專利名稱：潛血三合一檢測套裝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用膠體金檢測方法及化學(xué)檢測方法結(jié)合的潛血三合一檢測套裝，屬于醫(yī)用檢測領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
潛血試驗(yàn)是臨床上診斷消化道出血的一項(xiàng)重要項(xiàng)目，也是普查篩選消化道腫瘤的有效手段。多年來，臨床潛血試驗(yàn)方法一直以愈創(chuàng)木酯、聯(lián)苯胺、鄰甲苯胺、還原酚肽、四甲基聯(lián)苯胺等色原物質(zhì)為主體作化學(xué)檢驗(yàn)。鑒于聯(lián)苯胺具有強(qiáng)烈的致癌性，國內(nèi)現(xiàn)推薦使用鄰聯(lián)甲苯胺、鄰甲苯胺、四甲基聯(lián)苯胺等化學(xué)方法。但由于現(xiàn)有化學(xué)法受其它干擾因素多，假陽性率高，冰醋酸配成的試劑易形成結(jié)晶等條件限制。近年來，膠乳免疫化學(xué)凝集法，ELISA等方法作潛血試驗(yàn)已有報(bào)道，但其方法不夠簡便快速。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明利用將膠體金潛血檢測試紙與化學(xué)檢測潛血鄰聯(lián)甲苯胺方法相結(jié)合。膠體金潛血檢測試紙利用抗原、抗體特異性結(jié)合原理及雙抗體夾心膠體金顯色技術(shù)，試紙條一步法檢測便潛血，方法簡單快捷，無論是糞便還是尿液、胃液，都具有很好的靈敏度和特異性。鄰聯(lián)甲苯胺檢測法利用血紅蛋白中的鐵質(zhì)分解過氧化氫，放出新生態(tài)氧，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化為藍(lán)色化合物，而呈藍(lán)色。
利用兩種方法的不同作用原理進(jìn)行檢測，對結(jié)果判斷進(jìn)行雙重把關(guān)，提高準(zhǔn)確性。
潛血檢測試紙底板中部為硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上有一條抗血紅蛋白單克隆抗體反應(yīng)線、一條抗轉(zhuǎn)鐵蛋白單克隆抗體反應(yīng)線和一條羊抗鼠多克隆抗體控制線，在底板一端端頭為吸水層，另一端端頭為玻璃纖維樣品層，硝酸纖維素膜兩端分別與吸水層和抗血紅蛋白、抗轉(zhuǎn)鐵蛋白單抗金標(biāo)墊相互交疊連接，在金標(biāo)墊上壓有玻璃纖維樣品層。
有機(jī)溶劑可選用醇類、醚類、酮類、酯類其中的一種或多種按任意比例混合。有機(jī)酸可選用甲酸、乙酸、丙酸、乙二酸其中的一種或多種按任意比例混合。將有機(jī)溶劑和有機(jī)酸任意比混合，取一定量的鄰聯(lián)甲苯胺溶于有機(jī)溶劑與有機(jī)酸組成的混合液中配成1-1000mg/L的鄰聯(lián)甲苯胺溶液。將吸水紙片浸泡在此溶液中，取出干燥后，將吸水紙片固定于膠體金試紙的樣品吸液端，制成潛血三合一檢測試紙。
顯色液為2％～50％的過氧化氫溶液。
本套裝為潛血檢測三合一及顯色液組成潛血檢測套裝。


圖1為本實(shí)用潛血檢測套裝的整體示意圖。
圖2為本實(shí)用潛血檢測套裝的分解圖。
1、底板；2、顯色紙片；3、樣品吸液層；4、MAX線標(biāo)簽；5、單抗金標(biāo)墊組成；6、硝酸纖維素膜；7、手柄標(biāo)簽；8、吸水層。
具體實(shí)施例取一定量的鄰聯(lián)甲苯胺溶與甲醇組成的混合液中配成1-1000mg/L的鄰聯(lián)甲苯胺溶液，將吸水紙浸泡在此溶液中，干燥后將吸水紙片固定于膠體金試紙的樣品吸液端。
檢測時(shí)，用采便棒多點(diǎn)挑取糞便，然后將采便棒放進(jìn)采便器的蒸餾水中攪拌，將蓋擰緊，充分混勻。將試紙檢測端放入所測樣品，液面不得超過MAX線，樣品液將潤濕顯色紙片，并沿著吸水紙向膠體金試紙檢測端移動(dòng)，1分鐘后取出，膠體金試紙顯色，5分鐘內(nèi)判斷膠體金試紙結(jié)果。假設(shè)反應(yīng)線的最低檢測值設(shè)定為血紅蛋白0.2μg/ml，轉(zhuǎn)鐵蛋白40ng/ml。如果血紅蛋白含量大于0.2ug/ml濃度或轉(zhuǎn)鐵蛋白含量大于40ng/ml或兩者都滿足時(shí)，膠體金檢測試紙顯色區(qū)出現(xiàn)兩條或三條紅線，為陽性。如果血紅蛋白含量小于0.2ug/ml、轉(zhuǎn)鐵蛋白含量小于40ng/ml時(shí)，膠體金檢測試紙的檢測顯色區(qū)只有一條控制線時(shí)，為陰性?？刂凭€未出現(xiàn)紅色線，表明試紙過期或操作不當(dāng)。
5分鐘后將雙氧水滴加到已被樣液浸濕的顯色紙片上，20分鐘內(nèi)判斷結(jié)果。若顯色紙片顯藍(lán)色，表示陽性結(jié)果；若顯色紙片不顯色，為陰性。
若顯色紙片顯藍(lán)色而膠體金檢測試紙只有一條控制線，則對此樣品判斷為可疑，需要進(jìn)行進(jìn)一步檢測。
權(quán)利要求1.一種潛血三合一檢測套裝，其特征在于它是由潛血膠體金檢測試紙、顯色紙片(2)及顯色液組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于潛血膠體金檢測試紙是由底板(1)、單抗金標(biāo)墊(5)、硝酸纖維素膜(6)、吸水板(8)、玻璃纖維樣品吸液層(3)組成，底板中部為硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上有一條轉(zhuǎn)鐵蛋白單抗反應(yīng)線、一條血紅蛋白單抗反應(yīng)線和一條羊抗鼠多克隆抗體控制線，在底板一端端頭為吸水板，另一端端頭為玻璃纖維樣品吸液層，硝酸纖維素膜兩端分別與吸水板和抗轉(zhuǎn)鐵蛋白、抗血紅蛋白單抗金標(biāo)墊相互交疊連接，在金標(biāo)墊上壓有玻璃纖維樣品吸液層。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于顯色紙片固定在吸液層末端。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于所述的顯色液為2％～50％的過氧化氫溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于顯色紙片是由吸水纖維浸泡在鄰聯(lián)甲苯胺、有機(jī)醇、有機(jī)溶劑的混合液中，取出干燥制成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于有機(jī)醇可選用甲醇、乙醇、丙醇、丁醇其中的一種或多種按任意比例混合。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于有機(jī)溶劑可選用醇類、醚類、酮類、酯類其中的一種或多種按任意比例混合。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于有機(jī)醇與有機(jī)溶劑按任意比混合，鄰聯(lián)甲苯胺濃度為1-1000mg/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的潛血三合一檢測套裝，其特征在于所述的硝酸纖維素膜上包被有三條線，兩條反應(yīng)線，一條控制線。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的潛血膠體金試紙，其特征在于血紅蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白通過免疫分別篩選出兩種不同單抗，其各自一株用于包被，另一株用于膠體金標(biāo)記，共同與各自免疫原有親合作用，利用雙抗夾心法原理制成的試紙。
專利摘要本發(fā)明涉及一種試紙，利用膠體金潛血檢測試紙與化學(xué)檢測潛血鄰聯(lián)甲苯胺方法相結(jié)合，它是由潛血膠體金檢測試紙、顯色紙片及顯色液組成，通過兩種不同方法的優(yōu)點(diǎn)對檢測結(jié)果進(jìn)行判斷，提高準(zhǔn)確性。
文檔編號G01N33/577GK2876780SQ20062001829
公開日2007年3月7日 申請日期2006年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月24日
發(fā)明者萬志靜, 萬志強(qiáng) 申請人:萬華普曼生物工程有限公司