專利名稱：：無限制通量磁性微球定量測定系統(tǒng)及其在生物醫(yī)學(xué)中用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)及其用途領(lǐng)域。具體涉及無數(shù)種不同阻抗診斷磁性微球制作、無數(shù)種不同阻抗磁性微球編碼無數(shù)種不同待測物質(zhì)種類，診斷磁性微球檢測方法及其檢測裝置以及其在診斷疾病、判斷藥物療效以及基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的用途。
背景技術(shù)：
：目前建立在抗原抗體反應(yīng)基礎(chǔ)上的檢測技術(shù)，包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術(shù)，放射免疫技術(shù)、發(fā)光免疫技術(shù)、膠體金免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)、發(fā)光免疫技術(shù)、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)和生物蛋白質(zhì)傳感技術(shù)等。建立在核酸分子堿基配對原理技術(shù)上的檢測技術(shù)，包括Northernblot技術(shù)、Southernblot技術(shù)和原位雜交技術(shù)和聚合鏈反應(yīng)技術(shù)(PCR技術(shù))等。我們以ELISA技術(shù)為例一般存在以下不足①是一種試劑只能測定一個項目。比如測定乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的試劑只能測定HBsAg，而不能同時測定乙型肝炎病毒表面抗體(HbsAb)。醫(yī)院檢驗科或科研技術(shù)人員每次實驗只能測定一項指標(biāo)，要檢測某種疾病的相關(guān)物質(zhì)，就要進行大量的重復(fù)性工作(如乙型肝炎兩對半系列)，花費大量的人力，物力和資源，增加檢驗成本。②是質(zhì)量控制比較困難。我們不可能對一批試劑盒的測定板的每個測定孔，逐一進行質(zhì)量檢查。質(zhì)量控制部門，只能從一批ELISA測定扳中，進行隨機抽樣檢査，這很難保證標(biāo)本測定結(jié)果的準確性。這也是ELISA技術(shù)很難象液體試劑測定血糖那樣，對質(zhì)量進行有效監(jiān)督的原因。③是準確定量比較困難，靈敏度不高，操作復(fù)雜。ELISA技術(shù)最終以測定孔液體顏色深淺作為陽性判讀標(biāo)準，由于受到顯色時間的影響，使結(jié)果很難做到準確定量。此外該技術(shù)測定步驟煩瑣，需要時間長，存在人為誤差等缺點。除了ELISA技術(shù)之外，其他技術(shù)也各有各的缺點和不足，有的技術(shù)雖然快速，但只能定性、不能定量；有的技術(shù)雖然能夠定量，但檢測成本很高，且難以進行質(zhì)量控制。固體生物芯片(包括蛋白質(zhì)和基金芯片)技術(shù)，同時可以測定上千種物質(zhì)，但一般用于定性(判斷陰性和陽性)而難以用于定量測定。建立在不同顏色微球基礎(chǔ)上的液態(tài)芯片技術(shù)，該技術(shù)用不同顏色編碼不同測定項目，解決了可以同時定量測定上千種物質(zhì)的難題，但也存在以下不足一是最多只能得到100種比較穩(wěn)定的不同顏色微球，這無法滿足日益增多的檢驗科檢測和醫(yī)學(xué)科研項目的要求，屬于有限通量測定技術(shù)。二是檢測設(shè)備對顏色種類精細判讀，可能存在誤差，不可能同時檢測無數(shù)種待測物質(zhì)，三是微球顏色對微球表面的光信號測定，會產(chǎn)生干擾。四是不同顏色微球，因保存時間長，可能會出現(xiàn)脫色。五是測定設(shè)備要求條件高。需要高靈敏的顏色判斷和可以消除微球自身顏色的微球表面光信號定量測定設(shè)備，對該液態(tài)芯片技術(shù)，進行測定。這在技術(shù)不太發(fā)達的國家，很難開發(fā)和生產(chǎn)出這種測定設(shè)備，不利于國家要求的實驗診斷設(shè)備和試劑國產(chǎn)化發(fā)展要求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的阻抗變量液態(tài)芯片技術(shù)是在美國傳統(tǒng)液態(tài)芯片技術(shù)上的一次全新改良和創(chuàng)新，是設(shè)計上的一次飛躍。微球阻抗變量與顏色編碼不同，阻抗微球編碼可以做到無限多，決定了本發(fā)明在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有更廣泛的用途。蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)需要測定無數(shù)種待測物質(zhì)。疾病診斷和療效觀察也需要越來越多的檢測指標(biāo)。本發(fā)明最終目的是，阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)，取代目前醫(yī)院檢驗科或醫(yī)學(xué)科研院校所有ELISA項目、放射免疫項目和基因檢測項目等建立在抗原抗體反應(yīng)和核酸分子雜交技術(shù)上的所有項目。徹底改變醫(yī)院實驗室的項目分工和儀器配置，未來醫(yī)院和研究機構(gòu)只需一臺阻抗變量液態(tài)生物芯片技術(shù)測定儀，即可以測任何抗原、抗體和未知基因片段，還可以進行細胞計數(shù)。液態(tài)生物芯片測定儀，是一臺多功能的實驗診斷設(shè)備。為了達到以上目的，本發(fā)明分以下幾個步驟。1)按照本發(fā)明的方法，生產(chǎn)阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)。包括(l)制作不同阻抗磁性微球，(2)將抗原、抗體和已知DNA片段包被在不同阻抗磁性微球上，(3)其它配套試劑。2)按照本發(fā)明的方法和設(shè)計原理，生產(chǎn)阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)測定設(shè)備。包括(1)國家有關(guān)部門對不同阻抗磁性微球代表不同測定項目的認可和標(biāo)準化制訂。(2)—種同時可以測定磁性微球阻抗和磁性微球表面光信號設(shè)備的設(shè)計，開發(fā)和生產(chǎn)。3)向國內(nèi)外醫(yī)院和科研機構(gòu)推廣使用。包括(1)基因組學(xué)中無數(shù)種未知DNA序列測定鑒定，(2)蛋白質(zhì)組學(xué)無數(shù)種大量蛋白質(zhì)抗原物質(zhì)測定，(3)疾病診斷中無數(shù)種指標(biāo)測定，(4)疾病療效觀察和判斷中無數(shù)種指標(biāo)測定。本發(fā)明的技術(shù)方案為1.本發(fā)明的阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)整體技術(shù)方案可行性論證。很多發(fā)明專利因技術(shù)要求過高，而難以進行開發(fā)和推廣。顏色分辨技術(shù)要求高，超過ioo種顏色，一般技術(shù)難以實現(xiàn)，研制出一種分辨無數(shù)種顏色的設(shè)備，更不可能。電阻大小可以用連續(xù)的定量數(shù)值表示，理論上可以有無限多個電阻大小磁性微球編碼無數(shù)種不同的待測物質(zhì)種類。本發(fā)明專利技術(shù)要求相對低，結(jié)果更可靠。凡是能生產(chǎn)出血球細胞計數(shù)儀和流式細胞儀的廠家，均能開發(fā)出本發(fā)明所設(shè)計的阻抗變量無限通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)。1.1磁性微球無數(shù)種不同阻抗測定技術(shù)可行性分析血球計數(shù)儀的基本原理，就是測定血液各細胞的阻抗不同而進行分類計數(shù)的。微孔電阻測定原理能夠檢測到磁性微球阻抗的微小變化，目前成熟的技術(shù)完全能夠滿足對磁性微球阻抗變量的檢測。此外，不同阻抗磁性微球(阻抗變量磁性微球)生產(chǎn)工藝成熟，采用導(dǎo)電物質(zhì)(如金屬粉末，聚苯胺等)與合成磁性微球原料(如含有磁性物質(zhì)的苯乙烯等)混合的方法，可生產(chǎn)無數(shù)種阻抗變量磁性微球。由于導(dǎo)電成分可以與合成磁性微球原料按任意比例混合，從理論上可以生產(chǎn)出無數(shù)種電阻大小不同的磁性微球，合成的磁性微球經(jīng)羧基化或胺基化處理后，與抗原、抗體、DNA或RNA的共價連接，生產(chǎn)出無數(shù)種不同阻抗診斷磁性磁性微球。1.2本發(fā)明的阻抗變量無限通量診斷磁性微球研制技術(shù)可行性分析。無數(shù)種不同阻抗磁性微球表面通過羧基化和胺基化處理，可通過共價鍵牢固連接不同的蛋白質(zhì)抗原、抗體或DNA上，制作本發(fā)明的阻抗變量無限通量診斷磁性微球，該技術(shù)是成熟的技術(shù)。1.3本發(fā)明的阻抗變量無限通量診斷磁性微球定量分析技術(shù)可行性分析。只要同時能檢測磁性微球電阻大小變化和磁性微球表面熒光或發(fā)光信號強弱的儀器，即可滿足本發(fā)明的設(shè)備要求。在原理上是血球計數(shù)儀和流式細胞儀的有機結(jié)合，也是成熟的技術(shù)。2.本
發(fā)明內(nèi)容分兩部分。一是阻抗變量無限通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)的研制，二是阻抗變量無限通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用。2.1阻抗變量無限通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)的研制(l)生產(chǎn)無數(shù)種不同阻抗大小的體積相同的磁性診斷磁性微球電阻是物質(zhì)的一種屬性，電阻大小在數(shù)學(xué)上屬于連續(xù)變量。不同化學(xué)成分磁性微球，具有不同的電阻。本發(fā)明的創(chuàng)新之處是將導(dǎo)電物質(zhì)(如金屬粉末和聚苯胺等)和合成磁性微球的原料(如含有磁鐵粉末的苯乙烯)按任意比例進行混合，可生產(chǎn)出無數(shù)種不同阻抗特征的體積相同的磁性微球如圖1所示。以苯乙烯為原料合成乳膠磁性微球為例，首先將導(dǎo)電高分子材料聚苯胺與含有磁性氧化鐵粉末的苯乙烯，按不同比例混合，控制反應(yīng)條件通過成熟的乳膠生產(chǎn)工藝，生產(chǎn)出符合要求的不同阻抗聚苯乙烯乳膠磁性微球。導(dǎo)電高分子材料聚苯胺含量可以任意變化，可生產(chǎn)出無數(shù)種阻抗大小不同的磁性磁性微球(表2)。表2:不同阻抗聚苯乙烯磁性微球的生產(chǎn)配方<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注本表只起示意作用。具體配方不限于本表數(shù)據(jù)和原料物質(zhì)。為了保證摻入金屬成分不影響乳膠磁性微球表面的活性，本發(fā)明第2創(chuàng)新之處，是制作"雙心乳膠"如圖2所示。首先生產(chǎn)出含有不同金屬成分的磁性微球核心，然后外面再包裹一層不含金屬成分的乳膠外殼，形成"雙心乳膠"磁性微球。這種"雙心乳膠"磁性微球不影響乳膠磁性微球的表面活性，不會影響已知抗原、抗體和DNA包被在乳膠表面的效果。(2)生產(chǎn)無數(shù)種不同阻抗大小的體積不相等的磁性微球同樣電阻率(或電導(dǎo)率)材料磁性微球，磁性微球體積越大，電阻越大。為了從外觀上區(qū)分不同阻抗的磁性微球，同樣的磁性微球原料，根據(jù)成熟的技術(shù)嚴格控制條件，可以制作成不同體積大小的磁性微球，磁性微球體積越大，電阻就越大。(3)制備無數(shù)種不同阻抗診斷磁性微球購買或自己研制的無數(shù)種不同阻抗磁性微球，按照成熟的技術(shù)和文獻對磁性微球表面進行化學(xué)處理，制作無數(shù)種不同阻抗系列的羧化或胺化聚苯乙烯乳膠磁性微球，可共價牢固連接抗原、抗體和DNA化學(xué)分子，制備無數(shù)種不同阻抗系列診斷磁性微球如圖3所示。(4)無數(shù)種不同阻抗大小磁性微球編碼無數(shù)種待測物質(zhì)或未知物質(zhì)項目種類。i確定不同磁性微球電阻(或范圍)與待測物質(zhì)成分一一對應(yīng)，制定不同阻抗或阻抗范圍磁性微球編碼不同待測物質(zhì)對應(yīng)表。由于磁性微球電阻變化無限性，也決定著待測項目的7無限性。不同電阻磁性微球包括不同成分的相同體積磁性微球和相同成分的不同體積磁性微球。al，a2，a3等代表生物醫(yī)學(xué)某個領(lǐng)域項目(如疾病診斷項目)，bl，b2,b3等代表生物醫(yī)學(xué)另外一個領(lǐng)域(如基因組學(xué)或蛋白質(zhì)組學(xué)測定項目)見表3。表3:不同阻抗磁性微球與待測成分對應(yīng)表磁性微球阻抗(歐姆)123......102030......待測物質(zhì)ala2a3......Mb2b3......注本表只起示意作用。具體阻抗和項目對應(yīng)數(shù)據(jù)不限于本表數(shù)據(jù)ii將不同阻抗編碼的不同待測物質(zhì)種類信息，輸入阻抗變量無限通量診斷磁性定量分析裝置軟件處理系統(tǒng)。軟件處理系統(tǒng)自動分析不同阻抗(項目)磁性微球表面光信號。(5)生產(chǎn)阻抗變量無限通量診斷磁性微球。釆用成熟的化學(xué)共價標(biāo)記技術(shù)，將用于測定不同項目的特異性抗體、特異性抗原或已知DNA)化學(xué)交聯(lián)在相對應(yīng)的不同電阻磁性微球表面，生產(chǎn)出一系列阻抗變量無限通量診斷磁性微球。具體操作方法可在相關(guān)資料和教材中査閱，這里不再詳細描述。(6)配制阻抗變量無限通量診斷磁性微球定量分析所需的配套試劑。根據(jù)待測物質(zhì)或未知物質(zhì)的性質(zhì)不同，設(shè)計出不同的配套試劑。①待測成分為蛋白質(zhì)、多糖類、脂類抗原物質(zhì)。這類物質(zhì)包括，a)在疾病診斷和疾病療效觀察領(lǐng)域中的已知或未知的細菌、支原體、衣原體、病毒等表面特異抗原(屬于確診性診斷)、多種腫瘤標(biāo)記物、體內(nèi)蛋白質(zhì)多肽物質(zhì)(如C反應(yīng)蛋白，激素、類風(fēng)濕因子等)。b)在生物醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域(如基因組學(xué)，蛋白質(zhì)組學(xué))無數(shù)種蛋白質(zhì)、多糖類、脂類抗原物質(zhì)等。檢測這類物質(zhì)成分，需要磁性微球表面包被其特異性抗體，進行測定。以乳膠磁性微球表面為反應(yīng)平臺，釆用雙抗夾心法加以說明，這類測定項目的配套試劑包括以下幾種成分。(1)游離相應(yīng)多種特異性抗體溶液(2)熒光或發(fā)光物標(biāo)記的第二抗體(抗抗體)溶液(3)抗原抗體結(jié)合反應(yīng)緩沖液(4)乳膠磁性微球洗滌緩沖液(5)熒光或發(fā)光反應(yīng)緩沖液以上緩沖液均可在公開的資料文獻或教材上，找到配方，這里不再詳述。特異單克隆抗體和標(biāo)記第二抗體可以通過購買獲得或自行生產(chǎn)。②待測物質(zhì)為蛋白質(zhì)抗體。這類物質(zhì)主要包括a)在疾病診斷和疾病療效觀察領(lǐng)域中，由于患者感染了細菌、支原體、衣原體、病毒，而產(chǎn)生的特異抗體。此外，某些疾病也會診斷自身物質(zhì)產(chǎn)生的病理性抗體。b)在生物醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域(如基因組學(xué)，蛋白質(zhì)組學(xué))，需要測定的無數(shù)種蛋白質(zhì)抗體物質(zhì)等。這類檢測項目，需要乳膠磁性微球表面標(biāo)記相對應(yīng)的特異抗原成分，進行測定。這類測定項目的配套試劑包括以下幾種成分。(1)游離相應(yīng)熒光或發(fā)光物標(biāo)記多種特異性抗原溶液(2)抗原抗體結(jié)合反應(yīng)緩沖液(3)乳膠磁性微球洗滌緩沖液(4)熒光或發(fā)光反應(yīng)緩沖液以上緩沖液均可在公開的資料文獻或教材上，找到配方，這里不再詳述。特異單克隆抗體和抗原(細菌特征蛋白、病毒顆粒)，標(biāo)記第二抗體可以通過購買獲得或自行生產(chǎn)。(D待測物質(zhì)為DNA或RNA。這類物質(zhì)主要包括，a)在疾病診斷和疾病療效觀察領(lǐng)域中，體內(nèi)微生物尤其是病毒的特異DNA或RNA片段(確診性診斷)，b)在生物醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域(如基因組學(xué)，蛋白質(zhì)組學(xué))，需要測定的無數(shù)種DNA或RNA等。這類項目的檢測需要乳膠磁性微球表面包被相對應(yīng)的DNA或RNA片段，進行分析。這類項目的配套試劑包括以下幾種成分。(1)游離用熒光或發(fā)光物標(biāo)記的DNA片段(基因探針)溶液(2)雜交反應(yīng)緩沖液(3)乳膠磁性微球洗滌緩沖液(4)熒光或發(fā)光反應(yīng)緩沖液以上試劑來源方便，制作技術(shù)成熟。這里不再詳細說明。(7)組裝阻抗變量液態(tài)生物芯片試劑盒。將己包被無數(shù)種抗原、抗體和DNA(RNA)的無數(shù)種磁性微球(阻抗變量無限通量診斷磁性微球)及其配套試劑，組合包裝成為阻抗變量無限通量診斷磁性微球定量分析試劑盒。試劑盒內(nèi)有多少種不同電阻的診斷磁性微球，就代表能同時測定多少種項目。(8)阻抗變量無限通量診斷磁性微球檢測方法和裝置。阻抗變量無限通量診斷磁性微球檢測方法為，首先，同時或先后測定阻抗變量無限通量診斷磁性微球的電阻大小和磁性微球表面光信號強度。然后，根據(jù)不同阻抗磁性微球?qū)?yīng)的不同項目種類，判斷標(biāo)本中那些待測物質(zhì)陰性，那些待測物質(zhì)陽性以及含量。最后，打印結(jié)果報告。阻抗變量無限通量診斷磁性微球檢測方法原理見圖4。本發(fā)明的阻抗變量無限制通量診斷磁性微球測定方法，借助配套試劑盒及裝置進行。配套試劑盒如同前述。阻抗變量無限通量診斷磁性微球測定裝置，包括2個測定裝置和1套數(shù)據(jù)處理軟件如圖5所示。第一個測定裝置就是微孔阻抗測定裝置。該裝置能準確測定通過微孔的磁性微球的電阻大小，其原理與細胞計數(shù)儀的工作原理基本相同。根據(jù)不同阻抗編碼的項目種類，微孔阻抗測定裝置可以準確判讀磁性微球的測定項目類別。第二個測定裝置是對通過微孔的磁性微球表面的熒光或發(fā)光信號，進行定量檢測裝置。其原理與流式細胞儀工作原理基本相同。本發(fā)明的磁性微球液態(tài)生物芯片測定技術(shù)，從本質(zhì)上就是全自動血細胞計數(shù)技術(shù)和流式細胞測定技術(shù)的有機結(jié)合，該裝置技術(shù)成熟，某些高檔次的血球計數(shù)儀，已經(jīng)具備該項功能，在這里不再詳細描述。第三個軟件分析系統(tǒng)，就是對先后或同時接收的磁性微球電阻信號以及該磁性微球表面光信號，按照阻抗編碼項目表，準確分析出在無數(shù)種測定項目中，那些物質(zhì)陰性，那些物質(zhì)陽性，并在標(biāo)準參比條件下進行定量如圖6所示。軟件分析系統(tǒng)首先預(yù)設(shè)磁性微球阻抗值(或范圍)代表的測定項目(表3)，然后，分析不同阻抗磁性微球(測定項目)表面的熒光或光信號強度(物質(zhì)含量)，以標(biāo)準物做參比，計算待測物質(zhì)含量，最后將數(shù)據(jù)傳輸給打印機，打印結(jié)果報告。表3:不同乳膠磁性微球阻抗編碼不同測定項目微球電阻(歐姆)123…102030...100200300測定物質(zhì)HBVHCVHDV...AFPCEACA-153…胰島素T3T4值得說明的是，如果我們設(shè)定某阻抗為人體血液白細胞、紅細胞和血小板的電阻特征值，本裝置可以同時具備血球計數(shù)儀的功能。如果我們用骨髓等細胞來代替磁性微球進行測定，本裝置通過改變參數(shù)，可同時具備流式細胞儀的功能。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的用途1.疾病相關(guān)抗原類測定疾病診斷和觀察療效需要測定機體內(nèi)多種抗原物質(zhì)。隨著對疾病發(fā)生機理的研究深入，越來越多的疾病相關(guān)抗原被發(fā)現(xiàn)，常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右抗原物質(zhì)測定，遠遠不能滿足醫(yī)院實驗診斷未來發(fā)展的需要。發(fā)明人采用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次可以同時測定無數(shù)種待測抗原。發(fā)明人以同時測定n種(n大于l且小于正無窮)疾病相關(guān)抗原類為例，加以說明。1)自己生產(chǎn)或購買ii種不同阻抗的可用來化學(xué)共價鍵標(biāo)記的乳膠磁性微球。1)將乳膠磁性微球按阻抗從小到大進行分類并編碼n種不同疾病相關(guān)抗原。2)制定n種不同阻抗磁性微球編碼待測抗原對應(yīng)表。4)自己購買或自己生產(chǎn)針對n種抗原的單克隆抗體。5)按照不同阻抗磁性微球編碼待測抗原對應(yīng)表，將n種單克隆抗體，分別共價鍵結(jié)合在n種不同阻抗的磁性微球表面，制作診斷磁性微球，1500g離心10分鐘，或放置在磁性板上2-12小時使磁性微球沉淀，棄去游離未標(biāo)記的抗體。n種診斷磁性微球用磷酸緩沖液洗滌后，按等比例混合，用磷酸緩沖液重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的n元阻抗診斷磁性微球混合液。6)將250微升n元阻抗診斷磁性微球混合液放入1毫升的離心管內(nèi)，再加250微升血清或其他測定標(biāo)本，充分混勻，37^震蕩保溫1分鐘~2小時，使磁性微球表面抗體和樣品中待測抗原充分結(jié)合。7)離心管1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用PBS重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再棄去上清液，對n元阻抗診斷磁性微球進行洗滌，徹底洗去離心管中游離的待測物質(zhì)。8)加入含有抗n種抗原的n種單克隆抗體磷酸緩沖液500毫升，37°C震蕩保溫30分鐘~1小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測物質(zhì)反應(yīng)，重復(fù)第7)步，對磁性微球進行洗滌，棄去上清液。9)加入熒光標(biāo)記的抗人免疫球蛋白抗體(抗抗體)500毫升，37°(:震蕩保溫45分鐘，與結(jié)合在磁性微球表面的抗體結(jié)合，重復(fù)步驟7)，徹底洗滌，留磁性微球沉淀。10)將磁性微球熒光測定緩沖液重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(測定項目)和磁性微球表面熒光強度(物質(zhì)含量)測定。11)結(jié)果判讀如果nl阻抗磁性微球表面熒光陽性，說明血清nl抗原陽性，熒光強度與nl抗原濃度呈正比。采用nl抗原標(biāo)準濃度做參比測定，可對nl進行準確定量。如果n種阻抗磁性微球，只有nl,n2,n3,n4，n5等五種阻抗磁性微球表面熒光同時陽性，說明血液內(nèi)同時存在nl,ri2，n3，n4，n5五種抗原物質(zhì)，其他n-5種抗原均陰性。如果n種阻抗磁性微球表面熒光信號均陽性，說明血液中同時存在n種抗原物質(zhì)。依次類推。本發(fā)明技術(shù)方案也適用于生物醫(yī)學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)中無數(shù)種待測抗原的測定。如果要測n種抗原物質(zhì)，需要n種不同電阻的磁性微球，操作同上。上述技術(shù)方案只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料。2.疾病相關(guān)抗體類測定測定體內(nèi)某些物質(zhì)的抗體，能間接說明體內(nèi)感染了某些物質(zhì)，疾病診斷和觀察療效需要測定機體內(nèi)多種抗體物質(zhì)。隨著對疾病發(fā)生機理的研究深入，越來越多的疾病相關(guān)抗體被發(fā)現(xiàn)，常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右抗體物質(zhì)測定，遠遠不能滿足醫(yī)院實驗診斷未來發(fā)展的需要。發(fā)明人采用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次可以同時測定無數(shù)種待測抗體，發(fā)明人以同時測定n種(n大于l且小于正無窮)疾病相關(guān)抗體類為例，加以說明。l)自己生產(chǎn)或購買n種不同阻抗的可用來化學(xué)共價鍵標(biāo)記的乳膠磁性微球。2)將乳膠磁性微球按阻抗從小到大進行分類并編碼n種不同疾病相關(guān)抗體。3)制定n種不同阻抗磁性微球編碼待測抗體對應(yīng)表。4)自己購買或自己生產(chǎn)針對n種抗體的抗抗體或相對應(yīng)抗原。5)按照不同阻抗磁性微球編碼待測抗體對應(yīng)表,將n種可與n種待測抗體結(jié)合的n種抗抗體或相對應(yīng)抗原，分別共價鍵結(jié)合在n種不同阻抗的磁性微球表面，制作診斷磁性微球，1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去游離未標(biāo)記的抗抗體或相對應(yīng)抗原。n種診斷磁性微球用磷酸緩沖液洗滌后，按等比例混合，用磷酸緩沖液重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的n元阻抗診斷磁性微球混合液。6)將250微升n元阻抗診斷磁性微球混合液放入l毫升的離心管內(nèi)，再加250微升血清或其他測定標(biāo)本，充分混勻，37。C震蕩保溫l分鐘2小時，使磁性微球表面和樣品中待測抗體充分結(jié)合。7)離心管1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用PBS重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再去上清，對n元阻抗診斷磁性微球進行洗滌，徹底洗去離心管中游離的待測物質(zhì)。8)加入含有抗n種抗體的n種抗抗體或相對應(yīng)抗原磷酸緩沖液500毫升，37°C震蕩保溫30分鐘1小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測物質(zhì)反應(yīng)，重復(fù)第7)步，對磁性微球進行洗滌，棄去上清液。9)加入熒光標(biāo)記的抗n種抗抗體或相對應(yīng)抗原的抗體500毫升，37。C震蕩保溫45分鐘，與結(jié)合在磁性微球表面的抗體結(jié)合，重復(fù)步驟7)，徹底洗漆，留磁性微球沉淀。10)將磁性微球熒光測定緩沖液重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(測定項目)和磁性微球表面熒光強度(物質(zhì)含量)測定。11)結(jié)果判讀如果nl阻抗磁性微球表面熒光陽性，說明血清nl抗體陽性，熒光強度與nl抗體濃度呈正比。采用nl抗體標(biāo)準濃度做參比測定，可對nl進行準確定量。如果n種阻抗磁性微球，只有nl，n2,n3,n4,n5等五種阻抗磁性微球表面熒光同時陽性，說明血液內(nèi)同時存在nl,n2,n3,n4,ii5五種抗體物質(zhì)，其他n-5種抗體均陰性。如果n種阻抗磁性微球表面熒光信號均陽性，說明血液中同時存在n種抗體物質(zhì)。依次類推。如果要測n種抗體物質(zhì)，需要n種不同電阻的磁性微球，操作同上。上述技術(shù)方案只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料。3.疾病相關(guān)核酸類物質(zhì)測定測定某微生物的特異核酸片段，能夠特異診斷該微生物的存在。常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右核酸片段測定，遠遠不能滿足醫(yī)院實驗診斷未來發(fā)展的需要。發(fā)明人采用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次可以同時測定無數(shù)種特異核酸片段。發(fā)明人以同時測定n種(n大于l且小于正無窮)疾病相關(guān)DNA或RNA片段為例，加以說明。1)自己生產(chǎn)或購買n種不同阻抗的可用來化學(xué)共價鍵標(biāo)記的乳膠磁性微球。2)將乳膠磁性微球按阻抗從小到大進行分類并編碼n種不同疾病相關(guān)DNA或RNA片段。3)制定n種不同阻抗磁性微球編碼待測DNA或RNA片段對應(yīng)表。4)自己購買或自己生產(chǎn)針對n種待測DNA或RNA片段的互補DNA片段。5)按照n種不同阻抗磁性微球編碼不同疾病相關(guān)DNA或RNA片段對應(yīng)表,將n種可與n種待測DNA或RNA片段特異結(jié)合的n種不同互補DNA片段，分別共價鍵結(jié)合在n種不同阻抗的磁性微球表面，制作診斷磁性微球，1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去游離未標(biāo)記的互補DNA片段。n種診斷磁性微球用磷酸緩沖液充分洗滌后，按等比例混合，用磷酸緩沖液重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的n元阻抗磁性微球DNA探針混合液。6)將250微升n元阻抗磁性微球DNA探針混合液放入1毫升的離心管內(nèi)，再加250微升血清或其他測定標(biāo)本，充分混勻，37°C震蕩保溫1分鐘~12小時，使磁性微球表面和樣品中待測DNA或RNA充分結(jié)合。7)離心管1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用磷酸緩沖液重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再去上清，對n元阻抗磁性微球DNA探針混合液進行洗滌，徹底洗去離心管中游離的待測物質(zhì)。8)加入含有熒光或發(fā)光標(biāo)記的可與待測DNA或RNA互補序列結(jié)合的DNA片段磷酸緩沖液500毫升，37°(3震蕩保溫30分鐘~12小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測DNA或RNA互補DNA片段充分結(jié)合，重復(fù)第7)步，對磁性微球進行洗滌，棄去上清液。9)將磁性微球熒光測定緩沖液重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(測定項目)和磁性微球表面熒光強度(物質(zhì)含量)測定。10)結(jié)果判讀如果nl阻抗磁性微球表面熒光陽性，說明血清nl待測DNA或RNA片段陽性，熒光強度與nl待測DNA或RNA片段濃度呈正比。采用nl待測DNA或RNA片段標(biāo)準濃度做參比測定，可對nl待測DNA或RNA片段進行準確定量。如果n種阻抗磁性微球，只有nl,n2,n3,n4,n5等五種阻抗磁性微球表面熒光同時陽性，說明血液內(nèi)同時存在nl,n2，n3,n4，n5五種待測DNA或RNA片段，其他n-5種待測DNA或RNA片段均陰性。如果n種阻抗磁性微球表面熒光信號均陽性，說明血液中同時存在n種待測DNA或RNA片段。依次類推。本發(fā)明技術(shù)方案也適用于生物醫(yī)學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)中無數(shù)種待測DNA或RNA測定。如果要測n種待測DNA或RNA片段，需要n種不同電阻的磁性微球，操作同上。上述技術(shù)方案只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料。4.生物醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域應(yīng)用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)具有同時測定無數(shù)種待測物質(zhì)或未知物質(zhì)。在人類后基因年代，人體內(nèi)大量成千上萬種的DNA，RNA片段以及無數(shù)種已知抗原或抗體需要測定。人體內(nèi)DNA，RNA以及抗原物質(zhì)和抗體物質(zhì)復(fù)雜多樣，常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右物質(zhì)測定，遠遠不能滿足科研發(fā)展的需要。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次操作可以同時測定無數(shù)種待測物質(zhì)，借助龐大的計算機處理系統(tǒng)，將大大降低科研工作人員勞動強度，提高科研工作效率。7.4.1現(xiàn)以測定人類某種細胞內(nèi)全部己知mRNA種類為例，說明阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在基因組學(xué)中的應(yīng)用。l)假設(shè)該細胞基因組共有n種(n可為任意整數(shù))基因表達，且堿基序列明確。2)購買或自己生產(chǎn)n種不同阻抗可供核酸標(biāo)記的乳膠磁性微球，并設(shè)定n種不同阻抗磁性微球分別編碼和代表n種待測mRNA。3)制定n種不同阻抗磁性微球編碼n種不同待測mRNA對應(yīng)表。4)購買或自己合成n種待測mRNA的互補堿基序列DNA。5)按照制定n種不同阻抗磁性微球編碼n種不同待測mRNA對應(yīng)表，將購買或自己合成的n種待測mRNA的互補堿基序列DNA片段，分別共價結(jié)合在相應(yīng)n種阻抗磁性微球表面。1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去游離未標(biāo)記的DNA片段，用磷酸緩沖液重懸，1500g再離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，保留沉淀中的診斷磁性微球。n種不同阻抗診斷磁性微球分別用磷酸緩沖液洗滌，按等比例混合，用含雜交緩沖液進行重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的n種磁性微球DNA探針。6)取n種不同阻抗磁性微球等體積混合均勻，制作n種不同阻抗磁性微球DNA探針。7)取n種不同阻抗診斷磁性微球250微升放入1毫升的離心管內(nèi)，再加250微升細胞總RNA提取物，充分混勻，37°C震蕩保溫1分鐘~20小時，使磁性微球表面已知DNA和樣品中待測RNA充分雜交結(jié)合。8)1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用磷酸緩沖液重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再去上清，對n種阻抗磁性微球進行洗滌，徹底洗去離心管中未與磁性微球表面DNA結(jié)合的游離待測RNA片段。9)加入含有熒光或發(fā)光標(biāo)記的針對待測DNA或RNA互補DNA片段的雜交緩沖液500毫升，37。C震蕩保溫30分鐘l小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測RNA雜交結(jié)合，重復(fù)第8)步，對磁性微球進行徹底洗滌，棄去上清液未雜交上的游離熒光或發(fā)光物質(zhì)DNA片段，保留磁性微球沉淀。10)將磁性微球熒光或發(fā)光測定緩沖液，重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光或發(fā)光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(n種測定項目)和磁性微球表面熒光強度(待測RNA含量)測定。11)結(jié)果判讀如果nl阻抗磁性微球表面光信號陽性，說明該細胞al基因陽性表達。n2阻抗磁性微球表面光信號陽性，表明該細胞a2基因陽性表達，依次類推。如果，nl,n2，n3,n4，n5等阻抗磁性微球表面光信號全部陽性，表明肝細胞內(nèi)al,a2，a3,a4,a5基因同時陽性表達，而其他n-5種基因表達均陰性。依次類推。如果要測更多種mRNA物質(zhì)，需要更多種不同電阻的磁性微球，操作同上。以上操作事例只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料和文獻。以上方案也用于測定生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域無數(shù)種特異DNA片段,抗原或抗體片段。7.4.2現(xiàn)以測定人類正常細胞內(nèi)未知mRNA為例，說明阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在基因組學(xué)中的應(yīng)用。最近研究發(fā)現(xiàn)，人類基因雖然數(shù)量龐大，但是有限的，而人類蛋白質(zhì)的數(shù)量幾乎是無限的。由于基因轉(zhuǎn)錄后的加工和修飾等作用，編碼蛋白的信使RNA(mRNA)數(shù)量也遠遠大于基因數(shù)量。大部分mRNA和基因序列人類并不清楚，如何發(fā)現(xiàn)未知基因、未知mRNA和未知蛋白質(zhì)是人類后基因組時代面臨的技術(shù)難題。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)同時可以檢測無數(shù)種DNA或RNA片段，為解決直接尋找未知基因提供實驗手段。發(fā)明人以尋找人類某種細胞內(nèi)未知基因(mRNA)為例，說明阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在尋找未知基因中的用途。用無數(shù)種隨機探針(已標(biāo)記的己知DNA片段)在細胞cDNA文庫中，直接篩選出未知基因，目前技術(shù)均難以做到。本發(fā)明用無數(shù)種不同電阻磁性微球，采用計算機編碼無數(shù)種待測基因，制備無數(shù)種隨機探針，就能從理論上篩選出所有的未知基因。本發(fā)明的技術(shù)具有無限通量的特征，正好滿足用無數(shù)個隨機探針在細胞cDNA文庫中篩選未知基因的技術(shù)要求。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)篩選未知基因的方法如下1)分無數(shù)次進行，每次生產(chǎn)n種(n為任意整數(shù))不同阻抗磁性微球，2)計算機自動將磁性微球從阻抗數(shù)值從小到大記錄。3)每次合成n種7個以上的隨機寡核苷酸片段。4)計算機按阻抗大小排序，并分別編碼n種人工自動合成的隨機寡核苷酸片段所對應(yīng)的目的基因片段。5)按照阻抗編碼對照表，將隨機合成的n種7個以上的寡核苷酸片段分別標(biāo)記在n種不同阻抗的磁性微球表面。6)通過阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析裝置，分析磁性微球表面陽性信號，并根據(jù)磁性微球阻抗數(shù)值及其磁性微球阻抗編碼cDNA序列對應(yīng)表，確定未知cDNA片段。7)重復(fù)步驟l)到步驟6)，直到篩選出未知基因片段。生產(chǎn)不同阻抗磁性微球，磁性微球表面標(biāo)記寡核苷酸片段，以及磁性微球表面陽性信號及阻抗數(shù)值判斷等操作均可以自動完成。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)可用于篩選未知基因。本發(fā)明適合目前和未來生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域包括醫(yī)院、科研機構(gòu)等建立在抗原抗體反應(yīng)和核酸分子雜交技術(shù)上的所有項目(如ELISA項目，放射或發(fā)光免疫項目和基因檢測項目等)的測定。應(yīng)用領(lǐng)域涉及蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)以及各種疾病實驗診斷和療效觀察所需要測定的機體自身產(chǎn)生或外來的各種蛋白質(zhì)、多肽和脂類和糖類物質(zhì)測定。本發(fā)明的阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)(阻抗變量液態(tài)生物芯片)是建立在磁性微球表面平臺檢測技術(shù)上的一次革命，不同阻抗磁性微球代表不同測定項目使本發(fā)明測定項目無限多，磁性微球光信號強度代表測定物質(zhì)含量，使定量準確易于質(zhì)量控制。磁性微球阻抗測定和磁性微球表面光信號測定原理簡單，診斷試劑盒研制和實驗診斷設(shè)備開發(fā)技術(shù)成熟，是一項值得在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域進行推廣應(yīng)用的新發(fā)明。本發(fā)明及其應(yīng)用滿足了生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域不斷增長的待測物質(zhì)種類要求。具有快速準確，定量，易于質(zhì)量控制等優(yōu)點。本發(fā)明用阻抗變量磁性微球替代顏色變量微球，使微球特征更穩(wěn)定。磁性微球可以不通過人工離心，直接在強磁場作用下迅速沉淀，易于微球處理和檢測的全程自動化操作。由于微球電阻變化信息量從理論上是無限的，從而提高芯片檢測項目的無限性，是真正意義上的生物芯片。測定微球電阻的技術(shù)比判讀微球顏色技術(shù)，要成熟和簡單，目前國內(nèi)試劑和儀器開發(fā)產(chǎn)業(yè)，能完全滿足本發(fā)明的液態(tài)芯片技術(shù)的測定原理，完全能夠制造出測定試劑盒和相應(yīng)的檢測設(shè)備，為讓全世界能夠生產(chǎn)出液態(tài)芯片高科技技術(shù)，打破發(fā)達國家技術(shù)壟斷，面向全世界醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)推廣，創(chuàng)造條件。本發(fā)明是一種實用性的巨大創(chuàng)新，最大特點是1)無限通量。采用不同阻抗表示(編碼)不同測定項目，阻抗變量無限多，決定同時測定的項目無限多，保證科研和臨床需要的無限通量測定技術(shù)要求。無數(shù)種待測物質(zhì)或未知物質(zhì)一次操作完成。2)穩(wěn)定性好。磁性微球電阻測定技術(shù)成熟，實驗誤差小，結(jié)果精密度高。3)易于保存。生產(chǎn)的不同阻抗磁性微球比不同顏色微球保存更穩(wěn)定，制作工藝更簡單，來源更方便。4)靈敏度高。磁性微球本身不帶顏色，不會干擾磁性微球表面光信號的定量測定，極微量熒光信號就能檢測到陽性信號。5)自動化程度高。本發(fā)明采用的磁性微球可在強磁場作用下，迅速發(fā)生沉淀，不需要人工離心，可實現(xiàn)從加樣到打印報告的全程操作化。6易于生產(chǎn)和推廣。磁性微球電阻及表面熒光信號測定技術(shù)成熟。見表l。表1:本發(fā)明的阻抗變量液態(tài)芯片是與美國發(fā)明的顏色變量液態(tài)芯片技術(shù)比較<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>本發(fā)明優(yōu)點和用途如下本發(fā)明的液態(tài)生物芯片與國內(nèi)成熟的固態(tài)生物芯片技術(shù)、ELISA技術(shù)和放射免疫(RIA)技術(shù)比較，具有無一替代的優(yōu)良品質(zhì)(見表3)。主要表現(xiàn)在以下幾個方面1不同阻抗乳膠磁性微球，穩(wěn)定，保存時間長。2自動化程度高。磁性微球可在強磁場作用下，迅速發(fā)生沉淀，可不用離心即可分離和洗滌磁性微球。3磁性微球阻抗大小判讀簡單。用微孔阻抗法血球計數(shù)儀即可進行測定。在微孔兩端加一個電壓，當(dāng)磁性微球進入微孔的時候，就會產(chǎn)生一個電流脈沖，不同阻抗的磁性微球產(chǎn)生的電流脈沖不同。4合成磁性微球原料與導(dǎo)電物質(zhì)比例不同，磁性微球電阻從理論上可以有無數(shù)種變化，決定著本發(fā)明從理論上可以同時測定無數(shù)種待測物質(zhì)。5磁性微球表面光信號檢測技術(shù)成熟。普通流式細胞儀就可以完成對磁性微球表面光信號的定量測定。6本發(fā)明的磁性微球阻抗變量液態(tài)生物芯片測定所需要的設(shè)備，在機械設(shè)計和工作原理上，是細胞計數(shù)儀和流式細胞儀的結(jié)合，該設(shè)備在國內(nèi)能夠完成開發(fā)和生產(chǎn)。表3:本發(fā)明的技術(shù)與國內(nèi)成熟的技術(shù)比較<table>complextableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>本發(fā)明方法操作簡單，所需技術(shù)均成熟可靠。專利合作或轉(zhuǎn)讓對象為1.國內(nèi)外診斷試劑研究和開發(fā)人員。2.國內(nèi)外實驗診斷設(shè)備研究和開發(fā)人員。3.血球計數(shù)儀生產(chǎn)廠家。4.流式細胞分析儀生產(chǎn)廠家。5.磁性微球合成與生產(chǎn)廠家。6.乳膠診斷試劑生產(chǎn)廠家。7.醫(yī)院檢驗科。8.醫(yī)學(xué)院?？蒲袉挝?。9.計算機軟件研究與開發(fā)人員。10.綜合具備上面所有專業(yè)的單位和個人實體。圖1是含有不同導(dǎo)電物質(zhì)濃度的磁性微球示意圖。導(dǎo)電物質(zhì)含量越高，電阻越小，反之亦然。圖2是雙心磁性微球示意圖。同樣體積磁性微球中導(dǎo)電核心體積越大，阻抗越小，反之亦然。圖3是不同阻抗系列診斷磁性微球。不同電阻磁性微球表面攜帶不同特異性抗體、抗原、DNA或RNA物質(zhì)。*代表不同的抗體、抗原、DNA或RNA物質(zhì)。圖4是阻抗變量無限制通量診斷磁性微球檢測方法原理示意圖。圖5是阻抗變量無限制通量診斷磁性微球檢測裝置工作原理示意圖。圖6是阻抗變量無限制通量診斷磁性微球軟件分析系統(tǒng)工作原理示意圖。Q表示磁性微球阻抗大小，不同阻抗編碼不同待測物質(zhì)?？驳吕?cd，candela)表示磁性微球表面光信號強度，光信號強度代表待測物質(zhì)含量。具體實施例實施伊J1、疾病相關(guān)抗原類測定疾病診斷和觀察療效需要測定機體內(nèi)多種抗原物質(zhì)。隨著對疾病發(fā)生機理的研究深入，越來越多的疾病相關(guān)抗原被發(fā)現(xiàn)，常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右抗原物質(zhì)測定，遠遠不能滿足醫(yī)院實驗診斷未來發(fā)展的需要。發(fā)明人采用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次可以同時測定無數(shù)種待測抗原。發(fā)明人以同時測定乙型肝炎病毒三項抗原物質(zhì)(HBsAg，HBeAg，HbcAg)為例，加一說明。1)自己生產(chǎn)或購買不同阻抗的可用來化學(xué)共價鍵標(biāo)記的乳膠磁性微球。2)將乳膠磁性微球分為低阻抗，中阻抗和高阻抗三種。3)自己購買或自己生產(chǎn)抗HBsAg，HBeAg和HbcAg三種單克隆抗體。4)將抗HBsAg，HBeAg和HbcAg三種單克隆抗體，分別共價鍵結(jié)合在低、中、高三種不同阻抗的磁性微球表面，制作診斷磁性微球，1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去游離未標(biāo)記的抗體。三種診斷磁性微球用磷酸緩沖液(PBS)洗滌，按等比例混合，用含抗原抗體反應(yīng)PBS緩沖液進行重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的三元磁性微球液態(tài)芯片。5)將250微升三元磁性微球芯片放入1毫升的離心管內(nèi)，再加250微升血清或其他測定標(biāo)本，充分混勻，37。C震蕩保溫l分鐘2小時，使磁性微球表面抗體和樣品中待測抗原充分結(jié)合。6)離心管1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用PBS重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再去上清，對三元阻抗磁性微球芯片進行洗滌，徹底洗去離心管中游離的待測物質(zhì)。7)加入含有抗HBsAg,HBeAg和HbcAg三種單克隆抗體PBS溶液500毫升，37°C震蕩保溫30分鐘1小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測物質(zhì)反應(yīng)，重復(fù)第6)步，對磁性微球進行洗滌，棄去上清液。8)加入熒光標(biāo)記的抗人免疫球蛋白抗體(抗抗體)500毫升，37。C震蕩保溫45分鐘，與結(jié)合在磁性微球表面的抗體結(jié)合，重復(fù)步驟6)，徹底洗滌，留磁性微球沉淀。9)將磁性微球熒光測定緩沖液重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(測定項目)和磁性微球表面熒光強度(物質(zhì)含量)測定。10)結(jié)果判讀如果低阻抗磁性微球表面熒光陽性，說明血清HBsAg陽性，熒光強度與HBsAg,濃度呈正比。采用標(biāo)準HBsAg濃度做參比測定，可對HBsAg,進行準確定量。如果低阻抗和高阻抗表面熒光同時陽性，說明血液內(nèi)同時存在HBsAg和HbcAg，依次類推。以上操作事例只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料。如果要測n種抗原物質(zhì)，需要n種不同電阻的磁性微球，操作同上。實施伊J2、疾病相關(guān)抗體類測定測定體內(nèi)某些物質(zhì)的抗體，能間接說明體內(nèi)感染了某些物質(zhì)，疾病診斷和觀察療效需要測定機體內(nèi)多種抗體物質(zhì)。隨著對疾病發(fā)生機理的研究深入，越來越多的疾病相關(guān)抗體被發(fā)現(xiàn)，常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右抗體物質(zhì)測定，遠遠不能滿足醫(yī)院實驗診斷未來發(fā)展的需要。發(fā)明人采用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次可以同時測定無數(shù)種待測抗體，我們以同時測定甲型肝炎病毒(HAV)抗體、乙型肝炎病毒(HBV)抗體和丙型肝炎病毒(HCV)抗體和愛滋病病毒(HIV)抗體為例，進行說明。1)購買或自己生產(chǎn)4種不同阻抗(nl,n2,n3，n4)特征的可供共價交聯(lián)抗原蛋白質(zhì)的乳膠磁性微球。2)購買或自己生產(chǎn)基因工程產(chǎn)品HAV、HBV、HCV、HIV特異抗原片段或滅活病毒蛋白顆粒。3)預(yù)設(shè)nl，n2,n3,n4阻抗乳膠磁性微球分別代表測定HAV、HBV、HCV、HIV四種抗體。4)分別將HAV、HBV、HCV、HIV抗原片段化學(xué)共價標(biāo)記在nl,n2,n3,n4四種阻抗乳膠磁性微球表面。制作四元診斷磁性微球，1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去游離未標(biāo)記的抗原。四種診斷磁性微球用磷酸緩沖液(PBS)洗滌，按等比例混合，用含抗原抗體反應(yīng)PBS緩沖液進行重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的四元磁性微球液態(tài)芯片。5)將250微升四元磁性微球芯片放入1毫升的離心管內(nèi)，再加250微升血清或其他測定標(biāo)本，充分混勻，37。C震蕩保溫l分鐘2小時，使磁性微球表面抗原和樣品中待測抗體充分結(jié)合。6)1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用PBS重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再棄去上清，對四元阻抗磁性微球芯片進行洗滌，徹底洗去離心管中游離的待測抗體。7)加入含有熒光或發(fā)光物質(zhì)特異標(biāo)記的HAV、HBV、HCV、HIV.四種特異抗原的PBS溶液500毫升，37。C震蕩保溫30分鐘1小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測抗體反應(yīng)，重復(fù)第6)步，對磁性微球進行徹底洗滌，棄去上清液，保留磁性微球沉淀。8)將磁性微球熒光或發(fā)光測定緩沖液，重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光或發(fā)光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(測定項目)和磁性微球表面熒光強度(物質(zhì)含量)測定。9)結(jié)果判讀如果nl阻抗磁性微球表面熒光陽性，說明血清HAV抗體陽性，熒光強度與HAV抗體濃度呈正比。采用HAV抗體標(biāo)準濃度做參比測定，可對HAV抗體進行準確定量。如果n2、n3和n3阻抗磁性微球表面熒光同時陽性，說明血液內(nèi)同時存在HAV抗體、HBV抗體、HCV抗體和HIV抗體，依次類推。以上操作事例只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料和文獻。如果要測n種抗體物質(zhì)，需要n種不同電阻的磁性微球，操作同上。實施伊J3、疾病相關(guān)核酸類物質(zhì)測定測定某微生物的特異核酸片段，能夠特異診斷該微生物的存在。常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右核酸片段測定，遠遠不能滿足醫(yī)院實驗診斷未來發(fā)展的需要。發(fā)明人采用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次可以同時測定無數(shù)種特異核酸片段。發(fā)明人以同時測定乳頭瘤狀病毒、衣原體、支原體特異DNA片段為例，進行說明。1)購買或自己生產(chǎn)不同阻抗可供核酸(DNA)標(biāo)記的乳膠磁性微球。2)設(shè)定不同阻抗微球(nl,n2,n3和n4)分別代表乳頭瘤狀病毒、衣原體、支原體和乙肝病毒特異DNA片段測定項目。3)購買或自己合成乳頭瘤狀病毒、衣原體、支原體和乙肝病毒特異DNA片段互補堿基序列DNA。4)將乳頭瘤狀病毒、衣原體、支原體和乙肝病毒特異DNA片段互補堿基序列DNA片段，共價結(jié)合在相應(yīng)阻抗磁性微球表面，制作基因診斷磁性微球。5)1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去游離未標(biāo)記的抗原。四種診斷磁性微球用磷酸緩沖液(PBS)洗滌，按等比例混合，用含抗原抗體反應(yīng)PBS緩沖液進行重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的四元磁性微球液態(tài)芯片。6)將250微升四元磁性微球基因芯片放入1毫升的離心管內(nèi)，再加250微升血清或其他測定標(biāo)本(如陰道分泌物與生理鹽水l:l混合)，充分混勻，37°C震蕩保溫1分鐘~2小時，使磁性微球表面已知DNA和樣品中待測DNA充分雜交結(jié)合。7)1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用PBS重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再棄去上清，對四元阻抗磁性微球基因芯片進行洗滌，徹底洗去離心管中未與乳膠表面DNA雜交上的游離待測DNA片段。8)加入含有熒光或發(fā)光物質(zhì)特異標(biāo)記的乳頭瘤狀病毒、衣原體、支原體和乙肝病毒特異DNA片段(多元探針)的雜交緩沖液500毫升，37°C震蕩保溫30分鐘~1小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測DNA雜交，重復(fù)第7)步，對磁性微球進行徹底洗滌，棄去上清液未雜交上的游離探針，保留磁性微球沉淀。9)將磁性微球熒光或發(fā)光測定緩沖液，重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光或發(fā)光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(測定項目)和磁性微球表面熒光強度(DNA含量)測定。10)結(jié)果判讀如果nl阻抗磁性微球表面熒光陽性，說明血清人類乳頭瘤狀病毒DNA陽性，熒光強度與DNA濃度呈正比。采用人類乳頭瘤狀病毒DNA片段標(biāo)準濃度做參比測定，可對人類乳頭瘤狀病毒DNA進行準確定量。如果nl、n2、n3和n4阻抗磁性微球表面熒光同時陽性，說明血液內(nèi)同時存在人類乳頭瘤狀病毒、衣原體、支原體和乙肝病毒特異DNA片段，依次類推。以上操作事例只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料和文獻。如果要測n種基因物質(zhì)，需要n種不同電阻的磁性微球，操作同上。以上方案也可測定特異RNA片段。實施伊J4、生物醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域應(yīng)用阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)具有同時測定無數(shù)種待測物質(zhì)或未知物質(zhì)。在人類后基因年代，人體內(nèi)大量成千上萬種的DNA，RNA片段以及無數(shù)種已知抗原或抗體需要測定。人體內(nèi)DNA,RNA以及抗原物質(zhì)和抗體物質(zhì)復(fù)雜多樣，常規(guī)方法包括顏色編碼的診斷磁性微球定量測定系統(tǒng)一次也只能完成100種左右物質(zhì)測定，遠遠不能滿足科研發(fā)展的需要。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)一次操作可以同時測定無數(shù)種待測物質(zhì)，借助龐大的計算機處理系統(tǒng)，將大大降低科研工作人員勞動強度，提高科研工作效率?，F(xiàn)以測定人類正常肝細胞內(nèi)全部已知mRNA種類為例，說明阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在肝臟基因組學(xué)中的應(yīng)用。1)假設(shè)肝細胞基因組共有100萬個基因表達，且堿基序列明確。2)購買或自己生產(chǎn)100萬種不同阻抗可供核酸標(biāo)記的乳膠磁性微球，并設(shè)定100萬種不同阻抗(nl,n2,n3....)磁性微球分別代表100萬種待測mRNA(al，a2，a3……)。3)購買或自己合成100萬種待測mRNA的互補堿基序列DNA。4)將購買或自己合成100萬種待測mRNA的互補堿基序列DNA片段，共價結(jié)合在相應(yīng)100萬種阻抗磁性微球表面。1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去游離未標(biāo)記的DNA片段，用磷酸緩沖液重懸，1500g再離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄上清，保留沉淀中的診斷磁性微球。100萬種不同阻抗診斷磁性微球分別用磷酸緩沖液(PBS)洗滌，按等比例混合，用含抗原抗體反應(yīng)PBS緩沖液進行重懸，制成每升含105個磁性微球濃度的100萬種磁性微球診斷試劑。5)取100萬種每升含105個磁性微球濃度不同阻抗磁性微球等體積混合均勻，制作阻抗變量100萬通量診斷磁性微球。6)取阻抗變量100萬通量診斷磁性微球(每升含105個磁性微球濃度)250微升放入1毫升的離心管內(nèi)，再加250微升肝細胞總RNA提取物，充分混勻，37。C震蕩保溫l分鐘~2小時，使磁性微球表面己知DNA和樣品中待測RNA充分雜交結(jié)合。7)1500g離心10分鐘或放置在磁性板上靜止2-12小時，棄去上清，用磷酸緩沖液重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時，再去上清，對阻抗變量100萬通量診斷磁性微球進行洗滌，徹底洗去離心管中未與乳膠表面DNA雜交上的游離待測RNA片段。8)加入含有100萬種熒光或發(fā)光物質(zhì)特異標(biāo)記的待測mRNA的互補堿基序列DNA片段的雜交緩沖液500毫升，37。C震蕩保溫30分鐘1小時，使它們分別與結(jié)合在磁性微球上的待測RNA雜交，重復(fù)第7)步，對磁性微球進行徹底洗滌，棄去上清液未雜交上的游離熒光或發(fā)光物質(zhì)特異標(biāo)記的待測mRNA的互補堿基序列DNA片段，保留磁性微球沉淀。9)將磁性微球熒光或發(fā)光測定緩沖液，重懸磁性微球沉淀，使用能同時測定磁性微球阻抗和磁性微球表面熒光或發(fā)光強度的設(shè)備，進行磁性微球阻抗(100萬種測定項目)和磁性微球表面熒光強度(RNA含量)測定。10)結(jié)果判讀如果nl阻抗磁性微球表面光信號陽性，說明肝細胞al基因陽性表達。n2阻抗磁性微球表面光信號陽性，表明肝細胞a2基因陽性表達，依次類推。如果，nl,n2阻抗磁性微球表面光信號全部陽性，表明肝細胞內(nèi)al,a2基因同時陽性表達。如果，111,112，113....100萬種磁性微球表面光信號均陽性，表明肝細胞內(nèi)al,a2,a3，......等100萬種基因均陽性表達。以上操作事例只起示范作用，具體詳見有關(guān)技術(shù)資料和文獻。如果要測更多種mRNA物質(zhì)，需要更多種不同電阻的磁性微球，操作同上。以上方案也用于測定無數(shù)種特異DNA片段,抗原或抗體片段。實施伊j5、現(xiàn)以測定人類正常肝細胞內(nèi)未知mRNA為例，說明阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在肝臟基因組學(xué)中的應(yīng)用。最近研究發(fā)現(xiàn)，人類基因雖然數(shù)量龐大，但是有限的，而人類蛋白質(zhì)的數(shù)量幾乎是無限的。由于基因轉(zhuǎn)錄后的加工和修飾等作用，編碼蛋白的信使RNA(mRNA)數(shù)量也遠遠大于基因數(shù)量。大部分mRNA和基因序列人類并不清楚，如何發(fā)現(xiàn)未知基因、未知mRNA和未知蛋白質(zhì)是人類后基因組時代面臨的技術(shù)難題。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)同時可以檢測無數(shù)種DNA或RNA片段，為解決直接尋找未知基因提供實驗手段。發(fā)明人以尋找肝細胞內(nèi)未知基因(mRNA)為例，說明阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)在尋找未知基因中的用途。一般技術(shù)難以做到，用無數(shù)個隨機探針(已標(biāo)記的已知DNA片段)在細胞cDNA文庫中，篩選出未知基因。對于一種隨機探針篩選出未知基因的概率無疑是"大海撈針"，但用無數(shù)種隨機探針，就能從理論上篩選出所有的未知基因。本發(fā)明的技術(shù)具有無限通量的特征，正好滿足用無數(shù)個隨機探針在細胞cDNA文庫中篩選未知基因的技術(shù)要求。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)篩選未知基因的方法如下1)每次生產(chǎn)ioo萬不同阻抗的磁性微球，分無數(shù)次進行。2)計算機自動將磁性微球從阻抗數(shù)值從小到大記錄。3)每次隨機合成100萬種7個以上的寡核苷酸片段。4)計算機按阻抗大小排序并分別編碼100萬種人工自動合成的不同寡核苷酸片段所代表的目的基因片段。5)按阻抗編碼，將隨機合成的100萬種7個以上的寡核苷酸片段分別標(biāo)記在100萬不同阻抗的磁性微球表面。6)通過阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析裝置，分析磁性微球表面陽性信號，并根據(jù)阻抗數(shù)值確定未知cDNA片段。7)重復(fù)步驟1)到步驟6)，直到篩選出未知基因片段。生產(chǎn)不同阻抗磁性微球，磁性微球表面標(biāo)記寡核苷酸片段，以及磁性微球表面陽性信號及阻抗數(shù)值判斷等操作均可以自動完成。阻抗變量無限制通量診斷磁性微球定量分析系統(tǒng)可用于篩選未知基因。權(quán)利要求1、一種阻抗變量無限制通量診斷磁性微球，包括乳膠磁性微球，其特征在于診斷磁性微球具有磁性并含不同濃度的導(dǎo)電物質(zhì)，包括金屬和碳粉末，導(dǎo)電物質(zhì)與含有磁性物質(zhì)的乳膠原料是按任意比例進行混合。2、如權(quán)利要求1所述阻抗變量無限制通量診斷磁性微球，其特征在于l)無數(shù)種不同阻抗系列診斷微球均具有磁性并在磁場作用下發(fā)生沉淀，2)不同阻抗系列診斷磁性微球表面共價結(jié)合不同特異性抗原、抗體或特異DNA片段，3)相同阻抗系列診斷磁性微球表面共價結(jié)合相同特異性抗原、抗體或特異DNA片段，4)診斷磁性微球表面共價結(jié)合的特異性抗原、抗體或特異DNA或RNA片段，是針對正常人或患者機體內(nèi)具有診斷、判斷療效和科研價值的待測相應(yīng)抗體，抗原、DNA或RNA片段。3、如權(quán)利要求1或2所述的阻抗變量無限制通量診斷磁性微球的制備方法，其特征在于1)將導(dǎo)電物質(zhì)和磁性微球合成原料按任意比例進行混合，生產(chǎn)出不同電阻特征的乳膠磁性微球，2)按不同阻抗數(shù)值或范圍的磁性微球代表不同待測物質(zhì)，制訂不同阻抗或范圍磁性微球編碼不同待測物質(zhì)對應(yīng)表，3)按照不同阻抗或范圍磁性微球代表不同待測物質(zhì)對應(yīng)表，將不同阻抗或范圍磁性微球表面，標(biāo)記不同的特異性抗原、抗體、特異DNA或RNA片段。4、如權(quán)利要求書3所述的不同阻抗數(shù)值或范圍的磁性微球代表不同待測物質(zhì)，其特征在于l)待測物質(zhì)為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，包括診斷疾病，觀察藥物療效以及科研需要的待測物質(zhì)或未知物質(zhì);2)制備無數(shù)種不同阻抗磁性微球可代表或編碼無數(shù)種不同待測物質(zhì)；3)磁性微球阻抗不同范圍系列可代表不同系列待測物質(zhì)種類。5、一種如權(quán)利要求1或2所述的阻抗變量無限制通量診斷磁性微球的檢測方法，其特征在于1)將不同阻抗系列診斷磁性微球與待測樣品混合，進行抗原抗體特異結(jié)合和核酸分子雜交，然后用磷酸緩沖液洗滌磁性微球；2)將洗滌后磁性微球與熒光或其它發(fā)光物標(biāo)記的特異抗體、抗原或DNA片段，進行特異結(jié)合，使不同阻抗診斷磁性微球表面出現(xiàn)熒光或發(fā)光信號，熒光或發(fā)光磁性微球經(jīng)離心或放置在磁性板上吸引磁性微球沉淀后，再用磷酸緩沖液洗滌重新懸??；3)洗滌后不同阻抗系列熒光或發(fā)光診斷磁性微球，通過磁性微球阻抗分析，根據(jù)不同阻抗或范圍磁性微球編碼不同待測物質(zhì)對應(yīng)表，判斷檢測物質(zhì)種類；4)洗滌后不同阻抗系列免疫熒光或發(fā)光磁性微球，通過磁性微球表面光信號強度分析，根據(jù)己知標(biāo)準品濃度，計算待測物質(zhì)含量。6、如權(quán)利要求5所述的檢測方法，其特征在于將10%濃度的無數(shù)種不同阻抗系列診斷磁性微球，放入離心管中，加入足量待測樣品或標(biāo)準品，35—39'C溫育，2000g離心5-8分鐘或放置在磁性板上2-12小時使磁性微球完全沉淀，用磷酸緩沖液洗滌2次，棄去上清液，用磷酸緩沖液重懸；再加入熒光或發(fā)光素標(biāo)記的抗體、抗原或DNA片段，35—39'C溫育30-60分鐘，2000g離心5-8分鐘，或放置在磁性板上靜止2-12小時使磁性微球完全沉淀，棄去上清液，留取磁性微球，用磷酸緩沖液進行重懸，再離心或放置在磁性板上靜止2-12小時使磁性微球完全沉淀，再用磷酸緩沖液重懸。7、如權(quán)利要求5所述的檢測方法，其特征在于對結(jié)合熒光或發(fā)光物質(zhì)的不同阻抗系列診斷磁性微球，經(jīng)磷酸緩沖液洗滌重懸后，加入熒光或發(fā)光測定試劑，通過磁性微球阻抗測定裝置測定其阻抗，通過磁性微球表面熒光或發(fā)光強度檢測裝置檢測熒光或發(fā)光強度；通過磁性微球阻抗測定判斷待測物質(zhì)種類，通過熒光或發(fā)光信號強度測定判斷待測物質(zhì)含8、如權(quán)利要求7所述的檢測方法，其特征在于利用一種同時檢測無數(shù)種不同阻抗系列診斷磁性微球阻抗大小和磁性微球表面熒光或發(fā)光信號強度的裝置，該裝置包括三個部分，第一部分是磁性微球阻抗定量測定裝置，能測定通過微孔的單個磁性微球電阻大?。坏诙糠质谴判晕⑶虮砻鏌晒饣虬l(fā)光信號定量檢測裝置，能測定無數(shù)種不同阻抗系列單個磁性微球表面光信號強度；第三部分是軟件分析系統(tǒng)，能接收單個磁性微球阻抗信號以及該磁性微球表面熒光或發(fā)光信號，根據(jù)不同阻抗磁性微球編碼不同待測物質(zhì)對應(yīng)關(guān)系，判斷待測物質(zhì)種類，根據(jù)已知標(biāo)準品含量的磁性微球光信號強度，計算待測物質(zhì)含量。9、如權(quán)利要求書8所述的一種同時檢測無數(shù)種不同阻抗系列診斷磁性微球阻抗大小和磁性微球表面熒光或發(fā)光信號強度的裝置，其特征在于l)磁性微球阻抗定量測定裝置，磁性微球表面熒光或發(fā)光信號定量檢測裝置，以及軟件分析系統(tǒng)，是統(tǒng)一而不是分離的系統(tǒng)裝置；2)所述軟件分析系統(tǒng)是首先預(yù)設(shè)不同系列磁性微球阻抗范圍編碼不同系列測定項目，不同磁性微球阻抗數(shù)值編碼不同待測物質(zhì)種類，然后根據(jù)磁性微球阻抗值判斷待測物質(zhì)，根據(jù)磁性微球表面熒光或發(fā)光信號，以標(biāo)準物做參比，計算待測物質(zhì)含量，并將數(shù)據(jù)傳輸給打印機，自動打印無數(shù)種待測物質(zhì)含量結(jié)果報告。10、如權(quán)利要求7所述的阻抗變量無限制通量診斷磁性微球在生物醫(yī)學(xué)中的用途，其特征在于可同時定量測定同一份標(biāo)本中無數(shù)種用于診斷疾病，觀察藥物療效和科研的抗原類，抗體類或核酸類等待測物質(zhì)或未知物質(zhì)。全文摘要本發(fā)明涉及阻抗變量無限制通量診斷磁性微球及其制備方法和檢測方法以及在生物醫(yī)學(xué)中的用途。項目采用無數(shù)種不同阻抗磁性微球編碼無數(shù)種不同待測物質(zhì)種類，即無限制通量，磁性微球表面光信號強度代表待測物質(zhì)含量，利用同時檢測磁性微球阻抗和磁性微球表面光信號裝置，借助軟件分析系統(tǒng)，同時檢測一份樣本中無數(shù)種待測物質(zhì)，滿足日益發(fā)展的臨床診斷和生物醫(yī)學(xué)科研的無限要求。項目屬于建立在免疫學(xué)反應(yīng)和核酸分子雜交反應(yīng)基礎(chǔ)上的一種新的技術(shù)平臺，是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域一次技術(shù)革命，廣泛用于診斷疾病、判斷藥物療效以及基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等生物醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域。文檔編號G01N33/546GK101349690SQ20071030697公開日2009年1月21日申請日期2007年12月29日優(yōu)先權(quán)日2007年12月29日發(fā)明者于永洲,馮青青,柴長春,潘小清,熊曉平,志王,王占科,祝仲珍,群肖,胡揚濤,雷萬生申請人:王占科