專利名稱：尿液碘測定試劑盒的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于體外診斷試劑盒領域，特別涉及一種尿液碘測定試劑盒，通過測定尿液中碘的濃度評價人體碘營養(yǎng)狀況。
背景技術：
碘缺乏病是世界范圍內分布最廣，對人體智力健康危害最大的一種微營養(yǎng)缺乏病。經典的尿液碘的測定方法是Sandell-Kolthoff反應，是WHO、IDDICC推薦的尿液碘測定方法?；驹硎?，碘催化四價鈰還原成三價鈰，使鈰一砷復合物濃度下降，導致405nm處吸光度下降。為除去尿中干擾物質，尿液須經高氯酸在110℃消化，或用高溫爐使標本灰化后測定。由于該法使用的消化劑高氯酸很不穩(wěn)定，現(xiàn)用經Ohashi等建立的改良方法，該法采用過硫酸銨消化尿液，改進了試劑的穩(wěn)定性，測量線性范圍為0～300ug/L、最低檢出濃度5μg/L、變異系數(shù)＜10％、回收率為90～102％，與WHO、IDDICC推薦的Sandell-Kolthoff法相同，是我國推薦的尿液碘測定方法。但該法的安全性較差。試劑中含有三氧化二砷，易造成環(huán)境污染和對人體造成危害；消化過程中產生的有毒蒸氣也易對人體健康造成損害。此外，該法分析時間長，消化(灰化)、顯色共需2小時以上；顯色為淡黃色，須用特殊儀器，不便肉眼比色判讀結果；需專用的消解、半自動生化分析儀，設置專門的實驗室，固定專人操作，不便在碘缺乏病嚴重的基層推廣應用。

發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于提供一種能簡便快速去除尿液中的干擾物質，準確測定尿液中碘濃度的尿液碘測定試劑盒。
本發(fā)明的技術方案如下本發(fā)明提供的尿液碘測定試劑盒，主要包括尿液純化裝置、稀釋液、顯色液、復合氧化劑、標準比色板和尿標準液；所述尿液純化裝置(如圖1所示)為一種內裝用來特異吸附尿液中干擾物質的選擇性特異吸附劑的滴定式容器，所述選擇性特異吸附劑為由0.2～1g的純化活性炭和100～1000ug碘吸附拮抗劑組成的吸附劑；所述純化活性炭經pH值pH3～6.5的緩沖液浸泡處理，選擇性特異吸附劑在70～250℃烘烤4～72小時進行活化處理；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；所述稀釋液為由pH＝3～6.5的緩沖液與碘吸附拮抗劑組成的混合稀釋劑，所述碘吸附拮抗劑在所述混合稀釋劑中質量百分濃度為0.1％～10％；所述碘吸附拮抗劑為NaCl、MgCl2或NaBr；所述緩沖液為檸檬酸緩沖液、乙酸鹽緩沖液或磷酸鹽緩沖液；所述的顯色液為由質量百分濃度為2～20％的四甲基聯(lián)苯胺水溶液和質量百分濃度為5～20％的聚乙二醇6000～35000線性有機高分子化合物穩(wěn)定劑組成的混合試劑；所述的復合氧化劑為由質量百分濃度2～15％過氧乙酸、質量百分濃度2～15％H2O2和質量百分濃度0.1～3％蒽磺酸鈉甲醛縮合物組成的混合氧化劑；標準比色板為由由已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色作為色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標。通過比較樣品顯色與色標的顏色深淺，即可判定樣品濃度的范圍。
尿標準液收集健康人尿液，分裝凍干后，用“國家凍干人尿中碘成分分析標準物質”確定濃度。
所述的乙酸鹽緩沖液為乙酸鈉鹽緩沖液或乙酸鉀鹽緩沖液。所述的磷酸鹽緩沖液為磷酸鈉鹽緩沖液或磷酸鉀鹽緩沖液。
使用本發(fā)明的試劑盒進行尿液碘測定的步驟如下(1)取1ml尿液用稀釋液4ml稀釋；(2)取2ml稀釋尿液從加樣孔2加到尿液純化裝置的容器3(容器3中預先裝有用來特異吸附尿液中干擾物質的選擇性特異吸附劑)中，蓋上注液嘴密封1，搖晃10次后，取下堵頭帽5用注射器將尿液輕輕由出液咀4推出棄掉；(3)重復步驟2，用注射器將尿液輕輕由出液咀4推出到反應試管中；(4)滴5滴顯色劑在純化尿液中，搖勻；(5)滴一滴復合氧化劑在純化尿液中，開始記時并搖勻，90秒后與標準比色板上的色標對照或者用分光光度計或半自動生化分析儀630nm比色測定。
本發(fā)明提供的尿液碘測定試劑盒具有如下優(yōu)點1.本發(fā)明的尿液碘測定試劑盒可選擇性復合尿液中的干擾物，對測試結果沒有影響，且操作簡便。
2.標準液作為內對照和質控，可避免因干試劑墊保存不當，造成酶失活，產生不準確結果，提高了檢測結果的準確性。
3.國內目前沒有同類產品。


圖1為尿液純化裝置結構示意圖。
具體實施例方式
本發(fā)明提供的尿液碘測定試劑盒，包括尿液純化裝置、稀釋液、顯色液、復合氧化劑和標準比色板；所述尿液純化裝置(如圖1所示)為一種內裝用來特異吸附尿液中干擾物質的選擇性特異吸附劑的滴定式容器，所述選擇性特異吸附劑為由0.2～1g的純化活性炭和100～1000ug碘吸附拮抗劑組成的吸附劑；所述純化活性炭經pH值pH3～6.5的緩沖液浸泡處理，選擇性特異吸附劑在70～250℃烘烤4～72小時進行活化處理；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；所述稀釋液為由pH＝3～6.5的緩沖液與碘吸附拮抗劑組成的混合稀釋劑，所述碘吸附拮抗劑在所述混合稀釋劑中質量百分濃度為0.1％～10％；
所述碘吸附拮抗劑為NaCl、MgCl2或NaBr；所述緩沖液為檸檬酸緩沖液、乙酸鹽緩沖液或磷酸鹽緩沖液；所述的顯色液為由質量百分濃度為2～20％的四甲基聯(lián)苯胺水溶液和質量百分濃度為5～20％的聚乙二醇6000～35000線性有機高分子化合物穩(wěn)定劑組成的混合試劑；所述的復合氧化劑為由質量百分濃度2～15％過氧乙酸、質量百分濃度2～15％H2O2和質量百分濃度0.1～3％蒽磺酸鈉甲醛縮合物組成的混合氧化劑；標準比色板為由由已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色作為色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標。通過比較樣品顯色與色標的顏色深淺，即可判定樣品濃度的范圍。
尿標準液收集健康人尿液，分裝凍干后，用“國家凍干人尿中碘成分分析標準物質”確定濃度。
所述的乙酸鹽緩沖液為乙酸鈉鹽緩沖液或乙酸鉀鹽緩沖液。所述的磷酸鹽緩沖液為磷酸鈉鹽緩沖液或磷酸鉀鹽緩沖液。
實施例11、選擇圖1所示的尿液純化裝置10，該尿液純化裝置為一種滴定式容器，其滴定式容器3之內裝有選擇性特異吸附劑；本實施例的選擇性特異吸附劑為0.5g的純化活性炭和170ug的MgCl2組成的吸附劑；其中純化活性炭經過pH＝4.5的10mmol/L檸檬酸緩沖液浸泡處理；該選擇性特異吸附劑在150℃烘烤36小時進行活化；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；2、制備稀釋液pH＝4.5的10mmol/L檸檬酸緩沖液與質量百分濃度為1.85％的MgCl2進行混配；3、顯色液質量百分濃度9％的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)水溶液與質量百分濃度9％的聚乙二醇35000進行混配；
4、復合氧化劑質量百分濃度8％過氧乙酸、質量百分濃度8％H2O2和質量百分濃度1.2％蒽磺酸鈉甲醛縮合物混配；標準比色板為由根據(jù)已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色確定的色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標；6、尿標準液收集健康人尿液，分裝凍干后，用“國家凍干人尿中碘成分分析標準物質”確定濃度。
進行尿液碘測定的步驟如下(1)取1ml尿液用稀釋液4ml稀釋；(2)取2ml稀釋尿液從加樣孔2加到尿液純化裝置的容器3(容器3中預先裝有本實施例配制的用來特異吸附尿液中干擾物質的選擇性特異吸附劑)中，蓋上注液嘴密封帽1，搖晃10次后，取下堵頭帽5用注射器將尿液輕輕由出液咀4推出棄掉；(3)重復步驟2，用注射器將尿液輕輕由出液咀推出到反應試管中；(4)滴5滴顯色劑在純化尿液中，搖勻；(5)滴一滴復合氧化劑在純化尿液中，開始記時并搖勻，90秒后與標準比色板上的標準色標對照或者用分光光度計或半自動生化分析儀630nm比色測定。
實施例2選擇圖1所示的尿液純化裝置10，該尿液純化裝置為一種滴定式容器，其滴定式容器3之內裝有選擇性特異吸附劑；本實施例的選擇性特異吸附劑為1g的純化活性炭和500ug的MgCl2組成的吸附劑；其中純化活性炭經過pH＝3.8的10mmol/L檸檬酸緩沖液浸泡處理；該選擇性特異吸附劑在70℃烘烤72小時進行活化；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；制備稀釋液pH＝3.8的10mmol/L檸檬酸緩沖液與質量百分濃度為5％的MgCl2進行混配；
顯色液質量百分濃度2％的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)水溶液與質量百分濃度5％的聚乙二醇6000進行混配；復合氧化劑質量百分濃度2％過氧乙酸、質量百分濃度2％H2O2和質量百分濃度0.1％蒽磺酸鈉甲醛縮合物混配；標準比色板為由根據(jù)已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色確定的色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標；尿液碘測定的步驟通實施例1。
實施例3選擇圖1所示的尿液純化裝置10，該尿液純化裝置為一種滴定式容器，其滴定式容器3之內裝有選擇性特異吸附劑；本實施例的選擇性特異吸附劑為0.2g的純化活性炭和100ug的MgCl2組成的吸附劑；其中純化活性炭經過pH＝6.5的10mmol/L檸檬酸緩沖液浸泡處理；該選擇性特異吸附劑在250℃烘烤4小時進行活化；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；制備稀釋液pH＝6.5的10mmol/L檸檬酸緩沖液與質量百分濃度為0.1％的MgCl2進行混配；顯色液質量百分濃度20％的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)水溶液與質量百分濃度20％的聚乙二醇12000進行混配；復合氧化劑質量百分濃度15％過氧乙酸、質量百分濃度15％H2O2和質量百分濃度3％蒽磺酸鈉甲醛縮合物混配；標準比色板為由根據(jù)已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色確定的色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標；尿液碘測定的步驟通實施例1。
實施例4選擇圖1所示的尿液純化裝置10，該尿液純化裝置為一種滴定式容器，其滴定式容器3之內裝有選擇性特異吸附劑；本實施例的選擇性特異吸附劑為0.3g的純化活性炭和225ug的NaCl組成的吸附劑；其中純化活性炭經過pH＝4.3的10mmol/L檸檬酸緩沖液浸泡處理；該選擇性特異吸附劑在80℃烘烤72小時進行活化；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；制備稀釋液pH＝5.8的10mmol/L檸檬酸緩沖液與質量百分濃度為2.5％的NaCl進行混配；顯色液質量百分濃度16％的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)水溶液與質量百分濃度16％的聚乙二醇25000進行混配；復合氧化劑質量百分濃度12％過氧乙酸、質量百分濃度12％H2O2和質量百分濃度2.4％蒽磺酸鈉甲醛縮合物混配；標準比色板為由根據(jù)已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色確定的色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標；尿液碘測定的步驟通實施例1。
實施例5選擇圖1所示的尿液純化裝置10，該尿液純化裝置為一種滴定式容器，其滴定式容器3之內裝有選擇性特異吸附劑；本實施例的選擇性特異吸附劑為0.8g的純化活性炭和743ug的NaCl組成的吸附劑；其中純化活性炭經過pH＝3的10mmol/L檸檬酸緩沖液浸泡處理；該選擇性特異吸附劑在150℃烘烤36小時進行活化；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；
制備稀釋液pH＝3的10mmol/L檸檬酸緩沖液與質量百分濃度為7.5％的NaCl進行混配；顯色液質量百分濃度8％的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)水溶液與質量百分濃度8％的聚乙二醇25000進行混配；復合氧化劑質量百分濃度6％過氧乙酸、質量百分濃度6％H2O2和質量百分濃度0.8％蒽磺酸鈉甲醛縮合物混配；標準比色板為由根據(jù)已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色確定的色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標；尿液碘測定的步驟通實施例1。
實施例6選擇圖1所示的尿液純化裝置10，該尿液純化裝置為一種滴定式容器，其滴定式容器3之內裝有選擇性特異吸附劑；本實施例的選擇性特異吸附劑為1g的純化活性炭和1000ug的NaBr組成的吸附劑；其中純化活性炭經過pH＝4.8的10mmol/L檸檬酸緩沖液浸泡處理；該選擇性特異吸附劑在70℃烘烤72小時進行活化；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；制備稀釋液pH＝4.8的10mmol/L檸檬酸緩沖液與質量百分濃度為10％的NaBr進行混配；顯色液質量百分濃度5％的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)水溶液與質量百分濃度5％的聚乙二醇35000進行混配；復合氧化劑質量百分濃度2％過氧乙酸、質量百分濃度2％H2O2和質量百分濃度0.1％蒽磺酸鈉甲醛縮合物混配；標準比色板為由根據(jù)已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色確定的色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標；尿液碘測定的步驟通實施例1。
實施例7選擇圖1所示的尿液純化裝置10，該尿液純化裝置為一種滴定式容器，其滴定式容器3之內裝有選擇性特異吸附劑；本實施例的選擇性特異吸附劑為0.4g的純化活性炭和247ug的NaBr組成的吸附劑；其中純化活性炭經過pH＝3的10mmol/L檸檬酸緩沖液浸泡處理；該選擇性特異吸附劑在250℃烘烤4小時進行活化；經過活化的選擇性特異吸附劑可以完全吸附去除尿中的干擾物質如膽紅素、維生素C、肌酐等而對碘不吸附；制備稀釋液pH＝3的10mmol/L檸檬酸緩沖液與質量百分濃度為0.1％的NaBr進行混配；顯色液質量百分濃度20％的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)水溶液與質量百分濃度20％的聚乙二醇35000進行混配；復合氧化劑質量百分濃度15％過氧乙酸、質量百分濃度15％H2O2和質量百分濃度3％蒽磺酸鈉甲醛縮合物混配；標準比色板為由根據(jù)已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色確定的色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標；尿液碘測定的步驟通實施例1。
權利要求
1.一種尿液碘測定試劑盒，其特征在于，包括尿液純化裝置、稀釋液、顯色液、復合氧化劑和標準比色板；所述尿液純化裝置為一種內裝用來特異吸附尿液中干擾物質的選擇性特異吸附劑的滴定式容器，所述選擇性特異吸附劑為由0.2～1g的純化活性炭和100～1000ug碘吸附拮抗劑組成的吸附劑；所述純化活性炭經pH值pH3～6.5的緩沖液浸泡處理，選擇性特異吸附劑在70～250℃烘烤4～72小時進行活化處理；所述稀釋液為由pH＝3～6.5的緩沖液與碘吸附拮抗劑組成的混合稀釋劑，所述碘吸附拮抗劑在所述混合稀釋劑中質量百分濃度為0.1％～10％；所述碘吸附拮抗劑為NaCl、MgCl2或NaBr；所述緩沖液為檸檬酸緩沖液、乙酸鹽緩沖液或磷酸鹽緩沖液；所述的顯色液為由質量百分濃度為2～20％的四甲基聯(lián)苯胺水溶液和質量百分濃度為5～20％的聚乙二醇6000～35000線性有機高分子化合物穩(wěn)定劑組成的混合試劑；所述的復合氧化劑為由質量百分濃度2～15％過氧乙酸、質量百分濃度2～15％H2O2和質量百分濃度0.1～3％蒽磺酸鈉甲醛縮合物組成的混合氧化劑；標準比色板為由由已知不同碘濃度的尿液反應90秒后的顏色作為色標組成的標準比色板；該標準比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L濃度尿液的色標。
2.按權利要求1所述的尿液碘測定試劑盒，其特征在于，所述的乙酸鹽緩沖液為乙酸鈉鹽緩沖液或乙酸鉀鹽緩沖液。
3.按權利要求1所述的尿液碘測定試劑盒，其特征在于，所述的磷酸鹽緩沖液為磷酸鈉鹽緩沖液或磷酸鉀鹽緩沖液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種尿液碘測定試劑盒，包括尿液純化裝置、稀釋液、顯色液、復合氧化劑和標準比色板；尿液純化裝置為一種內裝用來特異吸附尿液中干擾物質的選擇性特異吸附劑的滴定式容器；選擇性特異吸附劑為由純化活性炭和碘吸附拮抗劑NaCl、MgCl
文檔編號G01N21/25GK1811394SQ20061005682
公開日2006年8月2日 申請日期2006年3月7日 優(yōu)先權日2006年3月7日
發(fā)明者王加義 申請人:北京中生金域診斷技術有限公司