專利名稱：一種用于elisa試驗(yàn)的稀釋液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于ELISA試驗(yàn)的稀釋液。
背景技術(shù)：
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)的簡稱，它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種酶免技術(shù)。由于ELISA試驗(yàn)方法具有敏感、特異、經(jīng)濟(jì)、簡便、安全等特點(diǎn)，因此是目前免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室中最常用的一種檢測(cè)方法。在ELISA試驗(yàn)中，血清或血漿是用于各種類型的ELISA試驗(yàn)及其它試驗(yàn)檢測(cè)血中各種抗原或抗體時(shí)最常用的標(biāo)本，由于ELISA試驗(yàn)中常常是多個(gè)標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)，而且由于方法敏感，為了準(zhǔn)確測(cè)定，常常需要將待測(cè)標(biāo)本作成不同比例的稀釋，為了簡便操作步驟和節(jié)約試劑，標(biāo)本可以直接在包被板孔內(nèi)進(jìn)行稀釋。而在ELISA試驗(yàn)中，目前常用的血清或血漿標(biāo)本稀釋液多為PBST(磷酸鹽緩沖液+0.5‰吐溫20)，為無色液體，這樣在操作時(shí)會(huì)發(fā)生標(biāo)本漏加或加錯(cuò)孔的現(xiàn)象，由于稀釋液中是否加入了待測(cè)血清或血漿標(biāo)本沒有任何可視的變化而不能發(fā)現(xiàn)，進(jìn)而影響檢測(cè)結(jié)果的正確性，因此建立一種方便可行的能分辨出在稀釋液中是否加入了血清或血漿的方法是有待解決的問題，特別是在同時(shí)檢測(cè)大量標(biāo)本的時(shí)候，直接在孔內(nèi)稀釋時(shí)則更為重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中血清或血漿稀釋液漏加或錯(cuò)加等缺點(diǎn)，提供一種能準(zhǔn)確加入的用于ELISA試驗(yàn)的稀釋液。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是提供一種用于ELISA試驗(yàn)中的稀釋液，所述的稀釋液包括按體積百分比計(jì)為1-4％的小牛血清、0.0013-0.0018％的指示劑，及余量的基礎(chǔ)稀釋液。
所述的指示劑是溴甲酚紫。
所述的稀釋液中還包括0.4-1％的防腐劑。
所述的防腐劑是Proclin300。
所述的稀釋液是按體積百分比計(jì)為2％的小牛血清、0.7％的Proclin300、0.0016％的溴甲酚紫，及余量的基礎(chǔ)稀釋液。
所述的小牛血清是滅活或不滅活的的無菌小牛血清。
所述的基礎(chǔ)稀釋液是生理鹽水。
與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明具有以下有益效果本發(fā)明是在基礎(chǔ)標(biāo)本稀釋液，即生理鹽水中加入了小牛血清、防腐劑和指示劑，其顯色反應(yīng)較明顯，可完全避免檢測(cè)標(biāo)本的漏加和錯(cuò)加現(xiàn)象。
本發(fā)明在基礎(chǔ)標(biāo)本稀釋液，即生理鹽水中加入了小牛血清有利于封閉包被板條孔內(nèi)的空白位點(diǎn)，減少非特異性發(fā)生；加入Proclin300防腐劑不影響檢測(cè)結(jié)果而便于標(biāo)本稀釋液的長期保存，而不用每次試驗(yàn)時(shí)現(xiàn)配置；加入溴甲酚紫，使得溶液在加入血清或血漿前呈黃色，而加入血清或血漿后呈藍(lán)色，顏色變化非常明顯，可完全避免檢測(cè)標(biāo)本的漏加和錯(cuò)加現(xiàn)象。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1本發(fā)明提供一種用于ELISA試驗(yàn)中的稀釋液，所述的稀釋液包括按體積百分比計(jì)為2％的小牛血清、0.7％的防腐劑Proclin300、0.0016％的指示劑溴甲酚紫，及余量的生理鹽水。
所述的稀釋液用于ELISA試驗(yàn)的方法，包括稀釋待測(cè)標(biāo)本、孵育、加酶標(biāo)抗體、加底物液顯色及終止反應(yīng)步驟，所述的稀釋待測(cè)標(biāo)本步驟是按體積百分比計(jì)為2％的小牛血清、0.7％的防腐劑Proclin300、0.0016％的指示劑溴甲酚紫加入到基礎(chǔ)稀釋液生理鹽水中制得標(biāo)本稀釋液，所述稀釋液呈黃色，再將稀釋液加入到待測(cè)標(biāo)本中進(jìn)行稀釋，其呈藍(lán)色。采用本發(fā)明的稀釋液，可避免加錯(cuò)或加漏。
本發(fā)明所述的方法可應(yīng)用于以下集中試驗(yàn)中a)巨細(xì)胞病毒IgG抗體、IgG抗體親和指數(shù)及IgM抗體檢測(cè)；b)風(fēng)疹病毒IgG抗體、IgG抗體親和指數(shù)及IgM抗體檢測(cè)；c)單純皰疹病毒IgG抗體、IgG抗體親和指數(shù)及IgM抗體檢測(cè)；d)弓形蟲IgG抗體、IgG抗體親和指數(shù)及IgM抗體檢測(cè)；e)甲胎蛋白ELISA定量檢測(cè)；f)絨毛膜促性腺素ELISA定量檢測(cè)；g)抗心磷脂抗體ELISA篩查。
實(shí)施例2本實(shí)施例僅將與實(shí)施例不同的部分加以說明，所述的稀釋液由體積百分比計(jì)為1％的小牛血清、0.4％的防腐劑Proclin300、0.0013％的指示劑溴甲酚紫，及余量的生理鹽水組成。
實(shí)施例3本實(shí)施例僅將與實(shí)施例不同的部分加以說明，所述的稀釋液由體積百分比計(jì)為4％的小牛血清、1％的防腐劑Proclin300、0.0018％的指示劑溴甲酚紫，及余量的生理鹽水組成。
權(quán)利要求
1.一種用于ELISA試驗(yàn)中的稀釋液，其特征在于所述的稀釋液包括按體積百分比計(jì)為1-4％的小牛血清、0.0013-0.0018％的指示劑，及余量的基礎(chǔ)稀釋液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于所述的指示劑是溴甲酚紫。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的稀釋液，其特征在于所述的稀釋液中還包括0.4-1％的防腐劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的稀釋液，其特征在于所述的防腐劑是Proclin300。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4之一所述的稀釋液，其特征在于所述的稀釋液是按體積百分比計(jì)為2％的小牛血清、0.7％的Proclin300、0.0016％的溴甲酚紫，及余量的基礎(chǔ)稀釋液。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的稀釋液，其特征在于所述的小牛血清是滅活或不滅活的的無菌小牛血清。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的稀釋液，其特征在于所述的基礎(chǔ)稀釋液是生理鹽水。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于ELISA試驗(yàn)中的稀釋液，所述的稀釋液包括按體積百分比計(jì)為1－4％的小牛血清、0.0013－0.0018％的指示劑，及余量的基礎(chǔ)稀釋液。所述的稀釋液是將小牛血清、指示劑加入到基礎(chǔ)稀釋液中制得標(biāo)本稀釋液，再將稀釋液加入到待測(cè)標(biāo)本中進(jìn)行稀釋。本發(fā)明顯色反應(yīng)較明顯，可完全避免檢測(cè)標(biāo)本的漏加和錯(cuò)加現(xiàn)象。
文檔編號(hào)G01N21/78GK1916592SQ20061006240
公開日2007年2月21日 申請(qǐng)日期2006年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月31日
發(fā)明者牛向蘭, 侯林浦, 谷學(xué)英, 何歡, 曾序春 申請(qǐng)人:深圳市人口和計(jì)劃生育科學(xué)研究所