專利名稱：：分析用具中的試劑層的形成方法、分析用具的制造方法及分析用具的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種具備試劑層的分析用具及形成試劑層的技術(shù)。
背景技術(shù)：
：作為樣品的分析方法，包括例如利用光學(xué)方法或電化學(xué)手法分析己使樣品與試劑反應(yīng)后的反應(yīng)液的手法。在利用這些手法進(jìn)行樣品的分析的情況下，可以使用提供反應(yīng)場所的分析用具。這種情況下的分析用具被安裝于用于分析反應(yīng)液的分析裝置中進(jìn)而被使用，但還要具備用于使其與樣品反應(yīng)的試劑層。試劑層通常是通過在對基材點(diǎn)著試劑含有液之后使試劑含有液干燥來形成的。試劑含有液的組成是由成為測定對象的成分或適用的樣品的分析手法等來決定的。例如在測定對象為葡萄糖等生物成分的情況下，要含有氧化還原酶，在利用光學(xué)方法進(jìn)行樣品的分析的情況下，要含有顯色劑。另一方面，試劑含有液的干燥通常是通過自然干燥、在低濕度條件下的干燥(例如參照專利文獻(xiàn)l)或利用溫風(fēng)或紅外線等的干燥(例如參照專利文獻(xiàn)2、3)來進(jìn)行的。但是，如果為自然干燥或低濕度條件下的干燥，則在試劑含有液含有很多吸濕性或保濕性高的成分(例如N—甲基一D—葡糖胺或3—(N—嗎啉代)丙垸磺酸)的情況下，使試劑含有液干燥所必需的時間變長。因此，在使試劑含有液干燥時，試劑成分可能會劣化。與此相對，如果為利用溫風(fēng)或紅外線等的干燥方法，則試劑含有液的干燥時間可以較短。但在溫風(fēng)或紅外線的作用下，試劑的溫度會上升。因此，會使試劑含有液中含有的不耐高溫的試劑成分劣化。例如，在試劑含有液中含有顯色劑的情況下，顯色劑可能會著色，在試劑含有液中含有氧化還原酶的情況下，氧化還原酶可能會失活。在發(fā)生了這樣的試劑成分的劣化的情況下，變得難以高精密度地測定樣品中的目標(biāo)成分。另一方面，還考慮了通過在試劑含有液中添加蔗糖等試劑穩(wěn)定化劑，來相對地減少水等溶媒成分，結(jié)果，不使用溫風(fēng)或紅外線，以較低溫且短時間使試劑含有液干燥的方法。在試劑含有液中添加蔗糖的情況下，干燥速度確實(shí)提高了。但是，蔗糖的干燥促進(jìn)效果在含有試劑含有液中內(nèi)含的吸濕性或保濕性高的成分的情況下并不充分。因此，在試劑含有液含有吸濕性或保濕性的情況下，必需加大試劑含有液中的蔗糖的添加量。結(jié)果，不僅試劑含有液的成本變高，而且由于蔗糖的含量多而在使試劑含有液干燥時會對試劑層的表面性狀等帶來不良影響。更具體而言，在試劑含有液中的蔗糖的含量大的情況下，有時在干燥后形成的試劑層的表面發(fā)生不均一的凹凸或者在試劑層的表面發(fā)生裂紋。試劑層的表面上的不均一、凹凸或裂紋不僅在使試劑層溶解時會成為發(fā)生氣泡從而發(fā)生測定誤差的原因，而且還會成為發(fā)生試劑層的溶解性的不均一、進(jìn)而在試劑的濃度中發(fā)生不均一從而發(fā)生測定誤差的原因。專利文獻(xiàn)l:日本專利特開平01—049962號公報(bào)專利文獻(xiàn)2:日本專利特開昭62—278454號公報(bào)專利文獻(xiàn)3:日本專利特開平07—110324號公報(bào)
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的課題在于不會使試劑劣化，抑制在試劑層的表面發(fā)生凹凸或裂紋，從而可以精密度良好地分析試劑中的目標(biāo)成分。本發(fā)明的第1側(cè)面提供一種試劑層的形成方法，其是包括使基材保持試劑含有液的第1工序和使所述試劑含有液干燥的第2工序的分析用具中的試劑層的形成方法，其中，作為所述試劑含有液，使用含有作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽的液體。本發(fā)明的第2側(cè)面提供一種分析用具的制造方法，其是具備用于與樣品反應(yīng)的試劑層的分析用具的制造方法，其中，包括使基材保持試劑含有液的第1工序和使所述試劑含有液干燥的第2工序，作為所述試劑含有液，使用含有作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽的液體。試劑含有液中的四硼酸鹽的含量例如相對試劑含有液lOOml，為lg以上，優(yōu)選為l10g。作為四硼酸鹽，優(yōu)選使用四硼酸鈉或四硼酸鉀，但其中最優(yōu)選使用四硼酸鈉。試劑含有液也可以進(jìn)一步含有蔗糖。試劑含有液中的蔗糖的含量例如相對試劑含有液100ml，為515g。試劑含有液例如含有酶及顯色劑中的至少一方。在第1工序中，例如使基材保持10100nL試劑含有液。在第2工序中，例如使試劑含有液在相對濕度為10%以下的環(huán)境下干燥，優(yōu)選在室溫下使其干燥。試劑層是用于分析堿性磷酸酶(ALP)、葡萄糖、或乳酸脫氫酶(LDH)的層，優(yōu)選作為單一層，被形成為樣品可以使其溶解的固層在本發(fā)明的第2側(cè)面中成為制造對象的分析用具進(jìn)一步具備例如用于使樣品與試劑反應(yīng)的反應(yīng)槽。這種情況下，在反應(yīng)槽中形成試劑層。分析用具例如是為了利用光學(xué)方法進(jìn)行樣品的分析而使用的用具。本發(fā)明的第3側(cè)面提供一種分析用具，其是具備用于使樣品與試劑反應(yīng)的試劑層的分析用具，其中，所述試劑層含有四硼酸鹽。試劑層中的四硼酸鹽的含量例如為315wt%。作為四硼酸鹽，優(yōu)選使用四硼酸鈉或四硼酸鉀，但其中最優(yōu)選使用四硼酸鈉。在本發(fā)明的分析用具中，試劑層也可以進(jìn)一步含有蔗糖。試劑層中的蔗糖的含量例如為530wt%。試劑層例如被形成為單一層，另外，被形成為樣品可以使其溶解的固層。本發(fā)明中的分析用具也可以進(jìn)一步具備用于使樣品與試劑反應(yīng)的反應(yīng)槽。這種情況下，試劑層被設(shè)置于反應(yīng)槽中。本發(fā)明中的分析用具例如是用于利用光學(xué)方法進(jìn)行樣品的分析的用具。圖1是表示成為本發(fā)明的制造對象的微裝置(microdevice)的一例的整體立體圖。圖2是圖1所示的微裝置中的基板的平面圖。圖3是放大示出基板的主要部分的部分平面圖。圖4A是圖1的微裝置中的相當(dāng)于沿著圖3的IVa線一IVa線的截面的截面圖，圖4B是圖1的微裝置中的相當(dāng)于沿著圖3的IVb線一IVb線的截面的截面圖。圖5是用于說明圖1所示的微裝置中的樣品的移動狀態(tài)的相當(dāng)于圖3的基板的部分平面圖。圖6A及圖6B是用于說明相對基板形成試劑層的工序的截面圖。圖7A圖7C是用于說明成為本發(fā)明的制造對象的分析用具的其他例的平面圖。圖8A是表示沒有在試劑含有液中添加作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽及作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成的ALP測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖8B是表示用針擦圖8A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖9A是表示在試劑含有液中添加10vol^作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成的ALP測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖9B是表示用針擦圖9A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖10A是表示在試劑含有液中添加lvor^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na而形成的ALP測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖10B是表示用針擦圖IOA的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖11A是表示在試劑含有液中添加3vol^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na而形成的ALP測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖11B是表示用針擦圖IIA的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖12A是表示在試劑含有液中添加5vol^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na而形成的ALP測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖12B是表示用針擦圖12A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖13A是表示在試劑含有液中添加10vol^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na形成的ALP測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖13B是表示用針擦圖13A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖14A是表示在試劑含有液中添加5vol^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸K而形成的ALP測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖14B是表示用針擦圖14A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖15A是表示在試劑含有液中添加作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成試劑層的微裝置中的試劑層的溶解狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片，圖15B是表示在試劑含有液中添加作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na形成試劑層的微裝置中的試劑層的溶解狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖16A是表示在試劑含有液中不添加作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽及作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成的葡萄糖測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖16B是表示用針擦圖16A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖17A是表示在試劑含有液中添加10volX作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成的葡萄糖測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖17B是表示用針擦圖17A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖18A是表示在試劑含有液中添加15vol^作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成的葡萄糖測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖18B是表示用針擦圖18A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖19A是表示在試劑含有液中添加20vol^作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成的葡萄糖測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖19B是表示用針擦圖19A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖20A是表示在試劑含有液中添加2vol^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na而形成的葡萄糖測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖20B是表示用針擦圖20A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖21A是表示在試劑含有液中添加2vol^作為千燥促進(jìn)劑的四硼酸Na及15vol^蔗糖而形成的葡萄糖測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖21B是表示用針擦圖21A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖22A是表示在試劑含有液中不添加作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽及作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖而形成的LDH測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖22B是表示用針擦圖22A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖23A是表示在試劑含有液中添加5vol^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na形成的LDH測定用的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片，圖23B是表示用針擦圖23A的試劑層的狀態(tài)的光學(xué)顯微鏡照片。圖中，1、6、7、8—微裝置(分析用具)，2—基板(基材)，25、62、71、84_反應(yīng)池(cell)(反應(yīng)槽)，26—試劑層，50、51—試劑含有液。具體實(shí)施例方式以下參照附圖對本發(fā)明進(jìn)行說明。首先，對作為在本發(fā)明中成為制造對象的分析用具的一例的微裝置進(jìn)行說明。圖1所示的微裝置1是在利用光學(xué)方法分析樣品時被利用的微裝置，同時還是安裝于分析裝置(圖示略)中從而使用的微裝置。該微裝置1被構(gòu)成為只使用一次的結(jié)構(gòu)，具備基板2及罩(cover)3。如圖2圖4所示，基板2整體上形成為圓盤狀，具備受液部20、多個流道21及共通流道22。受液部20用于保持向各流道21中導(dǎo)入的樣品，在基板2的中央部形成為圓柱狀的凹部。多個流道21是用于利用毛細(xì)管吸引力使樣品移動的結(jié)構(gòu)，整體上被設(shè)置成放射狀。各流道21具有主流道23及分支流道24。主流道23具有反應(yīng)池25，與共通流道22相連的該主流道23被構(gòu)成為通過向外部排出共通流道22的氣體來使毛細(xì)管吸引力發(fā)揮作用。該反應(yīng)池25提供使樣品與試劑反應(yīng)的場所，同時還是發(fā)揮作為測光區(qū)域(area)的功能的部分，在其內(nèi)部設(shè)置試劑層26。試劑層26被形成為適于分析例如堿性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(Glu)、乳酸脫氫酶(LDH)、白蛋白(Alb)、總膽紅素(T—Bil)、無機(jī)磷(IP)、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、肌酸磷酸激酶(CPK)、淀粉酶(Amy)、Y—谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、肌酸(Cre)、總蛋白(TP)、藥(Ca)、鎂(Mg)、果糖胺(FRA)、總膽固醇(T一Cho)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL—Cho)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL—Cho)、或甘油三酯中性脂肪(TG)。試劑層26內(nèi)含作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽，形成為例如在與樣品接觸時發(fā)生溶解的單一層的固體狀。10作為四硼酸鹽，例如可以使用四硼酸鈉或四硼酸鉀。試劑層26中的四硼酸鹽的含量例如為315wt%。試劑層26根據(jù)要分析的特定成分的種類而進(jìn)一步含有顯色劑、電子傳遞物質(zhì)、氧化還原酶、表面活性劑、或防腐劑等。試劑層26也可以為了容易進(jìn)行在形成試劑層26時的干燥而含有蔗糖。試劑層26中的蔗糖的含量例如為530wt%。分支流道24是用于實(shí)現(xiàn)將樣品提供到反應(yīng)池25的跟前(日文手前)的狀態(tài)的結(jié)構(gòu)，在位于反應(yīng)池25的若干靠近上游側(cè)的分支部27中，從主流道21分支。該分支流道24如圖4所示地與后述的罩3中的分支流道用排氣口31連通。如圖2所示，共通流道22在排出分支流道24的內(nèi)部的氣體時被利用，在基板2的圓周形成為環(huán)狀。該共通流道22如圖4B所示地與后述的罩3中的共通流道用排氣口32連通。如圖1及圖4所示，罩3整體上形成為透明的圓盤狀，具有樣品導(dǎo)入口30、多個分支流道用排氣口31及共通流道用排氣口32。樣品導(dǎo)入口30是在導(dǎo)入樣品時被利用的結(jié)構(gòu)，被形成為貫通孔。樣品導(dǎo)入口30在罩3的中央部形成為位于基板2的受液部20的緊鄰上方。各分支流道用排氣口31被形成為與對應(yīng)的分支流道24連通的貫通孔。利用密封材料33塞住各共通流道用排氣口32的上部開口。如圖5A所示，在受液部20中保持樣品S的狀態(tài)下，于密封材料33中形成開口時，主流道23中的分支部分27的上游側(cè)及分支流道24與外部連通，毛細(xì)管吸引力作用于這些部分。因此，受液部20的樣品S在主流道23的上游側(cè)中移動后被導(dǎo)入到分支流道24中。結(jié)果，樣品S成為在緊靠反應(yīng)池25處停止的狀態(tài)。如圖1及圖4所示，共通流道用排氣口32是用于排出主流道23的內(nèi)部的氣體的結(jié)構(gòu)，被形成為貫通孔。共通流道用排氣口32被形成為位于基板2中的共通流道21的規(guī)定位置的緊鄰上方，利用密封材料34塞住上部開口。如圖5B所示，在密封材料34中形成開口的情況下，主流道23中的分支部分27的下游側(cè)與外部連通，毛細(xì)管吸引力作用于該部分。因此，到達(dá)緊靠反應(yīng)池25的位置的樣品S被導(dǎo)入到反應(yīng)池25中。結(jié)果，在反應(yīng)池25中，試劑層26被樣品S溶解，樣品S的目標(biāo)成分與試劑反應(yīng)。利用公知的測定機(jī)構(gòu)檢測樣品S中的目標(biāo)成分與試劑的反應(yīng)生成物，基于該檢測結(jié)果，分析目標(biāo)成分。接著，說明微裝置1的制造方法。在制造微裝置l時，首先，形成上述形態(tài)的基板2及罩3?；?及罩3例如利用使用了聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)等丙烯酸系樹脂或聚二甲基硅氧垸(PDMS)或聚苯乙烯(PS)之類的透明的樹脂材料的樹脂成型來形成。在該樹脂成型中，通過對金屬模具的形狀下工夫，對于基板2而言，可以同時作成受液部20、多個流道21、及共通流道22，對于罩3而言，可以同時作成樣品導(dǎo)入口30、多個分支流道用排氣口31及共通流道用排氣口32。接著，在基板2中的反應(yīng)池25中形成試劑層26。試劑層26是經(jīng)過在反應(yīng)池25中點(diǎn)著試劑含有液的點(diǎn)著工序及使試劑含有液干燥的干燥工序來形成的。如圖6A所示，試劑含有液的點(diǎn)著例如可以通過利用噴墨頭5以微量的液滴50反復(fù)點(diǎn)著試劑含有液來進(jìn)行。1滴液滴50的量例如為10300pL左右，用于形成1層試劑層26的液滴數(shù)例如為10800左右，用于形成1層試劑層26的總點(diǎn)著量例如為10100nL。在這樣地進(jìn)行在反應(yīng)池25中點(diǎn)著規(guī)定量的試劑含有液的情況下，如圖6B所示，在反應(yīng)池26中作為半球(dome)狀的形態(tài)保持試劑含有液51。當(dāng)然，試劑層26的點(diǎn)著不一定需要反復(fù)點(diǎn)著微量的液滴50，也可以通過使用噴嘴等1次點(diǎn)著規(guī)定量的試劑含有液來進(jìn)行。在此，作為試劑含有液，可以使用例如內(nèi)含試劑及作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽的試劑含有液，除了這些成分以外，根據(jù)需要，也可以含有蒸餾水、緩沖液、防腐劑或表面活性劑等。試劑含有液中的試劑的組成可以對應(yīng)分析對象成分的種類適當(dāng)?shù)剡x擇，作為試劑，例如可以舉出顯色劑、電子傳遞物質(zhì)、及氧化還原酶。作為四硼酸鹽，可以優(yōu)選使用四硼酸鈉或四硼酸鉀，最優(yōu)選使用四硼酸鈉。試劑含有液中的四硼酸鹽的含量例如相對試劑含有液100ml為lg以上，優(yōu)選為l10g。這是因?yàn)?，在四硼酸鹽的添加量過少的情況下，不能得到足夠的干燥促進(jìn)效果，相反，在四硼酸鹽的添加量過多的情況下，四硼酸鹽沒有相對試劑含有液充分地溶解。另外，為了縮短干燥時間，試劑含有液也可以添加蔗糖作為試劑穩(wěn)定化劑。在使試劑含有液干燥形成的試劑層26的表面沒有產(chǎn)生凹凸或裂紋的范圍內(nèi)，此時的蔗糖的添加量例如相對試劑含有液100ml為515g。另一方面，干燥工序可以通過在規(guī)定的環(huán)境下放置保持有試劑含有液51的基板2來進(jìn)行。在此，干燥工序中的規(guī)定的環(huán)境例如相對濕度為10%以下，溫度為室溫常溫(2(TC3(TC左右)。試劑含有液的干燥時間由包括干燥促進(jìn)劑的種類或量的試劑含有液的組成來決定，通常為212小時。當(dāng)然，干燥工序中的相對濕度、溫度及干燥時間在不使試劑劣化的前提下，不限定于上述的范圍，可以進(jìn)行各種變更。在試劑含有液的干燥結(jié)束從而形成試劑層26的情況下，通過接合基板2及罩3來形成圖l所示的微裝置l。在此，基板2及罩3的接合可以通過例如進(jìn)行熱熔(hotmelt)粘接劑的使用等來進(jìn)行。在本發(fā)明中，使用內(nèi)含作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽的試劑含有液51形成試劑層26。本發(fā)明人已確認(rèn)，該四硼酸鹽與以往用作試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖相比，干燥促進(jìn)效果高。因此，即使在試劑含有液中含有很多吸濕性或保濕性高的成分(例如N—甲基一D—葡糖胺或3—(N—嗎啉代)丙垸磺酸)的情況下，不會在干燥后形成的試劑層26的表面上產(chǎn)生不均一的凹凸或者不會在試劑層26的表面產(chǎn)生裂紋，可以使表面性狀穩(wěn)定化。結(jié)果，在向反應(yīng)池25中導(dǎo)入樣品S進(jìn)而使試劑層26溶解的情況下，可以抑制氣泡的發(fā)生，另外，試劑層26大致均一地溶解從而均一化溶解液中的試劑的濃度成為可能。這樣，可以提高在本發(fā)明中形成的試劑層26進(jìn)而分析用具的測定誤差。另外，在試劑含有液51中含有四硼酸鹽作為干燥促進(jìn)劑的情況下，即使為自然干燥或在低濕度條件下的干燥，也可以以較短的時間使試劑含有液51干燥。因此，在使試劑含有液51干燥時，可以抑制試劑成分發(fā)生劣化，從而可以抑制試劑成分的劣化引起的測定精密度的降低。13當(dāng)然，本發(fā)明不限定于上述的實(shí)施方式，可以進(jìn)行各種變更。例如，在前面的實(shí)施方式中，以放射狀設(shè)置多個流道的微裝置為對象進(jìn)行了說明，但本發(fā)明也可以適用于制造其他形態(tài)的分析用具的情況或形成該分析用具的試劑層的情況。作為成為本發(fā)明的適用對象的分析用具，除了上述的微裝置1以外，還可以舉出例如圖7A圖7C所示的分析用具。圖7A所示的分析用具6是形成1個流道60的分析用具。更具體而言，分析用具6的構(gòu)成為從樣品導(dǎo)入口61導(dǎo)入的樣品被供給到反應(yīng)池62中，在反應(yīng)池62中，試劑層63被樣品溶解。圖7B所示的分析用具7是彼此平行地設(shè)置多個流道70(在附圖上為2個)的分析用具，在各流道70中設(shè)置反應(yīng)池71(試劑層72)。該分析用具7可以同時對同一樣品分析多個項(xiàng)目或者同時對多個樣品進(jìn)行同一項(xiàng)目的分析。圖7C所示的分析用具8的構(gòu)成為使從樣品導(dǎo)入口80A、80B導(dǎo)入的樣品或試劑分別在不同的流道81、82中移動，然后使其在共通流道83中集流，從而向共通流道83中設(shè)置的1個反應(yīng)池84(試劑層85)供給樣品。另外，本發(fā)明不限于利用毛細(xì)管吸引力使樣品移動的分析用具，不限于構(gòu)成為利用泵等外部動力使樣品移動的分析用具或者構(gòu)成為利用光學(xué)方法進(jìn)行樣品的分析的分析用具，也適用于形成構(gòu)成為利用電化學(xué)手法進(jìn)行樣品的分析的分析用具的試劑層的情況。接著，以實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行說明。不過，本發(fā)明不限定于以下說明的實(shí)施例。實(shí)施例1在本實(shí)施例中，探討了在形成適于測定堿性磷酸酶(ALP)的試劑層時，向試劑含有液中添加四硼酸Na或四硼酸K時的干燥促進(jìn)效果。試劑層是通過使用分配器(dispenser)對聚苯乙烯(PS)制的基材點(diǎn)著試劑含有液，然后使其干燥一晚來形成的。將試劑含有液調(diào)整成在下述表1所示的基本組成中添加下述表2所示的干燥促進(jìn)劑或試劑穩(wěn)定化劑而成的液體。試劑含有液的點(diǎn)著量為50nL。通過利用光學(xué)顯微鏡確認(rèn)干燥后的試劑層的性狀及用針擦干燥后的試劑層之后的性狀來探討干燥促進(jìn)效果。將干燥后的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片示于圖8A圖14A，將用針擦試劑層之后的光學(xué)顯微鏡照片示于圖8B圖14B。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>用5N—HC1將試劑含有液的pH調(diào)節(jié)成10.6MEG:N—甲基一D—葡糖胺CHAPSO:3—[(3—膽酰胺基丙基)二甲基氨基]一2—羥基一1一丙磺酸酯干燥促進(jìn)劑(試劑穩(wěn)定化劑)消光度(mAbs/min)蔗糖15vol%9.69.59.39.38.78.89.011.19.39.4四硼酸Na5vol%10.610.911.410.310.810.710.610.910.510.5干燥促進(jìn)劑(試劑穩(wěn)定化劑)平均值(mAbs/min)標(biāo)準(zhǔn)差重現(xiàn)性(％)蔗糖15vol%9.40.77.1四硼酸Na5vol%10.70.32.917從表3及表4可知，與為了縮短試劑的干燥時間而使用蔗糖作為試劑穩(wěn)定化劑的情況相比，在使用四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下測定的消光度穩(wěn)定，測定重現(xiàn)性出色。從圖15A可知，在使用蔗糖作為試劑穩(wěn)定化劑的情況下，在反應(yīng)池中可以確認(rèn)氣泡的發(fā)生。另一方面，如圖15B所示，在使用四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，在反應(yīng)池中沒有確認(rèn)氣泡的發(fā)生。從以上的結(jié)果，認(rèn)為在使用蔗糖作為試劑穩(wěn)定化劑的情況下，由于試劑層的表面性狀惡化，所以在使試劑層溶解時，產(chǎn)生氣泡，從而沒有使測定的消光度穩(wěn)定，重現(xiàn)性惡化。與此相對，認(rèn)為在使用四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，由于試劑層的表面性狀被改善，所以在使試劑層溶解時，沒有發(fā)生氣泡，從而測定的消光度穩(wěn)定，重現(xiàn)性改善。因而，在使用四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，可以提高測定精密度。這樣的效果不限于使用四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況，推測在使用四硼酸K的情況下也可以得到。實(shí)施例3在本實(shí)施例中，探討了在形成適于測定葡萄糖(Glu)的試劑層時，添加四硼酸Na時的干燥促進(jìn)效果。試劑層是通過對聚苯乙烯(PS)制的基材點(diǎn)著試劑含有液，然后使其干燥一晚來形成的。將試劑含有液調(diào)整成在下述表5所示的基本組成中添加下述表6所示的干燥促進(jìn)劑或試劑穩(wěn)定化劑而成的液體。使用分配器進(jìn)行試劑含有液的點(diǎn)著，其點(diǎn)著量為50nL。通過利用光學(xué)顯微鏡確認(rèn)干燥后的試劑層的性狀及用針擦干燥后的試劑層之后的性狀來判斷干燥促進(jìn)效果。將干燥后的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片示于圖16A圖21A，將用針擦試劑層之后的光學(xué)顯微鏡照片示于圖16B圖21B。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>[表6]<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>從圖16A可知，沒有添加干燥促進(jìn)劑及試劑穩(wěn)定化劑的配方A未見在試劑層中發(fā)生試劑的分離，但如圖16B所示，在用針擦試劑層時，可以確認(rèn)試劑層含有較多水分，試劑層幾乎沒有干燥。從圖17A可知，在相對試劑含有液(除了蔗糖以外)添加10vol^作為用于縮短干燥時間的試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖的配方B中，在試劑層中未見試劑的分離，但如圖17B所示，在用針擦試劑層的情況下，試劑含有液沒怎么進(jìn)行干燥，可以確認(rèn)干燥幾乎沒有被促進(jìn)。從圖18A可知，在相對試劑含有液(除了蔗糖以外)添加15vol^作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖的配方C中，試劑層中未見試劑的分離，但如圖18B所示，在用針擦試劑層的情況下，試劑層柔軟，含有較多的水分，試劑含有液沒怎么進(jìn)行干燥，可以確認(rèn)干燥沒有被充分地促進(jìn)。從圖19A可知，在相對試劑含有液(除了蔗糖以外)添加20vol^作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖的配方.D中，在試劑層的表面呈現(xiàn)凹凸。另一方面，如圖19B所示，在用針擦試劑層的情況下，可以確認(rèn)試劑含有液的干燥已被促進(jìn)。即，在添加蔗糖作為試劑穩(wěn)定化劑的情況下，如果添加量不多，則不僅沒有促進(jìn)試劑含有液的干燥，而且試劑層的表面性狀惡化。與此相對，從圖20A可知，在相對試劑含有液(除了四硼酸Na以外)添加2vor^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na的配方E中，可見像添加20vol%蔗糖作為試劑穩(wěn)定化劑時的那樣的試劑層中的試劑的分離或表面性狀的惡化(凹凸或裂紋的發(fā)生)。另外，如圖20B所示，在用針擦試劑層的情況下，盡管沒有完全干燥，但與添加15volQ^蔗糖作為試劑穩(wěn)定化劑的情況相比，試劑含有液的干燥已被促進(jìn)。即，在使用四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，不僅可以得到與少量添加蔗糖同等或其以上的干燥促進(jìn)效果，而且也沒有發(fā)生試劑層的表面性狀惡化。從圖21A可知，在相對試劑含有液(除了四硼酸Na及蔗糖以外)分別添加作為干燥促進(jìn)劑的2vol^四硼酸Na及15vol^蔗糖的配方F中，與單獨(dú)添加蔗糖的情況相比，試劑層的表面性狀已被改善。另外，如圖21B所示，可以確認(rèn)試劑層完全地干燥。從以上結(jié)果可知，在添加四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，試劑含有層的干燥被干燥，同時其干燥促進(jìn)效果與添加作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖的情況相比，可以更少量地得到更有效的干燥促進(jìn)效果。進(jìn)而，通過并用作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na和作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖，與單獨(dú)使用蔗糖的情況相比，可見表面性狀己被改善。推測即使在與實(shí)施例1的情況同樣地使用四硼酸K作為干燥促進(jìn)劑的情況下，也可以得到這樣的干燥促進(jìn)效果。另外，在添加四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，由于不會發(fā)生試劑層中的試劑成分的分離、表面的凹凸及表面的裂紋，所以可以推測與實(shí)施例2的情況同樣，在使試劑層溶解時可以抑制氣泡的發(fā)生，從而改善測定重現(xiàn)性。實(shí)施例4在本實(shí)施例中，探討了在形成適于測定乳酸脫氫酶(LDH)的試劑層時，添加四硼酸Na時的干燥促進(jìn)效果。試劑層是通過對聚苯乙烯(PS)制的基材點(diǎn)著試劑含有液，然后使其干燥一晚來形成的。將試劑含有液調(diào)整成在下述表7所示的基本組成中添加下述表8所示的干燥促進(jìn)劑而成的液體。使用分配器進(jìn)行試劑含有液的點(diǎn)著，其點(diǎn)著量為50nL。通過利用光學(xué)顯微鏡確認(rèn)干燥后的試劑層的性狀及用針擦干燥后的試劑層之后的性狀來判斷干燥促進(jìn)效果。將干燥后的試劑層的光學(xué)顯微鏡照片示于圖22A圖23A，將用針擦試劑層之后的光學(xué)顯微鏡照片示于圖22B圖23B。[表7]<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>用5N—HC1將pH調(diào)節(jié)成9.4MEG:N—甲基一D—葡糖胺CHAPSO:3—[(3—膽酰胺基丙基)二甲基氨基]一2—羥基一l一丙磺酸酯<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>從圖22A可知，沒有添加干燥促進(jìn)劑的配方A未見在試劑層中發(fā)生試劑的分離，但如圖22B所示，在用針擦試劑層時，可以確認(rèn)試劑含有液沒有完全地干燥。與此相對，從圖23A可知，在相對試劑含有液(除了四硼酸Na以外)添加5vol^作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na的配方B中，未見試劑層中的試劑的分離，另外，如圖23B所示，在用針擦試劑層的情況下，與沒有添加干燥促進(jìn)劑的情況相比，試劑層的千燥已被促進(jìn)，一晚后完全干燥。從以上結(jié)果可知，即使在基于上述表7的基本組成形成適于測定乳酸脫氫酶(LDH)的試劑層的情況下，在添加四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，也不會發(fā)生試劑層中的試劑成分的分離、表面的凹凸及表面的裂紋，試劑含有層的千燥會被促進(jìn)。推測即使在與實(shí)施例1的情況同樣地使用四硼酸K作為干燥促進(jìn)劑的情況下或者在與實(shí)施例3同樣地并用干燥促進(jìn)劑的四硼酸Na和作為試劑穩(wěn)定化劑的蔗糖的情況下，也可以得到這樣的干燥促進(jìn)效果。另外，在添加四硼酸Na作為干燥促進(jìn)劑的情況下，由于不會發(fā)生試劑層中的試劑成分的分離、表面的凹凸及表面的裂紋，所以可以推測與實(shí)施例2的情況同樣，在使試劑層溶解時可以抑制氣泡的發(fā)生，從而改善測定重現(xiàn)性。在前面說明的實(shí)施例14中，對基于表l、表5及表7所示的基本組成形成測定對象為ALP、Glu及LDH的試劑層的情況，對四硼酸Na及四硼酸K的干燥促進(jìn)效果進(jìn)行了探討，但本發(fā)明不限于形成用于上述測定對象的試劑層的情況或者基于表1、表5及表7的基本組成形成用于上述測定對象的試劑層的情況，在形成適于形成其他成分的試劑層的情況或者在以表1表3以外的組成形成用于上述測定對象的試劑層的情況下，也可以適用。權(quán)利要求1.試劑層的形成方法，其是包括使基材保持試劑含有液的第1工序和使所述試劑含有液干燥的第2工序的分析用具中的試劑層的形成方法，其中，作為所述試劑含有液，使用含有作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽的液體。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的試劑層的形成方法，其中，相對于所述試劑含有液100ml，所述試劑含有液中的四硼酸鹽的含量為lg以上。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑層的形成方法，其特征在于，相對于所述試劑含有液100ml，所述試劑含有液中的四硼酸鹽的含量為卜10g。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑層的形成方法，其中，所述四硼酸鹽為四硼酸鈉或四硼酸鉀。5.根據(jù)權(quán)利要求l所述的試劑層的形成方法，其中，還含有蔗糖。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑層的形成方法，其中，相對于所述試劑含有液100ml，所述試劑含有液中的蔗糖的含量為515g。7.根據(jù)權(quán)利要求l所述的試劑層的形成方法，其中，所述試劑含有液含有酶及顯色劑中的至少一方。8.根據(jù)權(quán)利要求l所述的試劑層的形成方法，其中，在所述第1工序中，使基材保持10100nL所述試劑含有液。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑層的形成方法，其中，在所述第2工序中，使所述試劑含有液在相對濕度為10%以下的環(huán)境下干燥。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑層的形成方法，其中，在所述第2工序中，使所述試劑含有液在室溫下干燥。11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑層的形成方法，其中，所述試劑層是用于分析堿性磷酸酶、葡萄糖、或乳酸脫氫酶的層。12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑層的形成方法，其中，所述試劑層被形成為單一層。13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑層的形成方法，其中，所述試劑層被形成為樣品可以使其溶解的固層。14.分析用具的制造方法，其是具備用于與樣品反應(yīng)的試劑層的分析用具的制造方法，其中，包括使基材保持試劑含有液的第1工序和使所述試劑含有液干燥的第2工序，作為所述試劑含有液，使用含有作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽的液體。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析用具的制造方法，其中，所述分析用具具備用于使樣品與試劑反應(yīng)的反應(yīng)槽，所述試劑層被設(shè)置于所述反應(yīng)槽中。16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析用具的制造方法，其中，所述分析用具是為了利用光學(xué)方法進(jìn)行樣品的分析而使用的用具。17.—種分析用具，其是具備用于使樣品與試劑反應(yīng)的試劑層的分析用具，其中，所述試劑層含有四硼酸鹽。18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析用具，其中，所述試劑層中的四硼酸鹽的含量為315wt%。19.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析用具，其中，所述四硼酸鹽是四硼酸鈉或四硼酸鉀。20.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析用具，其中，還含有蔗糖。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的分析用具，其中，所述試劑層中的蔗糖的含量為530wt%。22.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析用具，其中，所述試劑層被形成為單一層。23.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析用具，其中，所述試劑層被形成為樣品可以使其溶解的固層。24.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析用具，其中，還具備用于使樣品與試劑反應(yīng)的反應(yīng)槽，所述試劑層被設(shè)置于所述反應(yīng)槽中。25.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析用具，其是用于利用光學(xué)方法進(jìn)行樣品的分析的用具。全文摘要本發(fā)明提供一種包括使基材保持試劑含有液的第1工序和使試劑含有液干燥的第2工序的分析用具中的試劑層的形成方法。作為試劑含有液，使用內(nèi)含試劑及作為干燥促進(jìn)劑的四硼酸鹽的液體。試劑含有液中的四硼酸鹽的含量例如相對試劑含有液100ml，為1g以上。四硼酸鹽優(yōu)選為四硼酸鈉或四硼酸鉀。文檔編號G01N21/78GK101517095SQ20078003587公開日2009年8月26日申請日期2007年9月26日優(yōu)先權(quán)日2006年9月26日發(fā)明者筱嵜耕太郎申請人:愛科來株式會社