專利名稱：：煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及煙草中成分組成的測定方法，尤其涉及煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法。
背景技術(shù)：
：煙草中的各成分的含量決定了煙草的質(zhì)量，例如混合型香煙的焦油和尼古丁比是ll:1,而烤煙型大多是1314:1,因此混合型香煙和烤煙型香煙相比最大的優(yōu)點(diǎn)就是香氣量足而且焦油含量低。煙草中含有蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)在燃燒后會(huì)使煙氣苦味增加，產(chǎn)生辛辣味和刺激感，因此蛋白質(zhì)對巻煙吸味有不良影響，但是蛋白質(zhì)含量如果過低，那么煙氣就會(huì)顯得平淡，吃味和香氣也會(huì)變差。另外，蛋白質(zhì)在調(diào)制過程中可水解為氨基酸，而氨基酸含量與煙氣的香味和豐滿度又有明顯的正相關(guān)關(guān)系。雖然蛋白質(zhì)的總量在煙草的醇化過程中變化較小，但是煙草中的其他成分卻會(huì)隨著醇化過程而變化，從而也引起煙草中蛋白質(zhì)含量的變化。相應(yīng)地，對于煙草工業(yè)的研究開發(fā)以及生產(chǎn)，都需要在各個(gè)階段掌握煙草中蛋白質(zhì)的含量，測定煙草中蛋白質(zhì)的含量，對了解煙葉品質(zhì)十分重要。目前，煙草行業(yè)對蛋白質(zhì)的檢測方法可以參照中華人民共和國煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC/T166-2003進(jìn)行，此方法的測試原理也是國內(nèi)外通常采用的，其原理是，用乙酸等酸沉淀煙草樣品中的蛋白質(zhì)氮，通過將非蛋白質(zhì)氮含氮物與蛋白質(zhì)分離、洗脫，而后將蛋白質(zhì)連同其他沉淀物一起消煮，將蛋白質(zhì)氮在濃硫酸及催化劑作用下轉(zhuǎn)化為硫酸銨，強(qiáng)堿蒸餾釋放出氨，用標(biāo)準(zhǔn)酸液接收，反滴定，最后通過計(jì)算得出煙草中蛋白質(zhì)的含量。這個(gè)方法本質(zhì)上是測定煙草中蛋白質(zhì)氮的含量，從而通過計(jì)算得出蛋白質(zhì)的含量。此方法測定過程中，在對沉淀物進(jìn)行消煮以后，還需要重新收集由強(qiáng)堿蒸餾釋放出的氨，用標(biāo)準(zhǔn)酸液接收和反滴定，需要將多次將試樣轉(zhuǎn)移，試驗(yàn)過程中人為因素造成的誤差較大。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法，測試方法步驟少，不用再進(jìn)行收集氣體和滴定等#:作，測定結(jié)果準(zhǔn)確、誤差小。為了解決以上的技術(shù)問題，本發(fā)明提供以下的技術(shù)方案一種煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法，包括如下步驟a)稱取煙草；b)將稱取的煙草放入足量的酸或者硫酸銅溶液中，加熱至蛋白質(zhì)固化完全；c)過濾并用步驟b)中所述的酸或者碌u酸銅溶液沖洗濾出物；d)合并濾液并定容；e)取濾液進(jìn)行消化處理，定容；f)移取定容后得到的濾液，加入NaOH溶液，測定第一平衡電位值；g)加入NH/溶液，測定第二平衡電位值；結(jié)合第一平衡電位值和第二平衡電位值計(jì)算出煙草中非蛋白質(zhì)氮含量。對于這個(gè)煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法，步驟a)和步驟b)完成的是固氮過程；步驟c)和步驟d)為過濾分離剔除蛋白質(zhì)固化形成的沉淀；步驟e)為對濾液的消化過程；步驟f)和步驟g)為測定消化后的濾液在加入NaOH溶液和NH/標(biāo)準(zhǔn)溶液后的平衡電位值，這樣結(jié)合測得的兩個(gè)平衡電位值的差值即可計(jì)算出煙草中非蛋白質(zhì)氮含量。對于整個(gè)測定方法，簡而言之，首先通過固氮處理將煙草中的蛋白質(zhì)以沉淀的形式剔除，然后利用氨氣敏電極法測定濾液中的氮含量，通過計(jì)算即可得到煙草中非蛋白質(zhì)氮的含量。通過測定煙草中非蛋白質(zhì)氮含量，并且再通過測定煙草中總氮的含量，可以很容易計(jì)算出，煙草中蛋白質(zhì)的含量，測定方法步驟少，不用再進(jìn)行濾渣轉(zhuǎn)移、收集氣體和滴定等操作，而現(xiàn)有的直接測定蛋白質(zhì)氮的方法中，需要進(jìn)行抽濾處理并將濾渣轉(zhuǎn)移到消化容器中，在將蛋白質(zhì)氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨以后，還需要利用強(qiáng)堿蒸餾釋放出氨，用標(biāo)準(zhǔn)酸液接收，反滴定，這些操作實(shí)驗(yàn)都比較復(fù)雜而且因?qū)嶒?yàn)人員的不同而存在較大差異?？梢钥闯觯景l(fā)明提供的測定方法步驟少，不用再進(jìn)行收集氣體和滴定等操作，測定結(jié)果準(zhǔn)確、誤差小。下面對各個(gè)步驟中進(jìn)行詳細(xì)的論述和介紹，并提供一些優(yōu)選或者可以替代的技術(shù)方案。步驟a)稱取煙草前已述及，這個(gè)步驟是固氮過程的一個(gè)步驟。在本發(fā)明中，固氮過程指的是煙草中的蛋白質(zhì)與酸反應(yīng)生成沉淀的過程。固氮過程也稱為氮固化的過程等。確切的說，本步驟是一個(gè)稱量步驟，為了簡單起見，所以把這個(gè)稱量步驟定義成固氮過程的一個(gè)步驟。稱量步驟在分析測試過程中是基本的操作之一。由于煙葉的比重比較小，所以稱量使用的天平等稱量設(shè)備選用精確度高的電子天平或者光電天平比較好，精確度一般需用能夠精確到0.OOlg(克)或者精確度更高的測試儀器。在進(jìn)行此操作步驟之前，通常還需要測定煙草中的水分含量，一般采用的是烘箱法。也可以將煙草樣品烘干并置于干燥的環(huán)境中待用。步驟b)將稱取的煙草放入足量的酸或者碌u酸銅溶液中，加熱至蛋白質(zhì)固化完全這個(gè)步驟是固氮反應(yīng)發(fā)生的步驟，在此步驟中，煙草中的蛋白質(zhì)與酸或者硫酸銅反應(yīng)，生成沉淀。所述酸需要有一定的濃度，其本質(zhì)是有一定的氫離子濃度。對于不同種類的酸，對酸的質(zhì)量百分比濃度的要求也是不一樣的，可以根據(jù)實(shí)際測試中需要的酸來進(jìn)行選定。參與反應(yīng)的酸一般選用酸性較強(qiáng)的有機(jī)酸，最常用的是乙酸。也可以是乙酸、丙酸、丙二酸、三氯乙酸等，或者它們的組合。其中乙酸是最常用的，當(dāng)選用乙酸時(shí)，乙酸的濃度優(yōu)選使用0.4%-0.6%;三氯乙酸也較為常用，當(dāng)選用三氯乙酸時(shí)，三氯乙酸的濃度優(yōu)選使用0.8%~2.0%。本發(fā)明不限于只使用有機(jī)酸，也可以使用其它溶劑如硫酸銅等，只要能夠與煙草中的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，凝結(jié)沉聚，從而可以通過過濾與非蛋白質(zhì)氮分離即可。當(dāng)采用乙酸進(jìn)行蛋白質(zhì)的固氮反應(yīng)時(shí)，乙酸的濃度可以選用0.4%~0.6%,反應(yīng)的溫度選擇為所選用乙酸溶液的沸騰溫度，對于選用0.4%~0.6%的乙酸，需要保持乙酸沸騰15分鐘以上，以使得固氮反應(yīng)的完全發(fā)生。步驟c)過濾并用步驟b)中所述的酸或者碌u酸銅溶液沖洗濾出物步驟c)為過濾分離剔除蛋白質(zhì)固化形成的沉淀的主要步驟。此步驟的操作簡單，采用常用的過濾操作即可，既可以選用普通過濾，也可以選用抽濾的過濾形式。這也是本發(fā)明的優(yōu)勢之一，現(xiàn)有技術(shù)中在直接測定蛋白質(zhì)氮的過程中也有一個(gè)過濾過程，卻最好采用抽濾的形式，本發(fā)明中則無此項(xiàng)要求，因?yàn)楸景l(fā)明的測定的目標(biāo)物是濾液，所以，采用抽濾或者普通過濾的形式都可以，況且采用抽濾時(shí)存在濾液轉(zhuǎn)移困難的問題，因此本步驟中的過濾優(yōu)選使用普通過濾形式，也就是常壓過濾。過濾并用步驟b)中所述的酸或者硫酸銅溶液沖洗濾出物，可以使得濾紙或者沉淀中的殘留的非蛋白質(zhì)氮進(jìn)入濾液，有利于提高測試的準(zhǔn)確度。需要指出的是，此步驟中用到的酸或者硫酸銅溶液只是和步驟b)中所述的物質(zhì)一致，并不表示一定是與步驟b)中用到的酸或者硫酸銅溶液的濃度也一樣。例如，如果步驟b)中用到的是濃度為0.5%的乙酸，那么步驟c)中可以使用濃度為0.7%的乙酸。需要指出的是，優(yōu)選的方式是，步驟c)中使用的酸或者硫酸銅溶液的濃度與步驟b)中使用的酸或者硫酸銅溶液的濃度相差不大，盡量使用濃度一致的酸或者硫酸銅溶液。步驟d)合并濾液并定容如前所述，這個(gè)步驟為過濾分離剔除蛋白質(zhì)固化形成的沉淀的步驟之一，也可以認(rèn)為是為下一步的操作做準(zhǔn)備的一個(gè)步驟。從步驟c)來的濾液并沒有一個(gè)準(zhǔn)確的容積數(shù)值，在后續(xù)的計(jì)算過程中也無法給出確切的計(jì)算公式，所以需要定容。定容是化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常用操作方式，即將不確定容積的液體，加入一定量的液體，使得其具有確定的容積。如果需要定容的液體是溶液，則通常加入的是溶劑。由于從步驟c)來的濾液具有較高的溫度，那么最好待濾液冷卻后再定容，以免影響定容的準(zhǔn)確性。步驟e)取濾液進(jìn)行消化處理，定容步驟e)為對濾液的消化過程。消化過程指的是，有機(jī)含氮物質(zhì)在濃硫酸等氧化劑的作用下，經(jīng)過強(qiáng)熱消化分解，其中的氮轉(zhuǎn)化為氨的過程。氧化劑一般選用強(qiáng)氧化劑。所述強(qiáng)氧化劑可以選自濃硫酸、濃鹽酸、濃硫酸/雙氧水混合物或濃鹽酸/雙氧水混合物等。由于鹽酸的揮發(fā)性很強(qiáng)，所以如果使用鹽酸作為氧化劑，那么必須密封加壓進(jìn)行反應(yīng)，防止揮發(fā)，否則消化的溫度受到很大限制，進(jìn)而影響消化的效果。強(qiáng)氧化劑不選用硝酸，這是由于硝酸中含有氮元素，發(fā)生反應(yīng)之后會(huì)對測試結(jié)果有影響。在此過程中，還可以加入催化劑，加快消化反應(yīng)的進(jìn)行。催化劑可以選擇汞及其化合物、硒及其化合物、銅及其化合物，或者它們的組合，具體的如汞、氧化汞、硒、氧化銅、碌u酸銅等，優(yōu)選^f吏用氧化汞。除了氧化劑和催化劑之外，在消化反應(yīng)中還可以加入助熔劑。以濃硫酸為例，助熔劑的作用是可以使得濃硫酸的沸點(diǎn)升高，所以可以把消化溫度升高，從而可以提高消化的效果，減少消化時(shí)間。助熔劑有硫酸鉀、水楊酸等。硫酸鉀的效果更好，可以使得濃硫酸的沸點(diǎn)升高到35(TC甚至更高，而水楊酸的效果則稍^t差一些，水楊酸可以使得濃硫酸的沸點(diǎn)升高到34(TC以上。不含水的硫酸的沸點(diǎn)是338。C。由于所使用的硫酸中一般含有少量的水，所以消化過程的加熱一般分為兩個(gè)階段，第一階段是力n熱至10(TC15(TC，使得硫酸中的水分充分蒸發(fā)出來，避免降低硫酸的沸點(diǎn)。如果硫酸的沸點(diǎn)降低，那么部分硫酸就會(huì)在消化過程中蒸發(fā)出來，進(jìn)而導(dǎo)致氨的損失。助熔劑可以選擇硫酸鉀、硫酸鈉、水楊酸或者它們的組合。優(yōu)選其中的一種使用，并且更優(yōu)選硫酸鉀。當(dāng)硫酸和助熔劑在一起使用，經(jīng)常也需要加入催化劑，此時(shí)，可以加熱至疏酸接近沸騰，并且保持O.5小時(shí)以上，即可完成消化處理；在這樣的反應(yīng)條件下，也可以保持l小時(shí)以上，但是時(shí)間不宜太長。本發(fā)明人指出，在此反應(yīng)條件下的消化反應(yīng)時(shí)間以0.5~2.5小時(shí)為宜。由于消化反應(yīng)的溫度很高，通常會(huì)在300。C以上，因此在消化完成后，需要稍等一下，待濾液稍微冷卻后再進(jìn)行下一步操作，也可以加入少量水防止冷卻后硫酸銨結(jié)成晶體不易溶解。f)移取定容后得到的濾液，加入NaOH溶液，測定第一平衡電位值步驟f)和步驟g)為測定消化后的濾液在加入NaOH溶液和NH/標(biāo)準(zhǔn)溶液后的平衡電位值的步驟，這樣結(jié)合測得的兩個(gè)平衡電位值的差值即可計(jì)算出煙草中非蛋白質(zhì)氮含量。本步驟測定的是第一平衡電位值。g)加入NH/溶液，測定第二平衡電位值；結(jié)合第一平衡電位值和第二平衡電位值計(jì)算出煙草中非蛋白質(zhì)氮含量。本步驟測定的是第二平衡電位值。結(jié)合第一平衡電位值和第二平衡電位值，通過特定的計(jì)算公式即可得到煙草中非蛋白質(zhì)氮的含量。以上對本發(fā)明的各個(gè)步驟中的細(xì)節(jié)進(jìn)行了說明，其中也敘述了一些改進(jìn)和優(yōu)選的方案。本發(fā)明所述的煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法，可以準(zhǔn)確迅速的測定煙草中的非蛋白質(zhì)氮含量，另一方面，可以利用測定總氮的方法測定煙草中的氮含量，因此通過計(jì)算可以得出煙草中的蛋白質(zhì)氮含量以及蛋白質(zhì)的含量。因?yàn)闊煵葜锌偟康臏y定為各煙草企業(yè)的日常監(jiān)測項(xiàng)目，所以只要利用本發(fā)明所述的測定方法完成對煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的檢測即可得到煙草中蛋白質(zhì)的含量。本發(fā)明通過測定煙草中非蛋白質(zhì)氮含量，并且再結(jié)合煙草中總氮的含量，可以很容易計(jì)算出煙草中蛋白質(zhì)的含量，測定方法步驟少，不用再進(jìn)行濾渣轉(zhuǎn)移、收集氣體和滴定等操作；而現(xiàn)有的直接測定蛋白質(zhì)氮的方法中，例如中國人民共和國煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC-T166-2003中的方法，需要進(jìn)行抽濾處理并將濾渣轉(zhuǎn)移到消化容器中，在將蛋白質(zhì)氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨以后，還需要利用強(qiáng)堿蒸餾釋放出氨，用標(biāo)準(zhǔn)酸液接收，反滴定，這些操作實(shí)驗(yàn)都比較復(fù)雜而且因?qū)嶒?yàn)人員的不同而存在較大差異。可以看出，本發(fā)明提供的測定方法減少了人為的操作誤差，不是直接測定煙草中蛋白質(zhì)氮的含量，而是利用氨氣敏電極法測定煙草消化后過濾濾液中氮的含量，避免了后續(xù)復(fù)雜步驟的進(jìn)行，因此減少了人為的操作誤差，是一種簡便高效的測定煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的方法。具體實(shí)施例方式為能進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合具體的實(shí)施方式對上述的技術(shù)方案做進(jìn)一步的闡述和說明。以下實(shí)施例中用到的試劑的具體情況見表1，對試劑有特殊說明的除外。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表l中，AR代表分析純。具體測定方法為l)按照中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)GB/T19616-2004抽取煙葉樣品，按照中華人民共和國煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC/T31-1996將煙葉樣品制備煙末試樣，測定煙末中水分含量；2)稱取約2g煙末，稱取精度精確至0.OOOlg,置于100mL(毫升)濃度為O.5%的乙酸溶液中，加熱保持沸騰15分鐘，迅速用無氮定性濾紙過濾，并用濃度為0.5°/。乙酸溶液沖洗沉淀物。合并濾液，4寺冷卻到室溫后定容到200mL。所述乙酸溶液的濃度指的是質(zhì)量濃度，即質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。3)用移液管準(zhǔn)確移取10mL濾液到75mL消化管中，并加入0.lg氧化汞、l.Og硫酸鉀、5mL硫酸。將消化管置于消化器上消化，消化器工作參數(shù)為lO(TC保持lh(小時(shí))，370。C保持lh。消化后稍冷，加入少量水，冷卻到室溫，用水定容至75mL刻度線，搖勻。需要說明的是，消化工作參數(shù)為370°C并不代表濾液的溫度也為37(TC。設(shè)定儀器參數(shù)為370。C主要是為了保持消化管中的濾液沸騰。此溫度的測定也可以為其它溫度，只要能保證消化反應(yīng)的進(jìn)4亍就可以。4)用移液管移取步驟3)得到的消化液lOmL置于lOOmL燒杯中，燒杯放于電磁攪拌器上，燒杯中放入電磁攪拌器拌子。準(zhǔn)確加入濃度值在0.1~1.OmoL/L范圍內(nèi)，精度達(dá)到0.GlmoL/L的NaOH溶液10~50mL。在電石茲攪拌的情況下插入氨氣敏電極，讀取的電位值即為第一平衡電位值，記為再準(zhǔn)確加入濃度值在0.01~0.5moL/L范圍內(nèi)，精度達(dá)到0.001moL/L的NH/標(biāo)準(zhǔn)溶液lG-100mL，在電磁攪拌下讀取的電位值即為第二平衡電位值，記為E2。在此步驟中，加入的NaOH溶液的量和NH/標(biāo)準(zhǔn)溶液的量是可以根據(jù)實(shí)際測試情況做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，總的原則是使得測定結(jié)果誤差減小。例如NH/標(biāo)準(zhǔn)溶液還可以選擇實(shí)用1.00xl(T2mol/L的NH/標(biāo)準(zhǔn)溶液。測定的過程中，E!和E2的差值范圍如果在20~50mV(毫伏)，測定結(jié)果的誤差較小，更優(yōu)選地，E:和E2的差值范圍為20~50mV。5)按照下列公式計(jì)算出煙草中非蛋白質(zhì)氮的含量馬=稀釋倍數(shù)定容體積iV的原子量Cx1000_『參IOOO式中，各個(gè)字母的含義為Cs——標(biāo)準(zhǔn)氯化銨溶液濃度(mol/L)Vs——標(biāo)準(zhǔn)氯化銨溶液體積(mL)Vx——原溶液體積(mL)AE:E廣Ei(mV)W—一樣品質(zhì)量(g)6)按照中華人民共和國煙草^f亍業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC/T161-2002所述方法測定煙草的總氮含量。7)計(jì)算煙草中蛋白質(zhì)的含量。計(jì)算公式為6.25x(t-c)，其中，t代表步驟6)所測得的總氮含量，c代表步驟5)中測定的非蛋白質(zhì)氮的含量。對16個(gè)煙葉樣品，每個(gè)煙葉樣品進(jìn)行3次試驗(yàn)，所得的煙葉樣品的非蛋白質(zhì)氮含量的結(jié)果見表2，蛋白質(zhì)含量的結(jié)果見表3。表2非蛋白質(zhì)氮含量(質(zhì)量百分比)；險(xiǎn)測結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表3蛋白質(zhì)含量(質(zhì)量百分比)檢測結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>在每次試驗(yàn)中，以兩個(gè)平行樣檢測結(jié)果的平均值作為填報(bào)數(shù)據(jù)，并且本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，每次試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)皆大于0.999。從表2數(shù)據(jù)可以看到，除一個(gè)樣品外其它數(shù)據(jù)的變異系數(shù)皆小于5%。而從表3的數(shù)據(jù)更顯示，該方法重復(fù)性較好，變異系數(shù)小于3%，絕大部分都小于2.4,通常都小于2。因此，符合分析檢測的要求。對比實(shí)施方式按照中華人民共和國煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC/T166-2003煙草和煙草制品總蛋白質(zhì)含量的測定方法，對上述16個(gè)煙葉樣品進(jìn)行總蛋白質(zhì)含量的測定。得到的結(jié)果見表4。表4為本發(fā)明所測得的蛋白質(zhì)含量和利用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)測定方法得出的蛋白質(zhì)含量的比較表。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表4(續(xù))<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>從表4可以看出，各個(gè)樣品的利用本發(fā)明方法和利用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)所測得的數(shù)據(jù)對比，每對數(shù)據(jù)的相對偏差均小于6%。把利用本發(fā)明方法所測得的16個(gè)數(shù)據(jù)作為一組，把利用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)所測得的16個(gè)數(shù)據(jù)作為一組，采用凄t理統(tǒng)計(jì)方法中的t檢驗(yàn)對這兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得到t值為1.082，小于查表值t(0.1,15),t(O.l,15)=1.753?？梢钥闯鲈?0%的置信區(qū)間內(nèi)，兩組數(shù)據(jù)沒有明顯的差異，因此得出結(jié)論可以采用本發(fā)明所提供的測定方法代替原來的經(jīng)典4全測法。以上對本發(fā)明所才是供的技術(shù)方案進(jìn)行了詳細(xì)介紹。本說明書中應(yīng)用了具體實(shí)施例對本發(fā)明的原理及實(shí)施方式進(jìn)行了闡述，對于本領(lǐng)域的一般4支術(shù)人員，依據(jù)本發(fā)明的思想在具體實(shí)施方式及應(yīng)用范圍上可能在實(shí)施過程中會(huì)有改變之處。因此，本說明書記載的內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。權(quán)利要求1、一種煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法，包括如下步驟:a)稱取煙草；b)將稱取的煙草放入足量的酸或者硫酸銅溶液中，加熱至蛋白質(zhì)固化完全；c)過濾并用步驟b)中所述的酸或者硫酸銅溶液沖洗濾出物；d)合并濾液并定容；e)取濾液進(jìn)行消化處理，定容；f)移取定容后得到的濾液，加入Na0H溶液，測定第一平衡電位值；g)加入NH4+溶液，測定第二平衡電位值；結(jié)合第一平衡電位值和第二平衡電位值計(jì)算出煙草中非蛋白質(zhì)氮含量。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，步驟b)中所述的酸為有機(jī)酸。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的測定方法，其特征在于，步驟b)中所述有機(jī)酸為乙酸，濃度為0.4%~0.6%。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定方法，其特征在于，步驟b)中所述加熱至蛋白質(zhì)固化完全為，加熱至乙酸沸騰并保持15分鐘以上。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，步驟e)消化過程中消化劑包括催化劑和氧化性物質(zhì)。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的測定方法，其特征在于，所述催化劑選自汞及其化合物、硒及其化合物、銅及其化合物，或者它們的組合。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述的測定方法，其特征在于，所述氧化性物質(zhì)為硫酸，所述消化劑還包括助熔劑，所述消化處理為加熱至沸騰，并保持O.5小時(shí)以上。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的測定方法，其特征在于，所述助熔劑選自水楊酸、硫酸鉀、或者它們的組合。9、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述第一平衡電位值和第二平衡電位值的差為20~50mV。10、根據(jù)權(quán)利要求9所述的測定方法，其特征在于，所述第一平衡電位值和第二平衡電位值的差為30~40mV。全文摘要本發(fā)明公開一種煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的測定方法，包括如下步驟a)稱取煙草；b)將稱取的煙草放入足量的酸或者硫酸銅溶液中，加熱至蛋白質(zhì)固化完全；c)過濾并用步驟b)中所述的酸或者硫酸銅溶液沖洗濾出物；d)合并濾液并定容；e)取濾液進(jìn)行消化處理，定容；f)移取定容后得到的濾液，加入NaOH溶液，測定第一平衡電位值；g)加入NH₄⁺溶液，測定第二平衡電位值；結(jié)合第一平衡電位值和第二平衡電位值計(jì)算出煙草中非蛋白質(zhì)氮含量。本發(fā)明提供的測定方法是一種簡便高效的測定煙草中非蛋白質(zhì)氮含量的方法。文檔編號G01N27/416GK101382516SQ20081014758公開日2009年3月11日申請日期2008年9月3日優(yōu)先權(quán)日2008年9月3日發(fā)明者孔浩輝,程志穎申請人:廣東中煙工業(yè)有限責(zé)任公司