專利名稱：：復(fù)合物的形成方法和分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種在樣品內(nèi)的分析物或其類似物與可和所述分析物或其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(在下文中，縮寫為復(fù)合物形成物或CFS)之間形成復(fù)合物的方法，一種分離所形成的復(fù)合物、未參與所述復(fù)合物形成的CFS或類似物的方法，還涉及一種基于分離的復(fù)合物量、或未參與復(fù)合物形成的CFS或類似物量來測量樣品內(nèi)分析物的方法。
背景技術(shù)：
：分析樣品中的分析物通常需要將多種溶液，例如樣品和各種試劑溶液(例如，含有分析物抗體的試劑溶液，含有標記物的試劑溶液等)等混合，并使樣品中的分析物和試劑溶液中的反應(yīng)物(分析物抗體或標記物等)反應(yīng)。在使用微流裝置的微全分析系統(tǒng)Oi-TAS)中，其中該技術(shù)近來一直在發(fā)展且人們己經(jīng)對其進行了各種研究，人們已經(jīng)知道了將這些多種溶液預(yù)先混合并在毛細管(通道)外反應(yīng)，然后將該混合溶液引入毛細管(通道)的方法，或?qū)⒍喾N溶液同時引入混合毛細管(通道)中進行混合并反應(yīng)的方法(專利文獻1)。然而，在前一方法中，要求以微升Od)量級對樣品或試劑溶液進行預(yù)先混合，這樣就喪失了)i-TAS的價值，也就是說喪失了以納升(nl)或皮升(pl)量級進行樣品或試劑溶液微分析的可能性。另外，在后一方法中，引入時在毛細管中產(chǎn)生的層流會使多種溶液難以混合，而導(dǎo)致需要取決于分子擴散，這就會引起如下問題當(dāng)將多種不同分子量或粘度的溶液混合到一起時，由于待混合溶液的擴散系數(shù)不同，或粘度比不同而導(dǎo)致完成這些溶液的混合時間的變化改變了要引入通道的多種溶液的體積比，這就導(dǎo)致混合比例的變化要取決于待混合溶液的種類，從而使得不可能按照恒定的混合比來進行混合。另夕卜，在Bao,J.M,Regnier,F.E,J.Chromatogr.1992,608,217-224(非專利文獻l)或JP-A-10-512371(專利文獻2)中公開的方法可以作為上述方法以外的方法。在這些方法中，在分析用毛細管中，含有具有較高電泳遷移率分子的溶液與含有具有較低電泳遷移率分子的溶液逆流設(shè)置，通過施加電場使電泳遷移率較高的分子追上電泳遷移率較低的分子，從而在這些分子之間發(fā)生反應(yīng)。這些方法與常規(guī)的取決于分子擴散的混合方法相比，可以使分子在短時間內(nèi)均勻混合。但是，這些方法的反應(yīng)效率并不令人滿意，需要能確保足夠反應(yīng)效率的對策來以高敏感度對樣品中的分析物進行檢測，例如，增加要加入進行反應(yīng)的分子濃度或通過電泳減緩分子移動速率而延長反應(yīng)時間。專利文獻1:JP-A-2005-31070專利文獻2:JP-A-10-512371非專利文獻1:Bao,J.M,Regnier,F.E,J.Chromatogr.1992,608,217-22
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的問題本發(fā)明涉及短時間高反應(yīng)效率地在所述分析物或其類似物，和所述CFS之間形成復(fù)合物的方法，快速、簡單且高精度地分離所形成的復(fù)合物、未參與所述復(fù)合物形成的CFS或類似物的方法，還涉及高靈敏度地測量樣品中分析物的方法。解決問題的方式本發(fā)明由以下框架組成1.形成復(fù)合物的方法，其包括以下步驟第(1)步，將(a)含有分析物或其類似物的溶液和(b)含有至少一種CFS的溶液置于毛細管內(nèi)，通過對所述毛細管施加電壓，就在所述分析物或所述其類似物和該CFS間形成復(fù)合物，而不用將這些溶液預(yù)先混合；和第(2)步，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，而讓所述分析物或所述其類似物與CFS接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物或所述其類似物和該CFS間形成復(fù)合物。2.分離復(fù)合物的方法，其包括以下步驟第(1)步，將(a)含有分析物或其類似物的溶液和(b)含有至少一種CFS的溶液置于毛細管內(nèi)，通過對所述毛細管施加電壓，就在所述分析物或所述其類似物和該CFS間形成復(fù)合物，而不用將這些溶液預(yù)先混合；第(2)步，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或所述其類似物與該CFS接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物或所述其類似物和該CFS間形成復(fù)合物；和第(3)步，通過進一步的電移動分離所述復(fù)合物、未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物。3.測量分析物的方法，其包括以下步驟第(1)步，將(a)含有分析物或其類似物的溶液和(b)含有至少一種CFS的溶液置于毛細管內(nèi)，通過對所述毛細管施加電壓，就在所述分析物或所述其類似物和該CFS間形成復(fù)合物，而不用將這些溶液預(yù)先混合；第(2)步，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或所述其類似物與該CFS接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物或所述其類似物和該CFS間形成復(fù)合物；第(3)步，通過進一步的電移動分離所述復(fù)合物、未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物；和第(4)步，測量所分離的復(fù)合物的量、或未參與所述復(fù)合物形成的CFS或類似物的量，從而基于該結(jié)果來確定所述分析物的量。艮口，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)通過將含有分析物或其類似物的溶液和含有CFS的溶液置于通道中，不需要預(yù)先將這些溶液混合，通過對該毛細管施加電壓，利用不同的電泳遷移率而將所述分析物或其類似物和/CFS電泳富集的同吋就可以在所述分析物和類似物，與CFS之間形成復(fù)合物，通過僅用從納升(nl)到皮升(pl)量級的超少量的樣品和所述溶液，而不需要考慮由于樣品和所述溶液的粘度差異而導(dǎo)致的混合比例變化，就可以在短時間內(nèi)以高反應(yīng)效率形成所述復(fù)合物，從而實現(xiàn)本發(fā)明。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明的方法，溶液中的分析物或其類似物與溶液中的CFS之間的反應(yīng)可以在短時間內(nèi)以高反應(yīng)效率進行。這樣，就可以快速、簡單且高精度地分離出帶有CFS的復(fù)合物和未參與復(fù)合物形成的CFS或類似物，而且，可以基于分離的復(fù)合物量或未參與復(fù)合物形成的CFS或類似物量，而實現(xiàn)樣品中分析物的高靈敏度測量。圖1示出在實施例1中制備DNA標記抗體[與250bpDNA片段結(jié)合的抗-AFP抗體WA1Fab'片段(反應(yīng)改良CFS)]的制備流程。圖2示出實施例1制備的毛細管芯片的設(shè)置。圖3示出實施例1中引入毛細管的電泳樣品和試劑溶液的設(shè)置關(guān)系。圖4示出實施例1所得的AFP濃度和峰面積之間關(guān)系(線性)。圖5示出實施例1所得在用AFP濃度為0pM和100pM的電泳樣品情況下的電泳色譜。圖6示出實施例2制備的毛細管芯片的設(shè)置。圖7示出實施例2中引入毛細管的電泳樣品、第一測試樣品和第二試劑溶液的設(shè)置關(guān)系。圖8示出實施例2所得的AFP濃度和峰面積之間的關(guān)系(線性)。圖9示出實施例2所得的在低AFP濃度區(qū)域(使用AFP濃度為0nM、0.8nM、4nM和20nM的電泳樣品所得的結(jié)果)中AFP濃度和峰面積之間的關(guān)系(線性)。發(fā)明的最佳實施方式l.形成本發(fā)明復(fù)合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的方法的特征在于(a)將含有分析物或其類似物的溶液，和含有CFS的溶液引入并置于毛細管的各獨立區(qū)域內(nèi)，而不用通過預(yù)先在毛細管外混合來形成復(fù)合物，然后(b)在將這些溶液于毛細管內(nèi)均勻混合之前，通過對所述通道施加電壓，而電泳富集所述分析物或其類似物和/或CFS來讓它們接觸的同時，在所述分析物或其類似物和CFS間形成復(fù)合物。形成本發(fā)明復(fù)合物的方法特別包括以下步驟(1)和歩驟(2):第(l)步(引入步驟)，將(a)含有分析物或其類似物的溶液置于毛細管中，并將(b)含有至少一種CFS的溶液和所述分析物或所述其類似物一同置于毛細管中，通過對所述毛細管施加電壓，從而在所述分析物或所述其類似物和CFS間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先將這些溶液混合；和第(2)步(富集反應(yīng)步驟)，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或所述其類似物與CFS接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物或所述其類似物和CFS之間形成復(fù)合物。1-1.引入步驟[步驟(l)]本發(fā)明的步驟(l)是一步將含有分析物或其類似物的溶液，和含有至少一種CFS的溶液引入并置于毛細管中，通過對毛細管施加電壓，即進行后面描述的本發(fā)明步驟(2)，從而在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外混合這些溶液。這里，"通過對毛細管施加電壓，而在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物"是指通過讓分析物或其類似物與CFS接觸，使得在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物，而不是通過(不依賴于)分子擴散和通過利用下述現(xiàn)象，當(dāng)將含有電泳遷移率較高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)在含有電泳遷移率較低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液上游并進行電泳時，溶液中較高電泳遷移率的物質(zhì)(電泳速度快)會追上較低電泳遷移率的物質(zhì)(電泳速度慢)。也就是說，本發(fā)明的目的在于通過對毛細管施加電壓，而使毛細管中的(l)分析物或其類似物，或在分析物或其類似物和某個CFS間形成復(fù)合物，與(2)至少一種CFSs(注意CFS與上述定義的不同)之間形成復(fù)合物。換句話說，本發(fā)明不僅包括僅在毛細管中分析物或其類似物，與所有CFS之間形成復(fù)合物的情況，還包括下述情況比如當(dāng)使用2種或以上CFS時，預(yù)先在毛細管外，或在不施加電壓的毛細管內(nèi)，在分析物或其類似物，與2種或以上CFSs中的部分CFS之間形成復(fù)合物(中間體復(fù)合物)，然后通過對毛細管施加電壓，而讓所述中間體復(fù)合物與其余的至少一種CFS在毛細管內(nèi)接觸，從而在預(yù)先形成的中間體復(fù)合物與其余的至少一種CFS間形成復(fù)合物。例如，當(dāng)使用2種CFS時，自然包括的情況是(l)通過對毛細管施加電壓，在毛細管內(nèi)，在分析物或其類似物與一種CFS之間形成復(fù)合物(中間體復(fù)合物)，和在所述中間體復(fù)合物與其余的一種CFS之間形成復(fù)合物，還包括的情況是(2)預(yù)先在毛細管外，或在不施加電壓的毛細管內(nèi)，在分析物或其類似物，與一種CFS之間形成中間體復(fù)合物，然后通過對毛細管施加電壓，在毛細管內(nèi)，在所述中間體復(fù)合物與其余的一種CFS之間形成復(fù)合物。另外，例如，當(dāng)使用3種CFS時，自然包括的情況是(l)通過對毛細管施加電壓，在毛細管內(nèi)，在分析物或其類似物與一種CFS(CFS-1)之間形成復(fù)合物(中間體復(fù)合物1)，在所述中間體復(fù)合物1與其余一種CFS(CFS-2)之間形成中間體復(fù)合物2，在所述中間體復(fù)合物2與其余一種CFS(CFS-3)之間形成復(fù)合物，還包括的情況是(2)預(yù)先在毛細管外，或在不施加電壓的毛細管內(nèi)，在分析物或其類似物，與CFS-1之間形成中間體復(fù)合物1，然后通過對毛細管施加電壓，在毛細管內(nèi)，在所述中間體復(fù)合物1與CFS-2之間形成中間體復(fù)合物2，同時在所述中間體復(fù)合物2與CFS-3之間形成復(fù)合物；或(3)預(yù)先在毛細管外，或在不施加電壓的毛細管內(nèi)，在分析物或其類似物與CFS-1之間形成中間體復(fù)合物1，在所述中間體復(fù)合物l與CFS-2之間形成中間體復(fù)合物2，然后通過對毛細管施加電壓，在毛細管內(nèi)，在所述中間體復(fù)合物2與CFS-3之間形成復(fù)合物。(就此而論，可以按照同樣的想法考慮使用4種或以上CFS的情況。)因此，在本發(fā)明中，"不預(yù)先混合溶液"是指不預(yù)先將含有分析物或其類似物的溶液，和含有至少一種CFS的溶液混合，但并沒必要排除任何地預(yù)先將含有分析物或其類似物的溶液，與含有至少一種CFS的溶液混合(換句話說，并不是指絕對不能將有些含有分析物的樣品和含有所有CFS的溶液，如果需要，連同包括含有類似物的溶液一起混合)。在本發(fā)明中，將施加電壓時，分析物或其類似物與至少一種CFS之間最終形成的復(fù)合物的移動方向定義為"下游"，與其相對的方向定義為"上游"(以下相同)。另外，在本發(fā)明中，"(分析物或其類似物、CFS等進行電泳)的電泳速度慢"或"(分析物或其類似物、CFS等進行電泳)的電泳遷移率低"不僅是指比至少.種其他物質(zhì)的電泳速度(電泳遷移率低)慢，還指運動方向與至少—一種其他物質(zhì)的方向相反。含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液的設(shè)置順序沒有特別的限定，只要可以通過對毛細管施加電壓，而在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物即可。在表1-1至表1-5中，顯示了含有分析物或其類似物的溶液和含有CFS的溶液的設(shè)置順序和分析物或其類似物和CFS的電泳遷移率(電泳速度)之間的關(guān)系，但是本發(fā)明并不限于此。在這一點上，在表l-l至表l-5中，顯示了使用13種CFS的情況，在使用4種或以上CFS時的情況下，可以按照與表1-1至表1-5中相同的思路進行合適的設(shè)置。在表1-1至表1-5中，Ana代表分析物或其類似物，CFS-l代表CFS-1，CFS-2代表CFS-2，且CFS-3代表CFS-3。另外，在表1-1至表1-5中，毛細管內(nèi)的設(shè)置順序A是設(shè)置在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液間最上游邊界的溶液區(qū)域，B是設(shè)置在區(qū)域A下游的溶液區(qū)域，C是設(shè)置在區(qū)域B下游的溶液區(qū)域，且D是設(shè)置在區(qū)域C下游的溶液區(qū)域。在這一點上，在所述毛細管中的設(shè)置順序(A至D)僅僅是含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液間的順序，而且這種設(shè)置自然可以允許讓除所述溶液之外的溶液等設(shè)置于排在最下游區(qū)的所述溶液的更下游處，或設(shè)置于排在最上游區(qū)的所述溶液的更上游處。表1-1<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表1-2<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>表l-4<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>在表l-l表1-5中，"在之前形成"指前一復(fù)合物大體上地在后一復(fù)合物形成之前形成，但不排除部分的前一復(fù)合物和后一復(fù)合物同時或按相反順序形成，例如下述情況下。(1)通過將各區(qū)域(含有分析物或其類似物的溶液的區(qū)域，含有CFS的溶液的區(qū)域)相鄰安置，并通過在各區(qū)域之間液液界面附近產(chǎn)生的分子擴散，部分的前一復(fù)合物與后一復(fù)合物同時或按相反的順序形成。(2)由于分析物或其類似物和至少一種CFS的電泳速度的關(guān)系，部分的前一復(fù)合物與后一復(fù)合物同時或按相反的順序形成。(3)由于分析物或其類似物和至少一種CFS中的至少一種CFS以與其他物質(zhì)相反的方向移動，部分的前一復(fù)合物與后一復(fù)合物同時或按相反的順序形成。在這些情況中，含有分析物或其類似物的溶液和含有CFS的溶液適合以表l-l表1-5中相同的思路來設(shè)置。另外，在表l-l表1-5的情況中，當(dāng)使用2種或以上CFS時，這樣的情況顯示，所有的CFSs(CFS-1CFS-3)都會與分析物或其類似物結(jié)合，即2種或以上的CFS的全部結(jié)合位點僅呈現(xiàn)給分析物或其類似物[結(jié)合形式(l):三明治復(fù)合物，其中Ana被CFS-l和CFS-2夾在中間]。其他情況還可以理解為一種情況為，例如，2種CFSs(CFS-l和CFS-2)中的CFS-1與分析物或其類似物結(jié)合，CFS-2結(jié)合到分析物或其類似物與CFS-1形成的復(fù)合物產(chǎn)生的新位點上，換句話說，2種或以上CFS中的至少一種CFSs(例如，CFSA)的結(jié)合位點僅出現(xiàn)在分析物或其類似物上，而其它至少一種CFSs(例如，CFSB)的結(jié)合位點是出現(xiàn)在分析物或其類似物與CFSA間形成的復(fù)合物產(chǎn)生的新位點[結(jié)合形式(2)];或一種情況為，例如，2種CFSs(CFS-l和CFS-2)中的CFS-1與分析物或其類似物結(jié)合，而CFS-2結(jié)合到與分析物或其類似物結(jié)合的CFS-1上，換句話說，2種或以上CFS中的至少一種CFS(例如，CFSA)的結(jié)合位點僅在分析物或其類似物上，而其它至少一種CFS(例如，CFSB)的結(jié)合位點僅出現(xiàn)在CFSA上，[結(jié)合形式(3)];當(dāng)夾在Ana和CFS-2間的CFS-1三明治復(fù)合物是按照結(jié)合形式(l)形成時[使用了表1-1表1-5中2種CFS的分析物或其類似物可以讀作CFS-1，表l-l表1-5中的CFS-1也可以讀作分析物或其類似物]。另外，在上述結(jié)合形式(2)和(3)中使用3種或以上CFS的情況下，或在適當(dāng)?shù)亟M合上述結(jié)合形式(1)(3)的情況下，含有分析物或其類似物的溶液和含有CFS的溶液可以按照在表l-l表1-5和上述相同的思路來進行設(shè)置。在這一點上，在利用分析物的類似物的競爭性方法進行本發(fā)明時，也可以采用以下的設(shè)置方式；讓樣品中的分析物(也就是說，含有分析物的樣品)和類似物[例如，用標記物標記的類似物(標記性類似物)，和與反應(yīng)改良物質(zhì)結(jié)合的類似物(反應(yīng)改良類似物)]同時存在于相同的溶液中，并作為一種溶液區(qū)域(也就是說，含有包括分析物的樣品和類似物的溶液區(qū)域)引入并設(shè)置在毛細管中；將含有分析物的樣品，和含有類似物的溶液(例如，標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)引入并設(shè)置在毛細管中作為各自獨立的區(qū)域(溶液)；或?qū)⒑袠悠分械姆治鑫?也就是說，含有分析物的樣品)和至少一種CFS的溶液，和含有類似物的溶液(例如，標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)引入并設(shè)置在毛細管中作為各自獨立的區(qū)域(溶液)。在這一點上，在上述的競爭性方法中，在毛細管中設(shè)置(l)含有包括分析物的樣品和標記性類似物的溶液(含有分析物和類似物的溶液)，和含有至少一種CFSs(CFS，反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液；或(2)含有分析物的樣品(含有分析物或其類似物的溶液)，和含有標記性類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液(CFS，反應(yīng)改良CFS及其組合)；或(3)含有包括分析物的樣品和至少一種CFSs(CFS，反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液，和含有標記性類似物的溶液；從而通過對通道施加電壓，而在所述分析物和CFS間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物和CFS間形成復(fù)合物B，這些溶液的設(shè)置順序可以按照上述說明的含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液的設(shè)置順序，通過考慮分析物、標記性類似物和CFS的電泳遷移率來確定。另外，在毛細管中設(shè)置(l)含有包括分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(含有分析物和類似物的溶液)，和含有至少一種CFS的溶液，所述CFS具有能與分析物或其類似物形成復(fù)合物的能力，并用標記物標記(以下簡稱為標記性結(jié)合物或標記性CFS);或(2)含有分析物的樣品(含有分析物或類似物的溶液)，和含有反應(yīng)改良類似物的溶液和含有至少一種標記性CFS的溶液；或(3)含有包括分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液，和含有反應(yīng)改良類似物的溶液；從而通過對毛細管施加電壓而在所述分析物和標記性CFS間形成復(fù)合物A，在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間形成復(fù)合物B，這些溶液的設(shè)置順序可以按照上述說明的含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液的設(shè)置順序，通過考慮分析物、反應(yīng)改良類似物和標記性CFS的電泳遷移率來確定。另外，含有分析物或其類似物的溶液，和含有至少一種CFS的溶液沒有必要相鄰，且可以在這些溶液之間插入液體如水、生理鹽水、各種緩沖液、有機溶劑等。在這一點上，這樣的緩沖液可以是不會抑制在分析物或其類似物和至少一種CFS之間形成復(fù)合物的任何溶液，包括本領(lǐng)域通常使用的緩沖液，例如，Tris緩沖液、Good's緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、TBS緩沖液、磷酸緩沖液、硼酸緩沖液等。在這一點上，將含有分析物及其類似物的溶液、和含有至少一種CFS的溶液，如果需要還加上液體，形成并設(shè)置在毛細管中作為各自獨立的區(qū)域。換句話說，在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液之間，且如果需要，在含有分析物或其類似物與所述液體之間或在含有至少一種CFS的溶液與所述液體之間形成液液界面，并在設(shè)置這些溶液和必要的液體時保持該界面。在步驟(l)中，作為將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液引入毛細管的方法，可以使用任何方法，只要能在毛細管中分別形成含有分析物或其類似物的溶液區(qū)域，和含有至少一種CFS的溶液區(qū)域，而形成上述設(shè)置，換句話說，可以使用任何方法，只要能在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液之間，且如果需要，在含有分析物或其類似物的溶液與液體之間或在含有至少一種CFS的溶液與液體之間，形成液液界面，而且可以使用用于引入的已知方法。所述用于引入的已知方法包括，例如通過對毛細管施加電壓，將這些溶液(和液體)電動地引入毛細管的方法；將這些溶液(和液體)引入毛細管，從而增加和/或降低毛細管內(nèi)部壓力的方法；利用毛細作用將這些溶液(和液體)引入毛細管的方法等。另外，作為將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液引入和置于毛細管內(nèi)的方法，可以使用用于引入和設(shè)置的己知方法。這樣的用于引入和設(shè)置的已知方法包括，例如，第(l)種方法，首先利用上面描述的引入方法，將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液中的一種溶液從毛細管末端引入到毛細管內(nèi)，然后類似地利用上面描述的引入方法，將一種剩余溶液從毛細管末端引入到毛細管內(nèi)，重復(fù)該步驟直到所有溶液均置于毛細管內(nèi)；第(2)種方法，首先將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液中的一種溶液滴到儲液池(孔)中，并利用上面描述的引入方法將內(nèi)容物引入毛細管中，然后將該儲液池(孔)中的溶液用剩余溶液中的一種溶液替換，并利用上面描述的引入方法將內(nèi)容物引入毛細管中，重復(fù)該步驟直到所有溶液均置于毛細管內(nèi)；第(3)種方法，將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液分別滴到多個儲液池(L)中，利用上述的引入方法將它們分別引入到同一毛細管內(nèi)，以便讓所有溶液都置于毛細管內(nèi)；等等。在這一點上，將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液引入毛細管的方法，和將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液引入和置于毛細管內(nèi)的方法并不限于上述方法。另外，用于將下述的含有分析物的樣品；含有含分析物的樣品和標記性類似物或反應(yīng)改良類似物的溶液(含有分析物和類似物的溶液)；含有分析物和至少一種CFSs(例如，CFS、標記性CFS、反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液；含有標記性類似物的溶液；或含有反應(yīng)改良類似物的溶液引入毛細管的方法與上述的用于將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液引入毛細管的方法相同。l-2.富集反應(yīng)步驟[步驟(2)]本發(fā)明的步驟(2)是不通過(取決于)分子擴散，讓所述分析物或其類似物和CFS接觸，同時電泳富集所述分析物或其類似物和/或CFS，從而在所述分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物的步驟。"在溶液(含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液)均勻混合之前"是指"在通過本發(fā)明步驟(l)將置于毛細管內(nèi)的含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液，如果需要還包括液體，的各個區(qū)域(液液界面)在分子上均勻混合之前"。在這一點上，在本發(fā)明中，"界面"是指含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液接觸的邊界，或如果必要是指含有分析物或其類似物的溶液與液體接觸的邊界或含有至少一種CFS的溶液與液體接觸的邊界，且由于從實際角度看存在擴散，所述界面并不需要指完全地不混合。另外，在利用分析物的類似物的競爭性方法中，當(dāng)使用標記性類似物時，上述術(shù)語是指"在通過分子擴散，將通過步驟(l)而置于毛細管內(nèi)的下述區(qū)域(液液界面)充分混合之前"(l)含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(含有分析物和類似物的溶液)和含有至少一種CFSs(CFS，反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液，且如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)；(2)含有分析物的樣品，含有標記性類似物的溶液和含有至少一種CFSs(CFS，反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液，且如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)；或(3)含有含分析物的樣品和至少一種CFSs(CFS，反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液和含有標記性類似物的溶液，且如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)。在利用分析物的類似物的競爭性方法中，當(dāng)使用反應(yīng)改良類似物時，上述術(shù)語是指"在通過分子擴散將下述區(qū)域(液液界面)充分混合之前"(l)含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(含有分析物和類似物的溶液)和含有至少一種標記性CFS的溶液，且如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)；(2)含有分析物的樣品，含有反應(yīng)改良類似物的溶液和含有至少一種標記性CFS的溶液，且如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)；或(3)含有含分析物的樣品和至少一種CFSs(CFS、標記性CFS及其組合)的溶液和含有反應(yīng)改良類似物的溶液，且如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)。在這一點上，"界面"與上述含義相同。在步驟(2)中，"通過對毛細管施加電壓來富集分析物或其類似物、和/或至少一種CFS"是指在對毛細管施加電壓時，分析物或其類似物和至少一種CFS中的至少一種就會以帶狀(楔狀)聚集到一起。換句話說，就是在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)就會聚集到一起，這樣就會形成在該處，該物質(zhì)濃度高于步驟(l)設(shè)置區(qū)域內(nèi)的該物質(zhì)濃度，也就是說在對毛細管施加電壓時，分析物或其類似物和/或CFS就會聚集到一起，其會形成在該處，分析物或類似物的濃度和/或CFS的濃度高于步驟(l)設(shè)置的溶液區(qū)域(例如，含有分析物或其類似物的溶液區(qū)域，含有CFS的溶液區(qū)域)內(nèi)的分析物或類似物的濃度和/或CFS的濃度。在這一點上，作為本發(fā)明的富集水平(程度)，在對毛細管施加電壓時，在所述物質(zhì)聚集處(帶狀)的分析物或其類似物和/或至少一種CFS的濃度，相對通過步驟(l)設(shè)置的區(qū)域內(nèi)的分析物或其類似物和/或至少一種CFS的濃度是，下限通常不低于1.5倍，優(yōu)選不低于5倍，更優(yōu)選不低于10倍，且進一步優(yōu)選不低于25倍，上限沒有特別限定，但通常不高于107倍，優(yōu)選不高于106倍且更優(yōu)選不高于105倍。另外，在本發(fā)明中，"將所述分析物或其類似物與CFS接觸"是指，如上所述，分析物或其類似物和CFS進行接觸不是通過(不取決于)分子擴散而是利用在分析物或其類似物和至少一種CFSs中電泳遷移率較高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率較低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象，該現(xiàn)象是利用了在將含有電泳遷移率較高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)在含有電泳遷移率較低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液上游的條件下進行龜泳時，溶液中電泳遷移率較高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率較低(電泳速度慢)的物質(zhì)的事實。也就是說，在本發(fā)明的步驟(2)中，溶液中的分析物或其類似物，和溶液中的CFS是通過電泳移動(遷移)而接觸，而沒有通過(取決于)置于毛細管內(nèi)的含有分析物及其類似物的溶液和含有至少一種CFSs的溶液，且如果必要還包括液體靜置時產(chǎn)生的分子擴散而混合，或也沒有通過在毛細管內(nèi)的其物理混合。如上所述，本發(fā)明的步驟(2)，在通過分子擴散而將含有分析物或其類似物的溶液和含有CFSs的溶液，且如果必要還和液體一起，均勻混合之前，且進一步在沒有將它們在毛細管內(nèi)物理地均勻混合之前，換句話說，保持這些相鄰溶液之間的液液界面，且如果必要保持液體和溶液之間的液液界面，通過將溶液中的分析物或其類似物和溶液中的CFS電泳遷移，而在電泳富集分析物或其類似物和/或CFS的同時讓它們接觸，在所述分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物。在本發(fā)明中，"通過對毛細管施加電壓，而讓所述分析物或其類似物與CFS接觸，同時富集所述分析物或其類似物和/或至少一種CFS"是指以下兩種情況第(l)種情況，上述的分析物或其類似物和/或CFS的富集，和分析物或其類似物與CFS的接觸同時進行；或第(2)種情況，在基本完成上述的分析物或其類似物和/或CFS的富集之后，再讓分析物或其類似物和CFS接觸。因此，該術(shù)語包括除了在基本上完成分析物或其類似物和CFS間接觸之后，讓分析物或其類似物和/或CFS富集的情況之外的情況。換句話說，本發(fā)明的步驟(2)可以通過在下述條件下，對所述毛細管施加電壓而進行，所述條件是在將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFSs的溶液均勻混合之前，通過如上所述的對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或其類似物和CFS接觸，同時如上所述的富集所述分析物或其類似物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物。具體地說，所述條件是在富集毛細管內(nèi)物質(zhì)的所謂電泳富集法中使用的條件。電泳富集方法包括，例如，利用毛細管內(nèi)電泳遷移率差異的方法例如(l)場放大樣品堆集法(FASS)[US-A-2003-0057092Al;Weiss，D.J.，Saunders,K.，Lunte，C,E.五to，/zomy/s2001,22，59-65;Britz-McKibbin，P.,Bebault,G.M.,Chen,D.D.Y.爿加/C/z亂2000，72，1729-1735;Ross，D.，Locascio,L.E.」w"/C7zew.2002，71,5137-5145等];(2)場放大進樣法(FASI)[Chien,R.L等■/C/z國,r.1991,559，141-148等];(3)等速電泳(ITP)[Everaerts,F.M.，Geurts，M.Mikkers，F(xiàn).E.P.，Verheggen,T.P.E.M■/C/zTO附Wog廣1976,119,129-155;Mikkers，F(xiàn).E.P.,Everaerts，F(xiàn).M.，Peek,J.A.F./CTz畫atogr.1979，168，293-315;Mikkers,F.E.P.，Everaerts,F.M.,Peek,J.A.F.乂CTzrama一.1979,168，317-332;Hirokawa，T,Okamoto,H.Ikuta,N.,禾口Gas,B.,AnalyticalSciences2001,Vol.17Supplementi185等];(4)等電聚焦方法(IF)[WehrT等，爿m.腸fec/mo/.1990,8,22;KilarF.等，五/ec&叩/zom^1989,10,23-29等];(5)大體積樣品堆積法(LVSS)[Siri，N.等，乂CTwrmWo^.B，(2003),793，151-157等];(6)pH界面方法(pH-介導(dǎo)性堆集)[p.Britz-McKibbin等，2000，Jwa/.CAem.，72,1242,P.Britz-McKibbin等，2002,J"a/.CTze""74,3736];(7)掃描法(Sweepingmethod)(富集膠束電動色譜)[J.P.Quirino等，1998,Sc/e"ce，282，465，J.P.Quirino等,1999,爿wa/.C7zew.,71,1638，Y.Sera等，2001,五/ec/ro//zorew、，22,3509];等，但并不限于此。在上述的電泳富集法中，優(yōu)選如ITP、FASS，特別優(yōu)選ITP。在這一點上，ITP的理論基礎(chǔ)是，當(dāng)目標物質(zhì)夾在含有電泳速度比目標物質(zhì)快的先導(dǎo)離子的電泳介質(zhì)(先導(dǎo)緩沖液)，和含有電泳速度比目標物質(zhì)慢的拖尾離子的電泳介質(zhì)(拖尾緩沖液)之間進行電泳時，可以富集目標物質(zhì)。因此，在通過ITP進行本發(fā)明的步驟(2)時，至少含有電泳速度比分析物或其類似物和/或至少一種CFSs快的先導(dǎo)離子的電泳介質(zhì)(先導(dǎo)緩沖液)，和含有電泳速度比分析物或其類似物和/或至少一種CFS慢的拖尾離子的電泳介質(zhì)(拖尾緩沖液)是必需的，而且這些組分也包括在本發(fā)明的"富集分析物或其類似物和/或至少一種CFSs的條件"中。在這一點上，先導(dǎo)緩沖液是設(shè)置在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液中的位于毛細管最下游溶液的進一步下游側(cè)，拖尾緩沖液是設(shè)置在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液中的位于毛細管最上游溶液的進一步上游側(cè)。在上述說明中，作為先導(dǎo)離子，可以使用任何電泳速度比分析物或其類似物和/或至少一種CFSs快的離子，而且可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用離子。所述離子包括例如，cr等。另外，先導(dǎo)離子的使用濃度也可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域常用的范圍。使用濃度通常為lpM10M，優(yōu)選100^iMlM，且更1^選1mM500mM。而且，使用的包括所述先導(dǎo)離子的先導(dǎo)緩沖液可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用緩沖液，例如包括Good's緩沖液、Tris緩沖液、硼酸緩沖液、磷酸緩沖液、組氨酸緩沖液、咪唑緩沖液、甘氨酸緩沖液等。其使用濃度和pH可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域常用的使用濃度和pH，使用濃度如通常為lpM10M，優(yōu)選100fiMlM，且更優(yōu)選lmM500mM，pH通常為212，優(yōu)選410且更優(yōu)選69。在上述說明中，作為拖尾離子，可以使用任何電泳速度比分析物或其類似物和/或至少一種CFSs慢的離子，而且可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用離子。所述離子包括例如，Good's緩沖液如HEPES、TAPS、MES、MOPS等，氨基酸如甘氨酸、蘇氨酸等。另外，拖尾離子的使用濃度也可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用范圍。使用濃度如通常為l|iM10M，優(yōu)選100|aM1M，且更優(yōu)選lmM500mM。而且，使用的包括所述拖尾離子的拖尾緩沖液可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用緩沖液，例如包括Good's緩沖液、Tris緩沖液、硼酸緩沖液、磷酸緩沖液、組氨酸緩沖液、咪唑緩沖液、甘氨酸緩沖液等。其使用濃度和pH可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域常用的使用濃度和pH，使用濃度通常為l|iM10M，優(yōu)選100^M1M，且更優(yōu)選lmM500mM，pH通常為212，優(yōu)選410且更優(yōu)選69。在這一點上，上述條件(先導(dǎo)離子、先導(dǎo)緩沖液、拖尾離子、拖尾緩沖液等)，其他試劑、操作方法、其他條件等都可以根據(jù)上述參考中的描述來進行選擇。FASS、FASI和LVSS的理論基礎(chǔ)是，當(dāng)目標物質(zhì)到達含有目標物質(zhì)的介質(zhì)，和比目標物質(zhì)所在介質(zhì)的電導(dǎo)率高的介質(zhì)之間的界面時，目標物質(zhì)的電泳遷移率就會降低，而且該目標物質(zhì)就會富集。因此，當(dāng)通過FASS、LVSS或FASI進行本發(fā)明的步驟(2)時，要求在含有分析物或其類似物的溶液，和含有至少一種CFSs的溶液中，至少有一種溶液的電導(dǎo)率高于其余的至少一種溶液；或要求單獨使用電導(dǎo)率高于含有分析物或其類似物的溶液和/或含有至少一種CFSs的溶液的電泳介質(zhì)(高電導(dǎo)率電泳介質(zhì))，而且這些組分也包括在本發(fā)明的"富集分析物或其類似物和/或至少一種CFSs的條件"中。在這一點上，高電導(dǎo)率電泳介質(zhì)設(shè)置在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFSs的溶液中的位于毛細管最下游溶液的進一步下游另外，高電導(dǎo)率電泳介質(zhì)可以是任何介質(zhì)，只要其鹽濃度比含有分析物或其類似物的溶液，和/或含有至少一種CFSs的溶液高，而且可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用介質(zhì)。所述高電導(dǎo)率電泳介質(zhì)，包括例如，含NaCl、KC1等的電泳介質(zhì)。電泳介質(zhì)包括例如，Good's緩沖液、Tris緩沖液、硼酸緩沖液、磷酸緩沖液、組氨酸緩沖液、咪唑緩沖液、甘氨酸緩沖液等。其使用濃度和pH可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域常用的使用濃度和pH，使用濃度通常為1(iM10M，優(yōu)選100(iMlM，且更優(yōu)選lmM500mM，pH通常為212，優(yōu)選410且更優(yōu)選69。在這一點上，上述條件(高電導(dǎo)率電泳介質(zhì)等)、其他試劑、操作方法、其他條件等可以適當(dāng)?shù)馗鶕?jù)上述參考中的描述來進行選擇。IF的理論基礎(chǔ)是，通過用各種等電點的兩性物質(zhì)溶液填充毛細管(通道)，然后通過施加電壓而在毛細管(通道)中形成pH梯度，當(dāng)目標物質(zhì)到達相應(yīng)等電點的pH區(qū)域時，目標物質(zhì)就會富集。因此，當(dāng)利用IF進行本發(fā)明的步驟(2)時，至少要求可以在毛細管中形成pH梯度的電泳介質(zhì)，而且該物質(zhì)也包括在本發(fā)明的"讓分析物或其類似物和/或至少一種CFSs富集的條件"中。在上述說明中，作為可在毛細管中形成pH梯度的電泳介質(zhì)，任何通過適當(dāng)?shù)貜谋绢I(lǐng)域常用的介質(zhì)中進行選擇，通過施加電壓而在毛細管內(nèi)形成pH梯度的電泳介質(zhì)都是可以使用的。所述的可在毛細管中形成pH梯度的電泳介質(zhì)可以包括例如，含有可在毛細管中形成pH梯度的物質(zhì)的電泳介質(zhì)，如兩性電介質(zhì)。所述電泳介質(zhì)包括例如，Good's緩沖液、Tris緩沖液、硼酸緩沖液、磷酸緩沖液、組氨酸緩沖液、咪唑緩沖液、甘氨酸緩沖液等。其使用濃度和pH可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用使用濃度和pH，使用濃度通常為l|_iM10M，優(yōu)選100pMlM，且更優(yōu)選lmM500mM。在這一點上，上述條件(含有可在毛細管中形成pH梯度的物質(zhì)的電泳介質(zhì)等)、其他試劑、操作方法、其他條件等可以根據(jù)上述參考中的描述來進行選擇。pH界面法是通過在堿性電泳介質(zhì)中形成酸性或弱酸性樣品區(qū)(區(qū)域)，而在樣品和堿性電泳介質(zhì)間的界面處進行樣品內(nèi)的目標物質(zhì)富集的方法。因此，當(dāng)通過pH界面法進行本發(fā)明的步驟(2)時，至少要求電泳介質(zhì)比含有樣品的溶液的pH更偏堿性，且該組分也包括在本發(fā)明的"讓分析物或其類似物和/或至少一種CFSs富集的條件"中。在上述說明中，作為具有堿性pH的電泳介質(zhì)，任何通過適當(dāng)?shù)貜谋绢I(lǐng)域的常用電泳介質(zhì)中進行選擇，通過施加電壓而可在毛細管內(nèi)的含有樣品的溶液和所述電泳介質(zhì)之間形成pH不同的界面的電泳介質(zhì)都是可以使用的。這樣的電泳介質(zhì)包括例如，Good's緩沖液如HEPES、TAPS、MES、MOPS等，硼酸緩沖液，磷酸緩沖液，組氨酸緩沖液，咪唑緩沖液，甘氨酸緩沖液等。其使用濃度和pH可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用使用濃度和pH，使用濃度通常為l|iM10M，優(yōu)選100pMlM，且更優(yōu)選lmM500mM，pH通常為711，優(yōu)選710且更優(yōu)選79。在這一點上，上述條件(具有堿性pH的電泳介質(zhì)等)其他試劑、操作方法、其他條件等都可以根據(jù)上述參考中的描述來進行選擇。掃描法是基于以下原理艮口，含有形成膠束的帶電物質(zhì)的電泳介質(zhì)設(shè)置在包括目標物質(zhì)的溶液區(qū)域的上游。通過施加電壓，所形成的膠束會追上目標物質(zhì)，并與目標物質(zhì)形成膠束復(fù)合物。當(dāng)該膠束復(fù)合物到達目標物質(zhì)所在介質(zhì)和電導(dǎo)率高于目標物質(zhì)所在介質(zhì)的介質(zhì)之間的界面時，目標物質(zhì)的電泳速度會降低，而使目標物質(zhì)富集。因此，當(dāng)通過掃描法來進行本發(fā)明的步驟(2)時，要求在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFSs的溶液中，至少有一種溶液的電導(dǎo)率要高于該溶液的其它至少一種溶液；或要求單獨使用電導(dǎo)率高于含有分析物或其類似物的溶液和/或含有至少一種CFSs的溶液的電泳介質(zhì)(高電導(dǎo)率電泳介質(zhì))；而且要求電泳介質(zhì)包括能形成膠束的電泳速度要高于分析物或其類似物和/或至少一種CFS的帶電物質(zhì)，并且具有的電導(dǎo)率低于具有較高電導(dǎo)率的溶液(或電泳介質(zhì))；且這些組分也可以包括在本發(fā)明的"讓分析物或其類似物和/或至少一種CFSs富集的條件"中。在這一點上，高電導(dǎo)率電泳介質(zhì)設(shè)置在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFSs的溶液中的位于毛細管最下游溶液的進一步下游側(cè)，且含有形成膠束的帶電物質(zhì)的電泳介質(zhì)設(shè)置在含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液中的位于毛細管最上游溶液的進一步在上述說明中，可以使用任何帶電物質(zhì)作為形成膠束的帶電物質(zhì)，只要該帶電物質(zhì)的電泳速度比分析物或其類似物和/或至少一種CFSs的電泳速度快，而且可以適當(dāng)?shù)貜谋绢I(lǐng)域的常用帶電物質(zhì)中進行選擇。所述帶電物質(zhì)包括例如，表面活性劑如SDS等。另外，所述帶電物質(zhì)的使用濃度可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用范圍，而且用量要超過臨界的膠束濃度，更具體地說，所述帶電物質(zhì)的使用濃度通常為例如lpM10M，優(yōu)選100nM1M，且更優(yōu)選lmM500mM。使用的電泳介質(zhì)也可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用帶電物質(zhì)，例如Good's緩沖液、Tris緩沖液、硼酸緩沖液、磷酸緩沖液、組氨酸緩沖液、咪唑緩沖液、甘氨酸緩沖液等。其使用濃度和pH可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用使用濃度和pH，且使用濃度通常為lpM10M，優(yōu)選100pMlM，且更優(yōu)選lmM500mM，pH通常為212，優(yōu)選410且更優(yōu)選69。在這一點上，上述條件[形成膠束的帶電物質(zhì)、電泳介質(zhì)等]、其他試劑、操作方法、其他條件等可以適當(dāng)?shù)馗鶕?jù)上述參考中的描述進行選擇。步驟(2)中施加的電壓可以在能讓分析物或其類似物和/或CFS足以富集，且在分析物或其類似物和CFS間足以形成復(fù)合物的范圍內(nèi)，而且可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用范圍。更具體地說，施加的電壓從而使電場強度在以下范圍內(nèi)下限通常不低于5V/cm，優(yōu)選不低于10V/cm，更優(yōu)選不低于50V/cm，進一步優(yōu)選不低于500V/cm，且特別優(yōu)選不低于1000V/cm，上限通常不高于10000V/cm，優(yōu)選不高于5000V/cm，更優(yōu)選不高于2000V/cm。另外，其他反應(yīng)條件(例如，pH、溫度、時間等)優(yōu)選在不抑制分析物或其類似物和/或CFS富集，和在分析物或其類似物和CFS間形成復(fù)合物的范圍內(nèi)。具體地說，雖然由于取決于分析物或其類似物和CFS的性質(zhì)，而不能簡單地說明，但pH的下限通常不低于2，優(yōu)選不低于5，pH的上限通常不高于10，且優(yōu)選不高于9;溫度的下限通常不低于0°C，優(yōu)選不低于5°C，更優(yōu)選不低于10°C，且溫度的上限通常不高于50。C，優(yōu)選不高于40。C，且更優(yōu)選不高于30°C。反應(yīng)時間取決于所用CFS與分析物或其類似物的鍵常數(shù)，且相對低的鍵常數(shù)需要相對較長的反應(yīng)時間，相對高的鍵常數(shù)需要相對較短的反應(yīng)時間。更具體地說，例如，下限通常不短于l分鐘，優(yōu)選不短于3分鐘，更優(yōu)選不短于5分鐘；上限通常不長于24小時，優(yōu)選不長于12小時，更優(yōu)選不長于1小時，且進一步優(yōu)選不長于30分鐘。l-3.毛細管(通道)本發(fā)明所用的毛細管(通道)是本領(lǐng)域如毛細管電泳法，毛細管芯片電泳法等中的任意常用毛細管(通道)，而且并無特殊限制。本發(fā)明所用的毛細管(通道)材料是本領(lǐng)域的任意常用材料，且并無特殊限制，只要它能通過讓分析物或其類似物和至少一種CFSs接觸，而在分析物或其類似物和至少一種CFSs間最終形成復(fù)合物。毛細管(通道)材料的實例為例如，硅石類化合物如玻璃、石英和硅，合成聚合物如環(huán)烯烴共聚物(COC)、環(huán)烯烴聚合物(COP)、聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基硅氧垸、聚氯乙烯、聚氨酯、聚苯乙烯、聚砜、聚碳酸酯、聚四氟乙烯等。另外，毛細管(通道)的內(nèi)徑和長度并無特別限定，只要其足以富集分析物或其類似物和/或CFS，并在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物即可。例如，內(nèi)徑通常為1100(Vm，優(yōu)選1200jim且更優(yōu)選1100pm，且長度通常為0.1mm100cm，優(yōu)選0.1mm20cm且更優(yōu)選0.1mm10cm。本發(fā)明的步驟(2)通常在上述毛細管用電泳介質(zhì)填充的狀態(tài)下進行。電泳介質(zhì)包括用于電泳的緩沖液或含有填料的用于電泳的所述緩沖液等。在這一點上，電泳介質(zhì)可以單獨使用或兩種或多種組合使用。另外，將電泳介質(zhì)引入毛細管的方法，包括如上所述的將含有分析物或其類似物的溶液和含有至少一種CFSs的溶液引入毛細管的方法。下列的任意一種將電泳介質(zhì)引入毛細管的時間都是可以采用的(l)在將含有分析物或其類似物的溶液，和/或含有至少一種CFSs的溶液引入毛細管之前；(2)在將含有分析物或其類似物的溶液，和/或含有至少一種CFSs的溶液引入毛細管的同時；和(3)在將含有分析物或其類似物的溶液，和/或含有至少一種CFSs的溶液引入毛細管之后。對于所述的用于電泳的緩沖液沒有特別限定，只要是本領(lǐng)域常用的即可。用于電泳的緩沖液的實例是例如，在雜交法、免疫等領(lǐng)域常用的緩沖液等，如Tris緩沖液、磷酸緩沖液、佛羅那(Veronal)緩沖液、硼酸緩沖液、Good's緩沖液、SSC緩沖液、TBE緩沖液、TAE緩沖液等。這些緩沖液的濃度通常為0.1mM10M，優(yōu)選lmM5M，且更優(yōu)選5mMlM。另夕卜，所述緩沖液的任何pH都可以使用，只要其不對物質(zhì)分離有不良作用即可，且通常為213，優(yōu)選411且更優(yōu)選59。在這一點上，這些緩沖液可以單獨使用或2種或以上組合使用。毛細管中的填料(聚合物)并不特別限定，只要是本領(lǐng)域常用的即可。填料的實例為，例如，聚醚例如聚氧乙烯(聚乙二醇)、聚氧丙烯；聚烷撐亞胺例如聚乙烯亞胺；聚丙烯酸聚合物例如聚丙烯酸、聚丙烯酸酯和聚(丙烯酸甲酯)；聚酰胺類聚合物例如聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺；聚甲基丙烯酸類聚合物例如聚甲基丙烯酸、聚甲基丙烯酸酯和聚(甲基丙烯酸甲酯)；聚乙烯類聚合物例如聚醋酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯噁唑垸酮；水溶羥基聚合物例如支鏈淀粉、痂囊腔菌多糖、黃原膠、右旋糖苷和瓜爾膠；水溶纖維素化合物例如甲基纖維素、羥乙基纖維素和羥丙基纖維素；及其衍生物，和具有多種含這些聚合物的單體單元的共聚物等。在這一點上，這些填料可以單獨使用，也可以兩種或多種組合使用。上述填料的分子量通常為500Da6000kDa，優(yōu)選11000kDa且更優(yōu)選50500kDa。上述填料的使用濃度可以適當(dāng)?shù)剡x自本領(lǐng)域的常用范圍，通常為0.0140%(w/v)，優(yōu)選0.0120%(w/v)，且更優(yōu)選0.110%(w/v)。在這一點上，當(dāng)將上述填料加入到緩沖液時，用于電泳的緩沖液的粘度通常為11000厘泊，優(yōu)選1200厘泊，且更優(yōu)選110厘泊。1-4.分析物、樣品、類似物和含有分析物或類似物的溶液(l)分析物本發(fā)明的分析物包括，例如，核苷酸鏈(寡核苷酸鏈和多核苷酸鏈等)；染色體；肽鏈(C-肽和血管緊張素I等)，蛋白[血清降鈣素原、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)、|32-微球蛋白、清蛋白、其分解產(chǎn)物、和血清蛋白如鐵蛋白等];酶[淀粉酶(胰腺型、唾液腺型和X-型等)、堿性磷酸酶(肝的、骨的、胎盤的和小腸的等)、酸性磷酸酶(PAP等)、Y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(腎的、胰腺的和肝的等)、脂肪酶(胰腺型和胃型等)、肌酸激酶(CK-I、CK-2和mCK等)、乳酸脫氫酶(LDH1LDH5等)、谷氨酸草酰乙酸酯氨基移轉(zhuǎn)酶(ASTm和ASTs等)、谷氨酸-丙酮酸酯氨基移轉(zhuǎn)酶(ALTm和ALTs等)、膽堿酯酶(ChElChE5等)、亮氨酸氨肽酶(C-LAP、AA和CAP等)、腎素、蛋白激酶和酪氨酸激酶等];微生物如細菌(肺結(jié)核細菌、肺炎球菌生物體、白喉生物體、腦膜炎球菌、淋球菌、葡萄球菌、鏈球菌、腸細菌、大腸桿—菌和幽門螺桿菌等)，病毒(風(fēng)疹病毒、皰疹病毒、肝炎病毒、ATL病毒、AIDS病毒、流感病毒、腺病毒、腸病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、EB病毒、HAV、HBV、HCV、HIV和HTLV等)，真菌(假絲酵母(Candida)和隱球酵母(Cryptococcus)等)，螺旋體(鉤端螺旋體(leptospire)、梅毒螺旋體(Treponemapallidum)等)，衣原體和支原體；衍生自所述微生物的蛋白、肽或糖類抗原；各種抗原引起的支氣管痙攣、過敏性鼻炎和特應(yīng)性皮炎等(源自室內(nèi)灰塵、螨如粉塵螨(Dermatophagoidesfarinae)禾口屋塵螨(Dermatophagoidespteronyssinus))等，來自雪松、柏樹、雀稗(Pasupalumthunbergii)、豚草、梯牧草(timothy)、黃花草、和黑麥等的花粉，如貓、狗或蟹等的動物，如米和蛋白等的食品，真菌、昆蟲、木材、藥物或化學(xué)物質(zhì)等的過敏原)；脂質(zhì)(脂蛋白等)；蛋白酶(胰蛋白酶、纖溶酶和絲氨酸蛋白酶等)；蛋白抗原腫瘤標志物(PSA，PGI和PGII等)；糖類抗原[AFP(L1L3等)、hCG(hCG族等)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、IgG、甲狀腺球蛋白、衰變加速因子(DAF)、癌胚抗原(CEA、NCA、NCA-2禾nNFA等)、CA19-9、PIVKA-II、CA125、前列腺-特異性抗原、具有由癌細胞產(chǎn)生的特殊糖類(糖)鏈和ABO糖類抗原的糖類抗原腫瘤標志物等];糖類(糖)鏈[包括在上述糖類抗原中的透明質(zhì)酸，P-葡聚糖和糖類(糖)鏈等];糖類(糖)鏈結(jié)合蛋白(透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白和(3-葡聚糖結(jié)合蛋白等)；凝集素(伴刀豆球蛋白A、扁豆凝集素、菜豆凝集素、曼陀羅凝集素和麥芽凝集素等)；磷脂(心磷脂等)；脂多糖(內(nèi)毒素等)；化學(xué)物質(zhì)(激素，如PTH、T3、T4、TSH、胰島素、LH、FSH和促乳素等，內(nèi)分泌紊亂化學(xué)藥品如三丁錫、壬基苯酚、4-辛基苯酚、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯、二苯甲酮、八氯苯乙烯和鄰苯二甲酸二2-乙基己酯等)；受體(雌激素和TSH的受體等)；配體(雌激素和TSH等)；及其抗體等。其中，本發(fā)明的方法可用于對具有不同糖類(糖)鏈、核苷酸鏈(寡核苷酸鏈和多核苷酸鏈)和肽鏈(包括多肽)結(jié)構(gòu)的糖蛋白進行分析(定量測定)，特別適用于分析具有不同糖類(糖)鏈結(jié)構(gòu)的糖蛋白。在這一點上，由于己知糖類(糖)鏈結(jié)構(gòu)會在特定疾病(例如癌)中發(fā)生改變，而且據(jù)報道它在臨床實驗室(臨床化學(xué))中有用，因此可以利用本發(fā)明的方法來對具有不同糖類(糖)鏈結(jié)構(gòu)的糖蛋白的臨床實驗室(臨床化學(xué))有效性進行重新評價。另外，把從野生型中將由于核苷酸鏈(寡核苷酸鏈或多核苷酸鏈)或肽鏈(包括多肽)等的微小突變或取代而產(chǎn)生的突變型分離出來，作為是分子生物學(xué)和分子臨床實驗室(臨床化學(xué))領(lǐng)域的重要分析目標，因此，通過利用本發(fā)明的方法來對這些突變型和/或野生型進行分析(定量測定)，可以增加發(fā)現(xiàn)臨床實驗室(臨床化學(xué))中的某些有價值因素等的可能性。(2)含有分析物的樣品上述描述的本發(fā)明的含有分析物的樣品實例包括源自生物體的樣品，包括體液如血清、血漿、髓液、滑液、淋巴液等、排泄物如尿、糞(feces)等、痰、膿物質(zhì)、皮屑，環(huán)境樣品如食品、飲料、自來水、海水、湖水和濕地水、河水、工業(yè)廢水、半導(dǎo)體洗液、洗醫(yī)學(xué)儀器的洗液等；及其通過溶解在水或本領(lǐng)域常用緩沖液中而再生的加工產(chǎn)品，所述緩沖液例如Tris緩沖液、磷酸緩沖液、佛羅那緩沖液、硼酸緩沖液、Good's緩沖液等。在這一點上，本發(fā)明的相關(guān)樣品包括通過化學(xué)合成得到的含上述分析物的樣P叩o(3)類似物(標記性類似物和反應(yīng)改良類似物)本發(fā)明所用的類似物是可與結(jié)合樣品中用于分析靶分析物的CFS結(jié)合的物質(zhì)。換句話說，類似物是具有與所述樣品中分析物結(jié)合的CFS的結(jié)合位點一樣結(jié)合位點的物質(zhì)。這樣的物質(zhì)包括，例如，與樣品中的分析物(分析靶標)一樣的物質(zhì)；樣品中的分析物的部分結(jié)構(gòu)被修飾、改變、變性、除去等的物質(zhì)(通常所說的類似物)；等。物質(zhì)的實例為，例如，在樣品中的分析物(分析靶標)上引入部分突變的重組蛋白；樣品中的分析物(分析靶標)有部分修飾的肽序列的肽；樣品中的分析物(分析靶標)有部分修飾的核苷酸序列的核苷酸鏈；等。在這一點上，樣品中的分析物(分析靶標)的具體實例如上所述。在這一點上，本發(fā)明所用的標記性類似物和反應(yīng)改良類似物是與上述物質(zhì)結(jié)合的標記物或反應(yīng)改良物，且標記物和反應(yīng)改良物的具體實例和優(yōu)選的實施方式如下文所述。另外，使標記物或反應(yīng)改良物與上述物質(zhì)結(jié)合的方法可以是與使反應(yīng)改良物和CFS之間發(fā)生結(jié)合的方法或用標記物來標記性CFS的方法相似的方法，下文將會進行描述。類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)的使用量不能簡單地說明，因為它取決于要用的類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)的種類，或CFS的種類或使用濃度等。更具體地說，類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)可以包含在溶液(例如，含有分析物和類似物的溶液、含有類似物的溶液、含有類似物和CFS的溶液)中，這樣，如上所述，溶液中類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)的使用量下限通常不低于10pM，優(yōu)選不低于lnM且更優(yōu)選不低于100nM，且上限通常不高于10nM，優(yōu)選不高于l(iM且更優(yōu)選不高于500nM。(4)含有分析物或類似物的溶液如上所述，在本發(fā)明中"含有分析物或類似物的溶液"是指含有本發(fā)明的分析物(含有分析物的樣品)或類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)的溶液。這樣的溶液包括(a)如上所述的含有分析物的樣品，(b)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液(換句話說，含有在分析物和至少一種CFS之間的復(fù)合物的溶液)，(c)含有類似物的溶液(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)，(d)含有含分析物的樣品和類似物的溶液(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)(換句話說，含有分析物和類似物的溶液)，(e)含有類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)和至少一種CFS的溶液(換句話說，含有在類似物和至少一種CFS之間的復(fù)合物的溶液)，(f)含有含分析物的樣品、類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)和至少一種CFS的溶液等。在這一點上，作為上述溶液(b)或(e)，當(dāng)在本發(fā)明中使用2種或以上CFS時，特別包括含有由最終與分析物或其類似物結(jié)合的所有CFS中的一部分CFSs(所有CFS中的一部分)與分析物或其類似物形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，換句話說，含有由少于組成最終形成復(fù)合物的CFS的CFS與分析物或其類似物形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，所述最終形成的復(fù)合物在分析物或其類似物和2種或以上CFSs間。也就是說，例如，當(dāng)使用2種CFS時，它是含有由一種CFS與分析物或其類似物形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液。例如，當(dāng)使用3種CFS吋，它是含有由一種CFS與分析物或其類似物形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，和含有由2種CFS與分析物或其類似物形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液。(在此情況下，當(dāng)使用4種或以上CFS時，按照此情況的思路考慮。)更具體地說，例如，如下所述，當(dāng)不與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS與反應(yīng)改良CFS組合作為CFS使用時，含有由分析物和所述CFS形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，和含有由分析物和反應(yīng)改良CFS形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液對應(yīng)上述溶液(b);當(dāng)組合使用標記性CFS和反應(yīng)改良CFS作為CFS時，含有由分析物和標記性CFS形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，和含有由分析物和反應(yīng)改良CFS形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液對應(yīng)上述溶液(b)。另外，當(dāng)不與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS和標記性反應(yīng)改良CFS組合使用作為CFS時，含有由分析物和所述CFS形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，和含有由分析物和標記性反應(yīng)改良CFS形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液對應(yīng)上述溶液(b)。在這一點上，在上述說明中，通常含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液一般是將含有上述的分析物的樣品(不包括CFS)與如下所述的含有CFS的溶液適當(dāng)混合而得到的反應(yīng)溶液。上述溶液(e)包括，更具體地說，例如，當(dāng)使用標記性類似物或反應(yīng)改良類似物時，且當(dāng)使用2種或以上CFS時，與如上所述相似，含有由最終與標記性類似物或反應(yīng)改良類似物結(jié)合的所有CFS中的一部分CFSs(所有CFS中的一部分)與標記性類似物或反應(yīng)改良類似物形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，換句話說，含有由少于組成最終形成的復(fù)合物的CFS的CFS與標記性類似物或反應(yīng)改良類似物形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，所述最終形成的復(fù)合物由標記性類似物或反應(yīng)改良類似物與2種或以上CFS形成。在這一點上，在上述說明中，通常含有類似物的溶液(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)一般是將含有標記性類似物或反應(yīng)改良類似物的溶液與如下所述的含有CFS的溶液適當(dāng)混合而得到的反應(yīng)溶液。另外，作為上述溶液(d)，例如，包括含有樣品中的分析物，和用標記物標記的類似物(標記性類似物)或與反應(yīng)改良物結(jié)合的類似物(反應(yīng)改良類似物)的溶液。在這一點上，含有含分析物的樣品和類似物的溶液通常是將含有分析物的樣品(不包括CFS)與含有類似物的溶液適當(dāng)混合而得到的混合溶液。作為上述溶液(f)，更具體地說，例如，當(dāng)使用標記性類似物或反應(yīng)改良類似物，且當(dāng)使用2種或以上CFS時，與如上所述相似，溶液包括由最終與分析物和/或標記性類似物(或反應(yīng)改良類似物)結(jié)合的所有CFS中的一部分CFSs(所有CFS中的一部分)與分析物和/或標記性類似物(或反應(yīng)改良類似物)形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)，換句話說，含有由少于組成最終形成復(fù)合物的CFS的CFS與分析物和/或標記性類似物(或反應(yīng)改良類似物)形成的復(fù)合物(中間體復(fù)合物)的溶液，所述最終形成的復(fù)合物由分析物和/或標記性類似物(或反應(yīng)改良類似物)與2種或以上CFS形成。在這一點上，含有含分析物的樣品、類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)和至少一種CFS的溶液通常是通過將含有含上述分析物的樣品的溶液、含標記性類似物或反應(yīng)改良類似物的溶液和含有至少一種CFS的溶液適當(dāng)混合而得到的反應(yīng)溶液。在上述說明中，(a)含有分析物的樣品如上所述。另外，作為溶液(b)(f)，只要其不抑制在分析物與CFS之間形成復(fù)合物，和/或在類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)與CFS之間形成復(fù)合物，就可以使用任何溶液，例如，水、緩沖液等。作為這樣的緩沖液，一般包括通常在pH范圍511時具有緩沖作用且為本領(lǐng)域所常用的緩沖液。緩沖液的實例包括Tris緩沖液、Good's緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、TBS緩沖液、磷酸緩沖液、硼酸緩沖液等，且其使用濃度通常為lmM2M，且優(yōu)選10mMlM，且pH通常為511,優(yōu)選510，更優(yōu)選5.58.5，進一步優(yōu)選68，且特別優(yōu)選7左右。l-5.CFS和含有CFS的溶液在本發(fā)明中，"可與分析物或其類似物(CFS)形成復(fù)合物的物質(zhì)"指具有能在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物的能力的物質(zhì)，也就是說，通過與上述的分析物或其類似物結(jié)合，或通過其它CFS與分析物或其類似物結(jié)合而形成含有分析物或其類似物和CFS的復(fù)合物。這樣的CFS指通過相互作用與分析物或其類似物結(jié)合的物質(zhì)，所述相互作用例如"抗原"-"抗體"反應(yīng)、"糖類(糖)鏈"-"蛋白"反應(yīng)、"糖類(糖)鏈"-"凝集素"反應(yīng)、"酶"-"抑制劑"反應(yīng)、"蛋白"-"肽鏈"反應(yīng)或"染色體或核苷酸鏈"-"核苷酸鏈"反應(yīng)等。當(dāng)上述配對物質(zhì)中一個為分析物或其類似物時，那另一個就為CFS。例如，當(dāng)分析物或其類似物為"抗原"時，CFS為"抗體"，當(dāng)分析物或其類似物為"抗體"時，CFS為"抗原"(其他配對同理)。更具體地說，這樣的物質(zhì)包括，例如，核苷酸鏈(寡核苷酸鏈和多核苷酸鏈等)；染色體；肽鏈(C-肽和血管緊張素I等)，蛋白[血清降鈣素原、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)、(32-微球蛋白、清蛋白、其分解產(chǎn)物、和血清蛋白(如鐵蛋白等)];酶[淀粉酶(胰腺型、唾液腺型和X-型等)、堿性磷酸酶(肝的、骨的、胎盤的和小腸的等)、酸性磷酸酶(PAP等)、r谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(腎的、胰腺的和肝的等)、脂肪酶(胰腺型和胃型等)、肌酸激酶(CK-I、CK-2和mCK等)、乳酸脫氫酶(LDH1LDH5等)、谷氮酸草酰乙酸氨基移轉(zhuǎn)酶(ASTm和ASTs等)、谷氨酸-丙酮酸氨基移轉(zhuǎn)酶(ALTm和ALTs等)、膽堿酯酶(ChElChE5等)、亮氨酸氨肽酶(C-LAP、AA和CAP等)、腎素、蛋白激酶和酪氨酸激酶等];微生物如細菌(肺結(jié)核細菌、肺炎球菌生物體、白喉生物體、腦膜炎球菌、淋球菌、葡萄球菌、鏈球菌、腸細菌、大腸桿菌和幽門螺桿菌等)，病毒(風(fēng)疹病毒、皰疹病毒、肝炎病毒、ATL病毒、AIDS病毒、流感病毒、腺病毒、腸病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、EB病毒、HAV、HBV、HCV、HIV禾nHTLV等)，真菌(假絲酵母(Candida)和隱球酵母(Cryptococcus)等)，螺旋體(鉤端螺旋體(leptospire)、梅毒螺旋體(Tr印onemapallidum)等)，衣原體和支原體；衍生自所述微生物的蛋白、肽或糖類抗原；各種抗原引起的支氣管痙攣、過敏性鼻炎和特應(yīng)性皮炎等(源自室內(nèi)灰塵、喊如私、塵喊(Dermatophagoidesfarinae)禾口屋塵頓(Dermatophagoidespteronyssinus))等，來自雪松、柏樹、雀稗(Pasupalumthunbergii)、豚草、梯牧草(timothy)、黃花草、和黑麥等的花粉，如貓、狗或蟹等的動物，如米和蛋白等的食品，真菌、昆蟲、木材、藥物或化學(xué)物質(zhì)等的過敏原)；脂質(zhì)(脂蛋白等)；蛋白酶(胰蛋白酶、纖溶酶和絲氨酸蛋白酶等)；腫瘤標志物蛋白抗原(腫瘤標記物蛋白抗原？)(PSA，PGI和PGII等)；糖類抗原[AFP(L1L3等)、hCG(hCG族等)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、IgG、甲狀腺球蛋白、衰變加速因子(DAF)、癌胚抗原(CEA、NCA、NCA-2和NFA等)、CA19-9、PIVKA-II、CA125、前列腺-特異性抗原、含有由癌細胞產(chǎn)生的特殊糖類(糖)鏈的糖類抗原腫瘤標志物和ABO糖類抗原等];糖類(糖)鏈[透明質(zhì)酸，卩-葡聚糖和包括在上述糖類抗原中的糖類(糖)鏈等];糖類(糖)鏈結(jié)合蛋白(透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白和p-葡聚糖結(jié)合蛋白等)；凝集素(伴刀豆球蛋白A、扁豆凝集素、菜豆凝集素、曼陀羅凝集素和麥芽凝集素等)；磷脂(心磷脂等)；脂多糖(內(nèi)毒素等)；化學(xué)物質(zhì)(激素如PTH、T3、T4、TSH、胰島素、LH、FSH和促乳素等，內(nèi)分泌紊亂化學(xué)藥品如三丁錫、壬基苯酚、4-辛基苯酚、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯、二苯甲酮、八氯苯乙烯和鄰苯二甲酸二2-乙基己酯等)；受體(雌激素和TSH的受體等)；配體(雌激素和TSH等)；及其抗體等。在這一點上，本發(fā)明所用的抗體包括分解產(chǎn)物，例如通過用蛋白水解酶(蛋白酶等)如木瓜酶或胃蛋白酶降解或通過化學(xué)降解而得到的Fab和F(ab')2片段等。上述CFS可以單獨使用，也可以兩種或多種組合使用。在這一點上，當(dāng)使用2種或以上CFS的組合時，每個CFS的結(jié)合位點沒有特別的限定，只要2種或以上的CFS可以與分析物或其類似物形成復(fù)合物即可。結(jié)合這些CFS的結(jié)合位點包括，例如，與2個或以上CFSs結(jié)合的所有結(jié)合位點都存在于分析物或其類似物上[結(jié)合形式(l)];讓2個或以上CFS中的至少一種CFS(例如，CFSA)結(jié)合的結(jié)合位點僅存在于分析物或其類似物上，而與另一個至少一種CFS(例如，復(fù)合物結(jié)合物B)結(jié)合的結(jié)合位點存在于由在分析物或其類似物和CFSA間形成的復(fù)合物新生的位點上[結(jié)合形式(2)];和與2個或以上CFS中的至少一種CFS(例如，CFSA)結(jié)合的結(jié)合位點僅存在于分析物或其類似物上，而與另一個至少一種CFS(例如，CFSB)結(jié)合的結(jié)合位點僅存在于CFSA上[結(jié)合形式(3)]。其中，優(yōu)選分別與2個或以上CFS結(jié)合的結(jié)合位點是不同的。在這一點上，在結(jié)合形式(2)中，具有能特異性結(jié)合新生位點(CFS)的特性的物質(zhì)有，例如，抗體、肽鏈和核苷酸鏈等，它能識別分析物或其類似物與CFS間的復(fù)合物，而且能與之結(jié)合。作為上述的CFS，優(yōu)選與分析物或其類似物通過"抗原"-"抗體"反應(yīng)或"糖類(糖)鏈"-"蛋白"反應(yīng)結(jié)合的CFS。具體地說，優(yōu)選分析物或其類似物的抗體、或與分析物或其類似物結(jié)合的抗原、或與分析物或其類似物結(jié)合的蛋白，更優(yōu)選分析物或其類似物的抗體、或與分析物或其類似物結(jié)合的蛋白。上述CFS可以與標記物和/或能改變分析物或其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(后面簡稱為反應(yīng)改良物)結(jié)合，并會得到(l)具有與分析物或其類似物形成復(fù)合物和能改變分析物或其類似物的電泳遷移率的能力的CFS(后面簡稱為反應(yīng)改良CFS)，(2)具有與分析物或其類似物形成復(fù)合物能力并用標記物標記的CFS(標記性CFS)，和(3)用標記物標記并具有能與分析物或其類似物形成復(fù)合物和能改變分析物或其類似物電泳遷移率的能力的CFS(標記性反應(yīng)改良CFS)。通過利用與反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS，可以改變CFS的電泳遷移率，而且可以隨意地控制步驟(l)中的含有分析物或其類似物的溶液，和含有至少一種CFS的溶液的設(shè)置順序，從而提高分析物或其類似物和/或CFS的富集和分析物或其類似物與CFS的反應(yīng)效率(復(fù)合物形成反應(yīng))。另外，通過利用與標記物結(jié)合的CFS，可以測量(檢測)樣品中的分析物。(l)反應(yīng)改良CFS反應(yīng)改良CFS是具有能在分析物或其類似物和物質(zhì)間形成復(fù)合物，并能改變分析物或其類似物的電泳遷移率的能力的物質(zhì)，換句話說，是具有能通過與分析物或其類似物形成復(fù)合物而使所述分析物或其類似物的相應(yīng)電泳操作性質(zhì)的行為(電泳遷移率)發(fā)生變化的能力的物質(zhì)，并且能讓分析物或其類似物和反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物(或分析物或其類似物與除了反應(yīng)改良CFS以外的CFS間的復(fù)合物)的電泳遷移率高于或低于分析物或其類似物本身(未與反應(yīng)改良CFS結(jié)合的分析物或其類似物)的電泳遷移率(電泳遷移率快或慢)。作為所述的反應(yīng)改良CFS，上述CFS通常與下列的反應(yīng)改良物結(jié)合例如，無機金屬氧化物如硅石和氧化鋁等；金屬如金、鈦、鐵和鎳等；通過如硅垸偶聯(lián)處理等操作而引入官能團的無機金屬氧化物；生物體如各種微生物和真核細胞等；多糖如瓊脂糖、纖維素和不溶葡聚糖等；合成聚合物如聚苯乙烯乳膠、苯乙烯-丁二烯共聚物、苯乙烯-甲基丙烯酸共聚物、丙烯醛-乙二醇二甲基丙烯酸酯共聚物、苯乙烯-苯乙烯磺酸乳膠、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸縮水甘油酯、聚丙烯醛涂覆的顆粒、交聯(lián)的聚丙烯腈、丙烯酸或丙烯酸酯類聚合物、丙烯腈-丁二烯共聚物、氯乙烯-丙烯酸酯共聚物和聚醋酸乙烯酯-丙烯酸酯共聚物等；生物分子如紅血球、糖、核酸(多核苷酸如RNA、DNA)、蛋白、多肽和聚氨基酸(聚谷氨酸、聚天門冬酸、聚賴氨酸等)；脂類；等。但是，例如，反應(yīng)改良物結(jié)合分析物或其類似物可以通過化學(xué)結(jié)合法，如在反應(yīng)改良物的表面引入官能團，然后通過該官能團與分析物或其類似物結(jié)合的方法；通過使反應(yīng)改良物和分析物或其類似物鍵聯(lián)結(jié)合的方法等來進行。在這一點上，在上述說明中，反應(yīng)改良物是通過與CFS結(jié)合而具有能給所述CFS提供作上述反應(yīng)改良CFS特性的物質(zhì)。也就是說，反應(yīng)改良物是具有能改變分析物或其類似物的電泳遷移率的性質(zhì)能力的物質(zhì)，換句話說，是具有通過在分析物或其類似物和CFS間形成復(fù)合物(或在分析物或其類似物，反應(yīng)改良CFS和除了反應(yīng)改良CFS之外的CFS中的復(fù)合物)，而借助CFS使所述分析物或其類似物的相應(yīng)電泳操作行為(電泳遷移率)發(fā)生變化的能力的物質(zhì)，這樣就能使分析物或其類似物和反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物的電泳遷移率高于或低于分析物或其類似物本身或補結(jié)合反應(yīng)改良CFS和CFS的分析物或類似物間的復(fù)合物的電泳遷移率(電泳遷移率快或慢)。其中，作為反應(yīng)改良CFS，優(yōu)選如上所述通過讓核酸(核苷酸鏈)、蛋白、多肽或聚氨基酸與CFS結(jié)合而得到的反應(yīng)改良CFS，更優(yōu)選通過讓核酸(核苷酸鏈)或聚氨基酸與CFS結(jié)合而得到的反應(yīng)改良CFS。另外，作為反應(yīng)改良物，優(yōu)選包括抗體的物質(zhì)作為CFS，具體地說，優(yōu)選通過讓作為反應(yīng)改良物質(zhì)的核酸(核苷酸鏈)、蛋白、多肽或聚氨基酸與作為CFS的抗體結(jié)合而得到的反應(yīng)改良CFS，其它的就特別優(yōu)選通過讓核酸(核苷酸鏈)或聚氨基酸作為反應(yīng)改良物質(zhì)與作為CFS的抗體結(jié)合而得到的反應(yīng)改良CFS。可以使用本領(lǐng)域任何常用方法來讓反應(yīng)改良物與CFS結(jié)合，即，制備反應(yīng)改良CFS，例如，在己知的EIA、RIA、FIA法中常用的已知標記法或雜交法本身(例如，IkagakuJikkenKoza(醫(yī)藥化學(xué)實驗指南)，vo1.8，YuichiYamamura編輯，第一版,NakayamaShotenCo.,Ltd.,1971;Zusetu(示例性說明)熒光抗體，AkiraKawao，第一版，SoftscienceCo.,Ltd.,1983;EmasyImmunoassay,EijiIshikawa,TadashiKawai,KiyoshiMiyai，第三版,Igaku-ShoinLtd.,1987;分子克隆，實驗指南，第二版，J.Sambroock，E.F.Fritsch，T.Maniatis,冷泉港實驗室出版社；HandbookofFluorescentProbeandResearchChemicals,第七版,第8章,MolecularProbeInc.;WO2002/082083);或利用抗生物素蛋白(鏈霉抗生物素蛋白)與生物素間反應(yīng)的常規(guī)方法。在這一點上，當(dāng)使用反應(yīng)改良CFS作為CFS時，優(yōu)選組合使用(平行使用)上述的標記性CFS。但是，當(dāng)反應(yīng)改良CFS自身可通過任何方法而可測量(可檢測)，或能用標記物來進行標記時，就不需要組合使用標記性CFS。另外，當(dāng)標記性CFS和反應(yīng)改良CFS組合使用(平行使用)作為CFS時，只要在分析物或其類似物、標記性CFS和反應(yīng)改良CFS這三種組分中能形成復(fù)合物，就不需要特別限制這三種組分的結(jié)合形式或標記性CFS和反應(yīng)改良CFS的結(jié)合位點。這樣的結(jié)合形式包括，例如，(l)通常所說的三明治復(fù)合物，其中分析物或其類似物夾在標記性CFS和反應(yīng)改良CFS之間，(2)復(fù)合物，其中反應(yīng)改良CFS或標記性CFS進一步在結(jié)合位點與分析物或其類似物和標記性CFS或反應(yīng)改良CFS結(jié)合，和(3)復(fù)合物，其中反應(yīng)改良CFS或標記性CFS進一步與已與分析物或其類似物結(jié)合的標記性CFS或反應(yīng)改良CFS結(jié)合等。另外，所述結(jié)合部分包括，例如，(1)標記性CFS和反應(yīng)改良CFS的所有結(jié)合位點都僅存在于分析物或其類似物上[結(jié)合形式(l)]，(2)標記性CFS或反應(yīng)改良CFS中一個的結(jié)合位點僅存在于分析物或其類似物上，而另一個結(jié)合位點則在由于在分析物和任一所述標記性CFS和反應(yīng)改良CFS間形成復(fù)合物而新產(chǎn)生的位點上[結(jié)合形式(2)]，(3)標記性CFS和反應(yīng)改良CFS中的任一個結(jié)合位點僅存在于分析物或其類似物上，而另一個結(jié)合位點則僅存在于所述標記性CFS和反應(yīng)改良CFS之一上[結(jié)合形式(3)]和(4)上述情況的組合。其中，標記性CFS的結(jié)合位點、和反應(yīng)改良CFS的結(jié)合位點優(yōu)選是不相同的。在這一點上，在上述說明(2)中，作為具有能在新生位點特異性結(jié)合特性的物質(zhì)(標記性CFS禾n/或反應(yīng)改良CFS)有，例如，抗體、肽鏈和核苷酸鏈等，其能識別在分析物或其類似物與標記性CFS和/或反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物，并能與之結(jié)合。(2)標記性CFS上述CFS—般是通過任何方法就本身可測量(可檢測)，或能用標記物標記的物質(zhì)。通過利用具有這種性質(zhì)的物質(zhì)，就可以測量(檢測)樣品中的分析物。在這一點上，當(dāng)分析物或其類似物本身是可通過任何方法(例如酶等)就可測量的，或分析物或其類似物可直接與標記物結(jié)合而無需使用(不通過)CFS時，就可以對樣品中的分析物進行測量(檢測)，即便所述CFS沒有上述性質(zhì)。這些本身就通過任何方法可檢測的物質(zhì)包括酶、染料、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、具有UV區(qū)吸收的物質(zhì)等。其中，作為在本發(fā)明中使用的CFS，優(yōu)選可與分析物或其類似物形成復(fù)合物，并用標記物標記(標記性CFS)的物質(zhì)。作為在本發(fā)明中使用的標記物，本領(lǐng)域如酶免疫測定(EIA)、放射免疫測定(RIA)、熒光免疫測定(FIA)、雜交法等使用標記物都可以采用。這樣的標記物包括，例如，酶如堿性磷酸酶(ALP)、(3-半乳糖苷酶((3-Gal)、過氧化物酶(POD)、微過氧化物酶、葡糖氧化酶(GOD)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PDH)、蘋果酸脫氫酶和熒光素酶等；染料如考馬斯亮藍R250、和甲基橙等；放射性同位素如99mTc、131I、125I、14C、3H、32p和"S等；HiLyte型染料如HiLyteFluor488、HiLyteFluor555、HiLyteFluor647、HiLyteFluor680和HiLyteFluor750等(所有都為HiLyteBioscience,Inc.的商品名)；Alexa型染料如AlexaFluorDye350、AlexaFluorDye430、AlexaFluorDye488、AlexaFluorDye532、AlexaFluorDye546、AlexaFluorDye555、AlexaFluorDye568、AlexaFluorDye594、AlexaFluorDye633、AlexaFluorDye647、AlexaFluorDye660、AlexaFluorDye680、AlexaFluorDye700和AlexaFluorDye750等(所有都為MolecularProbes,Inc.的商品名)；CyDye型染料如Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5和Cy7等(所有都為AmershamBiosciences,Inc.的商品名)；熒光材料如熒光素、羅丹明、丹酰、熒光胺、香豆素、萘胺、或其衍生物、稀土熒光染料[稀土金屬如衫(Sm)、銪(Eu)、鋱(Tb)或鏑(Dy)]和螯合物如4,4'-雙(r,r,r，2"，2"，3",3"-七氟-4",6"-己二酮-6"-基)氯代磺基-0-三聯(lián)苯(BHHCT)、4,7-雙(氯磺酰)-1，10-菲羅啉-2,9-二羧酸(BCPDA)、(3-萘基三氟乙酸(P-NTA)等的組合]、嵌入劑染料[例如，吖啶染料，如吖啶橙等；乙錠化合物如溴化乙錠、乙錠均二聚物-1(EthD-l)、乙錠均二聚物-2(EthD-2)、溴化乙錠單疊氮化物(EMA)和二氫乙錠等；碘化合物如碘化丙錠、和碘化己錠(hexidiumiodide)等；7-氨基放線菌素D(7-AAD);花青素二聚型染料如POPO-l、BOBO-l、YOYO-l、TOTO-l、JOJO畫l、POPO-3、LOLO-l、BOBO-3、YOYO誦3、禾tlTOTO-3等(所有都為MolecularProbes,Inc.的商品名)；SYTOX型染料如SYBRGold、SYBRGreenI和SYBRGreenII、SYTOXGreen、SYTOXBlue、禾QSYTOXOrange等(所有都為MolecularProbes,Inc.的商品名)等]，與DNA雙螺旋的小基團結(jié)合的物質(zhì)[例如，4',6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI:MolecularProbes，Inc.的商品名)、五水合(雙-亞氨芐基)(Hoechst33258:MolecularProbes,Inc.的商品名)、和三鹽酸化物(Hoechst33342:MolecularProbes,Inc.的商品名)等];亞氨節(jié)基型染料(Hoechst34580:MolecularProbes,Inc.的商品名)等]，與腺嘌呤-胸腺嘧啶(A-T)序列特異性結(jié)合的物質(zhì)[例如，吖啶染料如9-氨基-6-氯-2-甲氧基吖啶(ACMA)和雙(6-氯-2-甲氧基-9-吖啶基)精胺(吖啶均二聚物)等，羥芪巴脒等];發(fā)光材料如熒光素、異魯米那(isoluminal)、魯米那(luminal)和雙(2,4，6-三氟苯基)草酸酯等；具有紫外區(qū)吸收的物質(zhì)如苯酚、萘酚、蒽、或其衍生物；具有自旋標記劑性質(zhì)的物質(zhì)，例如含有羥基的物質(zhì)如4-氨基-2，2,6，6-四甲基哌啶-1-羥基、3-氨基-2,2,5,5-四甲基吡咯垸-l-羥基、和2，6-二叔丁基-ot-(3，5-二叔丁基-4-氧代-2,5-環(huán)己-1-亞基)-p-甲苯基羥基等?？梢愿鶕?jù)與上述用標記物標記性CFS的方法相似的方法，或WO2002/082083中描述的常用方法來用標記物對CFS進行標記。(3)標記性反應(yīng)改良CFS此外，在本發(fā)明中，作為CFS，可以使用用標記物標記的、可與分析物或其類似物形成復(fù)合物、并能改變分析物的電泳遷移率的物質(zhì)(標記性反應(yīng)改良CFS)，也就是說，用標記物標記的反應(yīng)改良CFS。在這一點上，標記物和反應(yīng)改良CFS為如上所述，且可以根據(jù)與上述用標記物標記性CFS的方法相似的方法，或WO2002/082083中描述的常用方法來用標記物對反應(yīng)改良CFS進行標記。(4)CFSs的組合如上所述，在本發(fā)明中，比如使用下列的各種CFS。在這一點上，其自然可以適當(dāng)?shù)亟M合使用。(a)未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS(b)標記性CFS(c)反應(yīng)改良CFS(d)標記性反應(yīng)改良CFS(e)未與標記物和反應(yīng)改良物和反應(yīng)改良CFS結(jié)合的CFS(f)標記性CFS和反應(yīng)改良CFS(g)未與標記物，和反應(yīng)改良物，和標記性反應(yīng)改良CFS結(jié)合的CFS(5)含有CFS的溶液作為本發(fā)明的含有CFS的溶液，如上所述，只要不抑制在分析物或其類似物和所述CFS間形成復(fù)合物，任何溶液均可使用。這樣的溶液包括，例如，水、緩沖液等。作為這樣的緩沖液，只要其通常在pH511范圍內(nèi)具有緩沖作用而且不會抑制所述復(fù)合物形成反應(yīng)的形成，任何緩沖液均可使用。緩沖液的實例為本領(lǐng)域常用的那些，例如Tris緩沖液、Good's緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、TBS緩沖液、磷酸緩沖液、硼酸緩沖液等。緩沖液的使用濃度通常為1mM2M，優(yōu)選10mM1M，且pH通常為511，優(yōu)選510，更優(yōu)選5.58.5，進一步優(yōu)選68，且特別優(yōu)選為7左右。如上所述，溶液中含有的CFS濃度，也就是說CFS的用量由于取決于所用CFS的種類而不能簡單的說明，但通常優(yōu)選CFS在反應(yīng)溶液(含有分析物或其類似物和CFS的溶液)中的濃度為不低于(優(yōu)選不低于2倍，更優(yōu)選不低于5倍)CFS可與對應(yīng)測量限度的所有分析物或其類似物結(jié)合的濃度。另外，對濃度上限不作限制，但是，考慮到經(jīng)濟效益，通常為不高于1012倍(優(yōu)選不高于109倍，更優(yōu)選不高于106倍)的CFS可與對應(yīng)測量限度的所有分析物或其類似物結(jié)合的濃度。更具體地說，CFS可以包含在如上所述的溶液中，因此CFS在含有分析物或其類似物和CFS的溶液中的濃度下限通常不低于10pM，優(yōu)選不低于1nM，且更優(yōu)選不低于100nM，且上限通常不高于10^M，優(yōu)選不高于1且更優(yōu)選不高于500nM。1-6.形成復(fù)合物的具體方法下面具體地說明進行形成本發(fā)明復(fù)合物的方法的模式。(a)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS的情況。(1)(a)將含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管中，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有分析物的溶液區(qū)域[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物和CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物與所述CFS電泳接觸，同時富集所述分析物和/或至少一種CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物和CFS之間形成復(fù)合物。在上述的說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述分析物和/或至少一種CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述分析物和/或至少一種CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，分析物和/或至少一種CFS集中到一起，從而使得該部分的分析物濃度和/或至少一禾中CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物的溶液區(qū)域(例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)和含有至少一種CFS的溶液區(qū)域]中的分析物和/或至少一種CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物與所述CFS電泳接觸"是指，與上文含義相似，所述分析物和CFS進行接觸不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(b)使用標記性CFS的情況。(1)(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種標記性CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有分析物的溶液區(qū)域[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種標記性CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物和標記性CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸，同時富集所述分析物和/或至少一種所述標記性CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物和標記性CFS之間形成復(fù)合物。在上述的說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種標記性CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述分析物和/或至少一種標記性CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述分析物和/或至少一種標記性CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，分析物和/或至少一種標記性CFS集中到一起，從而使得該部分的分析物濃度和/或至少一種標記性CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物的溶液區(qū)域(例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)和含有至少--種標記性CFS的溶液區(qū)域]中的分析物和/或至少一種標記性CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸"是指，與上文含義相似，所述分析物和標記性CFS進行接觸不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(c)使用反應(yīng)改良CFS的情況。(1)(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有分析物的溶液區(qū)域[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸，同時富集所述分析物和/或至少一種所述反應(yīng)改良CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物。50在上述的說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述分析物和/或至少一種反應(yīng)改良CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述分析物和/或至少一種反應(yīng)改良CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，分析物和/或至少一種反應(yīng)改良CFS集中到一起，從而使得該部分的分析物濃度和/或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物的溶液區(qū)域(例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域]中的分析物和/或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物與所述反應(yīng)改良物質(zhì)電泳接觸"是指，與上文含義相似，所述分析物和反應(yīng)改良CFS進行接觸不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(d)使用標記性反應(yīng)改良CFS的情況。(l)(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有分析物的溶液區(qū)域[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物和標記性反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物與所述標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸，同時富集所述分析物和/或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物和標記性反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物。在上述的說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述分析物和/或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述分析物和/或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，分析物和/或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS集中到一起，從而使得該部分的分析物濃度和/或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物的溶液區(qū)域(例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)和含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域]中的分析物和/或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物與所述標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸"是指，與上文含義相似，所述分析物和標記性反應(yīng)改良CFS進行接觸不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(e)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。(l)(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有分析物的溶液區(qū)域[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種CFS的溶液區(qū)域，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物、CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓而讓所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，同時使選自所述分析物、至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物。在上述的說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種CFS的溶液，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而使選自所述分析物、至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，選自所述分析物、至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，選自分析物、至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種會集中到一起，從而使得該部分的分析物濃度，至少一種CFS的濃度或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物的溶液區(qū)域(例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)，含有至少一種CFS的溶液區(qū)域和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域]中的分析物、至少一種CFS或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸"是指，與上文含義相似，所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS進行接觸不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(f)使用標記性CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種標記性CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有分析物的溶液區(qū)域[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少-一種標記性CFS的溶液區(qū)域，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物、標記性CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物與所述標記性CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，同時使選自所述分析物、至少一種標記性CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物，標記性CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物。在上述的說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種標記性CFS的溶液，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而使選自所述分析物、至少一種標記性CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，選自所述分析物、至少一種標記性CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，選自分析物、至少一種標記性CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種會集中到一起，從而使得該部分的分析物濃度，至少一種標記性CFS的濃度或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物的溶液區(qū)域(例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)，含有至少一種標記性CFS的溶液區(qū)域和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域]中的分析物、至少一種標記性CFS或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物與所述標記性CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸"是指，與上文含義相似，所述分析物，標記性CFS和反應(yīng)改良CFS進行接觸不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(g)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS和標記性反應(yīng)改良CFS的情況。(1)(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種CFS的溶液和(c)含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有分析物的溶液區(qū)域[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種CFS的溶液區(qū)域，和含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物、CFS和標記性反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物與所述CFS和標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸，同時使選自所述分析物、至少一種CFS和至少一種標記性反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物，CFS和標記性反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物。在上述的說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有分析物的溶液[例如(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，和含有至少一種CFS的溶液，和含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而使選自所述分析物、至少一種CFS和至少一種標記性反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，選自所述分析物、至少一種CFS和至少一種標記性反應(yīng)改良CFS中的至少一種匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，選自分析物、至少一種CFS和至少一種標記性反應(yīng)改良CFS中的至少一種會集中到一起，從而使得該部分的分析物濃度，至少一種CFS的濃度或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物的溶液區(qū)域(例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)，含有至少一種CFS的溶液區(qū)域和含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域]中的分析物、至少一種CFS或至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物與所述CFS和標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸"是指，與上文含義相似，所述分析物，CFS和標記性反應(yīng)改良CFS進行接觸不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。形成本發(fā)明復(fù)合物的方法也可以用于通常所說的競爭性方法中。進行競爭性方法的過程如下(h)使用標記性類似物和CFS的情況(1)(a)將含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有至少一種CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物與CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物與CFS之間形成復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物和標記性類似物與所述CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述CFS電泳接觸，并且所述標記性類似物與所述CFS電泳接觸)，同時富集所述分析物和標記性類似物和/或至少一種CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物和CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物和CFS之間形成復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有至少一種CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述分析物和標記性類似物，和/或至少一種CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述分析物和標記性類似物和/或至少一種CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，分析物和標記性類似物和/或至少一種CFS會集中到一起，從而使得該部分的分析物和標記性類似物濃度，和/或CFS濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有CFS的溶液區(qū)域]中的分析物和標記性類似物，和/或至少一種CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物和標記性類似物與所述CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述CFS電泳接觸)"是指，與上文含義相似，所述分析物、標記性類似物和CFS進行接觸(也就是說，所述分析物與CFS接觸，標記性類似物與CFS接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(i)使用標記性類似物和反應(yīng)改良CFS的情況(1)(a)將含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物與反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物與反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物和標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸，并且所述標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸)，同時富集所述分析物和標記性類似物和/或至少一種反應(yīng)改良CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述分析物和標記性類似物，和/或至少一種反應(yīng)改良CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述分析物和標記性類似物和/或至少一種反應(yīng)改58良CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，分析物和標記性類似物和/或至少一種反應(yīng)改良CFS會集中到一起，從而使得該部分的分析物和標記性類似物濃度，和/或反應(yīng)改良CFS濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域]中的分析物和標記性類似物，禾口/或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物和標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸)"是指，與上文含義相似，所述分析物、標記性類似物和反應(yīng)改良CFS進行接觸(也就是說，所述分析物與反應(yīng)改良CFS接觸，標記性類似物與反應(yīng)改良CFS接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(J)使用標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)(a)將含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，(b)含有至少一種CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，含有至少一種CFS的溶液區(qū)域和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物和標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，所述標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸)，同時使選自所述分析物和標記性類似物，和至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有至少一種CFS的溶液，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而使選自所述分析物和標記性類似物，至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種富集"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，選自所述分析物和標記性類似物，和至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，選自分析物和標記性類似物，至少一種CFS和至少一種反應(yīng)改良CFS中的至少一種會集中到一起，從而使得該部分的分析物和標記性類似物濃度，至少一種CFS的濃度或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物和標記性類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，含有至少一種CFS的溶液區(qū)域，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域]中的分析物和標記性類似物，至少一種CFS或至少一種反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物和標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸)"是指，與上文含義相似，所述分析物、標記性類似物，CFS和反應(yīng)改良CFS進行接觸(也就是說，所述分析物、CFS和反應(yīng)改良CFS接觸，所述標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(k)使用反應(yīng)改良類似物和標記性CFS的方法。(1)(a)將含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)，禾卩(b)含有至少一種標記性CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有至少一種標記性CFS的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物和標記性CFS之間形成復(fù)合物A，在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間形成復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物和反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸，且所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸)，同時富集所述分析物和反應(yīng)改良類似物和/或至少一種標記性CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物與標記性CFS之間的復(fù)合物A，在所述反應(yīng)改良類似物與標記性CFS之間形成的復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)，和含有至少一種標記性CFS的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述分析物和反應(yīng)改良類似物和/或至少一種標記性CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述分析物和反應(yīng)改良類似物和/或至少一種標記性CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，分析物和反應(yīng)改良類似物和/或至少一種標記性CFS會集中到一起，從而使得該部分的分析物和反應(yīng)改良類似物濃度，和/或至少一種標記性CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物和反應(yīng)改良類似物的溶液區(qū)域(或含有含分析物的樣品、反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)，含有至少一種標記性CFS的溶液]中的分析物和反應(yīng)改良類似物，和/或至少一種標記性CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物和反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸，且所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸)"是指，與上文含義相似，所述分析物、反應(yīng)改良類似物，和標記性CFS進行接觸(也就是說，所述分析物和標記性CFS接觸，所述反應(yīng)改良類似物與標記性CFS接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(1)使用標記性類似物和CFS的情況。(1)(a)將含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液，和(b)含有標記性類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液區(qū)域，和含有標記性類似物的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述標記性類似物和CFS之間形成復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述標記性類似物和CFS電泳接觸(也就是說，所述標記性類似物與所述未參與在所述含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的CFS電泳接觸，同時富集所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述標記性類似物與CFS之間形成復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液，和含有標記性類似物的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓吋，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的CFS會集中到一起，從而使得該部分的標記性類似物濃度和/或未參與復(fù)合物形成的CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液區(qū)域，和含有至少一種標記性類似物的溶液區(qū)域]中的標記性類似物和/或未參與復(fù)合物A形成的CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述標記性類似物和CFS電泳接觸(也就是說，所述標記性類似物與未參與在所述含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物的所述CFS電泳接觸)"是指，與上文含義相似，所述標記性類似物和CFS進行接觸(也就是說，所述標記性類似物與未參與在所述含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物的所述CFS接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。.(m)使用標記性類似物和反應(yīng)改良CFS的情況。(l)(a)將含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，禾口(b)含有標記性類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域，和含有標記性類似物的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述標記性類似物和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述標記性類似物和所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述標記性類似物與未參與在所述含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸，同時富集所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的反應(yīng)改良CFS，而不通過(不取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述標記性類似物與反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，和含有標記性類似物的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的反應(yīng)改良CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的反應(yīng)改良CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，所述標記性類似物和/或所述未參與復(fù)合物A形成的反應(yīng)改良CFS會集中到一起，從而使得該部分的標記性類似物濃度和/或未參與復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液區(qū)域，和含有至少一種標記性類似物的溶液區(qū)域]中的標記性類似物和/或未參與復(fù)合物A形成的反應(yīng)改良CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述標記性類似物和所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述標記性類似物和所述未參與在所述含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的反應(yīng)改良CFS電泳接觸)"是指，與上文含義相似，所述標記性類似物和反應(yīng)改良CFS進行接觸(也就是說，所述標記性類似物和所述未參與在所述含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的反應(yīng)改良CFS接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(n)使用標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)(a)將含有含分析物的樣品和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)的溶液，(b)含有標記性類似物的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時？？，分別形成含有含分析物的樣品和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)的溶液區(qū)域，含有標記性類似物的溶液區(qū)域和含有至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合。(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物和標記性類似物與CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述溶液(a)中的所述分析物和CFS(或反應(yīng)改良CFS)間的復(fù)合物與所述溶液(c)中的所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)電泳接觸，且所述標記性類似物與所述未參與在溶液(a)中與所述分析物和在所述溶液(c)中與所述反應(yīng)改良CFS(CFS)形成所述復(fù)合物的CFS(或反應(yīng)改良CFS)電泳接觸)，同時使選自在所述分析物和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)間形成的復(fù)合物A，標記性類似物，和至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)中的至少一種富集，不取決于分子擴散且不進行物理混合，就在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)的溶液，含有標記性類似物的溶液和含有至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的溶液，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而使選自在所述分析物和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)間的所述復(fù)合物，所述標記性類似物，和至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)中的至少一種富集"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，選自在所述分析物和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)間的所述復(fù)合物，所述標記性類似物，和至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)中的至少一種匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，選自在所述分析物和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)間的復(fù)合物，標記性類似物，和至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的至少一種會集中到一起，從而使得該部分的所述分析物和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)間的復(fù)合物的濃度，標記性類似物濃度或至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的濃度高于設(shè)置在步驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有含分析物的樣品和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)的溶液區(qū)域，和含有標記性類似物的溶液區(qū)域和含有至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的溶液區(qū)域]中的在所述分析物和至少一種CFS(至少一種反應(yīng)改良CFS)間的復(fù)合物，標記性類似物，或至少一種反應(yīng)改良CFS(至少一種CFS)的濃度。在上述步驟(2)中，"所述分析物和標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述溶液(a)中的在所述分析物和CFS(或反應(yīng)改良CFS)間形成的復(fù)合物與所述溶液(c)中的所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)電泳接觸，所述標記性類似物與未參與在所述溶液(a)中與所述分析物和在所述溶液(c)中與所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)形成復(fù)合物的所述CFS(或反應(yīng)改良CFS)電泳接觸)"是指，與上文含義相似，所述分析物，標記性類似物，CFS和反應(yīng)改良CFS進行接觸(也就是說，溶液(a)中的在所述分析物和CFS(或反應(yīng)改良CFS)間的所述復(fù)合物與溶液Cc)中的所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)接觸，且所述標記性類似物、和未參與在溶液(a)中與所述分析物和在所述溶液(c)中與所述反應(yīng)改良CFS(CFS)形成所述復(fù)合物的所述CFS(或反應(yīng)改良CFS)進行接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。(0)使用反應(yīng)改良類似物和標記性CFS的情況。(1)(a)將含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液，和(b)含有反應(yīng)改良類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，從而在對所述毛細管施加電壓時，分別形成含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液區(qū)域，和含有反應(yīng)改良類似物的溶液區(qū)域(從而形成液液界面)，并在所述反應(yīng)改良類似物與標記性CFS之間形成的復(fù)合物B，而不用預(yù)先在毛細管外將這些溶液混合(2)然后，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述反應(yīng)改良類似物與標記性CFS電泳接觸(也就是說，所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸，該標記性CFS未參與在包含含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A))，同時富集所述反應(yīng)改良類似物和/或未參與復(fù)合物A類似物形成的所述標記性CFS，不通過(取決于)分子擴散且不進行物理混合，就在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間形成復(fù)合物B。在上述說明中，"在均勻混合這些溶液之前"指"在將通過步驟(l)排列在毛細管中的含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液的，和含有反應(yīng)改良類似物的溶液的，如果必要還包括液體的各個區(qū)域(液液界面)通過分子擴散而均勻混合之前"。在這一點上，"界面"的含義與上文相同。另外，在上述步驟(2)中，"通過對所述毛細管施加電壓而富集所述反應(yīng)改良類似物和/或未參與復(fù)合物A所述的標記性CFS"是指，與上文相似，在對毛細管施加電壓時，反應(yīng)改良類似物和/或未參與復(fù)合物A形成的標記性CFS匯集成帶狀(楔狀)。換句話說，是指在對毛細管施加電壓時，所述物質(zhì)集中到一起，從而使得該部分的所述物質(zhì)濃度高于設(shè)置在步驟(l)區(qū)域中的物質(zhì)濃度，即指在對毛細管施加電壓時，所述反應(yīng)改良類似物和/或未參與復(fù)合物A形成的標記性CFS會集中到一起，從而使得該部分的反應(yīng)改良類似物和/或未參與復(fù)合物A形成的標記性CFS的濃度高于設(shè)置在歩驟(l)的溶液區(qū)域[例如，含有分析物和至少一種標記性CFS的溶液區(qū)域，和含有反應(yīng)改良類似物的溶液區(qū)域]中的反應(yīng)改良類似物和/或未參與復(fù)合物A形成的標記性CFS的濃度。在上述步驟(2)中，"所述反應(yīng)改良類似物與標記性CFS電泳接觸(也就是說，所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸，所述標記性CFS未參與在包含含分析物和至少一種標記性CFS的所述溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)"是指，與上文含義相似，所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS進行接觸(也就是說，所述反應(yīng)改良類似物和所述標記性CFS進行接觸)，不通過(不取決于)分子擴散，而是利用當(dāng)將含有電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)的溶液設(shè)置在含有電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)的溶液的上游并進行電泳時，溶液中的電泳遷移率高(電泳速度快)的物質(zhì)會追上電泳遷移率低(電泳速度慢)的物質(zhì)這一現(xiàn)象。在上述方法(a)(o)中，在待富集物質(zhì)[例如，分析物、CFS、標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS、標記性類似物、反應(yīng)改良類似物、分析物和CFS間形成的復(fù)合物、分析物和反應(yīng)改良物間形成的復(fù)合物、分析物和標記性CFS間形成的復(fù)合物、標記性類似物和CFS間形成的復(fù)合物和反應(yīng)改良類似物和CFS間形成的復(fù)合物，等]的濃度水平(程度)方面，在對毛細管施加電壓時，在所述物質(zhì)集中部分(帶狀)的物質(zhì)[例如，分析物、CFS、標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS、標記性類似物、反應(yīng)改良類似物、分析物和CFS間形成的復(fù)合物、分析物和反應(yīng)改良物間形成的復(fù)合物、分析物和標記性CFS間形成的復(fù)合物、標記性類似物和CFS間形成的復(fù)合物和反應(yīng)改良類似物和CFS間形成的復(fù)合物等]濃度，與在步驟(l)所設(shè)置的溶液區(qū)域中的物質(zhì)[例如，分析物、CFS、標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS、標記性類似物、反應(yīng)改良類似物、分析物和CFS間形成的復(fù)合物、分析物和反應(yīng)改良物間形成的復(fù)合物、分析物和標記性CFS間形成的復(fù)合物、標記性類似物和CFS間形成的復(fù)合物和反應(yīng)改良類似物和CFS間形成的復(fù)合物等]濃度相比，下限通常不低于1.5倍，優(yōu)選不低于5倍，更優(yōu)選不低于10倍，且進一步優(yōu)選不低于25倍，不特別限定上限，但是通常不高于107倍，優(yōu)選不高于106倍和更優(yōu)選不高于105倍。另外，在上述方法(a)(o)中，"富集同時接觸"，與上文含義相似，包括富集和接觸同時進行的情況，和在富集基本完成之后進行接觸兩種情況，因此包括除在接觸基本完成之后進行富集之外的所有情況。在上述方法(a)(o)中，與前述相似，步驟(2)可以在將通過步驟(1)設(shè)置在毛細管中的溶液在可富集、接觸并形成復(fù)合物的條件下均勻混合之前，通過對所述毛細管施加電壓而進行。在上述方法(a)(o)中，與前述相似，步驟(2)可以在將通過步驟(1)設(shè)置在毛細管中的溶液均勻混合前，在通過對所述毛細管施加電壓而能富集、接觸并形成復(fù)合物的條件下，來對所述毛細管施加電壓而進行。所述條件的具體實例，優(yōu)選實施方案等如上所述，例如，上述步驟(2)可以根據(jù)上述富集方法，適宜的考慮所用分析物、CFS、標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS、標記性類似物、反應(yīng)改良類似物、包括上述2種或多種物質(zhì)的復(fù)合物的電泳遷移率，或包括這些物質(zhì)的溶液的電導(dǎo)率而進行。另外，在步驟(2)中施加的電壓和其它反應(yīng)條件(例如，pH、溫度、時間等)等也可以在上述范圍內(nèi)適宜地確定，考慮分析物、CFS、標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS、標記性類似物、反應(yīng)改良類似物、包括上述2種或多種物質(zhì)的復(fù)合物，包括這些物質(zhì)的溶液等。2.本發(fā)明的分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的分離方法的特征在于，電分離出通過本發(fā)明上述形成復(fù)合物的方法而形成的在分析物或其類似物和至少一種CFS間的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物。也就是說，特征在于，在本發(fā)明步驟(2)的毛細管中利用電泳移動(遷移)，使分析物或其類似物和CFS在溶液中相互接觸，而使在溶液中的分析物或其類似物和CFS間形成的復(fù)合物，與未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物進一步電泳移動(遷移)并且分離。本發(fā)明的分離方法可以根據(jù)已知的方法進行，不同在于，可以在已知通過電移動(遷移)，利用如毛細管分離物質(zhì)的方法中，對在分析物或其類似物和至少一種CFS間形成的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物進行電分離，而且所用材料和試劑也可以是己知方法中所用的。因此，本發(fā)明的分離方法包括下列步驟(1)(3):第(l)步(引入步驟)，將(a)含有分析物或其類似物的溶液和(b)含有至少一種可與所述分析物或所述其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(CFS)的溶液設(shè)置在毛細管中，從而通過對所述毛細管施加電壓就能在所述分析物或所述其類似物和CFS間形成復(fù)合物而不用預(yù)先將這些溶液混合；第(2)步(富集反應(yīng)步驟)，在這些溶液均勻混合之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或所述其類似物與CFS接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物或所述其類似物和CFS之間形成復(fù)合物；和第(3)步(分離步驟)，通過進一步的電移動(遷移)，分離出所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物的類似物。在這一點上，在分析物、類似物(標記性類似物、反應(yīng)改良類似物等)、含有分析物或其類似物的溶液、含有分析物的樣品、CFS(標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS等)、包括這些物質(zhì)的溶液的上述描述，實施方案，具體實施例，優(yōu)選實施例等中，引入步驟[步驟(I)]、富集反應(yīng)歩驟[步驟(2)]如上所述。2-1.分離步驟[步驟(3)]如上所述，在毛細管中，通過進一步的電移動(遷移)將通過本發(fā)明步驟(1)和(2)得到的在分析物或其類似物與CFS間的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物分離。本發(fā)明的分離方法用于分離在分析物或其類似物與CFS間的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物，更具體地說，(l)用于通過進一步的電移動(遷移)，來分離在所述分析物和CFS間形成的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS;或(2)用于通過進一步的電移動(遷移)，來分離在所述類似物和CFS間形成的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的類似物或在所述分析物和未參與所述復(fù)合物形成的CFS間形成的復(fù)合物。例如，在非競爭性方法(例如，后面描述的方法(a)(g)等)中，使用本發(fā)明的分離方法時，且當(dāng)使用包括標記物的CFS(標記性CFS或標記性反應(yīng)改良CFS)時，能分離出至少未參與在分析物和CFS間形成復(fù)合物的含有標記物的CFS(游離的標記物)，和包括分析物的復(fù)合物就足夠了。雖然從所述復(fù)合物分離出不含標記物的CFS不是必須的，但優(yōu)選分離出所述復(fù)合物和所有的未參與復(fù)合物形成的CFS(游離CFS)。另外，例如，當(dāng)本發(fā)明的分離方法用于競爭性方法(例如，后面描述的方法(h)(o)等)時，且當(dāng)使用標記性類似物時，能分離出至少在標記性類似物與(所有)CFS間的(最終)復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的標記性類似物(游離的標記性類似物)就足夠了。分離在分析物和CFS間的復(fù)合物，和在標記性類似物和(所有)CFS間的復(fù)合物不是必需的。另外，當(dāng)使用反應(yīng)改良類似物時，能分離出至少在反應(yīng)改良類似物和標記性CFS間的復(fù)合物，和在分析物和標記性CFS間的復(fù)合物就足夠了。本發(fā)明的步驟(3)可以采用能有效分離出在分析物或其類似物和CFS間的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的方法來進行。作為這樣的方法，可以使用已知的電泳方法和本領(lǐng)域的常用方法。具體而言，可以使用基于各種原理(分離模式)的電泳方法。所述方法的實例為ITP、IF，如上所述；通常所說的毛細管區(qū)帶電泳法(CZE)，根據(jù)其電荷強度以不同速度移動各個物質(zhì)來分離目標物質(zhì)，其中毛細管基本上僅由用于電泳的緩沖液填充，[參考文獻H.Hisamotoatal.,Chem.Commun.,(2001),2662等];通常所說的膠束電動力色譜(MEKC)，利用形成離子膠束的帶電物質(zhì)，通過與所述膠束的相互作用來分離目標物質(zhì)，[參考文獻S.Terabe，TrendsAnal.Chem.，(1989),8，129等];通常所說的毛細管凝膠電泳法(CGE)，通過利用諸如具有分子篩效應(yīng)的聚合物的填料、通過分子電荷和分子尺寸誘導(dǎo)的與聚合物的相互作用來分離目標物質(zhì)[參考文獻S.Hjerten，J.Chromatogr.,(1987)，397，409等]。71在這一點上，在本發(fā)明中，可以使用上述電泳方法中所用的試劑等。另外，可以根據(jù)上述參考文獻等選擇這些試劑、分離操作方法、條件等。作為本發(fā)明步驟(3)中所用的電泳方法，可以使用任何與步驟(2)中的富集方法基于同樣原理(分離模式)的電泳方法，或與步驟(2)中的富集方法基于不同原理(分離模式)的電泳方法。在這一點上，當(dāng)使用與步驟(2)基于同樣原理(分離模式)的電泳方法不足以分離出分析物或其類似物與CFS間的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物時，需要使用與步驟(2)中的富集方法基于不同原理(分離模式)的電泳方法來進行本發(fā)明的步驟(3)。在這種情況下，特別優(yōu)選在步驟(2)中進行ITP、FASS等，然后在步驟(3)中進行CZE等。如上所述，本發(fā)明的分離方法中，包括以下兩種情況(i)使所述分析物或其類似物和CFS接觸，同時富集分析物或其類似物和/或至少一種CFS，以便通過步驟(2)而在分析物或其類似物和CFS間形成復(fù)合物(換句話說，通過對所述毛細管施加電壓，使所述分析物或其類似物和CFS接觸，在此條件下分析物或其類似物和/或至少一種CFS富集，從而在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物)，然后使用相同的分離模式而不改變施加的電壓(換句話說，施加與步驟(2)中相同強度的電壓)，通過進一步的電移動(遷移)而將所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物分離；(ii)或讓所述分析物或其類似物和CFS接觸，同時富集分析物或其類似物和/或至少一種CFS，以便通過步驟(2)在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物(換句話說，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或其類似物和CFS接觸，在此條件下讓分析物或其類似物和/或至少一種CFS富集，而在分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物)，然后使用不同的分離模式和/或施加不同的電壓(換句話說，采用不同于步驟(2)分離模式所用的條件和/或所施加的電壓的強度)，通過進一步的電移動(遷移)而將所述復(fù)合物與未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物分離。至于步驟(3)中所施加的電壓，只要在分析物或其類似物與CFS間的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物能夠充分分離，那就可以使用任何范圍的電壓，且其可適宜地選自本領(lǐng)域常用的范圍。更具體地說，施加電壓以便電場強度在常規(guī)范圍內(nèi)，下限不低于5V/cm，優(yōu)選不低于10V/cm，更優(yōu)選不低于50V/cm，進一步優(yōu)選不低于500V/cm，特別優(yōu)選不低于1000V/cm，上限一般不高于10000V/cm，優(yōu)選不高于5000V/cm，更優(yōu)選不高于2000V/cm。在這一點上，如上所述，步驟(3)中所施加的電壓可以與步驟(2)中相同或不同。另外，其他分離條件(例如，pH、溫度、時間等)可以是任何范圍，只要分析物或其類似物與CFS的復(fù)合物，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物能夠充分分離，且其可適宜地選自本領(lǐng)域常用的已知方法。具體而言，雖然因為分析物或其類似物和CFS的性質(zhì)而不能簡單地說明，但是pH下限通常為不低于2，優(yōu)選不低于4，且更優(yōu)選不低于5，上限不高于13，優(yōu)選不高于11且更優(yōu)選不高于9。溫度的下限通常為不低于0。C，優(yōu)選不低于5。C且更優(yōu)選不低于10°C，上限通常為不高于90。C，優(yōu)選不高于80。C，更優(yōu)選不高于50。C，進而優(yōu)選不高于40。C，且特別優(yōu)選不高于30°C。另外，時間的下限通常為不短于1分鐘，優(yōu)選不短于2分鐘且更優(yōu)選不短于3分鐘，上限不長于20分鐘且更優(yōu)選不長于IO分鐘。如上所述，步驟(3)在毛細管中進行，且這樣的毛細管包括與步驟(2)中所用相同的毛細管，毛細管的材料和內(nèi)徑均如上所述。另外，本發(fā)明的步驟(3)通常在以下狀態(tài)下進行將電泳介質(zhì)例如電泳用緩沖液或所述含填料的電泳用緩沖液裝入毛細管(在上述分離區(qū)中)。在這一點上，電泳介質(zhì)的使用濃度、pH、分子量、粘度、引入毛細管的方法、引入時間等都與上面說明的相同。在這一點上，如上所述，當(dāng)利用基于不同于步驟(2)富集方法的原理(分離模式)的電泳方法來進行本發(fā)明的步驟(3)時，步驟(2)所用的電泳介質(zhì)和歩驟(3)所用的電泳介質(zhì)不要求是相同的，且可以合適地選擇不同的電泳介質(zhì)。在這一點上，本發(fā)明的步驟(2)和(3)通常使用相同的毛細管(在同一毛細管中)。也就是說，本發(fā)明的分離方法所用的毛細管至少有一部分是能進行本發(fā)明的步驟(l)，一部分能進行本發(fā)明的步驟(2)，一部分能進行本發(fā)明的步驟(3)。這些部分可以獨立地存在于毛細管中，或這些部分可以部分地或全部地呈重疊狀態(tài)。換句話說，結(jié)果就是，本發(fā)明分離方法中所用的毛細管是一種能在毛細管中安排(a)含有分析物或其類似物的溶液，和(b)含有至少一種可與所述分析物或其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(CFS)，從而能通過對所述毛細管施加電壓，而在所述分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物，而不用預(yù)先將這些溶液混合，并且能在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，而使所述分析物或其類似物與CFS接觸，同時富集所述分析物或其類似物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物，并能進一步通過電移動(遷移)來分離所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的毛細管。2-2.分離的具體方法下面具體描述進行本發(fā)明分離方法的模式。(a)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(a)的歩驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品，和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(a)的步驟(2)，讓所述分析物與所述CFS電泳接觸而在所述分析物與CFS之間形成復(fù)合物，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的CFS在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(b)使用標記性CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(b)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品，和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種標記性CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(b)的步驟(2)，讓所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸而在所述分析物與標記性CFS之間形成復(fù)合物，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的標記性CFS在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(c)使用反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(c)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(c)的步驟(2)，讓所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸而在所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述反應(yīng)改良CFS在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(d)使用標記性反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(d)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(d)的步驟(2)，讓所述分析物與所述標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸而在所述分析物與標記性反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，和。)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性反應(yīng)改良CFS在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(e)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS、和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(e)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種CFS的溶液，和(C)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(e)的步驟(2)，讓所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸而在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和所述未參與所述復(fù)合物形成的CFS和任選地未參與所述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(f)使用標記性CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(f)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種標記性CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(f)的步驟(2)，讓所述分析物與所述標記性CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸而在所述分析物，標記性CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性CFS和任選地未參與所述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(g)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS，和標記性反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(g)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種CFS的溶液，和(c)含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(g)的步驟(2)，讓所述分析物與所述CFS和標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸而在所述分析物，CFS和標記性反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物，和(3)通過進一歩的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性反應(yīng)改良CFS和任選地未參與所述復(fù)合物形成的CFS在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。本發(fā)明的分離方法也可以用在通常所說的競爭性方法中。在競爭性方法中進行如下的歩驟(h)使用標記性類似物和CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(h)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(h)的步驟(2)，讓所述分析物和標記性類似物與所述CFS電泳接觸(也就是說，讓所述分析物與所述CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述CFS電泳接觸)而在所述分析物與CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物和CFS之間形成復(fù)合物B，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(i)使用標記性類似物和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(i)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(i)的步驟(2)，讓所述分析物和標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，讓所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸)而在所述分析物與反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(j)使用標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。77(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(j)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，(b)含有至少一種CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(j)的步驟(2)，讓所述分析物和標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，讓所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸)而在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物A，在所述標記性類似物，CFS和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(k)使用反應(yīng)改良類似物和標記性CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(k)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種標記性CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(k)的步驟(2)，讓所述分析物和反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸(也就是說，讓所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸，且所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸)而在所述分析物與標記性CFS之間形成復(fù)合物A，在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間形成復(fù)合物B，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物B和所述復(fù)合物A在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(1)使用標記性類似物和CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(l)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液，和(b)含有標記性類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(1)的步驟(2)，讓所述標記性類似物與CFS電泳接觸(也就是說，讓所述標記性類似物與在含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液中未參與與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的所述CFS電泳接觸)而在所述標記性類似物和CFS之間形成復(fù)合物B，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(m)使用標記性類似物和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(m)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，和(b)含有標記性類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(m)的步驟(2)，讓所述標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，讓所述標記性類似物與在含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液中未參與與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸)而在所述標記性類似物和反應(yīng)改良CFS之間形成復(fù)合物B，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(n)使用標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(n)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)的溶液，(b)含有標記性類似物的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(n)的步驟(2)，讓所述分析物和所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，讓所述溶液(a)中的在所述分析物和CFS(或反應(yīng)改良CFS)之間的復(fù)合物，與在所述溶液(c)中的所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)電泳接觸，且所述標記性類似物與未參與在所述溶液(a)中與所述分析物形成所述復(fù)合物的所述CFS(或反應(yīng)改良CFS)和所述溶液(c)中的所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)電泳接觸)，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。(0)使用反應(yīng)改良類似物和標記性CFS的情況。(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(o)的步驟(l)，將(a)含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液，和(b)含有反應(yīng)改良類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(o)的步驟(2)，讓所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸(也就是說，讓所述反應(yīng)改良類似物與未參與在含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的所述標記性CFS電泳接觸)而在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間形成復(fù)合物B，和(3)通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物B和所述復(fù)合物A在毛細管的分離區(qū)域內(nèi)分離。3.本發(fā)明的測量方法通過測量在分析物或其類似物與CFS間的復(fù)合物的量，和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的量，這些都是通過本發(fā)明的分離方法分離出來的，利用對應(yīng)如復(fù)合物中的標記物，或在未參與復(fù)合物形成的CFS或其類似物中的標記物的性質(zhì)的方法，可以簡單地、高靈敏度地在短時間內(nèi)測得樣品中的分析物的量。因此，測量本發(fā)明特征的方法包括第(l)步(引入步驟)，將(a)含有分析物或其類似物的溶液，和(b)含有至少一種可與所述分析物或所述其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(CFS)的溶液置于毛細管中，以便通過對所述毛細管施加電壓，就在所述分析物或所述其類似物和CFS間形成復(fù)合物而不用預(yù)先將這些溶液混合；第(2)步(富集反應(yīng)步驟)，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，將所述分析物或其類似物與CFS接觸，同時富集所述分析物或其類似物和/或至少一種CFS,從而在所述分析物或其類似物和CFS之間形成復(fù)合物；第(3)步(分離步驟)，通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物分離；和第(4)步(測量步驟)，測量分離的復(fù)合物的量，或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的量，以便基于這個結(jié)果測出分析物的量。在這一點上，在上述說明中，分析物、類似物(標記性類似物、反應(yīng)改良類似物等)、含有分析物或其類似物的溶液、含有分析物的樣品、CFS(標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS等)、包括這些的溶液、引入步驟[步驟(l)]、富集反應(yīng)步驟[步驟(2)]、分離步驟[步驟(3)]的實施方式、具體實例、優(yōu)選實例等如上所述。本發(fā)明的測量方法可以用于測量在分析物或其類似物和CFS間的復(fù)合物的量，或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的量，這些物質(zhì)通過上述本發(fā)明的步驟(3)分離，可以用于基于這些結(jié)果來確定分析物的量，更具體地說，(1)用于測量通過本發(fā)明的步驟(3)分離的在分析物和CFS間的復(fù)合物的量，或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量，并用于基于這些結(jié)果來確定分析物的量；或(2)用于測量分離的在類似物和CFS間的復(fù)合物的量，或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的量，或在分析物和CFS間的復(fù)合物的量，并用于基于這些結(jié)果來確定分析物的本發(fā)明的測量方法適合任何非競爭性方法或競爭性方法。也就是說，當(dāng)采用非競爭性方法進行本發(fā)明的測量方法時，例如，其可以按照如下步驟進行(l)通過本發(fā)明的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種CFS的溶液(CFS、標記性CFS、反應(yīng)改良CFS、標記性反應(yīng)改良CFS及其組合)置于毛細管中，以便通過對所述毛細管施加電壓，而在所述分析物和CFS之間形成復(fù)合物[(分析物-CFS)復(fù)合物、(分析物-標記性CFS)復(fù)合物、(分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(分析物-標記性反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(標記性CFS-分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-分析物-標記性反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物及其組合等]，而不用預(yù)先將這些溶液混合；(2)通過本發(fā)明的步驟(2)，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物與所述CFS接觸，同時富集所述分析物和/或至少一種CFS，從而在所述分析物和CFS間形成復(fù)合物；(3)通過本發(fā)明的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)，使所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的CFS分離；和(4)測量分離的復(fù)合物的量，或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量，以便基于這個結(jié)果來測定分析物的量。另外，當(dāng)采用競爭性方法進行本發(fā)明的測量方法時，例如，其可以按照如下步驟進行(1)通過本發(fā)明的步驟(l)，將(i)(a)含有分析物的樣品(或含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)，(b)含有用標記物標記的標記性類似物的溶液(或含有標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和(c)含有至少一種CFS(CFS、反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液，或(ii)(a)含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品，標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，和(b)含有至少一種CFS的溶液(CFS、反應(yīng)改良CFS及其組合)，或(iii)(a)含有含分析物的樣品和至少一種CFS(CFS、反應(yīng)改良CFS及其組合)的溶液，和(b)含有標記性類似物的溶液(或含有標記性類似物和至少一種CFS的溶液)置于毛細管中，以便通過對所述毛細管施加電壓，從而形成在所述標記性類似物和CFS之間的復(fù)合物B[(標記性類似物-CFS)復(fù)合物、(標記性類似物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-標記性類似物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、及其組合，等]，或形成在所述分析物和CFS之間的復(fù)合物A[(分析物-CFS)復(fù)合物、(分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、及其組合，等]和所述復(fù)合物B，而不用預(yù)先將這些溶液混合；(2)通過本發(fā)明的步驟(2)，在均勻混合這些溶液之前，讓(i)所述標記性類似物與所述CFS接觸[也就是說，所述標記性類似物與未參與含所述分析物的復(fù)合物(復(fù)合物A)形成的CFS接觸]或(ii)所述分析物和標記性類似物與所述CFS接觸(也就是說，所述分析物與所述CFS接觸且所述標記性類似物與所述CFS接觸)，同時富集所述分析物、所述標記性類似物和至少一種CFS中的至少一種，從而形成在所述標記性類似物和CFS之間的復(fù)合物B，或形成在所述分析物和CFS之間的復(fù)合物A和復(fù)合物B;(3)通過本發(fā)明的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)來分離所述復(fù)合物B，和未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物；和(4)測量分離的復(fù)合物B的量、或未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物的量，以便基于這個結(jié)果來確定樣品中的分析物的量。另外，當(dāng)本發(fā)明的測量方法采用競爭性方法進行時，例如，其可以按照如下步驟進行(1)通過本發(fā)明的步驟(l)，將(i)(a)含有分析物的樣品(或含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液)，(b)含有與反應(yīng)改良物結(jié)合的類似物(反應(yīng)改良類似物)的溶液(或含有反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)，和(c)含有至少一種CFS(CFS、標記性CFS及其組合)的溶液，或(ii)(a)含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(或含有含分析物的樣品，反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)，禾口(b)含有至少一種CFS的溶液(CFS、標記性CFS及其組合)，或(iii)(a)含有分析物的樣品和至少二種CFS(CFS、標記性CFS及其組合)的溶液，和(b)含有反應(yīng)改良類似物的溶液(或含有反應(yīng)改良類似物鄰至少一種CFS的溶液)，置于毛細管中，以便通過對所述毛細管施加電壓，而形成在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間的復(fù)合物B，或形成在所述分析物和標記性CFS之間的復(fù)合物A和所述復(fù)合物B，而不用預(yù)先將這些溶液混合；(2)通過本發(fā)明的步驟(2)，在均勻混合這些溶液之前，讓(i)所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS接觸[也就是說，所述反應(yīng)改良類似物與未參與含所述分析物的復(fù)合物(復(fù)合物A)形成的標記性CFS接觸]或(ii)所述分析物和反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS接觸(也就是說，所述分析物與所述標記性CFS接觸且所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS接觸)，同時富集所述分析物、所述反應(yīng)改良類似物和至少一種標記性CFS中的至少一種，以便形成在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間的復(fù)合物B，或形成在所述分析物和標記性CFS之間的復(fù)合物A和復(fù)合物B;(3)通過本發(fā)明的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)來分離所述復(fù)合物B和復(fù)合物A;和8(4)測量分離的復(fù)合物B的量、或分離的復(fù)合物A的量，以便基于這個結(jié)果來確定樣品中的分析物的量。在這一點上，類似物(標記性類似物或反應(yīng)改良類似物)是通過(i)與樣品中的分析物(也就是說，含有分析物的樣品)共存，以含有標記性類似物或反應(yīng)改良類似物和分析物的溶液(含有分析物和類似物的溶液)形式而使用的；或(2)不與樣品中的分析物(也就是說，含有分析物的樣品)共存而獨立于含有分析物的溶液，以含有類似物的溶液形式使用。3-1.測量步驟[步驟(4)]在本發(fā)明的步驟(4)中，復(fù)合物的量或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的量，它們是分離的，可以比如利用在所述復(fù)合物中的標記物，或在未參與所述復(fù)合物形成的CFS中的標記物，或在未參與所述復(fù)合物形成的類似物中的標記物的性質(zhì)的所對應(yīng)的方法，并且基于所述標記物的測量結(jié)果來進行測量。也就是說，在非競爭性方法中，在分析物和CFS間的復(fù)合物的量，或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量，它們是分離的，可以比如利用在所述復(fù)合物中的標記物，或在未參與所述復(fù)合物形成的CFS中的標記物的性質(zhì)所對應(yīng)的方法，并且基于所述標記物的測量結(jié)果來進行測定。在競爭性方法中，復(fù)合物B的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物的量(或復(fù)合物B的量或復(fù)合物A的量)，它們是分離的，可以利用在所述復(fù)合物B中的標記物，或在未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物(或在復(fù)合物A中的標記物)的性質(zhì)所對應(yīng)的方法，并且基于所述標記物的測量結(jié)果來進行測定。標記物的測量可以按照對應(yīng)標記物種類的具體方法來進行。例如，當(dāng)所述性質(zhì)是酶活性時，標記物的測量可以按照一般的方法進行，例如EIA或雜交去[例如，在"Enzymeimmunoassaymethod,protein,nucleicacid,enzyme,separatevol"No.31,由T.Kitagawa，T.Nannbara，A.Tuji編著,51-63,KYORITSUSHUPPANCo"Ltd'.，1987年9月10日，中描述的方法等];當(dāng)所述性質(zhì)為放射性時，標記物的測量可以通過采用合適的測量設(shè)備，如浸液型GM計數(shù)器，液閃計數(shù)器和孔型閃爍計數(shù)器，根據(jù)所述放射性物質(zhì)發(fā)射的輻射強度，按照常規(guī)方法如RIA或雜交方法來迸行[如MedicalChemistryExperimentalCourse,vol,8,U.Yamamura編著,1stEd.，NakayamaBookstore,1971年出版；BiochemistryExperimentalCourse2,ATracerExperimentMethod(part2),A.Takemura,H,Honjo，501-525，TOKYOKAGAKUDQJINCo.,Ltd.出版，1977年2月25日];當(dāng)所述性質(zhì)為熒光性時，標記物的測量可以按照常規(guī)方法(例如FIA或雜交法)使用測量設(shè)備(例如熒光分光計或激光共焦距掃描電鏡)來進行[如"IllustrationExplanation,FluorescentAntibody,A.Kawao，1stEd，SoftscienceCo.，Ltd.,出版，1983";"MedicalChemistryExperimentalCourse,vol.2,ChemistryofnucleicacidIII，M.Saneyoshi,299-318,TOKYOKAGAKUDOJINCo.,Ltd.出版，1977年12月5日"中描述的方法];當(dāng)所述性質(zhì)為發(fā)光性時，標記物的測量可以按照常規(guī)方法使用測量設(shè)備如光子計數(shù)器來進行[例如，在Enzymeimmunoassaymethod,protein,nucleicacid,enzyme,separatevol"No.31，T.Kitagawa,T.Nannbara,A.Tuji編著，252-263，KYORITSUSHUPPANCo.,Ltd'.,1987年9月10日中描述的方法];進而當(dāng)所述性質(zhì)為UV吸收性時，標記物的測量可以按照常規(guī)方法使用測量設(shè)備如分光計來進行；當(dāng)所述性質(zhì)是顏色現(xiàn)象(colorphenomenon)時，標記物的測量可以按照常規(guī)方法使用測量設(shè)備如分光計或顯微鏡來進行；當(dāng)所述性質(zhì)為自旋時，標記物的測量可以按照常規(guī)方法使用電子自旋共振設(shè)備來進行[例如，在Enzymeimmunoassaymethod,protein,nucleicacid,enzyme,separatevol.,No.31，T.Kitagawa,T.Nannbara，A.Tuji編著，264-271,KYORITSUSHUPPANCo.,Ltd'.,1987年9月10日中描述的方法等]。另外，基于測量到的復(fù)合物的量或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的量，也就是說在復(fù)合物中的標記物的量或在未參與所述復(fù)合物形成的CFS中的標記物的量或在未參與所述復(fù)合物形成的類似物中的標記物的量，來確定存在于樣品中的分析物的量可以按照如下步驟進行在競爭性方法中，基于測量到的復(fù)合物的量或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量，也就是說上述獲得的在復(fù)合物中的標記物的量、或在未參與所述復(fù)合物形成的CFS中的標記物的量，存在于樣品中的分析物的量的可以通過繪制出顯示分析物的量與在復(fù)合物中的標記物的量或在未參與所述復(fù)合物形成的CFS中的標記物的量之間關(guān)系的校準曲線，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品相似的方法而測量得到，并通過將由測量含分析物的樣品而得到的標記物的量應(yīng)用到所述校準曲線來確定。另外，在非競爭性方法中，基于復(fù)合物B的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物的量(或復(fù)合物B的量或復(fù)合物A的量)，也就是說上述獲得的在復(fù)合物B中的標記物的量或在未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量(或在復(fù)合物A中的標記物的量)，在樣品中的分析物的量可以通過繪制出顯示分析物的量，與在復(fù)合物B中的標記物的量或在未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量(或在復(fù)合物A中的標記物的量)之間關(guān)系的校準曲線，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品相似的方法而測量得到，并通過將由測量含分析物的樣品而得到的標記物的量應(yīng)用到所述校準曲線來確定。另外，通過向樣品中加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并通過將加入作為內(nèi)參的所述物質(zhì)的量，與未參與所述復(fù)合物形成的復(fù)合物的量，或CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的量[也就是說，在復(fù)合物中的標記物的量、或在未參與所述復(fù)合物形成的CFS中的標記物的量、或在復(fù)合物B中的標記物的量、或在未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量(或在復(fù)合物B中的標記物的量或在復(fù)合物A中的標記物的量)]進行比較，可以計算出樣品中的分析物的相對量。另外，這樣的計算可以在電泳設(shè)備中校正誤差。而且，通過利用內(nèi)參峰的遷移還可以校正目標峰的遷移。所述可測物質(zhì)(內(nèi)參)包括例如，用上述標記物標記的肽、蛋白、核酸(DNA，RNA)、氨基酸、糖、糖鏈等；和熒光物質(zhì)等。另外，在本發(fā)明中，當(dāng)酶用作標記物等時，所述酶的底物或其他耦合酶可以要求測量所述酶的活性。此時，例如，可以將這些底物或其他耦合酶置于毛細管中含有復(fù)合物或未參與所述復(fù)合物形成的CFS或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的溶液[也就是說，在分析物和CFS或未參與所述復(fù)合物形成的CFS間的復(fù)合物，或復(fù)合物B或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物B(或復(fù)合物B或復(fù)合物A)]的下游側(cè)，并且至少在進行本發(fā)明的步驟(4)之前，通過本發(fā)明的步驟(3)來進行分離。優(yōu)選在本發(fā)明的步驟(1)中，將含有這些底物或其他耦合酶的溶液置于含有分析物或其類似物的溶液(區(qū)域)和含有至少一種CFS的溶液(區(qū)域)中最下游側(cè)的溶液(區(qū)域)的進一步的下游側(cè)，進而進行本發(fā)明的步驟(1)(4)。另外，當(dāng)嵌入劑染料用作標記物時，在本發(fā)明的步驟(l)中，不需要將所述嵌入劑染料引入并置于包含含有分析物或其類似物的溶液、和含有至少一種CFS的溶液的毛細管中。而且，在本發(fā)明的步驟(2)中，不需要將所述嵌入劑染料與分析物或其類似物和CFS接觸。只需要是至少本發(fā)明的步驟(3)是在存在所述嵌入劑染料的條件下進行的。在這種情況下，具體而言，可以將所述嵌入劑染料包含在本發(fā)明的步驟(3)所用的電泳介質(zhì)和/或緩沖液中。在其它情況下，在本發(fā)明中，優(yōu)選本發(fā)明的步驟(2)和步驟(3)都是在存在所述嵌入劑染料的條件下進行的。在此情況下，所述嵌入劑染料可以包含在本發(fā)明的步驟(2)和步驟(3)所用的電泳介質(zhì)和/或緩沖液中。3-2.使用帶電聚合物在本發(fā)明中，優(yōu)選步驟(2)是在存在帶電聚合物的條件下進行的。也就是說，(i)在存在帶電聚合物的條件下，通過使分析物或其類似物和CFS接觸，而形成在所述分析物或其類似物和CFS之間的復(fù)合物，或(ii)在存在帶電聚合物的條件下，通過使分析物、類似物(標記性類似物)和CFS接觸，而形成在所述分析物和CFS之間的復(fù)合物A，和在所述標記性類似物和CFS之間的復(fù)合物B;或(iii)在存在帶電聚合物的條件下，通過使分析物、反應(yīng)改良類似物和標記性CFS接觸，而形成在所述分析物和標記性CFS之間的復(fù)合物A和在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間的復(fù)合物B，從而減少了樣品中(尤其是血清樣品中)不利于分析的共存物質(zhì)的影響。具體而言，例如，(i)在存在帶電聚合物的條件下，通過使分析物和CFS接觸，而形成在所述分析物和CFS之間的復(fù)合物[(分析物-CFS)復(fù)合物、(分析物-標記性CFS)復(fù)合物、(分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(分析物-標記性反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(標記性CFS-分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-分析物-標記性反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物，及其組合等]，或(ii)在存在帶電聚合物的條件下，通過使分析物、標記性類似物和CFS接觸(也就是說，使所述分析物與CFS接觸，所述標記性類似物和CFS接觸)，而形成在所述分析物和所述CFS之間的復(fù)合物A[(分析物-CFS)復(fù)合物、(分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-分析物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、及其組合等]，和在所述標記性類似物和CFS之間的復(fù)合物B[(標記性類似物-CFS)復(fù)合物、(標記性類似物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、(CFS-標記性類似物-反應(yīng)改良CFS)復(fù)合物、及其組合等];或(iii)在存在帶電聚合物的條件下，通過使分析物、反應(yīng)改良類似物和標記性CFS接觸(也就是說，使所述分析物與標記性CFS接觸、所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS接觸)，而形成在所述分析物和標記性CFS之間的復(fù)合物A和在所述反應(yīng)改良類似物和所述標記性CFS之間的復(fù)合物B。作為本發(fā)明中所用的帶電聚合物，使用與樣品中共存物質(zhì)電荷相反(正或負)的物質(zhì)。另外，優(yōu)選與所用CFS具有相同電荷的帶電聚合物。作為所述的帶電聚合物，包括聚陰離子聚合物和聚陽離子聚合物。聚陰離子聚合物包括，多糖例如肝素，硫酸肝素，硫酸軟骨素，硫酸葡聚糖，聚鎢酸，鎢磷酸，透明質(zhì)酸，硫酸皮膚素和硫酸聚茴香腦(polyanetholesulfate)等；多核苷酸例如DNA(質(zhì)粒DNA、小牛胸腺DNA、鮭魚精DNA、結(jié)合纖維素的DNA和合成DNA等)和RNA等；多肽例如聚氨基酸(聚天門冬胺酸、聚谷氨酸等)、合成多肽等；合成聚合物例如聚-dldC、聚乙烯硫酸酯、聚丙烯酸等；陶瓷例如玻璃粒、膠體玻璃(colloidalglass)、玻璃乳(glassmilk)等；及其復(fù)合物等。另外，聚陽離子聚合物包括多糖例如殼聚糖、其衍生物等；多肽例如多熔素、聚組氨酸、聚精氨酸、魚精蛋白、組蛋白、鳥氨酸等；合成聚合物例如聚烯丙基胺、聚乙烯亞胺、聚乙烯胺等；多胺例如精胺、亞精胺等；陽離子脂肪、陶瓷、其復(fù)合物等。其中，優(yōu)選陰離子多糖，且特別優(yōu)選硫酸肝素。上述帶電聚合物可以單獨使用或兩種或多種組合使用。對于能獲得存在于進行步驟(2)時的上述帶電聚合物的方法沒有特別的限制，只要最終可以在存在帶電聚合物的條件下形成復(fù)合物即可。這樣的方法包括，例如，如上所述的能獲得共存于電泳介質(zhì)的帶電聚合物填到毛細管內(nèi)的方法；能獲得共存于含有分析物或其類似物的溶液，和/或含有CFS的溶液中的帶電聚合物的方法；等。其中，帶電聚合物優(yōu)選共存于除了含有分析物的溶液(區(qū)域)以外的溶液(區(qū)域)中，更優(yōu)選在置于與含有分析物的溶液(區(qū)域)相鄰的上游側(cè)或下游狽lj的至少一種溶液(區(qū)域)中。由于取決于所用的帶電聚合物的種類，因此上述帶電聚合物的用量不能簡單地說明，但是，例如，在要填入通道的電泳介質(zhì)中的濃度的下限通常不低于0.01%(w/v)，優(yōu)選不低于0.05%(w/v)，且更優(yōu)選不低于0.5%(w/v)，上限通常不高于50%(w/v)，優(yōu)選不高于10%(w/v)，且進一步優(yōu)選不高于5。/。(w/v)，在其他溶液中特別優(yōu)選約l%(w/v)。另外，在含有分析物或其類似物的溶液中或在含有CFS的溶液中的濃度的下限通常不低于0.001%(w/v)，優(yōu)選不低于0.01%(w/v)，更優(yōu)選不低于0.02%(w/v)，且進一步優(yōu)選不低于0.025%(w/v)，上限通常不高于10%(w/v)，優(yōu)選不高于5%(w/v)，更優(yōu)選不高于l%(w/v)，且進一步優(yōu)選不高于0.05%(w/v)。3-3.測量的具體方法下面具體說明本發(fā)明測量方法的模式。(1)非競爭性方法下面是非競爭性方法情況下使用的測量方法(a)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(a)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(a)的步驟(2)，讓所述分析物與所述CFS電泳接觸，而形成在所述分析物和CFS間的復(fù)合物，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(a)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)來分離所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述CFS，和(4)通過對應(yīng)CFS性質(zhì)(種類)的方法來測量分離的復(fù)合物中的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與CFS的量之間關(guān)系的校準曲線上而計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有分析物的溶液和含有CFS的溶液中的至少一種，加入己知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用上述含有內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。利用對應(yīng)CFS性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較而計算出樣品中的分析物的量。(b)使用標記性CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(b)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，禾n(b)含有至少一種標記性CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(b)的步驟(2)，讓所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸，而形成在所述分析物和標記性CFS間的復(fù)合物，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(b)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性CFS，禾卩(4)通過對應(yīng)標記性物質(zhì)的性質(zhì)(種類)的方法來測量分離的復(fù)合物中的標記物的量或包含在未參與所述復(fù)合物形成的標記性CFS中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上而計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有己知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。[方法B]:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有分析物的溶液和含有標記性CFS的溶液中的至少一種，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。利用對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的標記物的量或在未參與所述復(fù)合物形成的標記性CFS中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較而計算出樣品中的分析物的量。(c)使用反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(c)的步驟(l)，將(a)含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"1-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(c)的步驟(2)，讓所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸，而形成在所述分析物和所述反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(c)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述反應(yīng)改良CFS，和(4)利用對應(yīng)反應(yīng)改良CFS性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的反應(yīng)改良CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與反應(yīng)改良CFS的量之間關(guān)系的校準曲線上，而計算樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有分析物的溶液和含有反應(yīng)改良CFS的溶液中的至少一種，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(l)~(3)。利用對應(yīng)反應(yīng)改良CFS性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的反應(yīng)改良CFS的量或未參與所91述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較而計算出樣品中的分析物的量。(d)使用標記性反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(d)的步驟(l)，(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]和(b)含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(d)的步驟(2)，讓所述分析物與所述標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸，而形成在所述分析物和標記性反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(d)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性反應(yīng)改良CFS，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物形成的標記性反應(yīng)改良CFS中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有分析物的溶液和含有標記性反應(yīng)改良CFS的溶液中的至少一種，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物形成的標記性反應(yīng)改良CFS中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較而計算出樣品中的分析物的量。(e)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS，和反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B〗。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(e)的步驟(l)，(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(e)的步驟(2)，讓所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，而形成在所述分析物，CFS和反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(e)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述CFS和任選的未參與所述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS，和(4)通過對應(yīng)CFS或反應(yīng)改良CFS的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的CFS的量或分離的復(fù)合物中的反應(yīng)改良CFS的量，或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與CFS的量或反應(yīng)改良CFS的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有己知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有分析物的溶液，含有CFS的溶液和含有反應(yīng)改良CFS的溶液中的至少一種，加入己知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(l)(3)。通過對應(yīng)CFS或反應(yīng)改良CFS性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的CFS的量或分離的復(fù)合物中的反應(yīng)改良CFS的量，或未參與所述復(fù)合物形成的CFS的量或未參與所述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(f)使用標記性CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(f)的步驟(l)，(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種標記性CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(f)的步驟(2)，讓所述分析物與所述標記性CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，而形成在所述分析物，標記性CFS和反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(f)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性CFS和任選地未參與所述復(fù)合物形成的反應(yīng)改良CFS，和(4)通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物形成的標記性CFS中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，而計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有分析物的溶液，含有標記性CFS的溶液和含有反應(yīng)改良CFS的溶液中的至少一種，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物形成的標記性CFS中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(g)使用未與標記物和反應(yīng)改良物結(jié)合的CFS，和標記性反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(g)的步驟(l)，(a)將含有分析物的溶液[例如，(i)含有分析物的樣品，(ii)含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液]，(b)含有至少一種CFS的溶液和(c)含有至少一種標記性反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(g)的步驟(2)，讓所述分析物與所述CFS和標記性反應(yīng)改良CFS電泳接觸，而形成在所述分析物，CFS和標記性反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(g)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性反應(yīng)改良CFS和任選地未參與所述復(fù)合物形成的CFS，和(4)通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物形成的標記性反應(yīng)改良CFS中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有分析物的溶液，含有CFS的溶液和含有標記性反應(yīng)改良CFS的溶液中的至少一種，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物形成的標記性反應(yīng)改良CFS中標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(2)競爭性方法下面是競爭性方法情況下的測量方法(h)使用標記性類似物和CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(h)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(h)的步驟(2)，讓所述分析物和標記性類似物與所述CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述CFS電泳接觸)，而形成在所述分析物和CFS間的復(fù)合物A和所述標記性類似物和CFS之間的復(fù)合物B，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(h)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)或含有CFS的溶液，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(i)使用標記性類似物和反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(i)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(i)的步驟(2)，讓所述分析物和標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸)，而形成在所述分析物和反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物A和所述標記性類似物和反應(yīng)改良CFS之間的復(fù)合物B，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(i)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。的步驟(1)中的含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)或含有反應(yīng)改良CFS的溶液，加入己知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。Cj)使用標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(j)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，(b)含有至少一種CFS的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(j)的步驟(2)，讓所述分析物和標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸，且所述標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸)，而形成在所述分析物、CFS和反應(yīng)改良CFS間的復(fù)合物A和在所述標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS之間的復(fù)合物B，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(j)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有含分析物的樣品和標記性類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、標記性類似物和至少一種CFS的溶液)，含有CFS的溶液和含有反應(yīng)改良CFS的溶液中的至少一種，加入d知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(l)~(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(k)使用反應(yīng)改良類似物和標記性CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(k)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)和(b)含有至少一種標記性CFS的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(k)的步驟(2)，讓所述分析物和反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸(也就是說，所述分析物與所述標記性CFS電泳接觸，且所述反應(yīng)改良類似物與所述標記性CFS電泳接觸)，而形成在所述分析物和標記性CFS間的復(fù)合物A和在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間的復(fù)合物B，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(k)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和所述復(fù)合物A，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的章或分離的復(fù)合物A中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法而得到。:向在上述[方法A]的步驟(1)中的含有含分析物的樣品和反應(yīng)改良類似物的溶液(或含有含分析物的樣品、反應(yīng)改良類似物和至少一種CFS的溶液)或含有標記性CFS的溶液，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或分離的復(fù)合物A中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(1)使用標記性類似物和CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(l)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液，和(b)含有標記性類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(1)的步驟(2)，讓所述標記性類似物與所述CFS電泳接觸(也就是說，所述標記性類似物與未參與在所述含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的所述CFS電泳接觸)，而形成在所述標記性類似物和CFS之間的復(fù)合物B，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(1)的步驟(3)，通過進一歩的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法得到。[方法B]:向在上述[方法A]的步驟(1)中的含有含分析物的樣品和至少一種CFS的溶液或含有標記性類似物的溶液，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(m)使用標記性類似物和反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(m)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液，和(b)含有標記性類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(m)的步驟(2)，讓所述標記性類似物與所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，所述標記性類似物與未參與在含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的所述溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的所述反應(yīng)改良CFS電泳接觸)，而形成在所述標記性類似物和反應(yīng)改良CFS之間的復(fù)合物B，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(m)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物形成的所述標記性類似物，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法得到。[方法B]:向在上述[方法A]的步驟(1)中的含有含分析物的樣品和至少一種反應(yīng)改良CFS的溶液或含有標記性類似物的溶液，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，計算出樣品中的分析物的量。(n)使用標記性類似物、CFS和反應(yīng)改良CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A〗:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(n)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)的溶液，(b)含有標記性類似物的溶液和(c)含有至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(n)的步驟(2)，讓所述分析物和標記性類似物與所述CFS和反應(yīng)改良CFS電泳接觸(也就是說，在所述溶液(a)中的在所述分析物與CFS(或反應(yīng)改良CFS)間的復(fù)合物與所述溶液(c)中的所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)電泳接觸，且所述標記性類似物與未參與在所述溶液(a)中與所述分析物形成所述復(fù)合物的所述CFS(或反應(yīng)改良CFS)和在所述溶液(c)中與所述反應(yīng)改良CFS(或CFS)電泳接觸，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(n)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和未參與所述復(fù)合物B形成的所述標記性類似物，和101(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的相似方法得到。[方法B]:向在上述[方法A]的步驟(1)中的選自含有含分析物的樣品和至少一種CFS(或至少一種反應(yīng)改良CFS)的溶液、含有標記性類似物的溶液，和含有至少一種反應(yīng)改良CFS(或至少一種CFS)的溶液中的至少一種，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(l)~(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或未參與所述復(fù)合物B形成的標記性類似物中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。(0)使用反應(yīng)改良類似物和標記性CFS的情況。在此情況下，例如，可以進行下面的[方法A]或[方法B]。[方法A]:(1)按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(o)的步驟(l)，(a)將含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液，和(b)含有反應(yīng)改良類似物的溶液引入并設(shè)置在毛細管內(nèi)，(2)然后，按照"l-6.形成復(fù)合物的具體方法"中的情況(o)的步驟(2)，讓所述反應(yīng)改良類似物與標記性CFS電泳接觸(也就是說，所述反應(yīng)改良類似物與未參與在含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的所述溶液中與所述分析物形成復(fù)合物(復(fù)合物A)的所述標記性CFS電泳接觸)，而形成在所述反應(yīng)改良類似物和標記性CFS之間的復(fù)合物B，(3)按照"2-2.具體的分離方法"中的情況(o)的步驟(3)，通過進一步的電移動(遷移)分離出所述復(fù)合物B和復(fù)合物A，和(4)通過對應(yīng)標記物性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或分離的復(fù)合物A中的標記物的量，并將測量結(jié)果(測量值)應(yīng)用到顯示分析物的量與標記物的量之間關(guān)系的校準曲線上，而計算出樣品中的分析物的量，所述校準曲線通過用與含有已知濃度的分析物的樣品的[方法B]:向在上述[方法A]的步驟(l)中的含有含分析物的樣品和至少一種標記性CFS的溶液或含有反應(yīng)改良類似物的溶液，加入已知濃度的可測物質(zhì)作為內(nèi)參，并使用含有該內(nèi)參的溶液進行上述步驟(1)(3)。通過對應(yīng)標記物的性質(zhì)(種類)的方法，測量出分離的復(fù)合物B中的標記物的量或分離的復(fù)合物A中的標記物的量，通過將測量結(jié)果(測量值)與加入作內(nèi)參的所述物質(zhì)的量相比較，而計算出樣品中的分析物的量。除了使用本發(fā)明的分離方法外，本發(fā)明的測量方法可以按照上述己知方法進行，且待用的試劑也可以按照已知的方法進行合適的選擇。4.本發(fā)明的試劑盒本發(fā)明的試劑盒是用于進行本發(fā)明上述形成復(fù)合物的方法、分離的方法和測量方法的試劑盒。所述試劑盒包括以下物品(1)至少(i)上述CFS、(ii)視需要的類似物，和(iii)在本發(fā)明上述形成復(fù)合物的方法、分離的方法和測量方法中使用的說明書；或(2)(i)電泳裝置，該裝置包括具有至少可以進行本發(fā)明上述步驟(l)的部分和可以進行本發(fā)明上述步驟(2)的部分的毛細管(通道)，優(yōu)選具有可以進行本發(fā)明上述步驟(1)的部分、可以進行本發(fā)明上述步驟(2)的部分和進一步的可以進行本發(fā)明上述步驟(3)的部分的毛細管(通道)，(ii)CFS，(iii)視需要的類似物，和(iv)在本發(fā)明上述形成復(fù)合物的方法、分離的方法和測量方法中使用的說明書。在這一點上，所述"說明書"指所述試劑盒的手冊(說明手冊)、附帶文件(付信)或小冊子(活頁)等，其通過文字或附圖等對本發(fā)明方法的特征、原理、操作規(guī)程等進行了基本地描述。這些組合物元件的優(yōu)選實施方式和具體實例如上所述。而且，本發(fā)明的試劑盒還可以含有除了上述試劑以外的試劑。所述試劑包括但不限于，例如，用于電泳分離的緩沖液、稀釋劑、內(nèi)參、校準劑(標準溶液)、對照、用于測定標記物(例如，酶、染料、發(fā)光物質(zhì)、熒光物質(zhì)等)的試劑(酶底物、耦合酶等)、用于檢測器調(diào)焦的試劑等。下面參考實施例和比較例來更加詳細地解釋本發(fā)明，但是，本發(fā)明并不限于此。實施例實施例1[分析物(抗原)]a-胎蛋白(AFP)(WakoPureChemicalIndustries,Ltd.出品)[反應(yīng)改良CFS(DNA標記性抗體)根據(jù)圖l所示的過程，制備與DNA結(jié)合的抗-AFP抗體Fab'片段。也就是說，先用常規(guī)方法純化在5'端引入了NH2基團的250bpDNA片段。然后，通過常規(guī)方法，讓引入到DNA片段中的NH2基團，和4-(p-馬來酰亞胺苯基)丁酸硫代琥珀酰亞胺(Sulfo-SMPB)連接體(具有琥珀酰亞胺基團和馬來酰亞胺基團的連接體PierceCo.出品)的琥珀酰亞胺基團進行反應(yīng)。然后，通過凝膠過濾處理，除去未反應(yīng)的連接體，得到與連接體結(jié)合的250bpDNA片段。讓所得的與連接體結(jié)合的250bpDNA片段，與預(yù)先用抗-AFP抗體WAl(WakoPureChemicalIndustries,Ltd.出品)按照常規(guī)方法制備的抗-AFP抗體WAlFab'片段進行反應(yīng)。所得的反應(yīng)產(chǎn)物分別利用DEAE柱純化，制備出與250bpDNA片段結(jié)合的抗-AFP抗體WAlFab'片段(250bpDNA標記性抗體)[標記性CFS(熒光標記抗體)]將抗-AFP抗體WA2(WakoPureChemicalIndustries,Ltd.出品)，其識別的AFP的表位與WAl抗體不同，用常規(guī)方法處理得到抗-AFP抗體WA2Fab'片段。用常規(guī)方法將熒光物質(zhì)Alexa647(MolecularProbesInc.出品)引入到所述片段的氨基，而制成Alexa647標記的抗-AFP抗體WA2Fab'片段(熒光標記抗體)。[毛細管芯片]按照"Technologyandapplicationofmicrochemistrychip",T.Kitamori等人，2004年出版(MamzenCo.，Ltd.)描述的方法來生產(chǎn)具有圖2所示設(shè)置的毛細管芯片也就是說，在石英基底上的Si膜上形成光刻膜。用具有如圖2所示的毛細管設(shè)計(設(shè)置)的掩模來使光刻膠曝光。通過濺射除去用顯影除去光刻膠的部分上的Si，然后利用氟化氫溶液進行濕刻蝕，從而在石英基底上產(chǎn)生毛細管通道槽(毛細管)。在除去光刻膠和留在石英基底上的Si膜后，將所述石英基底和具有液儲存孔的蓋板用HF粘結(jié)技術(shù)粘結(jié)到一起，從而獲得毛細管芯片。在這一點上，在圖2中，Ll和L2表示用于引入先導(dǎo)緩沖液的孔，S表示用于引入電泳樣品的孔，Rl表示用于引入試劑溶液(含有250bpDNA標記性抗體的溶液)的孔，Wl和W2分別表示排出孔。[電泳]G)電泳樣品在0.5mL管中，將1^L具有預(yù)定濃度的AFP，1^L2pM的熒光標記抗體和8含有50mMCr離子的先導(dǎo)緩沖液混合，從而獲得10反應(yīng)溶液。將反應(yīng)溶液靜置于冰上，進行約30分鐘抗原-抗體反應(yīng)，從而形成[熒光標記抗體-AFP]免疫復(fù)合物。在這一點上，AFP的終濃度為0pM、25pm、50pM或100pM，熒光標記抗體的終濃度為200nM。將獲得的含有免疫復(fù)合物的反應(yīng)溶液作為電泳樣品。(2)試劑溶液(含有250bpDNA標記抗體的溶液)用含有20nM250bpDNA標記抗體的尾隨緩沖液(含75mMHEPES)作為試劑溶液。(3)電泳的過程a)引入電泳樣品和試劑溶液用滴劑向圖1所示的S孑L(用于引入電泳樣品的孔)中，滴入IO(iL電泳樣品(含有[熒光標記抗體-AFP]免疫復(fù)合物的溶液)，用滴劑將10試劑溶液(含有DNA標記性抗體的溶液)滴入Rl孔(用于引入試劑溶液的孔)中，并用滴劑將10)iL先導(dǎo)緩沖液分別引入Ll和L2孔中，并通過在Wl(用于排出的孔)和W2(用于排出的孔)之間施加-5psi的壓力100秒，將電泳樣品、試劑溶液和先導(dǎo)緩沖液引入該通道。電泳樣品和試劑溶液在毛細管中的設(shè)置關(guān)系示意性的顯示在圖3中。在這一點上，在圖3中，陰影區(qū)域表示電泳樣品的設(shè)置區(qū)域，網(wǎng)點區(qū)域表示試劑溶液的設(shè)置區(qū)域。b)富集和反應(yīng)通過在R1孔和L1孔之間施加312V、625V或2500V的電壓，試劑溶液中的250bpDNA標記抗體能與電泳樣品中的[熒光標記抗體-AFP]免疫復(fù)合物接觸，同時250bpDNA標記抗體在試劑溶液中富集，從而形成[熒光標記抗體-AFP-250bpDNA標記抗體]免疫復(fù)合物，同時于10°C，在試劑溶液中富集了250bpDNA標記抗體。在這一點上，施加312V電壓的反應(yīng)時間約為200秒，施加625V電壓的反應(yīng)時間約為100秒，施加2500V電壓的反應(yīng)時間約為25秒。c)分離和檢測當(dāng)[熒光標記抗體-AFP-250bpDNA標記抗體]免疫復(fù)合物穿過L2通道和主通道的交叉部分時，對L2孔施加2800V電壓，對Ll孔施加300V電壓100秒，從而分離和檢測所述免疫復(fù)合物。在這一點上，利用熒光顯微鏡(BX-50，KSOlympusCo.,Ltd.出品)，通過連續(xù)測量在距L2通道交叉部分2cm處的毛細管部分的635nm激光激發(fā)的熒光強度來進行檢測。[結(jié)果]圖4示出AFP濃度和峰面積之間的關(guān)系(線性)，圖5示出當(dāng)用AFP濃度為OpM和lOOpM的電泳樣品時的電泳色譜。在這一點上，在圖4中，縱軸表示峰面積，橫軸表示AFP濃度。另外，在圖5中，實線(_)表示當(dāng)用AFP濃度為lOOpM的電泳樣品的情況，虛線()表示當(dāng)用AFP濃度為OpM的電泳樣品的情況。從圖4和圖5中發(fā)現(xiàn)，可以觀察至lJ[熒光標記抗體-AFP-250bpDNA標記抗體]免疫復(fù)合物的峰，且其峰面積與AFP濃度成正比。也就是說，可以理解為免疫復(fù)合物在毛細管(通道)中通過電泳而形成，而不需要預(yù)先在毛細管(通道)外反應(yīng)來形成免疫復(fù)合物。另外，表2示出了在富集和反應(yīng)中的施加的電壓與AFP反應(yīng)率之間的關(guān)系。作為對比例，表2還表示了通過常規(guī)方法將多種溶液引入混合毛細管(通道)同時進行混合和反應(yīng)(JP-A-2005-31070等)，這些溶液反應(yīng)120秒時得到的AFP反應(yīng)率。在這一點上，AFP反應(yīng)率是一個相對值，以預(yù)先在毛細管外使熒光標記抗體、AFP和250bpDNA標記抗體在10°C反應(yīng)30分鐘，得到10|iL含有200nM熒光標記抗體、100pMAFP和20nM250bpDNA標記抗體的反應(yīng)溶液，并將S孔中的所得反應(yīng)溶液引入后，按照上述相似的方法檢測的AFP信號(峰面積)作為100%。表2實施例(本發(fā)明)對比例(常規(guī)方法)在毛細管外反應(yīng)外加電壓2500V625V312V————反應(yīng)時間約25秒約100秒約200秒120秒30分鐘AFP信號145346435-460反應(yīng)率32%75%95%26%100%從表2可以明顯地看出，在施加2500V(反應(yīng)時間約為25秒)電壓時，反應(yīng)率等于或大于常規(guī)方法所得的反應(yīng)率，在施加625V(反應(yīng)時間約為100秒)時，與常規(guī)方法的反應(yīng)時間基本相同，而反應(yīng)率則遠高于常規(guī)方法所得的反應(yīng)率。也就是說，可以理解為通過本發(fā)明的方法，可以以遠高于常規(guī)方法的反應(yīng)率形成復(fù)合物。實施例2[分析物(抗原)]使用與實施例l相同的分析物。[反應(yīng)改良CFS(DNA標記抗體]使用與實施例l相同的反應(yīng)改良CFS。[標記性CFS(熒光標記抗體)]使用與實施例1相同的標記性CFS。[毛細管芯片]按照"Technologyandapplicationofmicrochemistrychip",T.Kitamori等人，2004年出版(MaruzenCo.,Ltd.)描述的方法來生產(chǎn)具有圖6所示設(shè)置的毛細管芯片也就是說，在石英基底上的Si膜上形成光刻膜。用具有如圖6所示的毛細管設(shè)計(設(shè)置)的掩模使光刻膠曝光。通過濺射除去用顯影除去光刻膠的部分上的Si，然后利用氟化氫溶液進行濕刻蝕，從而在石英基底上產(chǎn)生毛細管通道槽(毛細管)。除去光刻膠和留在石英基底上的Si膜后，將所述石英基底和具有儲液孔的蓋板用HF粘結(jié)技術(shù)粘結(jié)到一起，從而獲得毛細管芯片。在這一點上，在圖6中，LI和L2表示用于引入先導(dǎo)緩沖液的孔，SR表示用于引入電泳樣品、第一試劑溶液(含有250bpDNA標記抗體的溶液)和第二試劑溶液(含有熒光標記抗體的溶液)的孔。[電泳](1)A電泳樣品用各自含有0nM、0.8nM、4nM、20nM、50nM禾n100nMAFP的先導(dǎo)緩沖液(含有50mMCr離子)作為電泳樣品。(2)第一試劑溶液(含有250bpDNA標記抗體的溶液)用含有100nM250bpDNA標記抗體的先導(dǎo)緩沖液(含有50mMCl'離子)作為第一試劑溶液。(3)第二試劑溶液(含有熒光標記抗體的溶液)用含有400nM250bp熒光標記抗體的先導(dǎo)緩沖液(含有50mMCl—離子)作為第二試劑溶液。(4)電泳過程a)引入電泳樣品、第一試劑溶液和第二試劑溶液在圖6所示的整個通道用先導(dǎo)緩沖液填充之后，用滴劑將10pL第二試劑溶液(含有熒光標記抗體的溶液)滴入SR孔，通過對LI孔施加-5psi的壓力2秒鐘而將第二試劑溶液引入該通道。然后，SR孔中的第二試劑溶液用10)iL電泳樣品(含有AFP的溶液)代替，同樣通過對LI孔施加-5psi的壓力2秒鐘而將該電泳樣品引入該通道。進而，SR孔中的電泳樣品用10|iL第一試劑溶液(含有250bpDNA標記抗體的溶液)代替，通過對LI孔施加-5psi的壓力2秒鐘而將第一試劑溶液引入該通道。通過這個過程，在通道內(nèi)按照下游方向形成了第二試劑溶液區(qū)域、電泳樣品區(qū)域和第一試劑溶液區(qū)域。在圖7中示出了電泳樣品、第一試劑溶液和第二試劑溶液在毛細管中的設(shè)置關(guān)系。在這一點上，在圖7中，垂線區(qū)域表示第一試劑溶液的設(shè)置區(qū)域，陰影區(qū)域表示電泳樣品的設(shè)置區(qū)域，網(wǎng)點區(qū)域表示第二試劑溶液的設(shè)置區(qū)域。然后，SR孔中的第一試劑溶液用10pL含有75mMHEPES的尾隨緩沖液代替，通過對Ll孔施加-5psi的壓力2秒鐘，而將尾隨緩沖液引入并設(shè)置在第一試劑溶液區(qū)的上游側(cè)。b)富集和反應(yīng)通過在SR孔和L1孔(用于引入先導(dǎo)緩沖液的孔)之間施加312V的電壓，讓第一試劑溶液中的DNA標記抗體，電泳樣品中的AFP和第二試劑溶液中的熒光標記抗體接觸，并同時富集，于10°C形成[熒光標記抗體-AFP-250bpDNA標記抗體]免疫復(fù)合物。在這一點上，反應(yīng)時間約為200秒。c)分離和檢測當(dāng)[熒光標記抗體-AFP-250bpDNA標記抗體]免疫復(fù)合物穿過L2通道和主通道的交叉部分時，對L2孔施加2800V電壓，對Ll孔施加300V電壓100秒，從而分離并檢測所述免疫復(fù)合物。在這一點上，利用熒光顯微鏡(BX-50，KSOlympusCo.,Ltd.出品)，通過連續(xù)測量在距L2通道交叉部分2cm處的毛細管部分的635nm激光激發(fā)的熒光強度來進行檢測。[結(jié)果]圖8示出AFP濃度和峰面積之間的關(guān)系(線性)，圖9示出在低AFP濃度區(qū)域(用AFP濃度為0nM、0.8nM、4nM和20nM的電泳樣品獲得的結(jié)果)中，AFP濃度和峰面積之間的關(guān)系(線性)。在這一點上，在圖8和圖9中，縱軸表示峰面積，橫軸表示AFP濃度。另外，作為對比例，圖8和圖9還顯示了在將預(yù)先在毛細管外使熒光標記抗體、AFP和250bpDNA標記抗體在10。C反應(yīng)30分鐘后獲得的反應(yīng)溶液從SR孔中引入毛細管后，利用與上述相似檢測而獲得的結(jié)果。在這一點上，在反應(yīng)中的熒光標記抗體終濃度為200nM，AFP的最終濃度為0nM、0.8nM、4nM、20nM、50nM或100nM，250bpDNA標記抗體的終濃度為20nM。在圖8和圖9中，標記表示利用實施例2的方法所得的結(jié)果，o標記表示利用對比例的方法所得的結(jié)果。另外，在圖9中，實線表示利用實施例2的方法所得的結(jié)果，虛線表示利用對比例的方法所得的結(jié)果。從圖8和圖9中發(fā)現(xiàn)，可以觀察至U[熒光標記抗體-AFP-250bpDNA標記抗體]免疫復(fù)合物的峰，且其峰面積與AFP濃度成正比。特別是，在預(yù)先形成免疫復(fù)合物，然后進行電泳處理的情況下，在低AFP濃度區(qū)域中的線性差(檢測值在實線下)，而在本發(fā)明的情況下，在AFP低濃度或高濃度區(qū)域都可以得到良好的線性，其中免疫反應(yīng)在毛細管中電泳進行，然后進行電泳處理。工業(yè)實用性本發(fā)明涉及用于在樣品中的分析物或其類似物和可與所述分析物或其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(CFS)之間形成復(fù)合物的方法，將所形成的復(fù)合物與未參與所述復(fù)合物形成的CFS或類似物分離的方法，以及基于分離的復(fù)合物的量或未參與復(fù)合物形成的CFS或類似物的量來測量樣品中的分析物的方法。按照本發(fā)明的方法，溶液中的分析物或其類似物與溶液中的可與所述分析物或其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(CFS)之間的反應(yīng)，可以在短時間內(nèi)高反應(yīng)效率地進行。這樣就可以快速、簡單、高精度地分離復(fù)合物和可與所述分析物或其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(CFS)，和未參與復(fù)合物形成的CFS或類似物，而且，可以基于分離的復(fù)合物的量或未參與復(fù)合物形成的CFS或類似物的量，來高靈敏度地測量樣品中的分析物。權(quán)利要求1.用于形成復(fù)合物的方法，其包括以下步驟第(1)步，將(a)含有分析物或其類似物的溶液和(b)含有至少一種可與所述分析物或所述其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(復(fù)合物形成物)的溶液置于毛細管內(nèi)，通過對所述毛細管施加電壓，就能在所述分析物或所述其類似物和該復(fù)合物形成物間形成復(fù)合物，而不用將這些溶液預(yù)先混合；和第(2)步，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，而使所述分析物或所述其類似物與復(fù)合物形成物接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種復(fù)合物形成物，從而在所述分析物或所述其類似物和該復(fù)合物形成物間形成復(fù)合物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(2)中施加電壓的結(jié)果是富集的所述分析物或所述其類似物和/或至少一種復(fù)合物形成物不低于1.5倍。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(2)通過ITP(等速電泳)或FASS(場放大樣品堆集法)進行。4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項所述的方法，其中至少一種復(fù)合物形成物是與標記物結(jié)合和/或與能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物。5.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項所述的方法，其中使用至少兩種復(fù)合物形成物、至少兩種各自含有所述復(fù)合物形成物的溶液，且(l)至少一種復(fù)合物形成物是與標記物結(jié)合的復(fù)合物形成物，至少一種另外的復(fù)合物形成物是與能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物，或(2)至少一種復(fù)合物形成物是與標記物和能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中一種復(fù)合物形成物是所述分析物或所述其類似物的抗體，或與所述分析物或所述其類似物結(jié)合的蛋白。7.分離復(fù)合物的方法，包括以下步驟第(1)步，將(a)含有分析物或其類似物的溶液和(b)含有至少一種可與所述分析物或所述其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(復(fù)合物形成物)的溶液置于毛細管內(nèi)，通過對所述毛細管施加電壓，就在所述分析物或所述其類似物和該復(fù)合物形成物間形成復(fù)合物，而不用將這些溶液預(yù)先混合；第(2)步，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或所述其類似物與該復(fù)合物形成物接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種復(fù)合物形成物，從而在所述分析物或所述其類似物和該復(fù)合物形成物間形成復(fù)合物；和第(3)步，通過進一步的電移動分離所述復(fù)合物、未參與所述復(fù)合物形成的復(fù)合物形成物或未參與所述復(fù)合物形成的類似物。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中步驟(2)中施加電壓的結(jié)果是富集的所述分析物或所述其類似物和/或至少一種復(fù)合物形成物不低于1.5倍。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中步驟(2)通過ITP(等速電泳)或FASS(場放大樣品堆集法)進行。10.根據(jù)權(quán)利要求79任一項所述的方法，其中至少一種復(fù)合物形成物是與標記物結(jié)合和/或與能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物。11.根據(jù)權(quán)利要求79任一項所述的方法，其中使用至少兩種復(fù)合物形成物、至少兩種各自含有所述復(fù)合物形成物的溶液，且(l)至少一種復(fù)合物形成物是與標記物結(jié)合的復(fù)合物形成物，且至少一種另外的復(fù)合物形成物是與能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物，或(2)至少一種復(fù)合物形成物是與標記物和能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物。12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中一種復(fù)合物形成物是所述分析物或所述其類似物的抗體，或與所述分析物或所述其類似物結(jié)合的蛋白。13.測量分析物的方法，包括以下步驟第(1)步，將(a)含有分析物或其類似物的溶液和(b)含有至少一種可與所述分析物或所述其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(復(fù)合物形成物)的溶液置于毛細管內(nèi)，通過對所述毛細管施加電壓，就在所述分析物或所述其類似物和該復(fù)合物形成物間形成復(fù)合物，而不用將這些溶液預(yù)先混合；第(2)步，在均勻混合這些溶液之前，通過對所述毛細管施加電壓，讓所述分析物或所述其類似物與該復(fù)合物形成物接觸，同時富集所述分析物或所述其類似物和/或至少一種復(fù)合物形成物，從而在所述分析物或所述其類似物和該復(fù)合物形成物間形成復(fù)合物；第(3)步，通過進一步的電移動分離所述復(fù)合物、未參與所述復(fù)合物形成的復(fù)合物形成物或未參與所述復(fù)合物形成的類似物；和第(4)步，測量所分離的復(fù)合物的量、或未參與所述復(fù)合物形成的復(fù)合物形成物或類似物的量，從而基于該結(jié)果來確定所述分析物的量。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中步驟(2)中施加電壓的結(jié)果是富集的所述分析物或所述其類似物和/或至少一種復(fù)合物形成物不低于1.5倍。15.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中步驟(2)通過ITP(等速電泳)或FASS(場放大樣品堆集法)進行。16.根據(jù)權(quán)利要求1315任一項所述的方法，其中至少一種復(fù)合物形成物是與標記物結(jié)合和/或與能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物。17.根據(jù)權(quán)利要求1315任一項所述的方法，其中使用至少兩種復(fù)合物形成物、至少兩種各自含有所述復(fù)合物形成物的溶液，且(l)至少一種復(fù)合物形成物是與標記物結(jié)合的復(fù)合物形成物，且至少一種另外的復(fù)合物形成物是與能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物，或(2)至少一種復(fù)合物形成物是與標記物和能改變所述分析物或所述其類似物的電泳遷移率的物質(zhì)(反應(yīng)改良物)結(jié)合的復(fù)合物形成物。18.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中一種復(fù)合物形成物是所述分析物或所述其類似物的抗體，或與所述分析物或所述其類似物結(jié)合的蛋白。全文摘要本發(fā)明的目的是提供短時間高反應(yīng)效率地在分析物或其類似物與可與所述分析物或其類似物形成復(fù)合物的物質(zhì)(復(fù)合物形成物)之間形成復(fù)合物的方法，快速、簡單、高精度地分離形成的復(fù)合物和未參與復(fù)合物形成的復(fù)合物形成物或未參與所述復(fù)合物形成的類似物的方法，以及高靈敏度地測量樣品中的分析物的方法。文檔編號G01N33/537GK101300488SQ200680040662公開日2008年11月5日申請日期2006年8月24日優(yōu)先權(quán)日2005年9月2日發(fā)明者亨利·加勒特·瓦達,川端智久,里村慎二申請人:和光純藥工業(yè)株式會社