專利名稱：：乙醛酸、乙二醛的高效液相色譜檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種乙醛酸、乙二醛的高效液相色譜檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：乙醛酸又名二羥醋酸或甲酰甲酸，乙醛酸的分子中既有羧基又有醛基，其化學(xué)性質(zhì)非常活潑。作為一種重要的化工原料和有機(jī)合成中的中間體，乙醛酸廣泛應(yīng)用于香料、醫(yī)藥、農(nóng)藥、日用化工助劑、水處理劑等精細(xì)化學(xué)品的生產(chǎn)中。近年來(lái)，乙醛酸及下游產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)利用，顯示出廣闊的市場(chǎng)前景。周昕等(周昕，趙志超，張彥杰等，反相離子對(duì)高效液相色譜法分離乙醛酸衍生物機(jī)理的探討，青島化工學(xué)院學(xué)報(bào)，1998，19(1》67-69)將草酸電解還原過(guò)程中的電解液進(jìn)行定量稀釋后與衍生試劑2,4-二硝基苯肼進(jìn)行加成反應(yīng)，將反應(yīng)生成的乙醛酸衍生物用以四丁基溴化銨為對(duì)離子試劑的反相高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。該法中乙醛酸與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)全部轉(zhuǎn)化為乙酵酸腙的時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)較復(fù)雜體系的信號(hào)干擾和光譜重疊現(xiàn)象也無(wú)法克服。在乙二醛氧化制乙醛酸方法中，乙醛酸主產(chǎn)物的定量檢測(cè)對(duì)反應(yīng)過(guò)程評(píng)價(jià)和生產(chǎn)指導(dǎo)具有重要的意義，由于乙醛酸和乙二醛的分子結(jié)構(gòu)非常相似，都含有羧基或醛基基團(tuán)，原料乙酸酸與主產(chǎn)物乙二醛間的相互干擾非常大，目前尚無(wú)一種適合工業(yè)過(guò)程的高效的乙醛酸、乙二醛的檢測(cè)方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種乙醛酸、乙二醛的高效液相色譜檢測(cè)方法采用這種簡(jiǎn)單、快速的方法檢測(cè)乙醛酸、乙二醛的含量。本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思3以乙二醛氧化制備乙醛酸的反應(yīng)液為原料，加入1.5mol/l-3mo1/1氫氧化鈉溶液，使反應(yīng)液中未完全反應(yīng)的乙二醛與氫氧化鈉溶液進(jìn)行歧化反應(yīng)，得到乙醛酸的樣品溶液用高效液相色譜的方法，檢測(cè)乙醛酸、乙二醛的含量。本發(fā)明的方法包括如下步驟一、樣品前處理將氫氧化鈉溶液加入乙二醛氧化制乙醛酸的反應(yīng)液中室溫下，反應(yīng)20分鐘，得到乙醛酸樣品溶液。二、液相色譜檢測(cè)采用反相高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，色譜條件如下色譜柱WatersSymmetry-C18柱，5Pm，250X4.6mm(I.D);流動(dòng)相組成的體積比乙腈磷酸-磷酸鹽水溶液(pH=2.5)=2.5:97.5，ml/ml;柱溫25°C;流速0.5ml/min;紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm;進(jìn)樣量25UL;在上述色譜條件下，乙醛酸的保留時(shí)間為5.8分鐘，乙二醛歧化產(chǎn)物的保留時(shí)間為7.2分鐘。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明檢測(cè)方法的線性試驗(yàn)證明，在一定濃度下，乙酸酸的回歸方程的相關(guān)系數(shù)R=0.9999，乙二醛的回歸方程的相關(guān)系數(shù)R=0.9979，線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，易于準(zhǔn)確定量，精密度實(shí)驗(yàn)測(cè)得相對(duì)偏差僅為1.2%。用本發(fā)明的檢測(cè)方法可同時(shí)快速、準(zhǔn)確檢測(cè)原料乙二醛和產(chǎn)物乙醛酸的含量，檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，適于工業(yè)化乙二醛氧化制備乙醛酸過(guò)程中對(duì)乙醛酸的質(zhì)量控制。圖1為乙醛酸、乙二醛標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液的液相色譜圖，圖中45.8分鐘的峰為乙醛酸，7.2分鐘的峰為乙二醛；圖2為乙醛酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖3為乙二醛的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。具體實(shí)施例方式下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但實(shí)施例并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。1.材料1.1儀器和材料Watersl525型高效液相色譜儀，Waters717plus自動(dòng)進(jìn)樣器，配Waters2996型二極管陣列(PDA)檢測(cè)器，色譜分離系統(tǒng)的控制和記錄由WatersEmpower色譜管理系統(tǒng)完成。1.2試劑與藥品乙二醛(40%wt)，乙醛酸(>99.0%)，乙腈(HPLC級(jí))，磷酸鹽緩沖水溶液(PH二2.5)，實(shí)驗(yàn)中流動(dòng)相和溶液用水均為二次石英蒸餾水。2.方法2.1樣品前處理方法將1.5mol/l氫氧化鈉溶液加入乙二醛氧化制乙醛酸的反應(yīng)液中，室溫下反應(yīng)20分鐘，得到乙醛酸樣品溶液。2.2液相色譜條件色譜柱WatersSymmetry-C18柱，5Pm，250X4.6mm(I.D);流動(dòng)相組成的體積比乙腈磷酸-磷酸鹽水溶液(pH=2.5)=2.5:97.5，ml/ml;柱溫25°C;流速0.5ml/min;紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm;進(jìn)樣量25UL;2.2.1流動(dòng)相pH值的選擇實(shí)驗(yàn)用乙腈水=2.5:97.5的流動(dòng)相等度洗脫，乙二酵歧化產(chǎn)物與乙醛酸達(dá)到基線分離。當(dāng)pH值》2.5時(shí)，隨著pH值增加，2個(gè)化合物的分離度變化不大，但峰面積變化較大，峰面積變得更接近，并且分離的峰出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾，不易進(jìn)行定量分析；當(dāng)pH《2.5時(shí)，隨著pH值減小，乙醛酸與反應(yīng)過(guò)程中生成的副產(chǎn)物草酸的分離度變得越來(lái)越小，不能很好地分離及進(jìn)行定量分析；當(dāng)pH二2.5左右時(shí)，分離度較好，并且乙醛酸也有較強(qiáng)的吸收峰，適于乙醛酸的定量分析。2.2.2檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇用二極管陣列檢測(cè)器在200-400nm進(jìn)行連續(xù)掃描，由于乙醛酸、乙二醛歧化產(chǎn)物其主要紫外吸收為羥基上的n-3x電子躍遷，其最大吸收為210nm，故確定檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。2.2.3流速的選擇流速對(duì)于乙二醛歧化產(chǎn)物與乙醛酸分離有一定的影響。當(dāng)流速增加時(shí)，色譜峰變窄，保留時(shí)間變短，分離度變小；相反，當(dāng)流速減小時(shí)，色譜峰變寬，保留時(shí)間增加，分離度變大。流速對(duì)峰的對(duì)稱性基本沒(méi)有影響，綜合考慮峰寬和分離度兩個(gè)因素，流速定為0.5ml/min。2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作準(zhǔn)確稱取0.2309g乙醛酸標(biāo)準(zhǔn)品，置于25ml容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，配成濃度為0.1mo1/1的乙醛酸的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，使用時(shí)逐級(jí)稀釋到所需濃度。準(zhǔn)確稱取0.3628g乙二醛水溶液(40。/。wt)，置于25ml容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，配成濃度為O.lmol/L的乙二醛的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，使用時(shí)逐級(jí)稀釋到所需濃度。根據(jù)本發(fā)明的高效液相色譜條件，即色譜柱為WatersSymmetryC18柱，5一m，250X4.6mm(I.D);流動(dòng)相組成為的體積比為乙腈磷酸-磷酸鹽緩沖水溶液(PH-2.5一2.5:97.5，ml/ml;柱溫為25"C;流速為0.5ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm;進(jìn)樣體積為25"L。取乙醛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，以峰面積對(duì)濃度作圖。乙醛酸在溶液濃度0.0010.1mol/l的范圍內(nèi)成線性，回歸方程為A乙醛酸=—68376.98263+1.68678E8C,r=0.9999取乙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，以峰面積對(duì)濃度作圖，乙二酵在溶液濃度為0.00010.1mol/l的范圍內(nèi)成線性，回歸方程為A乙醛=—10185.09563+6.93215E7C，r=0.99793.乙醛酸及原料乙二醛的測(cè)定精確量取0.1ml反應(yīng)液，置于10ml容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。取上述溶液1.0ml置于10ml容量瓶中，加入0.5mol/l的氫氧化鈉溶液l.Oml，室溫下反應(yīng)10分鐘。根據(jù)本發(fā)明的高效液相色譜條件，即色譜柱為WatersSymmetry-C18柱，5Pm，250X4.6mm(I.D);流動(dòng)相組成的體積比為乙腈磷酸-磷酸鹽緩沖水溶液(？11=2.5)=2.5:97.5，ml/ml;柱溫為25°〇；流速為0.5ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm;進(jìn)樣體積為25uL，進(jìn)行HPLC分析。選擇任意3個(gè)批次的樣品按上述方法進(jìn)行分析，樣品中主要產(chǎn)物乙醛酸及原料乙二醛的衍生物的檢測(cè)結(jié)果列于表1。表l.檢測(cè)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>權(quán)利要求1.一種乙醛酸、乙二醛的高效液相色譜檢測(cè)方法，包括樣品前處理和液相色譜檢測(cè)步驟，其特征在于樣品前處理的方法為在乙二醛氧化制備乙醛酸的反應(yīng)液中加入1.5mol/l～3.0mol/l的氫氧化鈉溶液，使反應(yīng)液中未完全反應(yīng)的乙二醛與氫氧化鈉進(jìn)行歧化反應(yīng)，得到乙醛酸的樣品溶液；液相色譜檢測(cè)采用反相高效液相色譜法，色譜柱采用WatersSymmetry-C18柱，流動(dòng)相為乙腈和磷酸-磷酸鹽水溶液，流速為0.5ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乙醛酸、乙二醛的高效液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于，所說(shuō)的磷酸-磷酸鹽水溶液為濃度20mmol/l的NaH2P04，用磷酸調(diào)節(jié)PH值為2.5。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種乙醛酸、乙二醛的高效液相色譜檢測(cè)方法。本發(fā)明以乙二醛氧化制備乙醛酸的反應(yīng)液為原料，通過(guò)加入氫氧化鈉溶液，使反應(yīng)液中未完全反應(yīng)的乙二醛與氫氧化鈉溶液進(jìn)行歧化反應(yīng)，得到的乙醛酸樣品溶液用高效液相色譜的方法，檢測(cè)乙醛酸、乙二醛的含量。采用本發(fā)明的檢測(cè)方法可同時(shí)快速、準(zhǔn)確檢測(cè)原料乙二醛和產(chǎn)物乙醛酸的含量，檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，適于工業(yè)化乙二醛氧化制備乙醛酸過(guò)程中對(duì)乙醛酸的質(zhì)量控制。文檔編號(hào)G01N30/36GK101539543SQ200910045780公開(kāi)日2009年9月23日申請(qǐng)日期2009年2月5日優(yōu)先權(quán)日2009年2月5日發(fā)明者振宋,錢(qián)柯君,瑩黃申請(qǐng)人:上海華誼(集團(tuán))公司