專利名稱：海洋底泥樣本的無菌采集方法
海洋底泥樣本的無菌采集方法
魷領(lǐng)域
本發(fā)明屬于海洋生物學領(lǐng)域，具^^及一禾t海洋底泥^if本的無菌采集;^法。 背景獄
海洋底泥中生自大量的海洋生物，對于海洋底泥中海洋生物資源的研知賄助于 全面揭示海洋環(huán)生態(tài)境的質(zhì)量狀況。眾多的有關(guān)海洋生物資源調(diào)査的科學研究中，對海 洋底泥中的微生ttii行分離、鑒定已戯一項不可或缺的研究內(nèi)容。^A海洋底泥樣本 中分離獲《 洋微生物，首先要進行底泥的無菌采^i作。
海洋底M^集方法的無菌禾號與簡易、'^^禾im:,定了底泥微生物資源檢出的 客觀性和準確性。目前，有關(guān)海洋底泥的無菌采集方法，#^^洋調(diào)查規(guī)范中均未作明 確規(guī)定。鑒于此，底泥樣本的無菌采集并無固定的方法。f腿常調(diào)査人員會采取如下方
法用滅菌的小勺挖取由采泥器采集的海洋底泥，然后方JtA無菌^^菌的i歸皿中，
帶回實驗皿行底泥微生物的分離。顯然i^^去具有以下三個突出的缺點(1) ^t初
采 泥樣本的過程中，為方便向滅菌皿培養(yǎng)皿中填皿泥樣本，在調(diào)彭艱^a行采
誠泥的過程中，滅菌驗i歸皿會被長時間打開，！^^鎖亍為終止。敘bl程中， 環(huán)境中,的雜菌極易對滅菌皿Jt^皿內(nèi)部造i^染，從而導(dǎo)EMi^泥中分離獲得的 微生物包含有環(huán)境中的雜菌。另外，暴露于環(huán)境中的用于挖鵬泥的小勺也增加了雜菌 污染的幾率。(2)底泥樣品被帶回實驗^Sfi^菌分離實驗時，由于底泥樣品^S于無 菌皿i歸皿中，需要借助其它實驗器材再^泥取出，這^^增加了在實驗室無菌條 件下將底泥樣品取出用于分離實驗的繁瑣敏(3)如果需要對底繊行分層采集，則 需要用牛親的器林將底泥±處部不需要的層次去除，然后用小勺進行挖取。由于去除了 不要的層次導(dǎo)致需要采,泥層次的暴露，又增加了環(huán)境中雜菌污染底泥樣本的幾率， 因此無^^iiE^底^it行有效的無菌分層采集。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對目前海洋底泥樣本采集時存,重缺陷的現(xiàn)狀，J^t共一種海洋 底泥樣本的無菌采集方法，以^l艮已有技術(shù)的不足。
本發(fā)明的方法首先將 冼凈晾干后，用高^^菌的薄^Mi,口，并用紙包 好后進行高壓滅菌備用，然后將海洋調(diào)査船上配備的箱錄泥器所采集的海洋底泥土鄉(xiāng)
置在不銹鋼的泥#^±，取出，的滅Wi管，在該自管的一端ft^泥塊時，將 封口的薄膜去掉，即刻插入底泥塊，同B寸在鵬管另一端的薄mi:穿剌幾個小孔，以保 i疏鄉(xiāng),MA^管內(nèi)；采集完鵬取出鵬管，即時用滅菌的薄劇繊入海洋底泥 塊的鵬管一^lt口，同時在鵬管穿刺小 L的一端的封口薄膨卜再加一層滅菌薄麟 行封口，即完鵬洋底泥樣本的采集。
在無斷境下，將滅^^管兩綱口薄膜去除，在該鷓管A端插入鵬亍酒精 滅菌的、，頭，將底泥樣本推出即可進行海洋底泥中微生物分離實驗。本發(fā)明有效地為
海洋底泥中的tt^物分離,潔凈、 卜界雜菌污染的底泥樣本。
本發(fā)明^l程保證無菌采ft^本，方法簡易，方便了海洋底泥樣本的無菌分層采集，
很好;t鵬決目前海洋底泥樣本采^l程中易出J條菌污染與操作費事的問題，同時也為 海洋底泥微生物資源的分離與鑒定^i共了前期技術(shù)保證。


圖1、本發(fā)明的滅^ 管兩端密封示意圖。
圖2、本發(fā)明的采 洋底泥樣本(包括分層采集)的示意圖。
圖3、本發(fā)明的完^洋底泥樣本采集的示意圖。
其中1、滅M^管，2、橡皮筋，3 、 5滅菌薄膜 4、底泥塊，6底泥樣本。
具敝施力式
本發(fā)明首先將Mt^^fe凈晾^P后，用高M^菌薄mit行封口，兩，口的,管按 照五t組，用紙包好后進行高壓滅菌得到滅M^管，備用，然后將海洋調(diào)查船上配 備的箱^^泥器所采集的海洋底泥:t顛爐在不辦ra的泥mi:，取出滅W^管，在玻 璃管的一端^^泥±央時，將封口的滅菌薄膜去掉，插入底泥塊，同時在 管另一端 的滅菌mJ:穿剌幾個小孔，以保iffi源頃利itA^管內(nèi)；采集^后取出,管，即 時用滅菌薄臓^i入海洋底泥塊的自管一端以橡皮筋封口，同時在自管另一端的封 口薄勝再加一層滅菌薄鵬亍封口，即完鵬洋底泥樣本的采集。
作為實施例，如圖l，圖2所示，本發(fā)明的具體實施步驟(1)根據(jù)實驗需要，定 制不同夫賺的鵬管(如不同長度、管口直徑等)。本發(fā)明以2007年北黃海底泥無菌采 集時所用的鵬管，鵬為例進衍劃月:根據(jù)需要，定制一定規(guī)格的兩端開口的鵬管(為 方便說明，分為A、 B端)，長度為152咖，鵬管外徑32跳管離1咖。^t擇玻 璃管時一定要保證管口內(nèi)徑與市售的塑料^f器的 ，頭直^^致，目的是為了方便以 后用、M"頭將鵬管中的底御頃利推出來。鵬瞥冼凈晾干后用可以高歐菌的薄鵬 行封口 (如圖1戶標)。將封口的鵬管按照5 t組，用紙包好后進行高壓滅菌，備用。 (2)海洋調(diào)查船上配備的箱^^泥器所采集的呈±央狀的海洋底泥(如圖2所示)。取出 滅菌的鷓管，當鵬管的—端(B端)^^泥塊時，再將封口的薄膜去掉，B端插入 底泥塊，同時將A端的薄膜打出幾個小孔，以保證鵬管A^1氣，底源頓利iSA^ 管。(3)采集^g，用滅菌的薄膜即時將B全謝口，同時在A端的封口薄膨卜再加一 層滅菌薄MS行封口 (如圖3戶標)。需要進行海洋底泥中微生物分離實驗時，只要在無 境下，將，管兩立謝口薄膜去除，在A端插入已酒精滅菌的繼寸頭，將底泥樣本 推出即可。
顯然，本發(fā)明具有以下幾^;點(1) 泥樣本采集時，盡可魁 免了外界環(huán) 境中的雜菌對底泥樣本的污染；(2)由于l^管的長度可以根據(jù)需要選擇，因此可以根 據(jù)需要隨意采驗?zāi)鄩K的倒可層次，同時也不需^l旦心底願次因為暴露而導(dǎo)驗菌污 染的問題；(3)由于自管中的底泥樣本可以用、ai^Mt出，因此極力也方便了在實驗 室無菌劍牛下將底泥樣本分層取出進行tt^物的分離實驗。
權(quán)利要求
1、一種海洋底泥樣本的無菌采集方法，首先將玻璃管洗凈晾干后，用高溫滅菌的薄膜兩端封口，并用紙包好后進行高壓滅菌備用，然后將海洋調(diào)查船上配備的箱式采泥器所采集的海洋底泥塊放置在不銹鋼的泥樣盤上，取出上述的滅菌玻璃管，在該玻璃管的一端靠近底泥塊時，將封口的薄膜去掉，即刻插入底泥塊，同時在玻璃管另一端的薄膜上穿刺幾個小孔，以保證底泥順利進入玻璃管內(nèi)；采集完成后取出玻璃管，即時用滅菌的薄膜將插入海洋底泥塊的玻璃管一端封口，同時在玻璃管穿刺小孔的一端的封口薄膜外再加一層滅菌薄膜進行封口，即完成海洋底泥樣本的采集。
2、 如權(quán)利要求1所述的海洋底泥樣本的無菌采集方法，其特征是上述 的滅菌玻璃管與注射頭的直徑尺度互相吻合。
全文摘要
一種海洋底泥樣本的無菌采集方法。首先將玻璃管洗凈晾干后，用高溫滅菌的薄膜兩端封口，并用紙包好后進行高壓滅菌，然后將采泥器所采集的海洋底泥塊放置在不銹鋼的泥樣盤上，取出滅菌玻璃管，在該玻璃管的一端靠近底泥塊時，將封口的薄膜去掉，即刻插入底泥塊，同時在玻璃管另一端的薄膜上穿刺小孔，采集完成后取出玻璃管，即時用滅菌的薄膜將玻璃管一端封口，同時在玻璃管穿刺小孔的一端的封口薄膜外再加一層滅菌薄膜封口，即完成海洋底泥樣本的采集。在無菌環(huán)境下，去除封口薄膜，插入已酒精滅菌的注射頭將底泥樣本推出即可進行微生物分離實驗。本發(fā)明全過程無菌采集樣本，方法簡易，分層采集方便，為底泥微生物資源的分離與鑒定提供了保證。
文檔編號G01N1/12GK101339100SQ200810138928
公開日2009年1月7日 申請日期2008年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月31日
發(fā)明者于子山, 唐學璽, 孫開明, 偉 李 申請人:中國海洋大學