專利名稱：一種生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置及其專用電化學(xué)傳感器和制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置及其專用電化學(xué)傳感器和制備 方法。
背景技術(shù)：
近些年來(lái)，化學(xué)物質(zhì)在生理、病理過(guò)程中變化規(guī)律的研究已成為人們廣泛關(guān)注的 前沿問(wèn)題，這主要是由于化學(xué)物質(zhì)活體實(shí)時(shí)變化的信息可以直接反映生理和病理過(guò)程 中的化學(xué)本質(zhì)。例如，腦內(nèi)葡萄糖和乳酸的變化可以直接反映腦內(nèi)能量代謝過(guò)程；谷 氨酸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)之一，其在腦內(nèi)的存在水平及其變化規(guī)律與學(xué) 習(xí)和記憶及神經(jīng)可塑性等重要生理現(xiàn)象直接相關(guān)。因此，建立適用于生物體內(nèi)化學(xué)物 質(zhì)的檢測(cè)方法具有十分重要的生理和病理意義。活體微透析采樣-在線電化學(xué)檢測(cè)由 于具有連續(xù)檢測(cè)和時(shí)間分辨率高等優(yōu)點(diǎn)，特別適合于生理活性物質(zhì)的在線連續(xù)檢測(cè)。
目前，在線電化學(xué)檢測(cè)方法基本上都是使用氧化酶來(lái)構(gòu)筑選擇性高的電化學(xué)傳感器， 但是，由于基于氧化酶的電化學(xué)傳感器的響應(yīng)對(duì)于氧氣和pH具有很大的依賴性，體 系中氧氣和pH的變化會(huì)導(dǎo)致傳感器響應(yīng)的變化，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定 性，因此，目前已報(bào)道的基于氧化酶的在線電化學(xué)體系很難適用于氧氣和pH變化的 生命體系的研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器及其制備方法。 本發(fā)明所提供的用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器，包括基底電極，其中， 在基底電極上還設(shè)有電化學(xué)催化劑層和位于電化學(xué)催化劑層上的混合酶層。電化學(xué)催 化劑層是由碳納米材料和電化學(xué)催化劑的復(fù)合物構(gòu)成，混合酶包括催化待測(cè)生理活性 物質(zhì)氧化的脫氫酶和消除干擾用的氧化酶。
在電化學(xué)催化劑層中，每平方厘米基底電極上碳納米材料和電化學(xué)催化劑的復(fù)合 物含量為100 240 pg，復(fù)合物中碳納米材料與電化學(xué)催化劑的質(zhì)量比為0.2 1;所 述碳納米材料選自碳納米管、碳納米纖維和碳納米球中的一種或幾種，每平方厘米基 底電極上碳納米材料的含量為30 70 本發(fā)明對(duì)納米材料的尺寸無(wú)特別要求，一 般來(lái)說(shuō)，所述碳納米材料的直徑范圍在1 500nm，優(yōu)選l 10nm，平均長(zhǎng)度在0.5 50pm，優(yōu)選5 15pm。所述電化學(xué)催化劑選自亞甲基藍(lán)、亞甲基綠、甲苯胺藍(lán)和亮 甲酚藍(lán)中的一種或幾種，每平方厘米基底電極上其含量為70 170 Pg。
在混合酶層中，消除干擾用的氧化酶選自抗壞血酸氧化酶、漆酶或者膽紅素氧化 酶中的一種，每平方厘米基底電極上氧化酶的含量為14 21U;每平方厘米基底電極 上催化待測(cè)生理活性物質(zhì)氧化的脫氫酶的含量為7 28U。根據(jù)目標(biāo)檢測(cè)物的不同， 可選擇相應(yīng)的針對(duì)該檢測(cè)物的脫氫酶。例如，對(duì)于葡萄糖，選用葡萄糖脫氫酶；對(duì)于 乳酸，選用乳酸脫氫酶；對(duì)于谷氨酸，選用谷氨酸脫氫酶；對(duì)于乙醇，選用乙醇脫氫 酶等等?；旧?，每一個(gè)傳感器上只固定一種脫氫酶，不可以將不同的脫氫酶整合到
一個(gè)傳感器上，達(dá)到一個(gè)傳感器實(shí)現(xiàn)多個(gè)目標(biāo)物的檢測(cè)。
本發(fā)明用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器的制備方法，包括如下步驟
1) 將納米碳材料和電化學(xué)催化劑混合后進(jìn)行超聲處理，離心分離得到碳納米材 料和電化學(xué)催化劑的復(fù)合物，將所述復(fù)合物涂覆于基底電極上，干燥后形成電化學(xué)催 化劑層；
2) 將含有催化待測(cè)生理活性物質(zhì)氧化的脫氫酶和消除干擾用的氧化酶的混合酶 溶液涂覆于電化學(xué)催化劑層上，干燥，在電化學(xué)催化劑層上形成混合酶層，得到所述 用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器。
其中，在上述制備過(guò)程中，步驟l)涂覆用復(fù)合物溶液的濃度為0.5 — 5mg/ml， 每平方厘米基底電極上復(fù)合物溶液的用量為0.02ml—0.5ml。這樣，可以使得在每平 方厘米基底電極上復(fù)合物含量為100 240pg，并且，碳納米材料和電化學(xué)催化劑的 含量分別為30 70 pg和70 170 |ig。
為了使混合酶能更好的固定于該電化學(xué)傳感器上，混合酶溶液還加有交聯(lián)劑，交 聯(lián)試劑為戊二醛、己二胺、順丁烯二酸酐或雙偶氮苯，優(yōu)選為戊二醛。消除干擾用的 氧化酶選自抗壞血酸氧化酶、漆酶或者膽紅素氧化酶中的一種。在上述制備過(guò)程中， 步驟2)涂覆混合酶溶液時(shí)，每平方厘米基底電極使用如下用量的溶液1000U/mL 的氧化酶溶液14 21 ^L， 1000 U/mL的脫氫酶7 28 nL， lg/100ml戊二醛溶液0.5 3pL。這樣，可以使得每平方厘米基底電極上氧化酶的含量為14 21U;每平方厘米 基底電極上脫氫酶的含量為7 28 U。
應(yīng)用本發(fā)明的電化學(xué)傳感器，還可以制備出一種用來(lái)測(cè)定生理活性物質(zhì)的在線電 化學(xué)檢測(cè)裝置。該生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置包括電化學(xué)流動(dòng)池、本發(fā)明用于 生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器、生物樣品供給管路、輔酶溶液供給管路和三通閥； 所述電化學(xué)傳感器設(shè)置于所述電化學(xué)流動(dòng)池內(nèi)，所述生物樣品供給管路和所述輔酶溶
液供給管路均通過(guò)所述三通閥與所述電化學(xué)流動(dòng)池連接。
為了能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)生物樣品的在線連續(xù)檢測(cè)，生物樣品供給管路還連接有微透析采 樣裝置，該微透析采樣裝置可用來(lái)在線連續(xù)獲得生物樣品。
碳納米材料由于具有獨(dú)特的物理和化學(xué)性質(zhì)，在很多科學(xué)研究和工業(yè)領(lǐng)域引起人 們的廣泛興趣。碳納米材料本身及其通過(guò)共價(jià)或者非共價(jià)功能化而得到的納米復(fù)合物 在電分析化學(xué)研究中具有十分重要價(jià)值。亞甲基藍(lán)、亞甲基綠、(堿性)甲苯胺藍(lán)、亮 甲酚藍(lán)等則是被廣泛使用的一類水溶性的電化學(xué)催化劑，可以很好地催化輔酶尼克酰 胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸)的電化學(xué)氧化。
本發(fā)明首先是通過(guò)利用碳納米材料和亞甲基藍(lán)、亞甲基綠、(堿性)甲苯胺藍(lán)、亮 甲酚藍(lán)等電化學(xué)催化劑之間的相互作用，制備了一種對(duì)于輔酶尼克酰胺腺嘌呤二核苷 酸(磷酸)具有很好電化學(xué)催化性能的納米復(fù)合物。通過(guò)將其固定電極表面，作為電化 學(xué)傳感器的換能器；然后，在電化學(xué)催化劑層上涂覆含有脫氫酶和消除干擾的氧化酶
的混合酶層，得到檢測(cè)目標(biāo)物的電化學(xué)傳感器。該電化學(xué)傳感器具有檢測(cè)限低、穩(wěn)定 性好、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，更為重要的是，由于電化學(xué)傳感器使用脫氫酶作為生物催化 劑，使電化學(xué)檢測(cè)體系的響應(yīng)對(duì)樣品中氧氣的變化不敏感。另外，輔酶是溶解在緩沖
溶液中的，此緩沖溶液在三通閥處與生物樣品混合，緩沖了生物樣品溶液的pH變化， 使得進(jìn)入電化學(xué)傳感器的樣品溶液pH能保持恒定值(與緩沖液pH相當(dāng))，不受生理 狀態(tài)下pH變化的影響。以該電化學(xué)傳感器制備生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置，能 夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)生理活性物質(zhì)的在線連續(xù)檢測(cè)，并且，檢測(cè)的響應(yīng)值不受氧氣和pH變化的 影響，在生命科學(xué)研究中(如腦神經(jīng)生理學(xué)和臨床醫(yī)學(xué))具有廣泛的應(yīng)用前景。


圖1為檢測(cè)生理活性物質(zhì)的電化學(xué)裝置的結(jié)構(gòu)示意圖2為不同的電化學(xué)催化劑亞甲基綠(圖2A)、亞甲基藍(lán)(圖2B)、亮甲酚 藍(lán)(圖2C)催化氧化輔酶尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸的響應(yīng)圖3為本發(fā)明生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置對(duì)腦透析液中葡萄糖和乳酸的響應(yīng)圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l、電化學(xué)傳感器的制備
2mg碳納米管(購(gòu)自深圳市納米港有限公司，直徑〈2nm,長(zhǎng)度在0.5 50 pm) 和5 mg亞甲基綠分散在5 ml蒸餾水中，25'C下超聲(超聲功率為50 W，頻率為50 Hz) 兩個(gè)小時(shí)，將所得到的懸濁液5000 rpm離心1分鐘，得到的固體再用5 ml蒸餾水分 散，再次5000 rpm離心1分鐘得到碳納米管和亞甲基綠的復(fù)合物。取此復(fù)合物1 mg 分散在1 ml雙蒸水中，配成1 mg/mL的懸濁液，取7 懸濁液滴涂在0.14平方厘米 的電極上，25'C干燥，形成電化學(xué)催化劑層。將含有葡萄糖脫氫酶3U(1000U/mL ，
3 nL)、抗壞血酸氧化酶2 U( 1000 U/mL ， 2 pL)和交聯(lián)試劑(戊二醛)10 pg( lg/100ml 水溶液，lpL)的6pL混合液滴涂在電化學(xué)催化劑層之上，在25"C下干燥，形成混合 酶層，得到檢測(cè)葡萄糖的電化學(xué)傳感器。
實(shí)施例2、電化學(xué)傳感器的制備
2mg碳納米纖維(購(gòu)自深圳市納米港有限公司，直徑200nm，長(zhǎng)度在100 200 pm)和5mg亞甲基藍(lán)分散在5ml蒸餾水中，25 "C下超聲(超聲功率為40 W，頻率為 60 Hz)兩個(gè)小時(shí)，所得到的懸濁液6000rpm離心1分鐘，得到的固體再用5 ml蒸餾水 分散，再次6000rpm離心1分鐘得到碳納米纖維和亞甲基綠的復(fù)合物。取此復(fù)合物1 mg 分散在1 ml雙蒸水中，配成1 mg/mL的懸濁液，取10 pL懸濁液滴涂在0.14平方厘 米的電極上，25'C干燥，形成電化學(xué)催化劑層。將含有乳酸脫氫酶4U(1000U/mL ，
4 pL)、膽紅素氧化酶2 U (1000 U/mL ， 2 nL)和交聯(lián)試劑(雙偶氮苯)8 pg (lg/100ml 水溶液，0.8 pL)的6.8]uL混合液滴涂在電化學(xué)催化劑層之上，在25'C下干燥，形成 混合酶層，得到檢測(cè)乳酸的電化學(xué)傳感器。
實(shí)施例3:電化學(xué)傳感器的制備
2mg碳納米球(中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所合成，直徑0.5 pm，參考文獻(xiàn) Macromolecular Chemistry and Physics 207 (18): 1633-1639)和5 mg甲苯胺藍(lán)分散在5 ml蒸餾水中，25 "C下超聲(超聲功率為10 W，頻率為50Hz)兩個(gè)小時(shí)，所得到的懸濁 液3000rpm離心1分鐘，得到的固體再用5 ml蒸餾水分散，再次5000rpm下離心1 分鐘得到碳納米球和亞甲基綠的復(fù)合物。取此復(fù)合物1 mg分散在1 ml雙蒸水中，配 成lmg/ml的懸濁液，取1 ML懸濁液滴涂在0.14平方厘米的電極上，25'C干燥后， 形成電化學(xué)催化劑層。將含有谷氨酸脫氫酶2 U (1000 U/mL ， 2 ^L)、漆酶3 U (1000 U/mL ， 3pL)和交聯(lián)試劑(戊二醛)20嗎(lg/100ml水溶液，2pL)的7 混合 液滴涂在電化學(xué)催化劑層之上，在25"C下干燥，形成混合酶層，得到檢測(cè)谷氨酸的電 化學(xué)傳感器。
實(shí)施例4、生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置
如圖1，生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置包括電化學(xué)流動(dòng)池2，電化學(xué)傳感器1， 生物樣品供給管路4和輔酶溶液供給管路5;電化學(xué)傳感器1整合在電化學(xué)流動(dòng)池2 內(nèi)；生物樣品供給管路4和輔酶溶液供給管路5通過(guò)三通閥3通入電化學(xué)流動(dòng)池2中， 三通闊3的兩個(gè)入口一個(gè)連接生物樣品供給管路4， 一個(gè)連接輔酶溶液供給管路5; 在用于在線檢測(cè)分析時(shí)，生物樣品供給管路4可以與微透析釆樣裝置6連接，這樣， 當(dāng)需要檢測(cè)活體內(nèi)的生理活性物質(zhì)時(shí)，可以通過(guò)微透析采樣裝置6獲得生理活性物質(zhì) 樣品，再通過(guò)生物樣品供給管路4輸送到電化學(xué)流動(dòng)池2中進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)在線 連續(xù)檢測(cè)；輔酶溶液供給管路5用于向電化學(xué)流動(dòng)池2輸送輔酶尼克酰胺腺嘌呤二核 苷酸(磷酸)，為檢測(cè)過(guò)程提供酶催化過(guò)程所必需的輔酶溶液。生理活性物質(zhì)樣品和輔 酶溶液在三通閥3處混合，通過(guò)其出口通入到電化學(xué)流動(dòng)池2中，在電化學(xué)傳感器1 處產(chǎn)生響應(yīng)。其中，輔酶溶液是以緩沖液配制的，具有緩沖能力，當(dāng)該輔酶溶液與生 理活性物質(zhì)樣品在三通閥3混合時(shí)，能緩沖生物樣品溶液的pH變化，使進(jìn)入電化學(xué) 傳感器的溶液能保持恒定值，不受生理狀態(tài)下pH變化的影響。另外，本發(fā)明中使用 脫氫酶構(gòu)筑生物傳感器，脫氫酶本身的性質(zhì)決定了其催化底物的反應(yīng)和整個(gè)在線電化 學(xué)體系不會(huì)受到生物樣品中氧氣變化的影響。
在進(jìn)行具體檢測(cè)時(shí)，在電化學(xué)傳感器1處連接電化學(xué)工作站和數(shù)據(jù)采集裝置，為 檢測(cè)過(guò)程提供恒定電位并采集檢測(cè)過(guò)程所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)響應(yīng)值。該電化學(xué)工作站和數(shù)據(jù) 采集裝置可采用目前各種常用的設(shè)備。
圖2A、圖2B和圖2C分別為電化學(xué)催化劑亞甲基綠、亞甲基藍(lán)和亮甲酚藍(lán)催化 氧化輔酶尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸的圖，三幅圖中虛線都代表在沒(méi)有輔酶尼克酰胺腺 嘌呤二核苷酸的存在下，電化學(xué)催化劑和納米材料的復(fù)合物自身的電化學(xué)行為；實(shí)線 代表在輔酶尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸的存在下，電化學(xué)催化劑和納米材料的復(fù)合物對(duì) 輔酶的電化學(xué)催化行為。從中可以看出，此三種催化劑對(duì)輔酶尼克酰胺腺嘌呤二核苷 酸都有明顯的催化效果，由此可以構(gòu)筑基于脫氫酶生物傳感器。
圖3為利用上述檢測(cè)裝置對(duì)SD大鼠腦透析液中葡萄糖(曲線A)和乳酸(曲線B) 的在線響應(yīng)圖，其中，電化學(xué)傳感器分別為實(shí)施例l所得到的檢測(cè)葡萄糖的電化學(xué)傳 感器和實(shí)施例2所得到的檢測(cè)乳酸的電化學(xué)傳感器，所用的基底電極均為碳膜電極， 兩個(gè)傳感器的工作電位都為0 V w. Ag/AgCl;腦透析液的流速為2 ^L/min;輔酶煙酰 胺腺嘌呤二核苷酸溶液濃度為1.4mmol/L (所用緩沖液成分為126 mmol / L NaCl， 27.5mmol/INaHC03， 2.4 mmol / L KC1， 1.1 mmol / L CaCl2， 0.85 mmol / L MgCl2， 0.5 mmol / L KH2P04和0.5 mmol / L Na2S04， pH為7.4)，流速為3 jiL/min。
圖3中，腦透析液代表采用微透析采樣裝置從動(dòng)物腦內(nèi)采集到的生物樣品，基線 代表空白液。微透析采樣裝置是以透析為原理，通過(guò)非平衡條件下灌注埋在動(dòng)物組織 中的微透析探針，組織中待測(cè)化合物沿濃度梯度逆向擴(kuò)散進(jìn)入透析液，被連續(xù)不斷地 帶出，從而達(dá)到從活體組織中取樣的目的。微透析采樣裝置可采用各種常用的設(shè)備，
如瑞典CMA公司，美國(guó)BAS公司或者其他公司的微透析采樣裝置。
圖3結(jié)果表明，當(dāng)動(dòng)物腦透析液進(jìn)入該電化學(xué)檢測(cè)裝置后，電化學(xué)傳感器會(huì)對(duì)樣 品內(nèi)相應(yīng)的物質(zhì)產(chǎn)生電流響應(yīng)，此電流響應(yīng)可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算為具體的濃度數(shù) 值，因此，該電化學(xué)檢測(cè)裝置可以反映出動(dòng)物腦內(nèi)的葡萄糖和乳酸的濃度。在大腦透 析液中含有很多電活性物種，這些物質(zhì)可能會(huì)在電極上產(chǎn)生干擾信號(hào)。本發(fā)明中傳感 器的選擇性首先是通過(guò)對(duì)底物特異性氧化的脫氫酶來(lái)實(shí)現(xiàn)的。其次，文獻(xiàn)(Analytical Chemistry. 2005， 77, 6234-6242)可以證明，在測(cè)定腦透析液的在線電化學(xué)體系中，傳 感器中使用碳納米材料時(shí)，除了抗壞血酸，其他電活性物種不會(huì)存在干擾。最后，我 們用的消除干擾的氧化酶都可以把抗壞血酸提前氧化而除去，不會(huì)干擾傳感器對(duì)底物 的響應(yīng)。
權(quán)利要求
1、一種用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器，包括基底電極，其特征在于在所述基底電極上還設(shè)有電化學(xué)催化劑層，和位于電化學(xué)催化劑層上的混合酶層；所述電化學(xué)催化劑層是由碳納米材料和電化學(xué)催化劑的復(fù)合物構(gòu)成的；所述混合酶包括催化待測(cè)生理活性物質(zhì)氧化的脫氫酶，和消除干擾用的氧化酶。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的電化學(xué)傳感器，其特征在于所述碳納米材料選自碳 納米管、碳納米纖維和碳納米球中的一種或幾種；所述電化學(xué)催化劑選自亞甲基藍(lán)、 亞甲基綠、甲苯胺藍(lán)和亮甲酚藍(lán)中的一種或幾種，
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的電化學(xué)傳感器，其特征在于所述電化學(xué)催化劑層中， 每平方厘米基底電極上碳納米材料和電化學(xué)催化劑的復(fù)合物含量為100 240|ig，所 述復(fù)合物中碳納米材料與電化學(xué)催化劑的質(zhì)量比為0.2 1。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l一3任一所述的電化學(xué)傳感器，其特征在于所述消除干擾用 的氧化酶選自抗壞血酸氧化酶、漆酶或者膽紅素氧化酶中的一種，每平方厘米基底電 極上所述氧化酶的含量為14 21U;每平方厘米基底電極上所述催化待測(cè)生理活性物 質(zhì)氧化的脫氫酶的含量為7 28 U。
5、權(quán)利要求l所述用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器的制備方法，包括如下 步驟1) 將納米碳材料和電化學(xué)催化劑混合后進(jìn)行超聲處理，離心分離得到碳納米材 料和電化學(xué)催化劑的復(fù)合物，將所述復(fù)合物涂覆于基底電極上，干燥，形成電化學(xué)催 化劑層；2) 將含有催化待測(cè)生理活性物質(zhì)氧化的脫氫酶和消除干擾用的氧化酶的混合酶 溶液涂覆于電化學(xué)催化劑層上，干燥，在電化學(xué)催化劑層上形成混合酶層，得到所述 用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述碳納米材料選自碳納米 管、碳納米纖維和碳納米球中的一種或幾種；所述電化學(xué)催化劑選自亞甲基藍(lán)、亞甲 基綠、甲苯胺藍(lán)和亮甲酚藍(lán)中的一種或幾種；所述碳納米材料與電化學(xué)催化劑的質(zhì)量 比為0.2 1: 1。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于步驟l)涂覆用復(fù)合物溶液的濃度為0.5—5mg/ml，每平方厘米基底電極上復(fù)合物溶液的用量為0.02ml—0.5ml。
8、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述消除干擾用的氧化酶選 自抗壞血酸氧化酶、漆酶或者膽紅素氧化酶中的一種；所述混合酶溶液還加有交聯(lián)劑;交聯(lián)劑為戊二醛、己二胺、順丁烯二酸酐或雙偶氮苯，優(yōu)選為戊二醛。
9、 根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于步驟2)涂覆混合酶溶液時(shí)，每平方厘米基底電極使用含有如下用量的混合溶液1000 U/mL的氧化酶溶液14 21 pL， 1000 U/mL的脫氫酶7 28 pL， lg/100ml戊二醛溶液0.5 3 (iL。
10、 一種生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置，包括電化學(xué)流動(dòng)池、權(quán)利要求l所 述用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器、生物樣品供給管路、輔酶溶液供給管路和 三通闊；所述電化學(xué)傳感器設(shè)置于所述電化學(xué)流動(dòng)池內(nèi)，所述生物樣品供給管路和所 述輔酶溶液供給管路均通過(guò)所述三通閥與所述電化學(xué)流動(dòng)池連接。
11、 根據(jù)權(quán)利要求10所述的電化學(xué)檢測(cè)裝置，其特征在于所述生物樣品供給 管路還連接有微透析采樣裝置。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了用于生理活性物質(zhì)檢測(cè)的電化學(xué)傳感器及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明電化學(xué)傳感器，包括基底電極，其中，在所述基底電極上還設(shè)有電化學(xué)催化劑層，和位于電化學(xué)催化劑層上的混合酶層；所述電化學(xué)催化劑層是由碳納米材料和電化學(xué)催化劑的復(fù)合物構(gòu)成的；所述混合酶包括催化待測(cè)生理活性物質(zhì)氧化的脫氫酶，和消除干擾用的氧化酶。以該電化學(xué)傳感器制備生理活性物質(zhì)的電化學(xué)檢測(cè)裝置，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)生理活性物質(zhì)的在線連續(xù)檢測(cè)，并且，檢測(cè)的響應(yīng)值不受氧氣和pH變化的影響，在生命科學(xué)研究中(如腦神經(jīng)生理學(xué)和臨床醫(yī)學(xué))具有廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)G01N27/327GK101349667SQ20071011912
公開(kāi)日2009年1月21日 申請(qǐng)日期2007年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月16日
發(fā)明者坤 劉, 玲 向, 林雨青, 毛蘭群, 磊 蘇 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所