專利名稱：：一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明具體涉及一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法。技術(shù)背景啤酒泡沫是啤酒品質(zhì)優(yōu)劣最直接的感官評價指標(biāo)之一。豐富細膩的泡沫是啤酒的重要特征，也決定著啤酒商品價值。啤酒泡沫的優(yōu)劣由多種因素決定，其中一個主要的影響因素是酒中所含蛋白質(zhì)的種類及含量，對啤酒起泡性和泡持性起重要作用的蛋白質(zhì)稱為泡沫蛋白(foam-positiveprotein)。泡沫蛋白的主要來源是啤酒大麥，目前學(xué)界公認(rèn)的大麥中的泡沬蛋白有兩類。一類以大麥蛋白質(zhì)Z為代表，屬于絲氮酸蛋白酶抑制劑超家族(serpins)，分子量分布在40kDa左右，主要貢獻啤酒的起泡性；另一類以大麥磷脂轉(zhuǎn)移蛋白LTP1為代表，分子量分布在9kDa左右，主要貢獻啤酒的泡持性。這兩類蛋白具有良好的熱穩(wěn)定性和蛋白酶抗性，因此能夠存在于啤酒釀造的全過程，這兩類蛋白質(zhì)己經(jīng)被廣泛證明在啤酒泡沬中優(yōu)勢存在。發(fā)芽后的大麥種子(麥芽)是釀造啤酒的主要原料。不同品種大麥的蛋白質(zhì)組成不盡相同，其中泡沫蛋白的總的含量、種類和各種類的相對含量也存在差異；而且在制麥過程中，隨著發(fā)芽溫度、pH值、通風(fēng)、外源添加物種類等工藝條件的變化，也必然會影響大麥種子在發(fā)芽過程中的蛋白質(zhì)組成，加劇或減小這一差異。另一方面各種泡沫蛋白組分對啤酒泡沫的作用和貢獻是不同的。因此使用不同品種、不同工藝條件下生產(chǎn)的麥芽釀造，成品啤酒泡沬特性存在很大差異。而縱觀目前國內(nèi)外的制麥和啤酒釀造行業(yè)，并沒有一種簡單有效的方法能夠從原料大麥和麥芽中判斷和預(yù)測成品啤酒的泡沫特性，在實踐中，改善麥芽和啤酒泡沫特性幾乎完全憑借生產(chǎn)經(jīng)驗。因此迫切需要一種簡單準(zhǔn)確，行之有效的方法，能夠在啤酒的上游生產(chǎn)步驟——制麥過程中，檢測和評價啤酒大麥中各種類泡沫蛋白的含量和變化情況。更重要的是，目前國內(nèi)優(yōu)質(zhì)高檔啤酒的釀造幾乎全部使用進口大麥麥芽，國產(chǎn)大麥麥芽由于質(zhì)量較低，始終無法在高檔啤酒原料市場占有一席之地。采用本方法能夠幫助制麥企業(yè)有針對性的改進工藝，改善國產(chǎn)大麥泡沫性較差的缺點，提高國產(chǎn)大麥麥芽的質(zhì)量，使國產(chǎn)大麥芽擺脫無法釀造高檔啤酒的尷她境地，進而較大地提升其價格和市場競爭力。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明采用優(yōu)化的蛋白提取方法，使用較為普及而常用的十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳技術(shù)，能夠準(zhǔn)確直觀的檢測到大麥或麥芽中泡沫蛋白組分和各組分的含量的變化情況。具體操作方法如下第一步、總蛋白的提取。取大麥或麥芽lg，粉碎，以4'C提取緩沖液3ml提取lh,2800xg離心10min，將所得上清液收集至另一離心管中，再次向沉淀中加入3ml的4T:提取緩沖液，4'C提取lh，2800xg離心10min，合并兩次所得上清液，沸水浴放置20min，4000xg離心10min，取上清液，即得蛋白溶液A。提取緩沖液pH7.5，其中含有50mmoH;1三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽，10mmol.U1氯化鈉，lmmol'L"二硫蘇糖醇，lmmol-1乙二胺四乙酸二鈉，余量為水。將前述所得上清液置于沸水浴(100°C)20min，4000xg離心10min，取上清液，得蛋白溶液A即為大麥或麥芽中的總泡沫蛋白溶液。第二步、考馬斯亮藍(Bradford)法測定總泡沫蛋白含量。配制緩沖液T，pH7.5，其中含有50mmol.L-l三(羥甲基)氨基甲烷，10mmol-l氯化鈉，余量為水。以緩沖液T為溶劑，配制1%牛血清白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)溶液(W/W，lmg/ml)，4"保存。配制考馬斯亮藍(Bradford)貯液，其組成為95%乙醇100ml，85%磷酸200ml，考馬斯亮藍G250350mg，于常溫下保存?zhèn)溆?。配制考馬斯亮藍(Bradford)工作液的組成為貯液30ml，95%乙醇15ml，85%磷酸30ml，水定容至500ml，過濾不溶顆粒，保存于棕色瓶備用。分別取濃度為0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml、0.6mg/ml、0.7mg/ml、0.8mg/ml的牛血清白蛋白溶液O.lml于具塞試管中，并以O(shè).lml緩沖液T為空白對照，加入考馬斯亮藍(Bradford)工作液5ml，搖勻，靜置5min，在595nm下測定各管的吸光值，每個樣品作一組平行，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取lOOpl前述蛋白溶液A于10ml具塞試管中，加入5ml考馬斯亮藍(Bradford)工作液，輕柔搖振，靜置5分鐘，在595nm下測定吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算其蛋白含量。第三步、十二垸基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE電泳)。配制30%丙烯酰胺貯液，其中含有丙烯酰胺30%(W/V)，N',N'-甲叉雙丙烯酰胺0.8%(W/V)，余量為雙蒸水，配制方法是將丙烯酰胺與N',N'-甲叉雙丙烯酰胺溶于雙蒸水后過濾，置棕色瓶4。C保存。配制樣品緩沖液，pH6.8，含有0.2mol/L三(羥甲基)氨基甲烷(Tris)，10%十二烷基磺酸鈉(W/V)，5%2-巰基乙醇(V/V)，20%甘油(V/V)，0.05%溴酚藍(W/V)，余量為水。配制電泳緩沖液，其中含有Tris0.25mol/L，甘氨酸1.92mol/L，0.5%SDS(W/V)，余量為蒸餾水，pH8.3，臨用前用水稀釋五倍。配制染色液，將考馬斯亮藍R250溶于甲醇，再加入蒸餾水和冰醋酸，配制成的染色液中含有考馬斯亮藍112500.05%(W/V)，甲醇50%(V/V)，冰醋酸10%(V/V)，余量為水。配制脫色液，含有甲醇5%(V/V);冰醋酸7%(V/V)，余量為水。分離膠為12%丙烯酰胺溶液，濃縮膠為5%丙烯酰胺溶液，配方分別見表1和表2。表l、分離膠配方:<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2、濃縮膠配方:<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>操作時，按配方制好分離膠和濃縮膠。吸取含量相當(dāng)于14(Ig蛋白的蛋白溶液A于微量離心管(eppendorf管)中，加入1/4樣品體積的樣品緩沖液，置沸水浴5min，1000xg離心3min后進行電泳，使用三(羥甲基)氨基甲垸/甘氨酸(Laemmli)不連續(xù)系統(tǒng)進行電泳。電泳結(jié)束后將凝膠浸入染色液染色1~2h，回收染色液。將凝膠置于脫色液中，搖床脫色12h后更換脫色液，放置過夜，脫色至背景清晰明亮。使用普通商品掃描儀或CCD數(shù)碼相機為凝膠拍照，使用凝膠軟件對條帶進行定量分析。發(fā)明中所使用的水除了特別指定的，均為蒸餾水、去離子水或雙蒸水。SDS-PAGE電泳能夠準(zhǔn)確的檢測到大麥或麥芽中各種泡沫蛋白組分和各組分的含量的變化情況，為進一步的分析工作提供更可靠的依據(jù)。當(dāng)?shù)鞍兹芤篈中蛋白濃度低于0.5mg/ml時，對蛋白溶液A進行丙酮沉淀濃縮，濃縮方法為取蛋白溶液A30(V1，加入1.2ml丙酮(經(jīng)過-2(TC預(yù)冷)，-20°C放置30min，12000xg離心5min，棄去上清液，在通風(fēng)櫥內(nèi)室溫風(fēng)干5min，向上述沉淀中加入緩沖液T60|il，振蕩溶解，得蛋白溶液B,取25)il溶液B，加入緩沖液T75pl(4倍稀釋)，搖勻。加入考馬斯亮藍(Bradford)工作液5ml，輕柔搖振，靜置5分鐘，在595nm下測定吸光值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線及稀釋倍數(shù)計算溶液B蛋白含量。得到蛋白溶液B，以蛋白溶液B為樣品進行電泳。本方法能夠準(zhǔn)確的檢測到大麥或麥芽中各種泡沬蛋白組分和各組分的含量的變化情況，因此具有重要的實際應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義第一，提供鑒定啤酒大麥的釀造特性中泡沫特性的方法，并為評價釀造大麥品質(zhì)、以及建立品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫提供重要參數(shù)。第二，能夠根據(jù)原料大麥的泡沫蛋白含量情況為優(yōu)化發(fā)芽條件提供依據(jù)，即使某些品種的大麥泡沬蛋白先天不足，在為其優(yōu)化的工藝條件下發(fā)芽，也可以生產(chǎn)出泡沫特性良好的麥芽。第三，能夠在發(fā)芽過程中隨時監(jiān)測泡沫蛋白的變化情況，為發(fā)芽過程的調(diào)控提供重要的參考指標(biāo)。第四，能夠為成品麥芽提供重要的質(zhì)量評價指標(biāo)和價格依據(jù)。第五，為啤酒釀造企業(yè)生產(chǎn)中工藝控制和新產(chǎn)品開發(fā)提供標(biāo)準(zhǔn)和依據(jù)。說明書附1、牛血清白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖2、司庫納(S)的泡沫蛋白電泳結(jié)果。圖3、蓋德納(G)的泡沫蛋白電泳結(jié)果。圖4、甘啤二號(X)的泡沫蛋白電泳結(jié)果。圖5、甘啤三號(M)的泡沬蛋白電泳結(jié)果。圖6、各品種在發(fā)芽不同時期的蛋白質(zhì)Z含量比較。具體實施例方式取四個品種的大麥在相同條件下發(fā)芽，品種分別為斯庫納(Schooner，澳洲)、蓋德納(Gairdner，加拿大)、甘啤二號(新疆)、甘啤三號(內(nèi)蒙)。發(fā)芽條件浸麥及噴淋用水pH6.8，16°C，暗室，通風(fēng)。發(fā)芽時間浸麥24小時，發(fā)芽96小時，共計120小時。每24小時取樣，原麥樣品記為發(fā)芽O小時，共計24個樣品，按品種分別記為斯庫納S0S120、蓋德納G0G120、甘啤二號X0X120、甘啤三號M0M120。提取緩沖液pH7.5，Tris-C150mmol'I/1，NaCl10mmol'L'1，DTTlmmol丄"，EDTA.2Nalmmo1.1/1，余量為水。將上述24個樣品分別粉碎，各稱取lg(扣除水分后的絕干重量)，置于離心管中，加入4。C提取緩沖液3ml，搖勻，置4'C提取1小時，其間每10分鐘搖振一次。2800xg離心10min，將上清液收集至另一個試管中，再次向沉淀中加入4。C提取緩沖液3ml，搖勻，置4。C提取1小時，2800xg離心10min，取上清液，合并兩次所得上清液。將前述所得上清液置于沸水浴(100°C)20min，4000xg離心10min，取上清液，得蛋白溶液A，待用。配制緩沖液T，pH7.5，其中含有50mmol丄-lTris，10mmol丄-lNaCl，余量為水。以緩沖液T為溶劑，酉己制1%牛血清白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)溶液(W/W，lmg/ml)，4。C保存。配制Bradford貯液，其組成為95%乙醇100ml，85%磷酸200ml，考馬斯亮藍(Bradford)G250350mg，于常溫下保存?zhèn)溆?。配制考馬斯亮藍(Bradford)工作液，其組成為考馬斯亮藍(Bradford)貯液30ml，95。/。乙醇15ml，85%磷酸30ml，蒸餾水定容至500ml，過濾不溶顆粒，保存于棕色瓶備用。分別取濃度為0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml、0.6mg/ml、0.7mg/ml、0.8mg/ml的牛血清白蛋白溶液O.lml于具塞試管中，并以O(shè).lml緩沖液T為空白對照，加入考馬斯亮藍(Bradford)工作液5ml，搖勻，靜置5min，在595nm下測定各管的吸光值，每個樣品作一組平行，繪制出牛血清白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)曲線(如圖1)。分別取lO(Hd前述蛋白溶液A于10ml具塞試管中，加入5mlBradford工作液，輕柔搖振，靜置5分鐘，在595nm下測定吸光值，根據(jù)上述牛血清白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算其總泡沬蛋白質(zhì)含量(如表3)。表3、不同發(fā)芽時間各品種大麥總泡沫蛋白質(zhì)含量(|ig/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>通過表3可以看出，24個樣品中，只有S120和X0兩個樣品中泡沫蛋白的含量高于0.5mg/ml，為保證實驗條件的一致，故對所有樣品的蛋白溶液A進行丙酮沉淀濃縮。分別取蛋白溶液A300^1，加入1.2ml丙酮(經(jīng)過-2(TC預(yù)冷)，-20°。放置3011^11，12000xg離心5min，棄去上清液，在通風(fēng)櫥內(nèi)室溫風(fēng)干5min，向上述沉淀中加入緩沖液T60pl，振蕩溶解，得蛋白溶液B，取25pl蛋白溶液B，加入緩沖液T75pl(4倍稀釋)，搖勻。加入考馬斯亮藍(Bradford)工作液5ml，輕柔搖振，靜置5分鐘，在595nm下測定吸光值，根據(jù)圖1的牛血清白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)曲線及稀釋倍數(shù)計算溶液B蛋白含量。將丙烯酰胺與N',N'-甲叉雙丙烯酰胺溶于雙蒸水后過濾，置棕色瓶4"C保存，得到30%丙烯酰胺貯液，其中含有丙烯酰胺30%(W/V)，N'，N'-甲叉雙丙烯酰胺0.8%(W/V)，余量為雙蒸水。配制樣品緩沖液，pH6.8，含有Tris0.2mol/L，十二烷基磺酸鈉10%(W/V)，2-巰基乙醇5%(V/V)，甘油20%(V/V)，溴酚藍0.05%(W/V)，余量為水。配制電泳緩沖液，pH8.3，其中含有Tris0.125mol/L，甘氨酸0.96mol/L，SDS0.5%(W/V)，余量為水，臨用前以水稀釋五倍。配制染色液，將考馬斯亮藍R250溶于甲醇，再加入水和冰醋酸，配制成的染色液中含有考馬斯亮藍R2500.05%(W/V)，甲醇50%(V/V)，冰醋酸10%(V/V)，余量為水。配制脫色液，含有甲醇5%(V/V);冰醋酸7%(V/V)，余量為水。分離膠與濃縮膠配方分別見表4及表5。操作時，吸取相當(dāng)于14(ig蛋白的蛋白溶液B于eppendorf管中，加入1/4樣品體積的樣品緩沖液，置沸水浴5min，1000r/min離心3min后進行電泳，電表4、12%分離膠配方為<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>泳使用12%分離膠，尺寸為80mmx80mmxlmm，5%濃縮膠，膠高8mm。使用Laemmli不連續(xù)系統(tǒng)進行電泳。電泳結(jié)束后將凝膠浸入染色液染色2h，回收染色液。將凝膠置于脫色液中，搖床脫色lh后更換脫色液，放置過夜，脫色至背景清晰明亮。使用普通商品掃描儀或CCD數(shù)碼相機為凝膠拍照。圖2~圖5為各品種大麥中泡沫蛋白質(zhì)隨發(fā)芽時間變化的電泳圖譜。圖2中左起第一條泳道為蛋白質(zhì)Marker,向右依次為SO、S24、S48、S72、S96、S120。圖3中左起第一條泳道為蛋白質(zhì)Marker,向右依次為G0~G120。圖4中左起第一條泳道為蛋白質(zhì)Marker,向右依次為X0~X120。圖5中左起第一條泳道為蛋白質(zhì)Marker,向右依次為M0M120。蛋白質(zhì)Marker分子量從上至下依次為97.2kDa、66.4kDa、44.3kDa、29.0kDa、20.1kDa、14.3kDa。比較上面四個電泳圖譜，僅憑肉眼便能觀察到同種大麥在發(fā)芽不同時間，以及不同品種大麥間泡沫蛋白質(zhì)的差異。以分子量43kDa附近條帶(大麥蛋白質(zhì)Z)為例，顯而易見，兩種進口大麥的含量較多，蛋白組分也比較簡單。新疆出產(chǎn)的甘啤二號此處條帶也較濃重，但是其條帶數(shù)量較多，說明蛋白組分復(fù)雜，這符合國產(chǎn)大麥蛋白質(zhì)含量高、成分復(fù)雜的事實。內(nèi)蒙出產(chǎn)的甘啤三號此處條帶較其他品種明顯零散、細窄而微弱，因此這種大麥釀造的啤酒泡沬性較差，也符合實際的生產(chǎn)經(jīng)驗。由于大麥蛋白質(zhì)Z對啤酒起泡性具有重要的影響作用，是構(gòu)成泡沬骨架的蛋白質(zhì)，故選取大麥蛋白質(zhì)Z條帶為樣本，使用凝膠分析軟件Totallab2005對各條帶濃度和體積進行積分，計算所得相應(yīng)的蛋白質(zhì)相對含量見表6和圖6。表6中蛋白質(zhì)Z相對含量以蛋白質(zhì)Maker中的牛血清白蛋白(66.4kDa)條帶為標(biāo)準(zhǔn)計算得出，該條帶蛋白含量為0.5昭。表6根據(jù)各品種蛋白質(zhì)Z條帶折算的蛋白質(zhì)含量(昭)發(fā)芽時間0h24h48h72h96h120h斯庫納(s)0.460.681.612.312.933.57蓋德納(G)0.861.952.193.864.285.17甘啤二號(X)0.911.542.293.093.574.12甘啤三號(M)0.490.940.712.031.912.43表6數(shù)據(jù)符合上述肉眼直觀分析的結(jié)果蛋白質(zhì)Z含量隨發(fā)芽過程持續(xù)增加；各品種之間蛋白含量差異明顯，各時間點最大值及最小值之間差距始終在23倍之間，甘德納的蛋白質(zhì)Z含量最多，其次為甘啤二號和司庫納，甘啤三號的含量最低。以120小時數(shù)據(jù)為例，蓋德納是甘啤三號的一倍多，即使是與之最接近的甘啤二號，含量也相差近20%(圖7)。凝膠定量分析印證了上述定性分析的結(jié)果，并且給出了泡沫蛋白質(zhì)的相對含量，為監(jiān)測和評價麥芽質(zhì)量，為制麥企業(yè)有針對性的改進生產(chǎn)工藝，以及制定麥芽質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)和價格依據(jù)等工作提供了可靠的方法和基礎(chǔ)。權(quán)利要求1、一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法，其特征在于按以下步驟進行操作(1)取大麥或麥芽lg，粉碎，以4。C提取緩沖液3ml提取lh，2800xg離心10min，將所得上清液收集至另一離心管中，再次向沉淀巾加入3ml的4r提取緩沖液，fC提取lh，2800xg離心10min，合并兩次所得上清液，沸水浴放置20min，4000xg離心10min，取上清液，即得蛋白溶液A;(2)通過考馬斯亮藍定量蛋白法(Bradford法)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定蛋白溶液A的總蛋白含量；(3)吸取相當(dāng)于14嗎總蛋白的蛋白溶液A于微量離心管(eppendorf管)中，加入1/4樣品體積的樣品緩沖液，置沸水浴5min，1000xg離心3min后，以5%丙烯酰胺溶液為濃縮膠，12%丙烯酰胺溶液為分離膠，使用三(羥甲基)氨基甲烷/甘氨酸不連續(xù)系統(tǒng)(Laemmli系統(tǒng))進行電泳，電泳結(jié)束后將凝膠浸入染色液染色1~2小時，然后用脫色液浸泡至背景清晰明亮，為凝膠拍照，使用凝膠分析軟件對條帶進行定量分析；以上所述提取緩沖液為pH7.5，其中含有50mmol'L"三(羥甲基)氨基甲烷(Tris)，10mmol'L"氯化鈉，lmmol'I/1二硫蘇糖醇，lmmoH/1乙二胺四乙酸二鈉，余量為水；樣品緩沖液為pH6.8，含有三(羥甲基)氨基甲烷(Tris)0.2mol/L，10%十二垸基磺酸鈉(W/V)，5%2-巰基乙醇(V/V)，20%甘油(V/V)，0.05%溴酚藍(W/V)，余量為水；電泳緩沖液為pH8.3，含有Tris0.25mol/L，甘氨酸1.92mol/L，0.5%SDS(W/V)，余量為水，使用前稀釋五倍；染色液中含有考馬斯亮藍R2500.05%(W/V)，甲醇50%(V/V)，冰醋酸10%(V/V)，余量為水。脫色液中含有甲醇5%(V/V);冰醋酸7%(V/V)，余量為水。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法，其特征在于所取大麥或麥芽的重量為扣除水分后的絕干重量。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沬蛋白組分與含量的方法，其特征在于所述步驟的第一步中，提取時需要連續(xù)震蕩。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法，其特征在于所述蛋白溶液A，當(dāng)?shù)鞍诐舛鹊陀?.5mg/ml時，對蛋白溶液A要進行濃縮，濃縮后得到蛋白溶液B，以蛋白溶液B為樣品進行電泳。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法，其特征在于蛋白溶液A的濃縮方法為取蛋白溶液A30(V1，加入L2ml丙酮，-20"放置30min，12000xg離心5min，棄去上清液，在通風(fēng)櫥內(nèi)室溫風(fēng)干5min，向上述沉淀中加入緩沖液T60|al，振蕩溶解，得蛋白溶液B，取25^1溶液B，加入緩沖液T75pl(4倍稀釋)，搖勻。加入考馬斯亮藍(Bradford)工作液5ml，輕柔搖振，靜置5min，在595nm下測定吸光值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線及稀釋倍數(shù)計算溶液B蛋白含量。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沬蛋白組分與含量的方法，其特征在于所述蛋白溶液A的濃縮過程中，加入的丙酮需提前于-2(TC進行預(yù)冷。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法，其特征在于所述緩沖液T為pH7.5，其中含有50mmol丄"三(羥甲基)氨基甲烷，10mmol七"氯化鈉，余量為水。8、根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測啤酒大麥或麥芽中泡沫蛋白組分與含量的方法，其特征在于所使用的水為蒸餾水、去離子水和雙蒸水。全文摘要本發(fā)明采用優(yōu)化的蛋白提取方法，通過十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳技術(shù)檢測啤酒大麥和麥芽中泡沫蛋白的組分與含量，能夠準(zhǔn)確直觀的檢測到啤酒大麥和麥芽在發(fā)芽過程中泡沫蛋白各組分及其含量的變化情況。文檔編號G01N33/68GK101144823SQ20071015785公開日2008年3月19日申請日期2007年10月30日優(yōu)先權(quán)日2007年10月30日發(fā)明者俞志敏,俊孫,孫麗華,張?zhí)煅?凱徐,趙長新申請人:大連工業(yè)大學(xué)