專利名稱：一種快速測(cè)定干血血型的膠體金試紙卡及其制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種快速測(cè)定干血血型的膠體金試紙卡及其制備方法，屬于法醫(yī)物證檢驗(yàn)領(lǐng)域的發(fā)明。
背景技術(shù)：
ABO血型系統(tǒng)的確立，至今已有百余年的歷史，該系統(tǒng)的確立是人類醫(yī)學(xué)發(fā)展的里程碑，它也是法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)上應(yīng)用的最早血型系統(tǒng)，它的應(yīng)用給案件的偵破及訴訟帶來(lái)極大的方便。
目前ABO血型系統(tǒng)仍然是我國(guó)法醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用最為普遍的系統(tǒng)，只要犯罪現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)血跡，就必須測(cè)定其血型，但現(xiàn)在仍然采用傳統(tǒng)的血清學(xué)方法檢驗(yàn)。該方法檢驗(yàn)干血跡的血型，具有很大的弊端。第一，靈敏度低。檢驗(yàn)需要一定的“量”，有時(shí)在現(xiàn)場(chǎng)提取的血跡由于量太少，不足以鑒定血型；第二，準(zhǔn)確性差。對(duì)于現(xiàn)場(chǎng)提取的不潔凈檢材的檢驗(yàn)，由于特異性差，所以結(jié)果不準(zhǔn)確；同時(shí)由于該方法受血清質(zhì)量的制約，有時(shí)由于血清的質(zhì)量導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論；第三，檢驗(yàn)必須在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，不能在犯罪現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行，不能適應(yīng)快速偵破案件的要求；第四，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，測(cè)定干血跡血型時(shí)，測(cè)定一個(gè)樣品需要2-3小時(shí)。第五，傳統(tǒng)的血清學(xué)方法每次檢驗(yàn)都必須使用新鮮的A型、B型指示紅細(xì)胞，在司法實(shí)踐中難以獲得，也很不方便。
膠體金技術(shù)是二十世紀(jì)八十年代后期發(fā)展起來(lái)的高科技技術(shù)，它的基本原理是氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，這種球形的粒子對(duì)蛋白質(zhì)等大分子有很強(qiáng)的吸附功能，由于靜電作用這些金顆粒成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金。吸附機(jī)理是膠體金顆粒表面帶負(fù)電荷，與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。
這項(xiàng)技術(shù)的出現(xiàn)使得許多煩瑣的檢驗(yàn)得以快速準(zhǔn)確的進(jìn)行，而且檢驗(yàn)的靈敏度也大大提高，目前醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)上廣泛使用的甲型肝炎、乙型肝炎、艾滋病、梅毒、早孕檢測(cè)試紙卡均為金標(biāo)試紙卡，這種檢驗(yàn)試紙不需要專門(mén)的檢測(cè)儀器，肉眼即可觀察，具有快速、準(zhǔn)確、靈敏的優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為一種快速檢驗(yàn)干血血型的膠體金試紙卡，可快速、準(zhǔn)確檢驗(yàn)干血的ABO血型。干血跡經(jīng)浸泡溶解后，滴加到試紙卡的加樣孔上，樣品中所含的紅細(xì)胞膜上的A型、B型抗原與試紙卡上的膠體金標(biāo)記的抗血清發(fā)生特異性結(jié)合，形成攜帶膠體金的抗原抗體復(fù)合物，在層析作用下，該復(fù)合物沿硝酸纖維素膜向前移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至固定有底物的區(qū)域時(shí)，樣品中相應(yīng)的抗原抗體復(fù)合物，被硝酸纖維素膜上預(yù)埋的底物特異性捕獲、富積，由于膠體金的特殊作用，在試紙卡直接顯示紅色陽(yáng)性標(biāo)記帶，如果是AB型血，除對(duì)照帶外，出現(xiàn)A標(biāo)記帶和B標(biāo)記帶；A型血?jiǎng)t除對(duì)照帶外只出現(xiàn)A標(biāo)記帶；B型血?jiǎng)t除對(duì)照帶外只出現(xiàn)B標(biāo)記帶；O型血?jiǎng)t除對(duì)照帶外不出現(xiàn)標(biāo)記帶；無(wú)效卡沒(méi)有任何標(biāo)記帶顯示。整個(gè)過(guò)程不超過(guò)5分鐘，快速準(zhǔn)確，靈敏度高，特異性性強(qiáng)，不需要任何儀器，如圖1。


圖1是試紙卡檢驗(yàn)示意圖；圖2是試紙卡組裝示意圖。
具體實(shí)施例方式
試紙卡縱向分三層，最下層是塑料支撐物，其上吸水濾紙，最上面是硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜從上到下分為加樣區(qū)、抗體區(qū)、底物區(qū)和對(duì)照區(qū)，抗體區(qū)固定膠體金標(biāo)記的抗A、抗B抗體；底物區(qū)固定特異性捕獲抗A、抗B凝集素；對(duì)照區(qū)固定羊抗人IgG，如圖2。
該試紙卡對(duì)抗A、抗B抗體進(jìn)行了標(biāo)記，獲得膠體金標(biāo)記的抗體，制成金標(biāo)試紙卡，檢材中的抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，形成抗原抗體復(fù)合物，該復(fù)合物經(jīng)特殊底物特異性捕獲后，在試紙卡直接得到陽(yáng)性標(biāo)記帶，整個(gè)過(guò)程不超過(guò)5分鐘，不需要專門(mén)的檢測(cè)儀器，肉眼即可觀察。
需要說(shuō)明的是，也可以將抗A、抗B抗體分別制作在兩張?jiān)嚰埧ㄉ希嗉丛谝粡堅(jiān)嚰埧ㄉ匣蛘吖潭笰抗體，或者固定抗B抗體，形成A抗原檢測(cè)卡和B抗原檢測(cè)卡，對(duì)A型血、B型血抗原分兩次分別檢驗(yàn)，這樣一來(lái)，如果是A型血，除對(duì)照帶外，在A抗原檢測(cè)試紙卡出現(xiàn)A標(biāo)記帶；如果是A型血，除對(duì)照帶外，在A抗原檢測(cè)試紙卡出現(xiàn)A標(biāo)記帶；如果是B型血，除對(duì)照帶外，在B抗原檢測(cè)試紙卡出現(xiàn)B標(biāo)記帶；如果是AB型血，除對(duì)照帶外，在A抗原檢測(cè)試紙卡和B抗原檢測(cè)試紙卡均出現(xiàn)標(biāo)記帶；如果是O型血，除對(duì)照帶外，在A抗原檢測(cè)試紙卡和B抗原檢測(cè)試紙卡均不能出現(xiàn)標(biāo)記帶；無(wú)效卡沒(méi)有任何標(biāo)記帶顯示。
本發(fā)明可快速、準(zhǔn)確獲得法醫(yī)物證的ABO血型，可用于法醫(yī)物證檢驗(yàn)。
權(quán)利要求
1.一種快速測(cè)定干血血型的膠體金試紙卡，其特征是分為加樣區(qū)、抗體區(qū)、底物區(qū)和對(duì)照區(qū)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速測(cè)定干血血型的膠體金試紙卡，其特征是如果是A型血，除對(duì)照帶外，在A抗原檢測(cè)試紙卡出現(xiàn)A標(biāo)記帶；如果是B型血，除對(duì)照帶外，在B抗原檢測(cè)試紙卡出現(xiàn)B標(biāo)記帶；如果是AB型血，除對(duì)照帶外，在A抗原檢測(cè)試紙卡和B抗原檢測(cè)試紙卡均出現(xiàn)標(biāo)記帶；如果是O型血，除對(duì)照帶外，在A抗原檢測(cè)試紙卡和B抗原檢測(cè)試紙卡均不能出現(xiàn)標(biāo)記帶；無(wú)效卡沒(méi)有任何標(biāo)記帶顯示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速測(cè)定干血血型的膠體金試紙卡在檢驗(yàn)法醫(yī)物證血型中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種快速測(cè)定干血血型的膠體金試紙卡。待檢驗(yàn)的干血經(jīng)浸泡溶解后，滴加到試紙卡的加樣區(qū)，紅細(xì)胞膜上的A型、B型抗原與試紙卡上膠體金標(biāo)記的抗A、抗B抗體發(fā)生特異性結(jié)合，形成攜帶膠體金的抗原抗體復(fù)合物，在層析作用下，該復(fù)合物沿硝酸纖維素膜試紙向前移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至底物區(qū)時(shí)，抗原抗體復(fù)合物被硝酸纖維素膜上預(yù)埋的特異性底物所捕獲、富積，由于膠體金的特殊作用，在試紙卡直接顯示紅色陽(yáng)性標(biāo)記帶，如果是AB型血，出現(xiàn)A標(biāo)記帶和B標(biāo)記帶；A型血只有A標(biāo)記帶；B型血只有B標(biāo)記帶；O型血?jiǎng)t沒(méi)有標(biāo)記帶。本發(fā)明可快速、準(zhǔn)確獲得干血的ABO血型，可用于法醫(yī)物證檢驗(yàn)。
文檔編號(hào)G01N33/80GK101074961SQ20071001130
公開(kāi)日2007年11月21日 申請(qǐng)日期2007年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月15日
發(fā)明者王瑞恒 申請(qǐng)人:遼寧師范大學(xué)