專利名稱:考馬斯亮藍(lán)顯色法檢測(cè)真蛋白的儀器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及食品檢測(cè)設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域,特別是涉及一種考馬斯亮藍(lán)顯色法檢 測(cè)真蛋白的儀器。
背景技術(shù):
目前我國(guó)檢測(cè)蛋白質(zhì)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法是凱氏定氮法,原理是將樣品中所有 含氮物用濃硫酸消化,再加堿使其全部轉(zhuǎn)化為氨,用酸堿滴定的方法換算出蛋 白質(zhì)含量。如果樣品中的含氮物全部是蛋白質(zhì),這種方法比較準(zhǔn)確,如果樣品 中除了蛋白質(zhì)以外還有其他形態(tài)的含氮物,如尿素、三聚氰胺、硝酸銨等,測(cè) 得的結(jié)果就不準(zhǔn)確了。因?yàn)榘凑談P氏定氮法的檢測(cè)原理,這些非蛋白質(zhì)最后都 被折算成了蛋白質(zhì)含量,加之凱氏定氮儀檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),比較笨重,要有專用的 通風(fēng)柜,最重要的是無(wú)法在線檢測(cè)。
除了凱氏定氮法之外,檢測(cè)蛋白質(zhì)還有其他的方法,其中用顯色劑和蛋白 質(zhì)顯色,再結(jié)合近紅外光譜的方法近幾年發(fā)展較快,其中考馬斯亮藍(lán)染色法是 這些方法中最為普遍的。其步驟是將考馬斯亮藍(lán)和蛋白質(zhì)顯色后,再用分光光
度計(jì)在波長(zhǎng)為595mm處測(cè)吸光度,然后換算成蛋白質(zhì)含量。其特點(diǎn)是準(zhǔn)確、快 速、方便、靈敏度高、抗干擾性好,樣品中的尿素、三聚氰胺、多糖、多酚等 基本不影響測(cè)定結(jié)果。但因?yàn)橛闷胀ǖ姆止夤舛扔?jì)檢測(cè)時(shí)要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié) 果換算較麻煩,使用也不十分方便,目前只在實(shí)驗(yàn)室使用,在線檢測(cè)較為困難。 采用分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白質(zhì)存在的不足之處是
1、分光光度計(jì)是一種通用儀器,而非專用儀器,其所用分光系統(tǒng)為光柵,體積大而笨重;
2、 顯色法檢測(cè)受溫度、電壓、顯色劑有效時(shí)間、標(biāo)樣和樣品配制時(shí)間等影 響,定標(biāo)和樣品檢測(cè)應(yīng)同時(shí)進(jìn)行;用標(biāo)準(zhǔn)曲線定標(biāo)的方法工作量大,時(shí)間也長(zhǎng);
3、 儀器顯示的數(shù)據(jù)是吸光度,要從工作曲線中找出對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)濃度或另 行計(jì)算;
4、 進(jìn)樣是用手工的方法,產(chǎn)生的誤差較大;
因此,采用分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白質(zhì),不僅操作時(shí)間長(zhǎng)、步驟繁瑣,而且要在 實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,無(wú)法實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)在線檢測(cè)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種設(shè)計(jì)合理、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便、靈敏度高、 能夠現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)蛋白真實(shí)含量的考馬斯亮藍(lán)顯色法檢測(cè)真蛋白的儀器。
本發(fā)明的目的是采用這樣的技術(shù)解決方案實(shí)現(xiàn)的它包括殼體、穩(wěn)壓電源、 程序控制器、顯示器、輸入鍵盤、光源'、光電池、前置放大電路和A/D轉(zhuǎn)換電 路,所述穩(wěn)壓電源分別與程序控制器和光源相連接,所述光電池經(jīng)前置放大電
路和A/D轉(zhuǎn)換電路與程序控制器相連接,顯示器和輸入鍵盤與程序控制器相連 接,其特征在于所述光源與光電池之間設(shè)有光學(xué)鏡片組件和樣品池,所述樣品 池內(nèi)設(shè)有一個(gè)流動(dòng)比色池,所述流動(dòng)式比色池與進(jìn)樣泵相配合,所述進(jìn)樣泵與 穩(wěn)壓電源相連接,.程序控制器的工作程序采用匯編語(yǔ)言編制。
所述光學(xué)組件由濾光鏡和透鏡構(gòu)成;所述濾光鏡為595nm單波長(zhǎng)的濾光鏡; 與現(xiàn)有技術(shù)相比,由于本發(fā)明采用了單個(gè)比色池、595nm單波長(zhǎng)的濾光鏡、 體積小的光電池和自動(dòng)進(jìn)樣泵等部件,使得整體結(jié)構(gòu)緊湊、成本低廉、已知濃 度的蛋白質(zhì)標(biāo)樣不需繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)樣時(shí)輸入標(biāo)樣值即可。樣品測(cè)試時(shí),在 顯示器直接顯示蛋白質(zhì)的濃度,不需換算;測(cè)一個(gè)樣品只需2 5分鐘,連續(xù)測(cè)幾個(gè)樣品時(shí),比色池不用清洗。因而真有體積小,檢測(cè)時(shí)間短,直接讀數(shù)不需 計(jì)算等特點(diǎn),適用于牛奶收購(gòu)或生產(chǎn)過程中在線檢測(cè),也適用于實(shí)驗(yàn)室中檢測(cè)。
圖1是本發(fā)明的結(jié)構(gòu)原理示意圖
圖2為本發(fā)明的光路系統(tǒng)示意圖 圖3為本發(fā)明的外形示意圖
附圖標(biāo)號(hào)說(shuō)明l一輸入鍵盤,2—顯示屏,3—穩(wěn)壓電源,4一程序控制器, 5—只讀存儲(chǔ)器,6—光源,7—進(jìn)樣泵,'8—A/D轉(zhuǎn)換電路,9一光學(xué)組件,10— 樣品池,ll一光電池,12—前置放大電路,13—比色池,14一暗盒,15_透鏡, 16—濾光鏡,17—箱體,18—進(jìn)樣泵開關(guān),19一功能調(diào)節(jié)旋鈕,20—進(jìn)樣孔, 21—進(jìn)樣口, 22—出液孔
具體實(shí)施例方式
參照?qǐng)Dl、屈2、圖3:本發(fā)明包括殼體17、穩(wěn)壓電源3、程序控制器4、顯 示屏2、輸入鍵盤l、光源6、光電池、前置放大電路12和A/D轉(zhuǎn)換電路8,所 述穩(wěn)壓電源3分別與程序控制器4和光源6相連接,所述光電池11經(jīng)前置放大 電路12和A/D轉(zhuǎn)換電路8與程序控制器4相連接,顯示屏2和輸入鍵盤1與程 序控制器4相連接,所述光源6與光電池11之間設(shè)有光學(xué)鏡片組件9和樣品池 10,所述樣品池10內(nèi)設(shè)有一個(gè)流動(dòng)比色池13,所述流動(dòng)式比色池13與進(jìn)樣泵 7相配合,所述進(jìn)樣泵7選用蠕動(dòng)泵,該進(jìn)樣泵7與穩(wěn)壓電源3相連接,程序 控制器4的工作程序采用匯編語(yǔ)言編制,并控制各個(gè)電路和電氣的工作狀態(tài)。
所述光學(xué)組件9由濾光鏡16和透鏡15構(gòu)成;所述濾光鏡16采用為595± 3咖單波長(zhǎng)的濾光鏡;所述光源6采用波長(zhǎng)為400 800nm的鎢燈。
在殼體17上設(shè)置有進(jìn)樣泵開關(guān)18、功能調(diào)節(jié)旋鈕19、進(jìn)樣孔20、進(jìn)樣口21、出液孔22、輸入鍵盤1和顯示屏2,輸入鍵盤1主要由透光度、標(biāo)樣、測(cè)
試、位選、力n、減和顯選鍵構(gòu)成,這些功能鍵均設(shè)置在殼體i7的面板上,所述
進(jìn)樣口21、進(jìn)樣泵7、流動(dòng)比色盒13和出液孔22之間以公知的方式相連接, 進(jìn)樣泵7能夠自動(dòng)從進(jìn)樣口 21進(jìn)樣,而流動(dòng)比色盒13中的原有液體能夠從出 液孔22排出。
本發(fā)明使用時(shí),先用標(biāo)樣樣品和顯色劑混合,混合液由進(jìn)樣泵7輸入到樣品 池10中的流動(dòng)比色盒13,在波長(zhǎng)為400 800nm的光源6照射下,光信號(hào)穿過 樣品池10中的流動(dòng)比色盒13后,被光電池ll接收,光電池ll將接收的光信 號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào),該電信號(hào)依次經(jīng)前置放大電路12和A/D轉(zhuǎn)'換電路8傳送至程 序控制器4,程序控制器4按工作程序?qū)斎氲男盘?hào)進(jìn)行處理后,將處理結(jié)果 輸送至顯示屏2顯示,從而可直觀地獲得被測(cè)標(biāo)樣樣品混合液中所含被測(cè)物質(zhì) 的含量;然后,將待測(cè)樣品和顯色劑混合,用進(jìn)樣泵7將待測(cè)樣品和顯色劑的 混合液輸入到樣品池10中的流動(dòng)比色盒13,采用上述相同方法便能夠獲得待 測(cè)樣品所含被測(cè)物質(zhì)的含量;所述被測(cè)物質(zhì)為蛋白質(zhì)。
實(shí)施例'
檢測(cè)樣品時(shí),按顯選鍵,選透光度,此時(shí)顯示屏上的讀數(shù)為透光度,將圖5 中的調(diào)節(jié)旋鈕19左旋,按調(diào)零按鈕使顯示屏讀數(shù)為0。進(jìn)空白顯色劑,圖5中 的調(diào)節(jié)旋鈕19右旋,按調(diào)IOO按鈕使顯示屏讀數(shù)為IOO。進(jìn)標(biāo)樣時(shí),按顯選, 標(biāo)樣口燈亮,用位選和按鈕調(diào)整,直到顯示屏準(zhǔn)確顯示標(biāo)樣讀數(shù)。顯選選測(cè)試, 進(jìn)樣測(cè)樣,顯示屏直接顯示待測(cè)樣的蛋白質(zhì)含量。 操作步驟如下
1、安裝好儀器后,接通電源,工作方式用功能調(diào)節(jié)旋鈕19選擇"透光度" 位置,預(yù)熱10分鐘,對(duì)儀器調(diào)O及調(diào)IOO,直至儀器穩(wěn)定2、樣品處理
牛奶準(zhǔn)確取0.05ml與2.0ml顯色劑混合,2—30分鐘內(nèi)測(cè)定。 標(biāo)樣準(zhǔn)確取0. 10ml與20ml顯色劑混合,2—30分鐘內(nèi)測(cè)定。 奶粉準(zhǔn)確稱取1.0g,力口到100ml水中,攪拌,5分鐘后,準(zhǔn)確取0.5ml和 20ml顯色劑混合,2—30分鐘內(nèi)測(cè)定。
顯色劑將顯色劑按l: 9的比例和水混合,備用。 3、樣品測(cè)試
a、 開啟進(jìn)樣泵7;
b、 將進(jìn)樣泵管通入稀釋后的顯色劑溶液中,自動(dòng)進(jìn)樣,穩(wěn)定后將透光度調(diào) 為100
c、 取標(biāo)樣和顯色劑的混合物換上述溶液,自動(dòng)進(jìn)樣,待透光度顯示穩(wěn)定后, 按"顯選"鍵,將工作狀態(tài)調(diào)為"標(biāo)樣值";
d、 用"位選"、"+ "、"-"鍵,輸入蛋白質(zhì)標(biāo)樣值,然后按"顯選"鍵,將 工作狀態(tài)調(diào)為"調(diào)試值";
e、 取待測(cè)樣和顯色劑混合物自動(dòng)進(jìn)樣,穩(wěn)定后直接讀數(shù),即為蛋白質(zhì)含量;
f、 測(cè)定完畢后,用顯色劑溶液10ml清洗,關(guān)閉電源。
權(quán)利要求
1、考馬斯亮藍(lán)顯色法檢測(cè)真蛋白的儀器,包括殼體、穩(wěn)壓電源、程序控制器、顯示器、輸入鍵盤、光源、光電池、前置放大電路和A/D轉(zhuǎn)換電路,所述穩(wěn)壓電源分別與程序控制器和光源相連接,所述光電池經(jīng)前置放大電路和A/D轉(zhuǎn)換電路與程序控制器相連接,顯示器和輸入鍵盤與程序控制器相連接,其特征在于所述光源與光電池之間設(shè)有光學(xué)鏡片組件和樣品池,所述樣品池內(nèi)設(shè)有一個(gè)流動(dòng)比色池,所述流動(dòng)式比色池與進(jìn)樣泵相配合,所述進(jìn)樣泵與穩(wěn)壓電源相連接,程序控制器的工作程序采用匯編語(yǔ)言編制。
2、 如權(quán)利要求1所述的考馬斯亮藍(lán)顯色法檢測(cè)真蛋白的儀器,其特征在于 所述光學(xué)鏡片組件由濾光鏡和透鏡構(gòu)成;所述濾光鏡采用為595士3nm單波長(zhǎng)的 濾光鏡。
3、 如權(quán)利要求l所述的考馬斯亮藍(lán)顯色法檢測(cè)真蛋白的儀器,其特征在于 所述光源采用波長(zhǎng)為400 800nm的鎢燈。
4、 如權(quán)利要求1所述的考馬斯亮藍(lán)顯色法檢測(cè)真蛋白的儀器,其特征在于 所述進(jìn)樣泵為蠕動(dòng)泵。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種考馬斯亮藍(lán)顯色法檢測(cè)真蛋白的儀器,包括殼體、穩(wěn)壓電源、程序控制器、顯示器、輸入鍵盤、光源、光電池、前置放大電路和A/D轉(zhuǎn)換電路,所述穩(wěn)壓電源分別與程序控制器和光源相連接,所述光電池經(jīng)前置放大電路和A/D轉(zhuǎn)換電路與程序控制器相連接,顯示器和輸入鍵盤與程序控制器相連接,其特征在于所述光源與光電池之間設(shè)有光學(xué)鏡片組件和樣品池,所述樣品池內(nèi)設(shè)有一個(gè)流動(dòng)比色池,所述流動(dòng)式比色池與進(jìn)樣泵相配合,所述進(jìn)樣泵與穩(wěn)壓電源相連接,程序控制器的工作程序采用匯編語(yǔ)言編制,具有設(shè)計(jì)合理、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便、靈敏度高、能夠現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)蛋白真實(shí)含量的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N21/77GK101539527SQ20091009774
公開日2009年9月23日 申請(qǐng)日期2009年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月15日
發(fā)明者方郁野, 來(lái)慧敏 申請(qǐng)人:杭州天辰儀器設(shè)備有限公司