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      5'-核苷酸酶診斷試劑盒及5'-核苷酸酶活性濃度測定方法

      文檔序號(hào):6087049閱讀:322來源:國知局
      專利名稱:5'-核苷酸酶診斷試劑盒及5'-核苷酸酶活性濃度測定方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種5'-核苷酸酶診斷試劑盒,同時(shí)本發(fā)明還涉及測 定5'-核苷酸酶活性濃度的方法,屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)測定技術(shù)領(lǐng)域。
      背景技術(shù)
      醫(yī)學(xué)研究表明,5'-核苷酸酶(5NT)增高主要見于阻塞性黃膽, 也可見于肝癌和肝炎。在膽汁淤積并發(fā)膽管炎、原發(fā)性和繼發(fā)性膽汁 性肝硬化和慢性肝炎時(shí),5NT升高率高于堿性磷酸酶;肝腫瘤和肝肉 芽腫時(shí)5NT升高的敏感性高于堿性磷酸酶。因?yàn)?'-核苷酸酶活性無 生理性升高,對(duì)于診斷嬰幼兒肝病和妊娠性肝功膽汁淤積較堿性磷酸 酶不但敏感,而且有特異性。因此測定5'-核苷酸酶的活性對(duì)于疾病 的診斷具有重要意義。
      5'-核苷酸酶的活性測定方法很多,主要有同位素底物法、化學(xué)強(qiáng) 酸測磷法(1925年)。據(jù)申請人了解,目前國際上普遍采用同位素底 物測試法,方法為5'-核苷酸酶作用于H3-dUMP,終止反應(yīng)后,通過 離子交換層析柱分析結(jié)果,求得5'-核苷酸酶活性?;蛘呃?'-核苷 酸酶作用于單磷酸腺苷后產(chǎn)生無機(jī)磷,再用化學(xué)強(qiáng)酸法分析無機(jī)磷含 量得以計(jì)算出5'-核苷酸酶的活性。
      同位素底物法方法復(fù)雜還有同位素污染,而且需要同位素測定儀, 因此難以切實(shí)推廣應(yīng)用。無機(jī)磷測定法是1925年發(fā)明的方法,準(zhǔn)確度 不好,強(qiáng)酸污染環(huán)境等等,也不適合推廣應(yīng)用。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提出一種利用酶循環(huán)擴(kuò)增法
      (Enzymatic Recycling Method)、 酶比色》去(Enzymatic Colorimetric
      Method)及酶聯(lián)法(Couple Reaction)技術(shù),計(jì)量通過酵聯(lián)反應(yīng)生成
      吲嗒胺色原(Indamine dye)或醌亞胺色原(Quioneimine dye),所導(dǎo)
      致在400—700nm波長處吸光度的上升,得以測定5'-核苷酸酶活性
      濃度的方法,同時(shí),本發(fā)明還將給出用以實(shí)現(xiàn)該方法的5'-核苷酸酶
      診斷試劑盒,采用該試劑盒不僅可以在可見光分析儀或半、全自動(dòng)生
      化分析儀上進(jìn)行5'-核苷酸酶活性濃度測定,而且測定速度快、靈敏
      度大、準(zhǔn)確度高,因而可以得到切實(shí)的推廣應(yīng)用。
      本發(fā)明5'-核苷酸酶活性濃度測定方法原理如下 腺苷單磷酸+水5'-核苷酸酶腺苷+單磷酸鹽
      腺苷+水腺苷脫氨酶肌苷+氨離子
      氨離子+ a-酮戊二酸+還原型輔酶谷氨酸脫氫酶谷氨酸
      +輔酶+水
      谷氨酸+水+氧谷氨酸氧化酶氨離子+ a-酮戊二酸+
      過氧化氫
      過氧化氫+還原型色原體組合過氧化物酶吲嗒胺色原或
      醌亞胺色原+水 這種方法應(yīng)用腺苷脫氨酶(Adenosine Deiminase EC 3.5.4.4)將腺
      苷酶解產(chǎn)生氨。
      谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase EC 1.4.1.2、 EC 1.4.1.3或 EC 1.4.1.4)、谷氨酸氧化酶(Glutamate oxidase EC 1.4.3.7、 EC 1.4.3.11)
      使氨不斷地被重復(fù)循環(huán)利用,并同時(shí)不斷地循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)出過氧化氫。 過氧化物酶將過氧化氫與還原型色原體組合作用,最終將無色的還
      原型色原體組合氧化成有色的染料,從而可以通過可見光分析儀器,
      在400—700nm (根據(jù)還原型色原體組合的不同而定)波長處,測定染 料,吲嗒胺色原(Indamine dye)或醌亞胺色原(Quioneimine dye), 含量高低的光吸收大小,通過測量400~700nm (根據(jù)還原型色原體組 合的不同而定)處吸光度上升的速度,得出5'-核苷酸酶活性濃度大 小測定結(jié)果。
      實(shí)驗(yàn)表明,從測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和配制成本的經(jīng)濟(jì)性兩方面綜合考 慮,如下成分關(guān)系的本發(fā)明5'-核苷酸酶診斷試劑盒較為理想
      緩沖液 穩(wěn)定劑 還原型輔酶 腺苷脫氨酶
      谷氨酸氧化酶
      a-酮戊二酸
      過氧化物酶
      還原型色原體組合A
      抗干擾劑
      畫mmol/L 50 mmol/L 0.25 mmol/L 5000 U/L 100000 U/L 8000 U/L 16 mmol/L 30000 U/L 6 mmol/L 30 mmol/L
      所述還原型色原體組合(Chromogen)可以是下列28個(gè)組合中的任-
      個(gè)組合:
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 石碳酸
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙
      N-乙基一-N- (3-硫丙基)-m-噻啶胺
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 N,N-雙乙基-m-甲苯胺
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 2,4-雙氯石碳酸
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 2,4,6-仨溴-3-羥基-苯磺酸
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 3,5-雙氯石碳酸磺酸
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 3,5-雙氯-2-羥基-苯磺酸
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙
      N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺鈉鹽
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙
      仨溴羥基苯甲酸
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 雙甲基苯胺
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙
      N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙
      2,2'-AZINO-雙(3-乙基苯噻唑-6-磺酸)
      3-甲基-2-苯噻唑酮腙 4_翔基-3-甲氧基苯甲酸
      3-甲基-2-苯噻哇酮腙
      3- 甲基-乙基-羥基苯胺
      4- 氨基抗砒 石碳酸
      4-氨基抗砒
      ]^—乙基__>1- (3-硫丙基)-m-噻啶胺
      4-氨基抗砒 N,N-雙乙基-m-甲苯胺
      4-氨基抗砒 2,4-雙氯石碳酸
      4-氨基抗砒
      2,4,6-仨溴-3-羥基-苯磺酸
      4-氨基抗砒 3,5-雙氯石碳酸磺酸
      4-氨基抗砒
      3,5-雙氯-2-羥基-苯磺酸 4-氨基抗砒
      N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺鈉鹽
      4-氨基抗砒 仨溴羥基苯甲酸
      4-氨基抗砒
      雙甲基苯胺
      4-氨基抗砒
      N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺 4-氨基抗砒
      2,2,-AZINO-雙G-乙基苯噻唑-6-磺酸) 4-氨基抗砒
      4-羥基-3-甲氧基苯甲酸
      4-氨基抗砒 3-甲基-乙基-翔基苯胺
      本發(fā)明的5'-核苷酸酶診斷試劑盒可以是單劑,包括 緩沖液、穩(wěn)定劑、OC-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶、谷氨酸脫 氫酶、谷氨酸氧化酶、過氧化物酶、還原型色原體組合、抗干擾劑。 試劑盒可以是干粉狀態(tài),在使用前加水溶解后使用;也可以配制成液 體試劑,直接使用。
      也可以將上述單劑試劑配成如下雙劑試劑 試劑1
      緩沖液、穩(wěn)定劑、a-酮戊二酸、還原型輔酶、谷氨酸脫氫酶、 過氧化物酶、還原型色原體組合、抗干擾劑。 試劑2
      緩沖液、穩(wěn)定劑、腺苷脫氨酶、谷氨酸氧化酶。 a-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶、谷氨酸脫氫酶、谷氨酸 氧化酶、過氧化物酶、還原型色原體組合在試劑1或試劑2中的位置 可以不限。試劑盒可以是干粉狀態(tài),在使用前加水溶解后使用;也可 以配制成液體試劑,直接使用。
      也可以將上述單劑試劑配成如下三劑試劑
      試劑1
      緩沖液、穩(wěn)定劑、a-酮戊二酸、還原型輔酶、谷氨酸脫氫酶。 試劑2
      緩沖液、穩(wěn)定劑、過氧化物酶、還原型色原體組合、抗干擾劑。 試劑3
      緩沖液、穩(wěn)定劑、腺苷脫氨酶、谷氨酸氧化酶。 a-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶、谷氨酸脫氫酶、谷氨酸 氧化酶、過氧化物酶、還原型色原體組合在試劑1、試劑2或試劑3 中的位置可以不限。試劑盒可以是干粉狀態(tài),在使用前加水溶解后使 用;也可以配制成液體試劑,直接使用。
      具體實(shí)施例方式
      下面結(jié)合實(shí)施例子對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。 實(shí)施例一
      本實(shí)施例的5'-核苷酸酶診斷試劑為單試劑,包括
      三(羧甲基)氨基甲烷一鹽酸緩沖液10Ommol/L
      穩(wěn)定劑
      還原型輔酶
      腺苷脫氨酶
      谷氨酸脫氫酶
      谷氨酸氧化酶
      a-酮戊二酸
      過氧化物酶
      4-氨基抗砒
      石碳酸
      50 mmol/L 0.25 mmol/L 訓(xùn)0 U/L 150000U/L ■0 U/L 16 mmol/L 30000 U/L 2 mmol/L 10 mmol/L
      試劑全部溶解配好后,分裝入瓶,進(jìn)行冷凍干燥,制成干粉試劑; 使用前,加入純凈水,復(fù)溶后使用。
      在全自動(dòng)生化分析儀上設(shè)定溫度37"C,反應(yīng)時(shí)間10分鐘,測 試主波長505nm,測試副波長600nm,被測樣品與試劑的體積比例為 1/25,反應(yīng)方向?yàn)檎磻?yīng)(上升反應(yīng)),檢測方法為速率法,延遲時(shí)間 大約1分鐘左右,檢測時(shí)間2分鐘左右。
      加入樣品和試劑后,使之混合并發(fā)生反應(yīng),最終將反應(yīng)物置于 生化分析儀下,檢測主波長505nm吸光度上升的速度,從而測算出5' -核苷酸酶活性的濃度大小。 實(shí)施例二
      本實(shí)施例的5'-核苷酸酶診斷試劑為雙試劑,包括 試劑l
      三(羧甲基)氨基甲烷一鹽酸緩沖液100mmol/L
      穩(wěn)定劑 50 mmol/L
      還原型輔酶 0.25 mmol/L
      120000U/L
      a-酮戊二酸 16mmol/L 過氧化物酶 30000 U/L
      2,4,6-仨溴-3-羥基-苯磺酸 0.2 mmol/L
      試劑2
      三(羧甲基)氨基甲烷一鹽酸緩沖液 100mmol/L 緩沖液 100 mmol/L
      穩(wěn)定劑 50 mmol/L
      腺苷脫氨酶 4000 U/L
      谷氨酸氧化酶 8000 U/L
      4-氨基抗石比 0.6 mmol/L
      試劑全部溶解配好后,分裝入瓶,制成液體雙試劑,可以直接使用。 在全自動(dòng)生化分析儀上設(shè)定溫度37t:,反應(yīng)時(shí)間10分鐘,測試 主波長546nm,測試副波長600nm,被測樣品與試劑的體積比例為1/20, 反應(yīng)方向?yàn)檎磻?yīng)(上升反應(yīng)),檢測方法為速率法,延遲時(shí)間大約l 分鐘左右,檢測時(shí)間2分鐘左右。
      加入樣品和試劑后,使之混合并發(fā)生反應(yīng),最終將反應(yīng)物置于生化 分析儀下,檢測主波長546nm吸光度上升的速度,從而測算出5'-核 苷酸酶活性的濃度大小。
      實(shí)施例三5'-核苷酸酶診斷試劑為三試劑,包括 試劑l
      (羧甲基)氨基甲烷一鹽酸緩沖液 100mmol/L
      穩(wěn)定劑 還原型輔f
      a-酮戊二酸 3-甲基-2-苯噻唑酮腙
      50 mmol/L 0.25 mmol/L 100000 U/L 16 mmol/L 0.6 mmol/L
      試劑2
      三(羧甲基)氨基甲烷一鹽酸緩沖液
      穩(wěn)定劑
      過氧化物酶
      雙甲基苯胺
      謹(jǐn)mmol/L 50 mmol/L 40000 U/L 2 mmol/L
      試劑3
      三(羧甲基)氨基甲烷一鹽酸緩沖液 100mmol/L
      50 mmol/L 5000 U/L 謂0 U/L
      穩(wěn)定劑 腺苷脫氨酶 谷氨酸氧化酶
      試劑全部溶解配好后,分裝入瓶,制成液體三試劑,可以直接使用。 在全自動(dòng)生化分析儀上設(shè)定溫度37T:,反應(yīng)時(shí)間10分鐘,測試
      主波長578nm,測試副波長660nm,被測樣品與試劑的體積比例為1/30,
      反應(yīng)方向?yàn)檎磻?yīng)(上升反應(yīng)),檢測方法為速率法,延遲時(shí)間大約1
      分鐘左右,檢測時(shí)間2分鐘左右。
      加入樣品和試劑后,使之混合并發(fā)生反應(yīng),最終將反應(yīng)物置于
      生化分析儀下,檢測主波長578nm吸光度上升的速度,從而測算出5' -
      核苷酸酶活性的濃度大小。
      申請人經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,采用以上發(fā)明內(nèi)容中記載的其他各種還原 型色原體組合均能達(dá)到本發(fā)明的目的,鑒于測定步驟等情況與以上實(shí) 施例類同,不另一一例舉。
      總之,實(shí)驗(yàn)證明,采用本發(fā)明的測定方法完全可以通過可見光分 析儀器得出所需的測定結(jié)果,并且靈敏度高、精確度好。
      權(quán)利要求
      1.一種酶循環(huán)擴(kuò)增法(Enzymatic Recycling Method)的5’-核苷酸酶活性濃度測定方法,其方法原理如下腺苷單磷酸+水 5’-核苷酸酶 腺苷+單磷酸鹽腺苷+水 腺苷脫氨酶 肌苷+氨離子氨離子+α-酮戊二酸+還原型輔酶 谷氨酸脫氫酶 谷氨酸 +輔酶+水谷氨酸+水+氧 谷氨酸氧化酶 氨離子+α-酮戊二酸+ 過氧化氫過氧化氫+還原型色原體組合 過氧化物酶 吲嗒胺色原或醌亞胺色原+水將最終反應(yīng)物置于可見光分析儀下,檢測400-700nm處直接反映吲嗒胺色原或醌亞胺色原含量高低的光吸收速度,得出5’-核苷酸酶活性濃度大小測定結(jié)果。腺苷脫氨酶(Adenosine Deiminase EC 3.5.4.4)作為作用酶,功能為產(chǎn)生氨。谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase EC 1.4.1.2、EC 1.4.1.3或EC 1.4.1.4)、谷氨酸氧化酶(Glutamate oxidase EC 1.4.3.7、EC1.4.3.11)作為循環(huán)酶,將氨不斷地被重復(fù)循環(huán)利用,并同時(shí)不斷地?cái)U(kuò)增產(chǎn)生過氧化氫。過氧化物酶作為顯色酶,將過氧化氫與還原型色原體組合作用發(fā)生顯色反應(yīng)。
      2. —種5'-核苷酸酶診斷試劑盒,主要成分包括 緩沖液20""穩(wěn)定劑l一還原型輔酶O.l—腺苷脫氨酶2000——谷氨酸脫氫酶2000——:谷氨酸氧化酶2000——oc-酮戊二酸2.過氧化物酶500——還原型色原體組合0.1-抗干擾劑卜—500 mmol/L —50 mmol/L -0.35 mmol/L500000 U/L 500000 U/L2-20 mmol/L500000 U/L -20 mmol/L-50 mmol/L其特征在于試劑盒可以是干粉狀態(tài),在使用前加水溶解后使用;也可以配制成液體試劑,直接使用。
      3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述5'-核苷酸酶診斷試劑盒,其特征在于 由緩沖液、穩(wěn)定劑、a-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶(Adenosine Deiminase EC 3.5.4.4)、谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase EC 1.4.1.2、 EC 1.4.1.3、 EC 1.4.1.4)、谷氨酸氧化酶(Glutamate oxidase EC 1.4.3.7、 EC 1.4.3.11)、過氧化物酶(EC 1.11丄7)、還原型色原 體組合及抗干擾劑組成單劑試劑。
      4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述5'-核苷酸酶診斷試劑盒,其特征在于 由緩沖液、穩(wěn)定劑、a-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶(Adenosine Deiminase EC 3.5.4.4)、谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase EC 1.4.1.2、 EC 1.4.1.3、 EC 1.4.1.4)、谷氨酸氧化酶(Glutamate oxidase EC 1.4.3.7、 EC 1.4.3.11)、過氧化物酶(EC 1.11.1.7)、還原型色原 體組合及抗干擾劑組成雙劑試劑;試劑1,由緩沖液、穩(wěn)定劑、a-酮戊二酸、還原型輔酶、谷氨酸脫氫酶、過氧化物酶、還原型色原 體組合及抗干擾劑組成;試劑2,由緩沖液、穩(wěn)定劑、腺苷脫氨酶、 谷氨酸氧化酶及抗干擾劑組成。a-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫 氨酶、谷氨酸脫氫酶、谷氨酸氧化酶、過氧化物酶在試劑1或試劑 2中的位置可以不限。
      5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述5'-核苷酸酶診斷試劑盒,其特征在于由緩沖液、穩(wěn)定劑、a-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶 (Adenosine Deiminase EC 3.5.4.4)、谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase EC 1.4.1.2、 EC 1.4.1.3、 EC 1.4.1.4)、谷氨酸氧化酶 (Glutamate oxidase EC 1.4.3.7、 EC 1.4.3.11)、過氧化物酶(EC 1.11丄7)、還原型色原體組合及抗干擾劑組成多劑試劑;試劑1, 由緩沖液、穩(wěn)定劑、a-酮戊二酸、還原型輔酶、谷氨酸脫氫酶組成; 試劑2,由緩沖液、穩(wěn)定劑、過氧化物酶、還原型色原體組合及抗 干擾劑組成;試劑3,由緩沖液、穩(wěn)定劑、腺苷脫氨酶、谷氨酸氧 化酶組成。a-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶、谷氨酸脫氫酶、 谷氨酸氧化酶、過氧化物酶及抗干擾劑在試劑1、試劑2或試劑3 中的位置可以不限。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述5'-核苷酸酶診斷試劑盒,其特征在于還 包括穩(wěn)定劑1^000 mmol/L或0.1%-100%體積比。所述穩(wěn)定劑為 硫酸銨(Ammonia Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐劑中的至少一種。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述5'-核苷酸酶診斷試劑盒,其特征在于所述 還原型色原體組合可以是下列28個(gè)組合中的任一個(gè)組合:3-甲基-2-苯噻唑酮腙石碳酸3-甲基-2-苯噻唑酮腙N-乙基一N- G-硫丙基)-m-噻啶胺3-甲基-2-苯噻唑酮腙 N,N-雙乙基-m-甲苯胺3-甲基-2-苯噻唑酮腙 2,4-雙氯石碳酸3-甲基-2-苯噻唑酮腙 2,4,6-仨溴-3-羥基-苯磺酸3-甲基-2-苯噻唑酮腙 3,5-雙氯石碳酸磺酸3-甲基-2-苯噻唑酮腙 3,5-雙氯-2-羥基-苯磺酸3-甲基-2-苯噻唑酮腙N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺鈉鹽3-甲基-2-苯噻唑酮腙仨溴羥基苯甲酸3-甲基-2-苯噻唑酮腙 雙甲基苯胺3-甲基-2-苯噻唑酮腙N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺3-甲基-2-苯噻唑酮腙2,2'-AZINO-雙(3-乙基苯噻唑-6-磺酸)3- 甲基-2-苯噻唑酮腙4- 羥基-3-甲氧基苯甲酸3-甲基-2-苯噻唑酮腙3- 甲基-乙基-羥基苯胺4- 氨基抗砒 石碳酸4-氨基抗砒N-乙基^N- (3-硫丙基)-m-噻啶胺4-氨基抗砒 N,N-雙乙基-m-甲苯胺4-氨基抗砒2.4- 雙氯石碳酸4-氨基抗砒2,4,6-仨溴-3-羥基-苯磺酸4-氨基抗砒 3,5-雙氯石碳酸磺酸4-氨基抗砒3.5- 雙氯-2-羥基-苯磺酸4-氨基抗砒N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺鈉鹽4-氨基抗砒 仨溴羥基苯甲酸4-氨基抗砒雙甲基苯胺4-氨基抗砒N-乙基-N- (2-羥基-3-硫丙基)-m-甲苯胺 4-氨基抗砒2,2,-AZINO-雙(3-乙基苯噻唑-6-磺酸) 4-氨基抗砒4-羥基-3-甲氧基苯甲酸4-氨基抗砒 3-甲基-乙基-羥基苯胺
      全文摘要
      本發(fā)明涉及一種酶循環(huán)擴(kuò)增法(Enzymatic Recycling Method)的5’-核苷酸酶診斷試劑盒,同時(shí)本發(fā)明還涉及測定5’-核苷酸酶活性濃度的方法原理、試劑的組成及成分,屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)測定技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的試劑盒可以是干粉狀態(tài),在使用前溶解后使用;也可以配制成液體試劑,直接使用。本發(fā)明的試劑盒主要成分包括緩沖液、α-酮戊二酸、還原型輔酶、腺苷脫氨酶(Adenosine Deiminase EC 3.5.4.4)、谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase EC 1.4.1.2、EC 1.4.1.3、EC1.4.1.4)、谷氨酸氧化酶(Glutamate oxidase EC 1.4.3.7、EC 1.4.3.11)、過氧化物酶(peroxidase EC 1.11.1.7)、還原型色原體組合、穩(wěn)定劑及抗干擾劑,這些成分可以配成單劑試劑盒、雙劑試劑盒或三劑試劑盒;通過一系列的酶促反應(yīng),最終將無色的還原型色原體組合氧化成有色的染料,從而可以通過可見光分析儀器,在400-700nm波長處,測定染料含量的高低,進(jìn)而直接反映出5’-核苷酸酶活性濃度的大小。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明不僅便于推廣應(yīng)用,而且由于所生成的染料均有較高的摩爾消光系數(shù),因此靈敏度高、精確度好。
      文檔編號(hào)G01N21/78GK101097200SQ20061008558
      公開日2008年1月2日 申請日期2006年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月26日
      發(fā)明者王爾中 申請人:蘇州艾杰生物科技有限公司
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