專利名稱：：測(cè)定配方營(yíng)養(yǎng)食品中蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本申請(qǐng)涉及食品領(lǐng)域，具體的說(shuō)涉及一種利用離子色譜儀測(cè)定嬰幼兒配方食品中蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂的方法。
背景技術(shù)：
：嬰幼兒配方營(yíng)養(yǎng)食品主要包括配方乳粉及配方谷粉等產(chǎn)品，其優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品對(duì)嬰幼兒的正常生長(zhǎng)發(fā)肓起到了促進(jìn)作用，但不法廠商生產(chǎn)的偽劣產(chǎn)品對(duì)嬰幼兒的健康成長(zhǎng)帶來(lái)了很大的危害。因此，對(duì)該類產(chǎn)品的重要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)具有重大意義。目前，測(cè)定嬰幼兒配方營(yíng)養(yǎng)食品中蛋白質(zhì)含量的方法仍延用凱氏定氮法，操作繁雜；而鈉、鉀、鈣、鎂金屬元素普遍采用原子吸收分光光度法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定時(shí)，需加入不同量的抗干擾試劑，還需換用相應(yīng)元素的空心陰極燈；以上指標(biāo)的傳統(tǒng)測(cè)定方法還存在著諸如消解時(shí)間長(zhǎng)、用酸量大、測(cè)定方法效率低、基體干擾較嚴(yán)重、再現(xiàn)性差等問(wèn)題。本申請(qǐng)的目的在于克服上述缺陷，采用離子色譜儀進(jìn)行嬰幼兒配方營(yíng)養(yǎng)食品中蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂五項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定，簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，靈敏度及精密度高，具有推廣意義。
發(fā)明內(nèi)容本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N利用離子色譜儀測(cè)定嬰幼兒配方營(yíng)養(yǎng)食品中蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂的方法，其步驟包括-(1)樣品消解選用濃硫酸一雙氧水體系用常規(guī)方法消解樣品，直至瓶?jī)?nèi)消化液呈無(wú)色透明，再升溫至30(TC加熱30分鐘；用去離子水多次洗滌，洗滌液并入100ml容量瓶，加水至刻度，搖勻放冷，得樣品液l;同條件做試劑空白；(2)調(diào)節(jié)樣品pH值氧化鋅中和法準(zhǔn)確移取5mL樣品液1于50mL三角燒瓶，置電熱板上不超過(guò)160。C揮發(fā)至近干，取下放冷后沿瓶壁旋轉(zhuǎn)加入15mL均勻氧化鋅混懸液，混勻，若出現(xiàn)沉淀，可滴加三滴鹽酸溶液，晃搖促溶；沿瓶壁加入5mL去離子水，混勻后加熱至液體剩余約5mL，取下放冷后用去離子水多次洗滌，洗滌液并入50mL容量瓶并定容，此為樣品液2;同條件處理試劑空白溶液；或者采用碘化氫還原法準(zhǔn)確移取5mL樣品液1于50mL三角燒瓶，置電熱板上不超過(guò)16(TC揮發(fā)至近干，取下放冷后沿瓶壁旋轉(zhuǎn)緩慢加入10mL10。/。氫碘酸溶液(臨用新配)，洗下沾在瓶壁的硫酸，混勻，放置2分鐘，沿瓶壁加入10mL去離子水，混勻后于18(TC加熱使液體棕黃色(或紫紅色)褪盡呈透明澄清(此過(guò)程適當(dāng)補(bǔ)加去離子水防止溶液揮干)，繼續(xù)加熱至液體剩余約5mL，取下放冷后用去離子水多次洗滌，洗滌液并入50mL容量瓶并定容，此為樣品液3，同條件處理試劑空白溶液。最終樣品液的pH值控制在1.5-6之間。(3)用離子色譜儀測(cè)定選用IonpacCS12A色譜柱；淋洗液采用5—30mmoL/L甲烷磺酸水溶液，優(yōu)選20mmoL/L;流速0.8-1.lmL/分，優(yōu)選1.0mL/分；抑制器電流為50—70mA，優(yōu)選69mA;測(cè)定量程1030(Vs;積分起始時(shí)間2.8分鐘；時(shí)間框量20秒；進(jìn)樣量25氮?dú)鈮毫?0kP;采樣時(shí)間16分鐘。在選定的儀器測(cè)定條件下，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列中鈉、氮、鉀、鎂、鈣不同濃度下的峰面積，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線、樣品和空白樣的值計(jì)算最終結(jié)果。用淋洗液按表1配制混合標(biāo)準(zhǔn)系列，在相同的儀器條件下測(cè)定，將儀器軟件標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方式設(shè)定為二次擬合，以各組分濃度及對(duì)應(yīng)的峰面積儀器軟件自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表2。表l鈉、氮、鉀、鎂、鈣混合標(biāo)準(zhǔn)系列配制方法<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2各待測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍、擬合方式、相關(guān)系數(shù)待測(cè)元素線性范圍(mg/L)曲線擬合方式相關(guān)系i~~S0.3120二次擬合0.999氮0.2-250二次擬合0.999<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結(jié)果計(jì)算公式蛋白質(zhì)含量計(jì)算公式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>式中:X—樣品中蛋白質(zhì)含量，g/100g;m—取樣質(zhì)量，g;Cl、CO—分別為樣品液及空白樣液中氮濃度，mg/L;K一氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)，乳粉為6.38，含乳配方食品為6.25，純谷物類配方食品為5.90。鈉、鉀、鈣、鎂含量計(jì)算公式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>式中X—樣品中鈉、鉀、鈣、鎂的含量，mg/100g;m—取樣質(zhì)量，g;Cl、co—分別為樣品液及空白樣液中鈉、鉀、鈣、鎂濃度，mg/L;圖1:鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜圖2:氮標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜圖3:鉀標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜圖4:鎂標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜圖5:鈣標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜圖6鈉、氮、鉀、鎂、鈣分離圖譜具體實(shí)施例方式l.主要儀器、試劑、材料(1)主要儀器設(shè)備美國(guó)戴安公司ICS-1500離子色譜儀(附CG12A保護(hù)柱、IonpacCS12A色譜柱、CSRS—ULTRA4mm自身再生型抑制柱、DS-6電導(dǎo)檢測(cè)器)、賽多利斯BS400S-WE1及BP211D電子天平、上海和泰公司純水機(jī)、控溫電爐、電熱板、廣泛pH試紙。(2)標(biāo)準(zhǔn)液及試劑鈉、鉀、鈣、鎂標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，來(lái)源于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，濃度均為lmg/mL;氮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液將光譜純氯化銨置于烘箱內(nèi)，在10210『C烘烤1小時(shí)，冷卻后稱取3.8190g，溶于去離子水中轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶?jī)?nèi)并定容，濃度為lmg/mL(以氮計(jì))。甲烷磺酸、硫酸、雙氧水(30%)、氧化鋅混懸液(稱取O.l克優(yōu)級(jí)純氧化鋅，去離子水定容至100mL，用前振搖成均勻混懸液)，鹽酸、氫碘酸，以上試劑均為優(yōu)級(jí)純以上級(jí)別(有條件可選用進(jìn)口試劑)，試驗(yàn)用水均為電阻率為18.2MQ/cm的去離子水。(3)玻璃器皿容量瓶、移液管、凱氏燒瓶、三角燒瓶、燒杯、玻璃棒等。所用的玻璃器皿均需在硫酸-重鉻酸鉀洗液中浸泡24小時(shí)以上，用肥皂水洗滌，并用去離子水沖洗干凈。(4)儀器工作條件淋洗液濃度20mmoL/L甲垸磺酸水溶液；淋洗液流速1.0mL/min;抑制器電流69mA;測(cè)定量程10300|as;積分起始時(shí)間2.8分鐘；時(shí)間框量20秒；進(jìn)樣量25PL;氮?dú)鈮毫?0kP;采樣時(shí)間16分鐘。實(shí)施例l標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制用淋洗液按表3配制混合標(biāo)準(zhǔn)曲線，在選定的儀器條件下測(cè)定，將儀器軟件標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方式設(shè)定為二次擬合，以各組分濃度及對(duì)應(yīng)的峰面積儀器軟件自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖l一5。表3鈉、氮、鉀、鎂、鈣混合標(biāo)準(zhǔn)系列配制方法<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實(shí)施例2鈉、氮、鉀、鎂、鈣在IonpacCS12A色譜柱上的分離試驗(yàn)配制鈉、氮、鉀、鎂、鈣濃度均為50mg/L的單一標(biāo)準(zhǔn)溶液及混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的儀器條件下進(jìn)樣測(cè)定，以其各組分單標(biāo)的洗脫出峰時(shí)間定性，混合標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)樣后得到其混標(biāo)洗脫出峰圖譜，如圖6所示，各相鄰組分均有良好的分離效果。鈉、氮、鉀、鎂、鈣在IonpacCS12A色譜柱上的出峰圖譜見(jiàn)圖6。表4為組分分離圖譜相關(guān)數(shù)據(jù)。表4組分分離圖譜相關(guān)數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例3樣品消解準(zhǔn)確稱取3g混勻試樣于250mL凱氏定氮燒瓶中，加入15mL濃硫酸與樣品充分混勻，蓋上小漏斗放置過(guò)夜。置電爐上低溫加熱至呈黑色黏稠狀，此過(guò)程中若內(nèi)容物呈黑色塊狀，取下放冷后以潔凈玻棒搗碎，并用20mL沸騰去離子水洗滌玻棒，洗液并入凱氏定氮燒瓶；升溫至30(TC，蓋上小漏斗繼續(xù)加熱30分鐘。取下放冷后沿瓶壁緩慢加入20mL30y。過(guò)氧化氫，注意沖下沾染在瓶壁的炭粒，混勻，蓋上小漏斗置電爐上30(TC繼續(xù)加熱，如溶液未呈現(xiàn)透明，可繼續(xù)重復(fù)此步驟，直到瓶?jī)?nèi)消化液呈無(wú)色透明為止。取下小漏斗，繼續(xù)加熱30分鐘。取下放冷后用去離子水多次洗滌，洗滌液并入100mL容量瓶，加水至刻度，搖勻放冷，此為樣品液l。同條件做試劑空白。實(shí)施例4氧化鋅中和硫酸法調(diào)整PH值準(zhǔn)確移取5mL樣品液1于50mL三角燒瓶，置電熱板上不超過(guò)16(TC揮至近干，取下放冷后沿瓶壁旋轉(zhuǎn)加入15mL均勻氧化鋅混懸液，混勻，若出現(xiàn)沉淀，可滴加三滴鹽酸溶液，晃搖促溶；沿瓶壁加入5mL去離子水，混勻后加熱至液體剩余約5mL，取下放冷后用去離子水多次洗滌，洗滌液并入50mL容量瓶并定容，此為樣品液2。同條件處理試劑空白溶液。離子色譜儀測(cè)定樣品液2及空白樣液，與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照得出濃度值，并根據(jù)公式計(jì)算樣品蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂含量。實(shí)施例5碘化氫還原硫酸法調(diào)整PH值準(zhǔn)確移取5mL樣品液1于50mL三角燒瓶，置電熱板上不超過(guò)160。C揮至近干，取下放冷后沿瓶壁旋轉(zhuǎn)緩'漫加入10mL10y。氫碘酸溶液(臨用新配)，洗下沾在瓶壁的硫酸，混勻，放置2分鐘，沿瓶壁加入10mL去離子水，混勻后于18(TC加熱使液體棕黃色褪盡呈透明澄清(此過(guò)程適當(dāng)補(bǔ)加去離子水防止溶液揮干)，繼續(xù)加熱至液體剩余約5mL，取下放冷后用去離子水多次洗滌，洗滌液并入50mL容量瓶并定容，此為樣品液3。同條件處理試劑空白溶液。離子色譜儀測(cè)定樣品液3及空白樣液，與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照得出濃度值，并根據(jù)公式計(jì)算樣品中蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂含量。實(shí)施例6方法精密度試驗(yàn)按本方法消解樣品，分別以氧化鋅中和法與碘化氫還原法調(diào)節(jié)樣品液pH值，各進(jìn)樣6次測(cè)定，其方法精密度指標(biāo)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)見(jiàn)表5、表6。表5氧化鋅中和法精密度試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實(shí)施例7方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)在樣品中加入低、高兩個(gè)濃度的待測(cè)成份，按方法消解樣品，分別以氧化鋅中和法與碘化氫還原法調(diào)節(jié)樣品液pH值，對(duì)每個(gè)樣品分析6次，計(jì)算其回收率，其方法準(zhǔn)確度指標(biāo)回收率見(jiàn)表7、表8。表7氧化鋅中和法加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實(shí)施例8對(duì)某品牌嬰幼JL配方乳粉的測(cè)定結(jié)果按本文所述對(duì)某品牌嬰幼兒配方乳粉進(jìn)行消解，并分別采用氧化鋅中和法及碘化氫還原法調(diào)節(jié)pH值，其測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表9及表10。表9采用氧化鋅中和法，某品牌嬰幼兒配方乳粉的測(cè)定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>對(duì)某品牌嬰幼兒配方米粉的測(cè)定結(jié)果按本文所述對(duì)某品牌嬰幼兒配方米粉進(jìn)行消解，并分別采用氧化鋅中和法及碘化氫還原法調(diào)節(jié)pH值，其測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表11及表12。表11采用氧化鋅中和法，某品牌嬰幼兒配方米粉的測(cè)定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>鈉mg/100g蛋白質(zhì)g/羅g鉀mg/100g鎂mg/100g鈣mg/100g權(quán)利要求1.一種利用離子色譜儀測(cè)定嬰幼兒配方營(yíng)養(yǎng)食品中蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂的方法，其步驟包括(1)樣品消解選用濃硫酸-雙氧水體系用常規(guī)方法消解樣品，直至瓶?jī)?nèi)消化液呈無(wú)色透明，再升溫至300℃加熱30分鐘；用去離子水多次洗滌，洗滌液并入100ml容量瓶，加水至刻度，搖勻放冷，得樣品液1；同條件做試劑空白。(2)調(diào)節(jié)樣品pH值氧化鋅中和法準(zhǔn)確移取5mL樣品液1于50mL三角燒瓶，置電熱板上不超過(guò)160℃揮發(fā)至近干，取下放冷后沿瓶壁旋轉(zhuǎn)加入15mL均勻氧化鋅混懸液，混勻；沿瓶壁加入5mL去離子水，混勻后加熱至液體剩余約5mL，取下放冷后用去離子水多次洗滌，洗滌液并入50mL容量瓶并定容，此為樣品液2；同條件處理試劑空白溶液。(3)樣品用離子色譜儀測(cè)定選用IonpacCS12A色譜柱；采用5-30mmoL/L甲烷磺酸作淋洗液，優(yōu)選20mmoL/L；流速0.8-1.1mL/分，優(yōu)選1.0mL/分；抑制器電流為50-70mA，優(yōu)選69mA；測(cè)定量程10～300μs；積分起始時(shí)間2.8分鐘；時(shí)間框量20秒；進(jìn)樣量25μL；氮?dú)鈮毫?0KP；采樣時(shí)間16分鐘。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于采用碘化氫還原法調(diào)節(jié)樣品pH值準(zhǔn)確移取5mL樣品液1于50mL三角燒瓶，置電熱板上不超過(guò)160'C揮發(fā)至近干，取下放冷后沿瓶壁旋轉(zhuǎn)緩慢加入10mL10%氫碘酸溶液，洗下沾在瓶壁的硫酸，混勻，放置2分鐘，沿瓶壁加入10mL去離子水，混勻后于18(TC加熱使液體棕黃色(或紫紅色)褪盡呈透明澄清，繼續(xù)加熱至液體剩余約5mL，取下放冷后用去離子水多次洗滌，洗滌液并入50mL容量瓶并定容，此為樣品液3，同條件處理試劑空白溶液。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于pH值控制在1.5—6之間。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于采用20mmoL/L甲垸磺酸作淋洗液。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于淋洗液流速為1.0mL/分。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于抑制器電流為69mA。全文摘要本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N利用離子色譜儀測(cè)定嬰幼兒配方營(yíng)養(yǎng)食品中蛋白質(zhì)、鈉、鉀、鈣、鎂的方法，其步驟包括使用硫酸—雙氧水體系消解樣品、氧化鋅中和法或碘化氫還原法調(diào)節(jié)pH值、特定條件離子色譜儀測(cè)定等步驟。該方法克服現(xiàn)有技術(shù)中測(cè)定方法效率低、基體干擾嚴(yán)重、再現(xiàn)性差等缺陷。文檔編號(hào)G01N30/96GK101354387SQ200810211369公開(kāi)日2009年1月28日申請(qǐng)日期2008年9月24日優(yōu)先權(quán)日2008年9月24日發(fā)明者寧房,潔高申請(qǐng)人:北京市大興區(qū)疾病預(yù)防控制中心