專利名稱：一種預(yù)測(cè)uht乳貨架期的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法，尤其是一種利用檢測(cè)UHT乳 中的脂肪酶含量來預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法。
背景技術(shù)：
UHT (Ultra High Temperature)乳是在20世紀(jì)60年代出現(xiàn)的一種產(chǎn)品，它 是指采用超高溫滅菌和無菌灌裝的工藝過程加工而成的牛乳制品。
與巴氏乳相比，UHT乳解決了液態(tài)乳運(yùn)輸、儲(chǔ)存、保鮮難的問題，有效地 保持了蛋白質(zhì)、鈣等營養(yǎng)物質(zhì)。其特性是產(chǎn)品能達(dá)到商業(yè)無菌，只需在常溫 下保存，分銷不需冷鏈，貨架期長(zhǎng)(一般能貯存1 6個(gè)月)，乳中的營養(yǎng)成份 (除了個(gè)別水溶性維生素外)基本同巴氏殺菌乳相同。UHT與傳統(tǒng)的巴氏殺菌 相比，能大大減少牛乳顏色、風(fēng)味和營養(yǎng)價(jià)值的損失，因而成為目前最佳而且 發(fā)展最快的加工方式。
食品貨架期指產(chǎn)品能夠貯存的時(shí)間，在貯存時(shí)間內(nèi)產(chǎn)品質(zhì)量可以被接受并 且滿足顧客質(zhì)量要求的時(shí)間長(zhǎng)度。貨架期加速實(shí)驗(yàn)(ASLT， Accelerated shelf-life testing)主要是針對(duì)長(zhǎng)貨架期的產(chǎn)品在研究中周期長(zhǎng)效率低的問題而發(fā)展起來的 一種實(shí)驗(yàn)方法。該實(shí)驗(yàn)方法是將產(chǎn)品置于激烈的條件下加速其反應(yīng)，使得在較 短的時(shí)間內(nèi)(短于其真正貨架期的時(shí)間)預(yù)測(cè)出產(chǎn)品的真正貨架期。加速試驗(yàn) 使用的條件主要有高溫、高濕、光照、更嚴(yán)格的溫度循環(huán)和高震蕩等，在食 品行業(yè)多用高濕、高溫和光照，其中溫度加速試驗(yàn)使用的較為廣泛。
近年來，商家為了獲得銷售利益，致力于研究長(zhǎng)貨架期的產(chǎn)品，例如近幾 年受到國內(nèi)外廣泛關(guān)注的貨架期延長(zhǎng)(Extended shelf-life ESL)乳，即ESL乳。 研究長(zhǎng)貨架期的產(chǎn)品已成為了 一種發(fā)展趨勢(shì)。
目前，國標(biāo)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中均沒有檢測(cè)牛乳特別是UHT乳貨架期的方法，現(xiàn) 在對(duì)于UHT新品貨架期的判定，主要依靠研發(fā)員綜合殺菌方式、包裝形式等因 素，給出經(jīng)驗(yàn)值，之后將產(chǎn)品在常溫條件下放置，定期觀察，以此來確定產(chǎn)品 的貨架期。這種方法判定的結(jié)果帶有很強(qiáng)的主觀性，并且判定時(shí)間很長(zhǎng)，通常
需要6-8個(gè)月來驗(yàn)證判定的準(zhǔn)確性。在改善UHT乳以及開發(fā)新產(chǎn)品的過程中研 究需要的時(shí)間長(zhǎng)，人力物力的消耗較大。
乳中脂肪酶主要有兩種， 一種存在于原料乳中，稱為天然脂肪酶；另一種 是嗜冷菌所產(chǎn)生的，稱為微生物脂肪酶。原料乳中的天然脂肪酶又分為兩種 一種吸附于脂肪球膜界面間，稱為膜脂肪酶，在末乳和乳房炎乳中含量很高； 另一種存在于乳漿，與酪蛋白結(jié)合，稱為乳漿脂肪酶，它會(huì)由于牛乳的均質(zhì)而 吸附于脂肪球上。
牛乳中的天然脂肪酶是由乳腺轉(zhuǎn)移而來的，被認(rèn)為是乳腺上皮細(xì)胞的滲漏 與合成，它的主要作用是水解乳中的甘油三酸酯生成游離脂肪酸(FFA)，它的 最適pH為9.2，最適溫度為37°C。有活性的脂肪酶含量也會(huì)隨著貯存時(shí)間增加， 因?yàn)橐徊糠种久冈跉⒕鷷r(shí)被鈍化，失去活性，在貯存時(shí)，被鈍化的脂肪酶逐 漸恢復(fù)活性，脂肪酶活力增加。
在UHT乳中仍可以檢測(cè)到殘留的脂肪酶活性，在UHT乳貯存期間由脂肪 酶水解生成的游離脂肪酸(FFA)含量明顯增加，并造成了 UHT乳酸度的增加。 脂肪酶的脂解作用產(chǎn)生的短鏈和揮發(fā)性脂肪酸會(huì)引發(fā)酸敗，會(huì)使乳變得發(fā)苦、 不潔、油膩和有收斂性氣味，對(duì)乳的風(fēng)味造成不良影響。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種用脂肪酶含量預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法，通過該方 法，可在較短時(shí)間內(nèi)判定UHT乳的貨架期。
本發(fā)明提供了一種預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法， 一種預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的 方法，包括如下步驟
1) 設(shè)定一個(gè)常溫T2下UHT乳中的脂肪酶含量值作為貨架期參考值，所述 貨架期參考值下貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程
Logt=A/T+M
其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)；
2) 檢測(cè)實(shí)際貯存溫度T1下貯存的UHT乳中的脂肪酶含量，當(dāng)實(shí)際C存時(shí) 間tl檢測(cè)得到脂肪酶含量值達(dá)到所述貨架期參考值時(shí)，將所述實(shí)際C存 溫度Tl和所述實(shí)際貯存時(shí)間tl代入上述方程，求得特征系數(shù)A;
3) 將所述相關(guān)系數(shù)M、特征系數(shù)A和所述常溫溫度T2代入上述方程，求 得所述UHT乳在常溫下的貨架期t2。
本發(fā)明中脂肪酶的含量以脂肪酶的酶活力表示， 一個(gè)酶活力單位(U)的 定義為PH=8.0， 37。C條件下，水解三丁酸甘油酯每分鐘產(chǎn)生1微摩爾的脂肪 酸所需的酶量。
本發(fā)明中，所述貨架期參考值為100.5-104.9 U。相關(guān)系數(shù)M為0.075-0.082。 上述實(shí)際貯存溫度T1為40-50。C，優(yōu)選為45。C，常溫T2為25"C。 所述步驟2)中，每3-5天檢測(cè)一次所貯存的UHT乳中的脂肪酶含量。 本發(fā)明中，檢測(cè)貯存的UHT乳中的脂肪酶含量的方法為
a. )制備多個(gè)不同濃度的脂肪酶標(biāo)準(zhǔn)溶液，并將其注入平板培養(yǎng)基的孔中，培
養(yǎng)，測(cè)量擴(kuò)散圈直徑，根據(jù)所測(cè)得的數(shù)據(jù)，繪制脂肪酶含量與擴(kuò)散圈直徑 之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
b. )將所述UHT乳注入所述平板培養(yǎng)基的孔中，培養(yǎng)，測(cè)量所述UHT乳的擴(kuò)
散圈直徑，將檢測(cè)得到的擴(kuò)散圈直徑與標(biāo)準(zhǔn)曲線比劉，得到貯存的UHT乳 中的脂肪酶含量。
上述平板培養(yǎng)基的配制方法為1.2% (W/W)瓊脂溶于0.1M磷酸鈉緩沖溶 液(PH-8.0),溶解后于121°C，滅菌5min，滅菌后加入0.15% (V/V)的三丁 酸甘油酯和0.05% (W/V)的疊氮鈉，混合乳化lmin，將熱混合液15mL注入 培養(yǎng)皿內(nèi)，冷卻。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法為用脂肪酶和0.1M磷酸鈉緩沖溶液(PH=8.0)制成 標(biāo)準(zhǔn)溶液20U、 40U、 60U、 80U、 IOOU、 120U;用滅菌的打孔器在平板培養(yǎng) 基內(nèi)打孔，孔徑4mm，每孔注入20uL標(biāo)準(zhǔn)溶液；平板培養(yǎng)基在37'C下培養(yǎng)24 小時(shí)，測(cè)量擴(kuò)散圈直徑，繪制脂肪酶含量與擴(kuò)散圈直徑之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
脂肪酶含量的測(cè)定方法如下每lmL貯存的UHT乳加入5i!L10y。疊氮鈉 (W/V)，震蕩；用滅菌的打孔器在平板內(nèi)打孔，孔徑4mm，每孔注入20uL處 理過的UHT乳；平板培養(yǎng)基在37'C下培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè)量擴(kuò)散圈直徑，與標(biāo)準(zhǔn) 曲線比對(duì)得到脂肪酶含量。
本發(fā)明中，所述脂肪酶的貨架期參考值為100.5-104.9U。在40-50'C下貯存 UHT乳，當(dāng)其脂肪酶含量達(dá)到貨架期參考值(也可以稱做終點(diǎn)濃度)時(shí)，記錄 忙存時(shí)間tl、貯存溫度Tl，設(shè)定相關(guān)系數(shù)M。只需將tl、 Tl和M代入 Logt=A/T+M，即可獲得所貯存的UHT乳在常溫下的貨架期。
本發(fā)明用脂肪酶含量檢測(cè)UHT乳貨架期，在開發(fā)UHT乳新產(chǎn)品時(shí)，可用 這種方法在較短時(shí)間內(nèi)預(yù)測(cè)其貨架期，減少研發(fā)周期與人力物力的投入，使研
發(fā)成果盡快轉(zhuǎn)化為經(jīng)濟(jì)效益。本發(fā)明的方法還可以用來檢測(cè)已有產(chǎn)品的貨架期。
本發(fā)明的方法檢測(cè)速度快，通常需要10-20天即可完成，而一般用現(xiàn)有方法需要 2-6個(gè)月。本發(fā)明的方法誤差小于10天，計(jì)算方法簡(jiǎn)單易行。


圖1是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中脂肪酶的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的實(shí)施方式意在解釋發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，本領(lǐng)域 任何普通技術(shù)人員都應(yīng)該能夠清楚地知道和理解，按照說明書中公開的比例范 圍是可以完整無誤地實(shí)施本發(fā)明的，任何在因?yàn)榕Ｈ槿樵吹牟煌鴮?dǎo)致的數(shù)值 上的略微差別不應(yīng)該作為本發(fā)明檢測(cè)結(jié)果略微不同的理由，所以本發(fā)明旨在保 護(hù)利用檢測(cè)UHT乳中的脂肪酶含量來預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法，而不是要將 比例特別嚴(yán)格地限定在某一個(gè)具體的數(shù)值上。
本發(fā)明中脂肪酶的含量以脂肪酶的酶活力表示， 一個(gè)酶活力單位(U)的 定義為pH=8.0， 37。C條件下，水解三丁酸甘油酯每分鐘產(chǎn)生1微摩爾的脂肪 酸所需的酶量。
實(shí)施例l:預(yù)測(cè)UHT乳的貨架期
設(shè)定常溫(T2=25°C)下UHT乳中的脂肪酶含量的貨架期參考值為 100.5-104.9 U，該貨架期參考值下，貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程
Logt=A7T+M
其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)。 該參考值下的相關(guān)系數(shù)取M=0.078。
自生產(chǎn)之日起，抽取一個(gè)批次的UHT乳樣品，貯存于45'C下，每五天測(cè)定 一次實(shí)際貯存溫度(T1=45°C)貯存UHT乳的脂肪酶含量。
脂肪酶的檢測(cè)步驟如下 1、平板培養(yǎng)基的配制
1.2% (W/W)瓊脂溶于0.1M磷酸鈉緩沖溶液(PH=8.0)，溶解后于12rC， 滅菌5min (ALP ML-30L型高壓蒸汽滅菌器)，滅菌后立即加入0.15% (V/V)
的三丁酸甘油酯和0.05% (W/V)的疊氮鈉，然后再在乳化儀上混合乳化lmin， 將熱的混合液15mL注入培養(yǎng)皿內(nèi)，冷卻。
2、 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
用脂肪酶(來源Candidarugosa，分析純，購自sigma)和0.1M磷酸鈉緩 沖溶液(PH=8.0)制成以下酶活的溶液20U、 40U、 60U、 80U、 100U、 120U。
3、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
用脂肪酶和0.1M磷酸鈉緩沖溶液(PH=8.0)制成標(biāo)準(zhǔn)溶液20U、 40U、 60U、 80U、 IOOU、 120U;用滅菌的打孔器在平板培養(yǎng)基內(nèi)打孔，孔徑4mm， 每孔注入20uL標(biāo)準(zhǔn)溶液；平板培養(yǎng)基置于溫箱中，在37。C下培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè) 量擴(kuò)散圈直徑，繪制脂肪酶含量與擴(kuò)散圈直徑之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。所獲得的標(biāo)準(zhǔn) 曲線如圖1所示。
4、 UHT乳中脂肪酶含量的檢測(cè)方法
取lmL貯存的UHT乳加入5pL10n/。疊氮鈉(W/V)，震蕩；用滅菌的打孔 器在平板內(nèi)打孔，孔徑4mm，每孔注入20uL處理過的UHT乳；平板培養(yǎng)基置 于溫箱中，在37'C下培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè)量擴(kuò)散圈直徑，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)得到脂肪 酶含量。
當(dāng)T1-45。C貯存的UHT乳中的脂肪酶含量達(dá)到101.5U時(shí)，落入了所設(shè)定 的貨架期參考值100.5-104.9 U范圍內(nèi)，記錄實(shí)際貯存時(shí)間tl為22天。
將M、T1和tl代入上述方程即Log22=A/45+0.078,求得特征系數(shù)A-56.卯。 將M、 A和常溫溫度T2-25。C代入上述方程，即Logt2=56.90/25+0.078,求得常 溫下C:存該UHT乳的貨架期t2為226天。
將該UHT乳在常溫25"C下貯存，每五天檢測(cè)脂肪酶含量，脂肪酶含量達(dá)到 上述貨架期參考值時(shí)記錄常溫下的貯存時(shí)間為230天。該UHT乳的實(shí)際貨架期 與上述預(yù)測(cè)結(jié)果相差4天。
實(shí)施例2:預(yù)測(cè)UHT乳的貨架期
設(shè)定常溫(T2=25°C)下UHT乳中的脂肪酶含量的貨架期參考值為 100.5-104.9 U，該貨架期參考值下，貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程
Logt=A/T+M
其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)。 該參考值下的相關(guān)系數(shù)取M=0.078。
自生產(chǎn)之日起，抽取一個(gè)批次的UHT乳樣品，貯存于45'C下，每三天測(cè)定 一次實(shí)際貯存溫度(T1=45'C)貯存UHT乳的脂肪酶含量。 脂肪酶的檢測(cè)步驟與實(shí)施例1中的檢測(cè)步驟相同。
當(dāng)T1二45'C貯存的UHT乳中的脂肪酶含量達(dá)到103.6 U時(shí)，落入了所設(shè)定 的貨架期參考值100.5-104.9 U范圍內(nèi)，記錄實(shí)際貯存時(shí)間tl為19天。
將M、T1和tl代入上述方程即Logl9二A/45+0.078，求得特征系數(shù)A=54.03。 將M、 A和常溫溫度T2二25。C代入上述方程，即Logt2=54.03/25+0.078，求得常 溫下貯存該UHT乳的貨架期t2為174天。
將該UHT乳在常溫25。C下貯存，每三天檢測(cè)脂肪酶含量，脂肪酶含量達(dá)到 上述貨架期參考值時(shí)記錄常溫下的貯存時(shí)間為168天。該UHT乳的實(shí)際貨架期 與上述預(yù)測(cè)結(jié)果相差6天。
實(shí)施例3預(yù)測(cè)UHT乳的貨架期
設(shè)定常溫(T2=25°C)下UHT乳中的脂肪酶含量的貨架期參考值為 100.5-104.9 U，該貨架期參考值下，貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程
Logt=A/T+M
其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)。 該參考值下的相關(guān)系數(shù)取M=0.078。
自生產(chǎn)之日起，抽取一個(gè)批次的UHT乳樣品，貯存于45"C下，每五天測(cè)定 一次實(shí)際貯存溫度(T1=45°C)貯存UHT乳的脂肪酶含量。 脂肪酶的檢測(cè)步驟與實(shí)施例1中的檢測(cè)步驟相同。
當(dāng)丁1=45匸貯存的UHT乳中的脂肪酶含量達(dá)到102.4 U時(shí)，落入了所設(shè)定 的貨架期參考值100.5-104.9 U范圍內(nèi)，記錄實(shí)際貯存時(shí)間tl為17天。
將M、T1和tl代入上述方程即Logl7二A/45+0.078，求得特征系數(shù)A=51.86。 將M、 A和常溫溫度T2-25。C代入上述方程，即Logt2=51.86/25+0.078，求得常 溫下貯存該UHT乳的貨架期t2為142天。
將該UHT乳在常溫25'C下貯存，每五天檢測(cè)脂肪酶含量，脂肪酶含量達(dá)到 上述貨架期參考值時(shí)記錄常溫下的貯存時(shí)間為139天。該UHT乳的實(shí)際貨架期 與上述預(yù)測(cè)結(jié)果相差3天。
實(shí)施例4預(yù)測(cè)UHT乳的貨架期
設(shè)定常溫(T2=25°C)下UHT乳中的脂肪酶含量的貨架期參考值為 100.5-104.9 U，該貨架期參考值下，貯存時(shí)間和C:存溫度滿足如下方程
Logt=A/T+M
其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)。 該參考值下的相關(guān)系數(shù)取M=0.075。
自生產(chǎn)之日起，抽取一個(gè)批次的UHT乳樣品，貯存于45'C下，每二天測(cè)定 一次實(shí)際貯存溫度(T1=45°C)貯存UHT乳的脂肪酶含量。 脂肪酶的檢測(cè)步驟與實(shí)施例1中的檢測(cè)步驟相同。
當(dāng)T1-45'C貯存的UHT乳中的脂肪酶含量達(dá)到103.6U時(shí)，落入了所設(shè)定 的貨架期參考值100.5-104.9 U范圍內(nèi)，記錄實(shí)際貯存時(shí)間tl為13天。
將M、T1和tl代入上述方程即Logl3:A/45+0.075，求得特征系數(shù)A-46.75。 將M、 A和常溫溫度T2二25。C代入上述方程，即Logt2=46.75/25+0.075，求得常 溫下貯存該UHT乳的貨架期t2為88天。
將該UHT乳在常溫25。C下貯存，每三天檢測(cè)脂肪酶含量，脂肪酶含量達(dá)到 上述貨架期參考值時(shí)記錄常溫下的貯存時(shí)間為90天。該UHT乳的實(shí)際貨架期 與上述預(yù)測(cè)結(jié)果相差1天。
實(shí)施例5預(yù)測(cè)UHT乳的貨架期
設(shè)定常溫(T2=25°C)下UHT乳中的脂肪酶含量的貨架期參考值為 100.5-104.9 U，該貨架期參考值下，貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程
Logt=A/T+M
其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)。 該參考值下的相關(guān)系數(shù)取M=0.082。
自生產(chǎn)之日起，抽取一個(gè)批次的UHT乳樣品，貯存于4(TC下，每三天測(cè)定 一次實(shí)際貯存溫度(T1=40°C)貯存UHT乳的脂肪酶含量。 脂肪酶的檢測(cè)步驟與實(shí)施例1中的檢測(cè)步驟相同。
當(dāng)T—4(TC貯存的UHT乳中的脂肪酶含量達(dá)到101.6U時(shí)，落入了所設(shè)定 的貨架期參考值100.5-104.9 U范圍內(nèi)，記錄實(shí)際貯存時(shí)間tl為20天。
將M、T1和tl代入上述方程即Log20=A/40+0.082，求得特征系數(shù)A=48.76。 將M、 A和常溫溫度T2^25i:代入上述方程，即Logt2=48.76/25+0.082，求得常
溫下貯存該UHT乳的貨架期t2為108天。
將該UHT乳在常溫25。C下貯存，每三天檢測(cè)脂肪酶含量，脂肪酶含量達(dá)到 上述貨架期參考值時(shí)記錄常溫下的貯存時(shí)間為116天。該UHT乳的實(shí)際貨架期 與上述預(yù)測(cè)結(jié)果相差8天。
實(shí)施例6預(yù)測(cè)UHT乳的貨架期
設(shè)定常溫(T2=25°C)下UHT乳中的脂肪酶含量的貨架期參考值為 100.5-104.9 U，該貨架期參考值下，貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程
Logt=A/T+M
其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)。 該參考值下的相關(guān)系數(shù)取M=0.076。
自生產(chǎn)之日起，抽取一個(gè)批次的UHT乳樣品，貯存于5(TC下，每三天測(cè)定 一次實(shí)際貯存溫度(T1=50°C)貯存UHT乳的脂肪酶含量。 脂肪酶的檢測(cè)步驟與實(shí)施例1中的檢測(cè)步驟相同。
當(dāng)T1-50'C貯存的UHT乳中的脂肪酶含量達(dá)到104.9U時(shí)，落入了所設(shè)定 的貨架期參考值100.5-104.9 U范圍內(nèi)，記錄實(shí)際貯存時(shí)間tl為7天。
將M、T1和tl代入上述方程即Log13=A/50+0.076，求得特征系數(shù)A=38.45。 將M、 A和常溫溫度T2^25。C代入上述方程，即Logt2=38.45/25+0,076，求得常 溫下貯存該UHT乳的貨架期t2為41天。
將該UHT乳在常溫25'C下貯存，每三天檢測(cè)脂肪酶含量，脂肪酶含量達(dá)到 上述貨架期參考值時(shí)記錄常溫下的貯存時(shí)間為47天。該UHT乳的實(shí)際貨架期 與上述預(yù)測(cè)結(jié)果相差6天。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，以上實(shí)施例中所述的每三天或每五天檢測(cè)一次， 并不意味著全部檢測(cè)都必須嚴(yán)格的按照該時(shí)間間隔進(jìn)行。在檢測(cè)所得到的脂肪 酶含量較為接近貨架期參考值時(shí)，檢測(cè)間隔可以縮短，例如每天檢測(cè)一次，以 得到準(zhǔn)確的結(jié)果。
用脂肪酶含量檢測(cè)UHT乳貨架期的方法，可在較短時(shí)間內(nèi)確定UHT乳新 產(chǎn)品貨架期，減少研發(fā)周期與人力物力的投入，使研發(fā)成果盡快轉(zhuǎn)化為經(jīng)濟(jì)效 益，計(jì)算方法簡(jiǎn)單易行。
權(quán)利要求
1. 一種預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法，包括如下步驟1)設(shè)定一個(gè)常溫T2下UHT乳中的脂肪酶含量值作為貨架期參考值，所述貨架期參考值下貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程Logt＝A/T+M其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)；2)檢測(cè)實(shí)際貯存溫度T1下貯存的UHT乳中的脂肪酶含量，當(dāng)實(shí)際貯存時(shí)間t1檢測(cè)得到脂肪酶含量值達(dá)到所述貨架期參考值時(shí)，將所述實(shí)際貯存溫度T1和所述實(shí)際貯存時(shí)間t1代入上述方程，求得特征系數(shù)A；3)將所述相關(guān)系數(shù)M、特征系數(shù)A和所述常溫溫度T2代入上述方程，求得所述UHT乳在常溫下的貨架期t2。
2. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述貨架期參考值為100.5-104.9U。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述相關(guān)系數(shù)M為0.075-0.082。
4. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述實(shí)際貯存溫度T1為40-50'C， 優(yōu)選為45'C。
5. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述常溫T2為25'C。
6. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中，每3-5天檢測(cè)一次 所貯存的UHT乳中的脂肪酶含量。
7. 如權(quán)利要求l-6之一所述的方法，其特征在于，所述檢測(cè)貯存的UHT乳中的 脂肪酶含量的方法為a. )制備多個(gè)不同濃度的脂肪酶標(biāo)準(zhǔn)溶液，并將其注入平板培養(yǎng)基的孔中，培養(yǎng)，測(cè)量擴(kuò)散圈直徑，根據(jù)所測(cè)得的數(shù)據(jù)，繪制脂肪酶含量與擴(kuò)散圈 直徑之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線；b. )將所述UHT乳注入所述平板培養(yǎng)基的孔中，培養(yǎng)，測(cè)量所述UHT乳的擴(kuò)散圈直徑，將檢測(cè)得到的擴(kuò)散圈直徑與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)，得到貯存的 UHT乳中的脂肪酶含量。
8. 如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述平板培養(yǎng)基的配制方法為1.2%(W/W)瓊脂溶于0.1M磷酸鈉緩沖溶液(pH=8.0)，溶解后于121'C，滅菌 5min，滅菌后加入0.15% (V/V)的三丁酸甘油酯和0.05% (W/V)的疊氮鈉， 混合乳化lmin，將熱混合液15mL注入培養(yǎng)皿內(nèi)，冷卻。
9. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法為用脂肪酶和0.1M磷酸鈉緩沖溶液(pH=8.0)制成標(biāo)準(zhǔn)溶液20U、 40U、 60U、 80U、 IOOU、 120U;用滅菌的打孔器在平板培養(yǎng)基內(nèi)打孔，孑L徑4mm，每孔 注入20uL標(biāo)準(zhǔn)溶液；平板培養(yǎng)基在37'C下培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè)量擴(kuò)散圈直徑， 繪制脂肪酶含量與擴(kuò)散圈直徑之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
10. 如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶含量的測(cè)定方法如下 每lmL貯存的UHT乳加入5nL10。/。疊氮鈉(W/V)，震蕩；用滅菌的打孔器 在平板內(nèi)打孔，孔徑4mm，每孔注入20uL處理過的UHT乳；平板培養(yǎng)基在 37'C下培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè)量擴(kuò)散圈直徑，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)得到脂肪酶含量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法，包括如下步驟設(shè)定一個(gè)常溫T2下UHT乳中的脂肪酶含量值作為貨架期參考值，所述貨架期參考值下貯存時(shí)間和貯存溫度滿足如下方程Logt＝A/T+M，其中，t為貯存時(shí)間，T為貯存溫度，A為特征系數(shù)，M為相關(guān)系數(shù)；檢測(cè)實(shí)際貯存溫度T1下貯存的UHT乳中的脂肪酶含量，當(dāng)實(shí)際貯存時(shí)間t1檢測(cè)得到脂肪酶含量值達(dá)到貨架期參考值時(shí)，將T1和t1代入方程，求得A；將M、A和T2代入方程，求得所述UHT乳在常溫下的貨架期t2。本發(fā)明建立了一種用脂肪酶含量預(yù)測(cè)UHT乳貨架期的方法，在開發(fā)UHT乳新產(chǎn)品時(shí)，可用這種方法在較短時(shí)間內(nèi)確定其貨架期，使研發(fā)成果盡快轉(zhuǎn)化為經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)G01N33/04GK101387627SQ20081017169
公開日2009年3月18日 申請(qǐng)日期2008年10月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月24日
發(fā)明者劉衛(wèi)星, 雪 白, 胡新宇, 郭奇慧 申請(qǐng)人:內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)(集團(tuán))股份有限公司