專利名稱：：一種2-氯煙酸含量的分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于分析
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及含量分析方法，特別涉及一種2-氯煙酸含量分析技術(shù)。
背景技術(shù)：
：近年來(lái)隨著農(nóng)藥和醫(yī)藥科學(xué)的發(fā)展，煙酸系列化學(xué)品越來(lái)越受到廣泛地關(guān)注和應(yīng)用。其中2-氯煙酸作為農(nóng)用和醫(yī)用中間體被用于制備新型高效除草劑、非茲體抗炎癥藥物高效消炎鎮(zhèn)痛尼氟滅酸、普拉洛芬等，這些產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)外供不應(yīng)求。2-氯煙酸的中文名稱2-氯煙酸、2-氯-3-吡啶甲酸，英文名稱2-chloronicotinicacid、2-chloro-3-pyridinecarboxylicacid，分子式為C6H4C1N02，分子量為157.56,2-氯煙酸為白色或原白色結(jié)晶性粉末，熔點(diǎn)為176-178°C。2-氯煙酸作為一種重要的醫(yī)藥和農(nóng)藥中間體，它在生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生副產(chǎn)物6-氯煙酸。6-氯煙酸若含量過(guò)高，將嚴(yán)重影響后續(xù)產(chǎn)品的品質(zhì)，因此對(duì)2-氯煙酸含量測(cè)定非常重要。經(jīng)査閱國(guó)內(nèi)外有關(guān)文獻(xiàn)，未見(jiàn)有關(guān)2-氯煙酸含量的分析報(bào)道，而為了保證2-氯煙酸生產(chǎn)過(guò)程中的實(shí)時(shí)控制，特別需要一種2-氯煙酸含量的檢測(cè)方法。
發(fā)明內(nèi)容針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中沒(méi)有對(duì)于2-氯煙酸含量的分析方法，本發(fā)明提供了一種采用高效液相色譜分析的方法，對(duì)2-氯煙酸含量進(jìn)行分析，該方法專屬性強(qiáng)，精密度好，回收率高的高效液相色譜法，特別適用于農(nóng)藥原藥中間產(chǎn)品的質(zhì)量控制，從而滿足后續(xù)產(chǎn)品的生產(chǎn)要求。本發(fā)明所釆用的分析方法具體如下釆用高效液相色譜外標(biāo)方法分析，具體采用ZORBAXSB-Phenyl不銹鋼填充柱，柱長(zhǎng)150亳米，柱內(nèi)徑4.6亳米，所用填料粒徑為3.5微米，柱室溫度為30°C;經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)采用這種色譜柱進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，對(duì)于2-氯煙酸而言是最佳的，因此優(yōu)選釆用了這種色譜柱，本色譜柱所釆用的與已有技術(shù)中釆用的Z0RBAXSB-Phenyl不銹鋼填充柱相同，可在巿場(chǎng)上直接購(gòu)得。具體檢測(cè)方法如下以下的流動(dòng)相比例全是體積分?jǐn)?shù)為了得到良好的分離效果，采用以PH=2-3的磷酸鹽緩沖溶液與甲醇的混合體系為流動(dòng)相，甲醇在流動(dòng)相中的體積分?jǐn)?shù)為20%至30%;由于磷酸鹽本身是弱酸鹽，因此為了保證檢測(cè)過(guò)程中的酸性環(huán)境，需要調(diào)節(jié)整個(gè)緩沖液的PH=2-3，發(fā)明人最終發(fā)現(xiàn)當(dāng)整個(gè)緩沖液的PH=2.4時(shí)，分離效果最為理想，且穩(wěn)定性好，因此優(yōu)選緩沖液的PH=2.4。用純甲醇作溶劑分別溶解標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和待測(cè)樣品，得到標(biāo)樣和試樣；將高效液相色譜的檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定為230nm至254nm，儀器基線穩(wěn)定后，按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣的順序依次進(jìn)樣，得到四條掃描曲線，分別對(duì)標(biāo)樣和試樣的2-氯煙酸峰面積進(jìn)行平均，得其峰面積平均值；按照下式對(duì)2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行計(jì)算^_4，rA」1.附3式中A一一標(biāo)樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；A2——試樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；m丄--氺示樣的質(zhì)量，g;m2--試樣的質(zhì)量，g;P,—一標(biāo)樣中2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，％。針對(duì)于2-氯煙酸，現(xiàn)有的技術(shù)中沒(méi)有相應(yīng)的采用高效液相色譜的檢測(cè)方法，而其檢測(cè)波長(zhǎng)也是未知的，而通過(guò)對(duì)其自身性質(zhì)的研究，發(fā)明人將其檢測(cè)波長(zhǎng)確定在了230nm至254nm，在該波長(zhǎng)內(nèi)，可以釆用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行含量的檢測(cè)，提高了檢測(cè)的精度，同時(shí)也填補(bǔ)了現(xiàn)有技術(shù)中的空白。為了達(dá)到更好的檢測(cè)效果和準(zhǔn)確度，開(kāi)啟機(jī)器自檢通過(guò)后，在規(guī)定的操作條件下，儀器基線穩(wěn)定后連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值,達(dá)到相鄰兩針相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%時(shí)再進(jìn)行依次進(jìn)樣，這樣可以有效的降低由于儀器開(kāi)機(jī)后的不穩(wěn)定而造成的誤差，提高最終檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。一般控制流動(dòng)相中甲醇的體積分?jǐn)?shù)為23%,每次進(jìn)樣的樣品體積為20微升；同時(shí)控制流動(dòng)相的流速為lml/min，檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)在235nm，對(duì)2-氯煙酸來(lái)說(shuō)，這是最穩(wěn)定的紫外吸收波長(zhǎng)。所采用的磷酸鹽緩沖溶液主要釆用磷酸二氫鹽，如可以釆用磷酸二氫鈉的緩沖液或磷酸二氫鉀的緩沖溶液，優(yōu)選釆用磷酸二氫鈉的緩沖溶液，其制備方法是稱取3.45克磷酸二氫鈉加1000亳升的水，用85。/。磷酸調(diào)至PH值為2-3待用。綜上所述，本發(fā)明提供了一種全新的檢測(cè)2-氯煙酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的方法，填補(bǔ)了現(xiàn)有技術(shù)中相應(yīng)領(lǐng)域的技術(shù)空白，采用上述方法檢測(cè)2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，可以實(shí)現(xiàn)雜質(zhì)與主峰分離完全，色譜峰形好，積分計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好，所得的結(jié)果可信度高，特別適用于農(nóng)藥原藥中間產(chǎn)品的質(zhì)量控制，對(duì)保證最終產(chǎn)品的質(zhì)量具有重要作用和現(xiàn)實(shí)意義。圖1是實(shí)施例1中2-氯煙酸在色譜條件下的色譜圖；圖中1處的色譜峰為2-氯煙酸的峰，其保留時(shí)間為6.950分鐘。具體實(shí)施例方式實(shí)施過(guò)程中所釆用的高效液相色譜儀為安捷倫公司生產(chǎn)的1120液相色譜儀。實(shí)施例1現(xiàn)有一批2-氯煙酸貨物，數(shù)量500公斤，需檢測(cè)該批貨物中2-氯煙酸的有效含量。色譜柱條件采用ZORBAXSB-Phenyl3.5um，4.6x150mm不銹鋼色譜柱進(jìn)行分離，柱室溫度為3(TC,以PH4.4的磷酸鹽緩沖溶液甲醇(體積比)=77:23為流動(dòng)相，流速為1.Oml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm,進(jìn)樣體積為20微升；所采用的磷酸鹽緩沖溶液釆用下述方法制備稱取3.45克磷酸二氫鈉加1000亳升的水，用85y。磷酸調(diào)至PH值為2.4。標(biāo)樣溶液配制準(zhǔn)確稱取2-氯煙酸標(biāo)樣O.0509g，置于100mL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到標(biāo)樣溶液備用。試樣溶液配制準(zhǔn)確稱取含2-氯煙酸O.0518g試樣，置于100mL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到試樣溶液備用。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理開(kāi)啟儀器自檢通過(guò)后，在規(guī)定的操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，達(dá)到相鄰兩針相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%時(shí)，按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣的順序依次進(jìn)樣，在235mn波長(zhǎng)下檢測(cè)，得數(shù)據(jù)如下<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>XI將測(cè)得的2針試樣溶液以及其前后2針標(biāo)樣溶液中2-氯煙酸峰面積分別進(jìn)行平均，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示2-氯煙酸的含量X,按下式計(jì)算A.戰(zhàn)2式中A:—一標(biāo)樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值;A2—一試樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值;iih——標(biāo)樣的質(zhì)量，g;m2--試樣的質(zhì)量，g;Pi—一標(biāo)樣中2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，％計(jì)算可得樣品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.78%。實(shí)施例2現(xiàn)有一批2-氯煙酸貨物，數(shù)量1000公斤，需檢測(cè)該批貨物中2-氯煙酸的有效含量。色譜柱條件采用Z0RBAXSB-Phenyl3.5um，4.6x150mm不銹鋼色譜柱進(jìn)行分離，柱室溫度為30。C,以ra=2.0的磷酸緩沖溶液甲醇體積比=80:20為流動(dòng)相，流速為1.Oral/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣體積為20微升；所采用的磷酸鹽緩沖溶液采用下述方法制備稱取3.45克磷酸二氫鈉加1000亳升的水，用85%磷酸調(diào)至PH值為2.0。標(biāo)樣溶液配制準(zhǔn)確稱取2-氯煙酸標(biāo)樣O.0512g,置于100mL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到標(biāo)樣溶液備用。試樣溶液配制準(zhǔn)確稱取含2-氯煙酸0.0506g試樣，置于lOOmL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到試樣溶液備用。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理開(kāi)啟儀器自檢通過(guò)后，在規(guī)定的操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，達(dá)到相鄰兩針相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%時(shí)，按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣的順序依次進(jìn)樣，在254nm波長(zhǎng)下檢測(cè)，得數(shù)6據(jù)如下:樣品稱樣量色譜峰面積色譜峰面積平均值含量標(biāo)樣Ml0.0512g2560147825605677PI99.32%25609875試樣M20.Q506g2520987625205816XI25201756將測(cè)得的2針試樣溶液以及其前后2針標(biāo)樣溶液中2-氯煙酸峰面積分別進(jìn)行平均，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示2-氯煙酸的含量Xi按下式計(jì)算式中A:—一標(biāo)樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；A2—一試樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；mi——標(biāo)樣的質(zhì)量，g;m2——試樣的質(zhì)量，g;Pi—一標(biāo)樣中2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，％計(jì)算可得樣品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.93%。實(shí)施例3現(xiàn)有一批2-氯煙酸貨物，數(shù)量800公斤，需檢測(cè)該批貨物中2-氯煙酸的有效含量。色譜柱條件采用Z0RBAXSB-Phenyl3.5um,4.6x150mm不銹鋼色譜柱進(jìn)行分離，柱室溫度為30。C,以ra-3.0的磷酸緩沖溶液甲醇體積比=70:30為流動(dòng)相，流速為1.Oml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm,進(jìn)樣體積為20微升；所采用的磷酸鹽緩沖溶液采用下述方法制備稱取3.45克磷酸二氫鈉加1000毫升的水，用85。/。磷酸調(diào)至PH值為3.0。標(biāo)樣溶液配制準(zhǔn)確稱取2-氯煙酸標(biāo)樣O.0496g，置于100mL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到標(biāo)樣溶液備用。試樣溶液配制準(zhǔn)確稱取含2-氯煙酸0.0510g試樣，置于100mL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到試樣溶液備用。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理開(kāi)啟儀器自檢通過(guò)后，在規(guī)定的搡作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，達(dá)到相鄰兩針相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%時(shí)，按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣的順序依次進(jìn)樣，在230nm波長(zhǎng)下檢測(cè)，得數(shù)據(jù)如下<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>將測(cè)得的2針試樣溶液以及其前后2針標(biāo)樣溶液中2-氯煙酸峰面積分別進(jìn)行平均，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示2-氯煙酸的含量Xi按下式計(jì)算^.附2式中、一一標(biāo)樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；A2—一試樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；m:——標(biāo)樣的質(zhì)量，g;m2—一試樣的質(zhì)量，g;Pi—一標(biāo)樣中2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，％計(jì)算可得樣品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.51%。為驗(yàn)證上述發(fā)明所述方法的可行性和準(zhǔn)確性，進(jìn)行了如下驗(yàn)證試驗(yàn)試驗(yàn)例1色譜條件采用ZORBAXSB-Phenyl3.5um,4.6x150mm不銹鋼色譜柱進(jìn)行分離，柱室溫度為30。C，以PH-2.4的磷酸緩沖溶液曱醇體積比=77:23為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm,進(jìn)樣體積為20微升。標(biāo)樣配制準(zhǔn)確稱取2-氯煙酸標(biāo)樣0.0513g,置于100niL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到標(biāo)樣備用。試樣配制準(zhǔn)確稱取含2-氯煙酸0.05g(精確至0.0002g)試樣,6份分別置于100mL容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到平行試樣備用。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理開(kāi)啟機(jī)器自檢通過(guò)后，在規(guī)定的操作條件下，儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，達(dá)到相鄰兩針相對(duì)響應(yīng)值變化小于l.5%時(shí)，按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣的順序依次進(jìn)樣，在235nm進(jìn)行掃描，雜質(zhì)分離完全，峰形良好，按式(1)計(jì)算試樣的有效成分含量，結(jié)果列于表l表1<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表中數(shù)據(jù)可見(jiàn)，該方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性良好。試驗(yàn)例2色譜柱條件、標(biāo)樣配制、測(cè)試于計(jì)算方法同試驗(yàn)例1,以PH-2.O的轔酸緩沖溶液甲醇(體積比)=80:20為流動(dòng)相，流速為1.Oml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230進(jìn)樣體積為20微升。試樣配制分別稱取適量2-氯煙酸，加甲醇溶解并稀釋成含2-氯煙酸215ug/ml、318ug/ml、432ug/ml、511ug/ml、614ug/m、705ug/ml、814ug/ml、916ug/ml的一組2-氯煙酸試樣備用。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理依法在230nm進(jìn)行測(cè)定，以峰面積(A)對(duì)樣品濃度，作線性回歸，得到回歸方程為y=1351.2x+484.32相關(guān)系數(shù)r-O.9997可見(jiàn)2-氯煙酸在200-900ug/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。9試驗(yàn)例3色譜條件、標(biāo)樣配制、測(cè)試與計(jì)算方法同試驗(yàn)例1,以以PH=3.0的磷酸緩沖溶液甲醇(體積比)=70:30為流動(dòng)相，流速為1.Oml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣體積為20微升。試樣配制不同人員在不同實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確稱取含2-氯煙酸0.05g(精確至0.0002g)試樣6份，分別置于100ml容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到一組中間精密度試驗(yàn)用試樣備用。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理依法在254nm進(jìn)行掃描測(cè)定，雜質(zhì)分離完全，峰形良好，按式(1)計(jì)算試樣的有效成分含量，結(jié)果列于表2，表2\項(xiàng)目試驗(yàn)^\稱樣量(g)峰面積含量平均含量相對(duì)平均偏差u)10.05062580458998.6920.05122611789398.7630.04982540012398.7098.750.0340.05132616784598.8050.04782438369898.7860.05202652314698.75由表中數(shù)據(jù)可見(jiàn)，該方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果中間精密度良好。試驗(yàn)例4色譜柱條件、標(biāo)樣配制、測(cè)試與計(jì)算方法同試驗(yàn)例1，以P^2.4的磷酸緩沖溶液甲醇(體積比)=75:25為流動(dòng)相，流速為1.Oml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，進(jìn)樣體積為20微升。試樣配制不同人員在不同實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確稱取含2-氯煙酸0.0511g試樣，置于100ml容量瓶中，加30ml甲醇，超聲波振蕩溶解，冷至室溫后，用甲醇稀釋至刻度，得到試樣備用。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理10不同時(shí)間依法在230nm'進(jìn)行掃描測(cè)定，雜質(zhì)分離完全，峰形良好，按式(1)計(jì)算試樣的有效成分含量，結(jié)果列于表3表3時(shí)間RSD0/。0123612(h)峰面積2457891124561246245378932457892124574563245238970.09由表中數(shù)據(jù)可見(jiàn)，該方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)間穩(wěn)定性良好。試驗(yàn)例5色譜柱條件、標(biāo)樣配制、測(cè)試與計(jì)算方法同試驗(yàn)例1，以P^2.4的磷酸緩沖溶液甲醇(體積比)-77:23為流動(dòng)相，流速為1.Oml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm,進(jìn)樣體積為20微升。試樣配制以已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的2-氯煙酸產(chǎn)品為底樣，加入2-氯煙酸純品，定容做加標(biāo)回收試驗(yàn)。測(cè)試與數(shù)據(jù)處理在235nm進(jìn)行掃描測(cè)定，雜質(zhì)分離完全，峰形良好，按式(1)計(jì)算試樣的有效成分含量，結(jié)果列于表4，表4工業(yè)2-氯煙酸加2-氯煙酸2-氯煙酸回回收率平均回收相對(duì)平均偏差(%)質(zhì)量(mg)純品質(zhì)量(mg)收質(zhì)量(mg)(%)率(％)i35.4515.7815.80風(fēng)13226.9826.0826.0599.88330.4519.5619.57100.0599.930.107424.6925.9425.9099.85531.4921.6521.6399.91637.8912.5612.5399.76由表中數(shù)據(jù)可見(jiàn)，加標(biāo)回收率良好。權(quán)利要求1.一種2-氯煙酸含量的分析方法，其特征在于采用高效液相色譜外標(biāo)法分析，具體方法如下用純甲醇作溶劑分別溶解標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和待測(cè)樣品，得到標(biāo)樣和試樣；將高效液相色譜的檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定為230nm至254nm，儀器基線穩(wěn)定后，按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣的順序依次進(jìn)樣，得到四條掃描曲線，分別對(duì)標(biāo)樣和試樣的2-氯煙酸峰面積進(jìn)行平均，得其峰面積平均值；按照下式對(duì)2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行計(jì)算<mathsid="math0001"num="0001"><math><![CDATA[<mrow><msub><mi>X</mi><mn>1</mn></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><msub><mi>A</mi><mn>2</mn></msub><mo>·</mo><msub><mi>m</mi><mn>1</mn></msub><mo>·</mo><msub><mi>P</mi><mn>1</mn></msub></mrow><mrow><msub><mi>A</mi><mn>1</mn></msub><mo>·</mo><msub><mi>m</mi><mn>2</mn></msub></mrow></mfrac></mrow>]]></math></maths>式中A1——標(biāo)樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；A2——試樣中，2-氯煙酸峰面積的平均值；m1——標(biāo)樣的質(zhì)量；m2——試樣的質(zhì)量；P1——標(biāo)樣中2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)；X1——試樣中2-氯煙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于所用色譜柱為ZORBAXSB-Phenyl不銹鋼填充柱，柱長(zhǎng)150毫米，柱內(nèi)徑4.6亳米，所用填料粒徑為3.5微米，柱室溫度為3(TC。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于所述分析方法中的流動(dòng)相釆用PH=2-3的磷酸鹽緩沖溶液與甲醇的混合體系，甲醇在流動(dòng)相中的體積分?jǐn)?shù)為20%至30%。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的分析方法，其特征在于所述的流動(dòng)相中甲醇的體積分?jǐn)?shù)為23%。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的分析方法，其特征在于所述磷酸鹽緩沖溶液為磷酸二氫鈉的緩沖液或磷酸二氫鉀的緩沖溶液。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于每次進(jìn)樣的樣品體積20微升；流動(dòng)相的流速為1.Oml/min。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于高效液相色譜的檢測(cè)波長(zhǎng)控制在235nm。全文摘要本發(fā)明涉及藥物中間體的含量分析方法，特別提供了一種2-氯煙酸含量的分析方法，其為高效液相色譜外標(biāo)定量分析法，采用ZORBAXSB-Phenyl3.5μm，4.6×150mm不銹鋼色譜柱進(jìn)行分離，柱室溫度為30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm至254nm；用純甲醇作溶劑，以pH＝2.4的磷酸鹽緩沖溶液與甲醇的混合體系為流動(dòng)相；在230nm至254nm范圍得到理想的色譜峰形，通過(guò)測(cè)定樣品的響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的響應(yīng)值進(jìn)行比較，計(jì)算被測(cè)樣品中的2-氯煙酸含量。該方法準(zhǔn)確度高、精密度好、回收率高、簡(jiǎn)便、可行，特別適合農(nóng)藥中間體的分析，能有效控制2-氯煙酸的質(zhì)量。文檔編號(hào)G01N30/00GK101650345SQ20091001823公開(kāi)日2010年2月17日申請(qǐng)日期2009年8月31日優(yōu)先權(quán)日2009年8月31日發(fā)明者劉建麗,史慶苓,張建林,鄭亭路,馬韻升申請(qǐng)人:山東京博控股發(fā)展有限公司