專利名稱：：潰瘍性大腸炎或間質(zhì)性肺炎的病期判定方法及其病期判定用試劑盒的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種潰瘍性大腸炎或間質(zhì)性肺炎的病期判定方法及其病期判定用試劑盒。
背景技術：
：已知潰瘍性大腸炎是難治性炎癥疾病，據(jù)報道患者數(shù)(特定疾病受分配者)在平成14年度為77，073人，每年以約5，000人正在增加。所述潰瘍性大腸炎是一種在大腸的粘膜出現(xiàn)糜爛或潰瘍的大腸的炎癥性疾病。該疾病的原因被認為是腸內(nèi)細菌的參與或免疫功能沒有正常發(fā)揮功能的自身免疫反應的異常或者飲食生活的變化的參與等，但尚不清楚。特征性的癥狀是伴有便血或不伴有便血的腹瀉和經(jīng)常發(fā)生的腹痛。病變有從直腸連續(xù)地進而向上行性(口側(cè))擴展的性質(zhì)，最大為從直腸擴展到全部結(jié)腸。該疾病根據(jù)病變的擴展或病程經(jīng)過等被如下所述地分類。(1)根據(jù)病變的擴展的分類全部大腸炎、左側(cè)大腸炎、直腸炎(2)病期的分類活動期、緩解期(3)根據(jù)嚴重程度的分類輕癥、中等癥、重癥、嚴重癥(4)根據(jù)臨床經(jīng)過的分類復發(fā)緩解型、慢性持續(xù)型、急性嚴重癥型、初次發(fā)作型診斷所述潰瘍性大腸炎時，根據(jù)作為臨床癥狀的持續(xù)性或反復性的粘血、血便或者其既往史進行診斷，進而并用結(jié)腸或乙狀結(jié)腸內(nèi)的內(nèi)窺鏡檢查和活檢，根據(jù)需要還進行高度且需要很大費用的灌腸X線檢查或整個大腸內(nèi)窺鏡檢查。首先，對從臨床癥狀獲得的數(shù)據(jù)進行分析，進行是否需要手術、治療藥的選擇、給藥的中止決定等最佳治療方法的選擇。進而，為了確認病情，進行內(nèi)窺鏡檢査，但在所述潰瘍性大腸炎的活動期還伴有穿孔或腸道粘膜的損傷導致的出血的危險，反復的檢査在醫(yī)療費用上成為很大的負擔，而且是一種伴隨著給檢查患者帶來負擔和痛苦的方法。另外，有報道前列腺素(prostaglandin)類(以下稱為PGs)或其衍生物在活體內(nèi)與各種病情之間的關系，已知有以簡單的操作對微量PGs進行定量的方法。作為該測定法，包括氣相色譜質(zhì)譜分析法(GC—MS)、放射免疫分析法(RIA)、酶免疫測定法(EIA)等。前列腺素E2(PGE)已知為參與活體內(nèi)的炎癥反應的重要的化學介質(zhì)(chemicalmediator),有報道利用競爭法以酶免疫法測定其尿中的主要代謝物(PGEMainUrinaryMetabolite,以下稱為"PGE—MUM"。)的方法(專利文獻l)。而且，本發(fā)明人等嘗試著將從所述潰瘍性大腸炎患者得到的尿樣本測定所述PGE—MUM的值、與數(shù)值化所述潰瘍性大腸炎患者的多個臨床癥狀(臨床疾病活性)的評分的總評分(修訂Talstad(夕》7夕、乂K)評分(score))聯(lián)系起來(非專利文獻l)。另一方面，己知間質(zhì)性肺炎為難治性炎癥疾病之一。該間質(zhì)性肺炎是伴有間質(zhì)的炎癥并最終引起肺泡的纖維化的病例的總稱，己知有特發(fā)性肺纖維癥、非特異性間質(zhì)性肺炎、特發(fā)性器質(zhì)化肺炎等病例。該間質(zhì)性肺炎的發(fā)生機制尚不很清楚，其診斷需要高度的經(jīng)驗，存在不得不對每個病例綜合判斷患者的病例、各種采集數(shù)據(jù)的檢查結(jié)果等的困難。為了解決該問題，還對測定血中的骨橋蛋白量得到的值與所述間質(zhì)性肺炎的癥狀之間的關系進行了探討(專利文獻2)。另外，作為判斷該間質(zhì)性肺炎的癥狀的標記物，已知有表面活性蛋白D(SP—D)、表面活性蛋白A(SP—A)、涎液(、乂了，)化糖鏈抗原KL—6等。但是，這些標記物在所述間質(zhì)性肺炎的癥狀進展之后才被作為結(jié)果檢測出來，所以可以明確依賴于這些標記物的方法未必適合作為判定所述間質(zhì)性肺炎的病期的階段的手段。專利文獻l:特開昭61—11664號公報專利文獻2:特開2005—030852號公報非專利文獻l:消化(Digestion)2000;61:201—206
發(fā)明內(nèi)容首先，對于所述潰瘍性大腸炎而言，如下所述，目前的潰瘍性大腸炎根據(jù)病期被大體上分成2期?；顒悠?Activephase):自述血便，可見內(nèi)窺鏡中血管透見像的消失、易出血性、糜爛或潰瘍等的狀態(tài)。緩解期(Remissionphase):血便消失、內(nèi)窺鏡中活動期所見消失、出現(xiàn)血管透見像的狀態(tài)。但是，對于所述潰瘍性大腸炎而言，在所述活動期與所述緩解期之間存在被稱為緩解前期(Pre—remissionphase)的過渡病期，病理學上可以觀察到從接近所述活動期的緩解前期到接近所述緩解期的緩解前期的寬范圍的病理像。在接近所述緩解期的病例中，很難客觀地判斷，盡管臨床癥狀消失，但在判斷是否中止給藥時，對通過內(nèi)窺鏡觀察的所見和從活體采集的10處以上的病理組織標本進行分析，利用以下所示的Matts分類對全部組織標本進行評分化，求得評分的平均值，根據(jù)多年的經(jīng)驗作出判斷。已知如果判斷為所述緩解前期已緩解并中止給藥，不僅所述潰瘍性大腸炎會復發(fā)，而且會發(fā)生向大腸癌移行的可能性等各種問題。所述非專利文獻1顯示所述PGE—MUM的測定結(jié)果與表示所述潰瘍性大腸炎的病情的活動期和緩解期的修訂Talstad評分相關，顯示了不進行內(nèi)窺鏡檢査而判斷病期的標準，但有時在用修訂Talstad評分判斷為緩解期的病例中包含需要繼續(xù)給藥的本發(fā)明所示的所述緩解前期的病例，無法進行區(qū)別。作為在用修訂Talstad評分進行判定中使用的項目，包括腹瀉、體溫、心動過速、紅細胞沉淀速度、血紅蛋白、白細胞、血小板、總蛋白質(zhì)、白蛋白、鐵等，對測定的各項目數(shù)值進行評分化，總計該評分，求得修訂Talstad評分。另一方面，對于間質(zhì)性肺炎而言，難以判斷活動期與非活動期，為了判定這些病期，除了對所述間質(zhì)性肺炎的患者進行聽診、X線檢查等以外，必需利用肺組織的活檢來進行病理組織學診斷等。特別是為了實施所述肺組織的活檢，必需向所述患者的氣道中插入內(nèi)窺鏡等從而實際上從所述患者的體內(nèi)釆集所述肺組織的活檢中所必需的量的肺組織，給所述患者帶來的身體上、精神上的負擔極大。進而，已知如果判斷所述間質(zhì)性肺炎的病期為非活動期而中止給藥，不僅所述間質(zhì)性肺炎會復發(fā)、進而進展，而且會發(fā)生向肺癌移行的可能性等各種問題。另外，對于前面的專利文獻2中的方法而言，必需采集所述間質(zhì)性肺炎的患者的血漿或血清，經(jīng)過多階段的操作，對其中所含有的骨橋蛋白量進行定量。本發(fā)明的目的在于，提供一種詳細而客觀地對存在于活動期與緩解期之間的所述潰瘍性大腸炎的緩解前期的病期進行分類的方法，提供一種用于對目前即使利用通過內(nèi)窺鏡的觀察所見或從活體采集的組織標本的分析也難以判斷的所述潰瘍性大腸炎的病期進行判定的簡單的病期判定方法。另外，本發(fā)明的目的還在于，提供一種詳細而客觀地對所述間質(zhì)性肺炎的活動期與所述間質(zhì)性肺炎的非活動期的病期進行分類的方法，提供一種用于對目前難以判斷的所述間質(zhì)性肺炎的病期進行判定的簡單的病期判定方法。本發(fā)明人等進行了潛心研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)從被診斷為處于潰瘍性大腸炎的緩解期的患者采集尿，將其尿中含有的所述PGE—MUM濃度的值作為基礎值來事前掌握，在所述患者的所述PGE—MUM濃度顯示出超過該基礎值并在所述基礎值的3倍以下的范圍時，所述患者的病期對應所述潰瘍性大腸炎的緩解前期。進而，本發(fā)明人等還發(fā)現(xiàn)從被診斷為處于間質(zhì)性肺炎的非活動期的患者采集尿，將其尿中含有的所述PGE—MUM濃度的值作為基礎值來事前掌握，在所述患者的所述PGE—MUM濃度顯示出超過該基礎值的范圍時，所述患者的病期對應所述間質(zhì)性肺炎的活動期，以至完成本發(fā)明。艮P，本發(fā)明提供以下的(1)(10)。(1)潰瘍性大腸炎的緩解前期與潰瘍性大腸炎的緩解期的病期判定方法，其特征在于，在伴隨給消炎藥的治療管理下，對診斷為處于所述潰瘍性大腸炎的緩解期的患者的尿中含有的前列腺素主要代謝物(PGE—MUM)進行測定，將得到的所述尿中的PGE—MUM濃度的值作為基礎值，當所述患者的尿中的PGE—MUM濃度的值超過該基礎值并在所述基礎值的3倍以下的范圍時，判定為潰瘍性大腸炎的緩解前期(Pre-remissionphase)，當所述患者的尿中的PGE—MUM濃度的值在該基礎值以下的范圍時，判定為潰瘍性大腸炎的緩解期(Remissionphase)。(2)根據(jù)上述(1)所述的病期判定方法，其特征在于，所述潰瘍性大腸炎的緩解前期為潰瘍性大腸炎的病理學評分(Matts分類)在23的范圍內(nèi)的情況，所述潰瘍性大腸炎的緩解期為所述Matts分類在不到2的范圍的情況。(3)間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與所述間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)的病期判定方法，其是一種通過在伴隨給消炎藥的治療管理下測定間質(zhì)性肺炎的患者的尿中含有的前列腺素主要代謝物(PGE—MUM)來判斷間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與所述間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)的病期判定方法。(4)根據(jù)上述(3)所述的病期判定方法，其特征在于，對診斷為處于所述間質(zhì)性肺炎的非活動期的患者的尿中含有的PGE一MUM進行測定，將得到的所述尿中的PGE—MUM濃度的值作為基礎值，當所述患者的尿中的PGE—MUM濃度的值在超過該基礎值的范圍時，判定為間質(zhì)性肺炎的活動期，當所述患者的尿中的PGE—MUM濃度的值在該基礎值以下的范圍時，判定為間質(zhì)性肺炎的非活動期。(5)根據(jù)上述(1)(4)中任意一項所述的病期判定方法，其特征在于，利用抗PGE—MUM抗體來免疫測定所述PGE—MUM。(6)潰瘍性大腸炎的緩解前期(Pre-remissionphase)與潰瘍性大腸炎的緩解期(Remissionphase)的病期判定用試劑盒，其含有已標記的PGE一MUM試劑及抗PGE—MUM抗體試劑，利用樣品中的PGE—MUM測定，根據(jù)潰瘍性大腸炎的病理學評分(Matts分類)來分類潰瘍性大腸炎的緩解前期(Pre-remissionphase)與潰瘍性大腸炎的緩解期(Remissionphase)。(7)間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)的病期判定用試劑盒，其含有已標記的PGE—MUM試劑及抗PGE—MUM抗體試劑，利用樣品中的PGE—MUM測定，判定間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)。(8)根據(jù)上述(6)或(7)所述的病期判定用試劑盒，其中，抗PGE—MUM抗體為抗PGE—MUM多克隆抗體。(9)根據(jù)上述(6)或(7)所述的病期判定用試劑盒，其中，抗PGE—MUM抗體為抗PGE—MUM單克隆抗體。(10)根據(jù)上述(6)(9)中任意一項所述的病期判定用試劑盒，其中，還含有與抗PGE—MUM抗體發(fā)生反應的抗免疫球蛋白抗體試劑。根據(jù)本發(fā)明，可以通過定量測定尿中的所述PGE—MUM來簡單地辨別所述潰瘍性大腸炎的緩解前期和所述潰瘍性大腸炎的緩解期的病期。另夕卜，可以通過定量測定尿中的所述PGE—MUM來簡單地辨別所述間質(zhì)性肺炎的活動期和所述間質(zhì)性肺炎的非活動期的病期。此外，根據(jù)本發(fā)明的方法，可以將以往使用的利用通過需要熟練而且需要高額檢查費用的內(nèi)窺鏡等的觀察或從活體采集的病理組織標本的分析來進行判定的方法代替為本發(fā)明的方法，所以不會給所述患者帶來像將內(nèi)窺鏡插入到所述潰瘍性大腸炎的患者或所述間質(zhì)性肺炎的患者的體內(nèi)等的檢查或釆集所述患者的體內(nèi)組織等的作手術等所伴隨的身體上、精神上的負擔，結(jié)果不依賴于實施檢查的醫(yī)師等的個人判斷差異，對于所述潰瘍性大腸炎或所述間質(zhì)性肺炎而言能夠簡單地判定其病期，所以不僅治療藥的選擇、給藥中止等的判斷變得容易，而且治療效果的判定變得容易，患者的QOL(生活質(zhì)量(QualityofLife))的提高或醫(yī)療費的削減成為可圖1表示緩解期的潰瘍性大腸炎患者病理照片。觀察到的黒點為顯示若干炎癥性細胞浸潤的細胞的核。圖2表示緩解前期的潰瘍性大腸炎患者病理照片。觀察到的黒點為顯示大量炎癥性細胞浸潤的細胞的核圖3表示活動期的潰瘍性大腸炎患者病理照片。觀察到的黒點為顯示大量炎癥性細胞浸潤的細胞的核，另外還觀察到作為活動期的特征的細胞浸潤引起的隱窩膿腫。具體實施方式利用本發(fā)明的方法測定的PGE—MUM(7alpha—hydroxy—5，ll一diketotetranor—prosta—1，16—dioicacid)被發(fā)現(xiàn)為是PGE，和E2、特別是PGE2向尿中的主要代謝物。在測定所述PGE—MUM的濃度的值時，可以使用尿作為樣本，利用例如GC—MS、HPLC、使用抗PGE—MUM抗體的免疫測定法等實施。所述PGE—MUM的濃度的值的測定可以同時且簡單地測定大量的樣本，所以優(yōu)選用免疫測定法實施，優(yōu)選加入利用氫氧化鈉等進行的堿處理從而成為化學穩(wěn)定的二環(huán)體的測定法來實施。作為所述免疫測定法中使用的抗PGE—MUM抗體，例如關于所述抗體可以舉出多克隆抗體或單克隆抗體等。本發(fā)明中使用的抗體只要是作為與二環(huán)化的PGE—MUM(以下稱為二環(huán)PGE—MUM)發(fā)生特異性反應的抗體的多克隆抗體或單克隆抗體等，就優(yōu)選。關于所述抗體，例如可以按照特開昭61—11664號(專利文獻l)中記載的方法制造多克隆抗體。在制造所述抗體時，由于所述PGE—MUM是半抗原(hapten),所以首先利用堿處理使所述PGE—MUM成為PGE—MUM的二環(huán)體，在使其與適當?shù)牡鞍踪|(zhì)例如牛血清白蛋白(BSA)、球蛋白、甲狀腺球蛋白、血藍蛋白等結(jié)合之后，與適當?shù)淖魟?adjuvant)懸濁混合，隔開使用間隔對動物(大鼠、小鼠、豚鼠、家兔、狗、貓、羊、山羊等)使用，經(jīng)過規(guī)定時間后采集動物的血清，以公知的方法進行處理，從而可以獲得多克隆抗體。另外，單克隆抗體可以利用通過如下所述的過程作成的雜交瘤(hybridoma)產(chǎn)生，即使在作成所述多克隆時使用的PGE—MUM的二環(huán)體與所述適當?shù)牡鞍踪|(zhì)結(jié)合，用作免疫原來免疫動物，使從脾臟得到的單克隆抗體產(chǎn)生細胞與腫瘤細胞發(fā)生細胞融合，從而作成雜交瘤。所述雜交瘤可以用下面的方法得到。將如上所述得到的PGE—MUM的二環(huán)體結(jié)合蛋白質(zhì)與弗氏(7口,乂卜)的完全佐劑一起，分數(shù)次，每隔23周向小鼠等動物進行腹腔內(nèi)或靜脈給予來進行免疫。接著，使脾臟等來源的抗體產(chǎn)生細胞與來自骨髓瘤細胞株(line)的細胞(骨髓瘤細胞)等可以在試管內(nèi)增殖的腫瘤細胞融合。作為融合方法，可以按照Kohler(^一，一)禾[]Milstein(S少少二夕,y)的常規(guī)方法(自然(Nature)，256巻，495頁，1975年)，利用聚乙二醇進行，或者也可以利用仙臺病毒等進行。使用利用上述方法得到的抗PGE—MUM抗體，實施所述PGE—MUM的免疫測定。作為該免疫測定法，優(yōu)選用基于相對測定對象物質(zhì)的所述PGE—MUM的周知的競爭法的免疫測定法進行，可以舉出用標記物質(zhì)分類的酶免疫測定法(EIA)、熒光免疫測定法、發(fā)光免疫測定法、放射免疫測定法(RIA)等。通常，在競爭法中可以使用己標記的抗原。作為標記物質(zhì)，例如包括酶、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、放射性同位素等。標記物與抗原的結(jié)合方法可以利用公知的形成共價鍵或非共價鍵的方法來制造。結(jié)合的方法例如可以舉出使用縮合劑形成共價鍵的方法、使用各種交聯(lián)劑的方法等(例如參照"蛋白質(zhì)核酸酶"增刊31號，3745頁(1985))。在利用共價鍵的方法中，除了可以使用存在于抗原的官能團以外，例如還可以在利用常規(guī)方法導入硫醇基、氨基、羧基、羥基等官能團之后利用所述結(jié)合法制造標記抗原。另外，作為利用非共價鍵的方法，可以舉出物理吸附法等。所述PGE—MUM的測定，例如優(yōu)選用以下記載的免疫測定法實施。使規(guī)定量的所述已標記的PGE—MUM、所述抗PGE—MUM抗體、將要實施測定的含有PGE—MUM的樣本發(fā)生競爭性反應，從與所述抗體結(jié)合或未結(jié)合的己標記的抗原的量來定量所述樣本中的所述PGE—MUM。如上所述，作為所述PGE—MUM，例如優(yōu)選使用二環(huán)化的PGE—MUM(二環(huán)體PGE—MUM)，作為所述抗PGE—MUM抗體，例如優(yōu)選使用抗二環(huán)PGE—MUM。為了從與所述抗體結(jié)合的已標記的抗原中分離沒有結(jié)合的抗原，可以進一步加入免疫球蛋白抗體，使其沉淀分離，測定與復合體結(jié)合的標記物質(zhì)或沒有結(jié)合的標記物質(zhì)，由此來實施。該方法被稱為二抗體法，也可以利用使用木炭過濾器(charcoalfilter)的方法等來實施。所述抗免疫球蛋白抗體也可以通過測定使其與固相結(jié)合的抗免疫球蛋白抗體、與固相結(jié)合的標記物質(zhì)或沒有結(jié)合的標記物質(zhì)來實施。所述抗免疫球蛋白抗體可以利用周知的方法例如物理吸附法、利用交聯(lián)劑或共價鍵的化學結(jié)合法、利用抗生物素蛋白一生物素(avidin—biotin)結(jié)合的結(jié)合法等而與固相結(jié)合。當然，在測定所述標記物質(zhì)時，要對應所述標記物質(zhì)進行選擇。在本發(fā)明的病期判定用試劑盒中含有所述已標記的PGE—MUM試劑、所述抗PGE—MUM抗體試劑。更優(yōu)選含有所述二環(huán)PGE—MUM試劑、所述抗二環(huán)PGE—MUM抗體試劑。進而在試劑盒中，除了與抗PGE一MUM抗體結(jié)合的抗免疫球蛋白抗體試劑以外，根據(jù)需要還加入樣本稀釋液、試劑稀釋液、已知濃度的標準PGE—MUM等，在EIA時還加入基質(zhì)、停止液等而構(gòu)成。作為本發(fā)明中使用的實施所述PGE—MUM的測定的樣本，例如可以舉出從人、動物等采集的尿。其中，作為在所述潰瘍性大腸炎的緩解前期和所述潰瘍性大腸炎的緩解期的病期判定中使用的樣本，使用在伴隨給消炎藥的治療管理下采集的所述潰瘍性大腸炎患者的尿。另外，作為在所述間質(zhì)性肺炎的活動期和非活動期的病期判定中使用的樣本，使用在伴隨給消炎藥的治療管理下采集的所述間質(zhì)性肺炎患者的尿。作為本發(fā)明中使用的消炎藥，例如可以例示甾體皮質(zhì)激素、非甾體系消炎鎮(zhèn)痛藥(non-steroidalanti-inflammatorydrug，NSAID)等。這些消炎藥可以使用一種或兩種以上。所述樣本使用存尿一日份的樣本，但也可以使用不存尿采集的樣本進行測定。采集的尿在用于測定之前優(yōu)選在低溫、零下2(TC以下保存。另夕卜，所述樣本中含有的所述PGE—MUM濃度的值的測定可以以采集的所述樣本全量為標準來實施，也可以考慮利用肌酸酐(creatinine)對采集的所述樣本的一部分進行補正來實施。從操作的簡便性出發(fā)，在測定所述樣本中含有的所述PGE—MUM濃度的值時，優(yōu)選考慮利用肌酸酐對采集的所述樣本,的一部分進行補正來實施。下面對本發(fā)明中使用的基礎值進行說明。對于所述潰瘍性大腸炎患者的基礎值，可以通過利用上述的方法，測定在伴隨給消炎藥的治療管理下被診斷為處于潰瘍性大腸炎的緩解期的患者的尿中含有的PGE—MUM濃度的值來得到。另外，對于所述間質(zhì)性肺炎患者的基礎值，也可以通過利用上述的方法，測定在伴隨給消炎藥的治療管理下被診斷為處于間質(zhì)性肺炎的非活動期的患者的尿中含有的PGE—MUM濃度的值來得到。在求所述基礎值時，優(yōu)選在對被診斷為所述緩解期或所述非活動期的患者給予消炎藥等的基礎上，采集一日存尿或在規(guī)定的時刻等釆集尿。另外，在規(guī)定所述基礎值時，優(yōu)選預先進行試驗評價考慮估計的測定所述PGE—MUM的試劑的測定間誤差等，然后再規(guī)定。判定所述潰瘍性大腸炎的病期的方法，可以使用利用Matts分類(MattsClassification)的病理學評分。Matts分類對利用內(nèi)窺鏡從活體采集的多個組織標本進行分析，對全部組織標本以15進行評分，求評分的平均值來判斷。Matts分類如表l所示。[表1]Matts分類<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>利用用于判斷所述潰瘍性大腸炎的病情的Matts分類，將病理學評分的平均值不到2分記為所述潰瘍性大腸炎的緩解期，將2以上不到3分記為所述潰瘍性大腸炎的緩解前期，將3分以上記為所述潰瘍性大腸炎的活動期。利用病理學判斷，通常在所述潰瘍性大腸炎的緩解前期和所述潰瘍性大腸炎的活動期，判斷為繼續(xù)給藥治療。判定所述間質(zhì)性肺炎的病期的方法，通過測定所述間質(zhì)性肺炎的患者的尿中含有的所述PGE—MUM來實施。所述PGE—MUM的測定方法與前面說明的所述潰瘍性大腸炎的情況完全相同。將在給消炎藥的治療管理下被診斷為處于所述間質(zhì)性肺炎的非活動期的間質(zhì)性肺炎的患者的尿中含有的PGE—MUM濃度的值作為基礎值，當所述尿中的PGE—MUM濃度的值為超過該基礎值的范圍時，判定為間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)，當所述尿中的PGE—MUM濃度的值在該基礎值以下的范圍時，判定為間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)。本發(fā)明提供一種通過測定樣本中的PGE—MUM的濃度的值而容易地判定所述潰瘍性大腸炎的病期的方法。另外，在本發(fā)明中測定的所述PGE—MUM，由于在各種炎癥性疾病中起因于PGE及/或PGE—MUM產(chǎn)生亢進而被排出到尿中，所以例如可以成為炎癥性腸疾病、大腸癌或大腸腺瘤引起的粘膜固有層的炎癥、肺癌等的診斷標記物。進而，PGE—MUM測定也成為確認作為前列腺素合成酶的環(huán)加氧酶(cyclooxygenase)(COX—2)的活性或C0X—2抑制劑(inhibitor)等藥劑的作用的標記物。實施例以下利用實施例對本發(fā)明進一步詳細說明，但本發(fā)明不被實施例所限定。實施例1PGE—MUM的測定對顯示出潰瘍性大腸炎的癥狀的患者，給予作為消炎藥的甾體皮質(zhì)激素及廿f口匕。!i7。用根據(jù)Inagawa等的液相二抗體法的RIA測定法(Adv.PG.TX.LT.Res.,11,191—196(1983))，來提取、定量這些患者的尿中PGE—MUM。即，將直到測定前保存在一8(TC下的各病期的所述漬瘍性大腸炎患者的尿(一日份存尿)lOOpl分注于反應容器中，添加等量的2NNaOH，室溫下放置1小時，使所述PGE—MUM二環(huán)化，然后加100(^1的2NHC1進行中和。接著，添加700^1的含有0.1MNaCl和0.1X明膠的0.1M磷酸緩沖液(pH7.3)，作為測定用樣品。作為反應操作法，向100pl的尿或各濃度的標準樣品液(含有PGE—MUM的二環(huán)體)中加入1251標記PGE—MUM溶液及稀釋第1抗體溶液(參照兔抗人PGE—MUM抗體；特開昭61_11664號(專利文獻l))各100iil，混合，在37匸下孵育60分鐘。然后，向各樣品中分別加入lOOpl正常兔血清(50倍稀釋；第一Radioisotope(，-才7一乂卜一7°)公司制)及第2抗體(10倍稀釋的羊抗兔IgG抗體；第一Radioisotope公司制)，進一步孵育一夜。接著，以4"、3000rpm離心分離10分鐘，棄上清，用自動孔計數(shù)器(才一卜々工》力夕y夕一)RAW—300(島津制作所公司制)測定沉淀物的放射活性，測定尿中PGE—MUM。同樣對標準樣品液進行測定，作成檢量線。另外，從各尿的測定結(jié)果和所述檢量線求得PGE—MUM的濃度。就潰瘍性大腸炎患者而言，關于從活體采集的多個(10個以上)組織標本求病理學評分(Matts分類)，將其分為緩解期、緩解前期或活動期，對該患者的尿測定PGE—MUM。其結(jié)果如表2所示。[表2]<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>在給消炎藥的治療管理下的基礎值盡管存在個人差異，但作為所述PGE—MUM濃度大致為10ng/ml。如表2所示，根據(jù)Matts分類，對于病理學評分不到2而被判斷為緩解期的患者樣品，對于除了樣品A—3及樣品A_4以外的樣品，所述PGE一MUM濃度均不到10ng/ml，病理學判斷與所述PGE—MUM濃度相關。另外，用Matts分類，對于病理學評分為2以上不到3而被辨別為緩解前期的患者樣品，對于除了樣品B—4以外的樣品，所述PGE—MUM濃度均超過基礎值10ng/ml，為基礎值的3倍即30ng/ml以下，病理學判斷與所述PGE—MUM濃度密切相關。另外，利用Matts分類被判斷為緩解期、緩解前期或活動期的各病期的所述潰瘍性大腸炎患者的病理照片如圖13所示。也可以從病理照片確認各病期與PGE—MUM濃度密切相關。實施例2代替實施例1的情況下的各病期的所述潰瘍性大腸炎患者的尿，使用各病期的所述間質(zhì)性肺炎患者的尿，除此以外，利用與實施例1的情況完全相同的操作，求所述PGE—MUM的濃度。此外，對患者給予作為消炎藥的甾體皮質(zhì)激素及非甾體系消炎鎮(zhèn)痛劑。結(jié)果如表3所示。在此所述間質(zhì)性肺炎的活動期是指患者的間質(zhì)的炎癥在進展或者患者的肺泡的纖維化在進展的病期。通過聽診、X線檢查以及利用活檢材料的病理學檢査等被診斷為所述間質(zhì)性肺炎的非活動期的各患者的基礎值大致為10ng/ml以下，與此相對，被診斷為所述間質(zhì)性肺炎的活動期的各患者的尿中的PGE—MUM濃度，除了樣品D—2以外，超過10ng/ml。即使這樣，在所述間質(zhì)性肺炎的情況下，病理學診斷與所述PGE—MUM濃度也密切相關。[表3]<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>[比較例1]對顯示出急性胃炎或慢性胃炎的癥狀的患者，利用與實施例1的情況完全相同的操作，求所述PGE—MUM的濃度，結(jié)果未見從所述顯示出急性胃炎或慢性胃炎的癥狀的患者得到的尿中的所述PGE—MUM的濃度、與所述患者的癥狀的進展程度之間存在有意義的相關性。[比較例2]對顯示出GPT(=ALT)的值為200IU/L以下的癥狀的丙型肝炎的癥狀的患者，利用與實施例1的情況完全相同的操作，求所述PGE—MUM的濃度，結(jié)果未見在從所述顯示出丙型肝炎的癥狀的患者得到的尿中的所述PGE—MUM的濃度、與所述患者的癥狀的進展程度之間存在有意義的相關性。顯示出乙型肝炎的癥狀的患者的情況也與上述同樣，未見與所述患者的癥狀的進展程度之間存在有意義的相關性。[比較例3]對顯示出甲狀腺炎的癥狀的患者，利用與實施例1的情況完全相同的操作，求所述PGE—MUM的濃度，結(jié)果未見在從所述顯示出甲狀腺炎的癥狀的患者得到的尿中的所述PGE—MUM的濃度、與所述患者的癥狀的進展程度之間存在有意義的相關性。[比較例4]對發(fā)生直徑2cm以下的化膿性病變的患者，利用與實施例1的情況完全相同的操作，求所述PGE—MUM的濃度，結(jié)果未見在從所述發(fā)生化膿性病變的患者得到的尿中的所述PGE—MUM的濃度、與所述患者的癥狀的進展程度之間存在有意義的相關性。如上述實施例12及比較例14的結(jié)果所示可知，本發(fā)明對關于所述潰瘍性大腸炎的病期判定及關于所述間質(zhì)性肺炎的病期判定為特別有用的方法。本說明書以2005年4月14日申請的特愿2005—117521為基礎。在此包括其全部內(nèi)容。權(quán)利要求1.一種潰瘍性大腸炎的緩解前期與所述潰瘍性大腸炎的緩解期的病期判定方法，其特征在于，將在伴隨給消炎藥的治療管理下，對被診斷為處于潰瘍性大腸炎的緩解期的患者的尿中含有的前列腺素主要代謝物(PGE-MUM)進行測定，將得到的所述尿中的PGE-MUM濃度的值作為基礎值，當所述患者的尿中的PGE-MUM濃度的值為超過該基礎值并在所述基礎值的3倍以下的范圍時，判定為潰瘍性大腸炎的緩解前期(Pre-remissionphase)，當所述患者的尿中的PGE-MUM濃度的值在該基礎值以下的范圍時，判定為潰瘍性大腸炎的緩解期(Remissionphase)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的病期判定方法，其特征在于，所述潰瘍性大腸炎的緩解前期為潰瘍性大腸炎的病理學評分(Matts分類)在23的范圍的情況，所述潰瘍性大腸炎的緩解期為所述Matts分類在不到2的范圍的情況。3.—種間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與所述間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)的病期判定方法，其中，通過在伴隨給消炎藥的治療管理下測定間質(zhì)性肺炎的患者的尿中含有的前列腺素主要代謝物(PGE—MUM)，來判斷間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與所述間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的病期判定方法，其特征在于，對被診斷為處于所述間質(zhì)性肺炎的非活動期的患者的尿中含有的PGE—MUM進行測定，將得到的所述尿中的PGE—MUM濃度的值作為基礎值，當所述患者的尿中的PGE—MUM濃度的值為超過該基礎值的范圍時，判定為間質(zhì)性肺炎的活動期，當所述患者的尿中的PGE—MUM濃度的值在該基礎值以下的范圍時，判定為間質(zhì)性肺炎的非活動期。5.根據(jù)權(quán)利要求14中任意一項所述的病期判斷方法，其特征在于，利用抗PGE—MUM抗體來免疫測定所述PGE—MUM。6.—種潰瘍性大腸炎的緩解前期(Pre-remissionphase)與潰瘍性大腸炎的緩解期(Remissionphase)的病期判定用試劑盒，其中，其含有已標記的PGE—MUM試劑及抗PGE—MUM抗體試劑，利用樣品中的PGE—MUM測定，根據(jù)潰瘍性大腸炎的病理學評分(Matts分類)來分類潰瘍性大腸炎的緩解前期(Pre-remissionphase)與潰瘍性大腸炎的緩解期(Remissionphase)。7.—種間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)的病期判定用試劑盒，其中，其含有已標記的PGE—MUM試劑及抗PGE—MUM抗體試劑，利用樣品中的PGE—MUM測定，判定間質(zhì)性肺炎的活動期(Activephase)與間質(zhì)性肺炎的非活動期(None—activephase)。8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的病期判定用試劑盒，其中，抗PGE—MUM抗體為抗PGE—MUM多克隆抗體。9.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的病期判定用試劑盒，其中，抗PGE—MUM抗體為抗PGE—MUM單克隆抗體。10.根據(jù)權(quán)利要求69中任意一項所述的病期判定用試劑盒，其中，還含有與抗PGE—MUM抗體發(fā)生反應的抗免疫球蛋白抗體試劑。全文摘要本發(fā)明提供一種病期判定方法，與以往在潰瘍性大腸炎或間質(zhì)性肺炎的病期的判定中使用的利用內(nèi)窺鏡的需要熟練的粘膜病變的觀察或利用從活體提取的病理組織標本的分析不同，本發(fā)明提供的方法可以容易地辨別病情、能夠判斷治療藥的選擇、治療效果的程度、給藥中止等，是通過將尿中含有的物質(zhì)數(shù)值化來定量判定病期的方法。測定尿中的前列腺素E主要代謝物(PGE-MUM)的濃度的值，判定潰瘍性大腸炎的緩解前期(Pre-remissionphase)和潰瘍性大腸炎的緩解期(Remissionphase)的病期。另外，測定尿中的所述PGE-MUM的濃度的值，判定間質(zhì)性肺炎的活動期和間質(zhì)性肺炎的非活動期的病期。文檔編號G01N33/577GK101133323SQ20068000647公開日2008年2月27日申請日期2006年4月14日優(yōu)先權(quán)日2005年4月14日發(fā)明者岡安勛,林裕造,藤原睦憲申請人:藤原睦憲;岡安勛;林裕造;富士瑞必歐株式會社