專利名稱：：用于分揀顆粒和提供性別分揀的動物精子的設(shè)備、方法和程序的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及動物精子收集的設(shè)備和方法，更具體地說，涉及利用包括流式細(xì)胞術(shù)的各種技術(shù)產(chǎn)生富含具有一個或者多個所需特征的精細(xì)胞的精子群(例如根據(jù)動物養(yǎng)殖業(yè)所使用的DNA特征分揀的活精細(xì)胞群)以預(yù)先選擇動物后代性別的設(shè)備和方法。
背景技術(shù)：
：利用人工受精(AI)使得動物受精和在體外受精后進(jìn)行胚胎移植是一種常規(guī)實施方法。在畜牧業(yè)中，朝向具有一個或者多個所需特征的后代而影響生殖結(jié)果的能力具有顯而易見的優(yōu)點。例如，在乳品加工業(yè)中趨向于雌性預(yù)先選擇后代以確保乳牛的養(yǎng)殖是具有經(jīng)濟(jì)效益的。如在美國專利US6，357,307(Buchanan等)、US5，985，216(Rens等)和US5，135,759(Johnson)中公開的，人們已經(jīng)對利用分揀X和Y精細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)來實現(xiàn)這個目標(biāo)進(jìn)行了嘗試。但是，這些嘗試都沒有導(dǎo)致能夠產(chǎn)生大量具有足以有效受精的游動性的性別相對純的精細(xì)胞的商業(yè)上成功的高生產(chǎn)能力的系統(tǒng)的形成。因此，在動物養(yǎng)殖業(yè)中目前需要一種在商業(yè)上使用的基于DNA特征(或者其它特征)有效隔離精細(xì)胞以產(chǎn)生大量的這樣的細(xì)胞的可行的高速系統(tǒng)。還需要一種當(dāng)這樣的被隔離的精子被隔離系統(tǒng)處理時能夠保持其生存力以及在準(zhǔn)^f吏用能夠保存這樣的被隔離的精子的精子管理系統(tǒng)。本發(fā)明滿足這些需要。更概括地，本發(fā)明涉及流式細(xì)胞術(shù)的改進(jìn)。一般地，流式細(xì)胞術(shù)被定義為通過一種測量裝置當(dāng)顆?；締瘟性诹黧w流中通過時測量各個顆粒的特征，流式細(xì)胞術(shù)通常提供根據(jù)所選擇的特征對顆粒分類的信息?；蛘?，接著可利用一些技術(shù)(包括液滴分揀、液滴干涉分揀和流體交換)對顆粒進(jìn)行分類。另一種選擇是選擇性地分裂不想要的顆粒，例如利用光切除。在基于光學(xué)的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，利用光學(xué)器件將光束(例如可見光或者uv光)引導(dǎo)和聚焦在含有顆粒的流體流中并且收集來自于顆粒的輻射(包括散射光和/或來自于顆粒熒光輻射)。例如在一種常用的光學(xué)系統(tǒng)中，光束(例如激光束)被聚焦在流體流上并且輻射被一對收集單元收集，一個位于激光器前面以收集散射光輻射，另一個垂直于流體流和激光器設(shè)置以收集熒光輻射。每一個收集單元包括分離的光檢測器，這增加了系統(tǒng)的費用。另夕卜，在常規(guī)光學(xué)系統(tǒng)中，光檢測器將所收集的輻射轉(zhuǎn)化為電信號，利用模擬系統(tǒng)分析電信號以根據(jù)所選擇的顆粒特征對顆粒分類。模擬系統(tǒng)是較低廉的，但僅有限的信息可從信號中得出。人們還試圖開發(fā)可用于處理精細(xì)胞以得到富含具有所需性別染色體的精子的精細(xì)胞群的技術(shù)。但是，現(xiàn)有的技術(shù)達(dá)不到這里所述的本發(fā)明技術(shù)。例如，Johnson等(美國專利US5，135，759)描述了利用流式細(xì)^^計/細(xì)胞分揀器根據(jù)DNA內(nèi)容將完整的帶X和Y染色體的精子群分離成帶X和Y染色體的精子富集群。如該文獻(xiàn)所述的，精子在30至39'C的溫度下在1小時(39'C)至1.5小時(30'C)與DNA選擇性染料結(jié)合。接著利用流式細(xì)胞計測量當(dāng)精子通過刺激染料的激光束時發(fā)出的熒光量。由于帶X染色體的精子含有比帶Y染色體的精子更多的DNA，并且大多數(shù)動物具有3至5%的差異，因此帶X染色體的精子發(fā)出比帶Y染色體的精子多的熒光。為了說明焚光測量可根據(jù)精細(xì)胞的轉(zhuǎn)動取向而改變的情況，使用兩個光檢測器。首先確定精細(xì)胞取向是否適當(dāng)，然后進(jìn)行測量以根據(jù)具有X或者Y染色體對精子分類。利用振蕩器使得包含精子的流體流在精子通過激光束的位置的下游分裂成液滴。具有預(yù)定熒光強(qiáng)度的包含單個精子的液滴被提供電荷并且被靜電偏轉(zhuǎn)到收集容器中。被收集的性別強(qiáng)化精子群接著用于顯微注射、體外受精或者人工受精。Seidel等(WO02/43574)還描述了利用流式細(xì)胞術(shù)將精子分成帶X和Y染色體的細(xì)胞的性別強(qiáng)化群。Seidel等描述了在30。C和40'C之間的溫度下對細(xì)胞著色。美國專利申請公開號為2003/0157475Al(Schenk，2003年8月21日)描述了一種低溫冷藏已經(jīng)根據(jù)X或者Y染色體含量進(jìn)行分揀的精細(xì)胞的方法。如這里所述的，需要在精細(xì)胞被低溫冷藏之前為精細(xì)胞添加一種防凍劑以在低溫冷藏過程中保護(hù)精細(xì)胞。例如，甘油是一種通常在低溫冷藏之前添加到牛的精細(xì)胞的防凍劑。但是，為了從防凍劑獲得更好的保護(hù)，需要在使得精細(xì)胞處于低于o。c的溫度下之前等待防凍劑與精細(xì)胞平衡。在平衡時間內(nèi)，防凍劑滲透細(xì)胞膜以除了由防凍劑提供的細(xì)胞外保護(hù)以外還提供細(xì)胞內(nèi)保護(hù)。這樣，在美國專利申請公開號為2003/0157475Al中描述的低溫冷藏方法描述了在精細(xì)胞被冷至5。C之后添加一種包含甘油的添加劑。接著在精細(xì)胞遭遇較低的溫度之前使得精細(xì)胞和甘油在1和18小時之間的時間內(nèi)在5。C下平衡。所披露的內(nèi)容建議3和6小時之間的平衡時段以獲得最佳結(jié)果。遺憾的是，3至6小時的平衡時間所涉及的時間和費用對于商業(yè)精子分揀方法的收益帶來負(fù)面影響。另外，對于商業(yè)精子分揀方法，相信通常通過減小精子收集和低溫冷藏之間的時間(其它因素是等同的)來改善精子的健康。也從該觀點出發(fā)，希望可以使用不需要長平衡時間來達(dá)到防凍劑最佳效果的低溫冷藏技術(shù)。另外，據(jù)說已知的低溫冷藏技術(shù)對精子的游動性產(chǎn)生有害的影響，這表明精子生育力降低。這樣，需要與常規(guī)技術(shù)相比保存精子生育力的低溫冷藏技術(shù)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及一種基于一個或者多個所需的特征分析、分類和分揀顆粒的改進(jìn)系統(tǒng)(方法和設(shè)備)；在一個實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，即使用流式細(xì)胞術(shù)根據(jù)DNA含量精確地隔離和分揀細(xì)胞的系統(tǒng)；在某些實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，即包括能夠4吏得系統(tǒng)的產(chǎn)量作為一個或者多個因素的函數(shù)被控制的分揀協(xié)議的系統(tǒng)，這些因素包括需要分揀的顆粒群的純度、所需顆粒群被收集的速度、沒有被分揀到所需群中的所需顆粒的損失以及其它因素；在一個實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，即高速操作以提供適合動物養(yǎng)殖業(yè)商業(yè)使用的性別分揀精子的系統(tǒng)；提供這樣一種系統(tǒng)，即可在不對細(xì)胞(包括精細(xì)胞的游動性)產(chǎn)生很大的不良影響的情況下用于分揀細(xì)胞的系統(tǒng)；提供一種系統(tǒng)，該系統(tǒng)可用于在對細(xì)胞(包括精細(xì)胞的游動性)產(chǎn)生的最小不良影響的情況下保存分揀的精細(xì)胞直至需要它們時；提供這樣一種系統(tǒng)，當(dāng)該系統(tǒng)涉及有性別精子的產(chǎn)生時，該系統(tǒng)包含提高速度和分類準(zhǔn)確度和精細(xì)胞的分揀的技術(shù)；提供一種流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)，該系統(tǒng)利用外照射(epi-illumination)光學(xué)器件檢測待分析以及(可選擇的)待分揀的顆粒的各種特征；提供這樣一種制造經(jīng)濟(jì)的外照射流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)；在一個實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元共享一個集成平臺以便以高生產(chǎn)率分類和(可選擇地)分揀顆粒(諸如一般意義上的細(xì)胞，特別是精細(xì)胞)；提供這樣一種多通道系統(tǒng)，該系統(tǒng)共享公共部件和系統(tǒng)以減小通道之間的差異以更有效的操作；以及在一個實施例中，提供這樣一種分揀系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括能夠使得一個樣本被迅速測試以確定樣本的質(zhì)量以可評價進(jìn)一步分揀的收益性的協(xié)議。另外，本發(fā)明涉及用于數(shù)字處理表示熒光的信號的改進(jìn)系統(tǒng)(方法和設(shè)備)；在一個實施例中，提供這樣一種數(shù)字系統(tǒng)，該系統(tǒng)用于檢測作為背景特征的函數(shù)的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換脈沖；在一個實施例中，提供這樣一種數(shù)字系統(tǒng)，該系統(tǒng)用于鑒別參數(shù)初始化；在一個實施例中，提供這樣一種數(shù)字系統(tǒng)，該系統(tǒng)用于檢測對應(yīng)于波形脈沖的數(shù)字信息；在一個實施例中，提供這樣一種數(shù)字系統(tǒng)，該系統(tǒng)用于包括特征抽取的數(shù)字信息分析；在一個實施例中，提供這樣一種數(shù)字系統(tǒng)，該系統(tǒng)用于分類脈沖和限定判定邊界；在一個實施例中，供這樣一種數(shù)字系統(tǒng)，該系統(tǒng)使用液滴分裂傳感器控制換能器振幅；以及在一個實施例中，提供這樣一種數(shù)字系統(tǒng)，利用該系統(tǒng)分配和收集用于商業(yè)流通的細(xì)胞。另外，本發(fā)明涉及在從雄性動物收集的精子樣本時通過包含比存在于藏對動物精子進(jìn)行商業(yè)處理的改進(jìn)的綜合系統(tǒng)(方法和設(shè)備)；在一個實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，該系統(tǒng)能夠?qū)ι虡I(yè)量的活的性別強(qiáng)化精子進(jìn)行有效處理；在一個實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，通過對該系統(tǒng)調(diào)節(jié)能夠計算日常的和動物之間的精子特征的變化；在一個實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，該系統(tǒng)能夠利用一個流式細(xì)胞術(shù)單元每小時以85%的純度生產(chǎn)約18，000，000個性別強(qiáng)化精子；在一個實施例中，提供這樣一種系統(tǒng)，該系統(tǒng)能夠?qū)σ慌?例如，從一個雄性動物收集的精子量)進(jìn)行完全處理以85%的純度生產(chǎn)具有所需性別特征的活精子樣本并且在l小時的處理時間內(nèi)具有所需性別特征的收集的精子的損失小于10%?？傮w上，本發(fā)明涉及在本申請權(quán)利要求中所述的設(shè)備和方法。本發(fā)明的其它目的和特征部分是明顯的并且部分在下文中提及。圖l是本發(fā)明的一個示例性精子分揀程序的作業(yè)流程圖2是本發(fā)明的流式細(xì)胞術(shù)液滴分揀系統(tǒng)的一個實施例的示意圖3是本發(fā)明的用于液滴分揀的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的一個實施例的一部分的側(cè)視圖，其中示出將刺激射束聚焦在由噴嘴系統(tǒng)產(chǎn)生的向上移動流體流上的外照射光學(xué)組件；圖4是本發(fā)明的噴嘴和噴嘴支座的一個實施例的一個端視圖5是沿圖4的切割平面5-5得到的圖4的噴嘴和噴嘴支座的截面圖6是本發(fā)明的一個實施例所涉及的在由橢圓形射束斑點詢問的流體流中輸送的精細(xì)胞的示意圖7是表示精細(xì)胞的所需取向的角包絡(luò)線的示意圖，其中來自于光學(xué)系統(tǒng)的光束將照射細(xì)胞的基本寬大的寬面；圖8是本發(fā)明的噴嘴主體的一個實施例的橫截面圖；圖9是表示通過噴嘴主體的一系列切割平面(A-A至H-H和J-J至K-K)的圖8中所示的噴嘴主體的側(cè)視圖9A-9H和9J-9K是沿著圖9的相應(yīng)平面(A-A至H-H和J-J至K-K)的在圖8和圖9中所示的噴嘴主體的截面圖10是噴嘴中具有定向擋板的噴嘴系統(tǒng)的一個實施例的橫截面的透視圖ll是圖10中所示的噴嘴系統(tǒng)的橫截面圖12是圖10和11中所示的噴嘴系統(tǒng)的一部分的局部放大橫截面圖；圖13是與圖12中所示的圖類似的局部放大橫截面圖，但是從垂直于圖12中的觀察方向的方向取得的；圖14是固定擋板的擋板支架的一個實施例的側(cè)視圖；圖15是圖14中所示的擋板支架和擋板的頂浮見圖16是以使得擋板支腿與平行于噴嘴中的橢圓D的長軸的線相交的方式在噴嘴中轉(zhuǎn)動定向的擋板支架的一個實施例的頂視圖17是以使得擋板支腿與垂直于噴嘴中的橢圓D的長軸的線相交的方式在噴嘴中轉(zhuǎn)動取向的擋板支架的一個實施例的頂視圖18是包括擋板的噴嘴系統(tǒng)的一個實施例的側(cè)橫截面圖，其中示出通過噴嘴和擋板的一系列切割平面(A-A至E-E);圖18A-18E示出在圖18中所示的噴嘴系統(tǒng)中在各個點處的橫截流動區(qū)域；圖19是通過具有垂直于噴嘴的縱向軸線的擋板的噴嘴得到的與圖12類似的橫截面圖20是通過圖19上所示的切割平面20-20得到的圖19中所示的噴嘴的橫截面圖21是與圖18的橫截面圖類似的橫截面圖，其中示出在偏置位置處具有樣本引入導(dǎo)管的噴嘴系統(tǒng)；圖22是安裝在本發(fā)明的噴嘴座的噴嘴系統(tǒng)的一個實施例的透視圖；圖23是多個排成一列的精細(xì)胞當(dāng)通過本發(fā)明的一個開孔元件朝向詢問位置時轉(zhuǎn)動取向的示意圖24是表示在本發(fā)明的一個實施例所涉及的噴嘴下游的液滴分裂(脫落，break-off)位置的示意圖25是本發(fā)明的分裂傳感器系統(tǒng)的一個實施例的示意圖26是本發(fā)明的一種流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)的正試圖27是圖26中所示的系統(tǒng)的一部分的放大透視圖，并且為了清楚起見去除該系統(tǒng)的一些部分；圖28是本發(fā)明的一種外照射光學(xué)系統(tǒng)的一個實施例的示意圖29是本發(fā)明的一種外照射光學(xué)系統(tǒng)的一個實施例的透視圖30是圖29中所示的外照射光學(xué)系統(tǒng)的側(cè)視圖31是圖29和30中所示的外照射光學(xué)系統(tǒng)的頂視圖32是沿著圖30的平面32-32的外照射光學(xué)系統(tǒng)的截面圖33是沿著圖31的平面33-33的外照射光學(xué)系統(tǒng)的一部分的截面圖34是僅示出在圖29中所示的外照射光學(xué)系統(tǒng)的二向性濾光器后面的濾光系統(tǒng)的元件的透碎見圖35是包括柱面透鏡的平移調(diào)節(jié)的本發(fā)明的另一種外照射光學(xué)系統(tǒng)的透視圖36是本發(fā)明的一個實施例的詢問位置的示意圖，其中示出以偏斜入射角聚焦在噴嘴的下游的流體流上的激光束；圖37是本發(fā)明的分揀校準(zhǔn)系統(tǒng)的一個實施例的示意圖38是與圖37中所示的分揀校準(zhǔn)結(jié)合使用的外照射傳感器的一個實施例的示意圖39是本發(fā)明所涉及的數(shù)字細(xì)胞分析器(DCA)和處理器的一個實施例的框圖40是本發(fā)明的多通道分揀器的一個實施例的示意圖，其中示出兩個通道；圖41是本發(fā)明的多通道分揀器的一個實施例的作業(yè)流程圖，其中示出四個通道；圖42是本發(fā)明所涉及的模擬細(xì)胞分析器(ACA)的一個實施例的框圖；圖43是表示來自于從以每秒10,000個細(xì)胞的平均速度流動的細(xì)胞檢測熒光脈沖的光檢測器輸出的波形脈沖流的圖表；圖44是圖43的分解圖，其中示出來自于從以每秒10，000個細(xì)胞的平均速度流動的三個細(xì)胞檢測三個熒光脈沖的光檢測器輸出的流；在該圖中100MHz液滴時鐘的正方形波已經(jīng)被疊加以表示在三個脈沖和液滴時鐘的正方形波脈沖之間的同步；圖45示出精細(xì)胞相對于具有窄寬度的激光束斑點的移動；圖49是對應(yīng)于來自于以105MHz的連續(xù)采樣率基于122個樣本檢測一個熒光脈沖的光檢測器的時間改變模擬輸出的數(shù)字信息的示例性圖示；圖50是表示在本發(fā)明的一個實施例中的在激光脈沖、由激光脈沖導(dǎo)致的來自于細(xì)胞的熒光發(fā)射以及光檢測器輸出的數(shù)字樣本之間的時間關(guān)系的示意圖51是表示圖50中所示的數(shù)字樣本如何形成脈沖波形的示意圖；圖52是表示X精細(xì)胞在脈沖波形中的較高峰值強(qiáng)度的與Y精細(xì)胞的脈沖波形同步的X精細(xì)胞的脈沖波形的示意圖53是表示可用于脈沖分析的一個閾值和積分窗的脈沖波形的示意圖54是表示利用縫隙掃描技術(shù)達(dá)到的高分辨率的包含X和Y精細(xì)胞的樣本的直方圖55是表示利用標(biāo)準(zhǔn)照射達(dá)到的較差分辨率的包含X和Y精細(xì)胞的樣本的直方圖56-59示出熒光直方圖和峰值相對于精子核和活精細(xì)胞的區(qū)域的散布圖；模型-圖60示出原始數(shù)據(jù)，以及圖61示出基于圖60中所示的數(shù)據(jù)利用本發(fā)明的一種迭代算法的一個實施例產(chǎn)生的模型曲線；圖62-63示出精細(xì)胞的熒光強(qiáng)度直方圖的三元模型-圖62示出原始數(shù)椐，以及圖63示出基于圖62中所示的數(shù)據(jù)利用本發(fā)明的一種迭代算法的一個實施例產(chǎn)生的才莫型曲線；圖64示出CSD特征的非線性；頂部板條表示用于帶X或者帶Y的精細(xì)胞的平均M圖表；中間板條示出小于平均的帶Y的熒光發(fā)射脈沖的峰值高度的用于信號振幅值的這些平均M圖表(即M')的第一導(dǎo)數(shù)的圖表；以及底部板條示出作為信號振幅的函數(shù)的笫一導(dǎo)數(shù)(M'x-M'y)之間的差異；圖65示出其中CSD特征是穿過熒光發(fā)射脈沖上的兩個點的直線的計算斜度的一個實施例；圖66-69示出利用CSD特征抽取達(dá)到的改進(jìn)區(qū)別；圖70示出設(shè)置在CSD相對于脈沖區(qū)域(area)散射的散射圖表上的二元變量分揀區(qū)域；圖71示出用于其中左板條對應(yīng)于高回收/重合接受分揀策略(無重合中止策略)以及右邊板條對應(yīng)于高純度/重合拒絕接受分揀策略(重合中止策略)的測試的流式細(xì)胞術(shù)再次分析的一個實施例；圖72是本發(fā)明的數(shù)字信號處理的一個實施例的作業(yè)流程圖；圖73是可根據(jù)本發(fā)明的一個實施例使用的k平均(k-menas)聚合策略的一個示例；圖74是可根據(jù)本發(fā)明的一個實施例使用的對于脈沖特征數(shù)據(jù)應(yīng)用BayesMinimumError(貝葉斯最小誤差)判定規(guī)則的概念圖和圖表表示；圖75是可根據(jù)本發(fā)明的一個實施例使用的利用BayesMinimumError判定規(guī)則獲得的結(jié)果和Mahalonobis(馬氏)距離脫粒支持獲得的結(jié)果的圖圖76可是根據(jù)本發(fā)明的一個實施例使用的移動窗統(tǒng)計表以提供"遺忘，，的概念圖；圖77是才艮據(jù)本發(fā)明的一個實施例使用的漂移補(bǔ)償?shù)膱DM示；圖78示出包含示例性顆粒分布的流體流；圖79是表示作為使用重合接受分揀策略的流體輸送率的一個函數(shù)的純度的圖表；圖80是表示作為使用重合拒絕分揀策略的流體輸送率的一個函數(shù)的被成功地分揀成可用群組的所需顆粒的百分比的圖表；圖81是表示接受分揀到所需顆粒的群組中的重合液滴的百分比和拒絕分揀到該群組中的重合液滴的百分比之間的反向關(guān)系的圖表；圖82是表示本發(fā)明的分揀設(shè)備的一個實施例的總體操作的判定流程圖83是取向適于產(chǎn)生具有水平速度分量的液滴流的細(xì)胞計和收集液滴的收集系統(tǒng)的側(cè)^L圖84是關(guān)于噴嘴系統(tǒng)和偏轉(zhuǎn)器板所示的圖83中所示的收集系統(tǒng)的放大透視圖85是本發(fā)明的收集系統(tǒng)的一個實施例的示意性圖表；圖86是圖83中所示的收集系統(tǒng)的截斷裝置的正試圖87是圖83中所示的收集系統(tǒng)的截斷裝置的側(cè)視圖88-95示出幾個精子離心分離試驗的圖表結(jié)果；圖96-98是表示本發(fā)明的過濾方法的一個實施例中的步驟的示意圖99是用于過濾精細(xì)胞的過濾系統(tǒng)的一個實施例的示意圖IOO是用于過濾精細(xì)胞的另一種過濾系統(tǒng)的示意圖101和102示出精細(xì)胞過濾試驗的圖表結(jié)果；圖103是本發(fā)明的低溫保藏方法的一個實施例的工作流程圖圖104示出精細(xì)胞低溫保藏試驗的圖表結(jié)果；圖105是用于本發(fā)明所涉及的處理精細(xì)胞的方法的一個實施例的作業(yè)流程圖106是本發(fā)明的多通道顆粒分揀器的一個實施例的透視圖，其中部分被拆下以示出分揀器的內(nèi)部特征；圖107是可用于圖106的多通道顆粒分揀器中流體輸送的歧管系統(tǒng)的透視圖108是圖107的歧管系統(tǒng)的透枧圖，其中示出歧管系統(tǒng)的內(nèi)部流體連通；圖109是圖106中所示的顆粒分揀器的透視圖，其中附加的元件被去除或者部分去除以更好地示出分揀器的內(nèi)部特征；圖IIO是圖106中所示的顆粒分揀器的正試圖111是圖106中所示的顆粒分揀器的側(cè)視圖，其中殼體的側(cè)壁被去除以示出分揀器的內(nèi)部特征；圖112是圖106中所示的顆粒分揀器的側(cè)視圖(從與得到圖107的側(cè)面相對的側(cè)面取得的)，并且側(cè)壁被去除以示出分揀器的內(nèi)部特征；圖113是從分揀器后面的一個角度得到的圖106中所示的顆粒分揀器的側(cè)視圖并且背蓋被去除以示出分揀器的內(nèi)部特征；圖114是圖106中所示的顆粒分揀器的一部分的透視圖，其中示出多噴嘴系統(tǒng)在橫梁上的安裝；圖115是圖106中所示的顆粒分揀器的一部分的透^L圖，其中示出收集系統(tǒng)和顆粒分揀器的其它部分的相對位置；圖116是用于本發(fā)明的多通道分揀器的流體輸送系統(tǒng)的一個實施例的示意圖117和118是兩種不同激光束分裂系統(tǒng)的示意圖119和圖120是本發(fā)明的另一種多通道分揀器的透視圖121-134示出各種實施例的圖示結(jié)果；圖135是本發(fā)明的噴嘴系統(tǒng)的一個可選擇的實施例的示意圖，其中噴嘴通過毛細(xì)管引導(dǎo)流體流；圖136是本發(fā)明的一種光損害分揀系統(tǒng)的一個實施例的示意圖137是基于可用于使用本發(fā)明的技術(shù)的設(shè)備中的流體轉(zhuǎn)換的一種可選擇的分揀系統(tǒng)的示意圖；以及圖138是基于使得帶有分析的顆粒的流體流的所選擇的不連續(xù)區(qū)段的一種高速液滴干涉流的一種可選擇的分揀系統(tǒng)的示意圖。在附圖中相應(yīng)的部件由相應(yīng)的附圖標(biāo)記表示。具有對應(yīng)于每一個部件的相關(guān)附圖標(biāo)記的部件列表如下。部件列表設(shè)有基本對應(yīng)于說明書中的段落標(biāo)題的段落標(biāo)題以便于部件列表的使用。一般地，部件列表的每一個段自身為在詳細(xì)描述的相應(yīng)段落中第一次引入的部件提供附圖標(biāo)記。具有對應(yīng)于每一個部件的相關(guān)附圖標(biāo)記的部件列表總體概述39精子收集41為精子貼標(biāo)識41A增加緩沖劑43質(zhì)量控制47清洗48著色流體49著色51培育53裝入流式細(xì)胞計的樣本引導(dǎo)裝置54通過流式細(xì)胞術(shù)增加鞘流體55分揀57收集分揀的精子58A增加收集流體58B濃縮精細(xì)胞58C增加低溫充填劑(膨脹劑)59將分揀的精子裝在試管中61低溫保藏63包裝在液氮中65分配67銷售69儲藏71人工受精流式細(xì)胞術(shù)1系統(tǒng)(總體)3載流體的供給7鞘流體的供給9具有分揀能力的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備15流體輸送系統(tǒng)17載流體19鞘流體21流體流23顆粒流25電磁輻射束31來自于顆粒的電磁輻射發(fā)射33液滴35包含在液滴中的顆粒流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備(單通道)101噴嘴系統(tǒng)103噴嘴孔105換能器107液滴分裂109光學(xué)系統(tǒng)115詢問位置117光檢測器119分揀系統(tǒng)123第一不同組或者群組的液滴125第二不同組或者群組的液滴2201收集系統(tǒng)131處理器噴嘴系統(tǒng)133圓柱形流動主體135中心縱向孔137噴嘴139漏斗形噴嘴主體141通過噴嘴主體的通道145帶有內(nèi)螺紋的沉孔149帶有螺紋的凸出部或者螺柱155O形密封件157導(dǎo)管(管形針)167環(huán)形空間(間隙)173流動主體中的徑向孔(鞘流體)183第二徑向孔(附加鞘流體)189載流體的中心孔191流體的外同軸鞘細(xì)胞取向201牛精細(xì)胞205槳形頭部207平寬的相對的表面209窄邊211精子赤道213核215尾217核長度219頭部長度221頭部寬度71223總長225在核內(nèi)的定位區(qū)域227流體流的方向229其中光束照射在寬面的具有一定角度的包絡(luò)線上Rl角度范圍P平面噴嘴設(shè)計231噴嘴主體的內(nèi)部233噴嘴主體的內(nèi)表面235第一軸向錐形區(qū)域237第二軸向錐形區(qū)域239第三軸向錐形區(qū)域247噴嘴的縱向軸線249噴嘴內(nèi)部的第四區(qū)域251第四區(qū)域的軸向長度255孔元件257在噴嘴前端的沉孔259第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域261第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域263第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的表面267第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的表面271扭力273第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的軸向長度275第一錐形區(qū)域的軸向長度277第二錐形區(qū)域的軸向長度279第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的軸向長度309孔元件的圓錐形上游表面315孔元件的圓錐形下游表面317圓錐形上游表面的軸向長度327下游表面的軸向長度定向擋板2001定向擋板2003擋板2005擋板支座2007上游支腿2009下游支腿2015交線2017噴嘴主體的中心軸線2019上游支腿的彎曲邊緣2025下支腿向下游延伸的距離2027擋板支座的總長2029擋板支座的外徑2031擋板支座的內(nèi)徑2033交線和噴嘴中心線之間的距離2035擋板的上游端2037擋板支座的傾斜表面2039下游支腿的側(cè)邊2041下游支腿的下游邊2049擋板和擋板支座之間的間隙2051擋板支座的內(nèi)表面2053擋板后的體積2055噴嘴的內(nèi)部體積2057圓柱形擋板支座的縱向軸線2059通過橢圓D的長軸的線2061注射針和擋板之間的距離2067擋板支座的下游端2069擋板支座和噴嘴之間的接觸點2071O形圏2077噴嘴座(凸臺)的下游端2079凸臺的內(nèi)徑2081芯流和噴嘴表面之間的鞘流體部分2087上游橫截面(A)2089在擋板(B)處的橫截面2091在擋板(C)處的橫截面2093在擋板(D)處的橫截面2094在擋板下游(E)處的橫截面2097垂直擋板系統(tǒng)2095空氣泡2099垂直擋板2101垂直擋板的彎曲邊緣2103垂直擋板的直邊緣2105O形圏2107噴嘴中的環(huán)形臺肩(架)2109樣本注射針(導(dǎo)管)的外徑2151具有偏置樣本引入導(dǎo)管的噴嘴系統(tǒng)噴嘴安裝和調(diào)節(jié)331噴嘴座333第一線性級337第二線性級339X軸線341Y軸線343第三轉(zhuǎn)動級345Z軸線347固定的第一級元件(未示出)349固定的第一級元件的框架355活動的笫一級元件357用于第一級的致動器(測微器)359固定的第二級元件361活動的第二級元件363用于第二級的致動器(測微器)365固定的第三級元件371活動的第三級元件373用于第三級的致動器(測微器)375包含細(xì)胞的流的一般向上的方向377向上方向的角度換能器和液滴形成379套環(huán)381壓電元件(未示出)383端子D流的直徑分裂傳感器389分裂傳感器391微處理器393光源395線性光敏元件陣列(光二極管)401用于液滴分裂傳感器的透鏡405電流電壓運算放大器電路407跟蹤/保持放大器409正弦波發(fā)生器(跟蹤/保持信號)411A/D轉(zhuǎn)換器412攝影系統(tǒng)413選通414A遮光板414B遮光板中的縫隙形開口外照射光學(xué)系統(tǒng)415外照射光學(xué)系統(tǒng)417外照射器具419縱向光學(xué)軸線425束斑427聚焦照射束的軸線429矩形底座431反射濾光器435激光器或者弧光燈437調(diào)節(jié)透鏡組件439二向色腔室的側(cè)壁中開口441二向色腔室的側(cè)壁443二向色腔室445扣環(huán)447中性密度濾光片449圓柱形透鏡455透鏡支座457防松螺母459束斑的橢圓形橫截面461用于反射濾光器的夾子463濾光器支座465濾光器支座的有角度的表面467濾光器支座中的開口469用于濾光器支座的線性級471X軸線473懸臂梁475用于線性級的致動器477二向色濾光器479用于二向色濾光器的夾子485用于二向色濾光器的框架487向前的方向489光學(xué)儀器的縱向光學(xué)軸線491聚焦透鏡組件497細(xì)胞發(fā)出的熒光脈沖波形或者信號498刺激空間功能501物鏡適配器503二向色腔室的前壁中的開口505二向色腔室的前壁507聚焦鏡筒509透鏡支座筒511聚焦透鏡513向后方向515套管式焦點調(diào)節(jié)517準(zhǔn)直發(fā)射光519濾光系統(tǒng)521發(fā)射濾光器523發(fā)射濾光器支座525在二向色腔室的后壁中的開口527二向色腔室的后壁529校準(zhǔn)薄膜組件531校準(zhǔn)薄膜的滑塊533用于濾光器組件部件的導(dǎo)軌535用于校準(zhǔn)薄膜的濾光器支座539薄膜濾光器元件77541用于將濾光器元件固定到濾光器支座的夾子543校準(zhǔn)薄膜相對于光學(xué)軸線的角度545用于將滑塊固定在底座上的緊固件547底座中的平行狹槽549非球面透鏡551用于非球面透鏡的支座553用于非球面透鏡的框架557用于非球面透鏡的緊固件559空間濾光器561孑L板563用于空間濾光器板的框架567垂直縫隙571水平縫隙573孔575垂直尺寸577水平尺寸579收集體積583板支座587用于板支座的緊固件589用于孔板的襯背元件449A可調(diào)節(jié)的安裝組件449B狹槽449C狹槽450反射熒光發(fā)射的外照射451二向色濾光器光檢測器591用于光檢測器的安^！595用于光檢測器的緊固件束入射角605詢問位置和噴嘴之間的距離609束軸線A入射角聚焦的束斑LI沿著長軸的長度Wl沿著短軸的寬度分揀系統(tǒng)627充電裝置629充電的檢測器板631充電元件633充電元件中的開口635用于檢測器板的電源5001可調(diào)節(jié)的安裝組件5003安裝組件調(diào)節(jié)板5005安裝組件背襯5007緊固件5009狹槽5011平移軸線5013平移軸線5015安裝組件調(diào)節(jié)板5017緊固件5019狹槽5021固定支承件5023緊固件5025彈簧自動裝置分揀校準(zhǔn)4201校準(zhǔn)系統(tǒng)4203外照射傳感器4205光纖纜線4207二向色濾光器4209透鏡系統(tǒng)4211來自于液滴中的顆粒的熒光發(fā)射4213光檢測器4215束擋分揀系統(tǒng)錯誤校正5047用于充電元件的碎屑去除系統(tǒng)5048用于檢測器板的碎屑去除系統(tǒng)5051用于充電元件的支承5053真空通道5055真空線5057靠近充電元件的開口5058配件5059壓縮氣體線5061歧管5063空氣通道5064開口5065配件5066檢測器板的側(cè)面分揀的樣本的保護(hù)4033收集容器4041污染防止機(jī)構(gòu)4043氣動致動器4045擺臂4047擺臂端流體輸送系統(tǒng)645注射泵647從泵到載體供給的流線649用于包含載流體供給的容器651從泵到注射針的線657從注射泵到針的供給線659變速馬達(dá)661用于鞘流體供給的第二容器667用于使得鞘流體與噴嘴中的徑向孔相連的供給線669在供給線中的控制閥671用于鞘流體的氣體壓力系統(tǒng)675加壓氣體源679加壓氣體氣線681用于控制被供給到鞘流體罐的壓力的調(diào)節(jié)器683空氣線中的雙向閥控制(裝置)689A/D轉(zhuǎn)換器693移動通過束斑的斑點經(jīng)歷的相對束強(qiáng)度695來自于穿過束斑的精子的相對束強(qiáng)度d噴嘴和液滴分裂位置之間的距離信號處理701來自于光檢測器的輸出信號703液滴產(chǎn)生時鐘信號705數(shù)字信號處理(數(shù)字細(xì)胞分析器)707來自于A/D的數(shù)字信號735PC/計算機(jī)端子737主時鐘(128x時鐘信號)739數(shù)據(jù)獲得(HH1')741初始化檢測參數(shù)(HH1)745初始化識別(辨別)M(HH2)747數(shù)字脈沖檢測(HH3)749數(shù)字脈沖分析-特征抽取(HH4)753脈沖區(qū)域(HH5)755脈沖峰值(HH6)757脈沖識別(HH7)759分揀(HH8)761漂移分析(HH9)763用于Bayes規(guī)則的判定邊界769初始化771系統(tǒng)檢查773^f吏用者相互作用775重試(最多三次)777閃光779珠質(zhì)量控制781吸氣釆樣783采樣質(zhì)量控制785開始采樣787分揀進(jìn)行789采樣完成791連續(xù)采樣793分揀停止795X/Y識別最佳797設(shè)置X/Y識別799識別OK801速度最佳803i殳定注射速度805速度OK807系統(tǒng)檢查809系統(tǒng)復(fù)位811系統(tǒng)OK813示例性總操作流825積分器827寬度/區(qū)域比較器829動態(tài)閾值計算器831脈沖識別833JTAG端口I/0837窗比較器(區(qū)域)839脈沖寬度和觸發(fā)器邏輯841分揀判定8431/0控制器845從屬控制器847分揀控制器板849USB851DSP板SDRAM853分揀信號854低通濾波器8551/0板SDRAM857處理器I/0859夕卜圍I/0總線861分揀脈沖發(fā)生器863數(shù)據(jù)管理處理器865脈沖檢測處理器867特征抽取處理器873分揀處理器875DSP板RAM逆關(guān)系OL可用群組中的重合液滴和不可用群組中的重合液滴之間的Pl對應(yīng)于85%純度的線OL上的點LL對應(yīng)于60。/。的所需顆粒的收集的線OL上的點OR操作范圍(Pl和LL之間的OL段)6000原始數(shù)據(jù)6001第一未排列的細(xì)胞群組6003第二未排列的細(xì)胞群組6005排列的Y群組6007排列的X群組6010原始數(shù)據(jù)6011未排列的細(xì)胞群組6015排列的Y群組6017排列的X群組多通道系統(tǒng)1001多通道系統(tǒng)1003流式細(xì)胞術(shù)單元1005^^共顆粒供給1007共電磁輻射源1009公共殼體1011〃>共控制輸入1019〃>共輸出1021公共流體輸送系統(tǒng)10237>共溫度控制系統(tǒng)1025〃>共電源1027z^共廢物回收系統(tǒng)10297>共偏轉(zhuǎn)板系統(tǒng)1031公共清潔系統(tǒng)公共殼體1069底座1071兩側(cè)壁1073下肩對1075下蓋板1077殼體前部1081上肩對1083上蓋板1085殼體后部1087用于安裝多個細(xì)胞計數(shù)單元的框架1089附著在殼體側(cè)壁的橫梁(用于連接噴嘴座)1093在側(cè)壁之間延伸的有角度的安^公共流體供給(源)1105用于載流體的泵1107載流體的公共供給(源)1115用于鞘流體的氣體壓力系統(tǒng)1117鞘流體的公共供給(源)1121歧管系統(tǒng)1123包含載流體的公共供給的容器1125容器支座1133支承塊1135用于接收容器的腔1137用于緩沖材料的第二腔1139用于緩沖材料的容器1141注射泵1147從注射泵到歧管的供給線1149控制載流體和緩沖流體的三向閥1155用于鞘流體的公共供給的容器1157從鞘流體容器到歧管的供給線1161加壓氣體源1163氣體線1165在氣體線中的調(diào)節(jié)器1167在氣源和鞘流體罐之間的氣線所用的兩向閥1169對清潔溶液的供給加壓的氣體線1173用于清潔溶液的罐1175用于清潔溶液的氣線的兩向閥1177歧管1179分層塊1181通道1185流體流路1189與注射泵相連的入口1191與鞘流體的供給連接的入口1193用于載流體和鞘流體的出口Vl-V6用于控制通過歧管通道的流體流的閥1203框架元件(用于連接歧管塊)1205擰在塊中的配件1207樣本存儲室V1A-V1D雙向閥(用于控制樣本流體到噴嘴的流動)1217樣本存儲室的針1221廢物系統(tǒng)1223廢物罐(容器)1225諸如真空泵的機(jī)構(gòu)(用于產(chǎn)生真空)1227廢物線(將閥V1A-V1D連接到廢物罐)1233憎水過濾器(在連接廢物罐和真空泵的線中)1235用于鞘流體的流路V2A-V2D雙向閥(用于控制鞘流體到噴嘴的流動)1241鞘供給線1247連接鞘流體流路與廢物罐的廢物線7>共電源和控制1249>共電源1251一^共動力輸送系統(tǒng)1253公共輸入(裝置)(GUI)1255公共輸出(裝置)(連接到微處理器)公共溫度控制1257溫度控制系統(tǒng)1259流體流路(到溫度控制)1263流體通道(用于固定塊中的溫度控制)1265控制單元1269流體通道(用于歧管中的溫度控制)V6關(guān)閉閥公共光束和射束分裂系統(tǒng)1270射束分裂器1270A來自于射束分裂器的第一光束1270B來自于射束分裂器的第二光束1271第二射束分裂器1271A來自于第二射束分裂器的第一光束1271B來自于第二射束分裂器的第二光束1272第三射束分裂器1272A來自于第三射束分裂器的第一光束1272B來自于第三射束分裂器的第二光束1273射束引導(dǎo)系統(tǒng)1279下濾光組件1281上反射鏡組件1285底座(用于下濾光組件)1289級(用于下濾光組件)1291用于移動級的機(jī)構(gòu)(測微器)1293在級上的可傾斜的平臺1295反射鏡(在平臺上)1297底座(用于上鏡組件)1299級(用于上鏡組件)1301可傾斜的平臺(用于上鏡組件)1303鏡(用于上鏡組件)1305用于移動上級的機(jī)構(gòu)1309目標(biāo)板(附著在殼體的側(cè)壁上)1311垂直排列的孔(在目標(biāo)板中)1315第一反射濾光器1317第二反射濾光器1319第三反射濾光器1321第四反射濾光器公共檢測器板1331兩個公共檢測器板1333框架(用于將公共檢測器板安裝在殼體上)模塊式多通道系統(tǒng)4001多通道系統(tǒng)4009才莫塊式細(xì)胞計數(shù)單元4011用于模塊單元的殼體4013>共殼體4015激光器4017射束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)4021用于使得激光進(jìn)入模塊式殼體的孔4023覆蓋出口孔的板4025用于系統(tǒng)的收集系統(tǒng)毛細(xì)管噴嘴系統(tǒng)1335毛細(xì)管噴嘴系統(tǒng)1337毛細(xì)管1341充填有透光介質(zhì)的腔可選擇的分揀系統(tǒng)1351光分裂分揀系統(tǒng)1353第二激光器1355收集容器1357流體轉(zhuǎn)換系統(tǒng)1359流體轉(zhuǎn)換裝置1361分支到第一收集容器的毛細(xì)管1365分支到第二收集容器的毛細(xì)管1367換能器(用于產(chǎn)生壓力波以選擇性地控制流體流的方向)1369在噴嘴的端部上的毛細(xì)管1371液滴干擾流分揀系統(tǒng)1373高速液滴干擾流1375用于高速液滴流的液滴產(chǎn)生系統(tǒng)1377高速噴嘴系統(tǒng)1379高速流體流1381用于液滴干擾流產(chǎn)生的換能器1383高速液滴1387用于高速液滴偏轉(zhuǎn)的電子偏轉(zhuǎn)板1389未充電的液滴1391充電的液滴1397流體流的轉(zhuǎn)向段1399高速液滴流與同軸流體流的相交部分1403收集毛細(xì)管收集系統(tǒng)892201收集系統(tǒng)2203截取裝置2205沖擊表面2207收集容器2211液滴入口通道2213吸液管的球管2215吸液管2217吸液管的內(nèi)壁2225導(dǎo)管2227收集系統(tǒng)框架2229圓形支架2231用于截取裝置高度的調(diào)整螺釘2233安狄2235用于橫向調(diào)節(jié)的調(diào)節(jié)螺釘2241橫向狹槽2243用于放置收集容器的托架2245出射窗2247第一截取裝置2249第二截取裝置2265離散液滴收集流體2301收集流體過濾2401過濾器2403用于過濾的收集容器2405包*細(xì)胞的濃縮漿2409注射器機(jī)構(gòu)2411套管過濾器2413再懸浮流體2419第二容器2421用于過濾試驗的注射器2423用于過濾試驗的樣本2425用于過濾試驗的過濾器2427用于過濾試驗的真空泵2431用于過濾試驗II的注射器2433用于過濾試驗II的樣本2435用于過濾試驗II的過濾器2437用于過濾試驗II的真空泵低溫保藏2501調(diào)節(jié)濃縮2503增加低溫保護(hù)劑2505增加蛋白質(zhì)源2507裝在試管中2509冷卻到保溫溫度2511保持在保溫溫度下2513冷卻到達(dá)到臨界區(qū)域的溫度2515通過冰晶形成的范圍的冷卻2517浸沒在液氮中公共收集系統(tǒng)28017>共收集系統(tǒng)2803用于截取裝置的公共框架2805廢物槽2807用于收集容器的托架脈沖激光系統(tǒng)3001脈沖激光3003激光脈沖傳感器3005激光脈沖3007熒光脈沖壽命衰減3009數(shù)字樣本具體實施例方式下面所述的實施例涉及動物精子的收集和處理，特別涉及處理來自于家畜的精子以根據(jù)特定DNA特征分揀精細(xì)胞(例如，預(yù)先選擇后代性別的X/Y染色體含量)。多種本發(fā)明的技術(shù)被組合以達(dá)到下面描述的結(jié)果。但是，應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下這里所述的本發(fā)明技術(shù)可用于其它應(yīng)用。概述圖l是提供在本發(fā)明的一個示例性程序中的步驟概況的作業(yè)流程圖。該程序始于從一個或者多個雄性動物(例如公牛)收集純精子樣本(步驟39)。精子樣本被貼上標(biāo)識以便于識別(步驟41)，與緩沖劑接觸(步驟41A)并且被輸送到處理設(shè)備。除了緩沖劑以外，還加入添加物(步驟41A),例如包括能量源、蛋白質(zhì)源、抗生素和/或在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分?？蛇x擇的質(zhì)量控制測試可被執(zhí)行(步驟43)以確保每一個樣本的質(zhì)量(例如，精子的游動性)足以指示最終的產(chǎn)物可能符合最低質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。可選擇的洗滌步驟可執(zhí)行(步驟47)。在步驟47A，通過利用各種為部分樣本著色的著色協(xié)議接著分析每一部分的分揀性以識別用于特定樣本的所需著色協(xié)議來選擇用于處理的著色協(xié)議。通過將包含化學(xué)染料(例如一種DNA選擇性熒光染料)的著色流體48加入到每一個樣本中來執(zhí)行根據(jù)所選擇的著色協(xié)議的著色(步驟49)。除了著色流體以外，添加物也可在步驟48被增加，例如包括能量源、蛋白質(zhì)源、抗生素和/或在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分。在步驟51培育樣本以使得精子攝取染料。接著在步驟53將樣本裝在流式細(xì)胞計的樣本引入裝置中。在步驟54，樣本流體與鞘流體一起被引入到流式細(xì)胞計中。除了鞘流體以外，還可在9步驟54增加添加物，例如包括能量源、蛋白質(zhì)源、抗生素和/或在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分。在步驟55，流式細(xì)胞計根據(jù)特定的DNA特征分揀精細(xì)胞，如下面描述的。當(dāng)在步驟57利用流式細(xì)胞計的收集系統(tǒng)收集分揀的細(xì)胞時，它們被加入到包含收集流體或者低溫填充劑的收集容器(步驟58A)。除了收集流體以外，還可在步驟58A增加添加物，例如包括能量源、蛋白質(zhì)源、抗生素和/或在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分。此時，精細(xì)胞在已經(jīng)被在該過程中被增加的各種流體稀釋的溶液中。因此，具有所需DNA特征的精細(xì)胞群組在步驟58B被濃縮以用于商業(yè)上的人工受精。在步驟58C，低溫填充劑被加入到濃縮的分揀的精細(xì)胞。除了低溫填充劑以外，還可在步驟58C增加添加物，例如包括能量源、蛋白質(zhì)源、抗生素和/或在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分。精細(xì)胞接著被包裝在管式容器中(在祠養(yǎng)業(yè)中被稱為"試管")(步驟59)和低溫保藏(步驟61)。被低溫保藏的精子被包裝以在液氮中儲藏(步驟63)。被低溫保藏的精子接著通過商業(yè)分配系統(tǒng)被分配(步驟65)并且被銷售到動物飼養(yǎng)者(步驟67)。動物飼養(yǎng)者可儲存低溫保藏的精子(步驟69)直至它們準(zhǔn)備使用精子對雌性動物(例如奶牛)人工受精(步驟71)。如下面描述的，本發(fā)明的一個實施例包括基本在整個過程中進(jìn)行溫度控制。同樣，在有限的期限內(nèi)完成各個步驟是本發(fā)明的另一個實施例的一個方面。整個過程僅是本發(fā)明可如何使用的一個示例，并且應(yīng)該理解的是，上述一些步驟可被取消和/或增加其它步驟。被分揀的精細(xì)胞還可用于顯微注射或者其它體外受精，接著胚胎被移植到接受的雌性動物體中。包含本發(fā)明的進(jìn)步的整個過程的步驟在下面將被詳細(xì)描述。盡管所述的一種特定的程序涉及分揀動物精子(例如公牛精子)，但應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的各個方面可用于任何類型的精子(馬、豬以及其它)，可用于任何類型的細(xì)胞，可用于任何類型的顆粒，有機(jī)的或者無機(jī)的，包括乳膠顆粒、/磁性顆粒、染色體、亞細(xì)胞成分、原生質(zhì)體和淀粉顆粒。這些顆粒的尺寸在0.5至200微米的范圍內(nèi)，但本發(fā)明的技術(shù)不限于該范圍。93樣本收集和稀釋樣本收集待分揀的精子樣本可是來自于源動物的剛收集的樣本，包括公牛、馬、豬或者其它哺乳動物源，或者解凍的以前低溫保藏的樣本。另外，樣本可是來自于同一個哺乳動物的一次射出的精液、多次匯集的精液或者來自于兩個或者多個動物的多次匯集的精液。各種收集方法是已知的并且包括帶手套的-手方法、利用人工陰道和電刺激射精。精子優(yōu)選被收集或者快速輸送到隔熱容器中以避免生理溫度(通常35。C至39。C)的快速溫度變化。一次射出的精液通常包含每毫升5億至150億個精子，這取決于種類和特定的動物。不管收集方法，可從精子樣本中抽取一部分并且對各個特征進(jìn)行評估，諸如精子濃度、精子游動性、精子前進(jìn)機(jī)動性、樣本pH、精子膜完整性以及精子形態(tài)。例如可利用Hamilton-Thorn游動性分析器(IVOS)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的和公知的程序(例如見Farrel等的Theriogenology(1998)49(4):871-9;以及美國專利US4，896，966和US4，896，967)通過對精子的檢驗來獲得數(shù)據(jù)。稀釋精子樣本可與緩沖劑(采用固體或者溶液的形式)結(jié)合以形成精子懸浮液。特別是，緩沖劑可通過抵抗pH或者滲透壓力的重大變化緩沖懸浮液來增強(qiáng)精子的生存力。一般地，緩沖劑對于細(xì)胞是無毒的并且與用于使得細(xì)胞著色的染料相容。示例性的緩沖劑包括砩酸鹽、二磷酸鹽、檸檬酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽及其組合。目前優(yōu)選的緩沖劑包括TCA、TEST、檸檬酸鈉、HEPES、TL、TES、檸檬酸一水合物、HEPEST(Gradipore，St.Louis，MO)、PBS(Johnson等GameteResearch,17:203-212(1987))以及Dulbecco'sPBS(InvitrogenCorp,，Carlsbad,CA)。一種或者多種緩沖劑可結(jié)合在一起或者與下面所述的添加劑結(jié)合在一起以形成緩沖的溶液，并且緩沖的溶液與精子樣本結(jié)合形成精子懸浮液。緩沖的溶液還可包含一種或者多種添加劑，如下面詳細(xì)描述的。示例性緩沖的溶液被示出在表l中。優(yōu)選的緩沖溶液包括一種在pH為7.0的水中包含3。/。的TRIS基、2%檸檬酸一水合物和1%的果糖(w/v)的溶液，在表l中被標(biāo)示為TCA弁1的溶液和在表l中#皮標(biāo)示為TCA弁2的溶液。表l緩沖溶液<table>tableseeoriginaldocumentpage96</column></row><table>或者，精子可與代謝抑制物結(jié)合以形成抑制的精子懸浮液。代謝抑制物通過模擬哺乳動物的附睪或者附睪管的流體環(huán)境使得精細(xì)胞模仿哺乳動物(例如公牛)的附睪的精細(xì)胞。這樣一種抑制物可減小或者抑制精子的游動性或者新陳代謝活性。這類抑制物的示例包括基于碳酸鹽的抑制物，例如在Salisbury&Graves,J.Reprod.Fertil"6:351-359(1963)中披露的。這類優(yōu)選的抑制物包括NaHC03，KHC03和C6Hs07-H2C)。這類一種優(yōu)選的抑制物包括每25毫升純水的0.204g的NaHCO3，0.433g的KHCO3和0.473g的C6H807-H20(在水中，NaHCO3為0.097摩爾/升，KHCO3為0.173摩爾/升以及<:611807-1120為0.090摩爾/升)。除了緩沖劑以外，精子懸浮液還可包含多種添加物以增強(qiáng)精子的生存力或者游動性。示例性添加物包括能量源、蛋白質(zhì)源、抗生素和/或在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分。這些添加物中的一種或者多種在精子懸浮液形成之前可被引入到緩沖劑中或者緩沖的溶液中，或者可被獨立地引入到精子懸浮液中。一個或者多個能量源可被加入以大大減小或者阻止精細(xì)胞氧化細(xì)胞內(nèi)磷脂和其它細(xì)胞成分。示例性的能量源包括單糖，諸如果糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖，以及二醣類，諸如蔗糖、乳糖、麥芽糖和海藻糖，以及其它多糖。例如，所得到的精子懸浮液可包括1%(w/v)至4%(w/v)的能量源。如果包括的話，能量源優(yōu)選是果糖并且精子懸浮液包含約2.5%Cw/v)為了使得稀釋震動最小化，為細(xì)胞提供支承或者使得細(xì)胞分散在整個懸浮液中，蛋白質(zhì)源也可被包括在緩沖劑、緩沖溶液或者精子懸浮液中。示例性蛋白質(zhì)源包括蛋黃、蛋黃提取物、牛奶(包括熱均質(zhì)化和撇渣)、牛奶提取物、大豆蛋白、大豆蛋白提取物、血清白蛋白、牛血清白蛋白、人血清替代品補(bǔ)充物及其組合。白蛋白，特別是牛血清白蛋白(BSA)是一種優(yōu)選的蛋白質(zhì)源。例如，如果包括的話，以小于5.0%(w/v)，優(yōu)選小于2%(w/v)、更優(yōu)選小于1%(w/v)，最優(yōu)選小于0.1%(w/v)的BSA可存在于精子懸浮液中。蛋白質(zhì)源(例如BSA)的使用僅可起動精細(xì)胞在懸浮液中的百分比中的獲能過程。優(yōu)選，該過程發(fā)生在雌性生殖道中。因此，為了在稀釋過程中以及在隨后的著色和分揀過程中阻止獲能起動，一種可選擇的蛋白質(zhì)源或者蛋白質(zhì)替代物可被包含在精子懸浮液中?？蛇x擇的蛋白質(zhì)源或者蛋白質(zhì)替代物具有常規(guī)蛋白質(zhì)源(例如BSA)的有益效果而且還有在細(xì)胞在精子懸浮液中的較大百分比中阻止獲能起動的能力?？蛇x擇的蛋白質(zhì)源的示例包括人血清替代品補(bǔ)充物(SSS)(IrvineScientific,SantaAna、CA)和膽固醇強(qiáng)化因子BSA，而蛋白質(zhì)替代物的一個示例包括聚乙烯醇(諸如分子量為30000至60000的低至中粘性的聚乙烯醇)。一般地，如果包括的話，這些成分將以與上面關(guān)于BSA描述的相同的量存在，緩沖劑或者緩沖溶液的總白蛋白含量通常不超過5.0%(w/v)?？股乜涉ぜ尤氲骄討腋∫阂砸种萍?xì)菌生長。示例性抗生素例如包括泰樂菌素、林肯霉素、奇放線菌素、Linco-Spectin(林肯霉素氫氯化物奇放線菌素)、青霉素、鏈霉素、羧瘞吩青霉素或者其任何的組合?？股乜梢悦抠裆?0口克至800口克的濃度存在，而與精子是否純、被緩沖或者包含附加的物質(zhì)(例如，這里所述的任何一種添加劑)無關(guān)。精子鑒定服務(wù)機(jī)構(gòu)(CSS)和動物飼養(yǎng)員國家協(xié)會(NAAB)已經(jīng)發(fā)布關(guān)于抗生素在精子收集和應(yīng)用中的使用的指南。在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的成分也可,皮包含在精子懸浮液中。這樣一種成分可為精細(xì)胞提供一種保護(hù)性效果，諸如利用保持精子生存力或者前進(jìn)游動性。這樣一種成分的示例例如包括丙酮酸鹽、維生素K、疏辛酸、谷胱甘肽、淡黃霉素、醌、超氧化物歧化酶(SOD)和SOD擬態(tài)。如果被包括在精子懸浮液中，這樣一種成分可以足以在不對精子健康造成不良影響的情況下達(dá)到保護(hù)效果的濃度存在。示例性濃度范圍包括約10mM至約50mM，取決于諸如所用的特定成分或者精子在懸浮液中的濃度之類的因素。例如，丙酮酸鹽可以約lmM至約50mM、優(yōu)選約2.5mM至約40mM、較優(yōu)選約5mM至25mM、更優(yōu)選約10mM至15mM、最優(yōu)選約15mM，最最優(yōu)選約10mM的濃度存在于精子懸浮液中。維生素K可以約98lmM至約100mM、優(yōu)選約10mM至約100mM、更優(yōu)選約100mM的濃度存在于精子懸浮液中。硫辛酸可以約O.lmM至約lmM、更優(yōu)選約0.5mM至約lmM、最優(yōu)選約lmM的濃度存在于精子懸浮液中。待分揀的細(xì)胞的著色一般地，可利用形成包含精細(xì)胞、緩沖劑和染料的著色混合物使得精細(xì)胞凈皮著色。如上面關(guān)于樣本收集和稀釋描述的，精細(xì)胞可由剛得到的精子樣本或者解凍的低溫保藏精子樣本得到。如果精子樣本是解凍的在前低溫保藏精子樣本，精子優(yōu)選在著色之前立即解凍。一般地，包含冷凍精子的試管或者其它低溫冷藏容器可被放置在水池中，水池的溫度優(yōu)選超過精細(xì)胞膜的玻璃態(tài)轉(zhuǎn)化溫度(即，約17。C),但不高至對精子健康產(chǎn)生不良影響。例如，可通過將低溫冷藏容器浸入到保持在17至40。C的溫度下的水池中持續(xù)30至90秒來解凍冷凍精子。在獲得后，精細(xì)胞可以純精子的形式或者以源于精子的懸浮液的形式(例如上面關(guān)于樣本收集和稀釋描述的精子懸浮液)被引入到著色混合物中。染料可采用純固體或者液體成分的形式。染料也可^皮溶解或者分散在未緩沖的液體中以形成染料溶液?；蛘撸玖峡刹捎冒ㄈ玖虾团c精細(xì)胞生理相容的緩沖劑或者緩沖溶液的染料懸浮液的形式。多種示例性的緩沖劑或者緩沖溶液是上面關(guān)于樣本收集和稀釋描述的。例如，在可用的緩沖劑中，一種是在pH為7.0的水中包括3。/。的TRIS基、2%的檸檬酸一水合物和l%的果糖的TCA緩沖溶液，或者一種在每25毫升的純水中包括(K204g的NaHC03、0.433g的KHCO3和0.473g的C6H807.H20的基于碳酸鹽的抑制劑溶液(水中包含0.097摩爾/升的NaHCO3、0.173摩爾/升的KHC03和0.0卯摩爾/升的C6H8O7.H20)。這樣，例如，一種著色混合物可通過純精子與染料結(jié)合而形成?；蛘?，著色混合物可通過純精子與緩沖劑或者緩沖溶液和染料結(jié)合而形成。另外，著色混合物可通過精子懸浮液與染料結(jié)合而形成。的，可利用一種或者多種UV或者可見光激發(fā)的DNA選擇性染料來形成著色混合物。示例性的UV光激發(fā)的選擇性染料包括Hoechst33342和Hoechst33258,每一種都可從Sigma-Aldrich(St.Louis，MO)商業(yè)獲得。示例性的可見光激發(fā)染料包括可從MolecularProbes，Inc.(Eugene,OR)商業(yè)獲得的SYBR-14和在WO02/41906中描述的bisbenzimide-BoDIPY共輒物6畫([3-((2Z)-2-Ul-(二氟硼烷基)-3，5-二甲基-lH-吡咯-2-基亞甲基)-2H-吡咯-5-基)丙醇氨基}-]\-[3-(甲基{3-[({4-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-111，3'11-2，5'-二苯并咪唑-2'-基苯氧基}乙?；?氨基丙基}#^)丙基1乙酰胺("BBC")。這些染料中的每一種可單獨使用或者結(jié)合使用；或者，可單獨使用或者與上述染料結(jié)合使用其它細(xì)胞滲透UV和可見光激發(fā)染料，只要在以這里所述的能夠分揀的濃度使用時染料不對精細(xì)胞的生存力產(chǎn)生達(dá)到不可接受的程度的不良影響即可。DNA選擇性染料在著色混合物中的優(yōu)選濃度是包括細(xì)胞相對于所選擇的染料的滲透性、著色混合物的溫度、允許著色發(fā)生的時間和在后續(xù)的分揀步驟中所需的濃縮程度的多個變量的函數(shù)。一般地，染料濃度優(yōu)選在1^'需的著色程度。例如，Hoechst33342、Hoechst33258、SYBR-14和BBC在著色混合物中的濃度通常在0.1pM至1.0M之間，優(yōu)選在0.1nM至700nM之間，優(yōu)選在100nM至200fiM之間。因此，在一組著色條件下，Hoechst33342的濃度優(yōu)選為100fxM。在另一組著色條件下，Hoechst33342的濃度優(yōu)選為150nM。在另一組著色條件下，濃度優(yōu)選為200nM。除了緩沖劑以外，其它添加劑可被包括在著色混合物中以增強(qiáng)精子的生存力或者游動性；這些添加劑可作為精子源、染料源的一部分祐:提供或者相對于著色混合物單獨提供。這樣的添加劑包括能量源、抗生素、在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分和精液漿，前三種是上面關(guān)于樣本收集和稀釋描述的，最后一種是下面關(guān)于收集流體描述的。這樣的添加劑可在這里所涉及的著色技術(shù)過程中被加入。1特別是，已經(jīng)觀察到，在著色混合物中加入在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分可有助于在高的著色溫度下、在高的染料濃度下、在長的著色時間內(nèi)或者它們的組合下保持精子的生存力。這些成分的示例和它們的使用參照上面關(guān)于緩沖劑和稀釋劑的描述。這些成分可在這里所涉及的著色技術(shù)過程中被加入。著色混合物可被保持在任何溫度范圍內(nèi)；通常，范圍在4至50。C之間。例如，著色混合物可被保持在"較低，，的溫度下，即4至30。C之間的溫度下；在該實施例中，溫度優(yōu)選在20至30。C之間、溫度優(yōu)選在25至30。C之間，優(yōu)選為28。C?；蛘?，著色混合物可被保持在"中間，，的溫度范圍內(nèi)，即30至39。C之間的溫度下；在該實施例中，溫度優(yōu)選在34至39。C之間、優(yōu)選為37。C。另外，著色混合物可被保持在"較高"的溫范圍內(nèi)下，即40至50。C之間的溫度下；在該實施例中，溫度優(yōu)選在40至45。C之間、溫度優(yōu)選在40至43。C之間，優(yōu)選為41。C。優(yōu)選溫度的選擇通常取決于多個變量，例如包括細(xì)胞相對于所用的染料的滲透性、染料在著色混合物中的濃度、細(xì)胞被保持在著色混合物中的時間和在分揀步驟中所需的濃縮的程度。使得精細(xì)胞在著色混合物中攝取染料持續(xù)足以達(dá)到DNA著色的所需程度的時間。該時間通常是染料足以粘合精細(xì)胞的DNA以使帶有X和Y染色體的精細(xì)胞可基于它們之間的不同的和可測量的熒光強(qiáng)度被分揀的時間。通常，該時間不大于160分鐘、優(yōu)選不大于卯分鐘、優(yōu)選不大于60分鐘、優(yōu)選在5分鐘至40分鐘之間。因此，在一個實施例中，形成濃度在100nM至200nM之間的包括精細(xì)胞和染料的著色混合物，并且著色混合物在41°C的溫度下保持一段時間。在另一個實施例中，著色混合物還包括濃度為10mM的丙酮酸鹽、濃度為100nM的維生素K和濃度為lmM的硫辛酸。在另一個實施例中，形成濃度在100iLiM至200nM之間的包括精細(xì)胞和染料的著色混合物，并且著色混合物在28。C的溫度下保持一段時間。在另一個實施例中，著色混合物還包括濃度為10mM的丙酮酸鹽、濃度為100nM的維生素K和濃度為lmM的硫辛酸。101在另一個實施例中，形成濃度在100nM至200nM之間的包括精細(xì)胞和在每25毫升的純水中包括0.204g的NaHCO3、0.433g的KHCO3和0.473g(水中包含0.097摩爾/升的NaHCO3、0.173摩爾/升的KHCO3和0.090摩爾/升的C6H807.H20)的新陳代謝抑制劑的著色混合物，并且著色混合物在28。C的溫度下保持一段時間。在另一個實施例中，著色混合物在41。C的溫度下保持一段時間。鞘流體為了分揀精細(xì)胞，著色的細(xì)胞作為樣本流體^f皮引入到下面描述的流式細(xì)胞計的噴嘴中。作為程序的一部分，樣本流體通常被鞘流體包圍。鞘流體使得樣本流體中的精細(xì)胞被抽成下面描述的一個列。利用流式細(xì)胞計的收集系統(tǒng)使得鞘流體和精細(xì)胞一起被收集，從而形成精細(xì)胞的分揀后環(huán)境的一部分。這樣，優(yōu)選在細(xì)胞和鞘流體接觸后鞘流體為細(xì)胞提供保護(hù)效果。鞘流體通常包括緩沖劑或者緩沖溶液?？捎糜谇柿黧w中的緩沖劑或者緩沖溶液的示例和它們的說明性濃度如上面參照樣本收集和稀釋描述的。在一個特定的實施例中，鞘流體包括在pH值為7.0的水中的0.96%的Dulbecco's磷酸鹽緩沖鹽(w/v)，0.1%的BSA(w/v)?；蛘?，鞘流體也可包含多種有益于精子生存力和游動性的添加劑。這樣的添加劑例如包括能量源、蛋白質(zhì)源、抗生素、在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分、備選的蛋白質(zhì)源和聚乙烯醇。這些添加劑的每一種和它們的示例如上面參照樣本收集和稀釋描述的。依照其，這樣的添加劑可被加入到鞘流體中。在分揀步驟前，鞘流體也可^L過濾?？纱嬖谟谇柿黧w中的雜質(zhì)，諸如不可溶解的顆粒，可干擾分揀。因此，在其^f皮引入到流式細(xì)胞計中之前鞘流體可被過濾。這樣的過濾器及其使用方法在本領(lǐng)域是公知的。通常，過濾器是0.1微米至0.5微米的薄膜，優(yōu)選為0.2微米至0.3微米，優(yōu)選為0,2微米。著色的細(xì)胞可在著色后的任何時間被引入到鞘流體中。通常，在樣本流體中的著色細(xì)胞流在流式細(xì)胞計的噴嘴內(nèi)被注入到鞘流體流中。開始，由于下面詳細(xì)描述的流體層流的緣故，樣本流體與鞘流體基本沒有接觸。優(yōu)選，樣本流體和鞘流體基本保持間斷流直至樣本流體中的顆粒(例如著色的精細(xì)胞)已經(jīng)被分析。但是，在一些地點，樣本流體與鞘流體相互接觸。例如在液滴分揀流式細(xì)胞計(下面描述的)中，當(dāng)液滴在詢問位置下游形成時鞘流體和樣本流體開始相互接觸。在引入著色的細(xì)胞和鞘流體時，著色的細(xì)胞和鞘流體可在4至50。C的溫度下。鞘流體和著色的細(xì)胞可處于相同或者不同的溫度，其中一個的溫度高于另一個。因此，在一個實施例中，在引入著色的細(xì)胞和鞘流體時，鞘流體和著色的細(xì)胞處于相同的溫度；例如，在"較低，，溫度下，例如5。C至8。C;或者在"中間，，溫度下，例如25。C至30。C;在"較高，，溫度下，例如40。C至43。C。在另一個實施例中，著色的細(xì)胞的溫度高于鞘流體，諸如，細(xì)胞在40。C至43。C之間，鞘流體在室溫下或者5。C。在另一個實施例中，著色的細(xì)胞的溫度低于鞘流體。流式細(xì)胞計本發(fā)明的一個實施例在流式細(xì)胞計中使用創(chuàng)造性的技術(shù)以分析和分揀精細(xì)胞?，F(xiàn)參見圖2和3，本發(fā)明的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)的一個實施例整體用附圖標(biāo)記1表示。如圖中所示，流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)l用于根據(jù)所選擇的特征分類和分揀顆粒，諸如精細(xì)胞。一般地，系統(tǒng)l包括包含待分揀的顆粒的載流體17的供給3、鞘流體19的供給7、用附圖標(biāo)記9表示的具有分揀能力的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備和用于在壓力下將載流體17和鞘流體19從供自的供給3、7輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備9的流體輸送系統(tǒng)15。流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備9適于接收載流體17和鞘流體19以使得載流體17和鞘流體19結(jié)合形成加壓流體流21以將帶有顆粒的流21引導(dǎo)通過聚焦的電磁輻射束25(例如，UV激光)，以及分析由通過聚焦束25的顆粒發(fā)出的電磁輻射31(例如，熒光)。設(shè)備9還用于將流21分裂成包含待評估的顆粒的液滴33以及根據(jù)包含在液滴33中的顆粒的一個或者多個特征基于上述測量分揀液滴33。盡管本發(fā)明可用于分析優(yōu)選分揀任何類型的顆粒，但是它特別適用于根據(jù)細(xì)胞的一個或者多個所需特征(例如，尺寸、DNA含量、形狀、密度、基因排序等)分揀細(xì)胞。本發(fā)明特別適用于分揀動物飼養(yǎng)業(yè)商用的動物精細(xì)胞以用于體內(nèi)或者體外人工受精，如下面詳細(xì)描述的。單通道分揀設(shè)備和方法流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備圖3中所示的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備9包括噴嘴系統(tǒng)IOI，噴嘴系統(tǒng)101用于在壓力下將包含顆粒(例如著色的精細(xì)胞)的流體流21輸送通過噴嘴孔103，并且細(xì)胞基本排成一列，對于精細(xì)胞，精細(xì)胞的不對稱頭部基本在將描述的所需取向上。如在常身見的流式細(xì)胞術(shù)液滴分揀系統(tǒng)中，與噴嘴孔103相對地設(shè)置換能器105以將聲能引入流體流21中，使得流21在與噴嘴孔103間隔的"液滴分裂"位置107處分裂成包含各個細(xì)胞的液滴33。系統(tǒng)l還包括光學(xué)系統(tǒng)109，光學(xué)系統(tǒng)109用于使得電磁輻射束25(例如，350-700納米UV或者可見激光)在"詢問"位置115處聚焦在流體流21上，在所述實施例中，詢問位置105在噴嘴孔103和液滴分裂位置107之間。這樣，所述實施例是一種空氣中噴射系統(tǒng)。在其它實施例中，詢問位置107可在噴嘴孔103內(nèi)或者在孔103上游。在任^T情況下，細(xì)胞適于在詢問位置107處穿過光束25，激發(fā)細(xì)胞中的化學(xué)著色劑(或者其它報告的介質(zhì))以形成波長不同于束25的熒光發(fā)射31(例如，如果照射光25的波長為350-370納米，熒光發(fā)射31的波長可為460納米)。光檢測器117可檢測這些發(fā)射31以及將它們轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，所述電信號被處理并且用于根?jù)所選擇的特征(諸如精細(xì)胞的X/Y染色體含量)對細(xì)胞進(jìn)行分類。流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備9還包括分揀系統(tǒng)119和收集系統(tǒng)2201(圖2),分揀系統(tǒng)119用于根據(jù)包含在液滴33中的細(xì)胞的分類將液滴33分揀成不同的組或者群組(例如，兩個群組123、125)，收集系統(tǒng)2201用于收集液滴33和保持不同群組123、125的分離。系統(tǒng)的操作受到處理器131的控制，諸如^L處理器或者其它數(shù)字或者模擬控制和/或處理器或者它們的組合，處理器131以將描述的一種方式控制系統(tǒng)l的部件的各種功能。重要的是，處理器131還響應(yīng)于顆粒分析信息以其中一個被分揀的顆粒群組的所需純度、與在一個或者多個其它群組中的所需顆粒的量(或者百分比)相比的在其中一個群組中的所需顆粒的可接受的量(或者百分比)，和后面將描述的其它參數(shù)。下面詳細(xì)描述系統(tǒng)l的各個部件。噴嘴系統(tǒng)參見圖4和圖5，在一個實施例中，噴嘴系統(tǒng)101包括通過其的具有中心縱向孔135的基本圓柱形流動主體133和在流動主體133上的具有漏斗形噴嘴主體139的噴嘴137。通道141與流動主體133中的孔135同軸地貫穿噴嘴主體139和在噴嘴137的前端處終止于上述噴嘴孔103。噴嘴主體139在其后端處具有帶內(nèi)螺紋的沉孔145以螺紋地接收在流動主體133的前端處的螺紋突起或者螺柱149以可拆卸地使得噴嘴137和流動主體133相連，該連接被O形密封件155密封。應(yīng)該理解的是，噴嘴可以其它方式以可拆卸的方式與流動主體相連，或者部件可整體地形成一體。利用同軸地位于流動主體133的孔135中的導(dǎo)管157將顆粒輸送到噴嘴137。導(dǎo)管157的外徑小于孔135的內(nèi)徑以使環(huán)形空間167形成在導(dǎo)管157周圍。在一個特定實施例中，導(dǎo)管157是管狀針(例如，內(nèi)徑為0.01英寸的16-ga.針)，導(dǎo)管157具有延伸到在噴嘴后部的沉孔145中的前端。導(dǎo)管157的后端與流體輸送系統(tǒng)15相連以將載流體15(例如，包含精細(xì)胞的著色混合物)輸送到導(dǎo)管157。圍繞導(dǎo)管157的環(huán)形空間167通過流動主體133中的徑向孔173與流體輸送系統(tǒng)15相連以將鞘流體19輸送到環(huán)形空間167中。如圖3和圖5中所示，可選擇的第二徑向孔183可^L置在流動主體133中以^使得環(huán)形空間167與另一個管線(未示出)相連以將附加的鞘流體19供給到噴嘴137中。如在常規(guī)流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中，鞘流體19被引入到包圍導(dǎo)管157的環(huán)形空間167中。當(dāng)鞘流體19流過導(dǎo)管157的尖端時的速度遠(yuǎn)高于離開導(dǎo)管157的載流體17的速度，以使載流體17和包含在其中的細(xì)胞(例如，精細(xì)胞)被朝向噴嘴137的孔103的鞘流體19加速。該加速用于在基本一列布置中將細(xì)胞分隔以由光學(xué)系統(tǒng)109進(jìn)行單獨分析。鞘流體19包圍載流體17，產(chǎn)生具有載流體17的中心芯189和包圍中心芯189的鞘流體19的外同軸鞘191的流體流121(見圖6)。流式細(xì)胞術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，中心芯189的層流和液壓力集中趨于將顆粒限定在芯189，基本不與噴嘴137中的鞘流體19和載流體17混合。另外，當(dāng)流21移動通過噴嘴系統(tǒng)101時，中心芯189基本完整地保持在鞘191內(nèi)，直至液滴33形成在分裂位置107處時。這種類型的同軸流動特別適于流式細(xì)胞術(shù)，這是因為待分析的顆粒,皮限制在流中的較窄芯部189內(nèi)。因此，聚焦在流21的中心或者芯部189上的光束25將照射顆粒以使它們可基本以一次一個的方式被分析。用于將芯189限制在足夠窄的直徑內(nèi)，因此人們可獲得在芯流體189中的更均勻的顆粒照射。為了達(dá)到良好的分析效果，包含顆粒的芯的直徑優(yōu)選在7至20微米的范圍內(nèi)，優(yōu)選在7至14微米的范圍內(nèi)。可通過相對于鞘流體19的輸送速度調(diào)節(jié)載流體17的輸送速度來增大或者減小芯流189的直徑。細(xì)胞取向為了使得分析結(jié)果達(dá)到最佳，優(yōu)選在具有不對稱形狀的顆粒穿過來自于光學(xué)系統(tǒng)的光束時使得它們處于所需的取向。如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，來自于不對稱顆粒的熒光發(fā)射趨于各向異性(即，發(fā)射的強(qiáng)度在所有方向上是不均勻的)。這里所用的術(shù)語"所需取向"指的是使得處理系統(tǒng)識別具有不同特征的細(xì)胞的準(zhǔn)確率在70%至IOO%的范圍內(nèi)、優(yōu)選在80%至IOO%的范圍內(nèi)、優(yōu)選在卯％至100%的范圍內(nèi)，優(yōu)選為95%或者更大的取向。為了說明這個方面，牛精細(xì)胞201被示出在圖6和圖7中。通常，細(xì)胞具從頭部205延伸的尾部215，槳狀頭部205具有較平寬的相對表面207和窄邊209，尾部215提供有效受精所需的游動性。平均牛精細(xì)胞201的頭部長度219為8微米，頭部寬度221為4微米，從頭部前部到尾端的總長為100微米。在平均牛精細(xì)胞201中，核213占據(jù)頭部體積的大部分并且僅略微小于精子頭部205。這樣，核長度217基本等于頭部長度219,長度也為8微米。已經(jīng)觀察到，在牛中，精細(xì)胞201的X/Y染色體位于核中的在頭部205的縱向中線或者赤道或者中心下方并且緊相鄰的區(qū)域225(圖6)中。特別是，該赤道下的區(qū)域225在核213的下半部(朝向尾部215)上延伸不大于核長度217的20%，優(yōu)選在核213的下半部上延伸不大于核長度217的10-15%，優(yōu)選在核213的赤道下面延伸不大于1.0-1.5微米。當(dāng)精細(xì)胞穿過激發(fā)束25時，優(yōu)選細(xì)胞基本成一列并且每一個細(xì)胞201的頭部205基本為類似取向以減小細(xì)胞和細(xì)胞之間的取向差異，從而提供更均勻的細(xì)胞測量。還希望，細(xì)胞具有能夠在X和Y細(xì)胞之間進(jìn)行準(zhǔn)確區(qū)分的取向。優(yōu)選，該取向是這樣一個取向，即，其中精細(xì)胞201的長度基本對準(zhǔn)流體流227的方向(頭前端(圖6所示)或者頭部末端)并且精細(xì)胞201的頭束25將照射細(xì)胞201的寬面(一般為寬側(cè))(如圖7中示意性示出的)而不是細(xì)胞的窄邊209的具有角度的包絡(luò)面229內(nèi)的取向。優(yōu)選，限定所需取向度范圍R1形成的，如在穿過流21橫向截得的橫截面中看到的。范圍R1優(yōu)選為O-卯度，優(yōu)選為0-60度，優(yōu)選為0-30度。本發(fā)明的噴嘴能夠以高達(dá)卯%或者更高的準(zhǔn)確度到達(dá)所需取向。精子取向的容限(即，由角度范圍R1限定的包絡(luò)面229的尺寸)與用于收集來自于精細(xì)胞的熒光發(fā)射的透鏡的數(shù)值孔徑有關(guān)。在圖7中所示的實施例中，例如，光學(xué)系統(tǒng)109具有由55度的立體角限定的熒光發(fā)射31檢測量579。當(dāng)在精子移動通過束25時精子頭部205的轉(zhuǎn)動取向在由R1限定的包絡(luò)面229外時，來自于精子頭部205的邊緣209的較強(qiáng)的熒光發(fā)射31被光學(xué)系統(tǒng)109收集，防止處理器131將熒光發(fā)射31的強(qiáng)度與精細(xì)胞201的X/Y染色體含量聯(lián)系起來。但是，只要在精子通過詢問位置115時其頭部205的轉(zhuǎn)動取向在包絡(luò)面229內(nèi)，光學(xué)系統(tǒng)109就不收集來自于精子頭部205的窄邊209的較強(qiáng)的熒光發(fā)射31。這樣，在圖7中所示的實施例中，只要精子頭部205的窄邊209被限制在角度R1內(nèi)，那么精細(xì)胞的取向不導(dǎo)致較強(qiáng)的沿邊焚光發(fā)射的收集?？衫镁哂袦p小數(shù)值孔徑的透鏡來減小收集量579的立體角，從而增大角度R1和取向差的精子的容限。但是這也減小了可被光學(xué)系統(tǒng)109收集的光子量，這可通過減小被光檢測器檢測的發(fā)射31的強(qiáng)度影響熒光發(fā)射31的測量。同樣，如果光學(xué)系統(tǒng)109利用高數(shù)值孔徑的透鏡收集熒光發(fā)射31以獲得被光檢測器檢測的熒光發(fā)射的較強(qiáng)的強(qiáng)度，接著精子取向的容限減小。這樣，在設(shè)計本發(fā)明的系統(tǒng)中，人們需要在精子取向的容限和數(shù)值透鏡孔徑之間權(quán)衡利弊。最佳的平衡取決于取向能力和系統(tǒng)的光學(xué)敏感性。在一個希望的實施例中，例如，4吏用數(shù)值孔徑為0.65的透鏡。噴嘴設(shè)計在一個實施例中，如圖8和圖9中所示，在沉孔145的下游的噴嘴主體139的內(nèi)部231具有內(nèi)表面233,所述內(nèi)表面233包括第一、第二和第三軸向錐形區(qū)域235、237、239以在朝向噴嘴孔103的下游方向上逐漸提高流體流21的速度。如上所述，該加速用于分隔流21中的顆粒(例如細(xì)胞)，使得它們呈現(xiàn)一種單列形式，從而它們基本可被一次一個顆粒的形式被分析。這些區(qū)域的至少兩個，并且優(yōu)選所有三個235、237、239在相對于噴嘴137的縱向軸線247成直角截得的橫截面中基本為橢圓形(卵形)，如圖9A-9H和圖9J-9K所示。噴嘴主體139的內(nèi)表面233還具有在頭三個區(qū)域235、237、239下游并且就在噴嘴孔103的上游的非錐形的第四區(qū)域249,在一個實施例中，第四區(qū)域249形成在固定于噴嘴主體139前部的沉孔257中的單獨孔元件255中。在一個實施例中，第一區(qū)域235和第二區(qū)域237的基本橢圓形的橫截面形狀以基本相同的方向取向以限定第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域259,并且構(gòu)成第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域261的第三區(qū)域239的基本橢圓形的橫截面形狀以相對于第一區(qū)域235和第二區(qū)域237的基本橢圓形的橫截面形狀成一定角度(例如90度)取向。該取向使得噴嘴主體139的內(nèi)表面233在流體流21上施加扭力，從而當(dāng)精細(xì)胞201通過噴嘴孔103時使得精細(xì)胞201定向于上述所需取向。優(yōu)選，第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域259具有3.0-4.5毫米的軸向長度273、優(yōu)選為3.6毫米，并且構(gòu)成區(qū)域259的第一錐形區(qū)域235和第二錐形區(qū)域237具有基本相等的軸向長度275、277(例如1.8亳米)。第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域261具有3.0-5.0毫米的軸向長度279、優(yōu)選為4.45亳米。第四區(qū)域249優(yōu)選基本為圓柱形。在第一區(qū)域235、第二區(qū)域237和第三區(qū)域239的邊界處的每一個橫截面形狀基本為橢圓形A-D(圖8)具有長軸直徑和短軸直徑，圖8和下面的表l中示出它們的示例性尺寸。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage109</column></row><table>應(yīng)該理解的是，上述尺寸是示例性的，并且其它尺寸和形狀也是可以的。功能上，長軸直徑和短軸直徑之間的比率變化和區(qū)域的橢圓形的不同取向產(chǎn)生作用在每一個細(xì)胞201上和施加可使得細(xì)胞201在其縱向軸線上轉(zhuǎn)動的扭力271的側(cè)作用力，從而使得其寬面207與第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域259中的短軸對準(zhǔn)以及當(dāng)細(xì)胞適度扭曲(例如90度)與第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域261中的短軸對準(zhǔn)。錐形表面235、237、239中的每一個還用于使得流過噴嘴101的流21(和細(xì)胞)加速。在一個實施例中，在第一區(qū)域235和第三區(qū)域239中平緩加速以及在第二區(qū)域237中迅速加速。例如，第一區(qū)域235的錐度可在11-14度的范圍內(nèi)；第二區(qū)域237的錐度可在42-48度的范圍內(nèi)；以及第三區(qū)域239的錐度可在8-12度的范圍內(nèi)。噴嘴主體139是由諸如模制塑性(ABS)或者金屬的適合材料形成的?？自?55(圖8)優(yōu)選由硬的、耐磨材料制成，諸如藍(lán)寶石，它可以精確尺寸被機(jī)加工或者成型。在一個實施例中，孔元件255本身具有基本為圓形橫截面的圓錐形上游表面309，其直徑從0.92亳米減小到0.060亳米并且具有0.54毫米的軸向長度317和39度的錐角。孔元件255還具有基本為圓柱形的下游表面315，其直徑為0.060毫米并且軸向長度327為0,36亳米。這些尺寸僅是示例性的，應(yīng)該理解的是，孔元件255可具有其它的尺寸和形狀。例如，上游表面309的橫截面形狀可基本為橢圓形(卵形)，在噴嘴137的下游端處的孔103的直徑可在40至100微米或者更大的范圍。優(yōu)選，孑Ll03的尺寸是這樣的，即，使得離開噴嘴101的細(xì)胞在流21的芯189內(nèi)基本為單列形式并且基本在所需取向，如上所述。例如，對于精細(xì)胞，在下游端處具有60-62微米的直徑的孔103已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)是適合的。優(yōu)選，噴嘴孔103用于使得流21進(jìn)一步加速和設(shè)定流21的形狀和尺寸以使得細(xì)胞分隔、細(xì)胞取向和液滴33形成達(dá)到最佳，如下面將描述的。當(dāng)細(xì)胞離開噴嘴137時的速度將取決于各個因素，包括鞘流體19被引入到噴嘴系統(tǒng)101中的壓力。在壓力為20psi時，當(dāng)基本為圓柱形的流21包含基本類似地取向在流21的芯189處的細(xì)胞時，細(xì)胞將以16.6m/s的速度離開上述實施例的噴嘴孔103。在鞘壓力為30psi時，細(xì)胞速度將為20.3111/8。在鞘流體19的壓力不同的情況下，流21的速度將改變。芯流到扭轉(zhuǎn)區(qū)域的引入可通過改變流體流21通過取向噴嘴的流動可獲得顆粒的改善取向以使包含待取向的顆粒(例如，精細(xì)胞)的芯流189沿著流動路徑被引導(dǎo)，所述流動路徑的至少一部分偏離噴嘴中心以使顆粒經(jīng)受由噴嘴產(chǎn)生的液體動力取向力同時它們處于偏離噴嘴中心的位置。沿著偏離的流動路徑引導(dǎo)芯流189還可改善顆粒在常規(guī)噴嘴(即，沒有任何扭轉(zhuǎn)區(qū)域的噴嘴)中的取向。在許多噴嘴中，人們可確定一個已知位置偏離噴嘴的中心，這是因為它從噴嘴的縱向軸線移動。人們也可認(rèn)識到，特定位置偏離噴嘴的中心，這是因為它從流體流流過的噴嘴的橫截面的幾何中心移動。多個技術(shù)可用于沿著偏離噴嘴中心的流動路徑引導(dǎo)芯流189。例如，取向擋板可位于噴嘴中以使得芯流偏轉(zhuǎn)到噴嘴的一側(cè)。類似地，用于引導(dǎo)包含樣本顆粒的芯流189的導(dǎo)管157可從噴嘴的常規(guī)中心重新定位到偏離位置。另外，可以預(yù)見的是，偏離樣本導(dǎo)管157可與取向擋板結(jié)合使用。取向擋板的使用和偏離樣本導(dǎo)管的使用的實施例如下面描述的。利用取向擋板和/或偏離樣本導(dǎo)管157達(dá)到的顆粒(例如精細(xì)胞)的改進(jìn)取向可取決于多個因素。一個因素是，芯流189的偏轉(zhuǎn)和/或流動區(qū)域的橫截面的尺寸和形狀導(dǎo)致趨于定向不對稱顆粒的液壓動力的施加(Kachel，etal.HistochemistryandCytochemistry,25(7):774-80(1977))。另一個因素是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)不對稱顆粒(特別是精細(xì)胞)當(dāng)它們在流體流中流動時趨于接近固體表面取向。這樣，通過引導(dǎo)芯流189以使其接近噴嘴的內(nèi)表面或者擋板表面，人們可獲得顆粒的改進(jìn)取向。另外，擋板和/或偏離樣本導(dǎo)管可與在不對稱顆粒上施加附加的取向力(例如，扭轉(zhuǎn)力)的取向噴嘴結(jié)合使用。在該情況下，擋板可操作以引導(dǎo)流體流以使包含待取向的顆粒的芯流沿著偏離噴嘴中心的路徑流動同時顆粒經(jīng)受由一個或者多個扭轉(zhuǎn)區(qū)域產(chǎn)生的扭力。定向擋板圖10-13示出一個位于上述取向噴嘴137中的示例性取向擋板2001。但是，擋板2001可在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的;l^出上與不同的噴嘴結(jié)合使用，包括非取向噴嘴。擋板2001位于噴嘴中在孔103的上游和樣本注射針157的下游。參見圖14和15，擋板包括被擋板支架2005定位的擋板2003。在所示的實施例中，擋板2003基本為L形并且由基本剛性、耐用的和耐腐蝕材料構(gòu)成(例如不銹鋼)。L形板2003具有上游支腿2007和下游支腿2009，優(yōu)選上游支腿2007和下游支腿2009基本相互垂直(例如在5度的垂直度以內(nèi))。在該圖中所示的示例性實施例中，L形板2003的兩個支腿2007、2009在垂直于噴嘴的137的縱向軸線2017的線2015處相交。如圖14中所示，交線2015與擋板支架2005的縱向軸線2057分隔短的距離2033(例如約0.3毫米)。L形板2003的上游支腿2007從遠(yuǎn)離噴嘴137的縱向軸線2017的交線2015—直延伸到擋板支架2005的邊緣，如圖15中所示。這樣，上游支腿2007形成有緊密匹配擋板支架2005的形狀的彎曲邊緣2019。如圖14中所示，上游支iii腿2007以與垂直于擋板支架2005的縱向軸線2057的方向成15-25度的角度AA傾斜。L形板2003的下游支腿2009以在與垂直于擋板支架2005的縱向軸線2057的方向成60-80度的范圍內(nèi)的角度BB從兩個支腿2007、2009的交線2015向下游延伸約2.0-2.5亳米的距離2025。擋板支架2005的尺寸和形狀適于安裝在噴嘴137內(nèi)，如圖10-13中所示。擋板支架2005優(yōu)選由可模制的材料(例如，聚丙烯)制成，盡管在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，擋板支架2005可由其它材料構(gòu)成。如圖14和15中所示，在該實施例中所用的擋板支架2005基本^f皮形成為總長度2027為4.0-4.5毫米的中空圓柱形殼。擋板支架2005具有約5-6亳米的外徑2029和約2.5-3.5毫米的內(nèi)徑2031。如果擋板支架2005將被模制，微小斜度(未示出)可被提供在支架2005的表面上(例如，以使得擋板支架容易從注射模制機(jī)器取出)。示例性擋板支架2005的上游端2035具有以與L形板2003的上游支腿2007相同的角度AA傾斜的傾斜表面2037。L形板2003的上游支腿2007抵靠擋板支架2005的傾斜表面2037并且被其支承。L形板2003的下游支腿2009的側(cè)邊2039(圖15)被部分埋(例如被接收在槽中)在擋板支架2005中以將擋板2003固定在下游支腿2009基本從擋板支架2005的一邊跨到另一邊的位置。在該實施例中的下游支腿2009的下游邊緣2041形成基本垂直于擋板支架2057的縱向軸線的直線。在下游支腿2009的下游邊緣2041和擋板支架2005的內(nèi)部圓柱形表面2051之間具有間隙2049(圖14)。間隙2049提供由L形板2003的支腿2007、2009和擋板支架2003的內(nèi)部圓柱形表面2051限定的體積2053和噴嘴137的內(nèi)部體積2055的其余部分之間的連通。擋板支架2005優(yōu)選位于噴嘴內(nèi)，并且擋板支架2005的縱向軸線2057基選，示例性擋板2003轉(zhuǎn)動取向以4吏板2003的兩個支腿2007、2009的交線2015平行于穿過橢圓D的長軸延伸的線2059，如圖16中所示。但是，當(dāng)L形板2003的兩個支腿2007、2009的交線2015垂直于穿過橢圓D的長軸延伸的線2059(如圖17中所示)時，示例性擋板2001也能夠4艮好地發(fā)揮作用。另外，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，擋板可具有任何轉(zhuǎn)動取向。如圖12中所示，在該實施例中的樣本注射針157優(yōu)選在擋板2001的最上游部分2035的上游與其保持約0.25-1.0毫米的距離2061。優(yōu)選，樣本注射針157優(yōu)選在擋板2001的最上游部分2035的上游與其保持約0.55-0.65亳米的距離。擋板支架2005可以多種方式相對于噴嘴被固定在所需位置。參見圖14,擋板支架2005的下游端2067是階梯形的以使其在噴嘴137中安裝在更遠(yuǎn)的下游處。支架2005的階梯形下游端2067為圓形并且抵靠噴嘴137的橢圓形內(nèi)表面233。這樣，在噴嘴137的內(nèi)表面233和擋板支架2005之間的接觸基本^L限制于兩個點2069，如圖13中所示。一對O形圏2071在噴嘴137和流動主體133的螺紋突起149之間圍繞擋板支架2005(圖11-13)并且密封噴嘴系統(tǒng)IOI防止其泄漏。O形圏2071可由Viton⑧制成，或者由任何其它類似的材料制成。當(dāng)噴嘴137被擰在螺紋突起149上時，兩個O形圏2071被壓縮以提供流體密封。在該實施例中使用兩個0形圏2071，因為由于擋板支架2005的長度2027而4吏得一個O形圏不能,皮壓縮在噴嘴137和流動主體133之間的空間內(nèi)。在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的基礎(chǔ)上，任何數(shù)量的O形圏或者不同類型的密封可被使用，只要O形圏的數(shù)量和其它類型的密封被選擇以便當(dāng)噴嘴137被擰在流動主體133上時具有流體密封即可。這將取決于多個因素，包括噴嘴137、流動主體133、擋板支架2005和O形圏2071的尺寸和形狀以及密封的類型。O形圏2071還有助于將擋板支架2005固定在所需位置。O形圏2071占據(jù)擋板支架2005周圍的空間，從而限制擋板支架2005在噴嘴137內(nèi)左右移動。在O形圏2071和擋板支架2005之間的摩擦力還抵抗擋板支架2005的轉(zhuǎn)動。如圖12中所示，當(dāng)噴嘴137被固定在流動主體133上時，在本實施例中，螺紋突起149相對于流動主體133的下游端2077采用凸臺的形式，下游端2077基本與擋板2001的最上游部分2035平齊。從而，使得擋板支架2005在流動主體133(在擋板支架2005的上游端2035處)和噴嘴137的內(nèi)表面233(在擋板支架2005的下游端2067處)之間被軸向限制。可使用其它保持機(jī)構(gòu)。在該圖中所示的實施例中，在螺紋突起149的下游端處的凸臺2079的內(nèi)徑(圖12)基本與擋板支架2005的內(nèi)徑2031相等。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，盡管具有擋板2001，但通過噴嘴系統(tǒng)101的流仍然保持層流，這是因為流體流過的小的橫截區(qū)域?qū)τ谒隽鳟a(chǎn)生低雷諾數(shù)。如圖ll中所示，擋板使得芯流189和鞘流191偏離噴嘴137的中心縱向軸線2017并且朝向噴嘴137的內(nèi)表面233偏轉(zhuǎn)。在一個實施例中，當(dāng)芯流189在第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域259和第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域261之間的過渡部分之間通過時，芯流189還很靠近噴嘴137的內(nèi)表面233流動。但是，鞘流體流191的一部分2081保持在芯流189和噴嘴137的內(nèi)表面233之間，因此在芯流189中的顆粒實際上不沖擊或者接觸噴嘴137的內(nèi)表面233。在噴嘴137的更遠(yuǎn)下游，液體動力將芯流189朝向噴嘴137的中心推回(例如，與噴嘴137的縱向軸線2017對準(zhǔn))。參見圖18A-18E，擋板2001改變形狀和減小噴嘴137中的流動橫截區(qū)域的尺寸。(為了清楚起見，圖18A-18E未示出擋板下游的任何噴嘴結(jié)構(gòu)。在圖18A-18E的每一個中的流動區(qū)域用粗體描繪輪廓以清楚示出)。在擋板2001上游(圖18A)，流動橫截區(qū)域2087基本為圓形或者橢圓形。在擋板2001的上游端2035，流動區(qū)域開始從圓形變化到在擋板2003的支腿2007、2009的交線2015處的基本為半圓形的形狀2089(圖1B),盡管其它形狀可是適合的。橫截流動區(qū)域2089小于擋板上游的流動區(qū)域2087。圖18C示出當(dāng)流體流過擋板支架2005的一部分時的流動區(qū)域2091，圖18D示出在擋板2003的下游支腿2009的下游端2041的更遠(yuǎn)下游的流動區(qū)域2093?？梢浴芬姴斓?，由于擋板2003的下游支腿2009的角度定向，流動區(qū)域2093略微大于流動區(qū)域2091。在擋板2003下游(圖18E)的通過擋板的流動區(qū)域2094對應(yīng)于擋板支架2005的內(nèi)表面2051的形狀，它在所示實施例中是圓形的。(其它形狀可是適合的)。在擋板支架2005的下游，噴嘴137的扭轉(zhuǎn)區(qū)域259、261優(yōu)選提供上述扭力。如圖ll中所示，可以觀察的是，一個或者多個氣泡2095可被捕獲在L形板2003的下游支腿2009和擋板支架2005之間的體積2053中。另外，氣泡2095的一部分可延伸通過在下游支腿2009的邊緣2041和擋板支架2005之間的間隙2049。這才羊，氣泡2095可占據(jù)L形板2003的下游支腿2009下游的橫截流動區(qū)域的一部分，可能影響流體通過噴嘴137的流動。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，示例性擋板2001在具有和沒有氣泡2095的情況下都能很好工作。這樣，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，在不帶入任何氣泡的情況下，擋板可用于定向精細(xì)胞。圖19和20中示出另一個示例性取向擋板2097。擋板2097包括在上述取向噴嘴137中的平的基本為半圃形的擋板2099。擋板2099位于噴嘴137中在樣本導(dǎo)管157的下游并且基本垂直于噴嘴137的縱向軸線2017。擋板2099具有基本匹配噴嘴137的內(nèi)表面233的曲率的彎曲邊緣2101，從而在擋板2099的彎曲邊緣2101和噴嘴137的內(nèi)表面233之間沒有大的間隙。擋板2099還具有經(jīng)過噴嘴137的縱向軸線2017延伸一小段距離的直邊2103以使其基本與樣本導(dǎo)管157的外徑2109對準(zhǔn)。利用擋板2099在類似于以上參照L形擋板環(huán)形臺肩或者支架2107之間的壓縮形成的摩擦來使得擋板2099定位。如圖19中所示，通過偏轉(zhuǎn)流體流來操作取向擋板2099以使包含待取向的顆粒的芯流189沿著其流動路徑的一部分偏離噴嘴137的中心縱向軸線2017。例如，當(dāng)芯流189流過第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域259以及第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域261的至少一部分時可沿著偏離噴嘴137的中心縱向軸線2017的流動路徑引導(dǎo)芯流189。因此，顆粒(例如精細(xì)胞)經(jīng)受由扭轉(zhuǎn)區(qū)域259、261產(chǎn)生的扭力同時它們處于偏離噴嘴137的中心縱向軸線2017的位置。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，可在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的基礎(chǔ)上對上述示例性擋板2001、2009進(jìn)行大的改變。所需要的是，擋板被構(gòu)造以使得芯流189和鞘流191朝向噴嘴的內(nèi)表面偏轉(zhuǎn)或者使得芯流189和鞘流191流過尺寸和/或形狀發(fā)生改變的橫截面區(qū)域。另外，應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的基礎(chǔ)上，取向擋板結(jié)構(gòu)可與噴嘴整體形成或者與噴嘴和流動主體整體形成。偏置的樣本導(dǎo)管115可通過使得樣本導(dǎo)管157從其在噴嘴137的中心處的常規(guī)位置重新設(shè)置到一個偏置的位置可使得芯流189沿著偏離噴嘴137的中心縱向軸線2017的流動路徑被引導(dǎo)。例如，圖21示出具有偏置樣本導(dǎo)管157的一種示例性偏置樣本引導(dǎo)噴嘴系統(tǒng)2151。除上述內(nèi)容以外，噴嘴系統(tǒng)2151基本與圖4和圖5中所示的噴嘴系統(tǒng)101相同。最大的差異在于，樣本導(dǎo)管157已經(jīng)被移離噴嘴137的中心以使其不再與噴嘴的縱向軸線2017對準(zhǔn)。這樣，芯流189沿著偏離縱向軸線2017的流動路徑被引導(dǎo)到取向噴嘴137的扭轉(zhuǎn)區(qū)域259、261中。盡管圖21中所示的示例性噴嘴系統(tǒng)2151使用了上述示例性取向噴嘴137,可以預(yù)見到，偏置樣本導(dǎo)管157以可與不同取向的噴嘴或者非取向噴嘴結(jié)合使用以使得在芯流189中的顆粒定向。噴嘴安裝和調(diào)節(jié)利用噴嘴座331以一種選擇的取向和位置安裝流動主體133和噴嘴137。在一個實施例中(圖22)，座331包括多個級，包括分別沿著X和Y軸339、341提供流動主體133和噴嘴137的線性調(diào)節(jié)的第一和第二線性級333、337和圍繞對應(yīng)于流動主體133和噴嘴137的縱向軸線2017的Z軸345提供轉(zhuǎn)動調(diào)節(jié)的第三轉(zhuǎn)動級343。這些級333、337、343在設(shè)計上可是常規(guī)的，適合的級可在商業(yè)上得到，例如從NewportCorporationofIrvineCA獲得。特別是，第一線性運動級333包括安裝在框架349上的固定第一級元件(未示出)、可沿著X軸339在固定的第一級元件上滑動的可動第一級元件355以及用于精確地將可動第一級元件355移動到選擇的X軸線位置的致動器357(例如測微計)。第二線性運動級337包括安裝在可動第一級元件355上的固定第二級元件359、可沿著Y軸341在固定的第二級元件359上滑動的可動第二級元件361以及用于精確地將可動第二級元件361移動到選擇的X軸線位置的致動器363(例如測微計)。轉(zhuǎn)動(第三)級343包括安裝在可動第二級元件316上的固定的第三級元件365，轉(zhuǎn)動地安裝在固定的第三級元件365上以圍繞Z軸345轉(zhuǎn)動的可動的第三級元件371和用于精確地使得可動第三級元件371相對于Z軸345轉(zhuǎn)動到所選擇的角位置的致動器373(例如測微計)。利用這些級333、337、343提供的三軸調(diào)節(jié)使得噴嘴137和離開噴嘴孔103的流體流21相對于光學(xué)系統(tǒng)109精確定位。噴嘴137圍繞Z軸345轉(zhuǎn)動是特別有益的，這是因為它能夠使得離開噴嘴137的流21轉(zhuǎn)動以將被噴嘴137定向的細(xì)胞(例如，精細(xì)胞)帶到其中來自于光學(xué)系統(tǒng)109的光束25將落在細(xì)胞的所需表面上(例如，精子頭部205的平面207)的位置，如圖23中所示。其它噴嘴座可是適合的。例如，4軸噴嘴安裝系統(tǒng)也可被使用，提供沿著X、Y和Z軸的線性調(diào)節(jié)和沿著Z軸的轉(zhuǎn)動調(diào)節(jié)。另外，優(yōu)選使用一個或者多個具有自動對準(zhǔn)特征的級，諸如伺服或者步進(jìn)馬達(dá)控制微型平移級(例如，PolytechPI,Inc.of入111)11111，]\11€111經(jīng)311的部件號]\1-110.200)。在圖36中所示的實施例中，例如，噴嘴137取向以在基本向上的方向上引導(dǎo)包含待分析的流21。在流體流21的方向和水平方向之間的角度377優(yōu)選在5至85度的范圍內(nèi)，優(yōu)選在15至75度的范圍內(nèi)、優(yōu)選在30至65度的范圍內(nèi)、優(yōu)選在45至60度的范圍內(nèi)、優(yōu)選在50至55度的范圍內(nèi)。該取向的優(yōu)勢在于，被俘獲在噴嘴系統(tǒng)101中的任何空氣容易被去除。另外，在液滴33的收集之前流體流21的速度在重力作用下逐漸減小。相信液滴33的逐漸減速不會對分析的細(xì)胞產(chǎn)生壓力，對于精細(xì)胞，這可4吏得收集后的分揀精子的游動性較高。當(dāng)然，在本發(fā)明的其它實施例中，噴嘴101被定位以當(dāng)流體流21離開孔103時使流體流21具有基本向下的速度，這對于空氣噴射細(xì)胞計數(shù)器是常規(guī)的。非強(qiáng)制地，噴嘴系統(tǒng)101的部件，諸如流動主體133和噴嘴137，涂有不反射的不發(fā)射的材料(例如，當(dāng)經(jīng)受UV激光時不發(fā)光的陰暗油漆或者環(huán)氧樹脂)以減小可能導(dǎo)致信號噪聲或者對光學(xué)系統(tǒng)109產(chǎn)生其它不良影響的這些元件133、137的任何反射和/或發(fā)光。換能器和液滴形成在一個實施例中，用于將能量引入到流體流21中的換能器105包括包含固定在噴嘴系統(tǒng)101的流動主體133周圍的壓電元件(未示出)的套環(huán)379(圖3-5)。換能器是常規(guī)設(shè)計的，諸如從BeckmanCoulter,Inc.aspartNo.6858368得到的。換能器具有連接適合的聲能源的端子383以使得能量可以將使其在距離噴嘴137下游保持距離d的液滴分裂位置107處分裂成液滴33的頻率被輸送到流體流21(圖24)。流式細(xì)胞術(shù)領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，液滴形成的特征受到下列方程式l控制(V=f7J式l其中V是流21的速度；f是施加在通過噴嘴137的流體流21的頻率；以及X是"波長"或者液滴33之間的距離。流式細(xì)胞術(shù)的一個已知原理是，液滴33將以規(guī)則的形式形成，并且液滴33之間的距離是流21的直徑的4.54倍。由于流21靠近噴嘴137的直徑D對應(yīng)于噴嘴孔103在其下游端的直徑，因此可利用下列方程式2容易計算流21(和噴嘴137)必須^皮振動以形成液滴33的頻率(f=V/4.54D)式2換能器105可被操作以產(chǎn)生每秒30000-100000個液滴33。例如，換能器105可產(chǎn)生每秒50000-55000個液滴。假設(shè)頻率是每秒55000個周期(55kHz)，并且還假設(shè)在流21中的細(xì)胞濃度是這樣的，即，細(xì)胞以基本每秒55000個細(xì)胞的匹配流量離開噴嘴137，接著平均每一個液滴具有一個細(xì)胞。(實際上，一些液滴33將不包含細(xì)胞，一些將包含一個細(xì)胞，一些將包含多于一個細(xì)胞)。當(dāng)然，多種因素的任何一個可被被改變以改變該平均值，包括頻率(f)、流21(孔103)尺寸(D)和流21速度(V)的變化。實際上，這些因素應(yīng)該能夠在處理過程中減小施加在細(xì)胞上的應(yīng)力值，特別是對于保存游動性是重要的精細(xì)胞。分裂傳感器參見圖2，分裂傳感器389可用于確定流21開始形成自由液滴33的位置(例如，分裂位置107)。分裂位置107將根據(jù)包括流21的速度、流體的表面張力和換能器105的振幅的幾個因素改變。通過監(jiān)測分裂位置107，換能器105的振幅可被改變以使得分裂位置107保持在給定的范圍內(nèi)以使每一個液滴33分裂的時間可被微處理器131更精確地預(yù)測。這使得微處理器131精確地控制液滴33的電荷，這可通過選擇性地控制流21的電荷來完成。由于液滴33的電荷與就在液滴33形成之前的流21的電荷相同，因此微處理器131通過選擇性地對流21充電來控制液滴33的分揀，如下面描述的。概括地，分裂傳感器與在分裂位置被分裂成液滴的任何連續(xù)流體流結(jié)合使用。(在圖2的實施例中，分裂傳感器389位于噴嘴137和向外位置115的下游。)圖25中示意性地示出一個示例性分裂傳感器389。光源393位于流21的一側(cè)以在分裂位置107,皮保持的給定范圍內(nèi)照射流21。位于流21的另一側(cè)的線性光敏元件陣列395適于沿著基本平行于流21的軸線被取向。因此，光敏元件陣列395檢測穿過液滴33的來自于光源393的光和提供對應(yīng)于檢測光的輸出信號。輸出信號被處理以確定分裂位置107的位置。例如，輸出信號可被數(shù)字化并且被提供給處理器131以處理。或者，如圖25中所示，光源393可是LED或者其它產(chǎn)生可見光語的近紅外部分的光源。在液滴33之間穿過的光被透鏡401放大并且被引向8xl的線性光電二極管排395。每一光電二極管產(chǎn)生與照射在其上的光強(qiáng)度成正比的電流。該電流被供給到8個電流電壓運算放大器電路405。運算放大器的輸出電壓是耦合在8個跟蹤/保持放大器407中的AC。放大器所用的跟蹤/保持信號409來自于換能器105。跟蹤/保持放大器的輸出被供給到微處理器單元(MPU)391的A/D轉(zhuǎn)換器411中。MPU391計算的數(shù)值將被提供到系統(tǒng)控制微處理器131。系統(tǒng)控制微處理器131可使用查閱表和/或算法以在分裂位置107漂移和換能器105的電壓調(diào)節(jié)之間轉(zhuǎn)換?；蛘撸琈PU391的輸出可是諸如具有對應(yīng)于換能器105的振幅變化的振幅的DC電壓的模擬信號。DC電壓可被提供給驅(qū)動液滴換能器105的高壓放大器以改變振幅。因此，這樣一種處理器391將構(gòu)成用于接收光敏元件陣列119395的輸出信號并且提供對應(yīng)于分裂位置107的位置的位置信號的控制器。這樣一種處理器391還構(gòu)成用于接收表示液滴33的分裂位置107的位置的輸出信號以及作為分裂位置107的位置的函數(shù)改變換能器105的操作的控制器。或者，本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的是，攝像機(jī)和閃光燈可用于監(jiān)測和控制液滴分裂位置。這樣，如圖26-27中所示，攝像機(jī)系統(tǒng)412和閃光燈413可被提供以監(jiān)測分裂位置107。優(yōu)選將閃光燈413放置在障板414A(例如，具有縫隙形開口414B的蓋)后面以限制進(jìn)入光學(xué)系統(tǒng)109的由閃光燈413產(chǎn)生的光量(圖27)。外照射光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)109適于將電磁輻射束(例如激光束)25以束斑的形式聚焦在流體流21上，從而使得待分析的細(xì)胞穿過束斑。束25可是在光語的可見光或者紫外線部分中的激光，例如波長為350-700納米，^a其它波長也可使用。激光的波長可被選擇以使其能夠激發(fā)用于分析顆粒的特定的熒光染料。如果光學(xué)系統(tǒng)109用于分析利用Hoechst33342著色的精細(xì)胞，例如，波長可#皮選擇以在350-700納米的范圍內(nèi)。激光的功率輸出可在50和300mW之間改變。例如，可利用200mW的激光分析精細(xì)胞。參見圖28-34，系統(tǒng)109是一種包括具有縱向光學(xué)軸線419的儀器417的外照射系統(tǒng)415。如這里所用的，術(shù)語"外照射"指的是，其中來自于穿過束斑的細(xì)胞的至少一些熒光發(fā)射沿著與聚焦束25相同的軸線但相反的方向引導(dǎo)返回通過光學(xué)儀器的光學(xué)系統(tǒng)。這種類型的系統(tǒng)的優(yōu)點在于，與檢測前和側(cè)熒光和使用兩個或者多個光檢測器的常規(guī)系統(tǒng)不同，僅需要一組光學(xué)器件，僅包括一個光檢測器117。但是，應(yīng)該理解的是，盡管外照射系統(tǒng)是優(yōu)選的，但本發(fā)明的許多方面可被應(yīng)用而與所用的光學(xué)系統(tǒng)的類型無關(guān)。在一個實施例中，外照射儀器417包括支承多個光學(xué)元件的矩形底座429。下面利用具有相關(guān)尺寸、焦距的特定示例和部件標(biāo)號對這些光學(xué)元件進(jìn)行描述。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，該信息僅是舉例說明，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下可使用其它可選擇的光學(xué)元件。參見圖28-34,光學(xué)元件包括反射濾光器431,反射濾光器431反射來自于激光器或者弧光燈435的準(zhǔn)直光束25例如通過安裝在從底座429向上延伸的二向色腔室443的側(cè)壁441中的開口439中的調(diào)節(jié)透鏡組件437。在該特定實施例中，調(diào)節(jié)透鏡組件437包括卡環(huán)445、中性密度濾光片447、柱面透鏡449、透鏡支座455和防松螺母457。柱面透鏡449將一維發(fā)散性引入到束25中并且將其引向能夠使得束形成所需橫截面形狀459的光學(xué)元件(下面描述的)，優(yōu)選基本為橢圓形。例如，柱面透鏡449可是焦距為16毫米的平凸透鏡。束擴(kuò)展器(未示出)也可被安裝在儀器417中以對橢圓形束斑459的形狀進(jìn)行調(diào)節(jié)。利用夾子461將反射濾光器431安裝在濾光器支架463的具有角度的面465上，濾光器支架463中具有開口467以使得束25離開濾光器431朝向儀器417的光學(xué)器件反射。支架463固定在線性級469上，線性級469可沿著X軸線471相對于固定在底座429上的懸臂梁473和二向色腔室443移動，可利用適合的裝置475(例如測微計)使得級469移動以使得支架463和反射濾光器431精確地定位，從而在適合的位置處將束25反射到儀器417中。二向性濾光器477被夾子479固定在安裝于二向色腔室443中的框架485上并且用于沿著軸線489在向前的方向487上反射成形光束25，在該特定實施例中，軸線489對應(yīng)于該儀器的縱向光學(xué)軸線419。束25穿過聚焦透鏡組件491，聚焦透鏡組件491將束25以具有上述基本橢圓形459(圖6)的束斑聚焦在流體流21上，并且橢圓的長軸基本垂直于流21的流動方向227延伸。當(dāng)每一個細(xì)胞通過束斑459時，細(xì)胞中的熒光染料(或者其它報告劑)被刺激以發(fā)出熒光31(圖23)。對于著色有DNA選擇性熒光染料的精細(xì)胞，X細(xì)胞具有比Y細(xì)胞多的DNA，包括更多的熒光染料，并且發(fā)出比Y細(xì)胞強(qiáng)的信號(例如3.8%)，這提供了識別和分揀細(xì)胞的基礎(chǔ)，如將描述的。在一個實施例中，聚焦透鏡組件491包括安裝在二向色腔室443的前壁505中的開口503中的物鏡適配器501、調(diào)焦鏡筒507、一對透鏡座筒509和其透鏡511，透鏡可是從OrielCorporation得到的部件號為41209的直徑為12.5毫米以及焦距為16毫米的平凸透鏡，并且具有適于波長在340-550納米的范圍內(nèi)的光的防反射涂層。透鏡511可由石英玻璃制成。其它的聚焦透鏡也是適合的，諸如無限調(diào)整熒光顯微鏡物鏡。聚焦透鏡組件491具有常規(guī)收縮式焦點調(diào)節(jié)515以將橢圓形束斑459聚焦在流21的芯189上。(由于斯托克斯頻移，比入射光的波長長)。一些熒光發(fā)射31沿著入射束軸線在向后方向513上被傳輸回到通過收集和校準(zhǔn)熒光發(fā)射31的聚焦透鏡511。準(zhǔn)直的熒光發(fā)射517在向后的方向上從透鏡511傳送到二向色濾光器477，二向色濾光器477傳送熒光發(fā)射517。例如，二向色濾光器477可是從OmegaOptical得到的部件號為XF2001，400DCLP的濾光器。光學(xué)系統(tǒng)415包括沿著儀器417的光學(xué)軸線419位于二向色濾光器477后面的濾光系統(tǒng)519。在一個實施例中，濾光系統(tǒng)519包括在安裝于二向色腔室443的后壁527中的開口525中的支架523中的發(fā)射濾光器521。發(fā)射濾光器521衰減通過二向色濾光器477傳輸?shù)娜魏渭す馍⑸浠蛘咂渌幌Ｍ碾姶泡椛?。例如并且非限定性的，發(fā)射濾光器521可是適于傳輸大于卯％的波長大于480nm的光的薄膜寬帶濾光器，如從OmegaOptical得到的部件號為XF3097的濾光器。調(diào)準(zhǔn)薄膜組件529沿著光學(xué)軸線419向后與發(fā)射濾光器分隔。該組件包括可在平行于儀器417的縱向光學(xué)軸線419的底座429的縱向延伸的導(dǎo)軌533上移動的滑塊531、固定在滑塊531上的濾光器支架535、薄膜濾光器元件539和用于以相對于儀器417的光學(xué)軸線419成一定角度將薄膜濾光器元件539固定在濾光器支架535上的夾子541。薄膜濾光器元件539具有與二向色濾光器477相同的厚度并且用于將準(zhǔn)直的熒光發(fā)射517傳送回到儀器417的光學(xué)軸線419上。在導(dǎo)軌533的相對側(cè)面上的通過在底座429中的平行狹槽547向上延伸的緊固件545沿著光學(xué)軸線419在所需位置處將滑塊531固定在底座429上。被安裝在框架553中的支架551固定的非球面透鏡549在調(diào)準(zhǔn)薄膜組件529后面并且與其保持一定間隔，所述框架553還可在導(dǎo)軌533上滑動并且被適合的緊固件557固定在所選擇的位置處。非球面透鏡549122將準(zhǔn)直的熒光發(fā)射517聚焦在空間濾光器559上，空間濾光器559濾出來自于源的反射或者發(fā)射而不是來自于待分析的細(xì)胞的反射或者發(fā)射。非球面透鏡549例如可是從OrielCorporation得到的直徑為12.5毫米以及焦距為15毫米的非球面透鏡。透鏡549優(yōu)選具有適于可見光發(fā)射波長的防反射涂層，但由進(jìn)一步衰減激光散射的材料(例如，璲石玻璃)制成。如圖34中所示，在一個實施例中，空間濾光器559包括;故安裝在儀器417的底座429上的框架563以可拆卸的方式固定的一對孔板561。每一個板561中具有縫隙567、571，一個縫隙567優(yōu)選基本是垂直的，而另一個571優(yōu)選是水平的，該布置是這樣的，即，使得縫隙567、571相交以形成孔573。在一個實施例中，孔573的形狀基本為矩形并且具有100微米的垂直尺寸575和500微米的水平尺寸577?？?73的尺寸和形狀可改變(甚至可通過改變孔板被調(diào)節(jié))，只要它用于去除反射和來自于除收集量579以外的任何源的光即可。固定孔板561的框架563優(yōu)選具有兩個部分，即，可在底座429的導(dǎo)軌533上滑動并且被緊固件587固定在選擇位置的板支架583以及用于使得孔板461定位在板支架583上的襯背元件589。在一個實施例中，空間濾光器559中的孔573的較小(垂直)尺寸575的尺寸適于(或者被調(diào)整)能夠利用"縫隙掃描"技術(shù)評估細(xì)胞。該技術(shù)在本說明書中的"聚焦束斑"部分中5f皮詳細(xì)描述。圖35中示出外照射光學(xué)系統(tǒng)的另一個實施例450。該實施例與圖28-34中所示的實施例基本相同，不同之處如下面描述的。一個明顯的差異是，二向色濾光器477^L不同的二向色濾光器451代替，二向色濾光器451傳送(而不是反射)照射束25并且反射(而不是傳送)熒光發(fā)射31。另外，由于熒光發(fā)射31被二向色濾光器451反射而不是,皮傳送，因此無需在外照射光學(xué)系統(tǒng)450的該實施例中的校準(zhǔn)薄膜539。這樣，外照射系統(tǒng)450僅是關(guān)于在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)如果需要的話可如何重新布置光學(xué)系統(tǒng)的一個示例。另外，柱面透鏡449安裝在可調(diào)節(jié)的安裝組件449A上。安裝組件449A使得柱面透鏡449在垂直于照射束25的平面中進(jìn)行兩軸平移?？伤砷_的緊固件(例如，螺釘(未示出))穿過狹槽形孔449B延伸(圖35上僅可以看到其中一個)。緊固件的^^開使得透鏡449在垂直于束25的第一方向上平移。類似的緊固件(未示出)穿過狹槽形孔449C延伸，使得透鏡449在垂直第一方向的第二方向上平移。這使得柱面透鏡449和束25的相對位置能夠微調(diào)以使束25和透鏡449的相交部分可穿過透鏡449的表面移動，從而使得由柱面透鏡449提供的聚焦的變化很小。在透鏡449處于所需位置后，緊固件可被緊固以將其固定在那里。光檢測器穿過空間濾光器559的發(fā)射的熒光落在光檢測器117上，光檢測器117在外照射儀器417的后部被緊固在可在底座429的導(dǎo)軌533上的滑動的安裝板591上并且可被緊固件595固定在固定位置上(圖32)。光檢測器117檢測如下面詳細(xì)描述的。光檢測器117可是一種常規(guī)的裝置，如從Hammamtsu得到的光檢測器。光檢測器117優(yōu)選包括前置放大器和使得外照射系統(tǒng)產(chǎn)生發(fā)射強(qiáng)度對于被分析的特定著色細(xì)胞為最佳的PMT增益。一般地，當(dāng)200至2000伏的電壓被提供給真空管時，PMT增益為最佳。例如在檢測Hoechst33342的熒光發(fā)射的情況下，當(dāng)400至800伏的電壓被提供給真空管時，PMT增益為最佳。一個特別優(yōu)選的光檢測器包括光語范圍為185-830納米(530納米峰值)、O.OlmA的最大平均陽極電流、通常為70mA/W的陰極輻射靈敏度、140nA/lm的陰極光靈敏度、300A/lm的陽極光靈敏度、lnA(通常為O.lnA)的最大陽極暗電流和1.4納秒的上升時間的PMT。該PMT是顯示大于37MHz的平坦增益并且在50Q的負(fù)載具有1V的峰值輸出以及小于400納秒的恢復(fù)時間的DC耦合放大器。優(yōu)選，該放大器還能夠在不使信號噪聲比減小到小于800dB的情況下進(jìn)行高壓調(diào)節(jié)以補(bǔ)償PMT效率變化。束入射角圖36示意性地示出光束和流體流的相交部分的一個所需取向。應(yīng)該注意幾點。如圖所示，光束25在位置115處聚焦在流21上，所迷位置115與噴嘴137的排出孑U03僅保持短的距離605，優(yōu)選小于1.0毫米，甚至在噴嘴137內(nèi)，以使細(xì)胞在穿過斑459時仍然基本保持所需取向，如前面所述的。這對于在流體流21中移動的細(xì)胞(包括精細(xì)胞)是特別重要的。應(yīng)該注意的另一點是，本實施例的束25可沿著以入射角A與流體流21相交的束軸線60W皮引向流體流21，從流21的一側(cè)觀察，入射角A相對于流體流21的縱向軸線上傾斜的(偏離卯度)(見圖36)。當(dāng)分揀某些顆粒時，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，可通過以非零的入射角照射流21獲得不同類型的顆粒的更好識別。例如，優(yōu)選以在5至45度的范圍內(nèi)的入射角A照射精子核，優(yōu)選在15至30度的范圍內(nèi)、優(yōu)選在18至24度的范圍內(nèi)。當(dāng)光束25基本垂直于流體流21時(即，當(dāng)角度A為O時)，其它顆粒(例如，活精細(xì)胞)更容易詢問。這樣，可以預(yù)見的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，角度A可為任何角度。角度A的適當(dāng)選擇能夠提高在某些顆粒中的信號噪聲識別，并且從而基于那些顆粒的不同特征(例如，具有X和Y染色體精細(xì)胞的精子核)可以更精確地進(jìn)行識別。該提高可能是由于多個因素造成的，包括進(jìn)入聚焦透鏡511的激光散射減小。由于聚焦束斑459優(yōu)選寬于流21，在束25和流21的相交部分115處產(chǎn)生不同的圖案。當(dāng)角度A大于12度時，反射的衍射圖樣不落在透鏡511上。另一個因素可能是，傾斜角A使得束25非?？拷鼑娮炜?03聚焦，以使噴嘴主體139不干涉透鏡511。相關(guān)地，細(xì)胞靠近噴嘴137更均勻的排列，從而束斑459靠近噴嘴137聚焦產(chǎn)生提高的信號。另外，以傾斜角A提供給透鏡511(束25)的細(xì)胞的較多的"頭部相對"型面減小由于細(xì)胞的任何未對準(zhǔn)(unaligned)導(dǎo)致的總熒光強(qiáng)度的變化。在這點上，對于精細(xì)胞，束25優(yōu)選落在每一個精細(xì)胞201的其中一個寬面207上，如上所述，并且噴嘴101和光學(xué)系統(tǒng)109,皮i殳置以達(dá)到該結(jié)果。盡管傾斜的入射角A被認(rèn)為對分揀一些顆粒是有益的，但可以預(yù)見的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，在束軸線和流之間的相交角度可為90度或者任何傾斜角度。還可以預(yù)見的是，最佳入射角可根據(jù)被分析的特定顆粒的性能大大改變。聚焦束斑參見圖6，所示的一個實施例的聚焦束斑的形狀基本為橢圓形(卵形)459，它具有沿著基本以相對于流體流動方向227的直角延伸的長軸的長度L1和沿著基本平行于流體流動方向227延伸的短軸的寬度W1。在一個實施例中，寬度W1小于精細(xì)胞219的頭部的長度，優(yōu)選小于細(xì)胞的包含染色體DNA物質(zhì)的區(qū)域225的長度，對于牛精細(xì)胞201，其長度小于l微米。對于具有直徑為60微米的鞘流體191和包含牛精細(xì)胞201的芯流189的流21，示例性長度L1為80微米，示例性寬度W1為1,5微米。通過將束斑459聚焦到寬度Wl，寬度W1小于精細(xì)胞201(或者被分析的任何其它細(xì)胞或者顆粒)的頭部205的長度，優(yōu)選小于精細(xì)胞201的頭部205的DNA區(qū)域225的直徑，可達(dá)到較大的信號分辨率，如"縫隙掃描"
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員應(yīng)該理解的是。這是一種使束25變窄使得寬度小于細(xì)胞的長度(即，細(xì)胞在流體流方向上的尺寸)從而當(dāng)細(xì)胞移動通過窄流時在細(xì)胞的長度上測量來自于細(xì)胞的光子發(fā)射31的技術(shù)，如后面描述的。這樣，可獲得關(guān)于沿著細(xì)胞的長度的結(jié)構(gòu)變化的信息，包括DNA材料?？p隙掃描技術(shù)還有助于識別"重合"細(xì)胞，即重疊或者挨在一起的細(xì)胞。如上所述，也可通過^L置空間濾光器559的孔573以具有垂直尺寸575來實現(xiàn)縫隙掃描以使從細(xì)胞發(fā)射的僅對應(yīng)于在流體流方向上的細(xì)胞長度的一部分的一部分光通過所述孔達(dá)到光檢測器117。另外，可通過調(diào)節(jié)束寬度和/或空間濾光器的孔的尺寸以使得它們共同起作用提供形狀適合縫隙掃描的束斑，從而^f吏得信號分辨率達(dá)到最佳。調(diào)節(jié)束斑459的形狀的一種方式是通過改變?yōu)椴煌闹嫱哥R和/或?qū)鈱W(xué)系統(tǒng)109中的束擴(kuò)展器進(jìn)行調(diào)節(jié)。在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，其它任何使得束25成形以形成橢圓形束斑459的方法是可以預(yù)見的。其它形狀和尺寸的束斑也可械使用并且可以預(yù)見到這也落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。分揀系統(tǒng)圖2示出分揀系統(tǒng)119的一個示例性實施例。分揀系統(tǒng)119包括根據(jù)包含在液滴33中的顆粒的分類(例如，精細(xì)胞的X/Y染色體含量)對液滴33充電和/或不充電的靜電充電裝置627以及一對用于根據(jù)它們的電荷將液滴33分揀到不同的組123、125中的靜電充電偏轉(zhuǎn)板629。偏轉(zhuǎn)板629優(yōu)選涂有暗淡的低發(fā)射性涂層(例如，環(huán)氧樹脂或者油漆)以限制被偏轉(zhuǎn)板629反射或者發(fā)射的光?？衫萌魏芜m合的電源635為偏轉(zhuǎn)板629充電。優(yōu)選，兩個完全充電的偏轉(zhuǎn)板629之間的電勢在2000-4000伏的范圍內(nèi)。但是，在偏轉(zhuǎn)板629之間的電勢可為1000和6000伏之間的任何一個數(shù)值。充電裝置627包括充電元件631，充電元件631中具有開口633，流21在靠近液滴分裂位置107的一個位置處(例如，在5個液滴長度或者更近的位置)通過開口633。充電元件631優(yōu)選裝有有助于相對于液滴分裂位置107調(diào)節(jié)充電元件631的位置的機(jī)構(gòu)。例如，如圖26、27中所示，充電元件631和偏轉(zhuǎn)板629可與可調(diào)節(jié)的安裝組件5001相連，安裝組件5001使得充電元件631和偏轉(zhuǎn)板629相對于噴嘴系統(tǒng)101平移和傾斜調(diào)節(jié)。為了能夠沿著平行于流21的軸線5011平移，安裝組件5001包括被穿過板5003中的狹槽5009的可拆卸緊固件5007緊固在背襯5005上的板5003，狹槽5009的取向基本平行于軸線50U。為了能夠沿著垂直于流21的軸線5013平移，利用穿過第二調(diào)節(jié)板5015中的狹槽5019的可拆卸緊固件5017使得第二調(diào)節(jié)板5015被緊固在第一板5003上，狹槽5019的取向基本平行于軸線5013。充電板631和偏轉(zhuǎn)板629固定在第二調(diào)節(jié)板5015上。這樣，通過^Hf緊固件5007和/或5017,人們可在平行于流體流21的平面中相對于噴嘴系統(tǒng)101調(diào)節(jié)充電元件631和偏轉(zhuǎn)板的位置，接著緊固緊固件5007和/或5017以固定安裝組件5001。為了能夠沿著垂直于頭兩個軸5011、5013的第三軸線平移，利用可調(diào)節(jié)的緊固件5023(例如，擰在固定支承件5021中的螺紋孔中的螺栓)使得背村5005緊固在固定的支承件5021上。在一個實施例中，每一個可調(diào)節(jié)的緊固件5023通過位于背襯5005和固定支承件5021之間的彈簧5025?？赏ㄟ^緊固或者杠、開各個緊固件5023調(diào)節(jié)任何彈簧5025的壓縮量。以相同的量調(diào)節(jié)所有彈簧5025的壓縮導(dǎo)致沿著第三軸線的平移?？赏ㄟ^改變一個或者多個彈簧5025相對于一個或者多個其它彈簧5025的相對壓縮使得安裝組件5001實質(zhì)上可在任何方向上傾斜。在該實施例中，充電元件631和偏轉(zhuǎn)板629的相對位置相互之間保持固定，這是由于它們都被固定在同一個調(diào)節(jié)板5015上。這防止安裝組件5001的調(diào)節(jié)影響充電元件631相對于偏轉(zhuǎn)板629的定位。充電元件631在處理器131的控制下與適合的電路(例如卯伏選擇性充電電路)相連并且與用于為充電元件631提供電荷的電源相連。該電路用于就在分裂位置107處形成液滴33之前根據(jù)液滴33是否包含具有所需特征的顆粒(例如，至少一個活的X染色體精細(xì)胞)來對流21充電或者不充電。充電元件631靜電地位于流21附近或者由流21形成的液滴33附近以相對于流21的靜電極性提供電參考。在液滴33從流21分裂時，液滴33帶有與流21相同的電荷。充電的或者未充電的液滴33接著在偏轉(zhuǎn)板629之間通過并且通過充填在收集系統(tǒng)2201的收集容器2207中而被分揀。盡管分揀產(chǎn)生了在圖2中的兩個液滴組或者群組123、125，但顆?？杀环蛛x成通過將不同的電荷放置在各個組中的液滴33上以及提供適合數(shù)量的收集容器而分揀的從1到N的任何數(shù)量的群組，每一個收集容器的位置適于收集不同的液滴群組。自動液滴延遲校準(zhǔn)在上述的分揀系統(tǒng)119中，處理器131必須評估顆粒從詢問位置115移動到液滴分裂位置107所需的時間以當(dāng)在液滴分裂位置107處顆粒在最后一個附著的液滴33中時需要被施加到包含該顆粒的液滴33的電荷(或者缺少電荷)被施加。如果處理器131所用的延遲設(shè)定是錯的，根據(jù)液滴33的含量，液滴33將沒有被分揀。類似地，如果電荷施加到液滴33與液滴33的形成略微不同步，那么這可對分揀造成不良的影響，這是因為沒有一個液滴33將被完全充電并且假設(shè)具有中性電荷的液滴33將帶有小的正或者負(fù)的電荷。這將改變液滴33通過在偏轉(zhuǎn)板629之間的電場的路徑。檢驗處理器131的最佳方式是利用適合的延遲設(shè)定或者調(diào)節(jié)液滴延遲設(shè)定(即，校準(zhǔn)系統(tǒng)的9個液滴延遲設(shè)定)分揀多個液滴33和檢查結(jié)果。通過遞增地改變延遲設(shè)定和監(jiān)測結(jié)果，人們可選擇最佳的延遲設(shè)定。通常，該分揀校準(zhǔn)是人工實現(xiàn)的。最近，自動校準(zhǔn)系統(tǒng)已經(jīng)祐i殳計以對分揀的液滴流中的液滴含量采樣或者檢查并且在沒有人為千涉的情況下自動地調(diào)節(jié)延遲設(shè)定。例如，美國專利US6，372，506(Norton)和US5，643，796(vandenEngh)都披露了自動分揀校準(zhǔn)系統(tǒng)，這兩篇專利文獻(xiàn)在這里合并參考。這些系統(tǒng)的聲稱的優(yōu)點是，它們節(jié)省勞動力并且能夠在整個分揀過程中而不是僅在開始設(shè)定時檢驗延遲設(shè)定。缺點是它們是笨重的并且不必要地占據(jù)有價值的空間。(i)外照射傳感器參見圖37，本發(fā)明的用于熒光激發(fā)液滴分揀細(xì)胞計數(shù)系統(tǒng)的自動連續(xù)校準(zhǔn)系統(tǒng)4201包括位置適于檢測液滴33的含量以檢驗用于液滴充電的延遲設(shè)定的一個或者多個外照射傳感器4203。參見圖38,每一個外照射傳感器包括光源(未示出)、光纖光纜4205、二向色濾光器4207、透鏡系統(tǒng)4209、光檢測器4213和控制系統(tǒng)。在一個實施例中，處理器131用作控制系統(tǒng)，但其它處理器或者控制器也可-皮代替使用。光源可是專用于自動校準(zhǔn)系統(tǒng)4201的低功率固態(tài)激光器。或者，可使用束分裂器(未示出)以將用于詢問流體流21中的顆粒的束25中的一部分能量(例如，約5%)轉(zhuǎn)移到一個或者多個外照射傳感器4203。類似地，光纖光纜4209可位于束擋塊4215中(圖26)以在其通過詢問位置115后從束25收集光。來自于光源的光必須包括波長能夠激發(fā)被分揀的顆粒中的熒光劑分子的光，從而產(chǎn)生從顆粒的熒光發(fā)射4211。例如，如果利用Hoechst33342對顆粒著色，光源可提供波長為350納米、407納米或者^f壬何其它能夠激發(fā)Hoechst33342分子的波長的光。光纖光纜4205從光源延伸到詢問位置115的下游的一個位置。例如，在該實施例中，光纖光纜4205通向與移動通過在偏轉(zhuǎn)板629之間的電場的液滴流的其中一個的軌跡相鄰的位置。二向色濾光器4207傳送具有由光纖光纜4205傳導(dǎo)的光的光鐠特征的光，但反射具有熒光發(fā)射4211的光語特征的光。這樣，二向色濾光器4207可具有與前面關(guān)于外照射光學(xué)^f義器417描述的二向色濾光器477相同的技術(shù)要求?；趥鞲衅?203和液滴33之間的預(yù)期的距離選擇透鏡系統(tǒng)4209的焦距以使得每一個傳感器4203的照射/檢測量基本等于液滴33的量。參見圖37中所示的實施例，外照射傳感器4203位于三個分揀的液滴流4225、4227、4229的每一個的軌跡附近以檢測在各個流中的液滴33含量。細(xì)胞計數(shù)系統(tǒng)9包括用于安裝兩個偏轉(zhuǎn)板629的電絕緣支承4221。支承件具有多個孔4223，一個靠近每一個分揀的液滴流4225、4227、4229的軌跡。外照射傳感器4203位于每一個孔4223處以通過各個孔4223觀察在其中一個液滴流4225、4227、4229中的液滴33。該緊湊的構(gòu)造占據(jù)很少的空間并且避開校準(zhǔn)系統(tǒng)4201的部件，能夠更好地接觸細(xì)胞計數(shù)系統(tǒng)9的其它部件。如果包含熒光劑顆粒的液滴通過傳感器4203的照射/檢測量，這導(dǎo)致熒光發(fā)射4211的閃光，其中一些被透鏡系統(tǒng)4209收集并且從二向色濾光器4207反射到光檢測器4213。來自于光檢測器4213的信號被提供到處理器131?；趶墓鈾z測器4213接收的信號，處理器131可確定在每一個分揀的液滴流4225、4227、4229中的液滴33的含量。如果當(dāng)處理器131期待包含熒光劑顆粒的液滴33通過傳感器4203時傳感器4203不能檢測熒光發(fā)射4211的閃光，那么處理器131可利用該信息調(diào)節(jié)延遲設(shè)定或者調(diào)節(jié)液滴分裂位置107的位置。同樣，如果當(dāng)處理器131不期待通過傳感器4203的包含顆粒的液滴33時傳感器4203檢測熒光發(fā)射4211,那么處理器131可進(jìn)行調(diào)節(jié)。另外，傳感器可比較來自于分揀的液滴流4225、4227、4229的熒光劑發(fā)射4211的相對頻率以看被檢測的熒光發(fā)射4211的頻率是否與所期待的頻率相符。處理器131還可調(diào)節(jié)被施加在充電元件631上的電荷幅值以增大或者減小分揀的流4225、4229偏轉(zhuǎn)以使得被檢測的熒光發(fā)射4211的強(qiáng)度達(dá)到最大的量。這將保持被檢測的液滴流4225、4229的軌跡的調(diào)準(zhǔn)，從而使得液滴直接通過外照射傳感器的收集量。因為傳感器4203130200910146867.7的位置適于在流4225、4227、4225移動通過偏轉(zhuǎn)板629之間的電場時》見察它們，如果它觀察到流4225、4227、4229在偏轉(zhuǎn)板下游的自由下落區(qū)域中，那么校準(zhǔn)系統(tǒng)具有比其短的響應(yīng)時間。(ii)空液滴測試流可通過產(chǎn)生和監(jiān)測基本僅包含空液滴33的校準(zhǔn)測試流來布置校準(zhǔn)質(zhì)量的一個敏感性指示。參見圖37中所示的分揀校準(zhǔn)系統(tǒng)4201,包含所需顆粒的液滴33被分揀到流4225中并且包含任何其它顆粒的液滴33和大部分空液滴33被分揀到流4229中(即，廢物流)。通過將中性電荷提供給空液滴33的至少一部分(例如，每10個中的1個)產(chǎn)生測試流4227?；陬w凈立在詢問位置115的達(dá)到時間和在流體流21中的評估的液滴形成邊界，對于常規(guī)的分揀目的被認(rèn)為是"空的"的許多液滴33實際上是包含顆粒的液滴33的可能性低的液滴33。這些"空的"液滴不應(yīng)該被分揀到測試流4227中，這是因為這不可避免地導(dǎo)致一些顆粒在測試流4227中的檢測。相反，對于測試流4227,處理器131應(yīng)該僅選擇處理器131認(rèn)為具有包含顆粒的基本為零的可能性的液滴33以形成基本沒有顆粒的測試流4227。包含細(xì)胞的任何隨機(jī)選擇液滴33的可能性是已知的并且約是平均細(xì)胞分析率除以液滴產(chǎn)生率。這意味著，通過監(jiān)測測試流4227中的錯分揀的比率能夠評估匹配液滴33的形成的相所需的液滴充電的相關(guān)系的部分調(diào)節(jié)。例如，處理器131可選擇液滴，它估計包含顆粒的可能性為15%或者更低、包含顆粒的可能性為10%或者更低、包含顆粒的可能性為5%或者更低、包含顆粒的可能性為1%或者更低、包含顆粒的可能性為0.1%或者更低、包含顆粒的可能性為0.01%或者更低、包含顆粒的可能性為0.001%或者更低、包含顆粒的可能性為0.0001%或者更低?？苫诜謷俣?、雜質(zhì)的容限或者其它分揀參數(shù)選擇基本為零的可能性的概率截止點，該截止點包括液滴將包括用于高速分揀的顆?；蛘弋?dāng)具有更大的雜質(zhì)的容限時的較高可能性。如通過在測試流4227中對多于包含顆粒的液滴33的閾值數(shù)量的檢測所指示的，處理器131產(chǎn)生基本沒有無顆粒的測試流4227的失敗(即，包含顆粒的液滴33與液滴總數(shù)的比率適合用于為測試流4227選擇液滴33的概率截止點的測試流4227),是非最佳分揀的明確指示并且促4吏處理器131調(diào)節(jié)液滴延遲設(shè)定。關(guān)于用于選擇測試流4227的液滴33的概率截止點和為測試流4227選擇的液滴33的總數(shù)確定閾值水平。理想地，可為測試流4227選擇一些液滴33，即使在流體流21中的一個或者多個顆粒相對接近用于各個液滴33的評估的液滴形成邊界以使得系統(tǒng)4201對略微非最佳液滴延遲設(shè)定更敏感。當(dāng)然，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，分揀校準(zhǔn)系統(tǒng)可為測試流所選擇的液滴提供非中性電荷并且使得所述液滴偏轉(zhuǎn)。在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，流4225、4227、4229的相對順序也可被重新安排，盡管將測試流4227設(shè)置在廢物流4225和所需顆粒流4229之間(如實施例中所示)減小廢物流對分揀的樣本交叉污染的危險。另外，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，如果顆粒不發(fā)射熒光，不同的傳感器可用于檢測由測試流中的顆粒產(chǎn)生的任何散射光。(iii)分揀校準(zhǔn)系統(tǒng)的影響在本發(fā)明的一個實施例中，自動校準(zhǔn)系統(tǒng)4201能夠自動地確定和設(shè)定在液滴形成和液滴充電之間的相關(guān)系為最佳相的5%之內(nèi)(即，在+/-18度內(nèi))。在另一個實施例中，系統(tǒng)4201能夠自動地確定和i爻定相關(guān)系為最佳相的1%之內(nèi)(即，在+/-3.6度內(nèi))。在另一個實施例中，校準(zhǔn)系統(tǒng)4201能夠連續(xù)監(jiān)測高速液滴分揀系統(tǒng)并且自動將相關(guān)系保持在最佳相的IO%之內(nèi)(即，在+/-36度內(nèi))。在另一個實施例中，系統(tǒng)4201能夠連續(xù)監(jiān)測高速液滴分揀系統(tǒng)并且自動將相關(guān)系保持在最佳相的3%之內(nèi)(即，在+/-10.8度內(nèi))。分揀系統(tǒng)錯誤校正有時，液滴33偏離其正常軌跡并且撞擊充電元件631或者偏轉(zhuǎn)板629。如果一個或者多個液滴33撞擊充電元件631,充電元件631可不能正確地使液滴33充電。另夕卜，液滴33通過充電元件631的正常軌跡可被阻塞，使得更多的液滴33累積在充電元件631上。另外，如果偏離的液滴33撞擊偏轉(zhuǎn)板629,它們可扭曲或者中斷偏轉(zhuǎn)板629之間的電場線，從而改變分揀的液滴流123、125的軌跡。這樣，優(yōu)選具有碎屑去除系統(tǒng)以從充電元件631和/或偏轉(zhuǎn)板629去除碎屑。在一個實施例中，如圖26和27中所示，系統(tǒng)9包括用于充電元件631的碎屑去除系統(tǒng)5047和用于偏轉(zhuǎn)板629的碎屑去除系統(tǒng)5049。參見圖27，利用固定在可調(diào)節(jié)的安裝組件5001的板5015上的支承件5051使得充電元件631定位。真空通道5053(如陰影線所示)穿過支承件5051延伸到靠近充電元件631的開口5057。利用連接在支承件5051上的配件5058上的真空線5055^f吏得真空通道5053與適合的真空源(未示出)相連。提供適合的控制器以選擇性地在通道5053中施加真空，從而將任何不需要的材料(例如，偏離的液滴33)從充電元件631吸走并且恢復(fù)充電元件631的正常功能。相關(guān)地，如圖27中所示，緊固在安裝組件5001上的歧管5061中具有空氣通道5063網(wǎng)絡(luò)(如陰影線所示)，空氣通道5063網(wǎng)絡(luò)通過空氣線5059和配件5065與壓縮空氣或者其它氣體源(未示出)相連。通道5063具有沿著每一個偏轉(zhuǎn)板629的一面5066設(shè)置的開口5064并且通道5063中通向開口5065的部分5067采用這樣的取向，即，使得通過歧管5061吹送的壓縮空氣將任何偏離的液滴33或者其它碎屑清離偏轉(zhuǎn)板629。從偏轉(zhuǎn)板629吹走的任何材料將撞擊蓋板(未示出)和排放到適合的廢物收集裝置(未示出)中。在一個實施例中，如果處理器或者其它傳感器確定偏離的液滴33已經(jīng)撞擊充電元件631或者偏轉(zhuǎn)板629,例如由上述分揀校準(zhǔn)系統(tǒng)所顯示的，處理器可自動地啟動錯誤校正程序或者模式，錯誤校正程序或者模式可包括為通道5053提供真空以從充電元件631吸走材料和/或輸送壓縮空氣通過通道5067以將材料吹離偏轉(zhuǎn)板629。在錯誤模式下的分揀樣本的保護(hù)1系統(tǒng)9的一個實施例還包括污染防止機(jī)構(gòu)4041(圖26)，污染防止機(jī)構(gòu)4041可由處理器131啟動以在分揀系統(tǒng)處于錯誤校正才莫式下時限制或者防止分揀樣本的污染。污染防止機(jī)構(gòu)包括能夠在保護(hù)位置(圖26所示)和非保護(hù)位置(未示出)之間選擇性地移動擺臂4045的氣動致動器4043。在保護(hù)位置，擺臂4045的端部4047覆蓋收集容器4033的開口，從而阻止收集容器4033收集液滴33。在非保護(hù)位置，收集容器4033不,iL^蓋。正常地，擺臂4045處于非保護(hù)位置，但在處理器131確定存在污染的危險時處理器131使得致動器4043將擺臂4045移動到保護(hù)位置(例如，噴嘴系統(tǒng)101堵塞、液滴分裂位置107變得不穩(wěn)定或者偏離的液滴33已經(jīng)撞擊充電元件631或者偏轉(zhuǎn)板629)。擺臂4045的端部4047為溜槽形以將由擺臂4045收集的任何流體排放到廢物容器4035中。流體輸送系統(tǒng)上述系統(tǒng)l能夠有效地生產(chǎn)被選擇的特征分揀的大量顆粒(例如，X精細(xì)胞)?？赏ㄟ^改變流體輸送系統(tǒng)15(圖2)將載流體17和鞘流體19輸送到噴嘴137的速度來提高或者降低生產(chǎn)率。在一個實施例中，流體輸送系統(tǒng)包括注射泵645,這樣一種泵的一個示例是從HamiltonCompany得到的MICROLAB⑧ModelPSD/3。泵645能夠以20nl/min的速度將載流體17輸送到噴嘴137。一般地，泵645應(yīng)該能夠在10-50nl/min的范圍內(nèi)的速度將樣本流體輸送到噴嘴137。利用流線647使得泵645與載流體17的供給源3相連，載流體17的供給源3可是包含一定量的待分析和分揀的材料的適合容器649。在待分析的顆粒的溫度是一個因素的情況下，例如對于精細(xì)胞，容器649的溫度可受到一個適合的溫度控制系統(tǒng)控制，諸如加熱/冷卻池(未示出)。注射泵645可移動通過吸入行程以從供給容器吸入載流體和通過排出行程以將載流體17通過供給線651分配到噴嘴系統(tǒng)101的注射針157。優(yōu)選在處理器131的控制下利用變速馬達(dá)(未示出)驅(qū)動泵645。例如，可利用步進(jìn)式馬達(dá)驅(qū)動泵645，步進(jìn)式馬達(dá)以選擇的可變速度操作以便以獲得所期望的生產(chǎn)量所需的速度將載流體17泵送到針159。其它類型的流體輸送系統(tǒng)可134被使用以代替注射泵。為了僅提供一個示例，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，可利用加壓氣體源對容器649加壓。另外，優(yōu)選使得線647、651盡可能短，這是因為線環(huán)境不利于可能在栽流體17中的敏感性細(xì)胞(例如，精細(xì)胞)的健康。鞘流體19的供給源7包括裝有適合體積的鞘流體19的第二容器661(例如圖2中的罐)，第二容器661通過其中具有控制閥173的供給線667與噴嘴系統(tǒng)101的流動主體133中的徑向孔173相連。在圖l的實施例中，鞘流體容器661被氣體壓力系統(tǒng)671加壓，氣體壓力系統(tǒng)671包括加壓氣體源675(例如，空氣或者其它氣體，諸如氮)，加壓氣體源675通過空氣線679與罐661連通，空氣線679中具有用于控制被供給到罐661的壓力的調(diào)節(jié)器681?？諝饩€679中的兩通閥683可在罐661和氣體源675之間建立連通的第一位置和使得罐661排氣的第二位置之間移動。氣體壓力調(diào)節(jié)器681是一種常規(guī)的調(diào)節(jié)器，優(yōu)選在處理器131的控制下。通過控制罐661的壓力，鞘流體19被輸送到流動主體133的壓力也可^皮控制。該壓力可在16至100psi的范圍內(nèi)，優(yōu)選在10至50psi的范圍內(nèi)，優(yōu)選在15至40psi的范圍內(nèi)、優(yōu)選在20至30psi的范圍內(nèi)。在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，可利用其它方式控制鞘流體19-皮輸送到流動主體133的壓力。在一個實施例中，如圖26中所示，流體輸送系統(tǒng)15包括鞘流體罐(未示出)和樣本臺4051。樣本臺包括適于裝樣本管4055的兩部分壓力容器4053。壓力容器的底部4057可相對于壓力容器4053的上部4059在可裝載或者卸載樣本管4055的打開位置(圖26所示)和關(guān)閉位置(未示出)之間上下移動，在所述關(guān)閉位置，壓力容器4053的兩部分4057、4059合在一起形成密封以容納用于將載流體17從樣本管4055泵送到噴嘴系統(tǒng)101的加壓氣體。當(dāng)壓力容器打開時，彈簧偏壓擺臂4071移動到用于將載流體17輸送到噴嘴系統(tǒng)101的線651下方的一個位置(也可見圖119中的標(biāo)號4071')。擺臂4071為溜槽形并且適于收集通過線651反沖回來的流體并且通過端口4073將反沖回來的流體排放到廢物容器。當(dāng)壓力容器4053從其打開位置移動到其關(guān)閉位置時，與壓力容器4053的底部4057相連的凸輪板4075抵抗其彈簧偏壓移動擺臂4071以清潔兩個部分4057和4059之間的區(qū)域并且使得壓力容器4053關(guān)閉。控制裝置參見圖2，微處理器131(或者其它數(shù)字或者模擬控制裝置和/或處理器，或者其結(jié)合)控制系統(tǒng)l的操作。如下面參照圖39描述的，；敞處理器可以一個系統(tǒng)控制處理器和用于控制信號處理的四個處理器的形式實現(xiàn)。或者，一些或者所有的功能可結(jié)合在一個或者多個處理器中。例如，可利用四個信號處理處理器中的一個來實現(xiàn)系統(tǒng)控制微處理器(見圖36)。另外，如下面所述的，可利用一個模擬電路(例如圖39中所示的模擬細(xì)胞分析器)或者模擬和數(shù)字電路的組合來實現(xiàn)信號處理。微處理器131響應(yīng)于從外照射系統(tǒng)415接收的輸入信號提供輸出信號以控制流體輸送系統(tǒng)15(下面所述)，響應(yīng)于從分裂傳感器389接收的輸入信號提供輸出信號以控制換能器105,以及響應(yīng)于從外照射系統(tǒng)415接收的輸入信號提供輸出信號以控制分揀系統(tǒng)119(下面所述)。微處理器131可將輸出信號提供給這里所述的細(xì)胞計數(shù)系統(tǒng)9的其它部件。另外，微處理器131可適于處理信息和實時提供輸出信號。概括地講，這里所用的術(shù)語"實時，，指的是處理器的操作與人類感知時間匹配的操作或者處理器131的操作速度匹配相關(guān)的物理或者外部處理的速度的操作。在一個含義上，術(shù)語"實時，，可表示在事件過去之前系統(tǒng)對事件作出反應(yīng)。一般地，來自于外照射系統(tǒng)415的電信號被A/D轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換成數(shù)字信息，A/D轉(zhuǎn)換器為微處理器131提供相應(yīng)的數(shù)字信息。響應(yīng)于該信息，微處理器131控制分揀系統(tǒng)119和流體輸送系統(tǒng)15，如下面描述的。外照射系統(tǒng)415的光檢測器117輸出的電信號是表示隨時間變化的模擬電壓信號，該隨時間變化的模擬電壓信號表示在細(xì)胞被激光束25照射時每一個細(xì)胞在任何時刻產(chǎn)生的發(fā)射熒光31的幅值。這樣，模擬信號(也被稱為模擬輸出)呈隨時間變化的波形脈沖497的形式，如圖52和53中所示。一般地，波形脈沖497被定義為包含一個或者多個脈沖或者一個脈沖的一些部分的變形或者變形的一部分。這樣，每一個波形脈沖497在任何時刻的幅值表示在細(xì)胞通過激光束25時每一個細(xì)胞在該時刻的光子發(fā)射31的相對速率。X染色體牛精細(xì)胞的DNA含量高于Y染色體牛精細(xì)胞(例如，約3.8%)。因此，被上述熒光著色劑標(biāo)記的活X細(xì)胞將產(chǎn)生不同于來自于其它任何標(biāo)記的細(xì)胞的脈沖的波形脈沖497。通過如下面所述的分析波形497(見信號處理、縫隙掃描和臨界效率差)，每一個細(xì)胞可被識別為X細(xì)胞或者沒有被識別為X細(xì)胞(X)。一般地，如這里所用的，X細(xì)胞指的是活X細(xì)胞，Y細(xì)胞指的是活Y細(xì)胞，X細(xì)胞指的是活Y細(xì)胞和可產(chǎn)生能夠檢測的熒光發(fā)射31但不能以相當(dāng)大的可能性被識別為活X細(xì)胞的細(xì)胞的組合。每一個波形脈沖497的時限表示每一個細(xì)胞在流21中的位置。由于通過噴嘴137被輸送的鞘流體19的速度保持恒定，以及由于噴嘴137和液滴分裂位置107之間的距離d(在圖25中)是已知的，因此每一個液滴33的位置是已知的并且在每一個液滴33內(nèi)的細(xì)胞(如果有的話)是已知的。這樣，微處理器131可計算每一個形成液滴通過充電套環(huán)631的時間并且可控制套環(huán)631的極性，從而控制液滴33是否被充電以被分揀系統(tǒng)119的充電元件631偏轉(zhuǎn)。由于微處理器131知道液滴形成速度并且識別液滴內(nèi)的細(xì)胞為X或者X，因此微處理器131知道每一個液滴33的細(xì)胞含量并且留意(或者計數(shù))在每一個群組123、125中的細(xì)胞數(shù)。根據(jù)分揀策略(下面所述的)，微處理器131確定液滴33被充電以偏轉(zhuǎn)或者液滴33不被充電以使它們不偏轉(zhuǎn)。信號處理A.數(shù)字釆樣介紹如上所述，激光束25和顆粒之間的相互作用產(chǎn)生被光學(xué)系統(tǒng)109的收集透鏡俘獲并且被輸送到光檢測器117的"脈沖"光子發(fā)射31(例如焚光發(fā)射)。光檢測器117在任何時刻將光子能量轉(zhuǎn)換成幅值隨時間變化的模擬電壓輸出。該輸出是包含可用于在顆粒群組之間識別的許多特征的一系列波形脈沖497(圖43和44)。這些特征包括總光子發(fā)射、作為顆粒通過激光束空間傳送的函數(shù)的光子發(fā)射速度、在傳送過程中的最大光子發(fā)射速度、在傳送過程中的平均光子發(fā)射速度和傳送所需的時間。激光束幾何形狀459、顆粒尺寸、通過顆粒體積的發(fā)射源的分步和顆粒速度確定波形脈沖497的頻語。對于上述牛精子所用的系統(tǒng)l，已經(jīng)確定每一個細(xì)胞201在800納秒和1200納秒之間的時間內(nèi)產(chǎn)生一個波形脈沖497。還已經(jīng)確定，作為頻率的一個函數(shù)，在波形脈沖497中的大于97。/。的功率以低于30MHz的頻率被輸送。該頻鐠將在后面描述，它涉及尼奎斯特采樣理論。將這些波形脈沖497聯(lián)系在一起形成來自于光檢測器117的輸出信號701,它是表示顆粒流通過該設(shè)備的傳送的連續(xù)、隨時間變化的信號。除了用于在群組中識別的各個脈沖的特征以外，隨時間變化的信號提供了關(guān)于通過該設(shè)備的各個顆粒之間的相對間隔(時間和位置)和移動通過該設(shè)備的顆粒的相對速度的精確記錄。該精確時間、位置和速度記錄可與如圖44中所示的液滴產(chǎn)生時鐘信號703同步以確定顆粒是由液滴形成設(shè)備105形成的特定液滴33的組成部分。該信息可用作確定在一個液滴33中的所需要的和不需要的顆粒的"重合"或者存在情況。精確地確定在一個液滴33中的每一個顆粒的數(shù)量和分類的能力提供精確有效的分揀。圖72中所示的數(shù)字信號處理705可用于分析由來自于光檢測器117的同步釆樣輸出信號701所表示的熒光脈沖31的檢測。該處理可在利用如這里所述的指令和/或算法的脈沖分析軟件中來實現(xiàn)。光檢測器117的隨時間變化的模擬輸出信號701被提供給對其同步采樣的A/D(模擬/數(shù)字)轉(zhuǎn)換器689。同步采樣指的是產(chǎn)生對應(yīng)于模擬輸出的數(shù)字信息的采樣。同步采樣也被稱為連續(xù)采樣或者流獲得。如下面描述的，采樣率取決于模擬輸出的頻i普。轉(zhuǎn)換器689提供包括數(shù)字信息707的輸出，數(shù)字信息707被提供給微處理器131或者其它利用脈沖分析軟件分析數(shù)字信息707的數(shù)字分析裝置。一般地，脈沖分析軟件可包括數(shù)字脈沖檢測HH3、脈沖特征抽取HH4和脈沖識別HH7。B.采樣頻率以及信號頻譜來自于PMT117的信號輸出701被高速模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器689(ADC)俘獲，高速才莫擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器689(ADC)以105MHz的頻率連續(xù)對輸出701采樣。應(yīng)該理解的是，當(dāng)對隨時間變化的信號釆樣時，采樣頻率必須至少為被釆樣的信號中包含的最大頻率的兩倍。這被稱為尼套斯特采樣理論。因此，來自于PMT117的信號輸出701首先被輸送通過40MHz的低通濾波器854(見圖39)以確保包含在信號701中的最大頻率低于由采樣率所施加的52.5MHz限度。重要的是，注意到設(shè)備l的光學(xué)系統(tǒng)l、流體系統(tǒng)15和檢測系統(tǒng)已經(jīng)被調(diào)諧以產(chǎn)生適于以105MHz速度釆樣的最佳頻率特征的波形脈沖497。在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，釆樣率可在25至200MHz之間變化。C.脈沖處理在共享存儲器并且通過高速并4亍端口互連的四個(4)TigerSharcDSP處理器中進(jìn)行脈沖處理。如圖39中所示，四個處理器為l)接收來自于使得來自于光檢測器117的輸出信號701數(shù)字化的高速ADC689的數(shù)據(jù)的數(shù)據(jù)管理處理器863;2)檢測由數(shù)字信息表示的波形脈沖497的脈沖檢測處理器征抽取和識別處理器867;以及4)基于抽取的特征和識別確定每一個脈沖497的分揀分類的分揀處理器873，分揀處理器873確定對于相應(yīng)的細(xì)胞和液滴33的分揀判定并且與液滴形成105同步。一般地，處理器863、865、867、873完成一個任務(wù)并且設(shè)定一個"標(biāo)記，，以使同伴處理器知道具有可用于處理的數(shù)據(jù)。每一個處理器863、865、867、873相互獨立工作，使得總處理量達(dá)到最大，這是由于它們相互不中斷。這樣，任何處理器863、865、867、873可執(zhí)行任何功能并且一個或者多個處理器或者功能可被結(jié)合在一個處理器中或者分散到多個處理器。處理器863、865、867、873按照上述分類并且該應(yīng)用僅是便于使用并且不是以任何方式對其限定。所有四個處理器863、865、867、873與用于信息交換的DSP板SDRAM851鏈接并且與外圍I/O總線859同步和通信的處理器輸入/輸出(1/0)857鏈接，外圍I/0總線859與PC735和分揀脈沖發(fā)生器861相連。處理器I/0857可由通過通信鏈路連接的兩個或者多個SharcFIN1/0處理器來實現(xiàn)。利用外圍I/0總線857將分揀信號853提供給PC735并且分揀信號853用于控制分揀脈沖發(fā)生器861以控制液滴33的充電。處理器I/0857從模擬/數(shù)字轉(zhuǎn)換器(ADC)689接收輸出707,例如BitwareCorp.105MHz/l-頻道，能夠支持105MHz/l-頻道的14比特。ADC689與光檢測器117輸出相連以將其隨時間變化的模擬輸出信號701轉(zhuǎn)換成數(shù)字信息707，ADC689還與I/0板SDRAM855相連以存儲來自于ADC689的數(shù)字信息塊。一般地，來自于光檢測器117的模擬輸出信號701表現(xiàn)為特征A或者特征B(例如，X或者X)。A/D轉(zhuǎn)換器689將來自于流動細(xì)胞計數(shù)系統(tǒng)l的光檢測器117的模擬輸出信號701轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的數(shù)字信息707。處理器863、865、867、873分析和分類數(shù)字信息707以及為分揀系統(tǒng)119提供作為被檢測的和分類的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號。D.數(shù)據(jù)獲得如上所述，來自于光檢測器117的輸出信號701被以105MHz的頻率連續(xù)對輸出采樣的高速模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器(ADC)689俘獲。數(shù)據(jù)(數(shù)字信息707)被立即轉(zhuǎn)移到用于緩沖輸入數(shù)據(jù)的高速存儲塊(1/0板SDRAM)855中。這些存儲塊855以一種保持?jǐn)?shù)據(jù)流707的完整性和順序的方式被組織。這些存儲塊855也可利用直接存儲器存取(DMA)由數(shù)字信號處理(DSP)處理器863、865、867、873存取。這樣，處理器863、865、867、873在不中斷ADC689的情況下可存取輸入數(shù)據(jù)707。這有助于數(shù)據(jù)707有效轉(zhuǎn)移到這些處理器863、865、867、873以特征抽取、分析和分揀分類。在這整個過程中，數(shù)據(jù)管理處理器863保持脈沖取樣707的次序和索引的時間(相對于主時鐘737,它是125乘以液滴33頻率)以保持它們對"實時，，或者細(xì)胞通140過激光束25的實際時間的參考。ADC689在兩個輸入之間前后往復(fù)轉(zhuǎn)換工作，連續(xù)對包括波形脈沖497的隨時間變化模擬輸出信號701采樣以及將它們轉(zhuǎn)換成數(shù)字信息707，數(shù)字信息707在數(shù)據(jù)管理處理器863的控制下被提供在I/0板SDRAM的塊855中。處理器863將信息707匯編為連續(xù)流。E.初始化檢測參數(shù)為了有效識別背景噪聲，數(shù)字脈沖檢測軟件747應(yīng)該設(shè)有當(dāng)沒有熒光脈沖497時表示信號背景二階統(tǒng)計的信息，即，來自于光檢測器117的輸出電壓信號701的性能的認(rèn)識?？衫密浖韺W(xué)習(xí)這些統(tǒng)計以就在系統(tǒng)l的啟動后的初始化階段以無人管理的方式使得檢測參數(shù)741初始化。一般地，脈沖可被定義為背景值的2或者3個標(biāo)準(zhǔn)偏差。由于栽流體17引入鞘流體流191可能導(dǎo)致背景熒光發(fā)射變化，因此載流體17應(yīng)該存在以便于檢測參數(shù)的初始化。輸出電壓信號值的時序的二階統(tǒng)計的簡單計算可過高估計背景的標(biāo)準(zhǔn)偏差(由于在該順序中的熒光發(fā)射497的可能存在)。因此，迭代程序是優(yōu)選的以逐漸消除該影響。脈沖檢測軟件747可這樣實現(xiàn)該迭代程序，即，通過計算總信號(背景+脈沖)701的統(tǒng)計、利用這些值提供脈沖檢測邏輯，在被檢測的樣本不在脈沖內(nèi)的情況下再次計算信號統(tǒng)計以及重復(fù)該程序直至背景統(tǒng)計評估收斂(或者迭代的固定最大次數(shù)出現(xiàn))。通過利用細(xì)胞存在評價背景，所期望的校正脈沖497幅值的更精確的表示可被確定。表II概括了利用脈沖檢測軟件確定檢測參數(shù)的檢測初始化程序。<table>tableseeoriginaldocumentpage141</column></row><table>Bckgrnd=PMTvolts[ltostatWindowSize]lastSampleMean=0lastSampleSTD=0numlterations=02.計算bckgrnd和增量迭代計數(shù)的樣本平均以及樣本標(biāo)準(zhǔn)偏差sampleMean=sum(bckgrnd)/statWindowSizesampleSTD=sum(bckgrnd-sampleMean)2/statWindowSizenumlterations=numlterations+13.檢查收斂或者超過迭代最大數(shù)exitFlag=((sampleMean曙lastSampleMean)<epsa(sampleSTD-lastSampleSTD<eps))v(numlterations>maxlterations)如果exitFlag是正確的，去步驟6(其它的繼續(xù)步驟4)4.提供脈沖檢測算法，獲得脈沖樣本的矢量和新的背景樣本的評估聚集體系合并"最近的"群(從作為其自身的群的每一個數(shù)據(jù)點開始)直至達(dá)到所需的群數(shù)。"最近的"群的確定的各種手段包括最近點之間的距離、最遠(yuǎn)點之間的距離、在群平均數(shù)(平均值)之間的距離以及點之間的平均距離。[1表2.用于識別算法參數(shù)初始化中被考慮的群集方法的概述。圖73包含基于分配統(tǒng)計限定群組l和群組2的k-Means群集程序的應(yīng)用的結(jié)果的一個示例。這些群組的二階統(tǒng)計接著用于設(shè)定識別所需的參數(shù)(1或者2階多項式判定函數(shù)的系數(shù))。表IV概括了識別初始化程序。算法初始化識別參數(shù)_輸入浮動detectedPulseData的矩陣、浮動popPriorProbabilities的矢量輸出對于每一個分類群組i:浮動Wi的矩陣、浮動wi的矢量、浮動wiO程序1.計算來自于檢測脈沖的特征值(每一個脈沖的n值，其中n是特征空間的維數(shù))featureValues=feature—extract(detectedPulseData)2.群集在特征空間中的特征值以獲得群組成員數(shù)Populations=群集(featureValues)3.計算群組的2階統(tǒng)計(對于i-l至m，其中m是群組/分類的數(shù)量)(對于j-l至n，其中n是特征空間的維度)popMeani[j-sum(featureValues[populationSi，jI)/populationSi中的樣本#(對于l^l至n，其中n是特征空間的維度)tmpVal[j，k二(featureValues[populationSi，j])-populationMeani[j).(featureValues[populationSi，kl)-populationMeaiiik])popCovarianceij，k=sum(tmpVal[j，k])/populationSi中的樣本#4.計算多項式判定函數(shù)的系數(shù)(對于i-l至m，其中m是群組/分類的數(shù)量)Wj=-l/2'popCovariancej-1Wj=popCovariance「1.popMean;wi0=-l/2'ln(IpopCovariancej|)-l/2'popMeaniT.popCovariancei".popMeani+ln(popPriorProbabilitieSi)表IV.識別算法參數(shù)的初始化1一般地，A/D轉(zhuǎn)換器689將來自于光檢測器117的模擬輸出信號701轉(zhuǎn)換成表示特征A或者特征B(例如，X或者X)的相應(yīng)的數(shù)字信息707。數(shù)字信號處理器867產(chǎn)生對應(yīng)于數(shù)字信息707的產(chǎn)生識別參數(shù)，識別作為初始識別參數(shù)的函數(shù)的數(shù)字信息，并且為分揀系統(tǒng)119提供作為識別的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號853。G.數(shù)字脈沖檢測第一處理步驟是由脈沖檢測處理器865執(zhí)行的脈沖檢測以確定一個特定的波形是否是對應(yīng)于細(xì)胞的熒光發(fā)射31的波形脈沖497。處理器865執(zhí)行脈沖檢測算法，所述脈沖檢測算法識別可能表示目標(biāo)為分揀到一個群組中的顆粒或者由于可能是群組中的雜質(zhì)而目標(biāo)為可能被避免的顆粒的樣本組。對于牛精子分揀，染料被加入以斷開不能生存的細(xì)胞的發(fā)射31，使得它們相關(guān)的脈沖強(qiáng)度為活細(xì)胞的強(qiáng)度的1/3。不能生存的細(xì)胞不被認(rèn)為分揀目標(biāo)或者可能的污染。它們不被認(rèn)為檢測脈沖497。對于高于背景水平的連續(xù)數(shù)量的樣本，通過監(jiān)測樣本的強(qiáng)度來檢測來自于活細(xì)胞的脈沖497。在該水平與統(tǒng)計確定的閾值交叉后，處理器865跳越到基本為75%的活細(xì)胞的期望脈沖497的寬度的更遲的時間。如果該水平仍然在閾值以上，該系列樣本被認(rèn)為是脈沖497。來自于檢測脈沖497的樣本被移動到由特征抽取處理器867所用的存儲塊。統(tǒng)計異常檢測手段是可由數(shù)字脈沖檢測軟件747使用的一個實施例，盡管可以預(yù)見到，可使用用于識別和/或隔離數(shù)字化的脈沖497的其它手段。本質(zhì)上，來自于從背景檢測統(tǒng)計異常的熒光的光檢測器117的輸出電壓信號701的數(shù)字樣本707被認(rèn)為是脈沖497的一部分。為了增加強(qiáng)度(以使得噪聲檢測最小化)，可包括附加的暫時標(biāo)準(zhǔn)。脈沖檢測進(jìn)行如下。當(dāng)來自于光檢測器117的電壓輸出信號701不是脈沖時，信號701的輸入樣本707的背景的Mahalanobis距離被計算并且與預(yù)先設(shè)定的閾值相比較。如果給定樣本的距離超過閾值，被認(rèn)為是脈沖497的可能啟動，脈沖檢測軟件開始緩沖輸入樣本。如果接下來的預(yù)定數(shù)量的樣本145(圖25)也超過閾值，脈沖497被認(rèn)為已經(jīng)啟動和緩沖持續(xù)直至符合脈沖結(jié)束標(biāo)準(zhǔn)；或者，緩沖被再次設(shè)定并且恢復(fù)對脈沖的啟動檢查。盡管在脈沖497中，如果樣本在閾值以下，那么它被認(rèn)為是脈沖可能結(jié)束并且緩沖位置被記錄(但樣本緩沖繼續(xù))。如果接下來的預(yù)定數(shù)量的樣本(圖25)也低于閾值，脈沖497^皮認(rèn)為已經(jīng)結(jié)束并且脈沖497包括到達(dá)記錄位置的緩沖樣本。表V概括了脈沖檢測算法，并且圖49提供在數(shù)字獲得熒光脈沖497上的脈沖檢測的結(jié)果的圖示。算法數(shù)字熒光脈沖檢測_輸入浮動digSamples的矢量、浮動bkgrndMean、浮動bkgrndSigma、浮動pulseStartThresh、浮動pulseEndThresh、整數(shù)numStartSamples、整數(shù)numEndSamples輸出浮動pulseBuffer的矢量程序1.凈刀i會4匕inPulseFlag二0、pulseStartCount=0、pulseEndCount=02.對于digSamples中的每一個樣本，計算背景Mahalanobis距離mhDist[i=(digSample[i-bkgrndMeaii)/bkgradSigina3.如果inPulseFlag沒有設(shè)定，去步驟4，其它去步驟6。4.如果mhDist〉pulseStartThresh，將樣本放入pulseBuffer中，增加pulseStartCount，并且去步驟5;其它設(shè)定pulseStartCount-O，去步驟2。5.如果pulseStartCount〉numStartSamples，i殳定inPulseFlag并去步驟2。6.如果mhDist《pulseEndThresh，將樣本放入pulseBuffer中，將lastpulseSample設(shè)定為當(dāng)前緩沖位置，增加pulseEndCount，并去步驟7，其它將pulseEndCounti殳定為零，并且去步驟2。7，如果pulseEndCount大于numEndSamples，返回pulseBuffer[l至lastpulseSample和離開。表V.數(shù)字熒光脈沖檢測的概述一般地，A/D轉(zhuǎn)換器689將來自于光檢測器117的模擬輸出信號701轉(zhuǎn)換成表示特征A或者特征B(例如，X或者X)的相應(yīng)的數(shù)字信息707。數(shù)字信號處理器865分析數(shù)字信息并且處理器873為分揀系統(tǒng)119提供作為檢測的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號853。H.特征抽取和識別下面的處理步驟是由特征抽取和識別處理器867執(zhí)行的特征抽取。該處理器響應(yīng)于由脈沖檢測處理器865設(shè)定的標(biāo)記。來自于檢測的脈沖的樣本被放在與特征抽取處理器867共享的存儲器中。對于每一個脈沖497確定諸如區(qū)域、脈沖寬度、脈沖高度、Gaussian校正系數(shù)和/或其它特征的特征。在一些情況下，脈沖497被確定為"雙重的"或者無效的，并且特征不纟皮抽取。對于牛精子201,僅對于具有普通振幅和活X或者Y細(xì)胞的寬度的脈沖497抽取特征。通常，活精細(xì)胞的脈沖振幅在700-卯0mV的范圍內(nèi)，盡管該范圍也可寬至500-1000mV。在特征被抽取后，它們與為分揀選擇的群組限定的特征空間比較。如果特征符合分揀識別的特征空間，接著處理器867設(shè)定指示分揀處理器873的正分揀命令的標(biāo)記。一般地，由識別處理器867進(jìn)行特定細(xì)胞的分類并且由分揀處理器873進(jìn)行分揀判定。表示熒光發(fā)射31(以及產(chǎn)生它們的相應(yīng)細(xì)胞的特征)的數(shù)字信息707基于對于所關(guān)注的不同群組在特征空間(由作為軸的n特征形成的n維正交空間)中表現(xiàn)明顯不同的統(tǒng)計性能的特定特征或者特點凈皮軟件757識別。因此，用于識別的分析數(shù)字信息707中的第一步驟是這些特征的計算，一種由處理器867執(zhí)行的脈沖分析軟件749執(zhí)行的所謂的特征抽取的步驟。表VI列出了幾個選擇特征，軟件749可用于該應(yīng)用。這些特征的一個或者多個將被選擇以形成用于分類的特征空間。應(yīng)該注意的是，具有附加的提供加強(qiáng)分離的特征以使該列表是示例性的，非全面的。例如，軟件749可使用子程序753確定脈沖497的區(qū)域和/或可使用子程序755確定脈沖497峰值。<table>tableseeoriginaldocumentpage148</column></row><table>有特征B的顆粒生產(chǎn)的脈沖的第一導(dǎo)數(shù)之間的差最大或者接近最大的脈沖的一個點處的脈沖斜度概述I.縫隙掃描一般地，由照射系統(tǒng)109提供的橢圓形斑點459測量細(xì)胞中的相對DNA含量差?？赏ㄟ^分析由光檢測器117檢測的熒光發(fā)射31的脈沖497的更可能包含被評估的特征的部分來進(jìn)一步提高分辨率。某些細(xì)胞(例如，牛精細(xì)胞)的生理現(xiàn)象AX/Y染色體定位在接近赤道區(qū)域225中，接近赤道區(qū)域225緊挨著細(xì)胞201的核213的縱向中線或者赤道或者中心，并且其長度為l微米(見圖6)。事實上，X/Y染色體不一定處于核213的中心。這樣，可通過將光檢測器117的隨時間變化的模擬輸出701轉(zhuǎn)換成數(shù)字信息707以及分析數(shù)字信息中對應(yīng)于熒光發(fā)射31的脈沖497的部分(例如對應(yīng)于從接近赤道區(qū)域225發(fā)出的光，諸如在脈沖497峰值周圍定中心的20-60%特別是20-30%的波形脈沖)的一部分來提高分辨率。如上所述，縫隙掃描可用于從每一個細(xì)胞染色質(zhì)的一部分而不是從整個染色質(zhì)獲得熒光測量。上述外照射系統(tǒng)415提供的橢圓形斑點459從染色質(zhì)的特定部分測量細(xì)胞中的相對DNA含量差，以提高X細(xì)胞和X細(xì)胞相互之間的分辨率。如上所述，縫隙掃描測量技術(shù)是聚焦激發(fā)光束25以如圖6中所示使得聚焦斑點尺寸459的大小遠(yuǎn)小于細(xì)胞直徑的熒光測量手段。這樣，當(dāng)細(xì)胞通過橢圓形束斑459時利用激光束25掃描細(xì)胞201。檢測由縫隙掃描照射產(chǎn)生的熒光發(fā)射31的光檢測器117的輸出701產(chǎn)生的所得到的波形脈沖497包含關(guān)于熒光沿著細(xì)胞201的長度定位的信息。如圖45-48所示，當(dāng)細(xì)胞201橫穿橢圓形束斑459時，隨時間改變的波形脈沖497(紅/橙線)是相對束強(qiáng)度(藍(lán)線)和相對發(fā)出脈沖強(qiáng)度(當(dāng)細(xì)胞橫穿束時對應(yīng)于橢圓形斑激發(fā)的著色的熒光發(fā)射并且由于沿著細(xì)胞軸線的熒光分配改變而改變)的巻積。通過一次僅照射細(xì)胞染色質(zhì)的一部分，來自于光檢測器117的所得到的隨時間變化的模擬輸出701包含沿著細(xì)胞201的縱向軸線的專用于在染色質(zhì)內(nèi)的熒光定位的信息。盡管來自于縫隙掃描的檢測的熒光發(fā)射31小于來自于由具有相當(dāng)于細(xì)胞直徑的斑寬度的束25掃描的檢測的發(fā)射31，形成來自于具有較低的脈沖振幅的縫隙掃描的波形脈沖497,但是在帶有X染色體的細(xì)胞和帶有Y染色體的細(xì)胞之間的大部分差異表現(xiàn)在波形脈沖497的中心20-30%至20-60%中。如果僅圖53中的矩形區(qū)域725被認(rèn)為用于識別X-Y精細(xì)胞，那么可在與細(xì)胞的總DNA含量相比的對應(yīng)于矩形區(qū)域725(由于X和Y染色體存在于該區(qū)域內(nèi))的染色質(zhì)的部分內(nèi)的DNA含量的定位變化之間測量較大的相對差異。例如，牛X-Y精細(xì)胞在總DNA含量中的差異為3.8%。來自于X和Y染色體的熒光發(fā)射31將被包含在矩形區(qū)域725中。如果該矩形區(qū)域725計算對應(yīng)于熒光發(fā)射31的總波形脈沖497的20%，那么在該區(qū)域內(nèi)將存在相對DNA含量的14%的差異。通過測量來自于染色質(zhì)的特定部分的相對DNA含量差異，提高X-Y精細(xì)胞差異的分辨率(例如，從3.8%至14%)。圖54示出利用縫隙掃描照射和僅處理從脈沖497的中心20%的區(qū)域(即圖53的矩形區(qū)域725)得到的分辨率。圖54的直方圖使得帶有X染色體的細(xì)胞和帶有Y染色體的細(xì)胞的很高百分比(例如，98%)以高的置信度(例如，95%)被識別。相比較，圖55的直方圖示出當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)照射技術(shù)可獲得的分辨率，說明縫隙掃描對于利用標(biāo)準(zhǔn)照射技術(shù)得到的結(jié)果有很大的提高。如圖53中所示的可用于獲得波形脈沖497的中心部分的區(qū)域725的兩種手段是如這段將描述的數(shù)字化光檢測器117的隨時間變化的模擬輸出701的數(shù)字信號處理(DSP)或者如下面描述的利用模擬閾值觸發(fā)的模擬積分。如這里所述的，DSP處理包括對來自于光檢測器117的隨時間變化的模擬輸出701連續(xù)采樣以獲得對應(yīng)于輸出701的數(shù)字信息707以及為數(shù)字信息707提供DSP算法以從對應(yīng)于波形脈沖497的中心部分725的數(shù)字信息中抽取特征，諸如區(qū)域尺寸，波形脈沖497的中心部分725對應(yīng)于由于X或者Y染色體存在于不同的細(xì)胞201中而造成的DNA含量的差異。作為一個簡單示例，利用分析對應(yīng)于其的數(shù)字信息707使得每一個波形脈沖497的總區(qū)域的中心20%將被確定。該分析可用于產(chǎn)生諸如圖53中所示的直方圖。J.脈沖激光掃描在一個實施例中，可以預(yù)見的是，系統(tǒng)l包括照射細(xì)胞的脈沖激光。在該實施例中，縫隙掃描(如上所述)可或者不可被使用。例如，模式鎖定固態(tài)激光器可用于以50-150MHz的脈沖頻率和100-500毫瓦的平均功率輸出發(fā)射一系列具有l(wèi)-IOO皮秒的脈沖寬度發(fā)出一系列電磁脈沖。一種適合的激光器是Vanguard350模式鎖定固態(tài)激光器(來自于Spectra-Physics,MountainView,CA94039)，它可用于以每秒85000000個脈沖的頻率和350毫瓦的平均功率輸出發(fā)射一系列具有12皮秒的脈沖寬度(持續(xù)時間)發(fā)出一系列電磁脈沖。由于350mV的功率是以12皮秒的極短脈沖輸送的，這樣一個激光器的功率輸出大于平均功率的幾百倍(例如，800倍)。這樣一個激光器的輸出可被描述為準(zhǔn)連續(xù)波(quasi-cw),由于對于許多應(yīng)用，脈沖重復(fù)率足夠快以接近連續(xù)波(cw)輸出。事實上，可以與利用cw激光器操作相同的方式利用quasi-cw激光器操作上述系統(tǒng)。這提供15了某些缺點，這是由于固態(tài)激光器通常以更高的效率工作，無需過大的冷卻系統(tǒng)，并且與大多數(shù)其它激光器相比需要很少的維護(hù)。quasi-cw脈沖固態(tài)激光器還可利用數(shù)字信號處理技術(shù)大大提高信號信號噪聲比。定時電路可被包括并且能夠產(chǎn)生表示激光脈沖到達(dá)詢問位置115(即，激光束25照射流21)的定時信號。例如，定時電路可是圖40中所示的激光脈沖傳感器3003以檢測對應(yīng)于包括由每一個激光脈沖和流體流21相互作用產(chǎn)生的散射光和/或包括來自于激光脈沖的光的激光脈沖的光?；蛘撸瑢τ诳杀挥|發(fā)的激光，觸發(fā)信號可被提供給孩i處理器131和/或A/D轉(zhuǎn)換器689以使得微處理器131和/或A/D轉(zhuǎn)換器689與激光脈沖同步，如下面參照圖50所述的。在任何一個實施例中，激光脈沖定時可為系統(tǒng)提供時鐘信號。參見圖50，時序圖表示激光脈沖LP和當(dāng)細(xì)胞通過束斑459和光檢測器輸出701的數(shù)字樣本DS時由于激光脈沖LP的重復(fù)激發(fā)而導(dǎo)致的來自于細(xì)胞的熒光發(fā)射FE之間的定時關(guān)系。如圖45-49所示，當(dāng)細(xì)胞通過激光束斑459時，熒光發(fā)射31才艮據(jù)細(xì)胞中產(chǎn)生熒光發(fā)射31的部分的照射量而變化。圖50示出當(dāng)細(xì)胞通過流式細(xì)胞計1的詢問區(qū)域115時影響細(xì)胞的20個激光脈沖LP1-LP20。每一個激光脈沖LP1-LP20分別對應(yīng)于熒光發(fā)射FE1-FE20，在激光脈沖的基本瞬時激發(fā)后熒光發(fā)射FE1-FE20指數(shù)衰減。在一個實施例中，微處理器131控制A/D轉(zhuǎn)換器689(見圖40)以使轉(zhuǎn)換器689在每一個熒光發(fā)射FE1-FE20的峰值或者其附近對光檢測器117的輸出信號701取樣，分別如數(shù)字樣本DS1-DS20所示。換言之，定時電路使得A/D轉(zhuǎn)換器689的采樣率與熒光發(fā)射FE1-FE20。顆粒通過詢問區(qū)域115所產(chǎn)生的數(shù)字信號是可由來自于連續(xù)波激光器的脈沖波形497的數(shù)字化所產(chǎn)生的數(shù)字信號的功能等同。如圖51中所示，例如，通過在數(shù)字樣本DS1-DS20中考慮熒光強(qiáng)度以及不考慮在激光脈沖LP1-LP20之間的熒光強(qiáng)度減弱，作為時間函數(shù)的熒光強(qiáng)度是脈沖波形497。這允許微處理器131從由脈沖激光產(chǎn)生的數(shù)字信號707抽取特征以分析提供熒光發(fā)射FE1-FE20的細(xì)胞。在一個實施例中，具有2納秒或者更低的較快響應(yīng)時間的更敏感的光檢測器可被使用以更精確地檢測熒光發(fā)射。151這樣，脈沖激光在流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)l中提供的優(yōu)點是，能夠使用低功率脈沖激光獲得與以高于脈沖脈沖的平均功率的平均功率操作的CW激光獲得的基本相同的分析。另外，來自于脈沖激光的高峰值功率趨于使得熒光團(tuán)飽和以使熒光發(fā)射到達(dá)最大，從而減小光檢測器的輸出信號的信噪比。換言之，利用包含比使得熒光團(tuán)飽和所需的更多的能量的激光脈沖，激光的輸出中的變化不會導(dǎo)致熒光發(fā)射31的變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，具有多種使得激光器發(fā)射一系列脈沖的方式。應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的基礎(chǔ)上，其它脈沖激光器，包括其它模式鎖定激光器、Q切換激光器和腔倒空激光器，可代替上述模式鎖定激光器被使用。類似地，定時數(shù)字采樣和處理所得到的信息的許多其它方式從以上的描述中是顯而易見的。例如，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的基礎(chǔ)上，數(shù)字采樣可被定時，從而在激光脈沖和數(shù)字樣本之間存在不同的延遲(或者沒有延遲)。類似地，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的基礎(chǔ)上，每一個脈沖的數(shù)字樣本的數(shù)量或者在數(shù)字采樣之間消逝的脈沖數(shù)量還可被改變。K.群組特征的評估如上所述，流式細(xì)胞術(shù)可用于基于3.8%的它們DNA含量的相對差異識別帶X的牛精細(xì)胞和帶Y的牛精細(xì)胞。通過對用于當(dāng)著色的細(xì)胞通過詢問位置115時記錄熒光發(fā)射31的由光檢測器117產(chǎn)生的隨時間變化的信號701的特征的分析進(jìn)行識別。這種相互作用被示出在圖45-48中。圖45-48示出脈沖波形497如何由在激光束25和著色精細(xì)胞201之間的相互作用導(dǎo)致的熒光發(fā)射31產(chǎn)生的。發(fā)射脈沖497是激發(fā)空間函數(shù)498和細(xì)胞201的發(fā)射空間函數(shù)的巻積積分。熒光脈沖波形497的特征用于將細(xì)胞分為X、Y或者不確定的。在一個實施例中，X-Y識別依賴兩個脈沖特征峰值脈沖高度和脈沖區(qū)域。這些特征被示出在出現(xiàn)于圖52和53中的示例脈沖上。圖52和53是來自于帶X和帶Y精細(xì)胞的脈沖497的示例。脈沖497是由假設(shè)利用具有Gaussian束腰W1(圖6)為2微米的橢圓形束斑459的激光束25激發(fā)照射和DNA含量差在細(xì)胞201的中心20%上均勻分布的計算枳4莫型產(chǎn)生的。這些假設(shè)表示以上更詳細(xì)描述的具有局部DNA差的牛精細(xì)胞201的縫隙掃描照射。脈沖497的3.8%的平均差異。能夠產(chǎn)生著色細(xì)胞和核的脈沖497的峰值和區(qū)域特征的直方圖和散布圖。圖56-59包含著色核和活細(xì)胞的脈沖區(qū)域特征的直方圖、著色核和活細(xì)胞的脈沖497區(qū)域和峰值特征的正散布圖。可限制活細(xì)胞識別的一些項目并且最終細(xì)胞分揀速度在這些圖中是顯然的。注意的是，圖57的活細(xì)胞直方圖，對于較小的程度，圖56的核直方圖具有通常屬于哺乳動物精細(xì)胞的熒光強(qiáng)度直方圖的左肩。已經(jīng)確定的是，左肩是由略微不對準(zhǔn)的細(xì)胞(即，由于略微偏離最佳對準(zhǔn)但不沒有脫離以使得來自于精子頭部205的窄邊209的較亮的熒光發(fā)射31被光學(xué)系統(tǒng)109收集的產(chǎn)生較弱的熒光發(fā)射的細(xì)胞)的一個或者多個群組形成的。在活細(xì)胞區(qū)域直方圖中僅可容易地識別一半的X細(xì)胞。其余的與Y細(xì)胞群組和未對準(zhǔn)(unaligned)細(xì)胞群組重疊。即使當(dāng)增加峰值脈沖高度時，如圖56-59中的散布圖中所示，帶X的細(xì)胞的分類可凈皮大大限制。圖60-61示出X和Y群組分布的重疊。在圖60-61中，四分量計算機(jī)模型已經(jīng)被用于原始數(shù)據(jù)6000(圖60)以評估未對準(zhǔn)的細(xì)胞(6001、6003)、對準(zhǔn)的活Y細(xì)胞(6005)和對準(zhǔn)的活X細(xì)胞(6007)的兩個群組的群組統(tǒng)計(圖61)。優(yōu)選作為X和Y群組的方差系數(shù)(CV)的一個函數(shù)識別X和Y群組。例如，優(yōu)選使得X和Y群組的方差系數(shù)(CV)最小化以提高識別。特別是，當(dāng)需要分揀的X細(xì)胞的群組時，X細(xì)胞群組的CV優(yōu)選小于1.5。/。，優(yōu)選為1.3%，優(yōu)選小于1.3%。通常，精細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的分布的CV相對于僅兩個群組(X和Y)的分布函數(shù)已經(jīng)被考慮。相對于CV的質(zhì)量控制已經(jīng)被限制于X和Y群組的CV的粗略的主觀評估以判定是否進(jìn)行連續(xù)分析或者是否值得分揀。根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，微處理器131的一功能上利用圖60-61中所示的四分量模型提供X群組的CV的自動評估。為了評估存在于特征(例如脈沖區(qū)域)分布中的群組的CV，需要評估群組分布的2階統(tǒng)計。這可通過提供一種已知形式的模型并且尋找該模型與所觀察的數(shù)據(jù)的最佳擬合來實現(xiàn)。給定正常分布數(shù)據(jù)的期望值，已經(jīng)選擇包括基于非參數(shù)密度評估的ParzenWindow(利用一種Gaussiankernel函數(shù))接著應(yīng)用Gaussian混合參數(shù)模型的手段。特別是，圖60-61中所示的四分量模型包括四個單變量Gaussian分布的和(或者混合)，這四個分量是對應(yīng)于對準(zhǔn)的X細(xì)胞、對準(zhǔn)的Y細(xì)胞和兩分量未對準(zhǔn)的細(xì)胞群組的特征分布。表征該模型的參數(shù)接著是群組平均數(shù)(平均)(4)、群組標(biāo)準(zhǔn)偏差/方差(4)和先驗概率(總分布的期望的％)(4)。這12個參數(shù)接著可變化以達(dá)到模型與所觀察的直方圖的最佳擬合。對于這樣評估的模型分量參數(shù)，可根據(jù)評估發(fā)群組標(biāo)準(zhǔn)偏差和平均數(shù)來確定所關(guān)注的(特別是，X細(xì)胞)的群組的CV的評估CV-(標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均數(shù))100%為了減小計算的復(fù)雜性，約束已經(jīng)被置于模型上以減小參數(shù)空間的維度。特別是，對應(yīng)于對準(zhǔn)的X和對準(zhǔn)的Y群組的模型分量的標(biāo)準(zhǔn)偏差已經(jīng)被限制以使它們相同。另外，對準(zhǔn)的X和對準(zhǔn)的Y分量已經(jīng)被限制以構(gòu)成總混合的相同百分比-這樣，未對準(zhǔn)的群組為假設(shè)的50。/。的X細(xì)胞和50。/。的Y細(xì)胞。在模型擬合之前應(yīng)用非參數(shù)密度評估以獲得基于原始直方圖數(shù)據(jù)的總密度函數(shù)(分量密度的總和)的提高評估。該特定的技術(shù)被稱為"ParzenWindows"(Duda，Hart，andStork,2001)，由于假設(shè)的基礎(chǔ)密度的Gaussian和的性質(zhì)，這里使用Gaussiankernel或者窗口函數(shù)。Gaussiankernel的標(biāo)準(zhǔn)偏差被選擇為構(gòu)造直方圖框的數(shù)量的1%;該數(shù)值已經(jīng)被經(jīng)驗觀察以提供適合的但不過大的直方圖的平滑。在直方圖中的每一個數(shù)據(jù)點接著使得kernel函數(shù)在包含數(shù)據(jù)點的直方圖框上定中心。接著，獲得密度評估作為kernel函數(shù)的總和。達(dá)到與數(shù)據(jù)最佳擬合的模型參數(shù)的變化所選擇的方法被稱為期望最大化(見DudaR.O.，Hart,P.E.，andStork,D.G"2001，Pattern2ndEd.，John154FastEM-basedMixtureModelClusteringusingMultiresolutionkd-trees，，，inM.KearnsandD.Cohn，Eds.，AdvancesinNeuralInformationProcessingSystems,pages543-549,1999，MorganKaufman)。所用的該特定算法實現(xiàn)如下1)設(shè)定用于模型參數(shù)的初始條件。在Parzen密度中的頂部兩個局部最大值用作初始Y和X平均位置(被評估為右峰值的幅值的X和Y群組的最大值的初始幅值)。初始X和Y群組方差纟皮評估為在左峰值和右峰值之間出現(xiàn)的局部最小值的右邊的數(shù)據(jù)相對于右峰值位置的方差。另外，初始X和Y群組先驗概率被設(shè)定為落在該局部最小值的右邊的所有點的百分?jǐn)?shù)。接著利用這些參數(shù)計算初始的X和Y群組Gaussian密度評估并且從總Parzen密度評估中減去。接著，計算剩余的數(shù)據(jù)點的平均值和方差并且用于使得兩個分量為對準(zhǔn)群組模型進(jìn)行如下的初始化。兩個群組平均值被設(shè)定(任意地)為相隔5%(在總未對準(zhǔn)平均數(shù)的上下2.5%)。已知等先驗和等方差的設(shè)定，接著，分量方差被給出其中一是方差，ii是各個群組的平均數(shù)。2)利用Parzen密度評估計算分量群組統(tǒng)計(平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)偏差和先驗)的更新的評估。利用在框中的Parzen密度評估在統(tǒng)計計算中對每一個直方圖框位置加權(quán)。另外，每一個數(shù)據(jù)點有助于使所有分量群組統(tǒng)計計算基于當(dāng)前的分量群組參數(shù)被加權(quán)到認(rèn)為該點屬于一個已知的群組的程度。全體成員(membership)的這種程度被確定為在該數(shù)據(jù)點處已知的分量群組(Gaussion)概率密度值與所有分量群組概率密度值的總和的比。這樣，我們具有(對于在該直方圖中的所有數(shù)據(jù)點X，群組Cpe(Cx，Cy，C山以及群組參數(shù)矢量ep-[iLip，CTp，Ppl)用于更新參數(shù)評估的計算的群組分量全體成員，更新參數(shù)評估的計算被給出<formula>formulaseeoriginaldocumentpage156</formula>接著利用由這些全體成員(membership)數(shù)值加權(quán)的Parzendensityestimate(Parzen密度評估)值計算更新的平均值和方差，更新的先驗由在所有數(shù)據(jù)點上的每一個分量群組的平均全體成員給出的。3)參數(shù)更新程序持續(xù)進(jìn)行直至所有參數(shù)達(dá)到穩(wěn)態(tài)(即，從一個更新迭代到下一個停止發(fā)生很大的變化(或者最大可允許的迭代數(shù)出現(xiàn)))。如上所述，對準(zhǔn)的X和Y群組在該程序中被限制以具有相同的方差和先驗概率。利用在每一個迭代中通過上述程序計算的X和Y方差和先驗值的平均值實現(xiàn)該限制?；蛘?，類似的建立模型的手段可用于三分量模型(圖62-63)，其中包括在四分量模型中的兩個未對準(zhǔn)群組6001、6003的細(xì)胞被處理為一個Gaussian分布6011而不是兩個截然不同的子群組。未對準(zhǔn)的細(xì)胞可被模型建立為具有由原始數(shù)據(jù)6010(如圖62所示)的左臺肩和左主峰值最佳擬合所確定的平均和標(biāo)準(zhǔn)偏差的三個Gaussian分布(如圖63所示)。三群組模型還評估了對準(zhǔn)的Y群組6015和對準(zhǔn)的X群組6017的統(tǒng)計。三分量模型的一個優(yōu)點是，它僅需要9維參數(shù)空間(與四分量模型所需的12維參數(shù)空間相比)。但是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)四分量模型通常產(chǎn)生更緊密匹配原始數(shù)據(jù)的評估密度函數(shù)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，多種統(tǒng)計技術(shù)可用于評估對準(zhǔn)X和對準(zhǔn)的Y的群組的特征。這樣，在不脫離的本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，可利用任何參數(shù)或者非參數(shù)計算機(jī)算法實現(xiàn)四分量模型、三分量模型或者其它模型以評估對準(zhǔn)X和對準(zhǔn)的Y的群組的特征。L.著色條件的基于CV的選擇幾個因素影響將一個群組內(nèi)的著色細(xì)胞分揀到濃縮的細(xì)胞子群組中的效率。在這些因素中，一個是在著色群組內(nèi)的各個細(xì)胞子群組之間的差分熒光量。通過染料攝取來影響差分熒光，染料攝取基于著色因素變化，諸如著色劑的濃度、著色時間、著色發(fā)生的溫度以及與著色劑一起被包括的或者被加到著色混合物的任何添加劑的濃度和數(shù)量。因此，這些因素中的一些或者所有可被調(diào)節(jié)以增大著色細(xì)胞的群組的分揀效率(細(xì)胞以某些純度和/或所需細(xì)胞最小的損失可被分揀到至少一個濃縮的細(xì)胞子群組中的速度)。另外，人們可通過調(diào)節(jié)每一個樣本的這些因素中的一個或者多個來增大多樣本分揀系統(tǒng)的效率，從而對抗任何樣本與樣本的變化。在牛精子分揀的范圍內(nèi)，例如，可通過從一個精子到下一個調(diào)節(jié)上述著色因素中的一個或者多個來提高分揀效率以對抗公牛與公牛的變化或者在同一個公牛內(nèi)的樣本與樣本的變化。待分揀的細(xì)胞群組的已知熒光發(fā)射特征的方差系數(shù)("cv")的確定是一種確定是否應(yīng)該對著色條件進(jìn)行調(diào)節(jié)以達(dá)到所需分揀效率的方式。例如，人們可作為從由細(xì)胞移動通過詢問位置所產(chǎn)生的脈沖波形抽取的任何特征的cv的一個函數(shù)調(diào)節(jié)著色條件，諸如表示總熒光強(qiáng)度或者峰值熒光強(qiáng)度(包括總熒光強(qiáng)度和峰值熒光強(qiáng)度)的任何特征。如上面更詳細(xì)描述的，cv是可測量的性能分布或者群組特征的均質(zhì)性或者一致性的標(biāo)志，例如給定群組的特定子群組的熒光發(fā)射特征。可通過用樣本平均數(shù)除樣本的測量特征的標(biāo)準(zhǔn)偏差來確定CV。還可利用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)9自動確定CV,諸如利用上面詳細(xì)描述的迭代cv評估算法的實現(xiàn)。cv越低，測量特征的分布的均質(zhì)性或者一致性越大。當(dāng)被用于精細(xì)胞的著色和分離時，帶X和Y染色體的精細(xì)胞的樣本的特定熒光發(fā)射特征的CV可受到著色條件的影響。著色劑的濃度、著色時間、著色混合物的溫度和/或添加劑的濃度和數(shù)量影響給定熒光發(fā)射特征的CV。增大著色劑的濃度、著色時間和著色混合物的溫度和/或減小添加劑的濃度和數(shù)量將降低cv。這樣的條件可被獨立或者結(jié)合被改變。另外，如果這些因素中的任何一個是這樣的，即，使其能夠增大熒光發(fā)射特征的cv,例如，通過縮短著色時間，接著其它條件中的任何一個或者多個可被調(diào)節(jié)以使其對第一效應(yīng)產(chǎn)生反作用，例如，通過增大染料濃度，并且總結(jié)果是熒光發(fā)射特征的cv減小到足以達(dá)到所需分揀效率的水平。因此，通過以這種方式控制這些因素中的任何一個或者任何組合，帶X和Y染色體的群組的熒光發(fā)射特征的CV可被減小到能夠使得精子樣本分揀到包括帶X染色體細(xì)胞的所需百分比純度的性別濃縮精子的子群組中的數(shù)值。遺憾的是，趨于降低帶X精細(xì)胞的CV的變化可具有副作用，諸如提高成本或者減小精子的游動性或者生存力。例如，其它條件都相同，優(yōu)選利用降低的著色劑濃度和較短的著色時間以使得著色工藝對精子的任何有害影響達(dá)到最小。注意到這點，人們可預(yù)定將達(dá)到可接受的分揀效率的cv。接著，待分揀的細(xì)胞樣本的一部分被著色并且經(jīng)受流式細(xì)胞術(shù)分析。該部分的熒光發(fā)射特征被確定，并且該部分基于特征被分類到子群組中。熒光特征的cv相對于子群組(濃縮子群組)中的一個的細(xì)胞被確定。如果濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的cv等于或者小于分揀發(fā)生的預(yù)定cv，那么細(xì)胞樣本的其余部分根據(jù)該部分被著色的條件被著色。接著，例如樣本被分揀，根據(jù)這里所述的方法。如果濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的cv大于分揀發(fā)生的預(yù)定cv，那么以一種類似的方式分析同一個樣本的另一個部分，但在被認(rèn)為達(dá)到更低cv的著色條件下。在這樣一種情況下，例如可通過增加著色時間、增大染料的濃度、增大該部分被著色的溫度或者其任何組合來降低cv。這些步驟(即，從待分揀的樣本中去除一部分、著色條件的調(diào)節(jié)和cv的確定)重復(fù)直至濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的cv被確定等于或者小于預(yù)定cv。接著，樣本的其余部分因此被著色并且可被分揀，例如根據(jù)這里披露的方法。在本發(fā)明的一個特定實施例中，細(xì)胞樣本包括精子樣本，并且濃縮子群組的細(xì)胞包括帶x染色體的精細(xì)胞。因此，本發(fā)明的一個實施例是一種評估一組用于分揀細(xì)胞群組著色的條件的方法，該群組包括第一類型和第二類型的細(xì)胞。所述程序包括(a)在一組著色條件下利用熒光染料使得細(xì)胞群組的一部分著色；(b)當(dāng)著色的細(xì)胞以速度R通過流式細(xì)胞計的詢問位置時使得著色細(xì)胞暴露在電磁輻158射下；(c)確定暴露的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征；(d)利用確定的熒光特征將暴露的細(xì)胞分類成兩個或者多個細(xì)胞的子群組，其中一個子群組是第一細(xì)胞類型的濃縮子群組；(e)確定濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的變異系數(shù)；以及(f)確定在細(xì)胞被著色的情況下改變?nèi)魏沃珬l件或者著色的細(xì)胞通過流式細(xì)胞計的詢問位置的速度R。在另一個實施例中，在一組不同的著色條件下對細(xì)胞群組的另一部分著色并且對于該部分重復(fù)步驟(b)至(e)。該方法可在兩個、三個、四個或者任何數(shù)量的附加部分上執(zhí)行。在另一個實施例中，同時從樣本抽取多個細(xì)胞部分。每一個部分可被同時著色或者在前面的部分通過流式細(xì)胞計后可使得每一個被著色。在前一種情況下，每一個部分可在其自己獨特的一組著色條件下被著色并且步驟(f)可包括利用各個CV確定待用于對附加的細(xì)胞著色的一組著色條件。在后一種情況下，隨后著色的部分的著色條件可才艮據(jù)步驟(7)的確定相對于在前分析的部分被改變。在一個實施例中，該方法被重復(fù)直至CV被確定為等于或者小于特定CV(例如1.3%)?；蛘?，在人們已經(jīng)預(yù)定可接受的分揀效率將被達(dá)到的CV后，整個細(xì)胞樣本可被著色。細(xì)胞樣本的一部分被去除并且經(jīng)受流式細(xì)胞術(shù)分析。該部分的熒光發(fā)射特征被確定并且用于將細(xì)胞分類到兩個或者多個子群組中。相對于濃縮子群組的細(xì)胞確定熒光發(fā)射的CV。如果濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的CV等于或者小于分揀發(fā)生的預(yù)定CV，那么細(xì)胞樣本的剩余部分接著被分揀。如果濃縮子群組的細(xì)胞的特定熒光發(fā)射特征的CV大于分揀發(fā)生的預(yù)定CV，那么以一種類似的方式分析同一個樣本的第二部分并且確定同一個熒光特征的CV。例如可通過增加著色時間、增大染料的濃度、或者其任何組合來降低第二部分的CV。這些步驟(即，從待分揀的樣本中去除一部分和CV的確定)重復(fù)直至濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的cv被確定等于或者小于預(yù)定cv。接著，樣本的其余部分因此被著色并且可被分揀，例如根據(jù)這里披露的方法。在本發(fā)明的一個特定實施例中，細(xì)胞樣本包括精子樣本，并且濃縮子群組的細(xì)胞包括帶x染色體的精細(xì)胞。因此，本發(fā)明的另一個實施例是一種評估一組用于分揀細(xì)胞群組著色的條件的方法，該群組包括第一類型和第二類型的細(xì)胞。所述程序包括(a)在一組著色條件下利用熒光染料使得細(xì)胞群組的一部分著色；(b)當(dāng)著色的細(xì)胞以速度R通過流式細(xì)胞計的詢問位置時使得著色細(xì)胞暴露在電磁輻射下；(c)確定暴露的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征；(d)利用確定的熒光特征將暴露的細(xì)胞分類成兩個或者多個細(xì)胞的子群組，其中一個子群組是第一細(xì)胞類型的濃縮子群組；(e)確定濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的變異系數(shù)；(f)確定在細(xì)胞被著色的情況下改變?nèi)魏沃珬l件或者著色的細(xì)胞通過流式細(xì)胞計的詢問位置的速度R;以及(g)為細(xì)胞群組的區(qū)域部分提供改變的著色條件。在另一個實施例中，對于細(xì)胞群組的至少一個其它部分至少一次重復(fù)步驟(a)至(f)。步驟(a)至(f)可重復(fù)一次、二次、三次、四次或者更多次數(shù)。在另一個實施例中，同時從樣;M^取多個細(xì)胞部分。每一個部分可被同時著色或者在前面的部分通過流式細(xì)胞計后可使得每一個被著色。在后一種情況下，隨后部分的著色可根據(jù)步驟(7)的確定相對于在前分析的部分被改變。在另一個實施例中，該方法還包括在步驟(g)之前，選擇產(chǎn)生最低的熒光發(fā)射特征的方差系數(shù)的改變的著色條件。在另一個實施例中，該方法包括步驟(a)至(e)的重復(fù)直至至少一個部分的熒光發(fā)射特征的方差系數(shù)為1.3%或者更低。在本發(fā)明的另一個實施例中，該方法還包括在步驟(g)之前，選擇產(chǎn)生1.3%或者更低的方差系數(shù)的改變的著色條件。如上面詳細(xì)描述的，在分揀整個樣本之前，除了執(zhí)行這樣的分析以外，可進(jìn)行類似的分析同時盡量使得樣本的著色和分揀發(fā)生以保證分揀效率的維持。因此，在另一個實施例中，已經(jīng)在前被著色的樣本的一部分或者在該方法中待分揀的所述樣本的一部分的濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的CV如上所述被確定。根據(jù)上面關(guān)于預(yù)分揀調(diào)節(jié)描述的方法對這些樣本被著色的著色條件進(jìn)行調(diào)節(jié)?？山邮艿姆謷蕦⒈贿_(dá)到的預(yù)定CV的選擇基于幾個因素，例如包括待分揀的細(xì)胞類型、分揀速度和相對于群組分揀成濃縮的子群組所需的純些因素，濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的CV—般在2.0%和l.O%之間，優(yōu)選在1.5%和1.0%之間、優(yōu)選為1.4%、優(yōu)選為1.3%。M.臨界斜度差特征抽取用作細(xì)胞分揀器的一部分的如圖40中所示的帶有數(shù)字信號處理(DSP)的微處理器131'能夠抽取分辨熒光發(fā)射脈沖的時間的特征，特別是利用模擬技術(shù)不易或者不能廉價獲得的特征。特別是，表現(xiàn)非線性并且大大提高顆粒A和B(例如，提高活的對準(zhǔn)的X精細(xì)胞的識別)的分離度以及分辨率的脈沖特征是一個被稱為臨界斜度差(CSD)的特征。CSD是熒光發(fā)射脈沖在由顆粒A(例如，帶X的細(xì)胞)產(chǎn)生的脈沖的第一導(dǎo)數(shù)和由顆粒B(例如，帶Y的細(xì)胞)產(chǎn)生的脈沖的第一導(dǎo)數(shù)之間的差接近最大值的信號振幅處的斜度的量化。利用作為時間函數(shù)的信號振幅描述熒光發(fā)射脈沖的函數(shù)可表示為y=x(t)。在檢測CSD特征的范圍內(nèi)，利用作為信號振幅的函數(shù)的脈沖持續(xù)時間描述熒光發(fā)射脈沖的函數(shù)可被限定。該函數(shù)可被稱為M函數(shù)。利用下面所示的變換熒光發(fā)射脈沖函數(shù)可得到M函數(shù)。焚光發(fā)射脈沖函數(shù)y=x(t)M函數(shù)t=M(y)t-脈沖持續(xù)時間y—言號振幅常規(guī)X和Y牛精細(xì)胞的M函數(shù)的比較表示CSD特征的識別功率。圖64的頂部板條表示帶X或者帶Y的精細(xì)胞的平均M圖表。圖64中的中間板條示出小于平均的帶Y的熒光發(fā)射脈沖的峰值高度的用于信號振幅值的這些平均M圖表(即M')的第一導(dǎo)數(shù)的圖表。在該圖中可以看出，當(dāng)信號振幅接近帶Y脈沖的平均峰值高度時，第一導(dǎo)數(shù)(M'y和M，x)之間的差大大增加。繪制在圖64的底部板條中的是作為信號振幅的函數(shù)的第一導(dǎo)數(shù)(M'x-M'y)之間的差。該CSD特征量化了在出現(xiàn)第一導(dǎo)數(shù)中的最大差的區(qū)域附近的一個脈沖的M的斜度(M')(或者在熒光發(fā)射脈沖函數(shù)上的對應(yīng)點處的斜度)。為了識別帶X和帶Y的精細(xì)胞，如圖62-63中所示，在脈沖的前沿與CSD閾值相交的點處確定每一個脈沖的CSD。在一些實施例中，CSD可取決于照射束的特征，諸如束寬度，無論束上連續(xù)的或者脈沖的。下面參照圖65描述一種用于確定CSD的算法。圖64示出在一些情況下CSD特征具有非線性，諸如在分揀X-Y精細(xì)胞群組的情況下。當(dāng)CSD閾值接近Y脈沖的峰值時導(dǎo)數(shù)之間的差(M'x-M'y)于在CSD特征空間中的對準(zhǔn)的X細(xì)胞的平均值。對準(zhǔn)的X細(xì)胞的CSD特征空間中的標(biāo)準(zhǔn)偏差基本不受影響(即，與在峰值或者區(qū)域特征空間中看到的類似)。它是增大可被精確識別的對準(zhǔn)的X細(xì)胞的數(shù)量的CSD特征的該非線性高增益性質(zhì)。圖65示出一種用于確定給定脈沖的CSD值的計算有效方法。CSD閾值可作為熒光發(fā)射脈沖的峰值高度的函數(shù)被確定。特別是，它可基于熒光發(fā)射脈沖的平均峰值高度被確定。CSD閾值被維持在來自于活的對準(zhǔn)細(xì)胞的脈沖峰值的約25%落在閾值或者其以下的點處。因此，在基于連續(xù)峰值高度分布分揀的過程中CSD閾值被動態(tài)調(diào)節(jié)(即，相對于平均峰值高度)。例如，閾值可基于峰值高度的加權(quán)連續(xù)平均值(較新的測量提供比較舊的測量更多的加權(quán))。CSD值是通過脈沖上的兩個點的線的斜度。這些點是CSD脈沖閾值和脈沖峰值。這樣，在該實施例中，CSD值僅是在脈沖前沿和CSD閾值的相交部分處的脈沖波形497的斜度的近似值。但是，關(guān)于給定脈沖的其它計算CSD的方法是顯而易見的，如果需要的話，其中一些可提供更精確的CSD值。在另一個實施例中，CSD閾值作為顆粒子群組的CSD特征抽取的CV的函數(shù)被動態(tài)調(diào)節(jié)。例如對于分揀精細(xì)胞，通過從較低水平增加CSD閾值(例如，脈沖檢測閾值)，CSD閾值將達(dá)到使得Y細(xì)胞的CSD的CV大大增加但仍然足夠低以致于X細(xì)胞的CSD的CV的增加遠(yuǎn)低于Y細(xì)胞中的CV增加的水平。當(dāng)一個子群組分散在總CSD分布中時該效果可在CSD分布中被觀察。可通過使得CSD閾值保持在該水平來達(dá)到CSD特征的良好識別。應(yīng)該注意的是，在流式細(xì)胞術(shù)中使用縫隙掃描技術(shù)可增大CSD特征的識別功率。束斑459的形狀可影響脈沖波形497的形狀。例如，使用具有較小寬度W1的束斑459，在樣本顆粒中的局部熒光差異(例如，由于X或者Y染色體在精子核213的中心區(qū)域225中而導(dǎo)致的局部熒光強(qiáng)度差異)對脈沖波形的第一階導(dǎo)數(shù)產(chǎn)生較大的影響。因此，本發(fā)明的一個實施例包括縫隙掃描技術(shù)與CSD特征抽取結(jié)合使用。相反，使用具有太大的束腰(例如，等于或者大于顆粒的直徑)的激光可防止CSD特征有效^f吏用以識別顆粒。聚焦照射束的束腰的寬度的可接受的范圍將取決于多個因素，包括顆粒的尺寸和形狀、被分析的顆粒內(nèi)的染料分布和被識別的顆粒的典型波形脈沖之間的差異量。對于精細(xì)胞，從利用具有小于3微米的束腰的激光激發(fā)牛精細(xì)胞201產(chǎn)生的波形脈沖497進(jìn)行CSD特征抽取如下面所示將工作得纟艮好。當(dāng)然，利用在縫隙掃描部分中描述的任何形式的縫隙掃描進(jìn)行的CSD特征抽取被認(rèn)為在本發(fā)明的該方面的范圍內(nèi)。利用CSD特征大大增加系統(tǒng)的產(chǎn)量，特別對于分揀X-Y精細(xì)胞群組，這是由于它允許更多的對準(zhǔn)的X細(xì)胞的收集。由于在峰值相對于區(qū)域或者上升時間相對于區(qū)域的特征空間中被限定的群組中的重疊，可以約或者大于85。/。的可靠性識別不大于7()o/。的對準(zhǔn)的X細(xì)胞。當(dāng)使用CSD特征時，95%或者更多的對準(zhǔn)的X細(xì)胞可被識別，從而在不使得收集的X細(xì)胞的群組的純度降至所需純度以下的情況下大大增加可,皮收集的活X細(xì)胞的百分比。這在圖66-69中所示的活細(xì)胞數(shù)據(jù)中,皮圖示。CS特征的非線性使得X細(xì)胞被隔離以分揀。在施加在圖68所示的散布圖中CSD上的粗選導(dǎo)致70%的純X區(qū)域群組。當(dāng)雙變量分揀識別用于該區(qū)域和CSD特征空間(圖68)中時，>95%的對準(zhǔn)的乂細(xì)胞可被識別以分揀。圖66-69中的數(shù)據(jù)在四個通道細(xì)胞計數(shù)系統(tǒng)(見下面描述的多通道系統(tǒng))的一個通道上以每秒22000個活細(xì)胞的總細(xì)胞處理量被收集。即使能夠進(jìn)行重合檢測(高純度)，可以至少85%的純度每秒收集超過6000個X細(xì)胞。圖66-69示出當(dāng)用于識別帶X和帶Y精細(xì)胞時的CSD特征的一個優(yōu)點。圖66和67是圖68和69所示的散布圖中限定的特征空間的熒光發(fā)射脈沖的區(qū)域特征的直方圖。在圖68中，CSD特征已經(jīng)將大部分未對準(zhǔn)的和對準(zhǔn)的Y細(xì)胞從散布圖的顯示中移出。這在散布圖的框中留下了70%的純X群組，這是在圖66中的脈沖區(qū)域直方圖中所示的。非CSD識別被示出在圖69中所示的脈沖區(qū)域/上升時間散布圖中。對準(zhǔn)的X細(xì)胞構(gòu)成了相應(yīng)區(qū)域直方圖的30%(圖67)。利用識別的CSD特征可使得大于95。/。的對準(zhǔn)的X細(xì)胞以大于85%的純度被收集。通過比較，可利用右邊的傳統(tǒng)特征空間使得不大于70%的對準(zhǔn)的X細(xì)胞,皮識別。利用CSD相對于脈沖區(qū)域、雙變量識別技術(shù)已經(jīng)完成了幾種活細(xì)胞分揀。圖70是表示設(shè)定在該二維特征空間中的分揀區(qū)域如何用于排除未對準(zhǔn)細(xì)胞和Y細(xì)胞的一個示例。圖70示出設(shè)定在CSD相對于脈沖區(qū)域散布的散布圖上的雙變量分揀區(qū)域。注意分揀區(qū)域如何在高CSD值的區(qū)域特征上降低(CSD從左向右增大并且區(qū)域從底部到頂部增大)并且當(dāng)CSD降至較低的數(shù)值時在區(qū)域特征上上升。在上述CSD相對于脈沖區(qū)域散布的散布圖上設(shè)定的雙變量分揀區(qū)域用于在輸入活細(xì)胞速度為每秒26000個的情況下以大于每秒6000個X細(xì)胞的分揀判定速度分揀X細(xì)胞?；诹魇郊?xì)胞術(shù)重新分析的純度為87%。CSD特征能夠制訂高產(chǎn)量非重合中止(即，重合接受或者高回收)分揀策略。在一些實施例中，脈沖特征可提供接近基線分離以及活X和Y精細(xì)胞的100%的準(zhǔn)確分類。該條件能夠在不中止包含^f皮分類為X和非X(不確定的或者Y)的細(xì)胞的液滴的情況下以很高的速度分揀細(xì)胞。該分揀策略被稱為高回收或者重合接受策略。利用CSD特征進(jìn)行一個試驗來測試其。在四通道流式細(xì)胞計的一個通道上以每秒12000個活X細(xì)胞的輸入速度進(jìn)行重合接受分揀。77。/。的X細(xì)胞完全被對準(zhǔn)，每秒使得4600個X細(xì)胞可能用于分揀。在這些條件下，每秒4300個細(xì)胞被分揀到X細(xì)胞群組中。隨后的純度分析表明在不對死細(xì)胞校正的情況下該分揀的純度大于87%以及在對死細(xì)胞校正的情況下該分揀的純度為89%。緊接著在相同的條件下在該分揀后執(zhí)行高純度重合拒絕檢測分揀。觀察到每秒3500個細(xì)胞的收集速度。純度分析表明在不對死細(xì)胞校正的情況下該分揀的純度為92%以及在對死細(xì)胞校正的情況下該分揀的純度為94%。上述試驗的結(jié)果表明，在以每秒12000個活X細(xì)胞的速度輸入時，可以大于85%的純度收集大于92%的對準(zhǔn)的X細(xì)胞。這表明CSD特征提供所有對準(zhǔn)的X細(xì)胞的95。/。的準(zhǔn)確分類。在這些情況下，細(xì)胞分揀器的產(chǎn)量主要受到正確細(xì)胞排列的限制。圖71示出用于其中左板條對應(yīng)于高回收/重合接受分揀策略(無重合中止策略)以及右邊板條對應(yīng)于高純度/重合拒絕接受分揀策略(重合中止策略)的測試的流式細(xì)胞術(shù)再次分析的一個實施例。左板條(87%的純度)對應(yīng)于在沒有重合中止的情況下每秒4400個X細(xì)胞的輸出。右邊板條來自于在相同條件下完成的分揀，不同之處在于包含污染細(xì)胞的液滴被中止。該分揀的純度為92%。這些分揀說明當(dāng)CSD用于識別時高回收無重合中止分揀是可能的。CSD特征的使用不限于精細(xì)胞或者任何特定種類的精細(xì)胞的分揀。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)上面披露的內(nèi)容可以看出，CSD特征可適于提高在產(chǎn)生具有不同的第一階導(dǎo)數(shù)特征的信號沒吃的任何顆粒群組之間的識別，而與產(chǎn)生這種差異的原因無關(guān)。N.識別在脈沖的特征已經(jīng)被脈沖分析軟件749抽取后，利用由處理器867執(zhí)行的脈沖識別軟件757完成脈沖的識別(例如，分類)，所述脈沖識別軟件757使用諸如BayesMinimumRisk判定規(guī)則的邏輯應(yīng)用。該規(guī)則是允許關(guān)于進(jìn)行不同錯誤分類(例如識別)判定的不同成本的分配(和調(diào)節(jié))的BayesMinimumError判定規(guī)則的變型。BayesMinimumError計算判定邊界763或者判定表面作為等于在特征空間中的群組之間的后驗概率的表面。對于(假設(shè))Gaussian概率分布，該表面一般是二次方的，盡管在某些條件下也可是線性的(或者能夠很接近超平面)。首先通過計算在特征空間中的給定點的后驗概率(一般根據(jù)類別調(diào)節(jié)概率密度或者利用Bayes規(guī)則的已知的/假設(shè)的后驗概率)接著為具有最高的后驗4既率的群組選擇類別標(biāo)記來進(jìn)行分類(例如識別)判定。BayesMinimumRisk包括當(dāng)需要分配造成不同分類錯誤的不同成本(例如，將"Y"細(xì)胞分類成"X"細(xì)胞比將"X"細(xì)胞分類成"Y"細(xì)胞可能成本更高)時允許調(diào)節(jié)判定邊界763的因素。在本申請中，這允許在分揀的樣本純度和回收之間的權(quán)衡。在該判定規(guī)則中，將每一個可能的分類標(biāo)記分配給特征空間中的一個點的"危險"皮計算為在每一個群組中的全體成員的后驗概率乘以關(guān)于被分類成在每一個其它群組中的當(dāng)前群組給定的真實的全體成員的成本的總和。表6概括了BayesMinimumError分類的程序。注意的是，對于多變量Gaussian密度，獲得后驗概率的Bayes規(guī)則的評估可被減小到表VII中所示的二次函數(shù)的評估，已知的是，系數(shù)W、w和w。為在表3中給出的識別算法參數(shù)初始化程序中計算的。圖74示出利用該程序分類的一個圖表示例。左邊的示意圖是兩個群組1和2以及分離群組的判定邊界763的示意圖。右邊的直方圖示出限定X和Y區(qū)域的兩組同心橢圓，其中判定邊界763為由橢圓的相交部分限定的線。算法BayesMinimumError熒光脈沖分類(識別)輸入對于每一個分類群組i的浮動pulseFeatures的矢量浮動W;的矩陣、浮動Wi的矢量、浮動Ww_輸出整數(shù)classLabel程序1.對于每一個分類/群組i，計算識別函數(shù)gi的數(shù)值gi=pulseFeatures*pulseFeatures+pulseFeatures+Wi02.對于每一個分類/群組i，計算危險函數(shù)riskj的數(shù)值初始化riskj-0，接著對于每一個分類/群組j:riskj=risk;+costy*gi3.找到j(luò)s丄=min(riski)Vi。返回classLabel叫并且退出。166表VII.利用BayesMinimumError判定規(guī)則的數(shù)字熒光脈沖分類(識別)的概述對于附加的加強(qiáng)，在數(shù)字熒光脈沖的分類中采用附加的步驟。計算特征空間中的脈沖與通過BayesMinimumError分配的群組的Mahalanobis距離，如果大于一個閾值，那么該脈沖被標(biāo)記為"不被分類，，或者其它一些表明其不可能是任何已知的群組中的一員的適合的指示。圖75示出該附加步驟的效果，再次使用了根據(jù)數(shù)字獲得的熒光脈沖數(shù)據(jù)計算的特征。一般地，A/D轉(zhuǎn)換器689將來自于光檢測器117的模擬輸出信號701轉(zhuǎn)換成表示特征A或者特征B(例如，X或者X)的相應(yīng)的數(shù)字信息707。數(shù)字信號處理器865從數(shù)字信息中抽取特征并且處理器873為分揀系統(tǒng)提供作為被抽取的特征的函數(shù)的分揀信號853。O.分揀分類和液滴同步第四個分揀處理器873管理液滴分類、執(zhí)行分揀策略并且輸送與分揀所選擇的液滴同步的分揀觸發(fā)脈沖853。該處理器873接收來自于識別處理器867的細(xì)胞分類信息并且使得該信息與液滴產(chǎn)生時鐘703相關(guān)聯(lián)(即，使得分揀到群組中被分類的顆粒的位置與液滴的形成一致)。它確定在液滴中是否存在重合并且管理基于預(yù)定分揀策略的重合。它維持所有細(xì)胞分類的FIFO和設(shè)定在當(dāng)實時觀察顆粒時和當(dāng)顆粒到達(dá)最后達(dá)到的液滴時之間的校正延遲的液滴分揀判定。它將對于每一個分揀選擇的液滴產(chǎn)生極性和振幅適合的適當(dāng)定時的輸出脈沖853。一般地，A/D轉(zhuǎn)換器689將來自于光檢測器117的模擬輸出信號701轉(zhuǎn)換成表示特征A或者特征B(例如，X或者X)的相應(yīng)的數(shù)字信息707。數(shù)字信號處理器867識別表示特征A或者表示特征B(例如，X或者X)的數(shù)字信息707并且為分揀系統(tǒng)119提供作為識別的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號853。一般地，數(shù)字信號處理器863、865、867、873包括用于檢測由數(shù)字信息表示的波形脈沖的指令、用于在檢測的脈沖中抽取特征的指令和用于識別作為它們的抽取特征的函數(shù)的檢測脈沖的指令。另外，處理器包括用于限定在表示特征A的抽取特征和表示特征B的抽取特征之間識別的判定邊界763的指令。另外，處理器863、865、867、873可相對于表示特征A的抽取特征和相對于表示特征B的抽取特征作為下列至少一個因素的函數(shù)調(diào)節(jié)判定邊界763的相對位置，這些因素包括這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。例如，處理器可移動判定邊界763以包括小于群組1和大于群組2，或者反之亦然，基于特定樣本的輸出或者基于所需輸出(例如，如上面關(guān)于調(diào)節(jié)不同成本的判定邊界的BayesMinimumRisk判定規(guī)則)。P.漂移補(bǔ)償已知的是，對應(yīng)于熒光發(fā)射的波形脈沖可隨時間變化或者隨時間表現(xiàn)偏移(由于著色差異、溫度變化、樣本老化和/或其它因素，例如)，該系統(tǒng)可使用限定動態(tài)閾值的漂移分析軟件761(圖72),所述動態(tài)閾值變化以補(bǔ)償任何漂移效果。特別是，對于信號背景特征中的任何緩慢的變化，軟件747所使用的脈沖檢測闊值可被調(diào)節(jié)，并且軟件757的識別算法可調(diào)節(jié)判定邊界763(圖74)以說明特征空間中的群組中的任何漂移。對于脈沖檢測軟件747所使用的算法，漂移補(bǔ)償軟件761通過基于在終止于當(dāng)前樣本的給定長度的樣本(例如IO-IOO個樣本)的移動窗內(nèi)計算的樣本統(tǒng)計評估更新背景平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差評估來完成漂移補(bǔ)償。已知相對于數(shù)據(jù)獲得頻率的慢(假設(shè)的)漂移速度，對于每一個樣本，背景統(tǒng)計無需被更新；相反，背景統(tǒng)計更新可周期性發(fā)生(例如，每6秒；見參考標(biāo)記795和圖82)。另外，窗可包含小于l的加權(quán)以在統(tǒng)計計算中提供相對于較新的樣本對較舊的樣本去加權(quán)的"忘記，，速率。圖76示出在沒有和具有"忘記，，速率的情況下在移動窗內(nèi)的統(tǒng)計(平均值)計算的概念。與檢測算法漂移補(bǔ)償類似，脈沖識別軟件757所使用的識別算法通過在特征空間中的群組的2階統(tǒng)計的周期性更新來實現(xiàn)漂移補(bǔ)償。但是，在這種另夕卜，可使用非l的加權(quán)以包括"忘記，，速率。圖77示出將該技術(shù)用于特征空間中的群組的效果的概念圖。圖77示出對于特征空間中的群組統(tǒng)計的漂移補(bǔ)償?shù)囊粋€示例。黃色表示群組l(X)、綠色表示群組2(Y)，菱形表示分類平均評估(具有漂移的放大圖示)，塊箭頭表示在恒定(T橢圓的變形中反映的群組協(xié)方差評估中的變化。一般地，數(shù)字信號處理器863使用分析數(shù)字信息的檢測閾值，該閾值是在終止于當(dāng)前樣本的移動窗內(nèi)計算的取樣隨時間變化的輸出信號的背景平均評估和標(biāo)準(zhǔn)偏差的函數(shù)。O.全數(shù)字技術(shù)相對于模擬技術(shù)的優(yōu)點使用全數(shù)字分揀系統(tǒng)的一個主要優(yōu)點是，沒有關(guān)于脈沖檢測和分析的"停滯時間"。對于模擬系統(tǒng)，總有在脈沖發(fā)生和檢測后重新設(shè)定電子器件所需的有限的"開關(guān)時間"。該時間通常為至少l微秒。由于數(shù)字系統(tǒng)俘獲連續(xù)流，因此它實際上沒有停滯時間。數(shù)字系統(tǒng)的另一個優(yōu)點是圍繞分揀分類脈沖及時前后觀察的能力。一般地，數(shù)字信號處理需要5個液滴時段用于分析。優(yōu)選，在液滴照射115和液滴信息107之間的時間延遲為7個液滴時段。這使得該系統(tǒng)基于由特定顆粒的特征表示的它將污染可用的群組的概率以及基于特定顆粒與另一個分類顆粒的接近程度對特定顆粒進(jìn)行分類。作為一個示例，分揀處理器873可拒絕觀察到的具有50。/。的概率為活X細(xì)胞的顆粒，而分揀處理器873可接受觀察到的當(dāng)該顆粒與觀察到的具有95%的概率為活X細(xì)胞的第二顆粒相符的具有50。/。的概率為活X細(xì)胞的顆粒。R.模擬細(xì)胞分析還預(yù)見到，來自于光檢測器的隨時間變化的輸出信號可被模擬電路819處理，諸如場可編程門陣列，其成本低于數(shù)字細(xì)胞分析器。圖42是可作為本發(fā)明所涉及的系統(tǒng)的一部分所使用的模擬細(xì)胞分析器的一個實施例的框圖。圖53圖示了模擬分析。設(shè)定閾值以基于脈沖高度產(chǎn)生觸發(fā)脈沖。該閾值斷開接通模擬積分器的積分窗以積累電荷。該窗在固定時段內(nèi)保持?jǐn)嚅_狀態(tài)或者直至脈沖振幅降至觸發(fā)脈沖閾值以下。這樣，僅在積分窗內(nèi)的脈沖部分的區(qū)域用于相對熒光測量。參見圖42，光檢測器l17的輸出701被提供給使得與液滴時鐘703同步的輸出信號701積分的積分器825。積分信號被提供給寬度/區(qū)域比較器827以將積分信號的水平與限定脈沖的閾值水平進(jìn)行比較(例如，脈沖可被定義為具有某一閾值的40%的積分信號)。動態(tài)閾值計算器829的功能類似于上述的漂移補(bǔ)償，它監(jiān)測積分信號水平并且它改變閾值水平，其中寬度/區(qū)域比較器用作平均積分信號水平的變化的函數(shù)。脈沖識別信號被提供給窗比較器837以確定脈沖區(qū)域在可接受的范圍內(nèi)。脈沖識別信號也被提供給脈沖寬度和觸發(fā)邏輯電路839以確定脈沖寬度在可接受的范圍內(nèi)。如果區(qū)域和寬度是可接受的，邏輯為表示分揀判定841的I/0控制器843提供觸發(fā)信號。這樣，窗比較器837和脈沖寬度和觸發(fā)邏輯電路839對于細(xì)胞是否應(yīng)該被分類為X細(xì)胞或者X細(xì)胞作出判定。1/0控制器843為分揀控制器板847提供以X或者X信號的形式的分揀判定841。1/0控制器843還包括用于連接PC735的通用串行總線(USB)接口849，并且可具有用于連接其它通道的從屬控制器845的I/0端口。模擬細(xì)胞分析器還包括用于為寬度/區(qū)域比較器、窗比較器和脈沖寬度和觸發(fā)邏輯編程的接合測試存取組(JTAG)端口833。還可預(yù)見的是，模擬細(xì)胞分析器可與數(shù)字細(xì)胞分析器705同時使用。例如，模擬分析器可用于調(diào)節(jié)由數(shù)字分析器使用的電壓閾值。另一方面，數(shù)字分析器可用于識別脈沖的各個特征并且該特征信息可用于配置模擬細(xì)胞分析器，特別是如果它以門陣列的形式實現(xiàn)?？刂撇呗砸话愕兀⑻幚砥?31被編程以執(zhí)行能夠在處理量和/或所需的顆粒損失方面使得系統(tǒng)1的效率達(dá)到最佳以符合分揀產(chǎn)品的任何成本要求的控制和分揀策略。例如，這可包括平衡至少一個收集的群組的高純度的需要和從,皮分揀的樣本回收所希望顆粒的至少最小百分比的需要。達(dá)到這樣一個平衡是重要的，特別是在成本和收益率是重要的考慮因素的商業(yè)應(yīng)用的范圍內(nèi)。因此，微處理器131執(zhí)行控制策略，所述控制策略是控制諸如流體輸送量和/或分揀參數(shù)的系統(tǒng)變量的一系列指令和/或算法。微處理器還執(zhí)行一個分揀策略，分揀策略限定用于確定如何分揀每一個顆?；蛘哳w粒組的判定方法。每一個特定的控制策略可使用一個或者多個分揀策略。各個分揀策略可根據(jù)諸如所選擇的控制策略、顆粒檢測系統(tǒng)和/或關(guān)于流體流中的顆粒分布的信息的因素^^f吏用。關(guān)于顆粒分布，圖78示出包含顆粒示例性分布的流體流。在該特定示例中，利用與上述噴嘴類似的噴嘴形成流，所述流包含具有不同特征A和B(例如，X和Y精細(xì)胞)的顆粒的混合物。如圖所示，細(xì)胞通常是在一列中一個跟著另一個，可被看作包括連續(xù)的顆粒組。這些組包括每一個包含具有特征A(例如，表示活X精細(xì)胞)的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個包含具有特征B(例如，表示活Y精細(xì)胞、更具體的，非活X細(xì)胞的精細(xì)胞(~X)，諸如Y細(xì)胞、或者死X或者Y細(xì)胞)的一個或者多個顆粒的第二顆粒組以及每一個包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒(例如，一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個X精細(xì)胞)的第三顆粒組。第三顆粒組下面也被稱為"重合，，顆粒組。無論一個特定顆粒4皮認(rèn)為自身構(gòu)成一組或者另一組的一部分都將主要取決于其空間位置和/或相對于相鄰顆粒的間隔。例如，在液滴分揀系統(tǒng)中，各個顆粒組將由液滴中的顆粒限定。在其中激光用于除去(殺死或者破壞)所選擇的顆粒組以提供具有所需含量的收集的群組的光破壞分揀系統(tǒng)中(如在下面的"光破壞分揀"系統(tǒng)段落中描述的)，各個顆粒組將由顆粒的空間接近度限定，即，顆粒之間的空間間隔是否足以能夠?qū)︻w粒進(jìn)行精確的分類和/或能夠在不除去一個或者多個所需顆粒的情況下利用激光除去一個或者多個不需要的顆粒。類似地，在其中包含所選擇的顆粒的流的部分被轉(zhuǎn)向以提供具有所需含量的收集的群組的流體切換分揀系統(tǒng)中(如在下面的"流體切換分揀"系統(tǒng)段落中描述的)，各個顆粒組將由顆粒的空間接近度限定，即，顆粒之間的空間間隔是否足以能夠?qū)︻w粒進(jìn)行精確的分類和/或使得所選擇的顆粒轉(zhuǎn)向。從上述內(nèi)容中可以觀察到，提供給不同顆粒組的分揀判定可被改變，取決于系統(tǒng)的所需結(jié)果或者處理量。例如，在液滴分揀系統(tǒng)中，所用的分揀策略可取決于"重合，，液滴的處理，即，包含第三顆粒組的液滴。例如，在這里所述的流式細(xì)胞術(shù)液滴分揀系統(tǒng)和方法中對牛精細(xì)胞的處理中，為了增強(qiáng)在至少一個收集的群組中的x精細(xì)胞的數(shù)量，可優(yōu)選使用這樣一種策略，其中包含x精細(xì)胞的每一個重合液滴被接受和分揀好像它僅包含一個x精細(xì)胞，即使該液滴也可包含一個x精細(xì)胞(重合接受策略)。另一方面，為了增強(qiáng)在所述群組中收集的x精細(xì)胞的純度，可優(yōu)選拒絕包含x精細(xì)胞的每一個重合液滴即使該液滴也可包含一個x精細(xì)胞(重合拒絕策略)。一般地，如下面所述的，具有許多可用于使得顆粒的處理量最大化的控制策略以及許多可與每一個特定控制策略結(jié)合使用的分揀策略?？衫昧魇郊?xì)胞術(shù)使得策略應(yīng)用到各個分揀技術(shù)，例如液滴分揀、光破壞分揀和流體切換分揀。另外，上述策略可用于根據(jù)顆粒的任何所需特征分揀任何類型的顆粒。根據(jù)一個實施例，微處理器控制作為系統(tǒng)的其它變量的函數(shù)的流體輸送系統(tǒng)輸送包含顆粒的流體的速度。例如，微處理器可作為所需輸出結(jié)果的函數(shù)控制流體輸送速度。由于微處理器確定每一個顆粒的身分并且確定其是否涉及至少一個收集的群組，因此微處理器可通過改變控制策略和/或通過改變分揀策略確定和控制輸出結(jié)果。所需輸出結(jié)果通常可被定義為下列至少一個(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度("高回收")；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量("高純度")。作為另一個示例，系統(tǒng)可使用基本恒定的流體輸送速度，并且微處理器可作為所需輸出結(jié)果的函數(shù)控制分揀參數(shù)。在該后一個示例，所需輸出結(jié)果通?？杀欢x為(1)在至少一個收集的群組中的顆粒的純度和(2)可用于流中但不被包括在所述群組中的所需顆粒量("恒定流速，，)的結(jié)合。一般地，假設(shè)當(dāng)分揀兩個群組時被識別的細(xì)胞可具有成為一個群組或者另一個群組的一部分的50/50的概率。但是，還可以預(yù)見到，未被識別的細(xì)胞可能實際上具有除了成為一個群組或者另一個群組的一部分的50/50的概率以外的其它一些概略。這其它的概略可由實驗分析或者其它關(guān)于被分揀的樣本的特征來確定。下面詳細(xì)討論幾個不同的控制策略。A.高回收控制策略一種控制策略可被稱為"高回收"控制策略。該策略的目的是，使得被分揀到所需顆粒的群組中的所需顆粒的數(shù)量達(dá)到最大，只要群組的純度為可接受的純度或者在其上。按照該策略，上述第一顆粒組被分揀到所需顆粒的群組中，這是由于這些組中的每一個都包含具有所需特征A的一個或者多個顆粒。第三顆粒組也被分揀到所需顆粒的群組(重合接受)中，這是由于這些組中的每一個也都包含具有所需特征A的一個或者多個顆粒，雖然附有具有特征B的一個或者多個顆粒。另一方面，第二顆粒組被拒絕(即，不被分揀到所需顆粒的群組中)，這是由于它們不包含具有所需特征的顆粒。為了利用該策略使得處理量達(dá)到最大，微處理器增大流體輸送，只要收集的群組的純度為可接受的純度或者在其上。反過來說，流體輸送速度增大，只要所需顆粒的群組的污染的可能水平為可接受的水平或者在其上。作為一個示例，考慮用于分揀在圖78的流體流中的X和Y精細(xì)胞的高回收控制策略的使用。所需的結(jié)果可是將所有X細(xì)胞分揀到X細(xì)胞的群組中，只要群組保持在可接受的純度或者其上，例如，只要X(X+Y)大于85。/。或者其它一些可接受的水平。為了達(dá)到該結(jié)果，第一顆粒組;陂分揀到X細(xì)胞群組中，這是由于它們僅包含一個或者多個X細(xì)胞。第三顆粒組也被分揀到X細(xì)胞群組中，這是由于它們也包含一個或者多個X細(xì)胞，即使它們也可包含Y或者(~X)細(xì)胞。第二顆粒組被分揀到其它一些群組中，這是由于它們不包含一個或者多個X細(xì)胞。在該示例中，流體輸送系統(tǒng)輸送包含顆粒的流體的速度可持續(xù)增大，只要X細(xì)胞的群組的純度大于85。/。。相反，如果X細(xì)胞的群組的純度低于85%,流體輸送速度減小。在液滴分揀系統(tǒng)的范圍內(nèi)，從Poisson's等式中可以得知，對于任何給定的液滴發(fā)生速度，當(dāng)細(xì)胞輸送速度增大時多細(xì)胞液滴的數(shù)量將增大。換言之，增大包含細(xì)胞的流體的輸送速度將增大多細(xì)胞液滴的數(shù)量。因此，如果使用重合接受分揀策略并且包含第三顆粒組的重合液滴被分揀到所需顆粒的群組中，增大流體的輸送速度將導(dǎo)致被收集的群組的純度減小，這是由于流體的輸送速度較高，更多的重合液滴被產(chǎn)生和收集。圖79示出對于兩(2)顆粒流體的該結(jié)果以使100%的所需顆粒被俘獲。如圖所示，以很低的流體輸送速度(沿著x軸的FDR)，所導(dǎo)致的收集的群組的純度(y軸)很高，這是由于極少的包含第三顆粒組的重合液滴被產(chǎn)生和收集。當(dāng)流體輸送速度增大時(FDR沿著x軸向右邊增大)，所產(chǎn)生的重合液滴的百分比增大，使得更多的重合液滴被收集和減小可用群組的純度(沿著y軸)。在該所示的特定的示例中，在80%的純度下，流體輸送速度為30K顆粒/秒。使用高回收策略的結(jié)果可是戲劇性的，如由其中利用液滴分揀方法使得X和Y精細(xì)胞被分揀的一個簡單示例所示。假設(shè)，例如液滴以60K/sec的速度產(chǎn)生，并且精細(xì)胞以30K/sec的速度被輸送到詢問位置。根據(jù)Poisson，s等式，如果所有包含X細(xì)胞的液滴被分揀到X細(xì)胞的群組中，包括包含X和Y細(xì)胞的重合液滴，每秒約15000個X細(xì)胞將被收集。收集的群組將包含2600個Y細(xì)胞，群組中關(guān)于X細(xì)胞的純度減小到85.2。/。。但是，收集的X細(xì)胞的數(shù)量(15000)表示相對于重合液滴不被收集的策略的大大增大，如在下面描述的高純度策略中或者模式中。在高純度模式中，以40K/sec的液滴頻率和40K/sec的細(xì)胞輸送速度操作(比在上述的高回收描述示例中的大10K/sec)，每秒僅約11800個X細(xì)胞將被收集，或者比在高回收策略中少3800個X細(xì)胞。例如，當(dāng)使用高純度策略時，約損失或者浪費9200個X細(xì)胞，這是由于重合液滴沒有,皮分揀在X細(xì)胞的群組合作。因此，如果小于100%的純度是可接受的，優(yōu)選可使用高回收模式以增大被收集的X細(xì)胞的數(shù)量或者反過來說，減小X細(xì)胞損失的數(shù)量。概括地，在利用重合接受分揀策略的高回收控制策略中，顆粒輸送速度相反地涉及所需顆粒的收集群組的純度(有時被稱為"可用"的群組)。B.高純度控制策略第二種控制策略可被稱為"高純度"控制策略。該策略的目的是保持收集的群組相對于具有所需特征的顆粒的純度在高水平，只要在收集的群組中的所需顆粒的量相對于可用于流中的所需顆粒的總數(shù)在可接受的量或者在其以上(即，只要在流中的沒有辟皮收集的所需顆粒的量保持在可接受的量以下)。按照該策略，上述第一顆粒組被分揀到所需顆粒的群組中，這是由于這些組中的每一個包含一個或者多個具有所需特征A的顆粒，并且由于這些組包含沒有污染的顆粒。另一方面，第二和第三顆粒組被分揀到一個或者多個"不可用"的群組(重合拒絕)中，這是因為它們包含污染的顆粒(即，特征B顆粒)。為了利用該"高純度"策略使得處理量達(dá)到最佳，微處理器增大流體輸送速度，只要被分揀到可用的群組中的所需顆粒的量相對于可用于該流中的所需顆粒的總數(shù)保持在可接受的量或者在其以上。作為一個示例，考慮用于分揀在圖78的流體流中的X和Y精細(xì)胞的高純度控制策略的使用。所需的結(jié)果可是將所有X細(xì)胞分揀到X細(xì)胞的群組中，只要從流收集的X細(xì)胞的量保持在可接受的量或者在其以上，例如，至少60%。為了達(dá)到該結(jié)果，第一顆粒組被分揀到可用的群組中，這是由于它們僅包含一個或者多個X細(xì)胞。另一方面，第二和第三顆粒被分揀到一個或者多個不可用的群組中，這是由于它們包含一個或者多個污染(x)細(xì)胞。在該示例中，流體輸送系統(tǒng)輸送包含顆粒的流體的速度可持續(xù)增大，只要作為已經(jīng)被分揀的x細(xì)胞的總可用量的百分比的在可用群組中收集的X細(xì)胞的量保持在60。/。或者以上。相反，如果沒有被收集在可用群組中的X細(xì)胞的量大于被分揀的X細(xì)胞的總可用量的40%，流體輸送速度減小。如上所述，在液滴分揀系統(tǒng)的范圍內(nèi)，已知增大流體輸送速度將增大多細(xì)胞液滴的數(shù)量，以及包含第三顆粒組的重合液滴的數(shù)量。由于當(dāng)使用重合拒絕分揀策略時重合液滴沒有被分揀到收集的X細(xì)胞的群組中，這意味著，增大流體輸送速度將導(dǎo)致在不可用的群組損失的活X細(xì)胞的量增大。圖80示出對于兩(2)顆粒流體的該結(jié)果以使可用的群組具有所需顆粒的100%純度。如圖所示，以很低的流體輸送速度(沿著x軸的FDR)，在可用群組中的所需顆粒的百分比很高，這是由于極少的重合液滴被產(chǎn)生和拒絕。當(dāng)流體輸送速度增大時(FDR沿著x軸向右邊增大)，包含第三顆粒組的重合液滴的百分比增大并且更多的這樣的組被拒絕。這減少了被分揀在可用群組中的所需顆粒量相對于在可用在流中的所需顆粒的總量(即，流中的被收集在可用的群組中的所需顆粒的百分比)。在所示的特定實施例中，流體輸送速度為40K顆粒/秒，并且75%的所需顆粒被分揀到可用的群組中。概括地，在利用重合拒絕分揀策略的高純度控制策略中，顆粒輸送速度相反地涉及在收集的群組中所需顆粒的百分比(即，在可用的群組中的所需顆粒的高純度)。C.恒定流速控制策略第三種控制策略可被稱為恒定流速控制策略。在該策略中，微處理器保持流體輸送速度恒定(或者在恒定范圍內(nèi))并且改變收集的(或者拒絕的)重合液滴的百分比，只要至少一個收集群組的純度在可接受的水平或者在其上以及只要在該群組中的所需顆粒的量相對于已經(jīng)處理的所需顆粒的總量在可接受的水平或者在其上。反過來說，流體輸送速度是恒定的并176200910146867且接受的(或者拒絕的)重合液滴的百分比改變，只要可用群組的污染的可能水平在可接受的純度水平或者其下并且只要損失于除了所述(可用)的群組以外的群組的所需顆粒的可能的量在可接受的量或者其下。作為一個示例，考慮用于分揀如圖78中所示的流體流的恒定流速控制策略的使用。所需的結(jié)果可是將X細(xì)胞分揀到純度至少為85%的可用群組中并且收集流中的至少60。/。的X細(xì)胞以使不大于40。/。的X細(xì)胞被分揀到不可用的群組中。在該示例中，流體輸送系統(tǒng)輸送顆粒的速度保持恒定并且收集或者拒絕第三顆粒組(重合組)的百分比將被改變，只要可用群組關(guān)于X細(xì)胞的純度等于或者大于85。/。，并且只要被分揀到不可用的群組中的X細(xì)胞的百分比小于40%以使;故分揀到可用群組中的所需顆粒的百分比等于或者大于60%(可變的重合接受分揀策略)。當(dāng)接受的第三顆粒組的百分比增大時，可用的群組的純度減小，但被分揀到不可用的群組中的所需顆粒(例如X細(xì)胞)的量減小。相反，當(dāng)接受的第三顆粒組的百分比減小時，可用的群組的純度增大，但被分揀到不可用的群組中的所需顆粒(例如X細(xì)胞)的量增大。如上所述，從Poisson's等式中可以得知，對于恒定的流體(細(xì)胞)輸送速度，多細(xì)胞液滴的數(shù)量(從而包含第三顆粒組的重合液滴的量)恒定。由于在該控制策略中重合液滴的數(shù)量恒定，因此被分揀到可用的群組中的重合液滴的百分比將影響可用群組的純度和被分揀到不可用的群組中而被浪費的X細(xì)胞的量。這是由于在被接受并且被分揀到收集的不可用群組中的重合液滴中的不希望的Y(或者X)細(xì)胞的百分比相反地涉及被拒絕從而沒有被分揀到收集的可用的群組中的重合液滴中的X細(xì)胞的百分比。圖81示出對于兩(2)顆粒流體采用可變重合拒絕分揀策略的在這里所述的流式細(xì)胞術(shù)液滴分揀系統(tǒng)和方法中的恒定流體輸送速度控制策略。如圖中所示，線OL表示拒絕的重合液滴的百分比(X軸)與接受的重合液滴的百分比(Y軸)之間的相反關(guān)系。當(dāng)接受的重合液滴的百分比很低時，拒絕的重合液滴的百分比很高。相反，接受的重合液滴的百分比很高時，拒絕的重合液滴的百分比很低。線OL表示這種反關(guān)系并且表示在給定的恒定顆粒流速下的可變重合接受分揀策略的操作線。在圖81中沿著操作線OL的點P處，可用的群組的純度是一個給定的百分比，取決于顆粒流速，例如85%的純度。當(dāng)接受的重合液滴的百分比沿著操作線OL增大(向左和朝上)時，被分揀到可用群組中的不需要的顆粒的數(shù)量增大并且純度降至85%以下，這可能是不能接受的。當(dāng)可接受的重合液滴的百分比沿著操作線OL減小時(向右和朝下)，純度達(dá)到85%以上并且是可接受的。在沿著操作線OL的點LL處，75%的重合液滴被拒絕(即，被分揀到不可用的群組中)以使被分揀到不可用的群組中而被浪費的所需顆粒的百分比是基于顆粒輸送速度的給定的百分比，例如，40%。當(dāng)被拒絕的重合液滴的百分比沿著操作線Ol增大(向右和朝下)時，被分揀到被可用的群組中的所需顆粒的百分比減小(例如，小于60%)，這可能是不能接受的。當(dāng)被拒絕的重合液滴的百分比沿著操作線Ol減小(向左和朝上)時，被分揀到被可用的群組中的所需顆粒的百分比增大(例如，大于60%)并且是可接受的。這樣，根據(jù)本發(fā)明的該方面，對于釆用可變重合接受分揀技術(shù)的恒定流速控制策略，微處理器可操作該系統(tǒng)使得被接受的和拒絕的重合液滴的百分比在如箭頭OR所示的點Pl和LL之間的操作范圍中變化。注意的是，操作范圍OR可包含更多的或者更少的操作線，取決于所需顆粒相對于不可用的群組的不純和損失的容限水平。概括地，在利用可變重合接受分揀策略的恒定流速控制策略中，被接受的第三顆粒組的百分比相反地涉及可用的群組的純度以及相反地涉及通過4皮分揀到不可用的群組而浪費的所需顆粒的量。D.控制策略的概括下面的表概括了上述控制策略?？刂撇呗愿呋厥崭呒兌群愣魉俦豢刂茀?shù)流體輸送速度流體輸送速度分揀錄控制參數(shù)群組的純度所需顆粒在群組中的量群組的純度和所需顆粒在群組中的量分揀策略重合接受重合拒絕可變重合接受X/Y分揀策略收集X液滴和X+X液滴；拒絕X液滴收集X液滴；拒絕X+X液滴；拒絕X液滴收集X液滴；改變收集的X+X液滴的百分比；拒絕X液滴定義流體輸送速度增大只要群組中關(guān)于x顆粒的純度在可接受的水平或者在其上流體輸送速度增大只要在可用的群組中的所需顆粒的量相對于在流中的X顆粒的總量在可接受的量或者在其上重合液滴在群組中的百分比增大只要群組中關(guān)于X顆粒的純度在可接受的水平或者在其上；為了繼續(xù)操作，在可用的群組中的所需顆粒的量相對于在流中的x顆粒的總量在可接受的量或者在其上相反的定義流體輸送速度增大只要可用群組的污染的概率在可接受的純度水平或者在其下流體輸送速度增大只要所需顆粒在不可用的群組中量的損失的概率在可接受的量或者在其下流體輸送速度增大只要可用群組的污染的概率在可接受的純度水平或者在其下以及只要所需顆粒在不可用的群組中量的損失的概率在可接受的量或者在其下所需的結(jié)果大于最小的可接受的純度；例如，大于85°/。的純度大于最小的可接受的量；例如，大于被俘獲的所需顆粒的60%(小于40%的所需顆粒損失)大于最小的可接受的純度和大于最小的可接受的量；例如，大于85%的純度以及大于#皮俘獲的所需顆粒的60%(小于40%的所需顆粒損失)179相關(guān)地，利用上述控制策略中的一個獲得的分揀的樣本可與第二樣本結(jié)合使用以得到具有所需特征的最終(例如，商業(yè))樣本。例如，才艮據(jù)用于生產(chǎn)100%的純度的群組的高純度策略分揀的樣本可與80%純度的被分揀的相同量的群組結(jié)合以生產(chǎn)純度為90%的最終樣本?；蛘邔τ诟呒兌鹊姆謷膭游锞?，分揀的精子的等分量可與未分揀的精子的等分量結(jié)合以便以低于利用上述分揀方法的任何一種分揀整體精子量的成本生產(chǎn)所需純度的最終樣本?？刂撇呗缘纳厦婷枋黾僭O(shè)精確識別和包括每一個重合液滴的每一個液滴的分揀。實際上，由于許多原因，100%的準(zhǔn)確率是不可能。為了使得污染最小化，因此，優(yōu)選可拒絕不能確定分類為屬于所需群組的顆粒。另一方面，如果在某些所選擇的概率內(nèi)某些顆?？杀蛔R別和分類在所需群組中(例如，對于精細(xì)胞大于50%)。優(yōu)選可將顆粒分類為屬于所需群組以使它們不損失于不可用的群組。這樣，如上所述，諸如精細(xì)胞的顆粒對于基于這樣的顆粒屬于可用群組中的概率分揀到所需細(xì)胞的群組中可被接受或者拒絕。上面的表和說明書中所用的術(shù)語"可用的"和"不可用的，，僅是便于使用并且沒有以任何方式被限定。這樣，"可用的"群組包括任何"第一，，群組，無論如何或者是否使用，并且一個"不可用的"群組包括不同于可用的群組的任何"第二"群組，無論如何或者是否使用。類似地，"所需的，，群組指的是根據(jù)所選擇的顆粒特征分揀的任何群組。微處理器將其數(shù)字處理軟件構(gòu)成用于處理來自于光檢測器的電信號以根據(jù)顆粒的特征分類顆粒(例如，一般的顆粒和特別是精子顆粒)和獲得關(guān)于如上面參照圖78所述的顆粒分布的信息的系統(tǒng)。另外，微處理器構(gòu)成了響應(yīng)于信號處理軟件作為所獲得的關(guān)于顆粒分布的信息的一個函數(shù)改變流體輸送系統(tǒng)將顆粒輸送到噴嘴系統(tǒng)的速度的控制系統(tǒng)。另外，微處理器構(gòu)成了響應(yīng)于信號處理軟件作為所獲得的關(guān)于顆粒分布的信息的一個函數(shù)改變分揀策略的控制系統(tǒng)。一般地，微處理器構(gòu)成了響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)的控制系統(tǒng)。換言之，微處理器能夠以第一模式操作以改變分揀策略、能夠以第二模式操作以控制流體輸送系統(tǒng)、能夠以第三模式操作以改變分揀策略和控制流體輸送系統(tǒng)，并且可以其它模式操作。當(dāng)以第一或者第三模式操作時，微處理器能夠作為下列因素至少一個的函數(shù)改變輸送流體速度，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所迷流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。收集系統(tǒng)需要收集系統(tǒng)以在它們在偏轉(zhuǎn)板之間通過后收集液滴。常規(guī)細(xì)胞計數(shù)器的收集系統(tǒng)可僅為用于在它們在偏轉(zhuǎn)板之間通過后俘獲在各個液滴流中的液滴的收集容器。類似的常規(guī)收集系統(tǒng)可在本發(fā)明的一些實施例中被使用。但是，在其中噴嘴被定向以向上的角度引導(dǎo)流體流從而為液滴提供水平速度分量的本發(fā)明的實施例中使用常規(guī)的收集系統(tǒng)可能是困難的。一個問題是，液滴在它們開始向下移動之前將沿著它們的弧形軌跡移動一些水平距離以適于落在收集容器中。例如，如果噴嘴在45度至60度的范圍朝上并且液滴以15m/s和20m/s之間的速度離開，液滴在達(dá)到它們的軌跡的頂點并且開始向下移動之前距離噴嘴具有幾米的水平距離。這樣，實驗室的好注意是空間被液滴流占據(jù)。另外，在幾米的范圍內(nèi)，確保液滴落在適合的收集容器中也是困難的。當(dāng)細(xì)胞計數(shù)器的一個或者多個操作條件改變時，液滴流的軌跡可改變(例如，調(diào)節(jié)流體輸送速度導(dǎo)致流體在噴嘴孔的速度中的變化)。液滴流的軌跡的變化將被液滴移動的距離加大。這樣，不導(dǎo)致在比較靠近噴嘴的點處的液滴位置的明顯變化的軌跡變化可導(dǎo)致在離噴嘴較遠(yuǎn)的位置處液滴位置的很大變化。如上所述，本發(fā)明的一些實施例使用對液滴信息的反饋和/或樣本流體輸送系統(tǒng)以使得液滴流不斷地改變其181軌跡。一種方式也可想改變鞘流體被輸送到噴嘴的壓力?？諝饬?、溫度變化和濕度變化還可改變液滴流的軌跡?？筛淖円旱瘟鞯能壽E的任何因素還需要收集容器重新定位以使液滴落入適合的收集容器。相反，在具有方向向下的噴嘴的常規(guī)細(xì)胞計數(shù)器中的液滴流的軌跡不易改變。例如，液滴流具有基本向下的初始速度的情況意味著在孔處的流體速度的變化不導(dǎo)致軌跡中的任何很大的變化。另外，收集容器比較靠近噴嘴，使得收集系統(tǒng)更易于接受液滴流中的軌跡變化。圖83-85示出一個收集系統(tǒng)2201的實施例，收集系統(tǒng)2201可用于收集在本發(fā)明的系統(tǒng)中的分揀液滴。收集系統(tǒng)特別適用于當(dāng)細(xì)胞計數(shù)器噴嘴系統(tǒng)101被定向以向上的角度或者其它任何具有水平分量的角度引導(dǎo)流體流21時的液滴33的收集。當(dāng)液滴在偏轉(zhuǎn)板629之間通過時，它們被分揀到具有不同的孤形軌跡的多個液滴流123、125(例如，兩個)中。如圖84和85中所示，每一個液滴流的軌跡通向兩個液滴截取裝置2203中的一個。如果液滴被分揀到多于兩個液滴流中，需要為每一個附加的液滴流提供獨立的截取裝置。這樣，在本發(fā)明的收集系統(tǒng)中的截取裝置的數(shù)量將取決于液滴被分揀到其中的流的數(shù)量。在示例性收集系統(tǒng)中的每一個截取裝置2203具有橫跨其中一個液滴流的軌跡以使得沿著軌跡移動的液滴偏轉(zhuǎn)到位于每一個截取裝置下方的收集容器2207的沖擊表面2205。該沖擊表面優(yōu)選由柔韌材料制成。在沒有#>特定的理論限定的情況下，相信柔韌材料減緩液滴撞擊截取裝置的表面的沖擊，從而減小對液滴中的顆粒的損傷(例如，精細(xì)胞)。例如，截取裝置可由聚丙烯、聚乙烯或者其它類似的聚合物構(gòu)成。參見圖86和87，截取裝置2203是通過在吸液管2215的球管2213的一側(cè)中切割液滴入口2211(例如，矩形窗)構(gòu)成的。這樣，球管的內(nèi)壁2217的與液滴入口相對的一部分形成橫跨各個液滴流的軌跡的彎曲沖擊表面2205。通常，吸液管的管體用作可將流體從沖擊表面引導(dǎo)到收集容器的引導(dǎo)件2225。參見圖84，截取裝置可被緊固在收集系統(tǒng)框架2227上以使得它們被定位。為了說明液滴流的軌跡中的變化，優(yōu)選能夠調(diào)節(jié)截取裝置的位置。例如，可通過在超過支架2229的圓孔中上下滑動導(dǎo)管來調(diào)節(jié)每一個截取裝置的垂直高度。當(dāng)截取裝置處于所需高度時，調(diào)節(jié)螺釘2231可被抨緊以將其固定在該高度處。支架可與安fc板2223相連，安裝板2223與收集系統(tǒng)框架相連，例如利用調(diào)節(jié)螺釘2235(例如，兩個調(diào)節(jié)螺4丁)。調(diào)節(jié)螺釘2235穿過安a中的水平槽2241以允許截取裝置的橫向調(diào)節(jié)。在調(diào)節(jié)后，調(diào)節(jié)螺釘可被擰緊以將圓形支架固定在所需位置。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，其它多種緊固裝置可,皮使用以調(diào)節(jié)截取裝置的位置。收集容器2207在截取裝置下方被設(shè)置在用于支承收集容器的托架2243中的槽2241中。這樣，如果需要的話，每一個收集容器可在各自的槽內(nèi)移動以使其保持在各自的截取裝置下方的位置。另外，如果需要的話，水池(未示出)可圍繞收集容器被提供以控制收集容器的內(nèi)容物的溫度。參見圖85,在本發(fā)明的一個實施例中，在其中一個截取裝置2247的背面切割離開窗2245(例如，矩形窗)以使得一個或者多個液滴流通過截取裝置。第二截取裝置2249被設(shè)置在離開窗后面以截取通過所述窗的液滴。第二截取裝置的一個示例性進(jìn)入窗的尺寸基本與第一截取裝置的示例性離開窗相同。由于顯而易見的原因，離開窗優(yōu)選遠(yuǎn)小于第一截取裝置的i^A窗。例如，第一截取裝置的一個示例性i^A窗的高為5/8英寸，寬3/8英寸。相反，一個示例性離開窗的高為l/8英寸，寬5/16英寸。在細(xì)胞計數(shù)器的操作過程中，收集系統(tǒng)截取分揀流中的液滴。接著被截取的液滴通過截取裝置2203的導(dǎo)管2225被向下抽并且進(jìn)入收集容器2207中。在其中細(xì)胞計數(shù)器具有用于沿著弧形軌跡引導(dǎo)液滴流的方向向上的細(xì)胞計數(shù)器噴嘴的情況下，例如，截取裝置使得液滴在它們的軌跡上的與液滴可能被常規(guī)收集系統(tǒng)(即，沒有截取裝置的收集系統(tǒng))收集的點相比很靠近噴嘴的點處被截取。沿著它們的弧形軌跡(例如，當(dāng)它們?nèi)匀幌蛏弦苿訒r)較早截取液滴流減小在液滴第一次遇到收集系統(tǒng)時液滴位置變化量。因此，收集系統(tǒng)可容忍比常規(guī)收集系統(tǒng)可容忍的更多的液滴流的軌跡的變化。類似地，液滴基本不可能被空氣流沖擊，這是因為它們對于收集系統(tǒng)的較短的路徑。在移動截取裝置2203比較靠近噴嘴101以增大軌跡變化的容限和移動截取裝置離噴嘴孔較遠(yuǎn)以當(dāng)液滴沖擊截取裝置時減小或者最小化沖擊力之間必須實現(xiàn)平衡，例如通過使得截取裝置定位以使得它們基本在它們的軌跡的頂點處截取液滴流。因此，截取裝置的最佳位置將取決于被分揀的顆粒(例如，精細(xì)胞)的持久性、液滴速度和液滴流軌跡的變化的期望值。例如，在包含牛精細(xì)胞的液滴在噴嘴孔處具有16至20m/s的速度的情況下，截取裝置可位于距離噴嘴孔4-6英寸的范圍內(nèi)。在其中第一截取裝置具有離開窗和第二截取裝置位于第一截取裝置后面的實施例中，例如第一截取裝置可在距離噴嘴4和5英寸的范圍內(nèi)。優(yōu)選，第一截取裝置距離噴嘴4.5英寸。第二截取裝置可在距離噴嘴5和6英寸的范圍內(nèi)。優(yōu)選，第二截取裝置距離噴嘴5，5英寸。其中一個截取裝置2203能夠截取通過另一個截取裝置的離開窗的液滴的構(gòu)造特別在人們不擔(dān)心其中一個被分揀的群組的純度(例如，在用于奶牛養(yǎng)殖而分揀精子的情況下的帶Y染色體的精子)時具有優(yōu)勢。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的是，除了如圖85中所示的分揀流中的液滴以外，具有未知的含量的離散液滴2265的數(shù)量(例如，離散液滴霧)可由細(xì)胞計數(shù)器產(chǎn)生。第一截取裝置應(yīng)該被定位以使被分揀到對于雜質(zhì)具有最大的容限的群組中的液滴流撞擊第一截取裝置的沖擊表面2205并且純度最為重要的流通過離開窗2245以撞擊第二截取裝置的沖擊表面。這樣，大部分離散液滴被收集在包含基本不關(guān)心純度的群組的收集容器2207中，如圖85中所示，并且將不污染純度重要的群組。還通過截取和收集離散液滴，從而避免了每次如果離散液滴脫離收集系統(tǒng)進(jìn)行清潔的需要。與第一截取裝置相反，第二截取裝置僅使得通過較小的離開窗的液滴偏轉(zhuǎn)。這有助于被第二截取裝置收集的群組的純度的保持。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，示例性收集系統(tǒng)可以多種方式被容易地變型。例如，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，能夠構(gòu)成在其下方具有整體形成的(或者連接)收集容器的液滴截取裝置。類似地，盡管如圖83-87中所示的實施例中的截取裝置是變型的吸液管，但應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，截取裝置2203可釆用多種形狀中的任何一種。例如，每一個截取裝置可包括平的或者曲線形片、勺、碗或者其它類似的形狀。唯一的要求是，截取裝置可截取沿著液滴流的各自的軌跡移動的液滴并且使得被截取的液滴轉(zhuǎn)向到收集容器中。但是，利用容易得到的和較低廉的產(chǎn)品(例如，吸液管)構(gòu)成截取裝置的一個優(yōu)點是，在每一個樣本用完后更換和拋棄所使用的截取裝置而不是在樣本使用之間清潔截取裝置時，可是更經(jīng)濟(jì)的。這可有助于減小操作收集系統(tǒng)的成本。收集流體分揀的精子在包含收集流體2301的容器中被收集(圖56和57)。通常，收集流體的目的包括減緩精細(xì)胞與收集容器的沖擊或者為細(xì)胞提供流體支持。與這些考慮因素一致，收集流體可包括緩沖劑或者緩沖溶液和蛋白質(zhì)源。如果被包括，可用于收集流體中的緩沖劑或者緩沖溶液的示例如上面參照樣本收集和稀釋描述的。通常，這些緩沖劑或者緩沖溶液將在0.001M至1.0]\1的濃度中并且具有4.5至8.5的？11,優(yōu)選為7.0。在一個實施例中，收集流體包含包括pH為7.0的0.96。/Q的Dulbecco'sPBS(w/v)的緩沖劑。在另一個實施例中，收集流體包含包括一種在每25毫升的純水中包括(K204g的NaHC03、0.433g的KHCO3和0.473g的C6H8O7.H2O的新陳代謝抑制劑溶液(水中包含0.097摩爾/升的NaHCO3、0.173摩爾/升的KHCO3和0.0卯摩爾/升的C6H807H20)。如果包括的話，蛋白質(zhì)源可是不影響精細(xì)胞的生存力的任何蛋白質(zhì)源并且與所用的特定緩沖劑或者緩沖溶液相容。常用的蛋白質(zhì)源的示例包括牛奶(包括熱均質(zhì)化和撇渣)、牛奶提取物、蛋黃、蛋黃提取物、大豆蛋白和大豆蛋白提取物。這樣的蛋白質(zhì)可在1%(v/v)至30%(v/v)的濃度中被使用，優(yōu)選在10%(v/v)至20%(v/v)之間，優(yōu)選為10%(v/v)。盡管牛奶可與緩沖劑或者緩沖溶液結(jié)合使用，但一般在沒有緩沖劑或者緩沖溶液的情況下使用牛奶，這是由于牛奶本身是一種可起到與緩沖劑或者緩沖溶液相同的作用的溶液。在這樣的情況下，收集流體可包含80%(Wv)至90%(v/v)的牛奶。除了蛋白質(zhì)源以外或者代替蛋白質(zhì)源，收集流體也可包括精液漿。精液漿具有提高精子生存力和游動性以及穩(wěn)定精子膜(從而在精子的收集和存儲過程中防止能育力獲得)的兩個優(yōu)點。Maxwdl等，Reprod.Fert.Dev.(1998)10:433-440。精液漿可來自于與獲得精子樣本相同的動物，或者來自于相同種類不同的動物，或者來自于不同種類的動物。如果被包括在收集流體中，精液漿的百分比通常在0.5%(v/v)至10%(v/v)的范圍內(nèi)。如果與蛋白質(zhì)源結(jié)合使用，諸如蛋黃或者牛奶，精液漿和蛋白質(zhì)源的總百分比在1%(v/v)至30%(v/v)的范圍內(nèi)。在這種情況下，精液漿的百分比將與蛋白質(zhì)源的百分比成反比。因此，在一個實施例中，收集流體包括精液漿。在另一個實施例中，收集流體包含在0.5%(v/v)至10%(v/v)的范圍內(nèi)的精液漿，優(yōu)選包含在4%(v/v)至6。/。(v/v)的范圍內(nèi)的精液漿，優(yōu)選包含5%(v/v)的精液漿。在另一個實施例中，收集流體包含蛋白質(zhì)源和精液漿。在另一個實施例中，收集流體包含精液漿和蛋黃，它們的總百分比在1%(v/v)至30%(v/v)的范圍內(nèi)。另外，收集流體也可包含多種對于精子生存力或者游動性有益的添加物。這樣的添加物的示例包括能量源、抗生素和在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分，每一種已在上面關(guān)于樣本收集和稀釋的描述中被論述。這樣的添加物可根據(jù)上述內(nèi)容凈皮添加到收集流體中。因此，在一個特定實施例中，收集流體包括在水中的0.96。/。Dulbecco'sPBS(w/v)、1%(w/v)的果糖、10%(v/v)的蛋黃，pH為7.0。在另一個實施例中，收集流體還包括10mM的丙酮酸鹽、IOO口M的維生素K或者lmM的硫辛酸?；蛘?，代替收集流體的使用，分揀的細(xì)胞可被收集在包含或者涂有在隨后的低溫保藏步驟(下面將對其進(jìn)行描述)中使用的低溫增補(bǔ)劑的容器中。因此，在一個特定實施例中，分揀的細(xì)胞被收集在低溫增補(bǔ)劑中。在另一個實施例中，收集的細(xì)胞被分揀在包括水、Triladyl(Minitube，Verona，WL，包括丙三醇、三氨基甲烷鹽酸緩沖液、檸檬酸、果糖、5mg/100ml的泰樂菌素、25mg/100ml的慶大霉素、30mg/100ml的奇霉素和15mg/100ml的林肯霉素)、蛋黃和丙酮酸。在另一個實施例中，收集流體為包括在75mL的水中的25gTrilady隨、25g蛋黃和10mM丙酮酸。應(yīng)該理解的是，這里所述的在收集流體中的蛋白質(zhì)的百分比濃度是在添加流動的分揀細(xì)胞之前的百分比濃度。流動的分揀細(xì)胞的加入可將收集流體的最終濃度稀釋到在添加流動的分揀細(xì)胞之前的百分比濃度的1/20。因此，例如，收集流體最初可包括10%(v/v)的蛋黃。在流動的分揀細(xì)胞被收集在包含收集流體的收集容器中后，蛋黃的最終濃度將減小到0.5%截取裝置和/或收集容器的預(yù)處理為了使得可根據(jù)本發(fā)明被分揀的顆粒(例如，精細(xì)胞)受損的可能性達(dá)到最小，截取裝置2203和/或收集容器2207(圖56-60)可在使用前被處理。這樣的預(yù)處理例如可包括在包含一種用于使得顆粒與截取裝置之間的沖擊最小化的組分的池中接觸或者浸泡截取裝置和收集容器。在從該池中取出截取裝置和收集容器后，一定量的組分將保留在截取裝置和收集容器上并且用作液滴中的顆粒的緩沖劑。因此，該組分應(yīng)該具有適于提供所需緩沖效果的特征。另外，該組分應(yīng)該與被分揀的顆?；蛘呒?xì)胞、鞘流體和收集流體相容。與這些考慮因素一致，用于處理截取裝置和收集容器的組分可包括緩沖劑或者緩沖溶液、鞘流體、收集流體、低溫增補(bǔ)劑、包含在緩沖溶液、鞘流體、收集流體或者低溫增補(bǔ)劑中的任何成分，或者其任何組合。根據(jù)本發(fā)明的方法用于精細(xì)胞的著色和分離的緩沖劑、緩沖溶液、鞘流體和收集流體如上所述。因此，在一個實施例中，截取裝置和收集容187器與鞘流體接觸(例如，被浸泡和沖洗)。在另一個實施例中，截取裝置和收集容器與收集流體接觸。在另一個實施例中，截取裝置和收集容器與下面所述的低溫增補(bǔ)劑接觸。截取裝置和收集容器的與該組分的接觸和浸泡優(yōu)選進(jìn)行足以使得組分附著在截取裝置和收集容器的表面上的一段時間。這樣的時間段一般可小于卯分鐘、優(yōu)選小于60分鐘、優(yōu)選為30至60分鐘、優(yōu)選為60分鐘。在另一個實施例中，截取裝置和收集容器僅在使用前與該組分接觸。代替或者與截取裝置和收集容器與上述組分接觸結(jié)合，截取裝置和收集容器也可與包含在鞘流體、收集流體和/或低溫增補(bǔ)劑中的特定成分接觸，例如，BSA、SSS、蛋黃、蛋黃提取物、牛奶(包括熱均質(zhì)化和撇渣)、牛奶提取物、大豆蛋白和大豆蛋白提取物。因此，在一個實施例中，截取裝置和收集容器與鞘流體接觸隨后與0.1%(v/v)的牛血清白蛋白接觸。在另一個實施例中，截取裝置和收集容器與鞘流體接觸隨后與10%(v/v)的蛋黃接觸。在一個實施例中，截取裝置和收集容器浸泡在收集流體中隨后與0.1%(v/v)的牛血清白蛋白接觸。在另一個實施例中，截取裝置和收集容器浸泡在收集流體中隨后與10%(v/v)的蛋黃接觸。盡管在上述每一個實施例中截取裝置和收集容器接收相同的預(yù)處理，但在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，可對于截取裝置和收集容器使用不同的預(yù)處理方法。同樣，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，截取裝置或者收集容器中的一些可接收一種預(yù)處理，截取裝置或者收集容器中的其它可接收一種不同的預(yù)處理。在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，僅對截取裝置或者收集容器進(jìn)行預(yù)處理也可獲得某些優(yōu)點。濃縮如上所述，被流式細(xì)胞計收集的被分揀的精子已經(jīng)通過加入各種緩沖劑和增補(bǔ)劑、著色流體、鞘流體和收集流體而被稀釋。通常，在如上所述被流式細(xì)胞術(shù)分揀后的精細(xì)胞的濃度在0.7-1.4xl(^個精細(xì)胞/亳升的范圍內(nèi)。因此，濃縮被分揀的精細(xì)胞以使得對精子的稀釋沖擊達(dá)到最小并且獲。在動物養(yǎng)殖業(yè)中的標(biāo)準(zhǔn)實踐，例如是以20xl0、40xl(^個精細(xì)胞/亳升的濃度對精子進(jìn)行人工受精。濃縮精細(xì)胞的一種方式是對由流式細(xì)胞計收集的流體進(jìn)行離心分離。濃縮精細(xì)胞的另一種方式是使得由流式細(xì)胞計收集的流體通過過濾系統(tǒng)。下面詳細(xì)描述這些方法。A.離心分離任何常規(guī)的離心分離設(shè)備可用于濃縮精子。但是在商業(yè)應(yīng)用中，優(yōu)選使用能夠一次對大批量的精細(xì)胞進(jìn)行離心分離的離心分離設(shè)備。在離心分離過程中，大量精細(xì)胞將由于作用在精細(xì)胞上的離心力的作用而被收集在離心分離管的底部處的丸中。離心力的大小通常被規(guī)定為離心力超過重力的倍數(shù)。由于離心力是重要的參數(shù)并且在任何給定速度(角速度)下的離心力的大小將取決于曲率半徑的長度，因此離心分離的速度通常由規(guī)定離心力的大小來定義。例如，600g的力指的是離心分離的角速度被選擇以使得所得到的離心力為重力的600倍。大部分流體和逃避被離心分離到丸中的任何精細(xì)胞將在上清液中。通常，上清液被去除并且丸中的精細(xì)胞被再次懸浮以如下面所述的進(jìn)行進(jìn)一步處理。重要的是，使得被濃縮在丸中的精子的百分比達(dá)到最大，同時使得對精細(xì)胞的傷害達(dá)到最小。根據(jù)本發(fā)明的一個方法，包含1(^106個分揀精細(xì)胞的離心分離管#^文置在離心分離設(shè)備中。為了有助于濃縮，離心分離管可用作在細(xì)胞計數(shù)器的收集系統(tǒng)中的收集容器。這避免了在離心分離之前將分揀的精細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心分離管的需要。該管以一定速度進(jìn)行離心分離并且持續(xù)一段足以使得濃縮精細(xì)胞的丸形成在管的底部中的時間。優(yōu)選在考慮幾個因素的情況下選擇離心分離的速度和時間，這些因素包括精細(xì)胞是脆弱的并且可能在多大的速度下被離心分離破壞的情況；離心分離管的尺寸將影響精細(xì)胞移動到管底部所需的時間；以及離心分離持續(xù)的時間越長精細(xì)胞在給定速度下被離心分離破壞的可能性越大。這樣，在本發(fā)明的一個實施例中，離心分裂管在550-800g下在6-IO分鐘的時間段內(nèi)被離心分離。根據(jù)本發(fā)明的189另一個實施例，離心分裂管在650-750g下在6-IO分鐘的時間段內(nèi)被離心分離。在本發(fā)明的另一個實施例中，離心分裂管在700g下在6-10分鐘的時間段內(nèi)被離心分離。在本發(fā)明的另一個實施例中，離心分裂管在700g下在7分鐘的時間段內(nèi),皮離心分離。如在下面的實驗中證明的，離心分離設(shè)備的速度和離心分離的時間可影響被回收的精細(xì)胞的百分比和被回收的精細(xì)胞的游動性。在實際上不分揀精細(xì)胞的情況下進(jìn)行實驗。相反，包括緩沖劑、增補(bǔ)劑、鞘流體和著色流體的各個流體被加到精子樣本以模擬分揀方法。接著樣本在濃縮精細(xì)胞的一個實驗中被離心分離。離心分離示例I在離心分離示例I中，如上所述牛精子^L收集和評估。利用一定量的pH為7.3的三氨基甲烷鹽酸緩沖液-檸檬酸("TCA")對精子樣本稀釋以獲得150><106個精細(xì)胞/毫升的濃度。在41。C下在20分鐘的時間內(nèi)利用Hoechst33342(100nM)對精子著色。預(yù)備兩個用于模擬的具有緩沖劑的15毫升的管。管l部分地充填具有10。/。的蛋黃的750jul的磷酸鹽緩沖鹽水("PBS")和具有0.1%的牛精液漿("BSA，，)的14.25ml的PBS。管2部分地充填具有10%的蛋黃的750nl的TCA和具有0.1%的BSA的14.25ml的PBS。兩個管的每一個接收100nl的包含著色的精子的溶液，接著在室溫下孵化20分鐘。兩個管被分成每一個7ml的兩等份。每一個管的一個等份在固定桶離心分離設(shè)備中以2250rpm(約540g)離心分離7分鐘。兩個管的每一個的另一個等份以2500rpm(約660g)離心分離7分鐘。在離心分離后，立刻使用10ml的吸液管從每一個等份中去除和保存上清液。丸被重新懸浮在具有10%的蛋黃的200ili1的TCA中。在相差顯徽鏡下觀察離心分離前和后的精子游動性。5(HU的固定液(在3.4%的檸檬酸鈉中的0.1%的戊二醛)被加入到每一個丸和上清液以利用血球計確定濃度?；谟裳蛴嫶_定的相應(yīng)的精子濃度乘以所用的/回收量計算精子的總數(shù)。利用丸中的總精子數(shù)和上清液中的總精子數(shù)的總和除丸中的精子總數(shù)來計算回收率。如圖88和89中所示的結(jié)果顯示了通過改變離心分離速度導(dǎo)致的精細(xì)胞的游動性的很小的差異。該結(jié)果還顯示利用TCA與PBS相比游動性略好。離心分離示例II在離心分離示例II中，來自于三個公牛的精子樣本如上所述被收集和評估。其中一個樣本由于不符合初始質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)而被取消資格。利用一定量的pH為7.3的TCA對另外兩個精子樣本稀釋以獲得150xl(^個精細(xì)胞/毫升的濃度。在41。C下在20分鐘的時間內(nèi)利用l(HiM的Hoechst33342對精子著色。包含具有10%的蛋黃的1500ij1的PBS和具有0.1%的BSA的28.31111的PBS的模擬緩沖劑被加入到兩個管中的每一個。200nl的著色的精子(30xl06)被加入到每一個管中，接著在室溫下孵化20分鐘。從兩個管的每一個取精子混合物的三個9ml的等份。兩個樣本的每一個的一個等份分別以下列速度中的每一個在15ml的離心管中離心分離7分鐘，這些速度為550g;650g;和750g。在離心分離過程中的溫度為22。C。在離心分離后，立刻使用10ml的吸液管去除上清液，在丸中留200-300pl的上清液。丸被重新懸浮在pH為7.0的具有10。/。的蛋黃的200pl的TCA中。在相差顯徽鏡下觀察離心分離前和后的精子游動性。在來自于兩個公牛的其中一個的離心分離后的樣本中注意幾個精子凝集。50nl的固定液(在3.4%的檸檬酸鈉中的0.1%的戊二醛)被加入到每一個丸和上清液以固定精子便于確定濃度。根據(jù)在離心分離試驗I中提及的公式確定回收率。結(jié)果如圖90中所示。結(jié)果顯示以650g與550g相比提高了精細(xì)胞的回收率。但是，在650g和750g之間的回收率的差異很小。改變離心分離速度導(dǎo)致的精細(xì)胞的游動性差異很小。離心分離示例III對于離心分離示例III，利用在不同日期的相同的三個公?；局貜?fù)離心分離示例II的程序。結(jié)果如圖91中所示。結(jié)果確定在650g和750g之間的回收率的差異很小。離心分離示例iv在兩個的不同的日期從兩個不同的公牛收集精子。以上述的方式輸送和評估精子?；谠季拥木訚舛龋萌被鶗跬辂}酸緩沖液-檸檬酸(TCA，pH7.3)加10mM丙酮酸鹽對精子稀釋以獲得150xl(^個精細(xì)胞/毫升的濃度。在4rC下在20分鐘的時間內(nèi)利用10nM的Hoechst33342對精子著色。在著色后，通過添加下列模擬的緩沖劑使得267nl的包含著色精子的溶液被稀釋到lxl(^個精細(xì)胞/毫升的濃度，這些模擬的緩沖劑包括2ml具有10%(v/v)的蛋黃的PBS;以及37.733ml具有0.1。/。(w/v)的牛精液漿(BSA)的PBS。著色的精子和模擬的緩沖劑在室溫下孵化20分鐘。從來自于每一個公牛的著色精子和模擬的緩沖劑混合物中取四個9ml的等份。來自于第一公牛的四個等份以下列順序以離心分離速度和持續(xù)時間的變化組合4皮離心分離(1)對于第一等份，700g持續(xù)7分鐘；(2)對于第二等份，700g持續(xù)10分鐘；(3)對于第三等份，650g持續(xù)10分鐘；以及(4)對于第四等份，650g持續(xù)7分鐘。來自于第二乂>牛的四個等份以下列順序以離心分離速度和持續(xù)時間的變化組合,皮離心分離(1)對于第一等份，700g持續(xù)10分鐘；(2)對于第二等份，700g持續(xù)7分鐘；(3)對于第三等份，650g持續(xù)10分鐘；以及(4)對于第四等份，650g持續(xù)7分鐘。在擺動頭離心分離設(shè)備(Allegra6R，BeckmanCoulterInc.Fullerton，CA)在22。C下在15ml的離心分離管中進(jìn)行所有的離心分離。在農(nóng)場收集精子和在實驗室進(jìn)行離心分離之間的時間間隔為4-5小時。在離心分離后，立刻使用10ml的吸液管去除上清液，在丸中留250nl的上清液。丸在250iul的Delbecco'sPBS(pH7.0)中被重新懸浮。在著色后但在離心分離前以及在離心分離后利用Hamilton-ThornMotilityAnalyzer(每一個樣本兩個滑塊；每一個滑塊兩個腔室)觀察精子游動性和前進(jìn)游動性。通過對已經(jīng)放置在冷凍器中的離心分離前的著色精子和模擬緩沖劑混合物的lOOiil的等份和與9(Hil的固定劑(在3.4%的檸檬酸鈉中的0.1°/。的戊二醛)混合的重新懸浮的丸的l(Hil的等份的血球劑測量來確定精子濃度。如在離心分離示例I中的確定回收率。結(jié)果如圖92和93中所示。數(shù)據(jù)顯示在以650g或者700g持續(xù)7或者IO分鐘離心分離后可回收85%的精子(圖92)。但是，回收率在700g略好(95%)。在所有處理中在離心分離后的游動性下降(與離心分離前相比)，這是由于不能承受離心力應(yīng)力的死/異常/脆弱精子的存在。在所有處理中精子游動性下降10-14%(圖93)。以650g持續(xù)7分鐘的精子游動性下降較高(14%),這是由于在700g后以650g進(jìn)行離心分離使得精子暴露在模擬的緩沖劑下的時間較長。離心分離沒有顯示對精子的前進(jìn)游動性產(chǎn)生不良影響，相反提高2-3%。離心分離示例V在兩個的不同的日期從一個公牛收集精子。精子被評估、稀釋和利用Hoechst33342著色，并且如在離心分離示例IV中所述的在模擬緩沖劑中被進(jìn)一步稀釋。對于兩個精子樣本中的每一個，獲得著色精子和模擬的緩沖劑混合物的四個9ml的等份。來自于第一樣本的等份以下列順序以離心分離速度和持續(xù)時間的下列任何一種組合被離心分離(1)對于第一等份，750g持續(xù)10分鐘；(2)對于第二等份，750g持續(xù)7分鐘；(3)對于第三等份，700g持續(xù)10分鐘；以及(4)對于第四等份，700g持續(xù)7分鐘。對于來自于第二樣本的等份，離心分離速度和持續(xù)時間的組合相同，但順序改變?nèi)缦?1)對于第一等份，750g持續(xù)7分鐘；(2)對于第二等份，750g持續(xù)10分鐘；(3)對于第三等份，700g持續(xù)7分鐘；以及(4)對于第四等份，700g持續(xù)10分鐘。在擺動頭離心分離設(shè)備(Allegra6R，BeckmanCoulterInc.Fullerton，CA)在22'C下在15ml的離心分離管中進(jìn)行離心分離。在農(nóng)場收集精子和在實驗室進(jìn)行離心分離之間的時間間隔對于第一樣本為6.5小時，對于第二樣本為4小時。離心分離后處理，即，上清液的去除、丸的重新懸浮、精子濃度的確定和利用Hamilton-ThornMotilityAnalyzer評估游動性以與示例IV中所述的相同的程序進(jìn)行。結(jié)果如在圖94和95中所示。結(jié)果表明，以650g或者700g持續(xù)7或者10分鐘離心分離后可回收在高度稀釋的懸浮液中的85%以上的精子群組(圖94)。g作用力增大到750g沒有大大提高回收率。如在離心分離示例IV中的情況，在所有處理中觀察到在離心分離后的游動性下降(與離心分離前相比)。在本試驗中，精子游動性下降13-20%(圖95),略高于離心分離示例IV。變化可能是由于精子樣本的變化以及在一個樣本中從精子收集到離心分離的時間間隔較長(6小時)導(dǎo)致的。如在示例IV中描述的，低速度離心分離(700g，7至10分鐘)的精子游動性下降(約20%)是由于在750g離心分離后進(jìn)行離心分離使得精子暴露在模擬的緩沖劑下的時間較長。前進(jìn)游動性下降可忽略(1-5%)。B.二次離心分離為了回收可能在上清液中損失的精子，可在上清液與丸分離后對其離心分離。在沒有受到一個特定理論限定的情況下，申請人相信丸/上清液界面阻止精子移動到丸中。通過使得丸與上清液分離來去除界面將使得上清液進(jìn)一步離心分離使得留在上清液中的精細(xì)胞形成第二丸。第二丸可被重新懸浮和被添加到來自于第一丸的重新懸浮精子。C.過濾可用于避免上清液中的精細(xì)胞損失的一種可選擇的濃縮方法是過濾。如圖96中所示，根據(jù)一個實施例，過濾器2415裝在收集容器2403中。在過濾器中的孔的尺寸優(yōu)選在0.2-1微米的范圍內(nèi)。優(yōu)選，過濾器不是深度過濾器(例如，具有可將精子尾部留在其中的曲折通道的過濾器)。相反，優(yōu)選過濾器可盡可能薄。例如，優(yōu)選過濾器厚度在50^:米至500^L米的范圍內(nèi)；優(yōu)選過濾器厚度在75微米至250微米的范圍內(nèi)；優(yōu)選過濾器厚度在100^L米至150微米的范圍內(nèi)。低水平真空2417被提供以當(dāng)液滴33被收集時去除通過過濾器的流體。重要的是，使用低水平真空(小于20英寸水銀，例如，15英寸水銀)避免對精細(xì)胞造成傷害。在一個實施例中，真空足夠低以使流體去除速度為1.0ml/15秒。根據(jù)本發(fā)明的另一個實施例，間歇地施加真空以為精細(xì)胞通過回收的機(jī)會。在另一個實施例中，過濾器2415由與精細(xì)胞相容的材料構(gòu)成，對于它們還沒有粘合親和力。在分揀完成時，約80-90%的流體將被通過過濾器去除。但是，足夠的流體保持(約10-20%)精細(xì)胞在濃縮的漿2405中，從而防止精細(xì)胞形成濾餅。濃縮的懸浮液可被轉(zhuǎn)移到另一個容器2419，例如，如圖97中所示。具有套管尖過濾器2411的注射器機(jī)構(gòu)2409可用于從該容器2419去除剩余液體中的一些。但是，足夠的流體被留在容器中以防止精細(xì)胞粘結(jié)在過濾器2411上。與在收集容器中的過濾器2415相同的考慮因素用于套管尖過濾器2411。這樣，套管過濾器2411孔尺寸優(yōu)選在0.2-1.0微米的范圍內(nèi)并且套管過濾器較薄以避免精子尾部被捕捉在過濾器中的曲折通道中。例如，DynaGard⑧中空聚丙烯纖維注射器尖過濾器，它可從SpectrumLaboratories,Inc.ofRanchoDominguez,CA商業(yè)得到，可用于套管尖過濾器。如圖98中所示，重新懸浮流體2413通過套管尖過濾器被沖洗以將可能粘在過濾器表面上的細(xì)胞沖回到漿中。重新懸浮流體可包括一定量的過濾流體和/或適合的增補(bǔ)劑。在足以從過濾器去除精細(xì)胞的一定量的重新懸浮流體已經(jīng)通過過濾器被回沖后，如果需要的話，可增加附加的重新懸浮流體。重新懸浮流體的總量被選擇以使得濃度達(dá)到所需濃度(例如，約2(^106個精細(xì)胞/亳升)。這樣，該實施例的過濾方法195是三步方法，包括在收集容器中^^用過濾器、利用套管過濾器進(jìn)行過濾和重新懸浮以獲得所需濃度。在一個可選擇的兩步過濾方法中，上述三步方法的第一和第二步驟結(jié)合以使所有流體的去除通過套管過濾器。在該方法中，被分揀的精細(xì)胞被引導(dǎo)到?jīng)]有過濾器的收集容器。利用上述的通過套管尖過濾器2411被施加的低真空和/或間歇真空去除流體。當(dāng)精細(xì)胞在濃縮漿中時，重新懸浮流體，諸如一種增補(bǔ)劑，通過套管過濾器沖回以獲得精細(xì)胞的所需濃度。過濾示例I過濾示例I示出在利用本發(fā)明的三步過濾方法濃縮后的精細(xì)胞的回收率和游動性。精子樣本從三個公牛被收集并且如在上面的樣本制備段中提供的被評估。三個精子樣本中的一個由于不符合初始質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)而被取消資格。利用一定量的達(dá)到150xl(^個精細(xì)胞/毫升的濃度所需的TCA(pH7.3)稀釋剩余兩個樣本。500nl的具有10。/。蛋黃的PBS和9.5ml的具有0.1%BSA的PBS被添加到兩個15ml試管中的每一個。76pl的精子樣本(約10xl(^個精細(xì)胞)被添加到每一個試管中并且室溫下孵化20分鐘。參見圖99，使用真空泵2427施加負(fù)壓以通過過濾器2425抽取稀釋精子2423的四毫升等分量。過濾器2429被收集在注射器2421中。在過濾器上的過濾精細(xì)胞被在15ml的管中的lml的TCA緩沖劑沖回后，真正評估精子游動性。過濾前和后的樣本與固定劑(在3.4%的檸檬酸鈉中的O.l%的戊二醛)混合以固定精細(xì)胞。利用血球計確定精子濃度。基于精子濃度乘以量計算精子的總數(shù)。利用在過濾前在等分量中的精細(xì)胞的總數(shù)除在回沖部分中的精細(xì)胞的總數(shù)來計算回收率。利用不同的過濾器重復(fù)該過程。利用下列兩個過濾器進(jìn)行實驗(1)1.0|LimPTFE(不是FTPE)膜盤(注射器)過濾器(從PallCorporation,LifeScienceGroup,AnnArbor,Ml,Cat#PN4226T或者VWR，Batavia，IL，Cat.#28143-928);和(2)0.8SFCA(無表面活性劑的醋酸纖維素)膜盤(注射器)過濾器(Corning.Inc.,Corning,NY，Cat.#431221;VWRBatavia，IL，Cat.#28200-028)。結(jié)果如圖101中所示。與PTFE過濾器相比，利用醋酸纖維素過濾器回收更多的精子，即，67對33%，這是由于醋酸纖維素的低蛋白質(zhì)粘合親和力。被回收的精子的真實游動性的范圍在63%(PTFE)至68%(醋酸纖維素)之間。過濾示例II過濾示例II示出在利用本發(fā)明的二步過濾方法濃縮后的精細(xì)胞的回收率和游動性。精子樣本從三個公牛被收集并且如在上面的樣本制備段中提供的被評估。利用一定量的達(dá)到150xl(^個精細(xì)胞/毫升的濃度所需的TCA(pH7.3)稀釋三個樣本。1.51111的具有10%蛋黃的？88和28.31111的具有0.1。/oBSA的PBS被添加到每一個50ml試管中。200iul的精子樣本(約30xl(^個精細(xì)胞)被添加到每一個試管中并且室溫下孵化20分鐘。參見圖IOO，使用注射器2431施加負(fù)壓以通過過濾器2435從每一個試管抽取稀釋精子2433的六毫升等分量。過濾器被放置在過濾器支架2437中(來自于MiUiporeCorporation,Billerica，MACat弁SX0002500的Swinnex過濾器支架)。在過濾后，過濾器支架2437與注射器和管分開，使得過濾器支架完整。通過轉(zhuǎn)動過濾器組件使其顛倒收集過濾器上的精子并且利用在15ml試管中的在頂部具有一小段管的3ml注射器使得過濾器上的過濾精細(xì)胞被lml的TCA緩沖劑沖回。真正評估精子游動性。過濾前和后的樣本與固定劑(在3.4%的檸檬酸鈉中的O.l%的戊二醛)混合以固定精細(xì)胞。利用血球計確定精子濃度。如在過濾示例l中所述的計算精細(xì)胞的總數(shù)和回收率。該過程重復(fù)兩次以測試不同的過濾器。利用下列兩個過濾器進(jìn)行實驗(1)0.2nmTeflon膜過濾器(從X-Partek，P.JCobertAssociatesInc.St.LouisCat.#944106;和(2)0.8醋酸纖維素膜過濾器(MilliporeCorporation,Billerica，MACat.#AAWP02500)。結(jié)果如圖102中所示。在兩種過濾器中，精子的回收率低(約25%)。如在示例I中在Teflon過濾器中它是低的。但是，在醋酸纖維素過濾器中的低回收率和回沖精子的真實游動性可能是由于不同賣家使用的材料和/或精子與過濾器支架/組件附著的能力導(dǎo)致的。D.致密介質(zhì)濃縮濃縮所收集的精子的另一種可選擇的方法取決于精細(xì)胞在高密度介質(zhì)中的浮選。根據(jù)該方法，高密度介質(zhì)被加入到被收集的精細(xì)胞以將懸浮液的比重提高到1,3以上。例如，膠態(tài)氧化珪懸浮液(諸如，在Percoll⑧和Isolate的商標(biāo)下得到的)可用于增大懸浮液的比重。這些精細(xì)胞將漂浮在懸浮液的頂部，在那里它們可被撇去或者收集，這是由于懸浮液的比重增大。懸浮流體被添加到已經(jīng)從表面收集的細(xì)胞以形成最終的20xl0M"精細(xì)胞/毫升濃度。在添加高密度介質(zhì)之前可利用上述過濾方法中的一種去除一些懸浮流體以減小需要獲得所需比重的高密度介質(zhì)的量。低溫延展A.低溫保護(hù)在精子已經(jīng)被分揀和收集在收集容器中后，它們可用于使雌性動物受精。這可基本立刻進(jìn)行，需要很少的精子的附加處理。同樣，精子也可被冷卻或者冷凍以在稍后的日期使用。在這樣的情況下，精子可受益于附加達(dá)到最小。一般地，低溫增補(bǔ)劑包括緩沖劑或者緩沖溶液、蛋白質(zhì)源和低溫保護(hù)劑?？捎糜诘蜏卦鲅a(bǔ)劑中的緩沖劑或者緩沖溶液的示例如上面參照樣本收集和延展描述的。通常，這些緩沖劑的濃度為0.001M至1.0M，pH為4.5至8.5，優(yōu)選7.0。如果包括的話，蛋白質(zhì)源可被添加以為細(xì)胞提供支持并且減緩細(xì)胞與收集容器的接觸。蛋白質(zhì)源可是不影響精細(xì)胞的生存力的任何蛋白質(zhì)源并且與所用的特定緩沖劑或者緩沖溶液相容。常用的蛋白質(zhì)源的示例包括牛奶(包括熱均質(zhì)化和撇渣)、牛奶提取物、蛋黃、蛋黃提取物、大豆蛋白和大豆蛋白提取物。這樣的蛋白質(zhì)可在10%(v/v)至30%(v/v)的濃度中被使用，優(yōu)選在10%(v/v)至20%(v/v)之間，優(yōu)選為10%(v/v)。盡管牛奶可與緩沖劑或者緩沖溶液結(jié)合使用，但一般在沒有緩沖劑或者緩沖198溶液的情況下使用牛奶，這是由于牛奶本身是一種可起到與緩沖劑或者緩沖溶液相同的作用的溶液。在這樣的情況下，收集流體可包含80%(v/v)至90%(v/v)的牛奶。低溫保護(hù)劑優(yōu)選被包括在低溫增補(bǔ)劑中以減小或者防止冷沖擊或者保持精子的生育力。多種低溫保護(hù)劑在本領(lǐng)域是已知的。適于與給定的增補(bǔ)劑結(jié)合使用的低溫保護(hù)劑的選擇可改變，并且取決于獲得的被冷凍的精子的種類。適合的低溫保護(hù)劑的示例例如包括丙三醇、二甲亞砜、乙二醇、丙二醇、海藻糖、Triladyl⑧及其組合。一般地，如果包括的話，這些低溫保護(hù)劑以1%(v/v)至15%(v/v)的量存在于低溫增補(bǔ)劑中，優(yōu)選以5%(v/v)至10%(Wv)的量、優(yōu)選以7%(v/v)的量，優(yōu)選以6%(v/v)的量。在一個特定實施例中，低溫增補(bǔ)劑包括水、Triladyl、蛋黃和丙酮酸。在另一個實施例中，低溫增補(bǔ)劑包括在75mL的水中的25gTrilady1⑧、25g蛋黃和10mM丙酮酸。另外，低溫增補(bǔ)劑也可包含多種有益于精子生存力和游動性并且防止或者減小低溫保藏的有害副作用的添加物。這樣的添加物例如可包括能量源、抗生素、或者在細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外調(diào)節(jié)氧化/還原反應(yīng)的組分，這些都在上面關(guān)于樣本收集和稀釋描述過。因此，這樣的添加物可被添加到低溫增補(bǔ)劑中。B.分揀的精細(xì)胞的低溫保藏在大多數(shù)情況下，不可能使用如上所述的已經(jīng)被分揀的精細(xì)胞立刻進(jìn)行人工受精。特別是在商業(yè)性精子分揀操作的情況下，分揀的精細(xì)胞在它們可被用于人工受精之前必須#皮分揀和/或運輸。這通常需要精細(xì)胞的低溫保藏。分揀的精子可被裝在細(xì)長的筒體(在養(yǎng)殖業(yè)中被稱為"試管")中并且被低溫保藏以在運輸和儲存過程中保藏精子。低溫保藏的精細(xì)胞可在液氮中被長時間存儲。為了使用低溫保藏的精子，試管可被浸入熱水池中以使得精子解凍。接著試管被裝到人工受精槍中以使得磁性動物受精。幾個防護(hù)措施必須考慮以在低溫保藏過程中保護(hù)精細(xì)胞。否則，精細(xì)胞將裙7皮壞(如5-10%的低解凍后的游動性率所示)使得它們不適于用于人工受精。常規(guī)的低溫保藏方法包括接連添加蛋白質(zhì)源(例如，蛋黃)、將精子冷卻到4-5。C的溫度，添加低溫保護(hù)劑(例如，丙三醇)，在4-5。C的范圍平衡的時間，接著使得精子過冷，例如將精細(xì)胞浸沒在-196。C的液氮中以進(jìn)行存儲。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，蛋白質(zhì)源的目的是當(dāng)它們從14。C冷卻到8。C時防止精子受到破壞，這是精細(xì)胞最容易受到冷沖擊的溫度。相反，低溫保護(hù)劑防止精細(xì)胞在0。C以下的溫度下受損。即使在低溫保藏中所涉及的溫度在冷凍以下并且術(shù)語"冷凍"有時用于描述低溫保藏，本領(lǐng)域技術(shù)人員還知道的是，低溫保藏的精子實際上沒有被冷凍。準(zhǔn)確地說，低溫保藏的精子處于過冷狀態(tài)。在精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑保持在穩(wěn)定溫度下的過程中的常規(guī)時間段可在任何地點持續(xù)60分鐘至多個小時。利用常規(guī)方法完成低溫保藏的總時間通常超過四個小時。另外，相信，高達(dá)50%的精細(xì)胞在常規(guī)低溫保藏過程中被殺死。盡管根據(jù)本發(fā)明的一些實施例利用常規(guī)的方法低溫保藏精子，但本發(fā)明的其它實施例使用能夠減少低溫保藏所需的時間和/或改善祐:低溫保藏的精子的健康的改進(jìn)的低溫保藏方法。圖103示出概括描述根據(jù)本發(fā)明的一種改進(jìn)的低溫保藏精子的方法的一個實施例的步驟的流程圖。在步驟2501,包含分揀的精細(xì)胞的溶液的濃度被調(diào)節(jié)到約1000000-40000000個精子/亳升的范圍內(nèi)，取決于具體消費者所有的標(biāo)準(zhǔn)(例如，關(guān)于養(yǎng)殖)。例如，精子濃度可被調(diào)節(jié)到約20000000-24000000個精子/亳升的范圍內(nèi)。精子濃度的調(diào)節(jié)可包括添加重新懸浮流體、緩沖劑和/或增補(bǔ)劑到上述的濃縮的精子。在步驟2503，在精子冷卻前低溫保護(hù)劑(例如，丙三醇)被添加。在它們與低溫保護(hù)劑接觸后精細(xì)胞立刻開始與低溫保護(hù)劑平衡。在步驟2505，蛋白質(zhì)源(例如，蛋黃)也被添加到上述包含精細(xì)胞的溶液中。在步驟2507利用常規(guī)的裝載機(jī)使得精細(xì)胞溶液、蛋白質(zhì)源和低溫保護(hù)劑被裝在常規(guī)的0.5或者0.25人工受精試管中。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉多種可用于將精子裝到試管中的常規(guī)的設(shè)備和技術(shù)。例如，于1993年10月5日授權(quán)的Cassou等的美國專利No.5，249，610并且在這里合并參考，提供了關(guān)于利用拋棄型注射器噴嘴使得試管中充填精子的教導(dǎo)。另外，充填試管的設(shè)備在商業(yè)上可從位于VeronaWI的MinitubeofAmerica獲得。這些或者類似的常規(guī)裝載方法和設(shè)備中的任何一個可用于將分揀的精細(xì)胞裝到試管中。在裝載后，在步驟2509精細(xì)胞被冷卻到保持溫度。一般地，保持溫度應(yīng)該在考慮下列因素的情況下被選擇使得精細(xì)胞保持在太高的溫度下(例如，10°C)可能導(dǎo)致冷沖擊帶來的不必要的損傷；精細(xì)胞與低溫保護(hù)劑(例如，丙三醇)的平I^皮認(rèn)為在4-5。C的范圍內(nèi)的溫度下最積極；以及使得精細(xì)胞保持在太低的溫度下(例如，小于0。C)被認(rèn)為會對精細(xì)胞造成損傷。這樣，根據(jù)一個實施例，保持溫度在0-8。C的范圍內(nèi)。優(yōu)選，保持溫度在2-6。C的范圍內(nèi)。優(yōu)選，保持溫度在4-5。C的范圍內(nèi)。在另一個實施例中，該步驟2509所用的冷卻速度被選擇以使得對精細(xì)胞的損傷達(dá)到最小。例如，冷卻速度可被控制(例如，基本恒定)以提供均質(zhì)冷卻和防止精子遭受溫度沖擊。冷卻速度應(yīng)該使得精子的冷卻足夠快以在它們導(dǎo)致膜受損之前減小它們的新陳代謝，但也應(yīng)該足夠慢以使得它們不遭受溫度沖擊。人們可通過將包M細(xì)胞的試管放置在可使得它們冷卻的可編程的冷凍裝置(例如，從位于VeronaWI的MinitubeofAmerica商業(yè)獲得的IceCube1810CD冷凍裝置)中來控制冷卻速度。4艮據(jù)一個實施例，可編程的冷凍裝置從室溫(通常在22至24。C的范圍內(nèi))以0.1和0.3°。/分鐘的恒定冷卻速度冷卻精子。優(yōu)選，冷卻速度在0.15和0.25'(:/分鐘的范圍內(nèi)。優(yōu)選，冷卻速度為0,2。C/分鐘。在另一個實施例中，冷卻速度被選擇以使精子在90分鐘的時間內(nèi)從它們的初始溫度冷卻到保持溫度。在另一個實施例中，冷卻速度被選擇以使精子以恒定的冷卻速度在90分鐘的時間內(nèi)從它們的初始溫度冷卻到保持溫度。上述冷卻速度實際上指的是可編程的冷卻裝置的腔室的冷卻速度，但由于試管的薄壁和長且薄的形狀(例如，長5.25英寸、小于3亳米的直徑和0.15毫米的壁厚)和試管的傳導(dǎo)性能，精細(xì)胞和冷卻腔室之間的溫度差不大。在精細(xì)胞已經(jīng)被冷卻到保持溫度后，在步驟2511，它們在該溫度下或者附近保持使得它們與低溫保護(hù)劑的平衡基本完成的時間段。例如，上述的可編程的冷凍裝置可被編程以在該階段中使得精細(xì)胞保持在穩(wěn)定溫度下。根據(jù)本發(fā)明的另一個實施例，精細(xì)胞在保持溫度下保持與常規(guī)方法相比較短的時間內(nèi)，這是因為精子已經(jīng)在冷卻過程中與低溫保護(hù)劑平衡。例如，時間段可在10和60分鐘的范圍內(nèi)。優(yōu)選，時間段可在20和40分鐘的范圍內(nèi)。優(yōu)選，時間段為30分鐘。在另一個實施例中，該時間段小于60分鐘。在另一個實施例中，該時間段小于40分鐘。較短的保持時間段在商業(yè)性精子分揀方法中具有多個優(yōu)點。首先，它減小了處理分揀的精子所需的時間，可轉(zhuǎn)換為節(jié)省成本。另外，精細(xì)胞還在0至8。C的范圍內(nèi)的溫度下執(zhí)行新陳代謝過程，從而減少精子需要保持在該溫度下的時間，可提高精細(xì)胞的健康，對于關(guān)心人工受精成功率的動物養(yǎng)殖人員，這將增大精細(xì)胞的量。在精細(xì)胞已經(jīng)在保持溫度下被保持上述的時間段后，在步驟2513精細(xì)胞被冷卻到接近精子低溫保藏的臨界溫度區(qū)域的溫度。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的是，臨界溫度區(qū)域是冰晶形成和滲透壓力變化破壞精細(xì)胞的區(qū)域。該溫度可根據(jù)精細(xì)胞被低溫保藏的溶液變化，但臨界溫度區(qū)域一般在-18和-35。C的范圍內(nèi)。有時，據(jù)說臨界溫度區(qū)域在-18和-30。C的范圍內(nèi)。這樣，根據(jù)本發(fā)明的另一個實施例，用于使得精細(xì)胞從保持溫度冷卻到接近-18。C(例如-15。C)的溫度的冷卻速度被選擇以保護(hù)精子的健康。應(yīng)該考慮的相關(guān)因素包括在該過程中精細(xì)胞仍然與包圍保護(hù)劑平衡的情況、精子仍然進(jìn)行一些新陳代謝的功能的情況以及精子仍然疇省支對快速溫度變化敏感的情況。另外，優(yōu)選，冷卻速度是可控制的速度，諸如可被編程到上述可編程的冷凍裝置中的速度。優(yōu)選，用于使得精細(xì)胞從保持溫度冷卻到接近-18。C的溫度的冷卻速度是恒定冷卻速度。這樣，根據(jù)本發(fā)明的另一個實施例，精細(xì)胞以在1.0至5.0。C/分鐘的范圍內(nèi)的冷卻速度從保持溫度冷卻到-15'C。優(yōu)選，冷卻速度在2.0至4.0。C/分鐘的范圍內(nèi)。優(yōu)選，冷卻速度為3.(TC/分鐘。步驟2515包括使得精細(xì)胞快速冷卻通過臨界溫度區(qū)域以限制精細(xì)胞在其中停留的時間。這樣，根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，通過臨界溫度區(qū)域(例如-18。C至-30。C)的冷卻速度被選擇以遠(yuǎn)大于用于將精細(xì)胞冷卻到保持溫度的冷卻速度和用于將精細(xì)胞冷卻到接近臨界溫度區(qū)域的溫度的冷卻速度。這樣，較陡的冷卻速度優(yōu)選在8至40'C/分鐘的范圍內(nèi)。優(yōu)選，較陡的冷卻速度優(yōu)選在8至12'C/分鐘的范圍內(nèi)。優(yōu)選，較陡的冷卻速度為l(TC/分鐘。使用較陡的冷卻速度的溫度范圍可延伸超過臨界溫度區(qū)域。這樣，在本發(fā)明的另一個實施例中，精細(xì)胞以上述其中一個較陡的冷卻速度從-15。C冷卻到-40°C。在本發(fā)明的另一個實施例中，精細(xì)胞以上述其中一個較陡的冷卻速度從-15。C冷卻到-80°C。以較陡的冷卻速度使得精子冷卻通過臨界溫度區(qū)域的步驟可在上述可編程的冷凍裝置中完成。在精細(xì)胞已經(jīng)被冷卻到臨界溫度區(qū)域以下(例如，到-80。C)后，在步驟2517包含分揀的精子的試管被浸沒在液氮(-196。C)中以提供分揀的精細(xì)胞的最大使用壽命。存儲低溫保藏的精子的液氮的使用在動物養(yǎng)殖業(yè)中在未分揀的精子的范圍內(nèi)是普遍的。這樣，本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉包^#子在液氮中的運輸和存儲的技術(shù)，這里無需詳細(xì)論述。應(yīng)該注意的是，常規(guī)容器用于提供大量的人工受精試管在液氮中的長時間存儲并且較小并且更輕便的容器也可用于提供人工受精試管在液氮中的存儲以運輸?shù)娇蛻艉?或運輸?shù)骄哂幸粋€或者多個需要利用低溫冷藏的精子受精的雌性動物的農(nóng)場。這里所述的低溫保藏方法的一個優(yōu)點是，在比根據(jù)常規(guī)方法需要的更短的時間完成低溫保藏。由于本發(fā)明所涉及的低溫保藏而使得游動性可能僅降低5%至11%，如下面示例描述的。這樣，如表明根據(jù)本發(fā)明低溫保藏的精細(xì)胞在它們在37。C的水池中解凍50秒后具有大于50。/。的游動性(例如60%)的實驗所示，本發(fā)明所涉及的低溫保藏保護(hù)精細(xì)胞的健康。如上所述，精子游動性可,皮自動機(jī)器(例如來自于HamiltonThornResearch的IVOS精子分析器)或者通過可視檢查被分析。203應(yīng)該注意的是，上述低溫保藏方法可用于商業(yè)規(guī)模的精子分揀方法中。這樣，根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，這里所述的本發(fā)明方法的步驟在一批分細(xì)胞。例如，利用下面所述的多通道流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，能夠在20分鐘的時間內(nèi)在設(shè)備的收集系統(tǒng)中得到840xl(^個分揀的帶X染色體的精細(xì)胞。這足以使得精細(xì)胞充填幾個冷凍的試管。另外，一批可包含利用兩個或者多個不同分揀細(xì)胞計數(shù)器的組合的精細(xì)胞。在如上所述被濃縮后，精細(xì)胞可被裝在任何數(shù)量的試管中并且作為一批被低溫保藏。例如，根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，將增補(bǔ)劑(包括蛋白質(zhì)源和低溫保護(hù)劑)添加到一批精細(xì)胞中需要5分鐘，利用自動裝載設(shè)備將精細(xì)胞裝到人工受精試管中需要15分鐘。在一個可編程的冷卻裝置中對于在該批中的所有試管同時冷卻。另外，一些可編程的冷凍裝置的能力允許同時對幾千個人工受精試管同時低溫保藏。例如，上述IceCube1810CD冷凍裝置具有同時低溫保藏2500個0.5ml的試管或者3800個0.251111的試管的能力。這樣，人們可等待啟動冷卻步驟直至已經(jīng)得到多批。或者，利用使得多個多通道流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備(見下面)并行操作并且在一個可編程的冷凍裝置中同時冷卻一起從其獲得的多批來基本同時獲得多批。在本發(fā)明的一個實施例中，將精細(xì)胞從室溫冷卻到過冷狀態(tài)并且將它們浸沒在液氮(-196。C)中需要少于220分鐘的時間段。在另一個實施例中，過冷時間段小于190分鐘。在另一個實施例中，過冷時間段小于150分鐘。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該注意的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，可對上述示例性方法進(jìn)行多種變型。例如，精細(xì)胞可被低溫保藏在容器中而不是人工受精試管中。類似地，包括改變或者維持溫度的方法中的步驟可利用任何適合的裝置來執(zhí)行，例如包括水池、液氮蒸氣和常規(guī)的可編程的或者非可編程的冷凍裝置。另外，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，多種物質(zhì)或者其組合可用作蛋白質(zhì)源和/或低溫保護(hù)劑。這些物質(zhì)包括上面關(guān)于緩沖劑、增補(bǔ)劑、低溫保護(hù)劑、鞘流體和收集流體描述而提及的物質(zhì)及其濃度。另外，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，在該方法中的一中表示在調(diào)節(jié)分揀系統(tǒng)的濃度后添加低溫保護(hù)劑，但可以預(yù)見的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，可在調(diào)節(jié)濃度之前添加低溫保護(hù)劑。例如，低溫保護(hù)劑可被提供在收集流體中或者流式細(xì)胞計所用的鞘流體中。本發(fā)明的一些優(yōu)點也可通過對精細(xì)胞進(jìn)行部分冷卻接著添加低溫保護(hù)劑來獲得。同樣，添加蛋白質(zhì)源的順序可被改變，只要蛋白質(zhì)源能夠在精細(xì)胞通過14至8。C的溫度范圍時保護(hù)其不受到冷沖擊的影響即可。低溫保藏示例I如上所述，牛精子被收集、輸送和評估。每一個都包含5毫升的TCA緩沖劑(pH7.3)的兩個試管裙二故置在兩個水池中的一個中至少5分鐘。一個水池在35。C的溫度下，另一個在水池在41。C的溫度下。24。C的精子被加入到每一個管中以使在每一個管中的最終濃度為15(^106個精細(xì)胞/亳升。兩個管分別被分成兩等份，所述等份分別被放置在相應(yīng)的水池中。在精子已經(jīng)與TCA緩沖劑平衡5分鐘后，80nM的Hoechst33342被加入到其中一個35。C的等份和其中一個41。C的等份。在添加Hoechst33342后，所有四個等份在它們各自的水池中孵化20分鐘。在孵化后，從水池中取出試管并且在室溫下(約25。C)保持5分鐘。接著利用包含20%的蛋黃和65%的丙三醇(v/v)(pH7.0)的TCA增補(bǔ)劑將每一個試管的內(nèi)容物稀釋到20xl(^個精細(xì)胞/毫升的最終濃度。接著，每一個試管的內(nèi)容物用于充填0.51111的人工受精試管。三個試管的每一個;^故置在可編程的冷凍裝置(來自于MinitubeofAmerica,WI的IceCubel810CD冷凍裝置)中。在可編程的冷凍裝置中對下列冷卻順序編程(1)22°。至4°。@-0.2。C/分鐘；(2)在4。C下保持30分鐘；(3)4。C至-15。C(^-3.0。C/分鐘；(4)-15。C至-80°C@-10.0°C/分鐘。在達(dá)到-80。C后，將試管浸沒在液氮(-196°C)中保持45分鐘。接著，將試管浸入到37。C的水池中保持50秒以解凍。在相差顯孩支鏡下在低溫保藏前和后檢查精子的游動性。結(jié)果如圖104中所示。解凍后的游動性通常為60%。這表示與以前的低溫保藏相比游動性僅下降了5-11%。變化分析表明Hoechst33342或者在41。C下的孵化對解凍后的精子游動性沒有產(chǎn)生很大的影響。系統(tǒng)操作現(xiàn)參照圖82對流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)9的整體操作813進(jìn)行描述并且在精細(xì)胞的特定范圍內(nèi)(例如，牛精細(xì)胞)，但應(yīng)該理解的是，本說明書僅是示例性的，該系統(tǒng)可用于處理其它顆粒。導(dǎo)致六個第二重復(fù)回路的第一系列的步驟包括系統(tǒng)的校準(zhǔn)。在初始化769后，執(zhí)行系統(tǒng)檢查771特別是確定處理器131或者多個處理器是否可操作。如果在三個失敗的系統(tǒng)檢查775后檢測到錯誤，請求使用者交互作用773。如果系統(tǒng)檢查是肯定的，微處理器引導(dǎo)該系統(tǒng)利用適合的流體沖洗噴嘴系統(tǒng)，接著質(zhì)量控制材料779，諸如珠或者牛核通過該系統(tǒng)以對檢測參數(shù)初始化(見圖72中的739)并且確定該系統(tǒng)在可接受的質(zhì)量控制內(nèi)操作。這包括控制材料的評估以測試系統(tǒng)的敏感性和精度，確定該系統(tǒng)可正確地識別樣本。如果在三次嘗試775后不能確定質(zhì)量控制，請求使用者交互作用773。如果質(zhì)量控制材料指示可接受的質(zhì)量控制水平，樣本781被吸入并且待分揀的樣本部分或者等份^皮質(zhì)量檢查783?？衫脴颖镜馁|(zhì)量因子(Q-因子)的計算來確定樣本質(zhì)量。例如，在樣本的第一等份中檢測細(xì)胞的類型。在該檢測過程中，初始化的檢測參數(shù)(741)被重新檢查并且產(chǎn)生初始的識別參數(shù)(745)。如果在等份中的檢測的細(xì)胞類型表明樣本符合或者超過預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)(例如，樣本可被識別以產(chǎn)生某一純度或者游動性，特別是具有可用于處理的足夠的活X細(xì)胞)，那么該系統(tǒng)繼續(xù)操作。如果樣本質(zhì)量失敗三次77S,請求使用者交互作用。繼續(xù)的操作包括利用六個第二重復(fù)回路分揀樣本的其余部分。在該回路的開始時，微處理器確定樣本的分揀沒有完成789。如果樣本的分揀完成789，微處理器繼續(xù)工作，如果下一個樣本781是可用的，則吸入下一個樣本781，如果附加的樣本不可用，則斷開分揀操作793。如果樣本沒有完成206789，」微處理器首先檢查樣本的X/Y識別795以確定它是否在最佳范圍內(nèi)，換言之，進(jìn)行如上所述的漂移分析(在圖72中的761)。如果應(yīng)該進(jìn)行任何變化，這樣的變化被執(zhí)行并且再次檢查該識別795。如果此時識別仍然是不可接受的，分揀斷開793并且請求使用者交互作用?；蛘?，系統(tǒng)繼續(xù)工作以確定流體輸送系統(tǒng)是否以在最佳范圍內(nèi)的速度輸送流體和細(xì)胞801。該確定取決于所用的控制策略的類型。對于高回收控制策略，可通過評估純度或者觀察纟皮收集的群組的X/X+X來確定最佳速度。如果確定的純度高于所要求的純度水平，通過增大提供給注射泵的控制信號的速率來提高細(xì)胞的供給輸入速度803。這可能增加重合細(xì)胞以及降低純度，這是因為更多的包括X細(xì)胞的重合細(xì)胞可與X細(xì)胞一起被收集。如果確定的純度低于所要求的純度，通過減小提供給注射泵的控制信號的速率來降低細(xì)胞的供給輸入速度以減少重合細(xì)胞的頻率803。這樣，細(xì)胞輸入速度是收集的群組的確定純度與所需純度水平相比的一個函數(shù)，例如被收集的識別的X精細(xì)胞的一個函數(shù)。對于高純度控制策略，可通過計算損失的X細(xì)胞來確定最佳速度，例如廢棄的^廢棄的乂+收集的X。如果損失的X細(xì)胞的量或者百分比小于可接受的水平，那么通過增大提供給注射泵的控制信號的速率來提高細(xì)胞的供給輸入速度803。這可能增加重合細(xì)胞以及增大廢棄的X細(xì)胞的數(shù)量，這是因為更多的包括X細(xì)胞的細(xì)胞可與Y細(xì)胞一起被放棄。如果損失的X細(xì)胞的量或者百分比大于可接受的水平，那么通過減小提供給注射泵的控制信號的速率來降低細(xì)胞的供給輸入速度以減少重合細(xì)胞803。這樣，細(xì)胞輸入速度是放棄的群組確定的損失的X細(xì)胞與在收集的群組中的X細(xì)胞數(shù)量相比的一個函數(shù)，例如沒有被收集的X精細(xì)胞的一個函數(shù)。如果改變的速度是可接受的805，該系統(tǒng)進(jìn)行另一個系統(tǒng)檢查807。如果系統(tǒng)檢查是可接受的807,那么分揀在六個第二回路中繼續(xù)。如果是不可接受的，系統(tǒng)重新設(shè)定809。如果重新設(shè)定后，該系統(tǒng)是不可接受的或者如果修改的供給速度是不可接受的811，分揀停止793并且請求使用者交互作用773。分揀的液滴流被收集系統(tǒng)收集2201。被分揀到X細(xì)胞群組中的液滴通過在第一截取裝置2247中的離開窗2245以被第二截取裝置2249截取。從那里，包含X細(xì)胞的液滴流入到收集容器2207中。其它液滴被第一截取裝置2247截取并且被引導(dǎo)到廢物流槽2805。當(dāng)然，被第一截取裝置截取也可被保存，如上所述。當(dāng)適量的帶X的精細(xì)胞已經(jīng)被收集在收集容器中時，分揀可被中斷以使得精細(xì)胞在收集容器2207中被濃縮?？蓪⑿碌氖占萜鞣胖迷诘谝唤厝⊙b置2247的下方或者收集的流體可被注入到一個不同的容器并且更換收集容器。接著，分揀可恢復(fù)。在收集流體中的精細(xì)胞被濃縮，裝在試管中并且如上所述被冷凍。在搡作過程中的溫度控制在整個過程中的溫度控制可用于改善處理的結(jié)果。如上所述，在該過程中的各個步驟中(例如，著色和低溫保藏)精子的溫度可被控制。在本發(fā)明的幾個實施例中，在該方法的各個步驟中精細(xì)胞的溫度被控制以達(dá)到改善的結(jié)果。例如，圖105是本發(fā)明所涉及的一種溫度控制方法的一個實施例的工作流程圖。在精子樣本被收集時的溫度將由收集精子樣本的動物體溫確定。例如，在步驟2601,牛精子樣本在37。C下被收集。在步驟2603利用隔熱容器將精子樣本從收集地點輸送到實驗室。隔熱容器延遲精子的冷卻。在步驟2605，在樣本評估過程中，溫度保持在收集溫度以下，但超過對應(yīng)于玻璃態(tài)轉(zhuǎn)化溫度的溫度，精細(xì)胞在玻璃態(tài)轉(zhuǎn)化溫度以下可能遭受膜受損。例如，該溫度可保持在18-37。C的范圍內(nèi)。在另一個實施例中，在樣本評估過程中，該溫度可保持在24-37。C的范圍內(nèi)。在一個特定實施例中，在樣本評估過程中，精細(xì)胞被放置在溫度范圍在22-25。C之間的環(huán)境中。根據(jù)在精子到達(dá)實驗室的溫度，將它們放置在溫度范圍在22-25。C之間的環(huán)境中的效果可是對精子進(jìn)行持續(xù)的慢冷卻，以保持精子的溫度，或者略微升高精子的溫度。在一個實施例中，如在著色段中描述的，在步驟2607可升高溫度(例如，升高到40。C或者更高)以進(jìn)行著色。在另一個實施例中，還如上面所述，在著色步驟中，精細(xì)胞的溫度可在20-40。C的范圍內(nèi)。在步驟2609中，著色的精子混合物械J改置在水池中直至該混合物被引導(dǎo)到流式細(xì)胞計中。水池的溫度可與著色步驟所用的溫度類似。在一個實施例中，水池的溫度在40-47。C的范圍內(nèi)。在另一個實施例中，水池的溫度在20-37。C的范圍內(nèi)。在另一個實施例中，水池的溫度在20-25。C的范圍內(nèi)。在被放置在水池中保持在一分鐘和兩小時之間的任何時間后，在步驟2611著色的精細(xì)胞被上述流式細(xì)胞術(shù)分揀。在步驟2613，收集的精細(xì)胞被濃縮。濃縮可在溫度將不大大改變精細(xì)胞的溫度的環(huán)境下進(jìn)行。例如，在一個實施例中，濃縮可在溫度在20和25。C的范圍內(nèi)的環(huán)境下進(jìn)行。在步驟2615，增補(bǔ)劑、蛋白質(zhì)源和低溫保護(hù)劑被加入到濃縮精子。接著，在步驟2617，精細(xì)胞被裝在人工受精試管中。在一個實施例中，裝載步驟可在溫度將不大大改變精細(xì)胞的溫度的環(huán)境下進(jìn)行。最后，在步驟2619，在上述低溫保藏過程中，控制精子的溫度。在另一個實施例中，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，精細(xì)胞可在較低的溫度下被著色。例如，優(yōu)選可在較低的溫度下(例如，0。C至8。C)在流式細(xì)胞計中分揀精細(xì)胞。這可需要整體溫度控制的改變。首先，當(dāng)精細(xì)胞被引入流式細(xì)胞計之前對其冷卻時，在玻璃態(tài)轉(zhuǎn)化溫度以下的溫度保護(hù)精細(xì)胞不受冷沖擊的蛋黃和其它常用蛋白質(zhì)源通常不可用作這樣的可能污染和/或堵塞流式細(xì)胞計的射流的包含蛋白質(zhì)的物質(zhì)。這樣，優(yōu)選在進(jìn)行著色步驟之前對精細(xì)胞冷卻以利用在純精子中發(fā)現(xiàn)的自然冷沖擊保護(hù)劑，例如，精液。在冷卻前對精細(xì)胞著色的任何努力可能需要添加緩沖劑以保護(hù)可能稀釋純精子和降低抵抗冷沖擊的天然保護(hù)的精子。因此，在0。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度下分揀精細(xì)胞的本發(fā)明的一個實施例包括將精細(xì)胞;故置在溫度低于8。C的環(huán)境中以在著色前將精細(xì)胞冷卻到在0。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度。任何方法可用于冷卻精細(xì)胞，但優(yōu)選使用一種在冷卻過程中防止精細(xì)胞出現(xiàn)快速的溫度波動的方法。例如，在一個實施例中，容納精細(xì)胞的容器^^文置在室溫水池中，接著將精細(xì)胞放置在溫度低于8。C的環(huán)境中。在另一個實施例中，精細(xì)胞的溫度^f皮監(jiān)測并且在水池中加冰以進(jìn)一步冷卻精細(xì)胞。如上所述，著色步驟可被執(zhí)行，除了著色混合物經(jīng)受在0。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度以外。由于較低的溫度，需要著色細(xì)胞的孵化階段因此較長。在精細(xì)胞已經(jīng)被冷卻到8。C或者以下后，優(yōu)選避免使它們暖化。這樣，本發(fā)明的另一個實施例是在溫度在0。C至8。C的范圍內(nèi)的環(huán)境下操作流式細(xì)胞計。類似地，本發(fā)明的另一個實施例是將分揀的精細(xì)胞收集在收集容器中，所述收集容器被溫度在0。C至8。C的范圍內(nèi)的環(huán)境包圍。本發(fā)明的另一個實施例是在0。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度下添加任何增補(bǔ)劑、低溫保護(hù)劑、緩沖劑、蛋白質(zhì)源、抗生素、抗氧化劑或者其它添加物。關(guān)于低溫保護(hù)劑的添加，優(yōu)選可在0。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度下添加比在沒有分揀精細(xì)胞的情況下添加的略多的低溫保護(hù)劑。這樣，在一個特定實施例中，在0。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度下在精細(xì)胞已經(jīng)被分揀后包含7%的丙三醇(v/v)的低溫保護(hù)劑被加入到精細(xì)胞。如在上面的低溫保藏段中描述的從在O。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度對精細(xì)胞進(jìn)行過冷。但是，在過冷之前在添加低溫保護(hù)劑后精細(xì)胞需要在0。C至8。C的范圍內(nèi)的溫度下保持一段時間以為精細(xì)胞提供平衡低溫保護(hù)劑的時間。這樣，根據(jù)一個實施例，使得精細(xì)胞在30分鐘到3小時的范圍內(nèi)的時間段平衡低溫保護(hù)劑。在另一個實施例中，使得精細(xì)胞在l-2小時的范圍內(nèi)的時間段平衡低溫保護(hù)劑。在另一個實施例中，使得精細(xì)胞在90分鐘的時間段平衡低溫保護(hù)劑。常規(guī)溫度控制設(shè)備和方法(例如水池、孵化器、冷卻器和冷凍器)可用于加熱或者冷卻樣本以達(dá)到或者保持在本發(fā)明的以上實施例中的特定溫度。應(yīng)該理解的是，將樣本放置在溫度不同于樣本的環(huán)境下將導(dǎo)致樣本的溫度隨時間改變。甚至可在樣本內(nèi)具有溫度差。如已經(jīng)描述的，優(yōu)選使得樣本的溫度逐漸變化以有助于維持精子的健康。逐漸的溫度變化還用于減小樣本內(nèi)的溫度差。本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的是，樣本的溫度變化速度將受到許多因素的影響，包括樣本量、樣本容器的大小和形狀以及樣本和環(huán)境之間的溫度差的大小。但是，本領(lǐng)域技術(shù)人員容易能夠選擇適合的方法和設(shè)備以在考慮所有相關(guān)的因素后達(dá)到所需的溫度控制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，在示例性的溫度控制中具有大的變化的可能性。一般地，在精細(xì)胞已經(jīng)被冷卻后，優(yōu)選避免使它們暖化。另外，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，上面關(guān)于樣本收集、著色、分揀、液滴收集、濃縮和低溫保藏描述的溫度差可被結(jié)合在整個溫度控制中。另外，精細(xì)胞保持在任何溫度下的時間也可影響精子的健康。這樣，根據(jù)其中在整個過程中溫度被控制的實施例的處理優(yōu)選在下面描述的時間線內(nèi)完成。操作的時間線通常，優(yōu)選在可能減小對精子的傷害的最少的時間內(nèi)完成精子分揀構(gòu)成。如上所述，本發(fā)明還包括在高溫下著色以減小精細(xì)胞著色所需的時間。例如，所述的改進(jìn)的著色方法的某些實施例將著色所需的時間減小到10分鐘。同樣，上述新穎的細(xì)胞計數(shù)器可用于在比常規(guī)細(xì)胞計數(shù)器所需的時間更短的時間內(nèi)分揀精細(xì)胞。例如，利用上述技術(shù)的流式細(xì)胞計每秒可收集2000至10000個具有所需DNA特征的精細(xì)胞。另外，與常規(guī)低溫保藏方法相比，低溫保藏方法可用于減小被處理的精細(xì)胞的低溫保藏所需的時間。因此，本發(fā)明的一個實施例包括按照一個整體方法處理精子以利用一個或者多個省時創(chuàng)新以減小完成整個過程所需的時間。例如，根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，一批精細(xì)胞(例如，一次射出的精液)從雄性哺乳動物(例如公牛)收集，對于質(zhì)量控制的評估、著色、根據(jù)特定的DNA特征分揀，被裝在一個或者多個容器中(例如，試管)，并且在從收集時刻起12個小時的時間段內(nèi)低溫保藏。在另一個實施例中，時間段小于8小時。在另一個實施例中，時間段小于6小時。在另一個實施例中，時間段小于3小時。在另一個實施例中，時間段小于2小時。在另一個實施例中，時間段小于l小時。多通道分揀設(shè)備和方法為了在很短的時間內(nèi)分揀更多的精子，可并行使用多于一個細(xì)胞計數(shù)器單元分揀同一精子樣本。這樣做的一種方式是簡單地將著色的精子分成多個等份并且使得每一個等份通過不同的細(xì)胞計數(shù)器。但是，如下面所述的，通過設(shè)計一種包括在一個集成多通道細(xì)胞計數(shù)器單元中的多個細(xì)胞計數(shù)器單元的設(shè)備可提供某些優(yōu)點。共享集成(一體)平臺的多通道系統(tǒng)圖106-116示出包括多通道細(xì)胞計數(shù)器系統(tǒng)1001的本發(fā)明的一個實施例，其中多個單通道流式細(xì)胞計單元1003被結(jié)合在一起形成一個整體系統(tǒng)以生產(chǎn)分揀的產(chǎn)品。四個這樣的單元被示出在該特定實施例中，但該數(shù)量可改變。單元可以各種方式#_集成，如通過共享包括下列元件中的一個或者多個的集成平臺(1)公共顆粒供給1005;(2)7>共電磁輻射源1007;(3)公共殼體1009;(4)控制單元操作的公共輸入1011;(5)提供一個單元相對于另一個單元的操作評估的公共輸出1019;(6)公共流體輸送系統(tǒng)1021;(7)公共溫度控制系統(tǒng)1023;(7)公共電源1025;(8)公共廢物回收系統(tǒng)1027;(9)公共偏轉(zhuǎn)板系統(tǒng)1029;以及(9)公共清潔系統(tǒng)1031。在一個實施例中，該系統(tǒng)包括所有這些元件，^f旦應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的多通道系統(tǒng)可包括元件的任何組合。公共元件的使用是有益的，這是因為它使得該系統(tǒng)更有效和有益地運轉(zhuǎn)，通過減少變量的數(shù)量在通道中達(dá)到更一致的結(jié)果，有助于可能需要的任何故障檢驗，并且是經(jīng)濟(jì)的。該多通道手段還使得分揀系統(tǒng)更適于按比例增大或者減小。每一個細(xì)胞計數(shù)器單元1003具有類似于在前面的實施例的流式細(xì)胞計設(shè)備9的某些部件，并且為了方便起見，利用相同的附圖標(biāo)記表示相應(yīng)的部件并且加上符號(')。一般地，每一個單元包括噴嘴系統(tǒng)101'，安裝噴嘴系統(tǒng)的座331'，換能器105'，和用于將光束25'聚焦在離開噴嘴孔103，的流體流21'上的外照射光學(xué)系統(tǒng)417'，所有如前面所述的。每一個單元還包括如在第一實施例中操作的光檢測器117，以檢測來自于流21'中的顆粒的熒光發(fā)射31'和將發(fā)射31'轉(zhuǎn)換成電信號701，，電信號701'被處理以根據(jù)特定的DNA特征對顆粒進(jìn)行分類。每一個單元1003還可根據(jù)包含在液滴35'中的顆粒的分類將液滴33'分揀到不同的組或者群組123'和125'中。被單元分揀的液滴群組,皮收集系統(tǒng)2201收集。A.公共殼體和模塊化流式細(xì)胞計單元被安裝在公共殼體1009中的模塊布置中。在圖106和109-131中所示的實施例中，殼體具有底座1069和從底座向上延伸的兩個側(cè)壁1071。側(cè)壁具有用于在殼體1077的前部支承下蓋板1075的一對下臺肩1073和一對上臺肩1081。在殼體1077的前部的下蓋板1075安裝在下臺肩1073之間。上臺肩1081支承在殼體1085的后部的上蓋板1083。殼體1077、1085的前部和后部基本是開放的以提供該設(shè)備內(nèi)部的入口。應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，殼體1009可具有其它的構(gòu)造。另夕卜，應(yīng)該理解的是，各個單元可被安裝在分離的殼體中。流式細(xì)胞術(shù)單元1003作為模塊被并排安裝在殼體1009中的一個適合的框架1087上。特別是，用于噴嘴101'定位的噴嘴安裝座331'可拆卸地與固定在殼體的側(cè)壁1071上的橫梁1089相連(圖106),并且外照射儀器417'的底座429'可拆卸地緊固在殼體的側(cè)壁1071之間朝向殼體1085的后部延伸的具有一定角度的安裝板1093上(圖109)，該布置是這樣的，即，使得特定的單元作為模塊被安裝或者去除。該模塊化有助于在維護(hù)和/或更換的情況下安裝、拆卸，并且如果需要或者希望的話，能夠使得任何數(shù)量的流式細(xì)胞術(shù)單元1003容易被添加以增大系統(tǒng)的生產(chǎn)能力。B.公共流體供給和輸送系統(tǒng)該實施例的流體輸送系統(tǒng)1021能夠為每一個細(xì)胞計數(shù)器單元1003提供適合的流體。如在圖108中示意性示出的，系統(tǒng)一般包括用于在壓力下從載流體的公共供給1107輸送載流體17'的泵1105、用于在壓力下從鞘流體19，的公共供給1117輸送流體的氣體壓力系統(tǒng)1115和用于從各個供給接收流體并且根據(jù)需要在壓力下將流體輸送到各個細(xì)胞計數(shù)器單元1003的歧管系統(tǒng)1121。在圖116的特定實施例中，載流體的供給包括包含適量的這樣流體(例如，5ml)的容器1123。容器被支架1125固定，支架1125可是具有尺寸適于接收容器1123的腔1135的塊1133。該塊還具有用于容納包含在使用過程中調(diào)節(jié)該系統(tǒng)的適合的緩沖材料的容器1139的第二腔1137，如下面描述的。用于從容器輸送載流體的泵1105優(yōu)選(但不是必需的)是上述的注射泵1141。泵的柱塞可移動通過吸入行程以從容器1139吸入所選擇的載流體17，的量和通過排出行程以通過供給線1147將栽流體分配到歧管1177和從那里分配到系統(tǒng)的各個噴嘴101，。注射泵還能夠從包含緩沖劑的容器1139吸入流體和以所述的方式通過系統(tǒng)泵送緩沖劑。三通閥1149控制載流體和緩沖流體在泵1141之間的流動。該泵在處理器131'的控制下被變速馬達(dá)驅(qū)動。例如，可利用以選擇的變速操作的步進(jìn)馬達(dá)驅(qū)動泵以便以獲得單元1003的所希望的生產(chǎn)量所需的速度將載流體泵送到歧管系統(tǒng)1121。多個注射泵或者其它類型的流體輸送裝置可代替一個注射泵^L使用。在一個實施例中，鞘流體的供給1117包括容器1155，例如利用供給線1157與歧管1177相連的罐。氣體壓力系統(tǒng)1115能夠為罐加壓并且包括通過氣體線1163與罐相通的加壓氣體源1161(例如，空氣或者氮)，氣體線1163中具有調(diào)節(jié)器1165以控制被供給到罐的壓力和兩向?qū)?167,兩向閥1167在第一位置建立罐和氣源之間的連通并且在第二位置能夠使得罐排氣。氣體壓力調(diào)節(jié)器1165是一種可調(diào)的以控制從氣源供給的壓力的常規(guī)調(diào)節(jié)器。氣體壓力系統(tǒng)1115還包括用于為可用于以下面所述的方式?jīng)_洗流路的清潔溶液(例如罐中的去離子水)的供給1173加壓的氣體線1169。利用可以與閥1167相同的方式操作的兩向閥1167控制通過氣體線的流動。在一個實施例中，歧管1177包括層壓材料塊1179(圖112),層壓材料塊1179中形成有通道1181以限定流體流路1185,諸如在圖116中圖解示出的。(通道可通過在組裝疊層以形成塊之前在疊層的面中機(jī)加工溝槽來形成的)。流路包括與注射泵1141和鞘流體供給1117相連的入口1189、1191和用于為流式細(xì)胞術(shù)單元1003提供這樣的流體的出口組1193，每一個這樣的組包括載流體出口和一個鞘流體出口。利用閥Vl-V6控制通過各個流動通道1181的流動，在一個實施例中，閥V1-V6是在與歧管塊1179相連的殼體中的螺線管操作閥。該塊優(yōu)選由基本透明的材料構(gòu)成(例如，丙烯酸塑料)以有助于監(jiān)測系統(tǒng)1121和故障排除。在所示的實施例中，歧管1177與框架元件1203相連，框架元件1203靠近在噴嘴系統(tǒng)101'下方的殼體的底部在殼體1009的側(cè)壁1071之間延伸。歧管1177的入口和出口1193可包括以螺紋的方式擰在塊中的配件1205,諸如從UpchurchScientific,adivisionofScivex得到的無凸緣螺母和套圏配件。應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，一般的流路1185以及特別是歧管1177的設(shè)計和構(gòu)造可改變。參見圖116，用于載流體17'的歧管流路1185包括用于容納有限載流體供給(例如，10ml)的樣本存儲室1207。如果載流體包含精細(xì)胞，例如，靠近噴嘴101'提供這樣一個樣本存儲室有益于精細(xì)胞的生存力和游動性，這是因為將這樣的細(xì)胞存儲在小空間內(nèi)(即使在短時間內(nèi))可對游動性產(chǎn)生不利影響。利用一系列分別對應(yīng)于每一個噴嘴的兩向閥VIA-V1D控制載流體從樣本存儲室1207流到噴嘴101'。每一個閥V1A-V1D具有在樣本存儲室的針1217和供給噴嘴的針157，之間建立流體連通以在由注射泵1141產(chǎn)生的壓力下將載流體17'輸送到針的第一位置和在針1217和廢物系統(tǒng)1221之間建立流體連通的第二位置，廢物系統(tǒng)1221對于所有流式細(xì)胞術(shù)單元1003是公共的。在所示的實施例中，廢物系統(tǒng)1221包括用于容納廢物材料的廢物罐1223、諸如真空泵的用于在廢物罐中產(chǎn)生真空的機(jī)構(gòu)1225和連接閥V1A-V1D和廢物罐的廢物線1227。如果需要的話，閥V3被提供在廢物罐上游的廢物線中以打開和關(guān)閉廢物線。適合的憎水過濾器1233被提供在連接廢物罐1223和真空泵125的線中。用于鞘流體19，的歧管流路1185包括多個閥V2A-V2D。每一個閥具有建立與罐中的鞘流體的供給1117流體連通以通過鞘供給線1241將鞘流體19'輸送到各自流動主體133'的第一位置和通過廢物線1247在流動主體和廢物罐之間建立流體連通的第二位置。鞘流體被輸送到流動主體133'的壓力將取決于鞘罐壓力(如由調(diào)節(jié)器1165控制的)，鞘罐壓力可在l至100psi的范圍內(nèi)，優(yōu)選在10至50psi的范圍內(nèi)，優(yōu)選在15至40psi的范圍內(nèi)，并且優(yōu)選在20至30psi的范圍內(nèi)。盡管對于所有單元使用一個公共供給具有多個優(yōu)點，但可以預(yù)見的是，可從分離的源為至少一些流式細(xì)胞術(shù)單元提供樣本材料。C.公共電源和輸入和輸出控制流式細(xì)胞術(shù)單元1003還共享公共電源1025、公共功率輸送系統(tǒng)、利用微處理器131，控制通道的操作的公共輸入(GUI)715，和提供給微處理器以對一個通道相對于另一個通道的操作進(jìn)行評估的公共輸出。例如，公共輸出包括將數(shù)字化信號從每一個外照射系統(tǒng)提供給微處理器以指示由每一個通道測量的熒光強(qiáng)度、指示每一個通道分離顆粒的速度、指示著色變化(可由來自于X和Y細(xì)胞的熒光脈沖的強(qiáng)度差表示)以及指示由用于在顆粒之間的識別的每一個通道使用的判定邊界763。作為另一個示例，公共輸出包括將輸出信號從分裂傳感器389'提供到微處理器以指示每一個通道的液滴分裂位置107'。D.公共溫度控制另外，溫度控制系統(tǒng)1257^皮提供以調(diào)節(jié)支座1133中的容器1123的內(nèi)容物的溫度和歧管1177的溫度。這樣的溫度控制減少系統(tǒng)的可變性，從而提供在通道之間的更一致的測量，并且對于某些類型的細(xì)胞(例如，精細(xì)胞)，有助于保持細(xì)胞的生存力。在一個實施例中，溫度控制系統(tǒng)1257包括流體流路159，流體流路159包括在支座1133中的流體通道1263和在歧管座1179中的流體通道1269;以及用于計算在所選擇的溫度下通過流路的熱流體(例如，水)的控制單元1265。該溫度優(yōu)選是這樣的，即，使得流體(特別是載流體)保持在最佳溫度以使得細(xì)胞生存力達(dá)到最大，并且如果包含精細(xì)胞，使得精子的游動性達(dá)到最大。截止閥V6位于流路中以控制通過流路的流動。溫度控制單元可用于在如上所述分揀之前使得精細(xì)胞保持在所需的溫度。在操作者或者適合的編程的控制下利用常規(guī)裝置(諸如螺線管)操作在流體輸送系統(tǒng)1021中的所有閥。連接在歧管座1179外部的系統(tǒng)的部件的各個流體流線優(yōu)選是基本透明的塑料管以觀察任何堵塞。例如，管可為外徑為0.0625英寸的FEP聚合物管。溫度控制系統(tǒng)1257的流線優(yōu)選略長(例如，外徑為0.125英寸)以提供較大的流動能力。E.公共光束和束分裂系統(tǒng)如上所述，多通道系統(tǒng)共享電磁輻射或者光束1007的公共源。例如(非限定性的)，源可是來自于UV多線激光器的激光束，主要具有351.1納米和363.8納米的波長。或者，優(yōu)選使用脈沖激光器(例如，模式鎖定激光器)，特別是使得數(shù)字采樣與脈沖激光器同步(如在脈沖激光器段中描述的)以增大被輸送到每一個細(xì)胞計數(shù)器單元的有效功率，從而增加可利用一個激光器操作的細(xì)胞計數(shù)器單元的數(shù)量。產(chǎn)生激光束所需的功率將根據(jù)每一個流式細(xì)胞術(shù)單元的要求和單元的數(shù)量改變。例如，如果具有N個單元并且每一個單元需要具有W瓦的有效功率的光束，那么將需要產(chǎn)生具有功率(WxN)+1^的激光束，其中L等于在系統(tǒng)的光學(xué)元件之間的系統(tǒng)功率損失。所有流式細(xì)胞術(shù)單元使用一個激光器與利用多個激光器的系統(tǒng)相比是經(jīng)濟(jì)的。這也是有效的并且提供從一個通道到下一個通道的更一致的測量，這是由于不同束特征沒有變化(例如，束強(qiáng)度、光偏振、束發(fā)散)或者因沒有利用多個激光器而導(dǎo)致的電子噪聲。才艮據(jù)本發(fā)明的一個實施例，束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)用于將一個激光束分裂成三個或者多個分離束。如圖117中所示，例如，50/50束分裂器1270(即，用于將一個束分裂成兩個具有基本相等的強(qiáng)度的分離束的束分裂器)可用于將一個束25'分裂成兩個束1270A、1270B。利用第二50/50束分裂器1271以將兩個束1270B中的一個分裂成兩個附加的束1271A、1271B，人們可從一個束25'產(chǎn)生總共3個束1270A、1271A、1271B。每一個束可被引導(dǎo)到流式細(xì)胞計的光學(xué)系統(tǒng)中，例如圖117中所示的外照射光學(xué)系統(tǒng)415'。人們還217可使用附加的50/50束分裂器以將一個激光束分裂成任何數(shù)量的附加的分離束。如圖118中示意性示出的，例如，第三束分裂器1272可被加入到3路束分裂系統(tǒng)(圖117)以使三個束分裂器1270、1271、1272可用于將一個束25'分裂成四個分離束1271A、1271B、1272A、1272B。由此，人們可容易地理解，一個束可被分裂成任何數(shù)量的分離束。其它束分裂布置可用于將入射源束分裂成多個對應(yīng)于各個單元的光束。一個束分裂系統(tǒng)的一個希望的實施例被示出在圖106和109中。束引導(dǎo)系統(tǒng)1273被提供以將公共束1007引導(dǎo)到各個流式細(xì)胞術(shù)單元1003的光學(xué)儀器417'。在圖106和111所示的實施例中，引導(dǎo)系統(tǒng)1273包括安裝在殼體1009的一個側(cè)壁1071上的下鏡組件1279、在下鏡組件上方的安裝在側(cè)壁1071上的上鏡組件1281和一系列反射濾光器1283,—個與每一個光學(xué)儀器417'相關(guān)。下鏡組件用于將束1007從適合的源向上反射到上鏡組件，并且上鏡組件用于通過在側(cè)壁1071中的開口將束反射到各個儀器417'的反射濾光器431'。在一個實施例中，下鏡組件包括緊固在殼體1009的側(cè)壁1071上的底座1285、由適合的機(jī)構(gòu)1291在底座上垂直移動的級1289，諸如測微計，在級上的可傾斜的平臺1293(例如，從Newport得到的運動光學(xué)座型號P100-P)和在平臺上的鏡1295,可通過將級和鏡平臺移動到適合的位置來調(diào)節(jié)鏡的位置。上鏡組件與下鏡組件類似，包括底座1297、可垂直移動的級1299、在級上的可傾斜的平臺1301和在平臺上的鏡1303。一對目標(biāo)板1309在上鏡組件與下鏡組件之間固定在殼體1009的側(cè)壁上。目標(biāo)板1309中具有垂直排列的孔1311以有助于上鏡組件與下鏡組件的調(diào)節(jié)使得入射束1007精確地朝向儀器417'的反射濾光器431'反射，所有濾光器與入射束對準(zhǔn)。頭三個反射濾光器1315、1317、1319的每一個用作束分裂器，即，它用于反射特定百分比的束并且使得其余百分比的束通過。例如，對于四個外照射儀器，頭三個儀器的反射濾光器431'分別反射一定百分比的激光1007，以使該系列的頭三個單元的每一個接收初始光束的25%的電磁輻射。例如，第一、第二和第三單元的反射濾光器可分別反射25%、33%和50%的入射光。該系列的最后一個反射濾光器1321優(yōu)選將所有的剩余光(25%的初始光束)反射到該系列的最后一個儀器。因此，四個儀器中的每一個應(yīng)該接收相同強(qiáng)度的輻射(光)以詢問在各個流中的細(xì)胞。根據(jù)在上述系統(tǒng)1273中所用的束分裂裝置，激光束優(yōu)選可具有特定的偏振。介電濾光器的透射反射比可根據(jù)光的偏振改變。另外，當(dāng)涉及線性偏振光時，介電濾光器(所制造的介電濾光器以特定入射角使用)可對于入射角的改變過于敏感。圓形或者橢圃形偏振光在一定程度上緩和該問題，這是由于當(dāng)光與濾光器相互作用時，光的偏振矢量相對于介電濾光器的光學(xué)軸線處于多個不同的取向。這樣，圓形或者橢圓形偏振光模擬隨機(jī)偏振光，從而為介電濾光器上的入射角提供較大的容限。因此，如果上述激光器產(chǎn)生例如具有垂直偏振的光束，那么優(yōu)選可在它被分裂之前將該光轉(zhuǎn)換成圓形偏振光。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，這可通過使得束通過由偏(濾光器)來實現(xiàn)。這樣由該波板傳輸?shù)氖鴮⒕哂谢緸閳A形的偏振，并且它可更容易分裂以為相應(yīng)的流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)提供多個束。另外，通過轉(zhuǎn)動波延遲板以改變激光偏振和用于制造波板的材料的光學(xué)軸線之間的角度，偏心度可被引入到束的基本圓形的偏振中(即，可使得偏振更趨于橢圓)。改變束的橢圓偏振的偏心度可通過使得更大百分比的光的偏振矢量相對于介電濾光器的光學(xué)軸線具有特定的角度來改變介電濾光器的透射反射比。因此，如果在多個細(xì)胞計數(shù)器單元中的光的平衡在所需范圍外，人們可轉(zhuǎn)動波板以增大或者減小橢圓偏振光的偏心度，從而改變各個濾光器的透射反射比直至達(dá)到更好的平衡。類似地，如果波板傳輸橢圓偏振光，人們可通過轉(zhuǎn)動濾光器來影響其中一個濾光器的透射反射比。無論采用什么方法將一個光束分裂成多個分離束，都可通過選擇性地堵塞一定百分比的光來達(dá)到被輸送到每一個細(xì)胞計數(shù)器單元的功率的平衡以將所有細(xì)胞計數(shù)器單元降至相同的功率水平。例如，每一個外照射系統(tǒng)415'的中性密度濾光片447'可被選擇以阻塞或多或少的光，從而平衡由束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)輸送到每一個獨立的細(xì)胞計數(shù)器單元的照射功率。如果多通道單元的一個通道從束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)接收較多的照射，傳輸很少的光的射功率與其它的通道一致。盡管不是必需的，但是優(yōu)選，通道與通道的照射功率的變化可小于10%。優(yōu)選，通道與通道的照射功率的變化可小于5%。應(yīng)該理解的是，如上所述，脈沖激光掃描對于多通道流式細(xì)胞術(shù)可能是需要的。例如，UV多線激光器可被以85MHz操作的模式鎖定脈沖激光器代替以使得較多的流式細(xì)胞術(shù)通道被一個激光器提供功率。例如，以85MHz的頻率發(fā)出寬度(持續(xù)時間)為12皮秒的脈沖的模式鎖定激光器的每一個脈沖中提供的峰值功率約是激光器平均功率輸出的800倍。這樣，模式鎖定激光器(例如，來自于Spectra-Physics的Vanguard350)可提供足夠的照射能量以操作幾打細(xì)胞計數(shù)器單元(例如，32個細(xì)胞計數(shù)器單元)同時僅以350毫瓦操作?？梢灶A(yù)見的是，使用光纖將光提供給單元。在該實施例中，光纖用于將來自于激光器的光引導(dǎo)到各個單元，從而無需上述引導(dǎo)系統(tǒng)。F.公共偏轉(zhuǎn)板在圖106和108-116中所示的實施例中，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元1003的分揀系統(tǒng)119'基本與在第一實施例中所述的分揀系統(tǒng)119相同，不同之處在于，單元優(yōu)選共享在殼體的前部在殼體1009的寬度上延伸的兩個公共偏轉(zhuǎn)板1331。利用一組公共的偏轉(zhuǎn)板具有如下優(yōu)點，包括從一個通道到下一個通道的一致電荷、公共電源的使用、提供更穩(wěn)定的電場和更均勻的液滴偏轉(zhuǎn)的較大的板區(qū)域以及用于分揀的樣本收集的一致的偏轉(zhuǎn)角。偏轉(zhuǎn)板1331安裝在被緊固在殼體1009上的框架1333上?；蛘撸瑸槊恳粋€單元提供獨立的板。G.公共收集系統(tǒng)220在圖107和116中所示的實施例中，y〉共收集系統(tǒng)2801包括上面關(guān)于一個單元的收集系統(tǒng)2201描述的用于每一個細(xì)胞計數(shù)器單元的兩個截取裝置。但是，公共框架2803被提供以固定所有八個截取裝置。另外，用于每一個細(xì)胞計數(shù)器單元的兩個截取裝置中的一個將流體引入到廢物溜槽2805而不是收集容器中。廢物溜槽使得廢棄包含基本沒有價值的顆粒的分揀的液滴(例如，對于養(yǎng)殖奶牛的帶有Y染色體的精細(xì)胞)更容易。如果優(yōu)選保持所有分揀的液滴，廢物溜槽可被去除并且可將收集容器放在每一個截取裝置下方。在圖107和116中所示的實施例中的四個收集容器放置在收集托架2807的表面中的開口中。公共水池(未示出)可被提供在收集托架的表面下方以控制收集容器的內(nèi)容物的溫度。H.多通道控制各個流式細(xì)胞術(shù)單元被微處理器131，控制(或者其它適合的處理系統(tǒng))，微處理器13r優(yōu)選具有上述的公共輸入和公共輸出。每一個流式細(xì)胞術(shù)單元1003的操作參數(shù)優(yōu)選可以與其它單元獨立的形式被設(shè)定以使這樣的參數(shù)可在單元之間被改變。這些參數(shù)例如可包括液滴形成的頻率、特定單元所用的控制和分揀策略、每一個單元所用的用于在被供給到單元的流體中分類和分揀顆粒的標(biāo)準(zhǔn)，和其它參數(shù)。例如，在某些情況下，優(yōu)選可以第一流速為一個或者多個單元提供載流體17'并且以第二(不同)流速為其它單元提供載流體。類似地，優(yōu)選可對于一個或者多個單元使用一種控制分揀策略(例如，"高效率"策略)同時對于其它單元使用不同的策略(例如"低損失，，策略)。通過基于歷史數(shù)據(jù)和實時收集的數(shù)據(jù)控制單元之間的這些參數(shù)的變化，單元的處理量可被管理和使得系統(tǒng)的結(jié)果達(dá)到最佳。獨立操作的能力還允許使得所選擇的單元在比需要或者使用的所有單元少的情況下被操作。I.多通道系統(tǒng)的操作該實施例的多通道系統(tǒng)的操作類似于上述的，不同之處在于，多個流式細(xì)胞術(shù)單元適于并行地進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)#:作(即，在同一時間段或者重疊時間段)以使得處理量較高。在開始運轉(zhuǎn)之前，如果需要的話，通過將閥V5移動到其清潔位置來利用罐1173中的清潔溶液沖洗流體輸送系統(tǒng)1021。接著利用注射泵1141用緩沖流體對系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。在該程序中，閥V1A-V1D和閥V2A-V2D移動以建立與在真空下的廢物容器1223的連通。因此，清潔溶液和/或緩沖流體流過系統(tǒng)廢棄。該構(gòu)成清潔系統(tǒng)1021，啟動注射泵1141和將空氣泡從系統(tǒng)去除。對于適當(dāng)定位的三向閥1149，注射泵11414皮操作通過吸入行程以吸入一定量的包含顆粒(例如精細(xì)胞)的載流體17',接著閥1149被移動以建立與歧管1177的連通，并且注射泵移動通過排出行程以將一定量的載流體泵送到樣本存儲室1207中以充填其。利用溫度控制系統(tǒng)1257控制載流體17'的溫度以使得載流體中的細(xì)胞保持在所需溫度。對于位置適于建立與樣本存儲室207連通的閥VIA-V1D，注射泵l141的進(jìn)一步操作迫使栽流體通過線到達(dá)各個噴嘴組件的針以流過噴嘴101'，如上所述。同時，并且對于位置適于建立與鞘流體罐l155連通的閥V2A-V2D，鞘流體19'被迫通過供給線到達(dá)各自流動主體和并且通過噴嘴，也如上所述。該過程持續(xù)足以將適量的流體泵送通過系統(tǒng)IOOI的適當(dāng)?shù)臅r間。一種特定運轉(zhuǎn)的持續(xù)時間將根據(jù)各個容器中的載流體的質(zhì)量、載流體被泵送通過系統(tǒng)的速度以及系統(tǒng)中的通道數(shù)量而改變。例如，運轉(zhuǎn)僅持續(xù)有限的時間段(例如，15分鐘，在該過程中l(wèi)ml的載流體被輸送給每一個噴嘴)或者它可無限連續(xù)，如果需要的話，流體的供給被補(bǔ)充。在針157'被堵塞的情況下，適合的閥V1被移動以建立與廢物容器1223的連通。進(jìn)入流動主體133'的鞘流體19'接著將在真空1225的作用力下流回通過針157'廢棄，這樣沖洗和清潔針。如果需要停止流到特定噴嘴，閥V1和V2被簡單地切換到它們的廢棄位置。盡管這里上面關(guān)于單通道和多通道構(gòu)造描述的系統(tǒng)已經(jīng)對于顆粒分離，諸如X和Y細(xì)胞的分離被描述，但可以預(yù)見的是，這樣的顆粒包括任何具有不同特征(可任意地被表示為特征A和特征B)的顆粒。另外，應(yīng)該理解的是，在一些實施例中，分揀功能可被完全取消，以使流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備(單通道或多通道)僅用作對顆粒分類而表示對它們進(jìn)行分揀。盡管上面在并行地操作流式細(xì)胞術(shù)單元的范圍內(nèi)對多通道系統(tǒng)進(jìn)行了描述，但是應(yīng)該理解的是，單元也可串行地操作。例如，可以預(yù)見的是，在一個流中的顆粒可被一個單元分揀到多個群組中，并且這樣分揀的群組的一個或者多個接著通過串行的一個或者多個其它的單元以進(jìn)行附加的分揀操作，利用相同或者不同的分揀策略分揀不同的顆粒。J.垂直多通道實施例圖119和120示出另一個示例性多通道流式細(xì)月包術(shù)系統(tǒng)。該系統(tǒng)4001包括結(jié)合在一起的四個細(xì)胞計數(shù)器單元4009。噴嘴系統(tǒng)101'、外照射光學(xué)系統(tǒng)450'、偏轉(zhuǎn)板629'、樣本臺4051、污染防止機(jī)構(gòu)4031和每一個單元4009的其它部件安裝在共享的垂直安裝板4011上。參見圖120，一個激光器4013和基本類似于上述束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)1273的束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)4015為每一個外照射系統(tǒng)450，提供照射。激光器4013通過在包含束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)4115的公共殼體4021中的孔4019(圖119)。束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)4115和外照射系統(tǒng)450'在板4011的一側(cè)。每一個外照射系統(tǒng)450，的聚焦透鏡組件491'通過板4011延伸到另一側(cè)(與圖26和27所示的單通道系統(tǒng)中所示的構(gòu)造類似)，單元4009的其余部件安裝在該另一側(cè)。單元4009都是這樣取向的，即，使得它們的噴嘴系統(tǒng)101，向下引導(dǎo)流體流21'。每一個單元4009還具有收集系統(tǒng)4031，收集系統(tǒng)4031包括用于收集包含所需顆粒群組的液滴33的收集容器4033和用于收集其它液滴33的廢物容器4035。水池(未示出)或者其它溫度控制可用于控制收集容器4033的溫度。多個流式細(xì)^^術(shù)單元4009也可共享一個^^共電源(未示出)、用于控制單元的操作的公共輸入(未示出)和使得單元4009的操作的相互之間的比較評估的公共輸出(未示出)。兩個示例性多通道實施例IOOI、4001的223比較證明，在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下，在一個多通道系統(tǒng)中的集成平臺的性質(zhì)和多個流式細(xì)胞術(shù)單元之間的特征共享可4皮大大改變。多通道處理對整個方法的影響可利用多通道精子分揀執(zhí)行上述整個方法以減小分揀精細(xì)胞所需的時間。除了很少的例外，該方法不改變。一個微小的變化是，分揀的精細(xì)胞將被收集在多個收集容器中。如果需要的話，多個收集容器的內(nèi)容物可被結(jié)合以濃縮。或者，每一個收集容器的內(nèi)容物可被獨立濃縮。應(yīng)該理解的是，利用多個細(xì)胞計數(shù)器單元處理該批精細(xì)胞可使得從收集到低溫保藏步驟的完成分揀一批精細(xì)胞(例如，一次射出的精液)所需的時間被大大減少。例如，如果四個細(xì)胞計數(shù)器單元并行操作以處理該批精細(xì)胞，完成分揀所需的時間被減小到利用一個細(xì)胞計數(shù)器單元分揀該批精細(xì)胞所需的時間的四分之一。這樣，通過利用四個并行操作的細(xì)胞計數(shù)器單元分揀精子的步驟代替利用一個細(xì)胞計數(shù)器單元分揀精子的步驟，完成該方法從收集到完成冷凍步驟的示例性時間線可被減小。還可通過增加并行操作以分揀在樣本中的精細(xì)胞的細(xì)胞計數(shù)器的數(shù)量來進(jìn)一步減少該時間，經(jīng)受在具有多于四個這樣的單元的并行系統(tǒng)的操作中包含的實踐限制。這樣，根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，通過在一個多通道流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中根據(jù)特定的DNA特征分揀精細(xì)胞執(zhí)行上述整個過程中的分揀步驟。在另一個實施例中，精子處理方法包括在一個多通道流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中根據(jù)特定的DNA特征分揀精細(xì)胞的步驟，其中每一個通道每秒收集在2000-IOOOO個范圍內(nèi)的具有所需DNA特征的精細(xì)胞。多通道分揀示例I利用人工陰道從性成熟的公牛收集公牛精子并且在37。C下在溫度控制容器中將樣本輸送到附近的著色設(shè)施。在接收后，利用Hamilton-Thorn游動性分析器(IVOS)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的和公知的程序(Farrel等的Theriogenology49(4):871-9(Mar1998))對精子的濃度、視覺游動性、游動性和前進(jìn)性進(jìn)行分析。通過在41。C的包含10mM丙酮酸鹽的TCA#2緩沖劑中懸浮一個精子的等份使得整個pH為7.35來制備lmL的150xl(^個精子/mL的精子懸浮液的六個管。接著，不同量的在水中的10mM的Hoechst33342溶液被加入精子樣本以產(chǎn)生最終染料濃度為200、300、400、500、600和700inM的Hoechst33342。六個樣本中的每一個在41。C下被孵化約30分鐘。利用流式細(xì)胞術(shù)對樣本進(jìn)行分析并且對于200、300和400^M的Hoechst33342利用迭代計算機(jī)算法評估X細(xì)胞群組的％CV。300和200nM的Hoechst33342的％CV被確定在接近1.3%的可接受的范圍內(nèi)。因此，可以確定濃度為250nM的Hoechst33342可用于對一批精細(xì)胞進(jìn)行著色以進(jìn)一步處理。通過在41。C的包含10mM丙酮酸鹽的TCA#2緩沖劑中懸浮一個精子的等份(也使得整個pH為7.35)來制備每一個包含2mL的150xl0M"精子/mL的精子懸浮液的兩個管。接著，10mM的Hoechst33342水溶液被加入到兩個精子懸浮液中的每一個以產(chǎn)生最終染料濃度為250pM的Hoechst33342。精子懸浮液在41。C的水池中保持30分鐘。在30分鐘后，將精子懸浮液從41。C的水池中取出并且4(iL的25mg/mL的FD&C#40被加入到其中一個懸浮液中。另一個被儲放在環(huán)境溫度下以為評估實驗提供比較樣本。著色的和冷卻的精子懸浮液被裝在一個四通道液滴分揀流式細(xì)胞計的一個通道的樣本端口上。Delbecco'sPBS用作鞘流體。細(xì)胞計裝有上述定向噴嘴并且具有60孩t米的孔。如上所述垂直于噴嘴的縱向軸線安裝半圓形擋板。換能器以54KHz操作并且液滴分裂位置,iLA工控制。上述的一種外照射光學(xué)系統(tǒng)用于引導(dǎo)連續(xù)波激光束的25%以垂直角度與流體流相交。聚焦和收集透鏡具有0.65的數(shù)值孔徑。束被聚焦成寬度小于3微米的斑以縫隙掃描精細(xì)胞。利用數(shù)字信號處理抽取臨界斜坡差和對于每一個檢測脈沖波形的脈沖區(qū)域。在兩維CSD中的對X細(xì)胞、Y細(xì)胞和未確定的細(xì)胞分類的分類參數(shù)和脈沖區(qū)域特征空間被人工輸入到處理系統(tǒng)中以根據(jù)染色體含量對精細(xì)胞分類。利用用于收集X細(xì)胞的重合接受分揀策略根據(jù)X和Y染色體含量對精子分揀，分配每一個未分類的精子為X細(xì)胞或者Y細(xì)胞的50/50概率。樣本流體速度被人工調(diào)節(jié)以使得收集的X細(xì)胞群組的純度(用GUI表示)保持在85%或者更高并且使得X細(xì)胞分揀速度保持在最小速度以上。在15000000個X精子已經(jīng)被收集在已經(jīng)在鞘流體中浸泡至少一個小時接著涂有0.5mL的pH為7.0的在TCA#2緩沖劑中的IO%的蛋黃的管中后，該管被取出并且利用已經(jīng)被類似制備的附加管代替。在從流式細(xì)胞計中取出收集管后，立刻制備著色的但未被分揀的精子懸浮液的比較樣本。分揀的和比較樣本在15mL管中以7min⑥750g被離心分離。利用轉(zhuǎn)移吸管去除上清液以產(chǎn)生約40000000個精子/mL的濃度。pH7.0的TCA弁2緩沖劑被加入到精子懸浮液以產(chǎn)生約20000000個精子/mL的最終濃度。該過程持續(xù)直至流式細(xì)胞計已經(jīng)產(chǎn)生四個收集管(A2-A5)。利用IVOS評估分揀的樣本和"未分揀的"比較樣本。利用差分干涉對比顯微鏡對于分揀的樣本A3及其未分揀的比較樣本的純的精子的頂體的百分比進(jìn)行測試。利用血球計對分揀的樣本計數(shù)以確定每小時分揀的精子的輸出速度。利用流式細(xì)胞計再次分析確定帶X染色體的精子的百分比。對于分揀的樣本和"未分揀的"比較樣本的IVOS評估結(jié)果被提供在圖121(游動性)和122(前進(jìn)性)中。被分揀到每一個收集管中的精子總數(shù)被示出在圖123中，每一個收集階段的每小時分揀精子的速度被示出在圖124中。每一個被分揀的樣本的帶X染色體的精子的百分比被列在圖125中。精子的頂體完整性評估的結(jié)果為被分揀的樣本純的精子的頂體為72%，未分揀的比較樣本為78%。結(jié)果表明了多通道流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)的每一個通道在保持時間內(nèi)以大于85%的純度每秒產(chǎn)生多于5000個分揀X細(xì)胞的技術(shù)能力。該結(jié)果還表示在理想條件下在保持時間內(nèi)以大于85%的純度每秒產(chǎn)生多于7000個分揀X細(xì)胞的技術(shù)能力。另外，該結(jié)果表示利用這樣的高速流式細(xì)胞術(shù)分揀獲得的分揀精細(xì)胞的樣本將僅在游動性上略孩支降低，表示分揀的精子具有良好的生育性。多通道分揀示例II利用人工陰道從性成熟的公牛收集公牛精子。一次射出的精液被分成兩個等份。第一個250itiL的精子等份被懸浮在5mL的37。CTriladyl⑧中。包含一次射出的精液的其余部分的第二等份被懸浮在兩部分37t)的碳酸鹽緩沖劑中(pH6.1-6.2)。兩個等份在37。C下在溫度控制容器中被輸送到處理設(shè)施。在處理設(shè)施，第一等份浮在200mL的燒杯中的120mL的37。C的水中并且被放置在冷室中以慢冷到5。C。利用Hamilton-Thorn游動性分析器(IVOS)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的和公知的程序(Farrel等的Theriogenology49(4):871-9(Mar1998))對第二等份的濃度、游動性和前進(jìn)性進(jìn)行分析。通過將來自于第二等份的包含150000000個精子的子等份轉(zhuǎn)移到空管，以500g離心分離5分鐘，去除上清液并且使得精子丸在lmL的28'C的pH為7.35的包含10mM丙酮酸鹽的TCA#2緩沖劑再次懸浮來制備lmL的150xl(^個精子/mL的精子懸浮液的三個管。不同量的10mM的Hoechst33342溶液被加入到三個管的每一個以產(chǎn)生最終染料濃度為100、150和200jaM的Hoechst33342。三個管的每一個在28。C下保持60分鐘。利用流式細(xì)胞術(shù)對三個管的每一個中的精子進(jìn)行分析并且利用交互計算機(jī)算法對于100、150和200(iM的Hoechst33342著色條件確定X群組的總焚光強(qiáng)度的CV。150和200jxM的Hoechst33342的CV被確定在接近1.3%的可接受的范圍內(nèi)。因此，可以確定使用包括濃度為150nM的Hoechst33342的著色條件進(jìn)行分揀。通過轉(zhuǎn)移來自于第二等份的包含750000000個精子的子等份，以500g離心分離5分鐘，去除上清液并且使得精子丸在28。C的pH為7,35的包含10mM丙酮酸鹽的TCA弁2緩沖劑再次懸浮來制備5mL的150xl(^個精子/mL的精子懸浮液的一個管。一定量10mM的Hoechst33342水溶液被加入到管中以產(chǎn)生最終染料濃度為150nM的Hoechst33342。該管在28。C下保持60分鐘。在60分鐘后，從28。C的水池中取出管并且加入10nL的25mg/mL的FD&C#40。現(xiàn)著色的和冷卻的精子懸浮液被裝在一個多通道液滴分揀流式細(xì)胞計系統(tǒng)的一個通道的樣本端口上。精子懸浮液凈皮保持在28。C。利用如在多通道示例I中所述的基本相同儀器設(shè)置，利用重合中斷分揀策略在將具有18000000個精子的濃縮的X細(xì)胞群組放置在一個收集管中所需的時間內(nèi)由流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分離帶X和Y染色體的精子，所述收集管是通過已經(jīng)在鞘流體中浸泡至少一個小時接著加入0.5mL的pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Triladyl⑧低溫保藏介質(zhì)來制備。精細(xì)胞以在每秒25000和30000個細(xì)胞之間的速度被引入到流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中。以在每秒4500個至6000個的速度收集濃縮的X細(xì)胞群組。當(dāng)約18000000個精子已經(jīng)被分揀到收集管中時，該管被取出并且利用已經(jīng)被類似制備的附加管代替。在從流式細(xì)胞計中取出收集管后，分揀的精子懸浮液以7111111@75(^被離心分離。利用轉(zhuǎn)移吸管去除上清液以產(chǎn)生約100000000個精子/mL的濃度。pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Triladyl⑧低溫保藏介質(zhì)被加入到精子懸浮液以產(chǎn)生約50000000個精子/mL的最終濃度。該過程持續(xù)直至流式細(xì)胞計已經(jīng)產(chǎn)生三個收集管(Dl-D3)。約52000000個精子在259分鐘內(nèi)被分揀以產(chǎn)生每小時分揀約12000000個濃縮X精細(xì)胞的平均收集速度。重新懸浮的分揀的樣本管浮在200mL的燒杯中的120mL的28。C的水中并且被J故置在5。C的冷室中以慢冷。在分揀的樣本達(dá)到5。C后，分揀精子的三個管被結(jié)合在一個管中。利用IVOS分析匯集的樣本以確定游動性百分比、前進(jìn)性百分比和濃度。附加的pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Triladyl⑧低溫保藏介質(zhì)被加入樣本以產(chǎn)生約50000000個精子/mL的最終濃度。如由流式細(xì)胞計再次分析確定的，在分揀的匯集的樣本中的帶X染色體精子的百分比為87。/。。IVOS評估與同一一次射出的精液的未分揀的樣本相比的概述;f皮示出在圖126中。在5。C的冷室中匯集的分揀的樣本和第一等份被裝在標(biāo)準(zhǔn)0.25cc的試管中。裝載的試管被轉(zhuǎn)移到可編程的冷凍裝置并且被下列程序冷凍5min@5。C，從5°C冷卻到-12°C@4°C/min，從-12°C冷卻到-100。C@40°C/min，從-100。C冷卻到-140。C②20。C/min，保持在-140。C。在試管已經(jīng)達(dá)到-140。C后，將它們從冷凍裝置快速取出并且放入液氮中。在37。C孵化30和120分鐘后對利用IVOS分析解凍的試管的游動性百分比和前進(jìn)性百分比。一組兩個分揀的和未分揀的試管的結(jié)果概括在圖127和128中。多通道分揀示例III利用人工陰道從性成熟的公牛收集公牛精子。一次射出的精液被分成兩個等份。第一個250jiL的精子等份被懸浮在5mL的37。CTriladyl⑧中。包含一次射出的精液的其余部分的第二等份被懸浮在兩部分37。C的碳酸鹽緩沖劑中(兩部分NaHCO3為0.097摩爾/升，KHCO3為0.173摩爾/升以及<:611807-1120為0.0卯摩爾/升)(pH6.1-6.2)。兩個等份在37。C下在溫度控制容器中被輸送到處理設(shè)施。在處理設(shè)施，第一等份浮在200mL的燒杯中的120mL的37。C的水中并且被放置在冷室中以慢冷到5。C。利用Hamilton-Thorn游動性分析器(IVOS)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的和公知的程序(Farrel等的Theriogenology49(4):871-9(Mar1998))對第二等份的濃度、游動性和前進(jìn)性進(jìn)^f于分析。通過將來自于第二等份的包含卯ooooooo個精子的部分分別轉(zhuǎn)移到兩個空管中，每一個管以500g離心分離5分鐘，從每一個管中去除上清液并且使得每一個精子丸在6mL的28。C的pH為7.35的包含10mM丙酮酸鹽的TCA并2緩沖劑再次懸浮來制備150xl(^個精子/mL的精子懸浮液的兩個管。lOmM的Hoechst33342水溶液被加入到兩個管的每一個以在一個管中產(chǎn)生最終染料濃度為200pM的Hoechst33342和在其它管中的400nM的Hoechst33342。兩個管的每一個在28。C下保持120分鐘。利用流式細(xì)胞術(shù)對每一個管中的精子進(jìn)行分析并且利用交互計算機(jī)算法對于200和400nM的Hoechst33342著色條件確定X群組的總熒光強(qiáng)度的CV。200和400|iM的Hoechst33342的CV被確定在接近1.3%的可接受的范圍內(nèi)。著色有濃度為200iuM的Hoechst33342的精子懸浮液被選擇用于分揀。在分揀前在該著色的精子懸浮液的管中加入10nL的25mg/mL的FD&C#40。229著色的精子懸浮液被裝在一個多通道液滴分揀流式細(xì)胞計系統(tǒng)的一個通道的樣本端口上。精子懸浮液被保持在28-C。利用如在多通道示例I中所述的基本相同儀器設(shè)置，利用重合中斷分揀策略在將具有18000000個精子的濃縮的帶X染色體的細(xì)胞群組放置在一個收集管中所需的時間內(nèi)由流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分離帶X和Y染色體的精子，所述收集管是通過已經(jīng)在鞘流體中浸泡至少一個小時接著加入0.5mL的pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Trilady瞎低溫保藏介質(zhì)來制備。精細(xì)胞以在每秒25000和30000個細(xì)胞之間的速度被引入到流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中。以在每秒4500個至6000個的速度收集濃縮的X細(xì)胞群組。當(dāng)約18000000個精子已經(jīng)被分揀到收集管中時，該管被取出并且利用已經(jīng)被類似制備的附加管代替。在從流式細(xì)胞計中取出收集管后，分揀的精子懸浮液以7min⑨700g被離心分離。利用轉(zhuǎn)移吸管去除上清液以產(chǎn)生約100000000個精子/mL的濃度。pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Triladyl⑧低溫保藏介質(zhì),皮加入到精子懸浮液以產(chǎn)生約50000000個精子/mL的最終濃度。該過程持續(xù)直至流式細(xì)胞計已經(jīng)產(chǎn)生兩個收集管(Cl-C3)。約35000000個精子在193分鐘內(nèi)被分揀以產(chǎn)生每小時分揀約IIOOOOOO個濃縮X精細(xì)胞的平均收集速度。重新懸浮的分揀的樣本管浮在200mL的燒杯中的120mL的28。C的水中并JU^故置在5。C的冷室中以慢冷。在分揀的樣本達(dá)到5。C后，分揀精子的三個管被結(jié)合在一個管中。利用IVOS分析匯集的樣本以確定游動性百分比、前進(jìn)性百分比和濃度。附加的pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Triladyl⑧低溫保藏介質(zhì)被加入樣本以產(chǎn)生約50000000個精子/mL的最終濃度。如由流式細(xì)胞計再次分析確定的，在分揀的匯集的樣本中的帶X染色體精子的百分比為88%。IVOS評估與同--次射出的精液的未分揀的樣本相比的概述被示出在圖129中。在5。C的冷室中匯集的分揀的樣本和未分揀的樣本(即，上面的第一等份)被裝在標(biāo)準(zhǔn)0.25"的試管中。裝載的試管被轉(zhuǎn)移到可編程的冷凍裝置并且被下列程序冷凍5min@5°C，從5。C冷卻到-12。C②4。C/min，從-12。C冷卻到-100。C⑥40。C/min，從-100°C冷卻到-140。C@20。C/min，保持在-140°C。在試管已經(jīng)達(dá)到-140。C后，將它們從冷凍裝置快速取出并且放入液氮中。在37。C孵化30和120分鐘后對利用IVOS分析解凍的試管的游動性百分比和前進(jìn)性百分比。一組兩個分揀的和未分揀的試管的結(jié)果概括在圖130和131中。多通道分揀示例IV利用人工陰道從性成熟的公牛收集公牛精子。一次射出的精液被分成兩個等份。第一個250itiL的精子等份被懸浮在5mL的37。CTriladyl⑧中。包含一次射出的精液的其余部分的第二等份^^皮懸浮在兩部分37。C的碳酸鹽緩沖劑中(兩部分NaHCO3為0.097摩爾/升，KHC03為0.173摩爾/升以及<:611807-1120為0.0卯摩爾/升)(pH6.1-6.2)并且在二氧化碳下保存。兩個等份在37。C下在溫度控制容器中被輸送到處理設(shè)施。在處理設(shè)施，第一等份浮在200mL的燒杯中的120mL的37。C的水中并且被放置在冷室中以慢冷到5。C。利用Hamilton-Thorn游動性分析器(IVOS)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的和公知的程序(Farrel等的Theriogenology49(4):871-9(Mar1998))對第二等份的濃度、游動性和前進(jìn)性進(jìn)行分析。通過將來自于第二等份(pH6.1-6.2)的包含750000000個精子的部分轉(zhuǎn)移到空管中并且加入28。C的碳酸鹽緩沖劑(pH為7.35)達(dá)到最終5ml的量來制備5mL的150xl(^個精子/mL的精子懸浮液的一個管。10mM的Hoechst33342水溶液被加入該精子懸浮液以產(chǎn)生最終染料濃度為150pM的Hoechst33342。懸浮液在二氧化碳下在41。C保持40分鐘并且被放置在28。C以用于分揀。在分揀前在該著色的精子懸浮液的管中加入10pL的25mg/mL的FD&C#40。著色的精子懸浮液被裝在一個多通道液滴分揀流式細(xì)胞計系統(tǒng)的一個通道的樣本端口上。精子懸浮液被保持在28。C。利用如在多通道示例I中所述的基本相同儀器設(shè)置，利用重合中斷分揀策略在將具有18000000個精子的濃縮的帶X染色體的細(xì)胞群組放置在一個收集管中所需的時間內(nèi)由流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分離帶X和Y染色體的精子，所述收集管是通過已經(jīng)在鞘流體中浸泡至少一個小時接著加入0.5mL的pH為6.6的包含1OmM丙酮酸鹽的Triladyl⑧低溫保藏介質(zhì)來制備。精細(xì)胞以在每秒25000和30000個細(xì)胞之間的速度被S1入到流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中。以在每秒4500個至6000個的速度收集濃縮的X細(xì)胞群組。當(dāng)約18000000個精子已經(jīng)被分揀到收集管中時，該管被取出并且利用已經(jīng)被類似制備的附加管代替。在從流式細(xì)胞計中取出收集管后，分揀的精子懸浮液以7min⑥700g被離心分離。利用轉(zhuǎn)移吸管去除上清液以產(chǎn)生約100000000個精子/mL的濃度。pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Triladyl低溫保藏介質(zhì)被加入到精子懸浮液以產(chǎn)生約50000000個精子/mL的最終濃度。該過程持續(xù)直至流式細(xì)胞計已經(jīng)產(chǎn)生兩個收集管(C2-C3)。重新懸浮的分揀的樣本管浮在200mL的燒杯中的120mL的28。C的水中并JUiU丈置在5。C的冷室中以慢冷。在分揀的樣本達(dá)到5。C后，分揀精子的三個管被結(jié)合在一個管中。利用IVOS分析匯集的樣本以確定游動性百分比、前進(jìn)性百分比和濃度。附加的pH為6.6的包含10mM丙酮酸鹽的Triladyl⑧低溫保藏介質(zhì)被加入樣本以產(chǎn)生約50000000個精子/mL的最終濃度。IVOS評估與同--次射出的精液的未分揀的樣本相比的概述被示出在圖132中。在5。C的冷室中匯集的分揀的樣本和未分揀的樣本(即，上面的第一等份)被裝在標(biāo)準(zhǔn)0.25"的試管中。裝載的試管被轉(zhuǎn)移到可編程的冷凍裝置并且被下列程序冷凍5min@5。C，從5。C冷卻到-12。C⑥4。C/min，從-12。C冷卻到-100°C@40。C/min，從-100°C冷卻到-140°C@20°C/min，保持在-140。C。在試管已經(jīng)達(dá)到-140。C后，將它們從冷凍裝置快速取出并且放入液氮中。在解凍后和在37'C孵化30分鐘后對利用IVOS分析解凍的試管的游動性百分比和前進(jìn)性百分比。一組兩個分揀的和未分揀的試管的結(jié)果概括在圖133和134中。毛細(xì)管噴嘴系統(tǒng)圖135示出另一個可選擇的噴嘴系統(tǒng)1335，與上述的類似，不同之處在于，毛細(xì)管1337(例如，石英或者熔融石英)與噴嘴137相連以使離開噴嘴孑U03的流體被引入和通過管。流式細(xì)胞計的光學(xué)系統(tǒng)109以一種適合的方式與管的一側(cè)光耦合，例如利用充填有具有已知折射率的油或者凝膠體的透光介質(zhì)的腔室1341。毛細(xì)管的使用，與通過開放空間噴射流體流相比，具有減小由于換能器105供給的聲能而導(dǎo)致的流21的透鏡化的優(yōu)點，并且能夠使得聚焦透鏡1343的位置緊靠流體流以增大發(fā)射信號的分辨率。在顆粒已經(jīng)被詢問和分類后，可利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何常規(guī)技術(shù)對它們進(jìn)行分揀，諸如利用如圖137中所示的流體切換裝置或者諸如光破壞系統(tǒng)或者液滴分揀系統(tǒng)的其它適合的裝置。液滴分揀以外的分揀技術(shù)光破壞分揀本發(fā)明的流式細(xì)胞術(shù)改進(jìn)不僅可用于上述液滴細(xì)胞分揀，還可用于其它分揀技術(shù)，諸如利用光破壞分揀(激光破壞)。光破壞分揀如在美國專利US4，395,397中描述的，該文獻(xiàn)全部內(nèi)容在這里合并參考。圖136示意性地示出單通道流式細(xì)胞術(shù)光破壞系統(tǒng)1351的一個實施例。如圖136中所示，光破壞分揀系統(tǒng)1351與圖2的液滴分揀系統(tǒng)類似，并且相應(yīng)的部件用相應(yīng)的附圖標(biāo)記表示但加上標(biāo)記(")。一般地，該系統(tǒng)包括與圖2的系統(tǒng)相同的部件，不同之處在于，液滴分揀部件被取消(例如，換能器105、充電裝置627、偏轉(zhuǎn)板629和相關(guān)功率源635)。利用響應(yīng)于來自于微處理器131"的指令以破壞在流體流21"中的不希望的顆粒的激光器1353或者類似的裝置代替這些部件。因此，被收集在收集容器1355中的流包含所需的顆粒群組。例如，如果待分析的顆粒是精細(xì)胞并且希望的結(jié)果是收集具有特征A(例如所需染色體含量)的精細(xì)胞，那么微處理器接收來自于外照射系統(tǒng)415"的信號，識別沒有特征A的細(xì)胞并且選擇性地激發(fā)激光器破壞這樣的細(xì)胞或者使它們無效。233不同的控制分揀策略可用于光破壞系統(tǒng)中，包括上面關(guān)于液滴分揀裝置描述的"高回收"和"高純度"分揀策略。在光破壞系統(tǒng)中，被包含在流體流中的顆粒沿著流以各個間隔被分隔并且通常以一個接著一個的形式排成一列。顆粒具有不同的特征，一些具有特征A，例如，其它具有特征B。顆粒的順序是隨機(jī)的，因此可被看做連續(xù)過程，顆?？杀环殖刹煌念w粒組，一個跟著另一個，包括僅包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、僅包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組和包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。后一個(第三)顆粒組通常對應(yīng)于在上述"重合，，顆粒組中的近間隔的顆粒，至少用于分揀策略。這樣，在第三組中的兩個或者多個顆?？墒墙g隔的意義是顆粒之間的空間間隔不足以進(jìn)行準(zhǔn)確的顆粒識別/分類，或者由于這樣的分離不足以能夠在不破壞在同一組中的其它顆粒的情況下使得在該組中的一個顆粒被激光器破壞。在任何情況下，在第三組顆粒中的每一個(或者至少一些)中的近間隔顆?？杀黄茐幕蛘卟槐黄茐模@取決于所用的分揀策略。應(yīng)該注意的是，在第一組中的多個顆?；蛘咴诘诙M中的多個顆?？墒?近間隔"的，但由于在這樣的組中的顆粒具有相同的特征(A或者B)，它們作為單顆粒組被處理，至少用于分揀策略。光破壞系統(tǒng)可是單通道系統(tǒng)或者多通道系統(tǒng)，如上所述。流體切換分揀可以預(yù)見的是，本發(fā)明的原理可用于使用流體切換技術(shù)的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)，例如在美國專利US6，432，246(Adair)、US4，756，427(GOhde等)和US3，791，517(Friedman)中披露的，這些文獻(xiàn)的全部內(nèi)容在這里合并參考。圖137是表示這樣一個系統(tǒng)1357的部分視圖。它基本與圖2中所示的系統(tǒng)相同，不同之處在于，噴嘴101"包括毛細(xì)管1369(例如，見圖135)，并且該分揀系統(tǒng)包括在詢問位置115'下游的與毛細(xì)管1369相連的流體切換裝置1359。流體切換裝置的構(gòu)造和操作可結(jié)合諸如在上述參考專利中披露的任何常規(guī)流體切換技術(shù)。一般地，該裝置用于通過間歇性地將包含所需/不希望的顆粒的流體流的部分沿著獨立的流動路徑1361、1365轉(zhuǎn)向以收集在容器等中響應(yīng)于從處理器接收的指令從不希望的顆粒中分揀所需的顆粒。該切換通常是通過選擇性地驅(qū)動在其中一個流動路徑中的換能器1367來實現(xiàn)的。上面關(guān)于液滴分揀和光破壞分揀描述的各個分揀策略也可用于流體切換系統(tǒng)中。在流體切換系統(tǒng)中，包含在流體流中的顆粒也沿著流以各個間隔被分隔并且通常以一個接著一個的形式排成一列。顆粒具有不同的特征，一些具有特征A，例如，其它具有特征B，并且顆粒的順序是隨機(jī)的。因此，如上面關(guān)于光破壞分揀描述的，顆?？杀环殖刹煌念w粒組，一個跟著另一個，包括僅包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、僅包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組和包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。后一個(第三)顆粒組通常對應(yīng)于在上述"重合，，顆粒組中的近間隔的顆粒，至少用于分揀策略。這樣，在第三組中的兩個或者多個顆?？墒墙g隔的意義是顆粒之間的空間間隔不足以進(jìn)行準(zhǔn)確的顆粒識別/分類，或者由于這樣的分離不足以使得在該組中的一個顆粒被流體切換裝置轉(zhuǎn)向與同一組中的另一個顆粒分離。在任何情況下，在第三組顆粒中的每一個(或者至少一些)中的近間隔顆?？蒦皮轉(zhuǎn)向到一個收集位置或者另一個，這取決于所用的分揀策略。如上面關(guān)于光破壞分揀描述的，在第一組中的多個顆粒或者在第二組中的多個顆?？墒?近間隔"的，但由于在這樣的組中的顆粒具有相同的特征(A或者B)，它們作為單顆粒組被處理，至少用于分揀策略。流體切換系統(tǒng)可是單通道系統(tǒng)或者多通道系統(tǒng)，如上所述。液滴干涉分揀還可以預(yù)見的是，本發(fā)明的技術(shù)可與液滴干涉流體切換技術(shù)結(jié)合使用。例如在圖138中示意性示出的高速液滴干涉分揀系統(tǒng)1371可用于通過使得同軸的載流體流和鞘流體流的選擇段轉(zhuǎn)向來分揀顆粒。與其它一些分揀技術(shù)不同，液滴干涉分揀技術(shù)不需要同軸的載流體流和鞘流體流形成液滴。這樣，無需與使得用于輸送載流體和鞘流體的噴嘴系統(tǒng)101"'與液滴產(chǎn)生系統(tǒng)相連。僅作為一個示例，以60psM吏得載流體和鞘流體通過噴嘴系統(tǒng)以形成直徑50微米的流是一種適于形成用于將顆粒輸送到液滴干涉分揀系統(tǒng)的層流同軸流體流的布置。在同軸流體流中的顆粒在移動通過詢問位置115"'時被光學(xué)系統(tǒng)109"'和處理器131"，分析和分類，如上面關(guān)于其它分揀系統(tǒng)描述的。分揀發(fā)生在詢問位置的下游，在同軸流體流與高速液滴干涉流1373相交的位置處。液滴干涉流1373由類似于液滴分揀所用的液滴產(chǎn)生系統(tǒng)的液滴產(chǎn)生系統(tǒng)1375產(chǎn)生。高速流體流1379通過與壓電換能器1381或者其它聲能源相連的高速噴嘴系統(tǒng)1377以使得高速流體流在高速噴嘴下游分裂成液滴1383。例如，無顆粒流體以1500psi通過高速噴嘴以形成直徑70孩i米的高速射流。高速噴嘴可以400KHz振蕩以形成高速液滴。高速液滴1383通過由一個或者多個電偏轉(zhuǎn)板1387形成的電場以使高速液滴的路徑可通過在液滴上選擇性施加電荷來控制，與液滴分揀系統(tǒng)中的控制液滴路徑的情況類似。高速液滴干涉流被引導(dǎo)以使一些高速液滴在位于詢問位置下游的點1399處與同軸流體流相交。例如，未帶電的液滴1389可被引導(dǎo)與流體流碰撞同時帶電的液滴1391,皮偏離同軸流體流。當(dāng)高速液滴碰撞同軸流體流時，流體流的一段1397和包含在其中的任何顆粒偏離它們將采用的路徑。電荷施加在高速液滴上或者不施加在高速液滴上可被定時以使液滴到達(dá)與同軸流體流相交部分1399處與同軸流體流的特定段的到達(dá)一致。這樣，基于通過被包含在同軸流體流段內(nèi)的顆粒的分類選擇性地對高速液滴充電，人們可通過使得所有包含一個或者多個被選擇的顆粒的流體流段轉(zhuǎn)向和使得其它同軸流段不轉(zhuǎn)向或者反之亦然來分揀顆粒。具有^W、真空的收集毛細(xì)管1403可用于收集轉(zhuǎn)向的1397或者不轉(zhuǎn)向的同軸流段。液滴干涉分揀系統(tǒng)可被建立以使高速液滴與轉(zhuǎn)向的同軸流段合并或者在與同軸流段碰撞后4吏得高速液滴保持與轉(zhuǎn)向的同軸流段分離。由于在高速液滴干涉流1373中沒有顆粒或者細(xì)胞，因此能夠在不破壞被分揀的顆?；蛘呒?xì)胞的情況下利用很高的壓力和很高的液滴頻率。這使得每一個具有體積小于在液滴分揀系統(tǒng)中的液滴體積的流體流段分揀。這大大增大系統(tǒng)的最大生產(chǎn)量同時還減小了被分揀的顆粒的稀釋因素。另夕卜，由于沒有細(xì)胞或者顆粒的細(xì)過濾的液體用于形成液滴干涉流，因此液滴形成更一致，這是因為與在液滴分揀系統(tǒng)中所用的噴嘴系統(tǒng)相比，液滴形成噴嘴堵塞或者遭遇蛋白質(zhì)堆積的可能性很小。另一個優(yōu)點是在顆粒分析的詢問位置和分揀點1399之間的距離可被減小(例如四倍)，能夠?qū)τ谔囟w粒到達(dá)分揀點處的時間的預(yù)測更準(zhǔn)確。另外，液滴干涉系統(tǒng)對于噴嘴尺寸的調(diào)節(jié)或者同軸流體流的壓力的調(diào)節(jié)更靈活。如果需要的話，液滴干涉分揀系統(tǒng)可與毛細(xì)管噴嘴系統(tǒng)結(jié)合^f吏用。多通道液滴干涉分揀系統(tǒng)可使用高壓流體泵以從公共流體供給為多個液滴干涉流產(chǎn)生噴嘴提供流體。當(dāng)說明本發(fā)明的元件或者其實施例時，詞語"a"、"an"、"the"和"said"指的是具有一個或者多個元件。詞語"comprising"、"including"和"having"是包括并且指的是除了所列出的元件以外還可包括分揀的元件。詞語"or，，指的是包括"and/or"并且指的是"一個或者兩個或者兩者"。這樣，"ABC或者DEF"的表示形式指的是(1)ABC、(2)DEF或者(3)ABC和DEF。詞語"and/or"指的是具有與上述"or，，相同的意義。這樣，"and/or"指的是"一個或者兩個或者兩者"。例如，"ABC和/或DEF"的表示形式指的是(1)ABC、(2)DEF或者(3)ABC和DEF。如上所述，可以看出，本發(fā)明的幾個目的被達(dá)到并且獲得其它優(yōu)勢結(jié)果。在不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍的情況下可對上述的構(gòu)造、產(chǎn)品和方法進(jìn)行多種改變，所有包含在上述說明書中和附圖中所示的內(nèi)容應(yīng)該是說明性的不是限定性的。對發(fā)明特征的評論本領(lǐng)域中技術(shù)人員應(yīng)理解的是，以上所述的本發(fā)明包括許多發(fā)明方面，所述發(fā)明方面至少包括以下內(nèi)容A.多通道分揀設(shè)備Al.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分揀的多通道系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元通過利用電磁輻射束詢問包含所述顆粒的流體流來對顆?；旌衔镏械念w粒的期望群組進(jìn)行分揀；所述單元共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)顆粒的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息的公共處理器；以及(6)用于將包含所述顆粒的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)。A2.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)胞。A3.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。A4.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述系統(tǒng)至少包括元件(2)，并且其中，一個或多個所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括空氣中噴射液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)單元。A5,Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(2)和(3)。A6.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(4)和(5)。A7.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(2)，所述公共源包括單一激光束。A8.A7所迷的系統(tǒng)，還包括用于將單一激光束分裂成多個光束并且將所述多個光束引導(dǎo)到各個流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)中的射束分裂系統(tǒng)。A9.A8所述的系統(tǒng)，其特征在于，所述單一激光束包括多個脈沖，每個脈沖都具有大于所述激光器的平均功率輸出的峰值功率。A10.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(3)，所述流式細(xì)胞術(shù)單元包括安裝在殼體中的可互換的模塊。238All.Al所述的系統(tǒng)，其中，每個流式細(xì)胞術(shù)單元都包括用于詢問各個流體流的外照射光學(xué)系統(tǒng)。A12.Al所述的系統(tǒng)，還包括用于從每個單元中收集所述顆粒的所需群組的收集系統(tǒng)。A13，Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(5)，并且所述公共輸出包括由每個單元測量的熒光強(qiáng)度指示。A14.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(5)，并且所述公共輸出包括每個單元分離顆粒的速度的指示。A15.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(5),并且所述公共輸出包括顆粒著色變化的指示。A16.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(5)，并且所述公共輸出包括由每個單元用于在顆粒之間進(jìn)行識別的判定邊界的指示。A17.Al所述的系統(tǒng)，其中，每個所述流式細(xì)胞術(shù)單元都包括液滴分揀系統(tǒng)。A18.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(5),并且所述公共輸出包括每個單元的液滴分裂位置的指示。A19.Al所述的系統(tǒng)，其中，至少一個所述沈式細(xì)胞術(shù)單元都包括光破壞系統(tǒng)。A20.Al所述的系統(tǒng)，其中，至少一個所述沈式細(xì)胞術(shù)單元都包括流體切換分揀系統(tǒng)。A21.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)單元適于并行地操作。A22.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括用于發(fā)出多個電磁輻射脈沖的共享激光器，其中每個所述脈沖都具有大于所述激光器的平均功率的峰值功率，并且一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括用于通過顆粒詢問位置引導(dǎo)包含樣本顆粒的流體流的流動通道；用于將一個脈沖中的電磁輻射的一部分引導(dǎo)到詢問位置的束引導(dǎo)系統(tǒng)；用于產(chǎn)生電磁輻射到達(dá)詢問位置的定時信號指示的定時電路；適于從詢問位置中檢測電磁輻射并用于輸出所檢測的電磁輻射的強(qiáng)度的時間改變模擬信號指示的檢測器；適于接收作為輸入的時間改變模擬信號并且適于采樣所述模擬信號以產(chǎn)生數(shù)字化輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器；以及用于作為時限信號的函數(shù)分析來自于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器的數(shù)字化輸出的電子處理器。A23.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括三個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元。A24.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括至少十二個流式細(xì)胞術(shù)單元。A25.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(5)，并且所述公共處理器執(zhí)行以下至少一項(l)實時地接收并處理所述信息；(2)接收并處理所述信息以便于允許相對于另一個單元對一個單元的操作的評價。A26.Al所述的系統(tǒng)，其中，每個流式細(xì)胞術(shù)單元都包括用于產(chǎn)生所述顆粒至少一個特征的時間改變輸出信號指示的傳感器，所述集成平臺至少包括元件(5)，并且由所述公共處理器接收的所述信息包括來自于各個傳感器的輸出信號，并且所述處理器用于作為基本連續(xù)流接收輸出信號并且基本連續(xù)地實時處理所述輸出信號。A27.Al所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺包括用于在分揀處理期間實時地將控制信號傳送給流式細(xì)胞術(shù)單元的公共處理器從而作為由所述公共處理器接收的所述信息的函數(shù)調(diào)節(jié)其操作，并且所述流式細(xì)胞術(shù)單元對控制信號起反應(yīng)。B.多通道分揀方法Bl.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分揀的多通道方法，所述方法包括提供多個流式細(xì)胞術(shù)單元；操作所述流式細(xì)胞術(shù)單元以引導(dǎo)多個流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括形成獨立的流體流，每一個流體流包含顆?；旌衔?，以及通過利用電磁輻射束詢問所述流體流來對顆?；旌衔镏械念w粒進(jìn)行分類；以及共享下列元件中的至少一個以引導(dǎo)所述操作(1)用于所述流的公共顆粒供給；(2)用于所述束的電磁輻射的公共源；(3)公共操作控制輸入；(4)用于接收和處理來自于單元的信息；(5)用于將流體輸送到所述流的/^共系統(tǒng)；以及(6)用于所述流式細(xì)胞術(shù)單元的^^共殼體。B2.Bl所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞。B3.Bl所述的方法，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。B4.Bl所述的方法，其中，至少一個所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括空氣中噴射液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)單元。B5.Bl所述的方法，還包括共享單一激光束形式的電》茲輻射的所述公共源，所述方法還包括將單一射束分裂成多個光束并且將所述多個光束引導(dǎo)到各個流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)中。B6.B5所述的方法，還包括朝向一個所述流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)反射一定百分比的單一束的光束，以及使得一定百分比的單一束的光束穿過以便于傳輸?shù)搅硪粋€所述流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)。B7.B6所述的方法，還包括使用固態(tài)激光器以形成所述單一激光束。B8.B7所述的方法，還包括模式鎖定所述固態(tài)激光器以使得所述單一激光束包括多個脈沖，其中每個脈沖都具有大于所述激光器的平均功率輸出的峰值功率。B9.Bl所述的方法，還包括共享至少元件(6),并且所述方法還包括以可移除的方式將所述流式細(xì)胞術(shù)單元安裝在所述7>共殼體中。B10.Bl所述的方法，還包括至少共享共享激光器形式的電磁輻射的所述公共源；所述方法還包括以下步驟從激光器中發(fā)出多個電磁輻射(EMR)脈沖，其中每個脈沖的峰值功率都超過所述激光器的平均功率；通過沿束路徑將來自于激光器中的脈沖中的一部分能量引導(dǎo)到每個詢問位置而將每個脈沖引導(dǎo)到束分裂和引導(dǎo)系統(tǒng)中以便于間歇地照射每個流體流和包含于其中的顆粒；檢測來自于至少一個詢問位置的EMR;產(chǎn)生從所述詢問位置中檢測的EMR的強(qiáng)度的時間改變模擬信號指示；產(chǎn)生脈沖到達(dá)所述詢問位置的定時信號指示；將時間改變模擬信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號；以及分析所述數(shù)字信號以確定流過各個詢問位置的流體流中的顆粒的特征。Bll.Bl所述的方法，還包括在所述操作的第一操作中使用第一分揀策略和在所述操作的第二操作中使用不同于第一分揀策略的第二分揀策略。B12.Bl所述的方法，還包括收集由每個流式細(xì)胞術(shù)單元分揀的所需顆粒的群組，以及將從一個單元中收集的群組與從另一個單元中收集的群組相組合以產(chǎn)生所需顆粒的混合群組。B13.Bl所述的方法，還包括作為以下至少一項的函數(shù)改變流體被輸送到一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元的速度，所述項包括第一分揀群組的純度；以及(2)第二群組中所需顆粒的量。B14.Bl所述的方法，還包括以并行的方式引導(dǎo)所述流式細(xì)胞術(shù)操作。B15.Bl所述的方法，其中，共享步驟包括共享至少元件(4)，所迷方法還包括使用公共處理器進(jìn)行以下操作中的至少一項(1)實時地接收并處理所述信息；(2)接收并處理所述信息以允許相對于另一個單元對一個單元的操作的評價。B16.Bl所述的系統(tǒng)，其中，共享步驟包括共享至少元件(4)，所述方法還包括使用用于每個獨立細(xì)胞術(shù)單元的傳感器以便于產(chǎn)生所述顆粒至少一個特征的時間改變輸出信號指示，并且使用公共處理器作為基本連續(xù)流接收各個輸出信號并且實時處理所輸出的信號。B17.Bl所述的系統(tǒng)，其中，共享步驟包括共享至少元件(4)，所述方法還包括在分揀處理期間實時地將控制信號傳送給一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元從而作為由所述公共處理器接收的所述信息的函數(shù)調(diào)節(jié)所述單元的C.保留1D.多通道分析器Dl.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分類的多通道系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元通過利用電磁輻射束詢問包含所述顆粒的流體流來對顆粒混合物中的顆粒的所需群組進(jìn)行分類；所述單元共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)顆粒的公共供給；(2)公共殼體；(3)用于控制單元操作的公共輸入；(4)用于接收和處理來自于單元的信息的公共處理器；以及(5)用于將包含所述顆粒的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)。D2.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺還包括電磁輻射的公共源。D3.Dl所述的系統(tǒng)，其中,所述顆粒是細(xì)胞。D4.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。D5.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(3)和(4)。D6.D5所述的系統(tǒng)，其中,所述集成平臺還包括電磁輻射的公共源。D7.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺還包括電磁輻射的公共源，所述公共源包括單一激光束。D8.D7所述的系統(tǒng)，還包括用于將單一激光束分裂成多個光束并且將所述多個光束引導(dǎo)到各個流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)中的射束分裂系統(tǒng)。D9.D8所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(2)，所述流式細(xì)胞術(shù)單元包括安裝在殼體中的可互換的模塊。243D10.Dl所述的系統(tǒng)，其中，每個流式細(xì)胞術(shù)單元都包括用于詢問各個流體流的外照射光學(xué)系統(tǒng)。，Dll.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(4),并且所述處理器用于輸出由每個單元測量的熒光強(qiáng)度指示。D12.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(4)，并且所述處理器用于輸出每個單元分離顆粒的速度的指示。D13.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(4),并且所述處理器用于輸出顆粒著色變化的指示。D14.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(4)，并且所述處理器用于輸出由每個單元用于在顆粒之間進(jìn)行識別的判定邊界的指示oD15.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)單元適于并行地操作。D16.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元用于分揀所迷顆粒。D17，D16所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺還包括電磁輻射的公共源，并且所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括空氣中噴射液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)單元。D18.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺至少包括元件(4)，并且所述公共處理器用于執(zhí)行以下至少一項(1)實時地接收并處理所述信息；(2)接收并處理所述信息以便于執(zhí)行相對于另一個單元對一個單元的操作的評價。D19.Dl所述的系統(tǒng)，其中，每個流式細(xì)胞術(shù)單元都包括用于產(chǎn)生所述顆粒至少一個特征的時間改變輸出信號指示的傳感器，所述集成平臺至少包括元件(4)，并且由所述公共處理器接收的所述信息包括從各個傳感器中輸出信號，并且所述處理器用于作為基本連續(xù)流接收輸出信號并且實時處理所述輸出信號。D20.Dl所述的系統(tǒng)，其中，所述集成平臺包括用于在分揀處理期間實時地將控制信號傳送給流式細(xì)胞術(shù)單元從而作為由所述公共處理器接收的所逸信息的函數(shù)調(diào)節(jié)其操作，并且所述流式細(xì)胞術(shù)單元對控制信號起反應(yīng)。E.多通道分析方法El.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分類的多通道方法，所述方法包才舌提供多個流式細(xì)胞術(shù)單元；操作所述流式細(xì)胞術(shù)單元以便于引導(dǎo)多個流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括形成分離流體流，每個所述流體流都包含所述顆粒的混合物，并且通過利用電磁輻射束詢問所述流來對所述顆?；旌衔镏械念w粒進(jìn)行分類；以及共享以下元件中的至少一個以引導(dǎo)所述操作(1)用于所述流的顆粒的公共供給；(2)公共操作控制輸入；(3)用于接收和處理來自于單元的信息的公共處理器；(4)用于將流體輸送到所述流的公共系統(tǒng)；以及(5)用于所迷流式細(xì)胞術(shù)單元的公共殼體。E2.El所述的方法，還包括共享用于所述束的電^f茲輻射的公共源。E3.E2所述的方法，其中，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括空氣中噴射液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)單元。E4.El所述的方法，還包括操作所述多個流式細(xì)胞器以才艮據(jù)其分類分揀所迷顆粒的混合物。E5.El所述的方法，所述顆粒是細(xì)胞。E6.El所述的方法，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。F7.El所述的方法，還包括共享用于單一激光束形式的所述束的電磁輻射的公共源、將單一激光束分裂為多個激光束，并且將多個激光束引導(dǎo)到各個流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)中。E8.E7所述的方法，其中，共享步驟包括至少元件(5),所述方法還包括在分裂所述束之前將所述單一激光束引導(dǎo)到所述公共殼體中。245E9.E7所述的方法，還包括朝向一個所述流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)反射一定百分比的單一束的光束，以及使得一定百分比的單一束的光束穿過以便于傳輸?shù)搅硪粋€所述流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)。E10.El所述的方法，其中，共享步驟包括至少元件(5)，所述方法還包括以可移除的方式將所述流式細(xì)胞術(shù)單元安裝在/>共殼體中。Ell.El所述的方法，包括操作每個流式細(xì)胞術(shù)單元以便于使用外照射光學(xué)系統(tǒng)詢問各個流體流。E12.El所述的方法，還包括并行地操作所述流式細(xì)胞術(shù)單元。E13.El所述的方法，其中，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元包括十二個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元。E14.El所述的方法，其中，所述共享步驟包括至少共享元件(4),所述方法還包括使用公共處理器執(zhí)行以下至少一項(1)實時地接收并處理所述信息；(2)接收并處理所述信息以便于允許相對于另一個單元對一個單元的操作的評價。E15.El所述的方法，其中，所述共享步驟包括至少共享元件(4)，所述方法還包括使用用于各個流式細(xì)胞術(shù)單元的傳感器產(chǎn)生所述顆粒的至少一個特征的時間改變輸出信號指示以及使用公共處理器作為基本連續(xù)流接收各個輸出信號并且實時處理所述輸出信號。E16.El所述的方法，其中，所述共享步驟包括至少共享元件(4),所述方法還包括在分揀處理期間實時地將控制信號輸送到一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元以作為公共處理器所接收的信息的函數(shù)調(diào)節(jié)所述單元的操作。F.『保留1G.為多通道細(xì)胞術(shù)分裂單一激光的方法Gl.使用包括三個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元的系統(tǒng)分揀顆粒的方法，每個所述單元都用于通過使用光束詢問包含所述顆粒的流體流從顆粒的混合物分揀顆粒的所需群組，所述方法包括產(chǎn)生單一激光束；將所述單一束分裂為三個或多個光束并且將所述光束引導(dǎo)到流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)中；以及操作流式細(xì)胞術(shù)單元以分揀顆粒。G2.Gl所述的方法，其中，每個細(xì)胞術(shù)單元使用約相同強(qiáng)度的光束詢問流體流。G3.Gl所述的方法，其中，每個單元需要具有W瓦功率的光束，所述方法還包括產(chǎn)生具有(WxN)+1^的所述單一激光束，其中N等于流式細(xì)胞術(shù)單元的數(shù)量以及L等于系統(tǒng)中的功率損耗。G4.Gl所述的方法，還包括通過利用一個或者多個濾光器使所述三個或者多個光束中的至少一個的強(qiáng)度減小而平衡細(xì)胞計數(shù)單元用以詢問各自的流體流的光束量。G5.G4所述的方法，還包括調(diào)節(jié)進(jìn)入各個單元的光束的強(qiáng)度以使得每個單元在IO%的公差內(nèi)接收相同量的光束。G6.Gl所述的方法，其中，至少一個所述流式細(xì)胞術(shù)單元使用液滴分揀處理以分揀所述顆粒。G7.Gl所述的方法，其中，至少一個所述流式細(xì)胞術(shù)單元使用光破壞處理以分揀所述顆粒。G8.Gl所述的方法，其中，至少一個所述流式細(xì)胞術(shù)單元使用流體切換分揀處理以分揀所述顆粒。G9.Gl所述的方法，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)單元被安裝在公共殼體中，所述方法還包括在分裂所述束之前將所述單一激光束引導(dǎo)到所迷公共殼體中。G10.G9所述的方法，還包括朝向一個所述流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)反射一定百分比的單一激光束的光束，以及使得一定百分比的單一激光束的光束穿過以便于傳輸?shù)搅硪粋€所述流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)。Gll.Gl所述的方法，其中，分裂單一束的步驟包括將單一束分裂為四個獨立束。G12.Gll所述的方法，其中，分裂步驟包括使用50/50射束分離器以將單一束分裂為兩個射束，使用第二個50/50射束分離器以將這兩個射束中的一個分裂為兩個補(bǔ)充射束，以及使用第三個50/50射束分離器以將這兩個射束中的另一個分裂為另外兩個補(bǔ)充射束。H.用于使用分揀策略進(jìn)行分揀的設(shè)備Hl.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。H2.Hl所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。H3.Hl所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是精細(xì)胞，特征A表示活X精細(xì)胞。H4.H3所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)。H5.H4所述的系統(tǒng)，還包括將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。H6.Hl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置在所述純度大于所需純度時增大流體輸送的速度，并且在所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。H7.Hl所迷的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組的純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以使得所述純度與所需純度基本一致。H8.H7所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組中的特征A顆粒的量大于至少一個群組中的特征A顆粒的可接受的量時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中的特征A顆粒的量小于所述可接受的量時該控制裝置減小流體輸送的速度。H9.H8所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組中特征A顆粒的純度，所述系統(tǒng)還包括用于指示所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以在所述至少一個群組中獲得所述接受的量。H10.Hl所述的系統(tǒng)，其中，所述流被構(gòu)成得包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。Hll.H10所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)用于使用分揀策略，其中所述第一顆粒組被選擇以收集在所述至少一個群組中而所述第二和第三顆粒組未被選擇以收集在所述至少一個群組中。H12.H10所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)用于使用分揀策略，其中所述第一和第三顆粒組被選擇以收集在所述至少一個群組中而所述第二顆粒組未,皮選擇以收集在所述至少一個群組中。H13.Hl所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)包括液滴分揀系統(tǒng)。H14.Hl所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)包括光破壞分揀系統(tǒng)。H15.Hl所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)包括流體切換分揀系統(tǒng)。I.用于使用分揀策略分揀顆粒的方法11.一種利用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒ǎ龇椒òㄝ斔桶鲱w粒的流體；使流體形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對流體流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略在流體流中分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)改變所述分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。12.Il所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。13.Il所述的方法，其中，所述顆粒是精細(xì)胞，特征A表示活X精細(xì)胞。14.13所述的方法，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)。15.13所述的方法，還包括將所述純度保持得大于85%但是小于95%。16.Il所述的方法，還包括在所述純度大于所需純度時增大流體輸送的速度，并且在所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。17.Il所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組中的特征A顆粒的量大于至少一個群組中的特征A顆粒的可接受的量時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中的特征A顆粒的量小于所述可接受的量時該控制裝置減小流體輸送的速度。18.Il所述的方法，其中，將所述流構(gòu)成得包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特250征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒ia。19.18所述的方法，還包括依照分揀策略分揀所述顆粒，其中只有第一顆粒組被選擇以收集在所述至少一個群組中。110.18所述的方法，還包括依照分揀策略分揀所述顆粒，其中第一和第三顆粒組^皮選擇以收集在所述至少一個群組中。111.Il所述的方法，其中，所述分揀包括使用液滴分揀處理。112.Il所述的方法，其中，所述分揀包括使用光破壞分揀處理。113.Il所述的方法，其中，所述分揀包括使用流體切換分揀處理。J.包括分揀策略的液滴分揀器Jl.一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏南到y(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體流的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體流、形成包含所述顆粒的液滴以及根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；所述液滴包括每個都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、每個都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴以及每個包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。J2.Jl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置控制流體輸送系統(tǒng)以使得輸送流體的速度保持基本恒定，并且所述控制裝置改變分揀策略。J3.J2所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置改變分揀策略以改變第三液滴在其中一個液滴群組中的百分比。J4.Jl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置控制流體輸送系統(tǒng)以作為所述至少一個液滴群組的純度的函數(shù)改變輸送流體的速度。J5.J4所述的系統(tǒng)，其中，所述純度至少為85%并且不大于95%。J6.Jl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置控制流體輸送系統(tǒng)以作為在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒的總量的函數(shù)改變輸送流體的速度。J7.J6所述的系統(tǒng)，其中，改變輸送流體的速度以4吏得在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量表示為所述流中的具有特征A的顆粒的總量的至少約60%。J8.Jl所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是精細(xì)胞，特征A表示活X精細(xì)胞。J9.Jl所述的系統(tǒng)，其中，在所述混合物中特征A的顆粒與特征B的顆粒的比率是一個已知的比率，并且所述控制裝置用于將一些顆粒分類為具有特征A或者具有特征B的并且作為已分類的顆粒的比率相對于已知比率的函數(shù)改變流體輸送速度。J10.Jl所迷的系統(tǒng)，其中，控制裝置基于來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定被分揀的顆粒的純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且控制裝置改變速度以使所述至少一個液滴群組的純度與所需純度基本一致。K.包括分揀策略的液滴分揀方法Kl.一種分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒ǎ龇椒ò派噍斔桶鲱w粒的流體流；形成包含所述顆粒的液滴；根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組，所述液滴包括都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴以及都包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)改變所述分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。K2.Kl所述的方法，還包括使得輸送流體的速度保持基本恒定，并且改變分揀策略。K3.la所述的方法，還包括改變分揀策略以改變第三液滴在其中一個液滴群組中的百分比。K4.Kl所述的方法，還包括作為所述至少一個液滴群組的純度的函數(shù)改變輸送流體的速度。K5.Kl所述的方法，還包括將所述純度保持在85%到95%的范圍內(nèi)。K6.Kl所述的方法，還包括作為在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒的總量的函數(shù)改變輸送流體的速度。K7.K6所述的方法，其中，改變輸送流體的速度以使得在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量表示為所述流中的具有特征A的顆粒的總量的至少約60%。K8,Kl所述的方法，其中，所述顆粒是精細(xì)胞，特征A表示活X精細(xì)胞。K9.Kl所述的方法，還包括在所述至少一個液滴群組的純度大于所需純度時增大速度，并且在所述至少一個液滴群組的純度小于所需純度時減小速度。L.具有反饋回路的可變流速液滴分揀器253Ll.一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏南到y(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體流的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體流、形成包含所述顆粒的液滴以及根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；所述液滴包括每個都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、每個都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴以及每個包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)控制控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。L2.Ll所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置控制流體輸送系統(tǒng)以作為所述至少一個液滴群組的純度的函數(shù)改變輸送流體的速度。L3.L2所述的系統(tǒng)，其中，所述純度至少為85%并且不大于95%。L4.Ll所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置控制流體輸送系統(tǒng)以作為在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量或百分比相對于在所述流中的具有特征A的顆粒的總量的函數(shù)改變輸送流體的速度。L5.L4所述的系統(tǒng)，其中，改變輸送流體的速度以使得在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量表示為所述流中的具有特征A的顆粒的總量的至少約60%。L6.Ll所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)月包，并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。L7.Ll所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是精細(xì)胞，特征A表示活X精細(xì)胞。L8.L7所述的系統(tǒng)，其中，所述至少一個液滴群組中至少一些液滴在同一個液滴中包含至少一個活X細(xì)胞和至少一個Y細(xì)胞，并且所述至少一個液滴群組的所述純度被測量為X/(X+Y)。L9.L8所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置用于改變流體輸送速度以便于將所述純度保持得大于85%但小于95%。L10.L7所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示非活X細(xì)胞的細(xì)胞。Lll.L7所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置用于改變流體輸送速度以使得所述至少一個液滴群組中的活X細(xì)胞的百分比是所述第一、第二和第三多個液滴中活X細(xì)胞的總量的至少60%。L12.Lll所述的系統(tǒng)，其中，所述至少一個液滴群組的純度被保持得小于95%。L13.Ll所述的系統(tǒng)，其中，在所述混合物中特征A的顆粒與特征B的顆粒的比率是一個已知的比率，并且所述控制裝置用于將一些顆粒分類為具有特征A或者具有特征B的并且作為已分類的顆粒的比率相對于已知比率的函數(shù)改變流體輸送速度。L14.Ll所述的系統(tǒng)，其中，具有特征A的顆粒是活X精細(xì)胞，具有特征B的顆粒是非活X精細(xì)胞的精細(xì)胞，并且所述控制裝置用于作為已分類的精細(xì)胞的比率的函數(shù)將流體輸送速度改變?yōu)?0%。L15.Ll所述的系統(tǒng)，其中，在所述至少一個液滴群組的純度大于所需純度時增大速度，并且在所述至少一個液滴群組的純度小于所需純度時減小速度。L16.Ll所述的系統(tǒng)，其中，控制裝置基于來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定被分揀的顆粒的純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且控制裝置改變速度以使所述至少一個液滴群組的純度與所需純度基本一致。M.4吏用可變流速和反饋的液滴分揀方法Ml.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的方法，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體流；形成包含所述顆粒的液滴；根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組，所述液滴包括每個都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、每個都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴以及每個包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆^:或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。M2.Ml所述的方法，還包括作為所述至少一個液滴群組的純度的函數(shù)改變輸送流體的速度。M3.M2所述的方法，其中，所述純度至少為85%并且不大于95%。M4.Ml所述的方法，還包括作為在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒的總量的函數(shù)改變輸送流體的速度。M5.M4所述的方法，還包括改變輸送流體的速度以使得在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒的量表示為所述流中的具有特征A的顆粒的總量的至少約60%。M6.Ml所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞，并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。M7.Ml所述的方法，其中，所述顆粒是精細(xì)胞，特征A表示活X精細(xì)胞。M8.M7所述的方法，其中，所述至少一個液滴群組中至少一些液滴在同一個液滴中包含至少一個活X細(xì)胞和至少一個Y細(xì)胞，并且所述至少一個液滴群組的所述純度^L測量為X/(X+Y)。M9.M8所述的方法，還包括改變流體輸送速度以便于將所述純度保持得大于85%但小于95%。M10.M7所述的方法，其中，特征B表示非活X細(xì)胞的細(xì)胞。Mil.M7所述的方法，還包括改變流體輸送速度以使得所述至少一個液滴群組中的活X細(xì)胞的百分比是所述第一、第二和第三多個液滴中活X細(xì)胞的總量的至少60%。M12.Mll所述的方法，還包括將所述至少一個液滴群組的純度保持得小于95%。M13.Ml所述的方法，其中，在所述混合物中特征A的顆粒與特征B的顆粒的比率是一個已知的比率，并且所述方法還包括作為已分類的顆粒的比率相對于已知比率的函數(shù)改變流體輸送速度。M14.Ml所述的方法，其中，具有特征A的顆粒是活X精細(xì)胞，具有特征B的顆粒是非活X精細(xì)胞的精細(xì)胞，并且所述方法還包括作為已分類的精細(xì)胞的比率的函數(shù)將流體輸送速度改變?yōu)?0%。M15.Ml所述的方法還包括在所述至少一個液滴群組的純度大于所需純度時增大速度，并且在所述至少一個液滴群組的純度小于所需純度時減小速度。N.用于高純度分揀策略的精細(xì)胞分揀系統(tǒng)Nl.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含X和Y精細(xì)胞的流體流的可變速流體輸送系統(tǒng)；用于(l)接收所述流和形成包含所述顆粒的液滴，所述液滴包括都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴以及都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴，(2)從所述第二和第三液滴分揀所述第一液滴，(3)收集所述第一液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組，以及(4)在至少一個群組中確定X精細(xì)胞的量的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的指令以作為所確定的X精細(xì)胞在所述至少一個群組中的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的X細(xì)胞的總量的函數(shù)改變流體被輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的速度的控制裝置。N2.Nl所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于確定在所述至少一個群組中收集的X細(xì)胞的數(shù)量，并且控制裝置改變流體4皮輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的速度以使得在所述至少一個群組中收集的X細(xì)胞的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的X細(xì)胞的總量保持在可接受的量或者在該可接受的量以上。N3.N2所述的系統(tǒng)，其中，所述可接受的量為X細(xì)胞的所述總量的至少60%。N4.N3所述的系統(tǒng)，其中，所述X細(xì)胞為活X細(xì)胞。N5.N2所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置用于當(dāng)所述至少一個群組中的X細(xì)胞的量在可接受的量以上時增大流體輸送速度以及當(dāng)所述至少一個群組中的X細(xì)胞的量在可接受的量以下時減小流體輸送速度。O.用于高純度分揀策略的精細(xì)胞分揀方法Ol.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴以及都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述第二和第三液滴分揀所述第一液滴；收集所述第一液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組；確定在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)胞的量；以及以作為所確定的在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)J包的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的x細(xì)胞的總量的函數(shù)改變流體被輸送到所述第一位置的速度。02.Ol所述的方法，還包括改變流體被輸送到所述第一位置的速度以使得在所述至少一個群組中收集的X細(xì)胞的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的X細(xì)胞的總量保持在可接受的量或者在該可接受的量以上。03.02所述的方法，其中，所述可接受的量為X細(xì)胞的所述總量的至少60%。04.03所述的系統(tǒng)，其中，所述X細(xì)胞為活X細(xì)胞。05.02所述的系統(tǒng)，還包括當(dāng)收集在所述至少一個群組中的X細(xì)月包的量或百分比在所述可接受的量以上時增大流體輸送速度以及當(dāng)收集在所述至少一個群組中的X細(xì)胞的量或百分比在所述可接受的量以下時減小流體輸送速度。P.用于高回收分揀策略的精細(xì)胞分揀器Pl.用于分揀X和Y精細(xì)胞的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含X和Y精細(xì)胞的流體流的可變速流體輸送系統(tǒng)；用于(l)接收所述流和形成包含所述顆粒的液滴，所述液滴包括都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴以及都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴，(2)從所述第二液滴分揀所述第一和笫三液滴，(3)收集所述第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組，以及(4)在至少一個群組中確定X精細(xì)胞的量的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的指令以作為所確定的X精細(xì)胞在所述至少一個群組中的量的函數(shù)改變流體被輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的速度的控制裝置。P2.Pl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置改變流體被輸送到流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)的速度以使得所述至少一個群組的純度保持在所需的純度或者在該所需的純度以上。P3.P2所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置用于當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需的純度時增大流體輸送速度以及當(dāng)所述至少一個群組的純度小于所需的純度時減小流體輸送速度。P4.P2所述的系統(tǒng)，其中，所述所需純度不大于95°/0。P5.P2所述的系統(tǒng)，其中，所述X精細(xì)胞為活細(xì)胞。0.包括高回收分揀策略的精細(xì)胞分揀方法Ql.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴以及都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述第二液滴分揀所述第一和第三液滴；收集所述第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組；確定在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)胞的量；以及以作為所確定的在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)胞的量的函數(shù)改變流體被輸送到所述第一位置的速度。Q2.Ql所述的方法，還包括改變流體輸送速度以使得所述至少一個群Q3.Q2所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需的純度時增大流體輸送速度以及當(dāng)所述至少一個群組的純度小于所需的純度時減小流體輸送速度。Q4.Q2所述的方法，其中，所述所需純度不大于95%。Q5.Q2所述的方法，其中，所述X精細(xì)胞為活細(xì)胞。Q6.—種利用流式細(xì)胞術(shù)分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴以及都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述笫二液滴分揀所述第一和第三液滴；收集所述第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組。Q7.Q6所述的方法，其中，所述X精細(xì)胞為活細(xì)胞而非死X細(xì)胞。Q8.—種利用流式細(xì)胞術(shù)分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括輸送包含X和Y精細(xì)胞的流體流并且使得所述流分裂成液滴；在其分裂成液滴之前詢問所述流體流以確定哪種精細(xì)胞將存在于所述液滴中；從不包含X精細(xì)胞的液滴中分揀包含X精細(xì)胞的液滴；收集包含X精細(xì)胞的所述液滴，包括包含至少一個X精細(xì)胞和至少一個Y精細(xì)力包的液滴。Q9.Q8所述的方法，其中，所述X精細(xì)胞為活X細(xì)胞而非死X細(xì)胞。R.具有分揀策略的光破壞分揀Rl.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及包括用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略熔化所述流中所選擇的顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的激光器的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括作為下列因素至少一個的函數(shù)控制激光器以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化特征A的顆粒或者未熔化特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。R2.Rl所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。R3.Rl所述的系統(tǒng)，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。R4.R3所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)。R5.Rl所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所迷純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。R6.Rl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以獲得所需純度。R7.Rl所述的系統(tǒng)，其中，所述流,皮構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。R8.R7所述的系統(tǒng)，其中，所述激光器僅熔化第二顆粒組。R9.R7所述的系統(tǒng)，其中，所述控制系統(tǒng)將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。RIO，R7所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(~X)并且所述激光器用于熔化所述流中的第二顆粒組和第三顆粒組。Rll.R10所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置當(dāng)所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的可接受的量時增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的量小于所述可接受的量時減小流體輸送的速度。R12.R10所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的量，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的可接受的量的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以獲得所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的可接受的量。S,包括分揀策略的光破壞分揀方法51.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆氺立的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包才舌輸送包含所述顆粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流中的顆粒分類；顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)改變分揀策略或改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化特征A的顆?；蛘呶慈刍卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。52.Sl所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。53.Sl所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。54.Sl所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。55.Sl所述的方法，還包括將所述流體被構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。56.S5所述的方法，還包括熔化第二顆粒組而不熔化第一和第三顆粒組。57.S6所述的方法，還包括將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于950/0。58.S5所述的方法，還包括熔化第二和第三顆粒組而不熔化第一顆粒組。59.S8所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的可接受的量時增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中未熔化特征A顆粒的量小于所述可接受的量時減小流體輸送的速度。T.具有可變流速和反饋的光破壞分揀器Tl.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及包括用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略熔化所述流中所選擇的顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的激光器的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括作為下列因素至少一個的函數(shù)控制激光器以改變輸送流體的速度的響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化特征A的顆?；蛘呶慈刍卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。T2.Tl所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。T3.Tl所述的系統(tǒng)，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。T4.T3所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)并且所述激光器僅熔化第二顆粒組。T5.T4所述的系統(tǒng)，還包括將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。T6.T2所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(~X)并且所述激光器用于熔化第二和第三顆粒組。T7.Tl所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。T8.Tl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以獲得所需純度。T9.T8所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量小于所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置減小流體輸送的速度。T10.T8所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組中特征A顆粒的總量，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變速度從而改變至少一個群組中特征A顆粒的量以獲得所述可接受的量或百分比。Tll.Tl所述的系統(tǒng)，其中，所述流^f支構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。T12.Tll所述的系統(tǒng)，其中，特征A表示活X精細(xì)胞(X)，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(~X)，所述激光器用于熔化第二顆粒組和第三顆粒組而不熔化第一顆粒組，并且所述控制裝置作為至少一個群組中活X精細(xì)胞的量的函數(shù)改變流體輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的速度。T13.Tll所述的系統(tǒng)，其中，特征A表示活X精細(xì)胞(X)，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)，所述激光器用于熔化第二顆粒組而不熔化第一和第三顆粒組，并且所述控制裝置作為至少一個群組中活X精細(xì)胞的量的函數(shù)改變流體輸送到流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中的速度。U.包括可變流速分揀策略的光破壞分揀方法Ul.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的方法，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略通過熔化所選擇的顆粒分揀所述流中的顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化特征A的顆?；蛘呶慈刍卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。U2.Ul所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。U3.U2所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。U4.U3所述的方法，其中，特征B表示活X精細(xì)胞以外的精細(xì)胞(X)，并且所述激光器僅熔化第二顆粒組。U5.U4所述的方法，還包括將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。U6.U2所述的方法，其中，特征B表示活X精細(xì)胞以外的精細(xì)胞(X)，并且所述激光器僅熔化第二和第三顆粒組。U7.Ul所述的方法，其中當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。U8.U7所迷的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組的純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送速度以獲得所述所需純度。U9，U8所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量小于所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置減小流體輸送的速度。UIO，U8所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組中特征A顆粒的總量，所述系統(tǒng)還包括用于顯示至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變速度從而改變至少一個群組中特征A顆粒的量以獲得所述可接受的量或百分比。Ull.Ul所述的系統(tǒng)，其中，所述流被構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。U12.Ull所述的系統(tǒng)，其中，特征A表示活X精細(xì)胞(X)，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)，所述激光器用于熔化第二顆粒組和第三顆粒組而不熔化第一顆粒組，并且所述控制裝置作為至少一個群組中活X精細(xì)胞的量的函數(shù)改變流體輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的速度。U13.Ull所述的系統(tǒng)，其中，特征A表示活X精細(xì)胞(X)，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(~X)，所述激光器用于熔化第二顆粒組而不熔化第一顆粒組和第三顆粒組，并且所迷控制裝置作為至少一個群組中活X精細(xì)胞的量的函數(shù)改變流體輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的速度。V.包括分揀策略的流體切換顆粒分揀器VI.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略在所述流中分揀所選擇的顆粒以提供包含所需顆粒的至少一個群組的流體切換分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括作為下列因素至少一個的函數(shù)控制流體切換分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所迷至少一個群組中的特征A的顆?；蛘咛卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。V2.Vl所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。V3.Vl所述的系統(tǒng)，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。V4.V3所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(~X)。V5.Vl所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。V6.Vl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以獲得所需純度。V7.Vl所述的系統(tǒng)，其中，所述流被構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。V8.V7所述的系統(tǒng)，其中，所述激光器僅熔化第二顆粒組。V9.V8所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。V10.V7所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)并且所述激光器用于熔化所述流中的第二顆粒組和第三顆粒組。Vll.V10所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量小于所述可接受的量時所述控制裝置減小流體輸送的速度。V12.V10所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變速度從而獲得所迷至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量。w.包括分揀策略的流體切換分揀方法Wl.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略通過使得所選擇的顆粒轉(zhuǎn)向分揀所述流中的顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的特征A的顆粒或者特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。W2.Wl所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。W3.Wl所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。W4.Wl所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。W5.Wl所迷的方法，還包括將所述流構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。W6.W5所迷的方法，還包括熔化第二顆粒組而不熔化第一和第三顆粒組。W7.W6所述的方法，還包括將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。W8.W5所述的方法，還包括熔化第二和第三顆粒組而不熔化第一顆粒組。W9.W8所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量小于所述可接受的量時所述控制裝置減小流體輸送的速度。X.包括可變流速分揀策略的流體切換分揀器XI,在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于根據(jù)所述分類在所述流中分揀所選擇的顆粒的以提供包含所需顆粒的至少一個群組的流體切換分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括作為下列因素至少一個的函數(shù)控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的特征A的顆?；蛘咛卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。X2.Xl所迷的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。X3.Xl所述的系統(tǒng)，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。X4.X3所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(~X)。X5.Xl所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。X6.Xl所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以獲得所需純度。X7.Xl所述的系統(tǒng)，其中，所述流被構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。X8.X7所述的系統(tǒng)，其中，所述激光器僅熔化第二顆粒組。X9.X8所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。X10.X7所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)并且所述激光器用于熔化所述流中的第二顆粒組和第三顆粒組。Xll.X10所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量小于所述可接受的量時所述控制裝置減小流體輸送的速度。X12.X10所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變速度從而獲得所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量。Y.包括可變流速和反饋的流體切換分揀方法Yl.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的方法，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類通過使得所選擇的顆粒轉(zhuǎn)向分揀所述流中的顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及作為下列因素至少一個的函數(shù)改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的特征A的顆?；蛘咛卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。Y2.Yl所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。Y3.Yl所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。Y4.Yl所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組的純度大于所需純度時該控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。Y5.Yl所述的方法，還包括將所述流構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。Y6.Y5所述的方法，還包括熔化第二顆粒組而不熔化第一和第三顆粒組。Y7.Y6所述的方法，還包括將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。Y8.Y5所述的方法，還包括熔化第二和第三顆粒組而不熔化第一顆粒組。Y9.Y8所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中未熔化的特征A顆粒的量小于所述可接受的量時所述控制裝置減小流體輸送的速度。Z.保留1AA.用于PMT輸出信號和DSP分析和分類的A/D轉(zhuǎn)換器AA1.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣并且提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信4表示特征A或者特征B;分析和分類數(shù)字信息并且為所述分揀系統(tǒng)提供作為被分析和分類的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號的數(shù)字信號處理器。AA1A.如AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述隨時間變化的模擬輸出包括一系列波形脈沖，每一個波形脈沖表示顆粒的特征，其中數(shù)字信號處理器檢測數(shù)字信息中對應(yīng)于波形脈沖的部分并且對所檢測的部分分類，并且所述數(shù)字信號處理器提供作為所述被檢測和分類的部分的函數(shù)的所述分揀信號。AA1B.如AA1所述的系統(tǒng)，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。AA2.AA1B所述的系統(tǒng)，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。AA3.AA1B所述的系統(tǒng)，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)月包。AA4.AA3所述的系統(tǒng)，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)。AA5.AA4所述的系統(tǒng)，還包括將所述至少一個群組的純度保持得大于85%但是小于95%。AA6.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置在所述純度大于所需純度時增大流體輸送的速度，并且在所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。AA7.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組的純度，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所需純度的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送的速度以使得所述純度與所需純度基本一致。AA8.AA7所述的系統(tǒng)，其中，當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量時所述控制裝置增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量小于所述可接受的量時所述控制裝置減小流體輸送的速度。AA9.AA8所述的系統(tǒng)，其中，所述控制裝置根據(jù)來自于流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的輸出信號確定所述至少一個群組中特征A顆粒的量，所述系統(tǒng)還包括用于顯示所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量的控制裝置的操作者輸入，并且所述控制裝置改變流體輸送速度從而獲得所述至少一個群組中的所述可接受的量。AA10.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述流被構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。AA11.AA10所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)用于使用分揀策略，其中所述第一顆粒組被選擇得用于收集在所述至少一個群組中并且所述第二和第三顆粒組未被選擇得用于收集在所述至少一個群組中。AA12.AA10所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)用于使用分揀策略，其中所述第一和第三顆粒組被選擇得用于收集在所述至少一個群組中并且所述第二顆粒組未被選擇得用于收集在所述至少一個群組中。AA13.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)包括液滴分揀系統(tǒng)。AA14.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)包括光破壞分揀系統(tǒng)。AA15.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述分揀系統(tǒng)包括流體切換分揀系統(tǒng)。AA16.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測對應(yīng)于所述數(shù)字信息的脈沖的指令、用于在檢測的脈沖中抽取特征的指令以及識別作為它們被抽取的特征的函數(shù)的被檢測的脈沖的指令。AA17.AA16所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定在表示特征A的被抽取的特征和表示特征B的被抽取的特征之間識別的判定邊界的指令。AA18.AA17所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器作為下列因素至少一個的函數(shù)調(diào)節(jié)判定邊界相對于表示特征A的被抽取的特征和相對于表示特征B的被抽取的特征的相對位置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。AA19.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于將數(shù)字信息匯集成連續(xù)流的數(shù)據(jù)管理處理器。AA20.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由數(shù)字信息表示的波形脈沖的脈沖檢測處理器，并且所述數(shù)字信號處理器作為所檢測的波形脈沖的函數(shù)分類所述數(shù)字信息。AA21.AA20所述的系統(tǒng)，還包括用于在等于或小于所述轉(zhuǎn)換器連續(xù)采樣速度的一半的頻率下過濾模擬輸出的濾波器，其中所述轉(zhuǎn)換器將已過濾的模擬輸出轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的數(shù)字信息，并且所述數(shù)字信號處理器作為判定邊界的函數(shù)分類所述數(shù)字信息。AA22.AA21所述的系統(tǒng)，所述連續(xù)采樣速度約為109MHZ或更高。AA23.AA21所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定識別表示特征A的已抽取特征和表示特征B的已抽取特征的特征抽取和識別處理器，并且特征抽取和識別處理器抽取由所述數(shù)字信息表示的特征以及作為判定邊界的函數(shù)分類所述特征。AA24.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括對所述分類起反應(yīng)以便于向所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號的分揀處理器。AA25.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述處理器計算(innumerates)具有特征A或具有特征B的已分類顆粒的量。AA26.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器作為將具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)減小得基本等于或小于預(yù)設(shè)量的函數(shù)或作為將具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)最小化得基本等于或小于預(yù)設(shè)量的函數(shù)而分類數(shù)字信息。AA27.AA26所述的系統(tǒng)，其中，所述預(yù)設(shè)量約為1.5%或更小。AA27a.AA26所述的系統(tǒng)，其中，所述預(yù)^L量約為1.3%或更小。AA28.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器分類數(shù)字信息以使具有特征A的顆粒群組和具有特征B的顆粒群組對應(yīng)于包括具有特征A的顆粒的第一模型群組、具有特征B的顆粒的第二模型群組和未對準(zhǔn)的顆粒的第三模型群組的三個群組的計算機(jī)模型，所述模型評估第一、第二和第三模型群組中的每一個的群組統(tǒng)計。AA29.AA28所述的系統(tǒng)，其中，第三模型群組包括未對準(zhǔn)的顆粒的兩個群組，并且所述才莫型評估這兩個群組的群組統(tǒng)計。AA30.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由數(shù)字信息表示的用于檢測波形脈沖的脈沖檢測處理器，并且所述數(shù)字信號處理器作為具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)或作為具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)而分類所述數(shù)字信息。AA30a.AA30所述的系統(tǒng)，還包括用于在等于或小于所述轉(zhuǎn)換器連續(xù)采樣速度的一半的頻率下過濾模擬輸出的濾波器，其中所述轉(zhuǎn)換器將已過濾的模擬輸出轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的數(shù)字信息，并且所述數(shù)字信號處理器作為具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)或作為具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)而分類所述數(shù)字信息。AA30b.AA1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定別處理器，并且特征抽取和識別處理器抽取由所述數(shù)字信息表示的特征以及作為具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)或作為具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)而分類所述特征。AA31.—種利用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的方法，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體；使流體形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)檢測流體流中的顆粒；根據(jù)分揀策略在流體流中分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組；將來自于所述流式細(xì)胞術(shù)的模擬輸出轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的數(shù)字信息，其中模擬輸出表示特征A或者特征B;以及分析和分類數(shù)字信息并且作為被分析和分類的數(shù)字信息的函數(shù)分揀顆粒。AA31A.AA31所述的方法還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)改變所述分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。AA32.AA31所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞并且特征A和B與所述細(xì)胞的物理特征有關(guān)。AA33.AA31所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)胞。AA34.AA33所述的方法，其中，特征B表示活X細(xì)胞以外的細(xì)胞(X)。AA35.AA33所述的方法，還包括將所述純度保持得大于85%但是小于95%。AA36.AA31所述的方法，還包括在所述純度大于所需純度時增大流體輸送的速度，并且在所述純度小于所述所需純度時減小流體輸送的速度。AA37.AA31所述的方法，還包括當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量大于所述至少一個群組中特征A顆粒的可接受的量時增大流體輸送的速度，并且當(dāng)所述至少一個群組中特征A顆粒的量小于所述可接受的量時減小流體輸送的速度。AA38.AA31所述的方法，還包括將所述流構(gòu)成為包含通常在一個系列中一個跟著另一個的顆粒的流，所述系列包括連續(xù)的顆粒組，所述組包括每一個都包含具有特征A的一個或者多個顆粒的第一顆粒組、每一個都包含具有特征B的一個或者多個顆粒的第二顆粒組，以及每一個都包含其中至少一個具有特征A和其中至少一個具有特征B的兩個或者多個近間隔的顆粒的第三顆粒組。AA39.AA38所述的方法，還包括根據(jù)分揀策略分揀所述顆粒，其中只有第一顆粒組,皮選擇得用于收集在所述至少一個群組中。AA40.AA38所述的方法，還包括根據(jù)分揀策略分揀所述顆粒，其中第一和第三顆粒組被選擇得用于收集在所述至少一個群組中。AA41.AA31所述的方法，其中，所述分揀包括使用液滴分揀處理。AA42.AA31所述的方法，其中，所述分揀包括使用光破壞分揀處理。AA43.AA31所述的方法，其中，所述分揀包括使用流體切換分揀處理。AA44.AA1所述的方法，還包括檢測由所述數(shù)字信息表示的波形脈沖、被檢測的波形脈沖。AA45.AA44所述的方法，還包括限定在表示特征A的被抽取的特征和表示特征B的被抽取的特征之間識別的判定邊界。AA46.AA45所述的方法，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)調(diào)節(jié)的特征的相對位置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。AA47.AA31所述的方法，其中，所述轉(zhuǎn)換包括同步采樣所述才莫擬輸出。AA48.AA31所述的方法，其中，分類數(shù)字信息包括作為將具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)最小化得基本等于或小于預(yù)設(shè)量的函數(shù)或作為將具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)最小化得基本等于或小于預(yù)設(shè)量的函數(shù)而分類數(shù)字信息。AA49.AA48所述的方法，其中，所述預(yù)設(shè)量約為1.5%或更小。AA50.AA31所述的方法，其中，分類數(shù)字信息包括類數(shù)字信息以使具有特征A的顆粒群組和具有特征B的顆粒群組對應(yīng)于包括具有特征A的顆粒的第一模型群組、具有特征B的顆粒的第二模型群組和未對準(zhǔn)的顆粒的第三模型群組的三個群組的計算機(jī)模型，所述模型評估第一、第二和第三模型群組中的每一個的群組統(tǒng)計。AA51.AA31所述的系統(tǒng)，分類所述數(shù)字信息包括作為具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)或作為具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)而分類所述數(shù)字信息。BB.確定初始檢測參數(shù)BB1.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于才艮據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣并且提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;確定來自于所述數(shù)字信息中所述隨時間變化的模擬輸出背景特征的數(shù)字信號處理器；檢測作為所確定的背景特征的函數(shù)的由所述數(shù)字信息表示的波形脈沖；以及為所述分揀系統(tǒng)提供作為被檢測的波形脈沖的函數(shù)的分揀信號。BB2.Bm所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器使用用于確定限定背景特征的脈沖檢測閾值的迭代法，所述迭代法包括從數(shù)字信息中計算背景統(tǒng)計評估；利用計算的評估為所述數(shù)字信息提供脈沖檢測邏輯以確定表示特征A或者特征B的脈沖；不利用對應(yīng)于確定的脈沖的數(shù)字信息再次計算評估；以及重復(fù)上述步驟直至背景統(tǒng)計評估收斂或者固定的最大迭代數(shù)出現(xiàn)。BB3，BB1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由所述數(shù)字信息表示的波形脈沖的指令、用于在檢測的脈沖中抽取特征的指令以及識別作為它們被抽取的特征的函數(shù)的被檢測的脈沖的指令。BB4，BB3所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定在表示特征A的被抽取的特征和表示特征B的被抽取的特征之間識別的判定邊界的指令。BB5.BB4所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器作為下列因素至少一個的函數(shù)調(diào)節(jié)判定邊界相對于表示特征A的被抽取的特征和相對于表示特征B的被抽取的特征的相對位置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。BB6.BB1所述的系統(tǒng)，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。BB7.Bl所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由數(shù)字信息表示的波形脈沖的脈沖檢測處理器，并且所述數(shù)字信號處理器作為所檢測的波形脈沖的函數(shù)分類所述數(shù)字信息。BB8.BB7所述的系統(tǒng)，還包括用于在等于或小于所述轉(zhuǎn)換器采樣速度的一半的頻率下過濾模擬輸出的濾波器，其中所述轉(zhuǎn)換器將已過濾的模擬輸出轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的數(shù)字信息。CC.產(chǎn)生初始識別參數(shù)CC1.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣并且提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;以及從數(shù)字信息中產(chǎn)生初始識別參數(shù)、識別作為初始識別參數(shù)的函數(shù)的數(shù)字信息以及為所述分揀系統(tǒng)提供作為被識別的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號的數(shù)字信號處理器。CC2.CC1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器使用下列算法中的至少一種以產(chǎn)生初始識別參數(shù)，這些算法包括k-平均(k-Means)、模糊k國平均(Fuzzyk畫Means)和凝聚分級(AgglomerativeHierarchical)。CC3.CC1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由所述數(shù)字信息表示的波形脈沖的指令、用于在檢測的脈沖中抽取特征的指令以及識別作為它們被抽取的特征的函數(shù)的被檢測的脈沖的指令。CC4.CC3所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定在表示特征A的被抽取的特征和表示特征B的被抽取的特征之間識別的判定邊界的指令。CC5.CC4所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器作為下列因素至少一個的函數(shù)調(diào)節(jié)判定邊界相對于表示特征A的被抽取的特征和相對于表示特征B的被抽取的特征的相對位置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。CC6.CC1所述的系統(tǒng)，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。DD.同歩采樣波形脈沖以進(jìn)行分類DDI.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括:用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；和用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的包括一系列波形脈沖的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣并且提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，其中所述波形脈沖和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;以及分析數(shù)字信息并且作為與其相對應(yīng)的被分析的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號的數(shù)字信號處理器。DD2.DD1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字處理器使用用于限定波形脈沖的檢測閾值，并且所述檢測閾值是背景平均評估和在結(jié)束于當(dāng)前樣本的樣本移動窗內(nèi)計算的數(shù)字信息的標(biāo)準(zhǔn)偏差的函數(shù)。DD3.DD1所述的系統(tǒng)，其中，數(shù)字控制裝置使用統(tǒng)計異常檢測分析，并且與數(shù)字信息的背景特征統(tǒng)計異常的數(shù)字信息是數(shù)字脈沖被考慮的部分。DD4.DD1所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測與數(shù)字信息相對應(yīng)的脈沖的指令、用于在檢測的脈沖中抽取特征的指令以及識別作為它們被抽取的特征的函數(shù)的被檢測的脈沖的指令。DD5.DD4所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定在表示特征A的被抽取的特征和表示特征B的被抽取的特征之間識別的判定邊界的指令。DD6.DD5所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器作為下列因素至示特征B的被抽取的特征的相對位置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。DD7.DD1所述的系統(tǒng)，還包括用于在等于或小于所述轉(zhuǎn)換器采樣速度的一半的頻率下過濾模擬輸出的濾波器，其中所述轉(zhuǎn)換器將已過濾的才莫擬輸出轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的數(shù)字信息。DD8.DD1所述的系統(tǒng)，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。DD9.DD1所述的系統(tǒng)，其中，所述處理器計算(innumerates)具有特征A或具有特征B的已分類顆粒的量。DD10.DD1所述的系統(tǒng)，還包括用于照射顆粒以產(chǎn)生相應(yīng)的波形脈沖的與同步采樣同步的脈沖照射裝置。DD11.DD10所述的系統(tǒng)，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由數(shù)字信息表示的波形脈沖的脈沖檢測處理器，并且所述數(shù)字信號處理器作為具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)或作為具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)而分類所述數(shù)字信息。EE.特征抽取EE1.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣并且提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;數(shù)的分揀;^"數(shù)字信號處理器。'、、曰、、、EE2.EE1所述的設(shè)備，其中，被抽取的特征對應(yīng)于下列特征的一個或者多個，這些特征包括脈沖區(qū)域、脈沖峰值、脈沖內(nèi)區(qū)域(pulseinnerarea)、脈沖寬度、脈沖高斯分布(pulsegaussianity)、脈沖滯后峰值或者脈沖斜度。EE3.EE2所述的設(shè)備，其中，被抽取的特征包括在脈沖的一點處相對于脈沖的平均峰值高度的脈沖的導(dǎo)數(shù)的近似值或者脈沖的效率。EE4.EE3所述的設(shè)備，其中，沿著脈沖的所述點對應(yīng)于在由具有特征A的顆粒產(chǎn)生的脈沖的第一導(dǎo)數(shù)和由具有特征B的顆粒產(chǎn)生的脈沖的第一導(dǎo)數(shù)之間存在差值的點。EE5.EE3所述的i殳備，其中，隨時間變化的^=莫擬輸出對應(yīng)于來自于顆粒的熒光發(fā)射脈沖，并且沿著脈沖的所述點對應(yīng)于在由具有特征A的顆粒產(chǎn)生的脈沖的第一導(dǎo)數(shù)和由具有特征B的顆粒產(chǎn)生的脈沖的第一導(dǎo)數(shù)之間的差值為最大值或者接近最大值的點。EE6.EE3所述的設(shè)備，其中，隨時間變化的模擬輸出對應(yīng)于來自于顆粒的熒光發(fā)射脈沖，并且沿著脈沖的所述點是熒光發(fā)射脈沖的峰值高度的函數(shù)。EE7.EE3所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由數(shù)字信息表示的波形脈沖的指令、用于在檢測的波形脈沖中抽取特征的指令以及識別作為它們被抽取的特征的函數(shù)的被檢測的波形脈沖的指令。EE8.EE7所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定在表示特征A的被抽取的特征和表示特征B的被抽取的特征之間識別的判定邊界的指令。EE9.EE8所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器作為下列因素至少一個的函數(shù)調(diào)節(jié)判定邊界相對于表示特征A的被抽取的特征和相對于表示特征B的被抽取的特征的相對位置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。EE10.EE1所述的設(shè)備，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。EE11.EE1所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由EE12.EE1所述的設(shè)備，還包括用于在等于或小于所述轉(zhuǎn)換器釆樣速度的一半的頻率下過濾模擬輸出的濾波器，其中所述轉(zhuǎn)換器將已過濾的模擬輸出轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的數(shù)字信息。FF.識別波形樂K沖FF1.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的287流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及才艮據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的包括波形脈沖的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣并且提供包括對應(yīng)于所述波形脈沖的數(shù)字信息的輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，其中所述波形脈沖和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;以表示特征A或者特征B的形式識別數(shù)字信息并且為所述分揀系統(tǒng)提供作為被識別的數(shù)字信息的函數(shù)的分揀信號的數(shù)字信號處理器。FF2.FF1所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由所述數(shù)字信息表示的波形脈沖的指令、用于在檢測的波形脈沖中抽取特征的指令以及識別作為它們被抽取的特征的函數(shù)的被檢測的波形脈沖的指令。FF3.FF2所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于限定在表示特征A的被抽取的特征和表示特征B的被抽取的特征之間識別的判定邊界的設(shè)備。FF4.FF3所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器作為下列因素至少特征B的被抽取的特征的相對位置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。FF5.FF1所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測與數(shù)字信息相對應(yīng)的波形脈沖的脈沖檢測處理器，并且所述數(shù)字信號處理器作為所檢測的波形脈沖分類所述數(shù)字信息。FF6.FF5所述的設(shè)備，還包括用于在等于或小于所述轉(zhuǎn)換器采樣速度的一半的頻率下過濾模擬輸出的濾波器，其中所述轉(zhuǎn)換器將已過濾的模擬輸出轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的數(shù)字信息。FF7.FF1所述的設(shè)備，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。FF8.FF1所述的設(shè)備，還包括用于照射顆粒以產(chǎn)生相應(yīng)的波形脈沖的與同步采樣同步的脈沖照射裝置。FF9.FF所述的設(shè)備，其中，所述數(shù)字信號處理器包括用于檢測由數(shù)字信息表示的波形脈沖的脈沖檢測處理器，并且所述數(shù)字信號處理器作為具有特征A顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)或作為具有特征B顆粒的群組的改變系數(shù)的函數(shù)而分類所述數(shù)字信息。GG.LED陣列分裂傳感器GG1.—種與在分裂位置處分裂為液滴的連續(xù)流體流結(jié)合使用的設(shè)備，所述設(shè)備包括布置在所述流的一側(cè)上以照射所述流的光源；布置在所述流的另一側(cè)上以便于沿著基本平行于所述流的軸線被取向的線性光敏元件陣列，所述光敏元件陣列適于檢測穿過所述流的來自于所述光源的光并且所述光敏元件陣列適于提供對應(yīng)于檢測光的輸出信號；用于接收輸出信號并且提供與分裂位置相對應(yīng)的位置的位置信號的控制裝置。GG2.GG1所述的設(shè)備，還包括用于提供表示分裂位置的位置的顯示的顯示器。GG3.GGl所述的i殳備，還包括用于向所述流施力以改變分裂位置的位置的換能器，所述換能器作為輸入信號的函數(shù)改變所述力的振幅，并且來自于檢測器的位置信號作為輸入信號被提供給所述換能器。GG4.GG3所述的設(shè)備，還包括用于指定作為分裂位置的位置的函數(shù)的施加于所述流的力的振幅的改變的查閱表。HH.流式細(xì)胞術(shù)分裂傳感器HH1.在一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)中，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，改進(jìn)包括布置在所述流的一側(cè)上第二位置處以照射所述流的光源；布置在所述流的另一側(cè)上第二位置處以便于沿著基本平行于所述流的軸線被取向的線性光敏元件陣列，所述光敏元件陣列適于檢測穿過所述流出信號；'、、；'、、…、、、，；"、、'用于接收表示第二位置的位置的輸出信號的控制裝置，所迷控制裝置作為輸出信號的函數(shù)改變所述換能器的操作。HH2.HH1所述的設(shè)備，還包括作為下列因素至少一個的函數(shù)響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。HH3.HH1所述的設(shè)備，還包括用于提供表示分裂位置的位置的顯示的顯示器。HH4.HH1所述的設(shè)備，還包括用于向所述流施力以改變分裂位置的位置的換能器，所述換能器作為輸入信號的函數(shù)改變所述力的振幅，并且來自于檢測器的位置信號作為輸入信號被提供給所述換能器。HH5.HH4所述的設(shè)備，還包括用于指定作為分裂位置的位置的函數(shù)的施加于所述流的力的振幅的改變的查閱表。II.具有外照射光學(xué)系統(tǒng)的液滴分揀器111.一種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的設(shè)備，所述系統(tǒng)包括用于將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置并且使得流體流在第二位置分裂成液滴的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備利用流式細(xì)胞術(shù)根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類并且根據(jù)包含在液滴中的顆粒的分類分揀所述液滴；所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以^使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出。112.IIl所述的設(shè)備，其中，所述顆粒是細(xì)胞。113.IIl所述的設(shè)備，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。114.113所述的系統(tǒng)，其中，所述射束在所述第一位置處以斑點的形式被所述光學(xué)系統(tǒng)聚焦在流體流上，所述斑點的形狀基本為橢圓形，并且其具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，所述寬度小于穿過斑點的精細(xì)胞的頭部的長度。115.ID所述的設(shè)備，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)包括在所述聚焦透鏡后面用于檢測所述發(fā)射的一個光檢測器。116.IIl所述的設(shè)備，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備還包括噴嘴，所述噴嘴具有這樣構(gòu)造的內(nèi)表面，即，能夠在顆粒穿過所述光束之前在顆粒上施加作用力以將它們帶到所需取向。117.114所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴可圍繞所述噴嘴的縱向軸線轉(zhuǎn)動以調(diào)節(jié)相對于射束軸線的所述所需顆粒取向。118.IIl所述的設(shè)備，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括噴嘴，所述噴嘴被取向為沿向上、非豎直的方向引導(dǎo)所述流體流。119.IIl所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴具有涂有非反射性、非發(fā)射性涂層。1110.IIl所述的設(shè)備，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)包括在所述聚焦透鏡后面用于檢測所述發(fā)射的一個光檢測器。nil.ni所述的設(shè)備，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括具有噴嘴孔的噴嘴，以及從所述噴嘴孔處延伸的毛細(xì)管，所述流體流通過所述噴嘴孔被輸送到所述第一位置。1112.H9所述的設(shè)備，其中，所述第一位置位于所述毛細(xì)管的內(nèi)部。1113.IIl所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元可同時分析多個流體流，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元包括所述外照射光學(xué)系統(tǒng)。JJ.使用外照射光學(xué)系統(tǒng)分揀顆粒的方法JJ1.一種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的方法，所述方法包括將包含所迷顆粒的流體流輸送到第一位置并且使得流體流在第二位置分裂成液滴；利用流式細(xì)胞術(shù)根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類并且根據(jù)包含在液滴中的顆粒的分類分揀所述液滴，所述流式細(xì)胞術(shù)包括可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出。JJ2.JJ1所述的方法，其中，所述顆粒是細(xì)胞。JJ3.JJ1所述的方法，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。JJ4.JJ3所述的方法，其中，輸送流體流的步驟包括在20-40psi的壓力下以及以每秒30000至50000個精細(xì)胞的速度引導(dǎo)所述流體通過直徑為50至70微米的噴嘴孔。JJ5.JJ3所述的方法，還包括所述射束在所述第一位置處以斑點的形式被聚焦在流體流上，所述斑點的形狀基本為橢圓形，并且其具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，所述寬度小于穿過斑點的精細(xì)胞的頭部的長度。JJ6，JJ5所述的方法，其中，所述精細(xì)胞的頭部包括具有在流體流的方向上的長度的DNA區(qū)域，并且所述光束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度。JJ7.JJ3所述的方法，還包括產(chǎn)生都包^#細(xì)胞的多個獨立的流體流，并且對于每一個這種流體流，執(zhí)行步驟(a)(b)。JJ8.JJ7所述的方法，還包括利用公共激光束照射所述流體流。JJ9.JJ1所述的方法，還包括在顆粒穿過所述光束之前在顆粒上施加作用力以將它們帶到所需取向。JJ10.JJ4所述的方法，還包括使得所述流體流流過被構(gòu)成得用于施加所述力的噴嘴，并且使得所述噴嘴圍繞所述噴嘴的縱向軸轉(zhuǎn)動以相對于射束軸線調(diào)節(jié)所需顆粒取向。JJ11.JJ1所述的方法，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)處理還包括僅利用一個光檢測器檢測電磁輻射的發(fā)射。KK.具有外照射光學(xué)系統(tǒng)的光破壞分揀器KK1.一種才艮據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的設(shè)備，所述系統(tǒng)包括用于將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置、根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類以及根據(jù)所述分類將所述顆粒分揀所到包含所需顆粒的至少一個群組中的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于熔化所述流中的顆粒的激光器，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從^L引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出。KK2.KK1所述的設(shè)備，其中，所述顆粒是細(xì)胞。KK3.KK2所述的設(shè)備，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。KK4.KK1所述的設(shè)備，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備還包括噴嘴，所述噴嘴具有這樣構(gòu)造的內(nèi)表面，即，能夠在顆粒穿過所述光束之前在顆粒上施加作用力以將它們帶到所需取向。KK5.KK4所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴可圍繞所述噴嘴的縱向軸線轉(zhuǎn)動以調(diào)節(jié)相對于射束軸線的所述所需顆粒取向。KK6.KK1(拷貝權(quán)利要求AA2等)LL.使用外照射光學(xué)系統(tǒng)和光破壞分揀顆粒的方法LL1.一種才艮據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的方法，所述方法包括使用流式細(xì)胞術(shù)處理以根據(jù)所述特征對流體流中的顆粒進(jìn)行分類以及根據(jù)所述顆粒的分類分揀所述顆粒；以及熔化所述流體流中的顆粒，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括沿著與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所迷細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出。MM.具有外照射光學(xué)系統(tǒng)的精細(xì)胞分揀器MM1.—種才艮據(jù)染色體DNA特征對精細(xì)胞進(jìn)行分類的系統(tǒng)包括用于將包含所述細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流在第二位置處分裂為液滴的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于根據(jù)DNA特征對所述細(xì)胞進(jìn)行分類并且根據(jù)包含在液滴中的細(xì)胞分類分揀所述液滴，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出。MM2.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)還包括在所述聚焦透鏡后面的所述射束軸線上的用于檢測所述輻射的至少一些并且將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號的光檢測器。MM3.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述液滴被分揀于每個都包含至少一個活X精細(xì)胞的第一液滴和每個都包含至少一個Y細(xì)胞的第二液滴中。MM4.MM3所述的系統(tǒng)，其中，第一液滴中的至少一些包含活X細(xì)胞和活Y細(xì)月包。MM5.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括噴嘴，所述噴嘴具有這樣構(gòu)造的內(nèi)表面，即，能夠在細(xì)胞穿過所述光束之前在細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。MM6.MM5所述的系統(tǒng)，其中，所述噴嘴可圍繞所述噴嘴的縱向軸線轉(zhuǎn)動以調(diào)節(jié)相對于射束軸線的所述所需細(xì)胞取向。MM7.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述射束軸線在所述第一位置處在相對于所述流的縱向軸的斜入射角下與所述流體流相交。MM8.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述射束在所述第一位置處以斑點的形式被所述光學(xué)系統(tǒng)聚焦在流體流上，所述斑點的形狀基本為橢圓形，并且其具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，所述寬度小于穿過斑點的精細(xì)胞的頭部的長度。MM9.MM8所述的系統(tǒng)，其中，所述精細(xì)胞的所述頭包括在流體流的方向上具有長度的DNA區(qū)域，并且所述光束斑點寬度小于所述DNA區(qū)域的長度。MM10.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)"i殳備包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元用于同時分析多個流體流，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元包括所述外照射光學(xué)系統(tǒng)。MM11.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括噴嘴，所述噴嘴被取向為沿向上、非豎直的方向引導(dǎo)所述流體流。MM12.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)僅包括用于檢測所述發(fā)射的一個光檢測器。MM13.MM1所述的系統(tǒng)，還包4舌用于收集至少所述笫一液滴的收集器。MM14.MM1所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括具有噴嘴孔的噴嘴，以及從所述噴嘴孔處延伸的毛細(xì)管，所述流體流通過所述噴嘴孔4皮輸送到所述第一位置。MM15.MM14所述的系統(tǒng)，其中，所述第一位置位于所述毛細(xì)管的內(nèi)部。MM16.MM15所述的系統(tǒng)，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)與所述毛細(xì)管光學(xué)地連接從而將所述射束傳輸?shù)搅鬟^所述管的所述流中。NN.使用外照射光學(xué)系統(tǒng)分揀精細(xì)胞的方法NN1.—種通過染色體DNA特征對動物精細(xì)胞進(jìn)行分類的方法，所述方法包括下列步驟(a)將包含所述細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流在第二位置處分裂為液滴；(b)沿著在所述第一位置與所述流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出；(c)檢測所述輻射的至少一些并且將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；(d)處理所述電信號和根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類；以及(e)根據(jù)包含在所述液滴中的細(xì)胞分類分揀所述液滴。NN2.NN1所述的方法，其中，所述液滴,皮分揀于每個都包含至少一個活X精細(xì)胞的第一液滴和每個都包含至少一個Y細(xì)胞的第二液滴中。NN3.NN2所述的方法，其中，第一液滴中的至少一些包含活X細(xì)胞和活Y細(xì)胞。NN4.NN1所述的方法，其中，步驟(a)包括在20-40psi的壓力下以及以每秒30000至50000個精細(xì)胞的速度引導(dǎo)所述流體通過直徑為50至70微米的噴嘴孔。NN5.NN1所述的方法還包括在顆粒穿過所述光束之前在顆粒上施加作用力以將它們帶到所需取向。NN6.NN5所述的方法，其中，所述精細(xì)胞具有頭部，所述頭部具有寬面和窄邊，并且其中，所述所需取向是射束擊打所述寬面的方向。NN7.NN6所述的方法，其中，所述流體輸送步驟包括通過噴嘴引導(dǎo)所述流，并且所述方法還包括使得所述噴嘴圍繞所述噴嘴的縱向軸線轉(zhuǎn)動以調(diào)節(jié)相對于射束軸線的所述所需細(xì)胞取向。NN8.NN1所述的方法還包括將所述射束以斑點的形式聚焦在流體流上，所述斑點的形狀基本為橢圓形，并且其具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，所述寬度小于穿過斑點的精細(xì)胞的頭部的長度。NN9.NN8所述的方法，其中，所述精細(xì)胞的所述頭包括在流體流的方向上具有長度的DNA區(qū)域，并且所述光束斑點寬度小于所述DNA區(qū)域的長度。NN10.NN5所述的方法，其中，步驟(d)包括至少使得所述第一液滴偏轉(zhuǎn)。NN11.NN1所述的方法，還包括引導(dǎo)所述發(fā)射的至少一些通過包括空間濾光器的過濾系統(tǒng)，所述空間濾光器具有長度和寬度尺寸的孔，至少一個所述尺寸可調(diào)節(jié)以改變所述孔的尺寸。NN12.NN1所述的方法，還包括沿向上的、非豎直軌跡引導(dǎo)所述流體流。NN13.NN1所述的方法還包括產(chǎn)生都包含精細(xì)胞的多個獨立的流體流，并且對于每一個這種流體流，執(zhí)行步驟(a)、(b)、(c)和(d)。NN13A.NN13所述的方法還包括使用公共激光束照射所述流體流。NN14.NN13所述的方法，其中，所述流體流包含來自于公共流體供應(yīng)的流體。NN15.NN1所述的方法，其中，所述流體流通過毛細(xì)管被輸送到所述第一位置。OO.具有外照射光學(xué)系統(tǒng)的精細(xì)胞分析器001.—種通過染色體DNA特征分類動物精細(xì)胞的設(shè)備，所述設(shè)備包括用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且用于在細(xì)胞到達(dá)所述第一位置之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向的噴嘴系統(tǒng)；外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)沿著在所述第一位置在非零的入射角下與所述流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射的激光束以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出；光檢測器，所述光檢測器用于檢測和將所述輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及用于處理所述電信號并根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞分類的處理器。002.OOl所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴系統(tǒng)是液滴細(xì)胞分揀系統(tǒng)的一部分。003.OOl所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴系統(tǒng)是光破壞細(xì)胞分揀系統(tǒng)的一部分。004.OOl所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴系統(tǒng)是流體切換細(xì)胞分揀系統(tǒng)的一部分。005.OOl所述的設(shè)備，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)還包括在所述聚焦透鏡后面的勝訴射束軸線上的光檢測器，所述光檢測器用于檢測和將輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號。006.OOl所述的設(shè)備，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括噴嘴，所述噴嘴具有這樣構(gòu)造的內(nèi)表面，即，能夠在細(xì)胞穿過所述光束之前在細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。007.006所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴可圍繞所述噴嘴的縱向軸線轉(zhuǎn)動以調(diào)節(jié)相對于射束軸線的所述所需細(xì)胞取向。008.OOl所述的設(shè)備，其中，所述射束軸線在所述第一位置處在相對于所述流的縱向軸的斜入射角下與所述流體流相交。009.OOl所述的設(shè)備，其中，所述射束在所述第一位置處以斑點的形式被所述光學(xué)系統(tǒng)聚焦在流體流上，所述斑點的形狀基本為橢圓形，并且其具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，所述寬度小于穿過斑點的精細(xì)胞的頭部的長度。0010.OOl所述的設(shè)備，其中，所述精細(xì)胞的所述頭包括在流體流的方向上具有長度的DNA區(qū)域，并且所述光束斑點寬度小于所述DNA區(qū)域的長度。0011.OOl所述的設(shè)備，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元用于并行地同時分析多個流體流，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元包括所述外照射光學(xué)系統(tǒng)。0012.OOl所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴系統(tǒng)包括噴嘴，所述噴嘴:f支取向為沿向上、非豎直的方向引導(dǎo)所述流體流。0013.OOl所述的設(shè)備，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)僅包括用于檢測所述發(fā)射的一個光檢測器。0014.OOl所述的設(shè)備，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括具有噴嘴孔的噴嘴，以及從所述噴嘴孔處延伸的毛細(xì)管，所述流體流通過所述噴嘴孔被輸送到所述第一位置。0015.0014所述的設(shè)備，其中，所述第一位置位于所述毛細(xì)管的內(nèi)部。0016.0015所述的i殳備，其中，所迷光學(xué)系統(tǒng)與所述毛細(xì)管光學(xué)地連接從而將所述射束傳輸?shù)搅鬟^所述管的所述流中。PP.使用外照射光學(xué)系統(tǒng)分析精細(xì)胞的方法PP1.—種通過染色體DNA特征對動物精細(xì)胞進(jìn)行分類的方法，所述方法包括下列步驟(a)用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且在流到達(dá)所述第一位置之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向；(b)沿著在所述第一位置與所述流體流相交的射束軸線在向前的方向致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出；(c)檢測所述輻射的至少一些并且將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及(d)處理所述電信號和根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類。PP2.PP1所述的方法，還包括根據(jù)所述DNA特征分揀細(xì)胞。PP3.PP1所述的方法，還包括使用光破壞分揀處理以分揀所述細(xì)胞。PP4.PP1所述的方法，還包括使用流體切換分揀處理以分揀所述細(xì)胞。PP5.PP1所述的方法，還包括使用液滴分揀處理以分揀所述細(xì)胞。PP6.PP1所述的方法，其中，步驟(a)包括在20-40psi的壓力下以及以每秒30000至50000個精細(xì)胞的速度引導(dǎo)所述流體通過直徑為50至70樹:米的噴嘴孔。PP7.PP1所述的方法，還包括在精細(xì)胞穿過所述光束之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。PP8.PP7所述的方法，其中，所述精細(xì)胞具有頭部，所述頭部具有寬面和窄邊，并且其中，所述所需取向是射束擊打所述寬面的方向。PP9.PP8所述的方法，其中，所述流體輸送步驟包括通過噴嘴引導(dǎo)所述流，并且所述方法還包括使得所述噴嘴圍繞所述噴嘴的縱向軸線轉(zhuǎn)動以調(diào)節(jié)相對于射束軸線的所述所需細(xì)胞取向。PP10.PP1所述的方法還包括將所述射束以斑點的形式聚焦在流體流上，所述斑點的形狀基本為橢圓形，并且其具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，所述寬度小于穿過斑點的精細(xì)胞的頭部的長度。PP11.PP10所述的方法，其中，所述精細(xì)胞的所述頭包括在流體流的方向上具有長度的DNA區(qū)域，并且所述光束斑點寬度小于所述DNA區(qū)域的長度。PP12.PP1所述的方法，還包括引導(dǎo)所述發(fā)射的至少一些通過包括空間濾光器的過濾系統(tǒng)，所述空間濾光器具有長度和寬度尺寸的孔，至少一個所述尺寸可調(diào)節(jié)以改變所述孔的尺寸。PP13.PP1所述的方法，還包括沿向上的、非豎直軌跡引導(dǎo)所述流體流。PP14.PP1所述的方法還包括產(chǎn)生都包M細(xì)胞的多個獨立的流體流，并且對于每一個這種流體流，執(zhí)行步驟(a)、(b)、(c)和(d)。PP15.PP14所述的方法還包括使用^^共激光束照射所述流體流。PP16.PP14所述的方法，其中，所述流體流包含來自于公共流體供應(yīng)的流體。PP17.PP1所述的方法，其中，所述流體流通過毛細(xì)管被輸送到所述第一位置。OO.具有斜入射角外照射光學(xué)系統(tǒng)的顆粒分析器QQ1.用于分析包含在流體流中的顆粒的設(shè)備，包括用于沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射束的外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述射束軸線在相對于所述流體流的縱向軸的斜入射角下與所述流體流相交；電磁輻射的射束聚焦在流體流上的聚焦透鏡，所述顆粒適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的顆粒發(fā)出；以及在聚焦透鏡后面的光檢測器，所述光檢測器用于檢測和將來自于所述DNA區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成待處理的電信號以獲得與所述顆粒有關(guān)的信息。QQ2.QQ1所述的設(shè)備，其中，所述入射角在5至45度的范圍內(nèi)。QQ3.QQ1所述的設(shè)備，其中，所述入射角在15至30度的范圍內(nèi)。QQ4.QQ1所述的設(shè)備，其中，所述顆粒是細(xì)胞，并且所述信息涉及所述細(xì)胞的DNA特征。QQ5.QQ1所述的設(shè)備，其中，所述顆粒是精細(xì)胞，所述信息涉及所述細(xì)胞的X/Y染色體DNA特征。QQ6.QQ5所述的設(shè)備，還包括噴嘴系統(tǒng)，用于引導(dǎo)所述流體流并且用于在所述流穿過所述光束之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。QQ7.QQ1所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴系統(tǒng)包括噴嘴，并且所述射束在距離所述噴嘴不到l.Omm的位置處擊打所述流體流。QQ8.QQ1所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述信息分揀所述顆粒的液滴細(xì)胞分揀系統(tǒng)。QQ9.QQ1所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述信息分揀所述顆粒的光破壞細(xì)胞分揀系統(tǒng)。QQ10.QQ1所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述信息分揀所述顆粒的流體切換細(xì)胞分揀系統(tǒng)。RR.使用斜外照射光學(xué)系統(tǒng)分析顆粒的方法RR1.用于分析包含在流體流中的顆粒的方法，包括沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射束，所述射束軸線在相對于所述流體流的縱向軸的斜入射角下與所述流體流相交；以斑點的形式將電磁輻射的射束聚焦在流體流上，所述顆粒適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的顆粒發(fā)出；檢測和將來自于所述DNA區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示顆粒特征的電信號；以及處理所述電信號以獲得與所述特征有關(guān)的信息。RR2.RR1(增加與QQ2等相似的權(quán)利要求)SS.具有外照射光學(xué)系統(tǒng)和橢圓形斑點焦點的細(xì)胞分析器551.—種分析在流體流中的細(xì)胞的DNA特征的設(shè)備，所述每一個細(xì)胞包括在流體流的方向上具有一定長度的DNA區(qū)域，所述設(shè)備包括用于沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射束以使射束與所述流體流相交的外照射光學(xué)系統(tǒng)；所述光學(xué)系統(tǒng)包括在所述射束軸線上的聚焦透鏡，所述聚焦透鏡以基本橢圓形斑點的形式將射束聚焦在流體流上，并且所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度，所述細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出，包括從表示所述DNA特征的所述DNA區(qū)域發(fā)射；在聚焦透鏡后面的光檢測器，所述光檢測器用于檢測和將來自于所述DNA區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及用于處理所述電信號、確定所述DNA特征和根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞分類的系統(tǒng)。552.SS1所述的設(shè)備，其中，所述斑點寬度小于3.0微米。553.SS2所述的設(shè)備，其中，所述斑點長度大于80微米。303554.SS1所述的設(shè)備，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞并且所述DNA特征表示精細(xì)胞的性別。555.SS1所述的設(shè)備，還包括噴嘴系統(tǒng)，用于在所述流穿過所述光束之前在所述流中的細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。556.SS1所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述DNA特征分揀所述顆粒的液滴細(xì)胞分揀系統(tǒng)。557.SS1所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述DNA特征分揀所述顆粒的光石皮壞細(xì)胞分揀系統(tǒng)。558.SS1所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述DNA特征分揀所述顆粒的流體切換細(xì)胞分揀系統(tǒng)。559.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的設(shè)備，所述每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的方向上具有一定長度，所述設(shè)備包括用于以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射束聚焦在流體流上的光學(xué)系統(tǒng)，所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所述精細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從精細(xì)胞發(fā)出，包括從表示所述區(qū)域的染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)出的輻射；光檢測器，所述光檢測器用于檢測來自于所述染色體區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些和將來自于所述染色體區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體特征的電信號；以及用于處理所述電信號、確定所述染色體特征和根據(jù)所述染色體特征對精細(xì)胞分類的處理器。5510.SS9所述的設(shè)備，其中，所述染色體特征表示精細(xì)胞的性別。5511.SS10所述的設(shè)備，其中，所述精細(xì)胞是牛的精細(xì)胞。5512.SS10所述的設(shè)備，其中，所述染色體區(qū)域位于在核的縱向中心的任何一側(cè)上延伸不大于核長度的20%的核的區(qū)域內(nèi)。5513.SS10所述的設(shè)備，其中，所述染色體區(qū)域位于在核的縱向中心的任何一側(cè)上延伸不大于核長度的IO%-15%的核的區(qū)域內(nèi)。5514.SS9所述的設(shè)備，還包括模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，用于對隨時間變化的輸出進(jìn)行同步采樣并且提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示所述所述染色體特征；并且所述處理器包括分析和分類所述數(shù)字信息的數(shù)字信號處理器。5515.SS9所述的設(shè)備，其中，所述斑點寬度小于3.0微米。5516.SS15所述的設(shè)備，其中，所述斑點長度大于80微米。5517.SS9所述的設(shè)備，還包括噴嘴系統(tǒng)，用于在所述流穿過所述光束之前在所述流中的精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。5518.SS9所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述染色體DNA特征分揀所述精細(xì)胞的液滴細(xì)胞分揀系統(tǒng)。5519.SS9所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述染色體DNA特征分揀所述精細(xì)胞的光破壞細(xì)胞分揀系統(tǒng)。5520.SS9所述的設(shè)備，還包括用于根據(jù)所述染色體DNA特征分揀所迷精細(xì)胞的流體切換細(xì)胞分揀系統(tǒng)。TT.使用外照射光學(xué)系統(tǒng)和橢圓形斑點焦點分析細(xì)胞的方法TT1.一種分析在流體流中的細(xì)胞的DNA特征的方法，每一個細(xì)胞包括在流體流的方向上具有一定長度的DNA區(qū)域，所述方法包括沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電^F茲輻射束以使射束與所述流體流相交；以基本橢圓形斑點的形式將所述電磁輻射束聚焦在流體流上，并且所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度，所述細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出；檢測和將所述輻射發(fā)射轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及處理所述電信號，包括在從精子頭部的DNA區(qū)域發(fā)射輻射的電信號和精細(xì)胞的其它區(qū)域發(fā)射輻射的電信號之間的微分，以及根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞分類。TT2.TT1所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞。TT3.TT1所述的方法，還包括在所述流穿過所述光束之前在所述流中的細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。TT4.TT1所述的方法，還包括才艮據(jù)所述DNA特征液滴分揀所述細(xì)胞。TT5.TT1所述的方法，還包括4艮據(jù)所述DNA特征光-皮壞分揀所述細(xì)胞。TT6.TT1所述的方法，還包括根據(jù)所述DNA特征流體切換分揀所述細(xì)胞。TT7.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的方法，所述每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的方向上具有一定長度，所述方法包才舌用于以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所述精細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從精細(xì)胞發(fā)出，包括從表示所迷區(qū)域的染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)出的輻射；檢測來自于所述染色體區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些和將來自于所述染色體區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體特征的電信號；處理所述電信號、包括確定所述染色體特征；和根據(jù)所述染色體特征對精細(xì)胞分類。TT8.TT7所述的方法，其中，所述染色體特征表示精細(xì)胞的性別。TT9.TT8所述的方法，其中，所述精細(xì)胞是牛的精細(xì)胞。306TT10.TT8所述的方法，其中，所述染色體區(qū)域位于在核的縱向中心的任何一側(cè)上延伸不大于核長度的20%的核的區(qū)域內(nèi)。TT11.TT10所述的方法，其中，所述染色體區(qū)域位于在核的縱向中心的任何一側(cè)上延伸不大于核長度的IOo/。-15%的核的區(qū)域內(nèi)。TT12.TT7所述的方法，其中，所述電信號包括隨時間變化模擬輸出，述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示所述所述染色體特征；并且所述處理包括分析所述數(shù)字信息；其中所述分類包括分類所述模擬數(shù)字信息。TT13.TT7所述的方法，其中，所述斑點寬度小于3.0微米。TT14.TT13所述的方法，其中，所述斑點長度大于180微米。TT15.TT7所述的方法，還包括在所述流穿過所述光束之前在所述流中的精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。TT16.TT7所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征液滴分揀所述精細(xì)胞。TT17.TT7所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征光破壞分揀所述精細(xì)胞。TT18.TT7所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征流體切換分揀所述精細(xì)胞。UU.僅具有一個光檢測器的精細(xì)胞分揀器UU1.—種才艮據(jù)細(xì)胞的染色體DNA特征對精細(xì)胞進(jìn)行分類和分揀的設(shè)備，所述設(shè)備包括用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使流在第二位置分裂成液滴的噴嘴系統(tǒng)，所述噴嘴系統(tǒng)包括噴嘴，所述噴嘴具有這樣構(gòu)造的內(nèi)表面，即，能夠在細(xì)胞到達(dá)所述第一位置之前在細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向；光學(xué)系統(tǒng)，所述光學(xué)系統(tǒng)引導(dǎo)電磁輻射在所述第一位置與流體流相交以使流中的細(xì)胞穿過所述射束，導(dǎo)致電磁輻射從細(xì)胞發(fā)出；僅一個用于檢測所述輻射的至少一些并且將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成電信號的光檢測器；以及根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類和根據(jù)被包含在液滴中的細(xì)胞的分類分揀所述液滴的系統(tǒng)。UU2.UU1所述的設(shè)備，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)是外照射系統(tǒng)。VV.定向噴嘴VV1.—種用在通過染色體含量在流體流中分揀動物精細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的噴嘴，所述噴嘴包括具有內(nèi)表面和所述流體流適于流過的孔的噴嘴主體；所述流體流的速度逐漸增加的第一、第二和第三軸向錐形區(qū)域，所述區(qū)域中的至少兩個具有在不同方向上定向的基本為橢圓形的橫截面形狀以在所述流體流上施加扭力以趨于將精細(xì)胞帶到所需取向。VV2.VV1所述的噴嘴，其中，所述至少兩個區(qū)域中的一個的基本為橢圓形的橫截面形狀以相對于所述至少兩個區(qū)域中的另一個的基本為橢圓形的橫截面形狀成90度定向。VV3.VV2所述的噴嘴，其中，第一和第二區(qū)域的所述基本為橢圓形的橫截面形狀以基本相同方向定向以限定第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域，并且構(gòu)成第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的第三區(qū)域的所述基本為橢圃形的橫截面形狀以相對于第一和第二區(qū)域的所述基本為橢圓形的橫截面形狀成卯度定向。VV4.VV3所述的噴嘴，其中，所述第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域具有3.0-4.5mm的軸向長度，所述第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域具有3.5-5.0111111的軸向長度。VV5.VV1所述的噴嘴，其中，所述第三區(qū)域在42-48的角度下逐漸變細(xì)。VV6.VV1所述的噴嘴，其中，所有所述區(qū)域具有基本為橢圓形的橫截面形狀。VV7.VV1所述的噴嘴，其中，所述噴嘴主體具有其上帶有非反射涂層的外表面。VV8.VV1所述的噴嘴，還包括用于將所述噴嘴安裝在朝上的位置以沿著向上的軌跡引導(dǎo)所述流體流的安裝座。VV9.VV1所述的噴嘴，其中，所述噴嘴主體可在所述主體的縱向軸線上在所述安裝座上轉(zhuǎn)動。WW.定向精細(xì)胞的方法WW1.—種用于在流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中為動物精細(xì)胞定向的方法，所述方法包括將包含精細(xì)胞的流體引入到流體流中；在20至40psi的范圍內(nèi)的壓力下引導(dǎo)包含所述精細(xì)胞的流體流通過噴嘴，所述噴嘴具有一個或者多個用于在朝向噴嘴孔的下游方向上增加所述流體流的速度的錐形區(qū)域，所述噴嘴孔的直徑在50至70孩吏米的范圍內(nèi)，所述區(qū)域的一個或者多個具有基本為橢圓形的橫截面形狀以細(xì)胞以每秒30000至50000個精細(xì)胞的范圍內(nèi)的速度通過所述孔時在所述流體流上施加扭力以趨于將精細(xì)胞帶到所需取向。WW2.WW1所述的方法，其中，所述噴嘴具有三個或者多個用于4吏得流體流朝向噴嘴孔逐漸加速的錐形區(qū)域。WW3.WW2所述的方法，其中，所述噴嘴在所述三個或者多個錐形區(qū)域中具有由噴嘴的內(nèi)表面限定的兩個扭轉(zhuǎn)區(qū)域。WW4.WW3所述的方法，其中，所述噴嘴具有通過所述孔的流動軸，所述噴嘴的內(nèi)表面的至少一些具有基本為橢圓形的橫截面形狀，它們圍繞所述軸線相對于彼此轉(zhuǎn)動。WW5.WW1所述的方法，還包括沿向上、非豎直軌跡引導(dǎo)所述流體流。309WW6.WW1所述的方法，還包括在引導(dǎo)所述流的同時使得所述噴嘴主體在所述主體的中央縱向軸上轉(zhuǎn)動。XX.具有向上指示噴嘴的顆粒分揀器XXI.—種用于使用流式細(xì)胞術(shù)分揀顆粒的設(shè)備，包括用于沿向上、非豎直軌跡通過噴嘴孔輸送包含所述顆粒的流體流的噴嘴系統(tǒng)；光學(xué)系統(tǒng)，所述光學(xué)系統(tǒng)引導(dǎo)電磁輻射的射束在所述第一位置與流體流相交，導(dǎo)致電磁輻射從顆粒中發(fā)出；用于檢測所述輻射的至少一些并且將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所迷顆粒特征的電信號的光檢測器；用于處理所述電信號并根據(jù)所述特征分類所述顆粒的處理器；以及用于根據(jù)所述顆粒的分類分揀所述顆粒的系統(tǒng)。XX2.XX1所述的設(shè)備，其中，所述分揀系統(tǒng)包括液滴分揀系統(tǒng)。XX3.XX1所述的設(shè)備，其中，所述分揀系統(tǒng)包括光破壞分揀系統(tǒng)。XX4.XX1所述的設(shè)備，其中，所述分揀系統(tǒng)包括流體切換分揀系統(tǒng)。XX5.XX1所述的設(shè)備，其中，所述噴嘴系統(tǒng)包括其上具有非反射涂層的噴嘴。XX6.XX1所述的設(shè)備，其中，噴嘴孔處的所述向上的軌跡是處于偏離水平方向的5-85度范圍內(nèi)的角度下。XX7.XX1所述的設(shè)備，其中，噴嘴孔處的所述向上的軌跡是處于偏離水平方向的15-75度范圍內(nèi)的角度下。XX8.XX1所述的設(shè)備，其中，噴嘴孔處的所述向上的軌跡是處于偏離水平方向的30-65度范圍內(nèi)的角度下。XX9.XX1所述的設(shè)備，其中，噴嘴孔處的所述向上的軌跡是處于偏離水平方向的45-60度范圍內(nèi)的角度下。YY.使用向上指示噴嘴分揀顆粒的方法YY1.—種使用流式細(xì)胞術(shù)分揀顆粒的設(shè)備，包括沿向上、非豎直軌跡通過噴嘴孔將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置；引導(dǎo)電磁輻射的射束在所述第一位置與流體流相交，導(dǎo)致電磁輻射從顆粒中發(fā)出；檢測所述輻射的至少一些并且將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述顆粒特征的電信號；處理所述電信號并根據(jù)所述特征分類所述顆粒；以及根據(jù)所述顆粒的分類分揀所述顆粒。YY2.YY1所述的方法，其中，所述分揀步驟包括使用液滴分揀處理進(jìn)行分揀。YY3.YY1所述的方法，其中，所述分揀步驟包括使用光破壞分揀處理進(jìn)行分揀。YY4.YY1所述的方法，其中，所述分揀步驟包括使用流體切換分揀處理進(jìn)行分揀。ZZ.處理參數(shù)ZZ1.—種使用流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備從細(xì)胞的混合物中分離所需細(xì)胞群組的方法，所述群組具有光線可檢測特征，所述方法包括在20至40psi的范圍內(nèi)的壓力下引導(dǎo)包含所述細(xì)胞的流體流以每秒30000至50000個細(xì)胞的范圍內(nèi)的細(xì)胞速度通過噴嘴孔，所述噴嘴孔的直徑在50至70微米的范圍內(nèi)；使得所述流體流在20到lOOKHz的頻率下分裂為液滴；以及使用流式細(xì)胞術(shù)分揀所述液滴以便于從細(xì)胞的混合物中分離所述所需細(xì)胞群組。ZZ2.ZZ1所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞。ZZ3.ZZ2所述的方法，其中，所述所需細(xì)胞群組包含活X細(xì)胞。AAA.商業(yè)方法AAA1.—種包括處理其中具有細(xì)胞的精液的經(jīng)商方法，所述方法包括獲得精液的供應(yīng)；使用可編程機(jī)器執(zhí)行多個集成流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括(a)接受精液的所述供應(yīng)；(b)形成包含所述細(xì)胞的多個流；以及(c)將所述細(xì)胞分揀于具有特征A的第一細(xì)胞群組和包含具有特征B的第二細(xì)胞群組中；以及分配第一或第二群組以用于商業(yè)用途。AAA2.AAA1所述的方法，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞，并且特征A表示活X精細(xì)月包。AAA3.AAA2所述的方法，其中，所述精液為牛精液，并且作為用在人工受精牛方面出售所述第一群組。AAA4.AAA3所述的方法，其中，所述可編程機(jī)器用于并行地執(zhí)行所述操作。BBB.商業(yè)方法BBB1.—種包括處理其中具有細(xì)胞的精液樣本的經(jīng)商方法，所述方法包括獲得精液的供應(yīng)；使用可編程機(jī)器執(zhí)行多個集成流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括(a)接受精液的所述供應(yīng)；以及(b)從所述供應(yīng)的最初部分中將所述細(xì)胞分揀于不同群組中，所述群組包括包含具有特征A細(xì)胞的第一群組和包含具有特征B細(xì)胞的第二群組；以及僅在從所述最初部分中最初分揀的細(xì)胞滿足或超過預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)時，從所述供應(yīng)的剩余部分中將所述細(xì)胞分揀于不同組中，所述組包括包含具有特征A細(xì)胞的第一組和具有特征B細(xì)胞的第二組。312BBB2.BBB1所述的方法，還包括分配第一或第二群組以用于商業(yè)用途。BBB3.BBB1所述的方法，其中，所述預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)是具有特征A或特征B的細(xì)胞的最小回收率或者所述群組中至少一個的最小純度。BBB4.BBB1所述的方法，還包括并行地執(zhí)行所述多個集成操作流式細(xì)胞術(shù)。CCC.商業(yè)方法CCC1.一種包括處理其中具有細(xì)胞的精液樣本的經(jīng)商方法，所述方法包括獲得精液的供應(yīng)；使用機(jī)器執(zhí)行多個集成流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括(a)接受精液的所述供應(yīng)；以及(b)從所述供應(yīng)的第一部分中將所述細(xì)胞分揀于不同群組中，所述群組包括包含具有特征A細(xì)胞的第一群組和包含具有特征B細(xì)胞的第二群組，以及從所述供應(yīng)的第二部分中將所述細(xì)胞分揀于不同群組中，所述群組包括包含具有特征A細(xì)胞的第一群組和包含具有特征B細(xì)胞的第二群組，將第一部分的一個群組與第二部分的一個群組相混合以獲得混合群組。CCC2.CCC1所述的方法，其中，第一部分的第一群組具有不可接受的純度，第二部分的第一群組具有可接受的純度，并且混合群組具有可接受的純度。DDD.液滴干擾分揀W/外照射DDD1.—種用于根據(jù)染色體DNA特征分揀精細(xì)胞的液滴干擾系統(tǒng)，包括流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，用于將包含所述細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所選擇的流體流的流部分在第二位置處被來自于液滴干擾流體流的液滴擊打，從而將所選擇的部分和包含于其中的細(xì)胞與所述流體流相分離，在所述流部分中的細(xì)胞的分類分揀所述流部分，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致電磁輻射在向后的方向上沿著所述射束軸線從被引導(dǎo)的細(xì)胞發(fā)出。DDD2.DDD1所述的系統(tǒng)，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)還包括所述聚焦透鏡后部的所述射束軸線上的光檢測器，用于檢測和將所述輻射發(fā)射轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號。DDD3.DDD1所述的系統(tǒng)，其中，所述細(xì)胞是精細(xì)胞并且所述DNA特征包括所述精細(xì)胞的性染色體含量。DDD4.DDD3所述的系統(tǒng)，其中，所述射束在所述第一位置處以斑點的形式被所述光學(xué)系統(tǒng)聚焦在流體流上，所述斑點的形狀基本為橢圓形，并且其具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，所述寬度小于穿過斑點的精細(xì)胞的頭部的長度。DDD5.DDD4所述的系統(tǒng)，其中，所述精細(xì)胞的頭部包括具有在流體流的方向上的長度的DNA區(qū)域，并且所述光束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度。DDD6.DDD1所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備還包括噴嘴，所述噴嘴具有這樣構(gòu)造的內(nèi)表面，即，能夠在細(xì)胞穿過所述光束之前在細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。DDD7.DDD6所述的系統(tǒng)，其中，所述噴嘴可圍繞所述噴嘴的縱向軸線轉(zhuǎn)動以調(diào)節(jié)相對于射束軸線的所述所需顆粒取向。DDD8.DDD1所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括用于同時分析多個流體流的多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每個流式細(xì)胞術(shù)單元都包括所述外照射光學(xué)系統(tǒng)。DDD9.DDD1所述的系統(tǒng)，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)僅包括一個用于檢測所述發(fā)射的光檢測器。DDD10.DDD1所述的系統(tǒng)，其中，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括具有噴嘴孔的噴嘴，以及從所述噴嘴孔處延伸的毛細(xì)管，所述流體流通過所述噴嘴孔被輸送到所述第一位置。DDD11.DDD10所述的系統(tǒng)，其中，所述第一位置位于所述毛細(xì)管的內(nèi)部。DDD12.DDD11所述的系統(tǒng)，其中，所述光學(xué)系統(tǒng)與所述毛細(xì)管光學(xué)地連接從而將所述射束傳輸?shù)搅鬟^所述管的所述流中。A'.^氐溫貯藏a.(加入低溫保護(hù)劑之后冷卻)Al'.—種低溫貯藏精細(xì)胞的方法，包括以下步驟將低溫保護(hù)劑加入到一定量精細(xì)胞中；將所述量的精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑冷卻到約0-8。C范圍內(nèi)的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40。C的溫度。A2'.Al'所述的方法，其中，所述保溫溫度在約2-6。C范圍內(nèi)。A3'.Al'所述的方法，其中，所述保溫溫度在約4-5。C范圍內(nèi)。A4'.Al'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入丙三醇。A5'.Al'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入約6%的丙三醇(v/v)。A6'.Al'所述的方法，其中，所述保溫周期小于40分鐘。A7'.Al'所述的方法，其中，所述保溫周期為約30分鐘。A8'.Al'所述的方法，其中，所述冷卻步驟包括在基本恒定的冷卻速度下冷卻所述一定量精細(xì)胞。A9'.A8'所述的方法，其中，所述冷卻速度被選擇得使得所述一定量精細(xì)胞在約卯分鐘內(nèi)從高于玻璃轉(zhuǎn)換溫度的溫度冷卻到保溫溫度，在所述玻璃轉(zhuǎn)換溫度下所述精細(xì)胞會受到冷沖擊的損害。AIO'.A8'所述的方法，其中，所述基本恒定的冷卻速度在每分鐘0.1-0.3'。的范圍內(nèi)。All'.A8'所述的方法，其中，所述基本恒定的冷卻速度在每分鐘0.15-0.25<€的范圍內(nèi)。A12'.All'所述的方法，其中，所述保溫周期的長度小于40分鐘。A13'.Al'所述的方法，其中，使用可編程冷凍器執(zhí)行所述冷卻步驟以便于在可編程速度下冷卻所述精細(xì)胞。A14'.A13'所述的方法，其中，所述保溫周期的長度小于40分鐘。A15'.A14'所述的方法，其中，編程的冷卻速度包括約每分鐘0.2。(的恒定冷卻速度。A16'，Al'所述的方法，其中，過度冷卻所述一定量精細(xì)胞的步驟包括在第一冷卻速度下將精細(xì)胞冷卻到接近臨界溫度區(qū)的溫度，在所述臨界溫度區(qū)冰晶形成和滲透壓力方面的改變損害精細(xì)胞，以及在比第一冷卻速度快的第二冷卻速度下將精細(xì)胞冷卻到低于-30。C的溫度。A17'.A16'所述的方法，其中，所述第一冷卻速度在每分鐘1-5'C的范圍內(nèi)。A18'.A16'所述的方法，其中，所述第一冷卻速度在每分鐘2-4。C的范圍內(nèi)。A19'.A16'所述的方法，其中，所述第一冷卻速度為每分鐘3。C。A20'.A16'所述的方法，其中，所述第二冷卻速度在每分鐘8-12。C的范圍內(nèi)。A21'.A16'所述的方法，其中，所述第二冷卻速度約為每分鐘10。C。A22'.A16'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞在所述第一冷卻速度下凈皮冷卻到約-15。C的溫度下。A23'.A22'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞在所述第二冷卻速度下從約-15。C被冷卻到約-80。C的溫度下。A24'.A16'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞在所述第一冷卻速度下被冷卻到約-18。C的溫度下。A25'.A24'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞在所述第二冷卻速度下從約-18。C被冷卻到約-80。C的溫度下。A26'.A16'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞在所述第一速度和所述第二速度下在可編程冷凍器中被冷卻。A27'.Al'所述的方法，其中，向一定量精細(xì)胞中加入低溫保護(hù)劑的步驟包括向鞘流中加入低溫保護(hù)劑并且使用用于分析精細(xì)胞的流式細(xì)胞器中的所述鞘流。A28'.A27'所述的方法，還包括使用所述流式細(xì)胞器以便于將所述精細(xì)胞分揀于具有所需特征的精細(xì)胞群組中以獲得所述一定量的精細(xì)胞的步驟。A29'.Al'所述的方法，其中，冷卻所述一定量的精細(xì)胞、將所述精細(xì)胞保持在保溫溫度下以及過度冷卻所述一定量的精細(xì)胞的步驟全部在小于220分鐘內(nèi)完成。A30'.Al'所述的方法，其中，冷卻所述一定量的精細(xì)胞、將所述精細(xì)胞保持在保溫溫度下以及過度冷卻所述一定量的精細(xì)胞的步驟全部在小于190分鐘內(nèi)完成。A31'.Al'所述的方法，其中，冷卻所述一定量的精細(xì)胞、將所述精細(xì)胞保持在保溫溫度下以及過度冷卻所述一定量的精細(xì)胞的步驟全部在小于150分鐘內(nèi)完成。A32'.Al'所述的方法，還包括在已將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞中之后將所述一定量的精細(xì)胞放入到人工受精麥桿中的步驟。A33'.Al'所述的方法，其中，所述一定量的精細(xì)胞構(gòu)成第一量精細(xì)胞，所述方法還包括以下步驟從流式細(xì)胞器中中獲得包含多于500xl(^精細(xì)胞的已分揀精細(xì)胞群組，從而獲得包含所述第一量精細(xì)胞的多量的精細(xì)胞、317將所述多量的精細(xì)胞中的每個放入到人工受精麥桿中、以及在批處理中在所述多量的精細(xì)胞中的每個上執(zhí)行冷卻、保持和過度冷卻的步驟以獲得一批包含低溫儲藏精細(xì)胞的人工受精麥桿。A34'.A33'所述的方法，其中，所述分揀精細(xì)胞群組包含多于800xl06精細(xì)胞。A35'.A33'所述的方法，其中，所述方法的步驟在小于240分鐘內(nèi)完成。A36'.A33'所述的方法，其中，所述方法的步驟在小于210分鐘內(nèi)完成。A37'.A33'所述的方法，其中，所述方法的步驟在小于170分鐘內(nèi)完成。A38'.Al'所述的方法，還包括在所述冷卻步驟之前用DNA選擇性熒光染料為所述一定量的精細(xì)胞著色。A39'.A38'所述的方法，其中，所述DNA選擇性熒光染料包括Hoechst33342。A40'.A39'所述的方法，其中，為所述一定量的精細(xì)胞著色的步驟包括在超過40。C的溫度下在包含Hoechst33342的溶液中培育所述一定量的精細(xì)胞一定時間周期。b.冷卻溫度分揀A41'.—種低溫貯藏精細(xì)胞的方法，包括以下步驟將一定量的精細(xì)胞冷卻到約0-8。C范圍內(nèi)的保溫溫度；向所述一定量的精細(xì)胞中加入低溫保護(hù)劑；以及使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間。A42'.A41'所述的方法，其中，所述周期在約30分鐘到小于60分鐘的范圍內(nèi)。A43'.A41'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入丙三醇。A44'.A41'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入約7%的丙三醇(v/v)。B'.具有擋板的噴嘴Bl'.—種用于分析在流體流中的顆粒的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的噴嘴，所述流體流包括包圍包含所述顆粒的芯流的鞘流，所述噴嘴包括噴嘴，所述噴嘴具有為所述流體流限定流動路徑的內(nèi)表面和用于使得流體流從噴嘴排出的孔；以及在噴嘴中的在所述孔上游位于所述流動路徑中的擋板，所述擋板能夠在流體流沿著所述流動路徑移動時使流體流偏轉(zhuǎn)，所述擋板和噴嘴的內(nèi)表面被構(gòu)成得適于當(dāng)顆粒離開孔時使得顆粒處于所需取向。B2'，Bl'所述的噴嘴，其中，所述擋板被構(gòu)成得用于遠(yuǎn)離噴嘴的中心縱向軸線和朝向噴嘴的所述內(nèi)表面偏轉(zhuǎn)所述芯流。B3'.Bl'所述的噴嘴，其中，所述噴嘴具有位于所述擋板上游的第一橫截面流動區(qū)域和所述擋板處的不同于所述第一橫截面流動區(qū)域的第二橫截面流動區(qū)域。B4'.B3'所述的噴嘴，其中，所述第二橫截面流動區(qū)域小于所述第一橫截面流動區(qū)域。B5'.B3'所述的噴嘴，其中，所述第一和第二^f黃截面流動區(qū)域具有不同形狀。B6'，B5'所述的噴嘴，其中，所述第二橫截面流動區(qū)域通常為半圓形的。B7'，Bl'所述的噴嘴，其中，所述噴嘴的所述內(nèi)表面適于在所述擋板的下游限定至少兩個軸向錐形區(qū)域，所述錐形區(qū)域用于在朝向噴嘴孔的下游方向上逐漸增加所述流體流的速度。B8'.B7'所述的噴嘴，其中，所述擋板朝向噴嘴的所述內(nèi)表面中限定所述至少兩個軸向錐形區(qū)域中的至少一個的一部分偏轉(zhuǎn)所述芯流。319B9'.B8'所述的噴嘴，其中，所述至少兩個軸向錐形區(qū)域具有在不同方向上定向的基本為橢圓形的橫截面形狀以在所述流體流上施加扭力以趨于將顆粒帶到所需取向。BIO'.B9'所述的噴嘴，其中，所述至少兩個區(qū)域中一個的所述基本為橢圓形的^f黃截面形狀相對于所述至少兩個區(qū)域中另一個的所述基本為橢圓形的橫截面形狀在約卯度下取向。Bll'.Bl'所述的噴嘴，其中，所述噴嘴具有其上帶有非反射涂層的外表面。B12'.Bl'所述的噴嘴，還包括用于將所述噴嘴安裝在朝上的位置以沿著向上的軌跡引導(dǎo)所述流體流的安裝座。B13'.B13'所述的噴嘴，其中，所述噴嘴可在所述噴嘴的縱向軸線上在所述安裝座上轉(zhuǎn)動。B14'.Bl'所述的噴嘴，其中，所述擋板包括用于偏轉(zhuǎn)所述流體流的擋板元件和用于將所述擋板元件固定在所述噴嘴中的固定位置中的固定器。B15'.B14'所述的噴嘴，其中，所述擋板元件包括擋板。B16'.B15'所述的噴嘴，其中，所述擋板具有基本相對于所述流體流橫向延伸的第一支腳和基本沿所述流體流的方向延伸的第二支腳。B17'.B15'所述的噴嘴，其中，所述固定器包括容納所述擋板并且布置在所述噴嘴中的基本圓柱形的外殼。B18'.B16'所述的噴嘴，其中，所述噴嘴的所述內(nèi)表面在所述擋板的下游具有基本為橢圓形橫截面的區(qū)域，并且所述擋板元件的第一和第二支腳沿基本與所述基本為橢圓形橫截面的長軸平行的線相交。B19'，B16'所述的噴嘴，其中，所述噴嘴的所述內(nèi)表面在所述擋板的下游具有基本為橢圓形橫截面的區(qū)域，并且所述擋板元件的第一和第二支腳沿基本與所述基本為橢圓形橫截面的長軸垂直的線相交。B20'.B15'所述的噴嘴，其中，所述擋板基本垂直于所述噴嘴的縱向軸。B21'.B20'所述的噴嘴，其中，所述擋板具有半圓形形狀。B22'，B20'所述的噴嘴，其中，所述擋板具有半橢圓形形狀。B23'.B20'所述的噴嘴，其中，所述噴嘴的內(nèi)表面被構(gòu)成得限定出側(cè)翼，并且所述固定器包括能夠?qū)⑺鰮醢鍓褐圃谒鰝?cè)翼上以將所述擋板保持在所需位置中的O形密封件件。B24'.B20'所述的方法，其中，所述擋板固定器將所述擋板保持在位置中，其中所述擋板橫斷所述噴嘴的縱向軸。B25'.Bl'所述的噴嘴，其中，所述顆粒包括精細(xì)胞。C'.具有擋板的噴嘴(方法)Cl'.一種用于在流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中為顆粒定向的方法，所述方法包括使得具有包含所述顆粒的樣本流體的芯流和包圍所述芯流的鞘流體的鞘流的流體流流過噴嘴，所述噴嘴具有從噴嘴的上游部分到位于噴嘴的下游端的孔減縮的內(nèi)表面；以及當(dāng)芯流流過噴嘴時偏轉(zhuǎn)芯流以使得芯流中的顆粒受到流體動力的作用趨于使得顆粒呈現(xiàn)所需取向。C2'.Cl'所述的方法，其中，所述噴嘴具有縱向軸線，偏轉(zhuǎn)芯流的步驟包括遠(yuǎn)離縱向軸線朝向所述內(nèi)表面偏轉(zhuǎn)所述芯流。C3'.Cl'所述的方法，其中，所述噴嘴具有縱向軸線，偏轉(zhuǎn)芯流路徑的步驟包括將芯流從通常與縱向軸線共中心的路徑中偏轉(zhuǎn)到偏轉(zhuǎn)路徑，至少一部分偏轉(zhuǎn)路徑遠(yuǎn)離所述噴嘴的縱向軸線。C4'.Cl'所述的方法，其中，所述噴嘴具有縱向軸線，所述方法還包括在偏離縱向軸線的位置處將所述芯流引入到所述鞘流中。C5'.Cl'所述的方法，其中，所述偏轉(zhuǎn)步驟包括利用擋板偏轉(zhuǎn)芯流。C6'.Cl'所述的方法，其中，所述偏轉(zhuǎn)步驟包括利用擋板偏轉(zhuǎn)芯流并且使用擋板固定器將所述擋板保持在所述噴嘴中的位置中。C7'.Cl'所述的方法，其中，所述擋板橫斷所述噴嘴的縱向軸。C8'.Cl'所述的方法，其中，所述噴嘴具有形狀適于限定至少一個使得顆粒受到定向流體動力的作用的扭轉(zhuǎn)區(qū)域的內(nèi)表面。C9'.C8'所述的方法，其中，所述至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域包括具有基本為橢圓形橫截面的漸縮區(qū)域。CIO'.C8'所述的方法，其中，所述內(nèi)表面,皮構(gòu)成得用于限定多個扭轉(zhuǎn)區(qū)域。Cll'.C10'所述的方法，其中，每個所述多個扭轉(zhuǎn)區(qū)域都包括具有基本為橢圓形橫截面的噴嘴的漸縮區(qū)域。C12'.Cll'所述的方法，其中，第一所述多個扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面沿與第二所述多個扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面不同的方向取向。C13'.Cl'所述的方法，其中，所述偏轉(zhuǎn)芯流的步驟包括利用擋板偏轉(zhuǎn)芯流，所述方法還包括使得流體流流過第一橫截面流動區(qū)域之后從第一橫截面流動區(qū)域下游流過第二橫截面流動區(qū)域的步驟，其中所述第一和第二橫截面流動區(qū)域具有不同的形狀。C14'.Cl'所述的方法，其中，第二橫截面流動區(qū)域的形狀小于第一橫截面流動區(qū)域。D'.具有不對稱注射針的噴嘴(設(shè)備)Dl'.—種用于分析在流體流中的顆粒的流式細(xì)胞計數(shù)器中的噴嘴系統(tǒng)，所述流體流包括包圍包含所述顆粒的芯流的鞘流，所述噴嘴系統(tǒng)包括具有縱向軸線的噴嘴、限定所述流體流的流動路徑的內(nèi)表面、以及用于使得所述流體流從所述噴嘴中排出的所述噴嘴下游端處的孔，所述內(nèi)表面的形狀被構(gòu)成得用于限定至少一個包括具有基本為橢圓形橫截面的軸向漸縮區(qū)域的扭轉(zhuǎn)區(qū)域，用于當(dāng)所述流體流朝向所述孔流過扭轉(zhuǎn)區(qū)域時使得顆粒處于所需取向；以及從顆粒源到噴嘴的導(dǎo)管，所述導(dǎo)管被布置得在相對于所述噴嘴的縱向軸線偏離的位置處將所述芯流引入到噴嘴中。D2'.Dl'所述的噴嘴系統(tǒng)，其中，所述位置為所述至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域的上游。D3'.Dl'所述的噴嘴系統(tǒng)，其中，所述至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域構(gòu)成第一扭轉(zhuǎn)，所述噴嘴還包括第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域。D4'.D3'所述的噴嘴系統(tǒng)，其中，所述位置為第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的上游和第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的至少一部分。D5'.D3'所述的噴嘴系統(tǒng)，其中，所述第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域包括具有基本為橢圓形橫截面的噴嘴的軸向漸縮區(qū)域。D6'.D5'所述的噴嘴系統(tǒng)，其中，所述第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面的長軸沿不同于所述第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面的長軸的方向取向。D7'.D6'所述的噴嘴系統(tǒng)，其中，所述第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面在相對于所述第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面約卯度的角度下取向。D8'.D7'所述的噴嘴系統(tǒng)，其中，所述位置為第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的上游和第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的至少一部分。E'.不對稱樣本引入(方法)El'.—種用于在流式細(xì)胞計數(shù)器中取向顆粒的方法，包括使得鞘流流過具有縱向軸線的噴嘴和包括具有基本為橢圓形橫截面的噴嘴的軸向漸縮區(qū)域的至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域；以及在偏離所述縱向軸線的位置處將包含顆粒的芯流體流引入到鞘流體流中以便于鞘流體流和芯流體流流過至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域。E2'.El'所述的方法，其中，使得流體流流過至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域的步驟包括使得芯流沿流動路徑流動，一部分所述流動路徑偏離所述噴嘴的縱向軸線，并且在所述顆粒沿所述流動路徑的所述偏離部分移動的同時使得所述顆粒受到所述扭轉(zhuǎn)區(qū)域所產(chǎn)生的流體動力定向力。E3'.El'所述的方法，其中，所述至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域構(gòu)成第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域，所述方法還包括使得所述鞘流體流和芯流體流流過第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域以便于沿所需定向取向所述顆粒的步驟。E4'.E3'所述的方法，其中，所述第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域包括具有基本為橢圓形橫截面區(qū)域的噴嘴中的漸縮區(qū)域。E5'.E4'所述的方法，其中，所述第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面區(qū)域的長軸沿不同于所述第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面區(qū)域的長軸的方向取向。E6'.E4'所述的方法，其中，所述第一扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面區(qū)域垂直于于所述第二扭轉(zhuǎn)區(qū)域的基本為橢圓形橫截面區(qū)域。F'.通過二級離心分離進(jìn)行的已分揀精細(xì)胞的濃縮Fl'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟^性動物收集精細(xì)胞；基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀到多個精細(xì)胞群組中的一個中；從所述多個精細(xì)胞群組中的一個獲得具有所需DNA特征的一定量精細(xì)胞，所述量的精細(xì)胞被包含在一定量的收集流體中；使得所述一定量的收集流體受到第一離心分離處理以形成第一精細(xì)胞丸和覆蓋第一丸的上層清液；使得第一丸與上層清液分離；使得上層清液經(jīng)受附加的離心分離以在第一離心分離后形成保留在上層清液中的第二精細(xì)胞丸；以及將一定量的再懸浮流體加入到第一和第二丸以獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的懸浮液，選擇所述再懸浮流體的量以在懸浮液中形成所需濃度的精細(xì)胞。F2'.Fl'所述的方法，其中，所述第一離心分離處理包括在足以產(chǎn)生550-800g范圍內(nèi)的重力的速度下進(jìn)行離心分離。F3'.F2'所述的方法，其中，所述第一離心分離處理包括在所述速度下對所述量的收集流體進(jìn)4亍7-10分鐘的周期離心分離。F4'.Fl'所述的方法，其中，所述一個或多個特定DNA特征包括所述精細(xì)胞是否包含X或者Y性別染色體。F5'.Fl'所述的方法，還包括獲得具有所需DNA特征的多個量的精細(xì)胞以及通過商業(yè)流通系統(tǒng)分配所述多個量的精細(xì)胞。G'.利用^f氐壓力的過濾Gl'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；分揀精細(xì)胞以獲得具有所需特征的一定量的精細(xì)胞，所述一定量的被分揀的精細(xì)胞被包含在其中具有精細(xì)胞第一濃度的第一體積的流體中；以及使得精細(xì)胞經(jīng)受濃縮步驟，其中所述精細(xì)胞的濃度增加到大于所述第一濃度的第二濃度；其中，所述濃縮步驟包括使得所述第一體積的流體的至少一部分流過第一過濾器，其中作用在第一過濾器上的壓力差小于20英寸汞柱，所述過濾器具有足夠小以阻止所述精細(xì)胞通過的過濾孔，并且保持包含所述精細(xì)胞的第二體積的未過濾的流體。G2'.Gl'所述的方法，其中，在所述流動期間作用在過濾器上的壓力差基本是恒定的。G3'.Gl'所述的方法，還包括在一定周期內(nèi)間歇地減小壓力差之后基本恢復(fù)壓力差的步驟。G4'.G3'所述的方法，其中，減小壓力差的步驟包括將所述壓力差減小到零的步驟。G5'.Gl'所述的方法，其中，所述過濾孔具有0.2-1.0微米范圍內(nèi)的尺寸。G6'.Gl'所述的方法，其中，約所述第一體積的流體的80%到90%流過第一過濾器。G7'.Gl'所述的方法，其中，所述第二體積的未過濾流體足以避免所述精細(xì)胞粘結(jié)在所述第一過濾器上。G8'，Gl'所述的方法，還包括4吏得所述第二體積的未過濾流體的至少一部分流過具有用以抑制所述精細(xì)胞通過的足夠小的過濾孔的第二過濾器、保留包含所述精細(xì)胞的第三體積的未過濾流體、以及用再懸浮流體沖刷所述第二過濾器以從第二過濾器上去除精細(xì)胞，以將所述第三體積達(dá)到所述第二濃度。G9'.G8'所述的方法，其中，約所述第二體積的未過濾流體的80%流過第二過濾器。GIO'.G8'所述的方法，其中，所述第三體積的未過濾流體足以避免所述精細(xì)胞粘結(jié)在所述第二過濾器上。Gll'.G8'所述的方法，其中，所述第二過濾器是具有50-500微米的范圍內(nèi)厚度的薄過濾器。G12'.G8'所述的方法，其中，所述第二過濾器是具有75-250微米的范圍內(nèi)厚度的薄過濾器。G13'.G8'所述的方法，其中，所述第二過濾器是具有100-150微米的范圍內(nèi)厚度的薄過濾器。G14'，Gl'所述的方法，其中，所述第一過濾器是具有50-500微米的范圍內(nèi)厚度的薄過濾器。G15'.Gl'所述的方法，其中，所述第一過濾器是具有75-250微米的范圍內(nèi)厚度的薄過濾器。G16'.Gl'所述的方法，其中，所述第一過濾器是具有100-150微米的范圍內(nèi)厚度的薄過濾器。H'.總溫度控制(高溫著色)Hl'.—種用于處理精細(xì)胞的方法，包括以下步驟從雄性動物收集包含精細(xì)胞的精液樣本；將所述精液樣本輸送到精細(xì)胞處理廠；在精液上執(zhí)行初始質(zhì)量控制檢查；利用DNA選擇性熒光染料使得所述精液樣本中的精細(xì)胞著色，通過將所述精細(xì)胞暴露于所述DNA選擇性熒光染料以形成著色混合物，并使得所述著色混合物經(jīng)受約至少40°C的溫度而使得所述DNA選擇性熒光染料選擇性地粘結(jié)于精細(xì)胞的DNA上；使用流式細(xì)胞計數(shù)器根據(jù)特定DNA特征分揀精細(xì)胞；獲得懸浮在一定體積流體中具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；通過執(zhí)行濃度處理調(diào)節(jié)所述懸浮液中精細(xì)胞的濃度以獲得所需濃度；以及使得所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻。H2'.Hl'所述的方法，還包括從收集所述精細(xì)胞到開始著色步驟的時間內(nèi)將精細(xì)胞的溫度保持在20-37。C的范圍內(nèi)并且在所述時間內(nèi)隔離所述精細(xì)胞以避免出現(xiàn)溫度波動。H3'.H2'所述的方法，其中，隔離所述精細(xì)胞的步驟包括在輸送到處理廠期間將精液樣本保存在絕熱容器中。H4'.Hl'所述的方法，還包括在將所述著色精細(xì)胞引入到所述流式細(xì)胞計數(shù)器中以便于從分揀步驟開始之前的著色期間所述精細(xì)胞所達(dá)到的溫度下冷卻所述精細(xì)胞之前，將所述著色精細(xì)胞;^文置在具有18-25。C范圍內(nèi)的溫度環(huán)境中的步驟。H5'.Hl'所述的方法，其中，所述過度冷卻步驟包括將精細(xì)胞從超過20。C的溫度冷卻到0-8。C范圍內(nèi)的溫度下，并且在所述精細(xì)胞的溫度已被冷卻到20。C下之前向所述精細(xì)胞中加入蛋白質(zhì)源和低溫保護(hù)劑。H6'.H5'所述的方法，還包括使用可編程冷凍器以便于(a)將所述精細(xì)胞冷卻到約0-8°C范圍內(nèi)的保溫溫度；(b)使得所述精細(xì)胞在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間以允許精細(xì)胞基本與所述低溫保護(hù)劑均衡；(c)在第一冷卻速度下將所述精細(xì)胞冷卻到接近臨界溫度區(qū)的溫度下，在所述臨界溫度區(qū)冰晶形成和滲透壓力方面的改變損害精細(xì)胞，以及(d)在比第一冷卻速度快的第二冷卻速度下通過所述臨界溫度區(qū)冷卻精細(xì)胞。H7'.H6'所述的方法，還包括在所述第一冷卻速度下將所述精細(xì)胞從保溫溫度冷卻到約-15。C。H8'.H7'所述的方法，還包括在所述第二冷卻速度下將所述精細(xì)胞從約-18。C冷卻到約-30。C。H9'.H6'所述的方法，還包括在所述第一冷卻速度下將所述精細(xì)胞從保溫溫度冷卻到約-18*€。HIO'.H6'所述的方法，還包括使用可編程冷凍器以便于在每分鐘0.1-0,3。C范圍內(nèi)的冷卻速度下將所述精細(xì)胞冷卻到所述保溫溫度。Hll'.H10'所述的方法，還包括使用可編程冷凍器以便于在每分鐘l-5。C的所述第一速度下將所述精細(xì)胞從所述保溫溫度冷卻到約-15。C的溫度。H12'.H6'所述的方法，還包括使用可編程冷凍器以便于在每分鐘8-12。C的所述第二冷卻速度下將所述精細(xì)胞從約-18。C的溫度冷卻到至少約誦30。C。H13'.H12'所述的方法，還包括使用可編程冷凍器以便于在每分鐘l-5。C的所述第一冷卻速度下將所述精細(xì)胞從所述保溫溫度冷卻到至少約-15°0的溫度。H14'.H6'所述的方法，其中，將所述精細(xì)胞保持在所述保溫溫度下30分鐘。H15'.H1'到H14'中任意一項所述的方法，其中，所述著色混合物還包括抗氧化劑。H16'.H15'所述的方法，其中，所述抗氧化劑是從包含丙酮酸鹽、維他命K、石克辛酸及其組合的組中選擇出來的。H17'.Hl'或H5'到H16'中任意一項所述的方法，還包括在將所述著色精細(xì)胞引入到所述流式細(xì)胞計數(shù)器中之前，將所述著色精細(xì)胞放置在具有至少37。C的溫度的環(huán)境中。H18'.HI'或H5'到H16'中任意一項所述的方法，還包括在將所述著色精細(xì)胞引入到所述流式細(xì)胞計數(shù)器中之前，將所述著色精細(xì)胞放置在具有至少40。C的溫度的環(huán)境中。H19'.Hl'所述的方法，其中，獲得一定量精細(xì)胞的步驟包括在至少每H20'.H19'所述的方法，其中，所述群組的所述純度至少為85%J'.總溫度控制(沒有高溫著色)Jl'.一種用于處理精細(xì)胞的方法，包括以下步驟從雄性動物收集包含精細(xì)胞的精液樣本；將所述精液樣本輸送到精細(xì)胞處理廠；在精液上執(zhí)行初始質(zhì)量控制檢查；利用DNA選擇性熒光染料使得所述精液樣本中的精細(xì)胞著色；使用流式細(xì)胞計數(shù)器分揀精細(xì)胞以獲得具有所需DNA特征的一個或多個精細(xì)胞群組；獲得懸浮在流體中具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；調(diào)節(jié)懸浮液中所述一定量精細(xì)胞的濃度以獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的所需濃度；在所述一定量精細(xì)胞具有超過玻璃轉(zhuǎn)換溫度時向具有所述所需特征的精細(xì)胞中加入低溫保護(hù)劑，其中在所述玻璃轉(zhuǎn)換溫度下所述精細(xì)胞會受到冷沖擊的損害；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8。C的保溫溫度；使得所述一定量的精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分4中的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40。C的溫度。J2'.Jl'所述的方法，其中，在所述一定量精細(xì)胞具有超過20。C的溫度時加入所述低溫保護(hù)劑。之前,J3'.Jl'所述的方法，其中，在流式細(xì)胞計數(shù)器中分揀所述著色精細(xì)胞將所述著色精細(xì)胞放置在具有20-25。C范圍內(nèi)的溫度環(huán)境中。J4'.Jl'所述的方法，還包括使用可編程冷凍器在第一冷卻速度下將所述精細(xì)胞從保溫溫度冷卻到接近臨界溫度區(qū)的溫度下，在所述臨界溫度區(qū)冰晶形成和滲透壓力方面的改變損害精細(xì)胞，之后在比所述第一冷卻速度快的第二冷卻速度下通過所述臨界溫度區(qū)冷卻所述一定量精細(xì)胞。J5'.Jl'所述的方法，其中，保持所述一定量精細(xì)胞的步驟包括將所述精細(xì)胞保持在所述保溫溫度下小于40分鐘的時間周期。J6'.Jl'所述的方法，其中，保持所述一定量精細(xì)胞的步驟包括將所述精細(xì)胞保持在所述保溫溫度下小于30分鐘的時間周期。J7'.J1'到J6'中任意一項所述的方法，其中，所述著色步驟還包括向所述精細(xì)胞中加入抗氧化劑。J8'.J7'所述的方法，其中，所述抗氧化劑是從包含丙酮酸鹽、維他命K、硫辛酸及其組合的組中選擇出來的。J9'.Jl'所述的方法，其中，獲得一定量精細(xì)胞的步驟包括在至少每秒JIO'.J9'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞的群組的所述純度至少為85%K'.總溫度控制(冷著色)Kl'.一種用于處理精細(xì)胞的方法，包括以下步驟從雄性動物收集包含精細(xì)胞的精液樣本；將所述精液樣本輸送到精細(xì)胞處理廠；在所述精液樣本上執(zhí)行初始質(zhì)量控制檢查；溫度；形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性染料的混合物并且使得所述混合物經(jīng)受約O-8。C的溫度以便于為精細(xì)胞著色；330使用流式細(xì)胞計數(shù)器分揀精細(xì)胞以獲得具有所需DNA特征的一個或多個精細(xì)胞群組；獲得懸浮在流體中具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；調(diào)節(jié)懸浮液中所述一定量精細(xì)胞的濃度以獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的所需濃度；在所述一定量精細(xì)胞中加入低溫保護(hù)劑；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑保持在約O-8。C范圍內(nèi)的保溫溫度下約30分鐘到3小時；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到低于40。C的溫度。K2'.Kl'所述的方法，還包括在所述處理期間的任何時間基本避免暖化所迷細(xì)胞的步驟。K3'.Kl'所述的方法，其中，將所述精細(xì)胞冷卻到約0-8。C范圍內(nèi)的溫度下的步驟包括將容納所述精細(xì)胞的容器放置在基本與所述預(yù)冷卻精細(xì)胞相同溫度的水槽中并且將所述水槽放置在具有低于8。C的溫度的環(huán)境中。K4'.K3'所述的方法，其中，所述冷卻步驟還包括當(dāng)所述精細(xì)胞冷卻時監(jiān)測所述精細(xì)胞的溫度并且在所述精細(xì)胞已被冷卻到小于10。C時向7jC槽中力口入冰。K5'.Kl'所述的方法，其中，所述保持周期在l-2小時的范圍內(nèi)。K6'.Kl'所述的方法，其中，所述保持周期在約卯分鐘的范圍內(nèi)。K7'.Kl'所述的方法，其中，所述保持周期在約30分鐘到小于60分鐘的范圍內(nèi)。K8'.Kl'所述的方法，其中，過度冷卻所述一定量精細(xì)胞的步驟包括使用可編程冷凍器在第一冷卻速度下將所述精細(xì)胞從保溫溫度冷卻到接近臨界溫度區(qū)的溫度下，在所述臨界溫度區(qū)冰晶形成和滲透壓力方面的改變損害精細(xì)胞，之后在比所述第一冷卻速度快的第二冷卻速度下通過所述臨界溫度區(qū)冷卻所述一定量精細(xì)胞。K9'.Kl'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入丙三醇。KIO'.Kl'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入約7%的丙三醇(v/v)。Kll'.Kl'所述的方法，其中，獲得一定量精細(xì)胞的步驟包括在至少每K12'.Kll'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞的群組的所述純度至少為85%。L'.收集系統(tǒng)(設(shè)備)Ll'.一種收集系統(tǒng)，用于收集由液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器所分揀的液滴流，所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器產(chǎn)生沿包括水平分量的軌跡移動的液滴流，所述系統(tǒng)包括用于當(dāng)所述液滴沿所述軌跡移動時截取所述流中的液滴的截取裝置，以及布置得用于收集所截取的液滴的收集容器。L2'.Ll'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述截取裝置包括設(shè)置得橫過所述軌跡的沖擊表面，所述液滴適于撞擊在所述沖擊表面上。L3'.L2'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述沖擊表面被設(shè)置得在所述液滴具有向上加速度分量的位置處橫過所述軌跡。L4'.L2'所述的收集系統(tǒng)，其中，至少一些所述液滴包含顆粒并且所述沖擊表面被涂以用于在與所述沖擊表面撞擊時減小對于所述顆粒的損壞的物質(zhì)。L5'.L4'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述物質(zhì)包括從包含蛋黃、牛血清蛋白和礴酸鹽緩沖鹽水的組中選擇出來的一種或多種物質(zhì)。L6'.L4'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述顆粒是精細(xì)胞。L7'.1^'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述截取裝置被構(gòu)成得用于將所述所截取的液滴引導(dǎo)到所述收集容器。L8'.L7'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述截取裝置包括位于所述沖擊表面下面的導(dǎo)向器，用于將所述液滴向下引導(dǎo)到所述收集容器。L9'.L7'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述截取裝置包括限定所述沖擊表面并且具有用于使得沿所述軌跡移動的液滴進(jìn)入到所述包絡(luò)線中已撞擊所述沖擊表面的入口窗的中空包絡(luò)線。LIO'.Ll'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述液滴流構(gòu)成第一液滴流、所述截取裝置構(gòu)成第一截取裝置、所述收集容器構(gòu)成第一收集容器、并且所述細(xì)胞計數(shù)器還產(chǎn)生沿不同于所述第一軌跡的第二軌跡移動的第二液滴流，所述收集系統(tǒng)還包括用于截取沿第二軌跡移動的第二液滴的第二截取裝置和用于收集由所述第二截取裝置截取的液滴的第二收集容器。Lll'.L10'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述第一截取裝置中具有所述第二流適于從中穿過的窗，并且所述第二截取裝置被布置在所述第一截取裝置后面用于截取穿過所述窗的所述第二流中的液滴。L12'.L10'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述第二截取裝置被構(gòu)成得用于將第二流中的所述被截取的液滴引導(dǎo)到第二收集容器。L13'.Ll'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述液滴包含顆粒，所述收集系統(tǒng)還包括涂在所述截取裝置的沖擊表面上以減少在沖擊時對于所述顆粒的損壞的物質(zhì)。L14'.L13'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述顆粒包含活精細(xì)胞。L15'.L13'所述的收集系統(tǒng)，其中，所述物質(zhì)包括從由包含蛋黃、牛血清蛋白和磷酸鹽緩沖鹽水的組中選擇出來的一種物質(zhì)。L16'.Ll'所述的收集系統(tǒng)與布置得用于將液滴流引導(dǎo)到所述截取裝置的流式細(xì)胞計數(shù)器相組合。M'.收集系統(tǒng)(方法)Ml'.—種用于收集由液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器所分揀的液滴流，所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器產(chǎn)生沿包括水平分量的軌跡移動的液滴流，所述方法包括以下步驟當(dāng)所述液滴沿所述軌跡移動時截取所述液滴；以及將所述截取的液滴收集在第一收集容器中。M2'.Ml'所述的方法，其中，所述收集步驟包括將所述截取的液滴引導(dǎo)到所述第一收集容器中。M3'.M2'所述的方法，其中，所述截取步驟包括在所述液滴具有向上加速度分量的位置處橫過所述軌跡設(shè)置沖擊表面。M4'.M3'所述的方法，還包括調(diào)節(jié)所述沖擊表面的位置以適應(yīng)不同的液滴軌跡。M5'.Ml'所述的方法，其中，所述流式細(xì)胞計數(shù)器產(chǎn)生沿各自的第一和第二軌跡移動的笫一和第二液滴流，每個軌跡都具有水平分量，所述方法還包括當(dāng)其沿所述第二軌跡移動時截取所述第二流中的所述液滴，以及將第二流的所述截取的液滴收集在第二收集容器中。M6'.M5'所述的方法，其中，所述第一和第二軌跡基本位于同一個平面中。M7'.M5'所述的方法，其中，所述第一流中的液滴通過在所述液滴具有向上加速度分量的位置處橫過所述第一軌跡布置第一沖擊表面被截取，所述第二流中的液滴通過在所述液滴具有向上加速度分量的位置處橫過所述第二軌跡布置第二沖擊表面,皮截取。M8'.M7'所述的方法，其中，所述第二沖擊表面被布置在不同于所述第一沖擊表面的海拔高度處。M9'.Ml'所述的方法，其中，所述液滴包含顆粒并且截取所述液滴的步驟包括使用截取裝置截取所述液滴，所述方法還包括使得所述截取裝置與合成物相接觸以減小對于所述顆粒的損壞。MIO'.M9'所述的方法，其中，所述顆粒包括活精細(xì)胞。Mll'.M10'所述的方法，其中，所述合成物包括從包含蛋黃、牛血清蛋白和磷酸鹽緩沖鹽水的組中選擇出來的一種物質(zhì)。M12'.M10'所述的方法，其中，使得所述截取裝置與合成物相接觸的步驟包括將所述截取裝置浸泡在所述合成物中一段周期，所述周期足以使得所述合成物由所述截取裝置吸收和/或黏附于所述截取裝置。M13'.M12'所述的方法，其中，所述周期在約30-90分鐘的范圍內(nèi)。M14'，M13'所述的方法，其中，所述周期在約30-60分鐘的范圍內(nèi)。M15'.M14'所述的方法，其中，所述周期約為60分鐘。M16'.M10'-M15'所述的方法，其中，將所述液滴收集在收集容器中，所述方法還包括使得所述收集容器與合成物相接觸以減小對于所述顆粒的損壞。M17'.M16'所述的方法，其中，使得所述收集容器與合成物相接觸以減小對于所述顆粒的損壞的步驟包括使得所述收集容器與用于接觸所述截取裝置相同的合成物相接觸。M18'.M16'所述的方法，其中，使得所述收集容器與合成物相接觸以減小對于所述顆粒的損壞的步驟包括將所述收集容器浸泡在所述合成物中一段周期，所述周期足以使得所述合成物由所述收集容器吸收和/或黏附于所述收集容器。M19'.M18'所述的方法，其中，所述周期在約30-90分鐘的范圍內(nèi)。M20'.M18'所述的方法，其中，所述周期約為60分鐘。N'.增效組合a.多通道FCM(具有分揀策略)Nal'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括以下步驟利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；以及335作為下列因素至少一個的函數(shù)改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)具有所需DNA特征的第一分揀的精細(xì)胞群組的純度；以及(2)在第二分揀群組中的具有所述所需DNA特征的精細(xì)胞量。Na2'.Nal'所述的方法還包括并行地操作所述流式細(xì)胞術(shù)單元。Na3'.Nal'所述的方法，其中，所述一個或者多個特定DNA特征包括精細(xì)胞是否包含X或Y性別染色體。b.具有數(shù)字處理的多通道FCMNbl'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；以及利用一個或者多個模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于每一個流式細(xì)胞術(shù)單元的擬輸出的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示所述特定DNA特征。Nb2'，Nbl'所述的方法，其中，所述一個或者多個特定DNA特征包括精細(xì)胞是否具有X或Y性別染色體。c.多通道FCM(w/高溫著色)Ncl'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40。C的溫度；以及利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)。Nc2'.Ncl'所述的方法，其中，所述染料是UV激發(fā)或可見光激發(fā)染料。Nc3'.Nc2'所述的方法，其中，所述染料是從由二苯甲亞胺、SYBR-14和其變體、類似物或衍生物構(gòu)成的組中選擇出來的。Nc4'.Ncl'-Nc3'中的任意一項所述的方法，其中，所述著色混合物經(jīng)歷這樣一種時間周期，所述時間周期足以使得所述染料粘結(jié)DNA以使得可根據(jù)熒光分別分揀X和Y精細(xì)胞。Nc5'.Nc4'所述的方法，其中，所述時間周期在1-160分鐘的范圍內(nèi)。Nc6'.Ncl'-Nc5'中的任意一項所述的方法，其中，所述著色混合物還包括抗氧化劑。Nc7'.Ncl'所述的方法，其中，所述一個或者多個特征包括精細(xì)胞是否包含X或Y性別染色體。d.多通道(具有快速低溫儲藏)Ndl'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括以下步驟利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的^^共流體輸送系統(tǒng)；從一個或者多個分揀的精細(xì)胞群組獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8'C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40'C的溫度。Nd2'.Ndl'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入丙三醇。Nd3'.Ndl'所述的方法，其中，所述一個或者多個特定DNA特征包括精細(xì)胞是否具有X或Y性別染色體。Nd4'.Ndl'所述的方法，其中，將所述一定量精細(xì)胞冷卻到所述保溫溫度的步驟包括使用被選擇得在約卯分鐘內(nèi)將所述一定量精細(xì)胞從高于玻璃轉(zhuǎn)換溫度的溫度冷卻到保溫溫度的冷卻速度，在所述玻璃轉(zhuǎn)換溫度下所述精細(xì)胞會受到冷沖擊的損害。Nd5'.Nd4'所述的方法，其中，所述冷卻速度是每分鐘0.1-(K3。C的范圍內(nèi)的基本恒定的冷卻速度。Nd6'.Ndl'所述的方法，其中，過度冷卻所述一定量精細(xì)胞的步驟包括在第一冷卻速度下將精細(xì)胞冷卻到接近臨界溫度區(qū)的溫度，在所述臨界溫度區(qū)水晶形成和滲透壓力方面的改變損害精細(xì)胞，以及在比第一冷卻速度快的第二冷卻速度下將精細(xì)胞冷卻到低于-30。C的溫度。Nd7'.Ndl'所述的方法，還包括形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40。C的溫度。e.分揀策略(具有高溫著色)Nel'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40。C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到第一位置并且使得所述流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；從所述第二和第三液滴分揀所述第一液滴；收集所述第一液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；確定所述至少一個群組中具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及以作為所確定的在所述至少一個群組中的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的總量的函數(shù)改變流體被輸送到所述第一位置的速度。Ne2'，一種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包t清細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40'C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到第一位置并且使得所述流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；從所述第二液滴分揀所述第一和第三液滴；收集所述第一和第三液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；確定所述至少一個群組中具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及以作為所確定的在所述至少一個群組中的具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的量的函數(shù)改變流體,皮輸送到所述第一位置的速度。f.高溫著色(w/快速低溫儲藏)Nfl'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40。C的溫度；基于特定DNA特征將分揀所述著色混合物中的所述精細(xì)胞；獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8。C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40。C的溫度。Nf2'.Nfl'所述的方法，其中，加入低溫保護(hù)劑的步驟包括加入丙三醇。Nf3'.Nfl'所述的方法，其中，所述特定FNA特征為精細(xì)胞是否包含X或Y性別染色體。Nf4'.NiT所述的方法，其中，冷卻所述一定量精細(xì)胞的步驟包括使用被選擇得在約90分鐘內(nèi)將所述一定量精細(xì)胞冷卻到約0-8°C的冷卻速度。Nf5'.Nf4'所述的方法，其中，所述冷卻速度是每分鐘0.1-0.3°。的范圍內(nèi)的基本恒定的冷卻速度。Nf6'.Nfl'所述的方法，其中，過度冷卻所述一定量精細(xì)胞的步驟包括在第一冷卻速度下將精細(xì)胞冷卻到接近臨界溫度區(qū)的溫度，在所述臨界溫度區(qū)冰晶形成和滲透壓力方面的改變損害精細(xì)胞，以及在比所述第一冷卻速度快的第二冷卻速度下將精細(xì)胞冷卻到低于-30。C的溫度。g.多重組合Ngl'.(高溫著色/多通道分揀/快速低溫儲藏)一種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40。C的溫度；利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將所述著色混合物中的精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8。C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40。C的溫度。Ng2'.(高溫著色/多通道分揀/高純度分揀策略)一種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40。C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元中的每一個并且將每個流體流分裂為液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；利用液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)從所述第二和第三液滴中分揀所述第一液滴，所述液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)包括操作所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；收集所述第一液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；確定所述至少一個群組中具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及以作為所確定的在所述至少一個群組中的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的總量的函數(shù)改變流體被輸送到一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元的速度。Ng3'.(高溫著色/多通道分揀/高回收率分揀策略)一種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40。C的溫度；將包^lt細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元中的每一個并且將每個流體流分裂為液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；利用液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)從所述第二液滴中分揀所述第一和第三液滴，所述液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)包括操作所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；收集所述第一和第三液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；確定所述至少一個群組中具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及以作為所確定的在所述至少一個群組中的具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的量的函數(shù)改變流體被輸送到一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元的速度。Ng4'.(高溫著色/多通道分揀/分揀策略/快速低溫儲藏)一種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物經(jīng)受至少40'C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元中的每一個并且將每個流體流分裂為液滴，并且利用流式細(xì)胞術(shù)根據(jù)包含在液滴中精細(xì)胞的一個或者多個特定DNA特征分揀所述液滴，以獲得一個或多個具有所需DNA特征的精細(xì)胞的群組，所述流式細(xì)胞術(shù)包括操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；作為下列因素至少一個的函數(shù)改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述具有所需DNA特征的精細(xì)胞的一個或多個群組的純度；以及(2)在一個或多個精細(xì)胞群組中具有所述所需DNA特征的精細(xì)胞量相對于所述液滴中具有所述所需DNA特征的精細(xì)胞的總量；加入低溫保護(hù)劑以保護(hù)從所述一個或多個精細(xì)胞群組中獲得的一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8'C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40'C的溫度。O'.總時間線Ol'.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；利用DNA選擇性熒光染料使得精細(xì)胞著色；利用電磁輻射照射精細(xì)胞以使得DNA選擇性熒光染料發(fā)出熒光；檢測由精細(xì)胞發(fā)出的熒光；分析由精細(xì)胞發(fā)出的熒光以確定精細(xì)胞的一個或者多個特定的DNA特征；基于所述一個或者多個特定的DNA特征將精細(xì)胞分揀成多個精細(xì)胞群組；從所述多個精細(xì)胞群組中的一個獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；以及使得所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻；其中，在精細(xì)胞收集后在小于12小時的時間內(nèi)完成過度冷卻的步驟。02'.Ol'所述的方法，其中，在精細(xì)胞收集后在小于8小時的時間內(nèi)完成所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻的步驟。03'.Ol'所述的方法，其中，在精細(xì)胞收集后在小于6小時的時間內(nèi)完成所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻的步驟。04'.Ol'所述的方法，其中，在精細(xì)胞收集后在小于3小時的時間內(nèi)完成所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻的步驟。05'，Ol'所述的方法，其中，在精細(xì)胞收集后在小于2小時的時間內(nèi)完成所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻的步驟。06'.Ol'所述的方法，其中，在精細(xì)胞收集后在小于l小時的時間內(nèi)完成所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻的步驟。07'.Ol'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞包括活精細(xì)胞08'.07'所述的方法，其中，所述一個或者多個DNA特征包括精細(xì)胞是否包含X或Y性別染色體。09'.or所述的方法，還包括在過度冷卻步驟之后解凍所述一定量精細(xì)胞之后通過人工受精使用來自于所述一定量的精細(xì)胞使得卵細(xì)胞受精的步驟。OIO'.Ol'所述的方法，還包括產(chǎn)生大量具有所需特征的精細(xì)胞并且通過商業(yè)分配系統(tǒng)將所述大量精細(xì)胞分配給動物育種家。P'.分揀速度Pl'.—種根據(jù)染色體含量分揀活精細(xì)胞的方法，包括(a)將DNA選擇性熒光染料加入到活精細(xì)胞供給；(b)使得包含所述精細(xì)胞的樣本流體和鞘流體流過趨于使得精細(xì)胞轉(zhuǎn)動到所需取向的定向噴嘴，所述樣本流體和鞘流體以流體流的形式離開噴嘴，所述流體流包括由樣本流體和精細(xì)胞形成的芯流和包圍芯流的鞘流體流；(c)為噴嘴提供聲能以使得流體流在噴嘴下游的液滴分裂位置處分裂成液滴流；(d)引導(dǎo)電磁輻射束在液滴分裂位置上游的詢問位置處與流體流相交以激發(fā)在精細(xì)胞中的熒光染料，從而使得精細(xì)胞發(fā)出熒光；(e)利用輸出表示被檢測的熒光發(fā)射的強(qiáng)度的隨時間改變的模擬信號的光檢測器檢測發(fā)出的熒光；(f)對所述隨時間改變的模擬信號進(jìn)行電子處理以確定多個精細(xì)胞的染色體含量；(g)根據(jù)包含在液滴中的精細(xì)胞的染色體含量選擇性地為流體流提供靜電荷以選擇性地為液滴提供電荷或者不提供電荷；(h)利用電場根據(jù)它們的電荷使得液滴偏轉(zhuǎn)，從而使得包含在具有相同電荷的液滴中精細(xì)胞與包含在具有不同電荷的液滴中精細(xì)胞分離；以及(i)以至少每秒5000個精細(xì)胞的速度收集至少一個活精細(xì)胞群組。P2'.Pl'所述的方法，其中，收集步驟中收集的至少一個群組具有至少85%的純度。P3'.Pl'所述的方法，其中，所述收集步驟包括以至少每秒6000個精細(xì)胞的速度收集至少一個活精細(xì)胞群組。P4'.Pl'所述的方法，其中，所述收集步驟包括以至少每秒7000個精細(xì)胞的速度收集至少一個活精細(xì)胞群組。P5'.Pl'所述的方法還包括并行操作兩個或者多個細(xì)胞計數(shù)單元以使每一個執(zhí)行步驟(b)至(i)同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)顆粒的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述顆粒的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)。P6'.P5'所述的方法，其中，操作兩個或者多個細(xì)胞計數(shù)單元同時共享一個集成平臺的步驟包括操作模式鎖定的固態(tài)激光器以產(chǎn)生包括多個電^茲脈沖的單一束，每個脈沖的峰值功率都大于所述激光器的平均功率輸出；將所述單一束分裂為兩個或多個束；以及將所述兩個或多個束中的每個引導(dǎo)到流式細(xì)胞計數(shù)單元。R'.CSD或縫隙掃描a.精細(xì)胞Rl'.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的方法，所述每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的方向上具有一定長度，所述方法包4舌以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所述精細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從精細(xì)胞發(fā)出，包括從表示所述區(qū)域的染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)出的輻射；檢測來自于所述染色體區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些和將來自于所述染色體區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體DNA特征的隨時間變化的模擬電信號；數(shù)字化地釆樣隨時間變化的模擬信號并且提供包含與所迷隨時間變化的模擬信號相對應(yīng)的數(shù)字信息的輸出；分析所述數(shù)字信息以抽取表示隨時間變化的模擬信號的微分特性的信息；以及至少部分地根據(jù)所述抽取信息分析作為具有特定染色體DNA特征對至少一些精細(xì)胞分類。R2'.Rl'所述的方法，其中，所述染色體特征表示精細(xì)胞的性別。R3'.R2'所述的方法，其中，所述精細(xì)胞是牛的精細(xì)胞。R4'.R3'所述的方法，其中，所述染色體區(qū)域位于在核的縱向中心的任何一側(cè)上延伸不大于核長度的20%的核的區(qū)域內(nèi)。R5'.R3'所述的方法，其中，所述染色體區(qū)域位于在核的縱向中心的任何一側(cè)上延伸不大于核長度的IO%-15%的核的區(qū)域內(nèi)。R6'.Rl'所述的方法，其中，數(shù)字化采樣步驟包括同步采樣所述隨時間變化的模擬輸出。R7'.Rl'所述的方法，其中，所述斑點寬度小于3.0微米。R8'.R7'所述的方法，其中，所述斑點長度大于100孩i米。R9'.Rl'所述的方法，還包括在所述流穿過所述光束之前在所述流中的精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向。RIO'.Rl'所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征液滴分揀所述細(xì)胞。Rll'.Rl'所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征光破壞分揀所述細(xì)胞。R12'，Rl'所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征流體切換分揀所述細(xì)胞。R13'.Rl'所述的方法，其中，所述微分特性包括在所述信號相對于閾值的一點處隨時間變化的模擬信號的斜度。b.—般顆粒R14'.—種分析在具有流動方向的流體流中的顆粒的方法，所迷方法包括以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所述顆粒適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從顆粒發(fā)出；檢測和將輻射發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示顆粒特征的隨時間變化的模擬電信號；數(shù)字化地采樣隨時間變化的模擬信號并且提供包含與所述隨時間變化的模擬信號相對應(yīng)的數(shù)字信息的輸出；分析所述數(shù)字信息以抽取表示隨時間變化的模擬信號的微分特性的信息；以及至少部分地根據(jù)所述抽取信息分析作為具有特定特征對至少一些顆粒分類。R15'.R14'所述的方法，其中，數(shù)字化采樣步驟包括同步采樣所述隨時間變化的模擬輸出。R16'.R14'所述的方法，還包括根據(jù)所述分類液滴分揀所述顆粒。R17'.R14'所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征光破壞分揀所述精細(xì)胞。R18'.R14'所述的方法，還包括根據(jù)所述染色體DNA特征流體切換分揀所述精細(xì)胞。R19'，R14'所述的方法，其中，所述微分特性包括在所述信號相對于閾值的一點處隨時間變化的模擬信號的斜度。S'.脈沖激光器FCM設(shè)備Sl'.—種流式細(xì)胞術(shù)i殳備，包括用于通過顆粒詢問位置引導(dǎo)包含樣本顆粒的流體流的流動通道；用于發(fā)出多個電磁輻射(EMR)脈沖的激光器，其中每個脈沖都具有超過所述激光器的平均功率的峰值功率，所述脈沖沿射束路徑從所述激光器被引導(dǎo)到顆粒詢問位置；用于產(chǎn)生脈沖到達(dá)詢問位置的定時信號指示的定時電路；適于從詢問位置中檢測EMR并用于輸出所檢測的EMR的強(qiáng)度的時間改變模擬信號指示的檢測器；適于接收作為輸入的時間改變模擬信號并且適于采樣所述模擬信號以產(chǎn)生數(shù)字化輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器；以及用于作為時限信號的函數(shù)分析來自于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器的數(shù)字化輸出的電子處理器。S2'.Sl'所述的設(shè)備，其中，所述激光器用于在約100-500皮秒的功率下在約50-150MHz的脈沖頻率下發(fā)射具有l(wèi)-100皮秒寬度的EMR脈沖。S3'.S2'所述的設(shè)備，其中，所述激光器用于在約70-100MHz的脈沖頻率下發(fā)射具有5-20皮秒寬度的EMR脈沖。S4'.Sl'所述的設(shè)備，其中，所述定時電路包括適于感測與EMR脈沖相對應(yīng)的光線的傳感器，所述光線包括由每一個激光脈沖和流體流21相互作用產(chǎn)生的散射光或包括EMR脈沖的光。S5'.Sl'所述的設(shè)備，其中，所述定時電路包括用于觸發(fā)所述激光器以發(fā)射脈沖的時鐘。S6'.Sl'所述的設(shè)備，其中，所述檢測器適于檢測由所述脈沖的激發(fā)能激勵的熒光發(fā)射。S7'，Sl'所述的設(shè)備，其中，所述激光器包括模式鎖定固態(tài)激光器。S8'.Sl'所述的設(shè)備，其中，所述激光器包括Q-切換激光器。S9'.sr所述的設(shè)備，其中，所述激光器包括傾腔激光器。SIO'.Sl'所述的i殳備，其中，所述檢測器是光電增倍管。Sll'.S9'所述的設(shè)備，其中，所述光電增倍管具有小于2毫微秒的響應(yīng)時間。S12'.Sl'所述的i殳備，其中，所述電子處理器用于作為脈沖波形處理數(shù)字化輸出。S13'.S12'所述的設(shè)備，其中，所述電子處理器用于從數(shù)字化輸出中抽取以下特征中的至少一個臨界斜度差異；脈沖上升時間；脈沖峰值；以及脈沖區(qū)域。T'.脈沖激光器方法Tl'.一種用于當(dāng)其流過詢問位置時分析包含在流體流中顆粒的方法，所述方法包括以下步驟從激光器中發(fā)出多個電磁輻射(EMR)脈沖，其中每個脈沖的峰值功率都超過所述激光器的平均功率；通過沿束路徑將來自于激光器中的所述脈沖引導(dǎo)到詢問位置而間歇地照射流體流和包含于其中的顆粒；檢測來自于詢問位置的EMR;產(chǎn)生從檢測的EMR的強(qiáng)度的時間改變模擬信號指示；產(chǎn)生脈沖到達(dá)所述詢問位置的定時信號指示；將時間改變模擬信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號；以及分析所述數(shù)字信號以確定流體流中的顆粒的特征。T2'.Tl'所述的方法，其中，將時間改變模擬信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號的步驟包括在與用脈沖照射流體流同步的時間下采樣所述模擬信號。T3'.Tl'所述的方法，其中，照射流體流的步驟導(dǎo)致與所迷顆粒相關(guān)的熒光團(tuán)的激發(fā)，并且將時間改變模擬信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號的步驟包括在詢問位置的照射之后在所述熒光團(tuán)的熒光壽命衰退的預(yù)定時間下采樣所述模擬信號。T4'.Tl'所述的方法，其中，每個脈沖都包含使得所述熒光團(tuán)飽和的充足功率。T5'.Tl'所述的方法，其中，檢測來自于詢問位置的光線的步驟包括使用光電增倍管檢測來自于與所述顆粒相關(guān)的熒光團(tuán)中的熒光發(fā)射。T6'.Tl'所述的方法，其中，發(fā)出電磁輻射脈沖的步驟包括發(fā)射每秒鐘50-150百萬之間的脈沖的步驟，其中每個脈沖具有1-100皮秒之間的寬度。T7'.TT所述的方法，其中，產(chǎn)生定時信號的步驟包括感測由于所述脈沖與所述流體流相互作用而產(chǎn)生的散射光。T8'.Tl'所述的方法，其中，產(chǎn)生定時信號的步驟包括產(chǎn)生時鐘信號的步驟并且從激光器中發(fā)出多個EMR脈沖的步驟包括使用所述時鐘信號以觸發(fā)所述激光器發(fā)出脈沖。T9'.Tl'所述的方法，其中，分析所述數(shù)字信號的方法包括作為脈沖波形分析數(shù)字信號。TIO'.Tl'所述的方法，其中，分析所述數(shù)字信號的方法還包括從所述信號中抽取以下特征中的至少一個臨界斜度差異；脈沖上升時間；脈沖峰值；以及脈沖區(qū)域。Tll'.Tl'所述的方法，其中，所述顆粒包括精細(xì)胞。U'.保留1v'.cv最優(yōu)化Vl'.—種評估對用于分揀的細(xì)胞群組著色的一組條件的程序，所述群組包括第一類型和第二類型的細(xì)胞，所述程序包括(a)在一組著色條件下利用熒光染料使得細(xì)胞群組的一部分著色；(b)當(dāng)著色的細(xì)胞以速度R通過流式細(xì)胞計的詢問位置時使得著色細(xì)胞暴露在電磁輻射下；(c)確定暴露的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征；(d)利用確定的熒光特征將暴露的細(xì)胞分類成兩個或者多個細(xì)胞的子群組，其中一個子群組是第一細(xì)胞類型的濃縮子群組；(e)確定濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的改變系數(shù)以提供對著色條件的分揀效率的指示；以及(f)確定在細(xì)胞被著色的情況下改變?nèi)魏沃珬l件或者著色的細(xì)胞通過流式細(xì)胞計的詢問位置的速度R以提高分揀效率。V2'.Vl'所述的程序，其中，所述部分包括第一部分并且所述一組著色條件包括第一組著色條件，所述程序還包括在不同于第一組著色條件的第二組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第二部分并且通過所述細(xì)胞群組的第二部分執(zhí)行步驟(b)到(e)。V3'.V2'所述的程序，其中，在已為第一部分確定了改變系數(shù)之后著色第二部分。V4'.V2'所述的程序，其中，所述第二組著色條件由于以下至少一項而導(dǎo)致不同于第一組著色條件(1)熒光染料的濃度；(2)用于著色細(xì)胞的著色周期的長度；以及(3)用于著色細(xì)胞的著色周期期間細(xì)胞的溫度。V5'.V2'所述的程序，還包括在不同于第一和第二組著色條件的第三組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第三部分并且通過所述細(xì)胞群組的第三部分執(zhí)行步驟(b)到(e)。V6'.V5'所述的程序，還包括在不同于第一、第二和第三組著色條件的第四組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第四部分并且通過所述細(xì)胞群組的第四部分執(zhí)行步驟(b)到(e)。V7'.V6'所述的程序，還包括在不同于第一、第二、第三和第四組著色條件的第五組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第五部分并且通過所述細(xì)胞群組的第五部分執(zhí)行步驟(b)到(e)。V8'.V2'所迷的程序，還包括根據(jù)所述確定選擇性地改變第一組著色條件中的條件從而獲得第二組著色條件。V9'.V2'所述的程序，其中，作為通過在第二部分上執(zhí)行步驟(7)而確定的改進(jìn)著色條件被應(yīng)用于所述細(xì)胞群組的剩余部分的著色。VIO'.V2'所述的程序，其中，在步驟(a)中多部分細(xì)胞被著色，每個部分都在獨特的著色條件組下被著色，其中，為每個部分執(zhí)行步驟(b)到(e)，步驟(f)包括使用各種改變系數(shù)以確定用于著色所迷群組中其它細(xì)胞的著色條件組。Vll'.Vl'所述的程序，其中，所述細(xì)胞為精細(xì)胞。V12'.Vll'所述的程序，其中，所述第一細(xì)胞類型包括攜帶X染色體的精細(xì)胞。V13'.Vl'所述的程序，其中，步驟(a)包括用Hoechst33342著色所述細(xì)胞。V14'，Vl'所述的程序，其中，所述熒光發(fā)射特征包括與細(xì)胞穿過詢問位置的運動相對應(yīng)的熒光脈沖波形的特征，并且所述特征表示以下至少一項(1)總熒光強(qiáng)度；以及(2)峰值熒光強(qiáng)度。V15'.Vl'所述的程序，還包括在步驟(f)之前確定來自于步驟(e)二變系數(shù)是否等于或小于預(yù)定改變系數(shù)并且使用每次都著色不同細(xì)胞部,不同著色條件組重復(fù)步驟(a)到(e)直到步驟(e)中確定的改變系-于或小于預(yù)定改變系數(shù)，并且步驟(f)包括如果對于各個著色條件來-自于步驟(e)的改變系數(shù)都等于或小于預(yù)定改變系數(shù)的話，確定使用.著色條件著色所述其它細(xì)胞。V16'.—種評估對用于分揀的細(xì)胞群組著色的一組條件的程序，所述.包括第一類型和第二類型的細(xì)胞，所述程序包括(a)在一組著色條件下利用熒光染料使得細(xì)胞群組的一部分著色；(b)當(dāng)著色的細(xì)胞以速度R通過流式細(xì)胞計的詢問位置時使得著色細(xì).露在電磁輻射下；(c)確定暴露的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征；(d)利用確定的熒光特征將暴露的細(xì)胞分類成兩個或者多個細(xì)胞的子，其中一個子群組是第一細(xì)胞類型的濃縮子群組；(e)確定濃縮子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的改變系數(shù)以提供對著色的分揀效率的指示；(f)確定在細(xì)胞,皮著色的情況下改變?nèi)魏沃珬l件或者著色的細(xì)胞通,式細(xì)胞計的詢問位置的速度R以提高分揀效率；以及(g)將改進(jìn)的著色條件應(yīng)用于所迷細(xì)胞群組的其余部分。Vir.V16'所述的程序，還包括在流式細(xì)胞計數(shù)器中分揀所迷細(xì)胞群其余部分以獲得第一細(xì)胞類型的濃縮樣本群組；V18'.V16'所述的程序，其中，所述部分包括第一部分并且所述一組,條件包括第一組著色條件，所述程序還包括在不同于第一組著色條件二組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第二部分并且通過所述細(xì)胞群組二部分執(zhí)行步驟(b)到(e)。V19'.V18'所述的程序，其中，在已為第一部分確定了改變系數(shù)之后,第二部分。V20'.V18'所述的程序，其中，所述第二組著色條件由于以下至少一項而導(dǎo)致不同于第一組著色條件(1)熒光染料的濃度；(2)用于著色細(xì)胞的著色周期的長度；以及(3)用于著色細(xì)胞的著色周期期間細(xì)胞的溫度。V21'.V18'所述的程序，還包括在不同于第一和第二組著色條件的第三組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第三部分并且通過所述細(xì)胞群組的第三部分執(zhí)行步驟(b)到(f)。V22'.V21'所述的程序，還包括在不同于第一、第二和第三組著色條件的第四組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第四部分并且通過所述細(xì)胞群組的第四部分執(zhí)行步驟(b)到(f)。V23'.V22'所述的程序，還包括在不同于第一、第二、第三和第四組著色條件的第五組著色條件下著色所述細(xì)胞群組的第五部分并且通過所述細(xì)胞群組的第五部分執(zhí)行步驟(b)到(f)。V24'.V18'所述的程序，在步驟(g)之前，還包括在選擇用作步驟(g)中的一組著色條件，所述著色條件產(chǎn)生用于熒光發(fā)射特征的改變系數(shù)水平，所述改變系數(shù)水平等于或小于預(yù)定改變系數(shù)。V25'.V24'所述的程序，其中，預(yù)定改變系數(shù)約為1.3%或更小。V26'.V16'所述的程序，還包括在步驟(f)之前確定來自于步驟(e)的改變系數(shù)是否等于或小于預(yù)定改變系數(shù)并且使用每次都著色不同細(xì)胞部分的不同著色條件組重復(fù)步驟(a)到U)直到步驟(e)中確定的改變系數(shù)等于或小于預(yù)定改變系數(shù)，并且步驟(f)包括如果對于各個著色條件來說來自于步驟(e)的改變系數(shù)都等于或小于預(yù)定改變系數(shù)的話，確定使用所述著色條件著色所述其它細(xì)胞。V27'.V16'所述的程序，其中，所述細(xì)胞為精細(xì)胞。V28'.V27'所述的程序，其中，所述第一細(xì)胞類型包括攜帶X染色體的精細(xì)胞。V29'.V16'所述的程序，其中，步驟(a)包括用Hoechst33342著色所述細(xì)胞。V30'.Vl'所述的程序，其中，所迷熒光發(fā)射特征包括與細(xì)胞穿過詢問位置的運動相對應(yīng)的熒光脈沖波形的特征，并且所述特征表示以下至少一項(1)總熒光強(qiáng)度；以及(2)峰值熒光強(qiáng)度。W'.使用外照射傳感器的自動化校準(zhǔn)Wl'.用于自動化校準(zhǔn)液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器的設(shè)備，當(dāng)在液滴分裂位置分裂連續(xù)流體流時所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器選擇性地向多個液滴施加或不施加一組一個或多個電荷中的一個，并且靜電地將所述液滴分揀到兩個或多個獨立液滴流中，取決于所述液滴的所需容量為每個液滴選擇的電荷，在流式細(xì)胞計數(shù)器的詢問位置和所述顆粒到達(dá)液滴分裂位置處檢測根據(jù)表示連續(xù)的流體流中所包含的顆粒的瞬間之間的時間消釋的估計值的滴落延遲設(shè)定，所述設(shè)備包括(a)詢問位置下游的外照射傳感器，用于照射一個所述獨立液滴流中的液滴，檢測由包含在所述液滴中的顆粒發(fā)出的任何熒光發(fā)射，并且產(chǎn)生表示所檢測的熒光發(fā)射的輸出信號；以及(b)用于分析所述輸出信號并且自動化地調(diào)節(jié)以下至少一項的控制裝置(1)滴落延遲設(shè)定；以及(2)所述電荷組中電荷的幅度。W2'.Wl'所述的設(shè)備，其中，所述控制裝置作為所檢測的熒光發(fā)射與應(yīng)由具有所需容量的液滴產(chǎn)生的熒光發(fā)射之間差異的函數(shù)調(diào)節(jié)所述滴落延遲設(shè)定。W3'.Wl'所述的設(shè)備，其中，所述控制裝置作為為包含熒光顆粒的液的幅度。W4'.Wl'所述的設(shè)備，其中，所述外照射傳感器包括光源、二向性濾光器、透鏡系統(tǒng)、以及光檢測器。W5'.W4'所述的設(shè)備，其中，所述外照射傳感器還包括用于將來自于光源的光線引導(dǎo)到所述傳感器照射所述液滴的位置的纖維光纜。W6'，W5'所述的設(shè)備，其中，通過一對充電的偏轉(zhuǎn)板產(chǎn)生電場，并且所述外照射傳感器被布置得用于當(dāng)所述液滴在所述偏轉(zhuǎn)板之間穿過時照射所述液滴。W7'.W6'所述的設(shè)備，其中，所述外照射傳感器被布置得用于在所述液滴穿過由一個或多個偏轉(zhuǎn)板產(chǎn)生的電場時通過電絕緣支承物中的孔照射所述液滴，所述支承物用于支承至少一個偏轉(zhuǎn)板。W8'.W4'所述的設(shè)備，其中，所述光源用于在詢問位置處照射顆粒。W9'.Wl'所述的設(shè)備，還包括W1'的段落(a)所述的用于所述兩個或多個獨立液滴流的剩余部分的外照射傳感器，所述控制裝置用于分析來自于所述外照射傳感器的輸出信號并且自動化地調(diào)節(jié)以下至少一項(1)作為所檢測的熒光發(fā)射與應(yīng)由具有所需容量的液滴產(chǎn)生的熒光發(fā)射之間差異的函數(shù)的滴落延遲設(shè)定；以及(2)作為為包含熒光顆粒的液滴所檢測的熒光發(fā)射的平均峰值強(qiáng)度中變化的函數(shù)的節(jié)所述電荷組中電荷的幅度。WIO'.W9'所述的設(shè)備，其中，通過一對充電的偏轉(zhuǎn)板產(chǎn)生電場，并且所述外照射傳感器被布置得用于當(dāng)所述液滴在所述偏轉(zhuǎn)板之間穿過時照射所述液滴。Wll'.W10'所述的設(shè)備，其中，所述外照射傳感器被布置得用于在所述液滴穿過由一個或多個偏轉(zhuǎn)板產(chǎn)生的電場時通過電絕緣支承物中的孔照射所述液滴，所述支承物用于支承至少一個偏轉(zhuǎn)板。W12'.Wl'所述的設(shè)備，其中，所述控制裝置用于將液滴充電的相位保持在關(guān)于液滴形成的最佳相位上下的約36度內(nèi)。W13'.W12'所述的設(shè)備，其中，所述控制裝置用于將液滴充電的相位保持在關(guān)于液滴形成的最佳相位上下的約10.8度內(nèi)。X'.自動化校準(zhǔn)方法Xl'.用于連續(xù)地校驗流式細(xì)胞計數(shù)器中適當(dāng)分揀刻度的方法備，當(dāng)在液滴分裂位置由連續(xù)流體流構(gòu)成時所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器選擇性地向多個液滴施加或不施加一組一個或多個電荷中的一個，并且靜電地將所L液滴分揀到兩個或多個獨立液滴流中，取決于所述液滴的所需容量為每-液滴選擇的電荷，在流式細(xì)胞計數(shù)器的詢問位置和所述顆粒到達(dá)液滴分-位置處檢測根據(jù)表示連續(xù)的流體流中所包含的顆粒的瞬間之間的時間消，的估計值的滴落延遲設(shè)定，所述方法包括(a)通過沿向前的方向引導(dǎo)照射射束沿射束軸線穿過透鏡系統(tǒng)而照射-個所述獨立液滴流中的液滴，從而產(chǎn)生由包含在所述液滴中的顆粒發(fā)出'任何熒光發(fā)射；(b)使用所述透鏡系統(tǒng)收集一些熒光光線并且沿射束軸線沿向后的方引導(dǎo)所述熒光光線；(c)檢測所收集的熒光光線中至少一些并產(chǎn)生表示所檢測的光線的輸信號；以及分析所述輸出信號并且根據(jù)所述分析自動化地調(diào)節(jié)以下至少一項的控裝置(1)滴落延遲設(shè)定；以及(2)所述電荷組中電荷的幅度。X2'.Xl'所述的方法，其中，所述調(diào)節(jié)步驟包括作為所檢測的熒光發(fā)與應(yīng)由具有所需容量的液滴產(chǎn)生的熒光發(fā)射之間差異的函數(shù)調(diào)節(jié)所述滴延遲設(shè)定。X3'.Xl'所述的方法，其中，所述調(diào)節(jié)步驟包括作為為包含熒光顆粒液滴所檢測的熒光發(fā)射的平均峰值強(qiáng)度中變化的函數(shù)調(diào)節(jié)所述電荷組中荷的幅度。X4'.Xl'所述的方法，其中，所述照射步驟包括使用纖維光纜將來自光源的光線引導(dǎo)到鄰近所述分揀液滴流的位置。X5'.Xl'所述的方法，其中，通過一對充電的偏轉(zhuǎn)板產(chǎn)生電場，并且射步驟包括當(dāng)所述液滴在所述偏轉(zhuǎn)板之間穿過時照射所述液滴。X6'.X5'所述的方法，其中，至少一個偏轉(zhuǎn)板由電絕緣支承物支承，且照射步驟包括在所述液滴穿過所述電場時通過支承物中的孔照射所述.滴。X7'.xr所述的方法，還包括使用光源在詢問位置處照射顆粒。X8'.Xl'所述的方法，還包括執(zhí)行用于所述兩個或多個獨立液滴流的剩余部分的步驟(a)-(c)，并且步驟(d)還包括分析各個輸出信號并且自動化地調(diào)節(jié)以下至少一項(l)作為所檢測的熒光發(fā)射與應(yīng)由具有所需容量的液滴產(chǎn)生的熒光發(fā)射之間差異的函數(shù)的滴落延遲設(shè)定；(2)作為為包含熒光顆粒的液滴所檢測的熒光發(fā)射的平均峰值強(qiáng)度中變化的函數(shù)的節(jié)所述電荷組中電荷的幅度。X9'.X8'所述的方法，其中，通過一對充電的偏轉(zhuǎn)板產(chǎn)生電場，并且照射步驟包括當(dāng)所迷液滴在所述偏轉(zhuǎn)板之間穿過時照射所迷液滴。XIO'.X9'所述的方法，其中，至少一個偏轉(zhuǎn)板由電絕緣支承物支承，并且照射步驟包括在所述液滴穿過所述電場時通過支承物中的孔照射所述液滴。Y'.測試流校準(zhǔn)方法Yl'.用于連續(xù)地校驗流式細(xì)胞計數(shù)器中適當(dāng)分揀刻度的方法，當(dāng)在液滴分裂位置由連續(xù)流體流構(gòu)成時所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器選擇性地向多個液滴施加或不施加一組一個或多個電荷中的一個，并且靜電地將所述液滴分揀到兩個或多個獨立液滴流中，取決于所述液滴的所需容量為每個液滴選擇的電荷，在流式細(xì)胞計數(shù)器的詢問位置和所述顆粒到達(dá)液滴分裂位置處檢測根據(jù)表示連續(xù)的流體流中所包含的顆粒的瞬間之間的時間消釋的估計值的滴落延遲設(shè)定，所述方法包括選捧估計其包含所述顆粒的可能性基本為零的液滴；向所選擇的液滴施加所述電荷組的一個電荷，以便于形成所選擇液滴以外的測試流；照射所述測試流中的液滴；以及檢測由所選擇的液滴中的任何顆粒發(fā)出或散射的任何光線。Y2'.Yl'所述的方法，還包括如果檢測步驟中檢測的光線超過閾值水平的話，調(diào)節(jié)所述滴落延遲設(shè)定；Y3'.Y2'所述的方法，其中，自動地執(zhí)行所述調(diào)節(jié)步驟。Y4'.Yl'所述的方法，其中，在所述充電步驟施加的電荷是中性電荷。Y5'.Yl'所述的方法，其中，使用外照射傳感器執(zhí)行照射步驟和檢測步驟。Z'.分揀校正系統(tǒng)Zl'.—種用于液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器所分揀系統(tǒng)校正系統(tǒng)，包括充電元件，用于當(dāng)所述液滴由液滴分裂位置處的連續(xù)流體流構(gòu)成時選擇性地向液滴流中的每個液滴施加來自于一組電荷中的一個電荷；充電元件下游的一對充電偏轉(zhuǎn)板，被布置得用于使得液滴穿過所述偏轉(zhuǎn)板之間以便于依照其電荷分揀所述液滴；以及清除殘損物系統(tǒng)，包括以下元件中的至少一個(l)用于從充電元件中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)；以及(2)用于從偏轉(zhuǎn)板中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)。Z2'.Zl'所述的系統(tǒng)，其中，所述清除殘損物系統(tǒng)包括元件(1)和元件(2)。Z3'.Zl'所述的系統(tǒng)，其中，所述清除殘損物系統(tǒng)適于在所述處理器確定來自于偏離液滴的殘損物妨礙了液滴分揀時由處理器自動地啟動。Z4'，Zl'所述的系統(tǒng)，其中，所述清除殘損物系統(tǒng)包括元件(1)，并且元件(1)的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)包括具有鄰近所述充電元件的開口的真空通路以便于將殘損物真空吸離所述充電元件。Z5'.Zl'所述的系統(tǒng)，其中，所述清除殘損物系統(tǒng)包括元件(2)，并且元件(2)的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)包括具有開口的空氣通路，通過所述空氣通路輸送壓縮空氣以便于將殘損物吹離所述偏轉(zhuǎn)板。Z6'，一種操作液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器系統(tǒng)的方法，所述方法包括使用充電元件將來自于一組電荷中的一個電荷選擇性地施加于作為由液滴分裂位置處的連續(xù)流體流構(gòu)成的液滴的液滴流中的每個液滴；使得所述液滴穿過充電元件下游的一對充電偏轉(zhuǎn)板之間以便于依照其電荷分揀所述液滴；360使用處理器判定殘損物是否妨礙液滴分揀；以及如果處理器判定殘損物妨礙液滴分揀，則在處理器的控制下使用清除殘損物系統(tǒng)去除所述殘損物，所述清除殘損物系統(tǒng)包括以下元件中的至少一個(1)用于從充電元件中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)；以及(2)用于從偏轉(zhuǎn)板中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)。權(quán)利的保留本申請人明確保留在任何指定國家中關(guān)于歸檔的修正權(quán)利要求和附加和/或分案申請的所有權(quán)利，從而追訴涉及以上指定的發(fā)明方面所涉及的權(quán)利要求和說明書中所述或附圖中所示的其它主題。權(quán)利要求1.一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。2.—種利用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆豐立的顆津立混合物的方法，所述方法包4舌輸送包含所述顆粒的流體；使流體形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對流體流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略在流體流中分揀顆粒以提供包含所需顆粒的至少一個群組；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。3.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏南到y(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體流的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體流、形成包含所述顆粒的液滴以及根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；所述液滴包括分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、分別都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴、以及分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。4.一種分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒ǎ龇椒ò?舌輸送包含所述顆粒的流體流；形成包含所述顆粒的液滴；根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組，所述液滴包括分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、分別都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴、以及分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在至少一個液滴群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。5.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含X和Y精細(xì)胞的流體流的可變速流體輸送系統(tǒng)；流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，該流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于(1)接收所述流體流和形成包含所述顆粒的液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個x精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴，(2)從所述第二和第三液滴分揀所述第一液滴，(3)收集所述第一液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組，以及(4)確定在所述至少一個群組中的X精細(xì)胞的量；以及控制裝置，該控制裝置響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)i殳備接收的指令根據(jù)所確定的在所述至少一個群組中的X精細(xì)胞的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的X細(xì)胞的總量來改變流體被輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的速度。6.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流體流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述第二和第三液滴分揀所述第一液滴；收集所述第一液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組；確定在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)胞的量；以及根據(jù)所確定的在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)胞的量相對于在所述笫一、第二和第三液滴中的X細(xì)胞的總量來改變流體被輸送到所述第一位置的速度。7.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含X和Y精細(xì)胞的流體流的可變速流體輸送系統(tǒng)；流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，該流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于(1)接收所述流體流和形成包含所述顆粒的液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個笫三液滴，(2)從所述第二液滴分揀所述笫一和第三液滴，(3)收集所迷第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組，以及(4)確定在至少一個群組中的Y精細(xì)胞的量；以及控制裝置，該控制裝置響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的指令根據(jù)所確定的Y精細(xì)胞在所述至少一個群組中的量來改變流體被輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的速度。8.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流體流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述第二液滴分揀所迷第一和第三液滴；收集所述第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組；確定在所述至少一個群組中收集的Y精細(xì)胞的量；以及根據(jù)所確定的在所述至少一個群組中收集的Y精細(xì)胞的量來改變流體-故輸送到所述第一位置的速度。9.一種利用流式細(xì)胞術(shù)分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流體流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述第二液滴分揀所述第一和第三液滴；收集所述第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組。10.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述隨時間變化的模擬輸出相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器分析和分類數(shù)字信息，并且根據(jù)被分析和分類的數(shù)字信息為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號。11.一種利用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆凈立的顆豐立混合物的方法，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體；使流體形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對流體流中的顆粒進(jìn)行檢測；根據(jù)分揀策略在流體流中分揀顆粒，以提供包含所需顆粒的至少一個群組；將來自于所述流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)的模擬輸出轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的數(shù)字信息，其中模擬輸出表示特征A或者特征B;以及分析和分類數(shù)字信息并且根據(jù)被分析和分類的數(shù)字信息分揀顆粒。12.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述隨時間變化的模擬輸出相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器從所述數(shù)字信息確定所述隨時間變化的模擬輸出的背景特征；根據(jù)所確定的背景特征檢測由所述數(shù)字信息表示的波形脈沖；以及根據(jù)所檢測的波形脈沖為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號。13.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述隨時間變化的模擬輸出相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;以及數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器從數(shù)字信息產(chǎn)生初始識別參數(shù)，根據(jù)初始識別參數(shù)識別數(shù)字信息，以及根據(jù)識別到的數(shù)字信息為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號。14.一種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所迷系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；和用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的包括一系列波形脈沖的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述波形脈沖相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述波形脈沖和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;以及分析數(shù)字信息并且根據(jù)被分析的相應(yīng)數(shù)字信息分揀信號的數(shù)字信號處理器。15.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述隨時間變化的模擬輸出相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;從數(shù)字信息抽取特征并且根據(jù)被抽取的特征為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號的數(shù)字信號處理器。16.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及才艮據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所迷分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的包括波形脈沖的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述波形脈沖相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述波形脈沖和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器以表示特征A或者特征B的形式識別數(shù)字信息，并且根據(jù)識別到的數(shù)字信息為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號。17.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包4舌用于將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置并且使得流體流在第二位置分裂成液滴的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備利用流式細(xì)胞術(shù)根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類并且根據(jù)包含在液滴中的顆粒的分類分揀所述液滴；所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡，所述光學(xué)系統(tǒng)用于沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射在向后的方向上沿著所述光束軸線引導(dǎo)。18.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的方法，所述方法包4舌(a)將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置并且使得流體流在第二位置分裂成液滴；(b)利用流式細(xì)胞術(shù)根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類并且根據(jù)包含在液滴中的顆粒的分類分揀所述液滴，所述流式細(xì)胞術(shù)包括沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射在向后的方向上沿著所述光束軸線引導(dǎo)。19.一種利用染色體DNA特征對動物精細(xì)胞進(jìn)行分類的設(shè)備，包括用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置和用于在所述流體流到達(dá)所述第一位置之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向的噴嘴系統(tǒng)；外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)用于沿著在所述笫一位置與所述流體流相交的射束軸線在向前的方向上以與所述流體流成非零的入射角引導(dǎo)電磁輻射束以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射在向后的方向上沿著所述光束軸線引導(dǎo);能夠檢測所述發(fā)射的至少一些并且將所述發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號的光檢測器；以及用于處理所述電信號和根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類的處理器。20.—種利用染色體DNA特征對動物精細(xì)胞進(jìn)行分類的方法，所述方法包括下列步驟(a)將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置和在所述流體流到達(dá)所述第一位置之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向；(b)沿著在所述第一位置與所述流體流相交的射束軸線在向前的方向上以與所述流體流成非零的入射角引導(dǎo)電磁輻射束以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射在向后的方向上沿著所述光束軸線引導(dǎo)；(c)檢測所述發(fā)射的至少一些并且將所述發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及(d)處理所述電信號和根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類。21.—種用于分析在流體流中的細(xì)胞的DNA特征的設(shè)備，所述每一個細(xì)胞包括在流體流流動方向上具有一定長度的DNA區(qū)域，所述設(shè)備包括用于沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射束以使射束與所述流體流相交的外照射光學(xué)系統(tǒng)；所述光學(xué)系統(tǒng)包括在所述射束軸線上的聚焦透鏡，所述聚焦透鏡用于以基本橢圓形斑點的形式將射束聚焦在流體流上，并且所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度，所述細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射在向后的方向上沿著所述光束軸線引導(dǎo)，包括從表示所述DNA特征的所述DNA區(qū)域發(fā)射；在聚焦透鏡后面的光檢測器，所迷光檢測器用于檢測來自于所述DNA區(qū)域的所述發(fā)射的至少一些和將來自于所述DNA區(qū)域的所述發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及用于處理所述電信號、確定所述DNA特征和根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類的系統(tǒng)。22.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的設(shè)備，所述每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的方向上具有一定長度，所述設(shè)備包括用于以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射束聚焦在流體流上的光學(xué)系統(tǒng)，所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所述精細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從精細(xì)胞發(fā)出，包括從表示所迷區(qū)域的染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)射；光檢測器，所述光檢測器用于檢測來自于所述染色體區(qū)域的所述發(fā)射的至少一些和將來自于所述染色體區(qū)域的所述發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體特征的電信號；以及用于處理所述電信號、確定所述染色體特征和根據(jù)所述染色體特征對精細(xì)胞進(jìn)行分類的處理器。23.—種分析在流體流中的細(xì)胞的DNA特征的方法，每一個細(xì)胞包括在流體流的方向上具有一定長度的DNA區(qū)域，所述方法包括沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射束以使射束與所述流體流相交；以基本橢圓形斑點的形式將所述電磁輻射束聚焦在流體流上，并且所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度，所述細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射在向后的方向上沿著所述光束軸線引導(dǎo)；檢測所述發(fā)射和將所述發(fā)射轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及處理所述電信號，包括區(qū)分來自于從精子頭部的DNA區(qū)域的發(fā)射的電信號和來自于從精細(xì)胞的其它區(qū)域的發(fā)射的電信號，以及根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類。24.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的方法，所迷每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的方向上具有一定長度，所述方法包括以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著相對于流體流的方向基本以直角延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所述精細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從精細(xì)胞發(fā)出，包括從表示所述區(qū)域的染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)射；檢測來自于所述染色體區(qū)域的發(fā)射的至少一些和將來自于所述染色體區(qū)域的發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體特征的電信號；以及處理所述電信號，包括確定所述染色體特征；和根據(jù)所述染色體特征對精細(xì)胞進(jìn)行分類。25.—種根據(jù)細(xì)胞的染色體DNA特征對精細(xì)胞進(jìn)行分類和分揀的設(shè)備，所迷設(shè)備包括用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置和用于使流體流在第二位置分裂成液滴的噴嘴系統(tǒng)，所述噴嘴系統(tǒng)包括噴嘴，所述噴嘴具有一內(nèi)表面，該內(nèi)表面構(gòu)造成能夠在細(xì)胞到達(dá)所述第一位置之前在細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向；光學(xué)系統(tǒng)，所述光學(xué)系統(tǒng)用于引導(dǎo)電磁輻射束在所述第一位置與流體流相交，以使流體流中的細(xì)胞穿過所述射束，導(dǎo)致電磁輻射從細(xì)胞發(fā)射；僅一個用于檢測所述發(fā)射的至少一些和將所述發(fā)射的至少一些轉(zhuǎn)換成電信號的光檢測器；以及用于根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類和用于根據(jù)被包含在液滴中的細(xì)胞的分類分揀所述液滴的系統(tǒng)。26.—種用在根據(jù)染色體成分分揀在流體流中的動物精細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的噴嘴，所述噴嘴包括具有內(nèi)表面和所述流體流適于流過的噴嘴孔的噴嘴主體；所述噴嘴的所述內(nèi)表面包括用于在朝向所述噴嘴孔的下游方向上使得所述流體流的速度逐漸增加的第一、第二和第三軸向錐形區(qū)域，所述區(qū)域中的至少兩個具有在不同方向上定向的基本為橢圓形的橫截面形狀，以在所述流體流上施加扭力，以趨于將精細(xì)胞帶到所需取向。27.—種用于在流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中為動物精細(xì)胞定向的方法，所述方法包括將包含精細(xì)胞的流體引入到流體流中；在20至40psi的范圍內(nèi)的壓力下引導(dǎo)包含所述精細(xì)胞的流體流通過噴嘴，所述噴嘴具有一個或者多個用于在朝向噴嘴孔的下游方向上增加所述流體流的速度的錐形區(qū)域，所述噴嘴孔的直徑在50至70微米的范圍內(nèi)，所述錐形區(qū)域的一個或者多個具有基本為橢圓形的橫截面形狀，以當(dāng)細(xì)胞以每秒30000至50000個精細(xì)胞的速度通過所述孔時在所述流體流上施加扭力，以趨于將精細(xì)胞帶到所需取向。28.—種用在分析在流體流中的顆粒的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的噴嘴，所述流體流包括包圍包含所述顆粒的芯流的鞘流，所述噴嘴包括噴嘴，所述噴嘴具有為所述流體流限定流動路徑的內(nèi)表面和用于使得流體流從噴嘴排出的孔；以及在噴嘴中的在所述孔上游位于所述流動路徑中的擋板，所述擋板用于在流體流沿著所述流動路徑移動時偏轉(zhuǎn)流體流，擋板和噴嘴的內(nèi)表面被構(gòu)造成使得顆粒在離開孔時處于所需取向。29.—種用于在流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中為顆粒定向的方法，所述方法包括使得流體流流過噴嘴，該流體流具有包含所述顆粒的樣本流體的芯流和包圍所述芯流的鞘流體的鞘流，所述噴嘴具有從噴嘴的上游部分到位于噴嘴的下游端的孔基本呈錐形的內(nèi)表面；以及當(dāng)芯流流過噴嘴時偏轉(zhuǎn)芯流，以使得芯流中的顆粒受到流體動力的作用而趨于使得顆粒呈現(xiàn)所需取向。30.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀到多個精細(xì)胞群組中的一個中；從所述多個精細(xì)胞群組中的一個獲得具有所需DNA特征的一定量精細(xì)胞，所述量的精細(xì)胞被包含在一定量的收集流體中；使得所述一定量的收集流體受到第一離心分離處理，以形成第一精細(xì)胞丸和覆蓋第一精細(xì)胞丸的上層清液；使得第一丸與上層清液分離；使得上層清液經(jīng)受附加的離心分離，以形成在第一離心分離后保留在上層清液中的第二精細(xì)胞丸；以及將一定量的再懸浮流體加入到第一和第二精細(xì)胞丸，以獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的懸浮液，所述再懸浮流體的量選擇成得到在懸浮液中的所需濃度的精細(xì)胞。31.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元用于基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元，同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)精細(xì)胞的公共供給源；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元的操作的公共輸入裝置；(5)用于接收和處理來自于單元的信息、以^更能對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變向一個或者多個流式細(xì)胞術(shù)單元輸送流體的速度，這些因素包括(1)具有所需DNA特征的第一分揀精細(xì)胞群組的純度；以及(2)在第二分揀群組中的具有所迷所需DNA特征的精細(xì)胞的量。32.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元用于基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元，同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)精細(xì)胞的公共供給源；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元的操作的公共輸入裝置；(5)用于接收和處理來自于單元的信息、以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所迷流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；以及利用一個或者多個模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于每一個流式細(xì)胞術(shù)單元的隨時間變化的輸出進(jìn)行同步釆樣，并且提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示所述特定DNA特征。33.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟利用流式細(xì)胞術(shù)基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀成不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元用于基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；搮作所述單元，同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)精細(xì)胞的公共供給源；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元的操作的公共輸入裝置；(5)用于接收和處理來自于單元的信息、以對一個單元相對于另一個單元的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；從一個或者多個分揀精細(xì)胞群組獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8。C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在基本所述保溫溫度下保持小于60分4中的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-4(TC的溫度。34.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；利用DNA選擇性熒光染料使精細(xì)胞著色；利用電磁輻射照射精細(xì)胞，以使得DNA選擇性熒光染料發(fā)出熒光；檢測由精細(xì)胞發(fā)出的熒光；分析由精細(xì)胞發(fā)出的熒光，以確定精細(xì)胞的一個或者多個特定的DNA特征；基于所述一個或者多個特定的DNA特征將精細(xì)胞分揀成多個精細(xì)胞群組；從所述多個精細(xì)胞群組中的一個獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；以及使得所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻；其中，在收集精細(xì)胞后在小于約12小時的時間內(nèi)完成過度冷卻的步驟。35.—種根據(jù)染色體成分分揀活精細(xì)胞的方法，包括(a)將DNA選擇性熒光染料加入到活精細(xì)胞供給；(b)使得包含所述精細(xì)胞的樣本流體和鞘流體流過趨于使得精細(xì)胞轉(zhuǎn)動到所需取向的定向噴嘴，所述樣本流體和鞘流體以流體流的形式離開噴嘴，所述流體流包括由樣本流體和精細(xì)胞形成的芯流和包圍芯流的鞘流體流；(c)為噴嘴提供聲能，以使得流體流在噴嘴下游的液滴分裂位置處分裂成液滴流；(d)引導(dǎo)電磁輻射束在液滴分裂位置上游的詢問位置處與流體流相交，以激發(fā)在精細(xì)胞中的熒光染料，從而使得精細(xì)胞發(fā)出熒光；(e)利用光檢測器檢測發(fā)出的熒光，該光檢測器輸出隨時間改變的模擬信號來表示被檢測的熒光發(fā)射的強(qiáng)度；(f)對所述隨時間改變的模擬信號進(jìn)行電子處理，以確定多個精細(xì)胞的染色體成分；(g)根據(jù)包含在液滴中的精細(xì)胞的染色體成分選擇性地為流體流施加靜電荷，以選擇性地為液滴施加電荷或者不施加電荷；(h)利用電場根據(jù)液滴的電荷使得液滴偏轉(zhuǎn)，從而使得包含在具有相同電荷的液滴中精細(xì)胞與包含在具有不同電荷的液滴中精細(xì)胞分離；以及(i)以至少每秒5000個精細(xì)胞的速度收集至少一個活精細(xì)胞群組。36.—種對用于分揀的細(xì)胞群組的著色的一組條件進(jìn)行評估的程序，所述群組包括第一類型和第二類型的細(xì)胞，所述程序包括(a)在一組著色條件下利用熒光染料使得細(xì)胞群組的一部分著色；(b)當(dāng)著色的細(xì)胞以速度R通過流式細(xì)胞計的詢問位置時使得著色細(xì)胞暴露在電磁輻射下；(c)確定暴露的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征；(d)利用確定的熒光特征將暴露的細(xì)胞分類成兩個或者多個細(xì)胞的子群組，其中一個子群組是第一細(xì)胞類型的富集子群組；(e)確定富集子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的變化系數(shù)，以提供對著色條件的分揀效率的指示；以及(f)確定是否改變細(xì)胞要被著色的任何著色條件或者被著色的細(xì)胞要通過流式細(xì)胞計的詢問位置的速度R,以提高分揀效率。37.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；分揀精細(xì)胞以獲得具有所需特征的一定量的精細(xì)胞，所述一定量的被分揀的精細(xì)胞被包含在其中具有精細(xì)胞第一濃度的第一體積的流體中；以及使得精細(xì)胞經(jīng)受濃縮步驟，其中所述精細(xì)胞的濃度增加到大于所述第一濃度的第二濃度；其中，所述濃縮步驟包括使得所述第一體積的流體的至少一部分在第一過濾器上的壓力差小于20英寸汞柱下流過第一過濾器，所述過濾器具有足夠小以阻止所述精細(xì)胞通過的過濾孔，并且保持包含所述精細(xì)胞的第二體積的未過濾的流體。38.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分揀的多通道系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元通過利用電磁輻射束詢問包含所述顆粒的流體流來對顆?；旌衔镏械念w粒的期望群組進(jìn)行分揀；所述單元共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)顆粒的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息的公共處理器；以及(6)用于將包含所述顆粒的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)。39.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分揀的多通道方法，所述方法包括提供多個流式細(xì)胞術(shù)單元；操作所述流式細(xì)胞術(shù)單元以進(jìn)行多個流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括形成獨立的流體流，每一個流體流包含顆?；旌衔铮约巴ㄟ^利用電磁輻射束詢問所述流體流來對顆?；旌衔镏械念w粒的期望群組進(jìn)行分揀；以及在進(jìn)行所述操作時共享下列元件中的至少一個(1)用于所述流體流的公共顆粒供給；(2)用于所述電磁輻射束的電磁輻射的公共源；(3)公共操作控制輸入；(4)用于接收和處理來自于單元的信息的公共處理器；(5)用于將流體輸送到所述流體流的公共系統(tǒng)；以及(6)用于所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共殼體。40.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分類的多通道系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元通過利用電磁輻射束詢問包含所述顆粒的流體流來對顆?；旌衔镏械念w粒進(jìn)行分類；所述單元共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)顆粒的公共供給；(2)公共殼體；(3)用于控制單元操作的公共輸入；(4)用于接收和處理來自于單元的信息的公共處理器；以及(5)用于將包含所述顆粒的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)。41.一種才艮據(jù)顆粒的一個或者多個特征對顆粒進(jìn)行分類的多通道方法，所述方法包括提供多個流式細(xì)胞術(shù)單元；操作所述流式細(xì)胞術(shù)單元以進(jìn)行多個流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括形成分離的流體流，每個流體流都包含顆粒混合物，并且通過利用電磁輻射束詢問所述流體流來對所述顆?；旌衔镏械念w粒進(jìn)行分類；以及共享以下元件中的至少一個以進(jìn)行所述操作(1)用于所述流體流的顆粒的公共供給；(2)公共操作控制輸入；(3)用于接收和處理來自于單元的信息的^共處理器；(4)用于將流體輸送到所述流體流的/>共系統(tǒng)；以及(5)用于所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共殼體。42.使用包括三個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元的系統(tǒng)分揀顆粒的方法，每個所述單元都用于通過使用光束詢問包含所述顆粒的流體流來從顆?；旌衔镏蟹謷w粒的所需群組，所述方法包括產(chǎn)生單一激光束；將所述單一激光束分裂為三個或多個光束并且將所述光束引導(dǎo)到流式細(xì)胞術(shù)單元的光學(xué)系統(tǒng)中；以及操作流式細(xì)胞術(shù)單元以分揀顆粒。43.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。44.一種利用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆術(shù)立的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體；使流體形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對流體流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略在流體流中分揀顆粒，以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。45.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏南到y(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體流的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體流、形成包含所述顆粒的液滴以及根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；所述液滴包括分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、分別都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴、以及分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制分揀系統(tǒng)改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所迷至少一個液滴群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所迷流體流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。46.—種分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體流；形成包含所述顆粒的液滴；根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組，所述液滴包括分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的笫一液滴、分別都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴、以及分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所迷至少一個液滴群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。47.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏南到y(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體流的可變速流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體流、形成包含所述顆粒的液滴以及根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；所述液滴包括分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的笫一液滴、分別都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的第二液滴、以及分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的笫三液滴；以及根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息而控制流體輸送系統(tǒng)以改變從流體輸送系統(tǒng)輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所迷至少一個液滴群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。48.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的方法，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體流；形成包含所述顆粒的液滴；根據(jù)分揀策略將所述液滴分揀成不同的群組，所述液滴包括分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒的第一液滴、分別都包含具有特征B的一種或者多種顆粒的笫二液滴、以及分別都包含具有特征A的一種或者多種顆粒和具有特征B的一種或者多種顆粒的第三液滴；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個液滴群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個液滴群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆l立的49.一種用于分揀X和Y精細(xì)胞的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含X和Y精細(xì)胞的流體流的可變速流體輸送系統(tǒng)；流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，該流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于(1)接收所述流體流和形成包含所述顆粒的液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴，(2)從所述第二和第三液滴分揀所述第一液滴，(3)收集所述第一液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組，以及(4)確定在所述至少一個群組中的X精細(xì)胞的量；以及控制裝置，該控制裝置響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的指令根據(jù)所確定的在所述至少一個群組中的X精細(xì)胞的量相對于在所述第一、第二和第三液滴中的X細(xì)胞的總量來改變流體被輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的速度。50.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流體流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述第二和第三液滴分揀所述第一液滴；收集所述第一液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組；確定在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)胞的量；以及根據(jù)所確定的在所述至少一個群組中收集的X精細(xì)胞的量相對于在所述第一、第二和笫三液滴中的X細(xì)胞的總量來改變流體被輸送到所述第一位置的速度。51.用于分揀X和Y精細(xì)胞的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含X和Y精細(xì)胞的流體流的可變速流體輸送系統(tǒng)；流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，該流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于(1)接收所迷流體流和形成包含所述顆粒的液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的笫一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴，(2)從所述第二液滴分揀所述第一和第三液滴，(3)收集所述第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組，以及U)確定在所述至少一個群組中的Y精細(xì)胞的量；以及控制裝置，該控制裝置響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的指令根據(jù)所確定的在所述至少一個群組中的Y精細(xì)胞的量來改變流體被輸送到流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的速度。52.—種用于分揀X和Y精細(xì)胞的方法，所述方法包括將包含X和Y精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置并且使得所述流體流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞的第一液滴、分別都包含一個或者多個Y精細(xì)胞的第二液滴、以及分別都包含一個或者多個X精細(xì)胞和一個或者多個Y精細(xì)胞的多個第三液滴；從所述笫二液滴分揀所述第一和第三液滴；收集所述第一和第三液滴以提供X精細(xì)胞的至少一個群組；確定在所述至少一個群組中收集的Y精細(xì)胞的量；以及根據(jù)所確定的在所述至少一個群組中收集的Y精細(xì)胞的量來改變流體被輸送到所述第一位置的速度。53.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及包含激光器的分揀系統(tǒng)，該激光器用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略熔化所述流體流中所選擇的顆粒，以提供至少一個包含所需顆粒的群組，其特征在于根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息來控制激光器以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化的具有特征A的顆粒或者未熔化的具有特征B的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。54.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒ǎ龇椒òㄝ斔桶鲱w粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流體流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略通過熔化所選擇的顆粒來分揀所迷流體流中的顆粒，以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變分揀策略或改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化的具有特征A的顆?；蛘呶慈刍木哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。55.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及包含激光器的分揀系統(tǒng)，該激光器用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略熔化所述流體流中所選擇的顆粒，以提供至少一個包含所需顆粒的群組，其特征在于根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息來控制激光器以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(l)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化的具有特征A的顆?；蛘呶慈刍木哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。56.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包括輸送包含所迷顆粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流體流中的顆粒分類；流中的顆粒，以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的未熔化的具有特征A的顆粒或者未熔化的具有特征B的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。57.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略在所述流體流中分揀所選擇的顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的流體切換分揀系統(tǒng)，其特征在于根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息來控制流體切換分揀系統(tǒng)以改變其分揀策略或者控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。58.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包4舌輸送包含所述顆粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略通過使得所選擇的顆粒轉(zhuǎn)向來分揀所述流體流中的顆粒，以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變分揀策略或者改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所迷至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。59.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于根據(jù)所述分類在所述流體流中分揀所選擇的顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的流體切換分揀系統(tǒng)，其特征在于根據(jù)下列因素中的至少一個響應(yīng)于從流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備接收的信息來控制流體輸送系統(tǒng)以改變輸送流體的速度的控制裝置，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的總量。60.使用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包括輸送包含所述顆粒的流體；使所述流體形成流體流以及根據(jù)所述特征使用流式細(xì)胞術(shù)對所述流體流中的顆粒分類；根據(jù)所述分類通過使得所選擇的顆粒轉(zhuǎn)向來分揀所述流體流中的顆粒，以提供至少一個包含所需顆粒的群組；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變輸送流體的速度，這些因素包括(1)所述至少一個群組關(guān)于具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的純度；以及(2)在所述至少一個群組中的具有特征A的顆粒或者具有特征B的顆粒的量相對于在所述流體流中的具有特征A的顆?；蛘呔哂刑卣鰾的顆粒的總量。61.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述隨時間變化的模擬輸出相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器分析和分類數(shù)字信息，并且根據(jù)被分析和分類的數(shù)字信息為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號。62.—種利用流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏姆椒?，所述方法包4舌輸送包含所述顆粒的流體；使流體形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)檢測流體流中的顆粒；根據(jù)分揀策略在流體流中分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組；將來自于所述流式細(xì)胞術(shù)的模擬輸出轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的數(shù)字信息，其中模擬輸出表示特征A或者特征B;以及分析和分類數(shù)字信息并且根據(jù)被分析和分類的數(shù)字信息分揀顆粒63.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所迷顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及用于根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供包含所需顆粒的至少一個群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所迷流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述隨時間變化的模擬輸出相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器從所述數(shù)字信息確定所述隨時間變化的模擬輸出的背景特征；根據(jù)所確定的背景特征檢測由所述數(shù)字信息表示的波形脈沖；以及根據(jù)檢測到的波形脈沖為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號。64.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所迷分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒、以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所迷流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述隨時間變化的模擬輸出相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;以及數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信息處理器從數(shù)字信息產(chǎn)生初始識別參數(shù)，根據(jù)初始識別參數(shù)識別數(shù)字信息，以及根據(jù)識別到的數(shù)字信息為所述分揀系統(tǒng)提供分揀信號。65.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)l包術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；和用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的包括一系列波形脈沖的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并且提供包括與所述波形脈沖相應(yīng)的數(shù)字信息的輸出，其中所述波形脈沖和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;以及數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器分析數(shù)字信息并且根據(jù)被分析的相應(yīng)的數(shù)字信息分揀信號。66.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆粒混合物的流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所迷顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于一模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;一數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器從數(shù)字信息抽取特征，并為所述分揀系統(tǒng)提供根據(jù)被抽取的特征的分揀信號。67.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于一模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，該模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備的包括波形脈沖的隨時間變化的模擬輸出進(jìn)行同步采樣，并提供包括對應(yīng)于所述波形脈沖的數(shù)字信息的輸出，其中所述波形脈沖和相應(yīng)的數(shù)字信息表示特征A或者特征B;一數(shù)字信號處理器，該數(shù)字信號處理器以表示特征A或者特征B的形式識別數(shù)字信息，并為所述分揀系統(tǒng)提供根據(jù)被識別的數(shù)字信息的分揀信號。68.—種與在分裂位置處分裂為液滴的連續(xù)流體流結(jié)合使用的設(shè)備，所述設(shè)備包括布置在所述流體流的一側(cè)上以照射所述流體流的光源；布置在所述流體流的另一側(cè)上、適于沿著基本平行于所述流體流的軸線取向的線性光敏元件陣列，所述光敏元件陣列適于檢測穿過所述流體流的、來自于所述光源的光，所述光敏元件陣列適于提供對應(yīng)于所檢測到的光的輸出信號；用于接收輸出信號并提供與所述分裂位置的位置相對應(yīng)的位置信號的控制裝置。69.—種用于分揀包括具有特征A的顆粒和具有特征B的顆粒的顆?；旌衔锏牧魇郊?xì)胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括用于輸送包含所述顆粒的流體的流體輸送系統(tǒng)；用于接收所述流體、使其形成流體流以及根據(jù)所述特征利用流式細(xì)胞術(shù)對顆粒分類的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備；以及根據(jù)所述分類并根據(jù)分揀策略分揀顆粒以提供至少一個包含所需顆粒的群組的分揀系統(tǒng)，其特征在于布置在所述流體流的一側(cè)上第二位置處以照射所述流體流的光源；布置在所述流體流的另一側(cè)上第二位置處、適于沿著基本平行于所述流體流的軸線取向的線性光敏元件陣列，所述光敏元件陣列適于檢測穿過所述流體流的、來自于所述光源的光，所述光敏元件陣列適于提供對應(yīng)于所檢測的光的輸出信號；用于接收表示第二位置的位置的輸出信號的控制裝置，所述控制裝置根據(jù)輸出信號改變所述換能器的搮作。70.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的設(shè)備，所述設(shè)備包括用于將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置，使得流體流在第二位置分裂成液滴的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備可利用流式細(xì)胞術(shù)工作以根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類，根據(jù)包含在液滴中的顆粒的分類分揀所述液滴；所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)。71.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的方法，所述方法包括將包含所述顆粒的流體流輸送到笫一位置，使得流體流在笫二位置分裂成液滴；利用流式細(xì)胞術(shù)根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類，根據(jù)包含在液滴中的顆粒的分類分揀所述液滴，所述流式細(xì)胞術(shù)包括沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過一聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)。72.—種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的設(shè)備，所述設(shè)備包括流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，該流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置，根據(jù)所述特征對顆粒進(jìn)行分類，根據(jù)所述分類將所述顆粒分揀到包含所需顆粒的至少一個群組中；以及用于熔化所述流體流中的顆粒的激光器，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所迷細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)。73，一種根據(jù)顆粒的一個或者多個特征分揀包含在流體流中的顆粒的方法，所述方法包括使用流式細(xì)胞術(shù)處理以根據(jù)所述特征對流體流中的顆粒進(jìn)行分類，根據(jù)所述顆粒的分類分揀所述顆粒；以及熔化所述流體流中的顆粒，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括沿著與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)。74.—種根據(jù)染色體DNA特征對精細(xì)胞進(jìn)行分揀的系統(tǒng)，包括流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，該流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于將包含所述細(xì)胞的流體流輸送到第一位置，并使所述流體流在第二位置處分裂為液滴，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備用于根據(jù)DNA特征對所述細(xì)胞進(jìn)行分類，根據(jù)包含在液滴中的細(xì)胞分類分揀所述液滴，所述流式細(xì)胞術(shù)i殳備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)。75.—種通過染色體DNA特征對動物精細(xì)胞進(jìn)行分揀的方法，所述方法包括下列步驟(a)將包含所述細(xì)胞的流體流輸送到第一位置，4吏得所述流體流在第二位置處分裂為液滴；(b)沿著在所述第一位置與所述流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)；(c)檢測所述輻射的至少一些，將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；(d)處理所述電信號，根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類；以及(e)根據(jù)包含在所述液滴中的細(xì)胞分類分揀所述液滴。76.—種通過染色體DNA特征分類動物精細(xì)胞的設(shè)備，所述設(shè)備包括噴嘴系統(tǒng)，該噴嘴系統(tǒng)用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置，用于在流體流到達(dá)所述第一位置之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向；外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)沿著在所述第一位置、以非零的入射角與所述流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射射束以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)；光檢測器，所述光檢測器用于檢測所述輻射的至少一些，將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及用于處理所述電信號并根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞分類的處理器。77.—種通過染色體DNA特征對動物精細(xì)胞進(jìn)行分類的方法，所述方法包括下列步驟(a)用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置，在流體流到達(dá)所述第一位置之前在精細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向；(b)沿著在所述第一位置、以非零的入射角與所迷流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射射束以使所述細(xì)胞穿過射束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)；(c)檢測所述輻射的至少一些，將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及(d)處理所述電信號，根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類。78.—種用于分析包含在流體流中的顆粒的設(shè)備，包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，該外照射光學(xué)系統(tǒng)用于沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射射束，所述射束軸線在相對于所述流體流的縱軸線傾斜的入射角下與所述流體流相交；所迷外照射光學(xué)系統(tǒng)包括所述射束軸線路徑上的、用于以斑點的形式將電f茲輻射射束聚焦在流體流上的聚焦透鏡，所述顆粒適于穿過所述斑點，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)；以及在聚焦透鏡后面的光檢測器，所述光檢測器用于檢測輻射的至少一些，將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成待處理的電信號以獲得與所述顆粒有關(guān)的信息。79.—種用于分析包含在流體流中的顆粒的方法，包括沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射射束，所述射束軸線在相對于所述流體流的縱軸線傾斜的入射角下與所述流體流相交；以斑點的形式將電》茲輻射射束聚焦在流體流上，所述顆粒適于穿過所述斑點，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)；檢測輻射的至少一些，將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示顆粒特征的電信號；以及處理所述電信號以獲得與所述特征有關(guān)的信息。80.—種分析在流體流中的細(xì)胞的DNA特征的設(shè)備，所述每一個細(xì)胞包括在流體流的流動方向上具有一定長度的DNA區(qū)域，所述設(shè)備包括用于沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射射束以使射束與所述流體流相交的外照射光學(xué)系統(tǒng)；所述光學(xué)系統(tǒng)包括在所迷射束軸線上的聚焦透鏡，所述聚焦透鏡以基本橢圃形斑點的形式將射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著與流體流的流動方向垂直延伸的長軸的長度和基本平^f于于流體流的流動方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度，所述細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)，包括從表示所迷DNA特征的所述DNA區(qū)域發(fā)射；在聚焦透鏡后面的光檢測器，所迷光檢測器用于檢測來自于所述DNA區(qū)域的輻射發(fā)射的至少一些并將其轉(zhuǎn)換成表示所迷DNA特征的電信號；以及用于處理所述電信號、識別所述DNA特征和根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞分類的系統(tǒng)。81.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的設(shè)備，所述每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的流動方向上具有一定長度，所述設(shè)備包括用于以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射射束聚焦在流體流上的光學(xué)系統(tǒng)，所述斑點具有沿著基本垂直于流體流的流動方向延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的流動方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所迷核的長度，所述精細(xì)胞適于穿過所迷斑點，導(dǎo)致從精細(xì)胞發(fā)出電磁輻射，包括從表示區(qū)域染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)出；光檢測器，所述光檢測器用于檢測來自于所述染色體區(qū)域的輻射的至少一些和將來自于所述染色體區(qū)域的輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體特征的電信號；以及用于處理所述電信號、識別所述染色體特征和根據(jù)所述染色體特征對精細(xì)胞分類的處理器。82.—種分析在流體流中的細(xì)胞的DNA特征的方法，每一個細(xì)胞包括在流體流的流動方向上具有一定長度的DNA區(qū)域，所述方法包括沿著射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)電磁輻射射束以使射束與所述流體流相交；以基本橢圓形斑點的形式將所述電磁輻射射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著垂直于流體流的流動方向延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的流動方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述DNA區(qū)域的長度，所述細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)；檢測所述輻射轉(zhuǎn)，將所述輻射轉(zhuǎn)換成表示所述DNA特征的電信號；以及處理所述電信號，包括區(qū)分來自精子頭部的DNA區(qū)域的輻射的電信號和來自精細(xì)胞的其它區(qū)域的輻射的電信號，以及根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞分類。83.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的方法，所述每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的流動方向上具有一定長度，所述方法包才舌用于以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著基本垂直于流體流的流動方向延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的流動方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所迷核的長度，所述精細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致精細(xì)胞發(fā)出電磁輻射，包括從表示區(qū)域染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)出的輻射；檢測來自于所述染色體區(qū)域的輻射的至少一些，將來自于所述染色體區(qū)域的輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體特征的電信號；處理所述電信號，包括識別所述染色體特征；和根據(jù)所述染色體特征對精細(xì)胞分類。84.—種4艮據(jù)細(xì)胞的染色體DNA特征對精細(xì)胞進(jìn)行分類和分揀的i殳備，所述設(shè)備包括用于將包含精細(xì)胞的流體流輸送到第一位置，使流體流在第二位置分裂成液滴的噴嘴系統(tǒng)，所述噴嘴系統(tǒng)包括噴嘴，所述噴嘴具有這樣構(gòu)造的內(nèi)表面，即，能夠在到達(dá)所迷第一位置之前在細(xì)胞上施加作用力以將它們帶到所需取向；光學(xué)系統(tǒng)，所述光學(xué)系統(tǒng)引導(dǎo)電磁輻射射束在所述第一位置與流體流相交以使流體流中的細(xì)胞穿過所述射束，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)出電磁輻射；僅一個用于檢測所述輻射的至少一些并將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成電信號的光檢測器；以及根據(jù)所述DNA特征對細(xì)胞進(jìn)行分類和根據(jù)被包含在液滴中的細(xì)胞的分類分揀所述液滴的系統(tǒng)。85.—種用在通過染色體成分在流體流中分揀動物精細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的噴嘴，所述噴嘴包括具有內(nèi)表面和所述流體流適于流過的孔的噴嘴主體；所迷噴嘴的所迷內(nèi)表面包括用于在朝向所述噴嘴孔的下游方向上使得所述流體流的速度逐漸增加的第一、第二和第三軸向錐形區(qū)域，所述區(qū)域述流體流上施加扭力，用以將精細(xì)胞帶到所需取向。86.—種用于在流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中為動物精細(xì)胞定向的方法，所述方法包括將包含精細(xì)胞的流體引入到流體流中；在20至40psi的壓力下引導(dǎo)包含所述精細(xì)胞的流體流通過噴嘴，所述噴嘴具有一個或者多個用于在朝向噴嘴孔的下游方向上增加所述流體流的速度的錐形區(qū)域，所述噴嘴孔的直徑在50至70微米的范圍內(nèi)，所述區(qū)域中一個或者多個具有基本為橢圓形的橫截面形狀，從而當(dāng)精細(xì)胞以每秒30000至50000個精細(xì)胞的速度通過所述孔時在所述流體流上施加扭力，用以將精細(xì)胞帶到所需取向。87.—種用于使用流式細(xì)胞術(shù)分揀顆粒的設(shè)備，包括用于沿向上的非豎直軌跡、通過噴嘴孔輸送包含所述顆粒的流體流的噴嘴系統(tǒng)；光學(xué)系統(tǒng)，所迷光學(xué)系統(tǒng)引導(dǎo)電磁輻射射束在所述第一位置與流體流相交，導(dǎo)致顆粒發(fā)出電磁輻射；用于檢測所述輻射的至少一些并將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述顆粒特征的電信號的光檢測器；用于處理所述電信號并根據(jù)所述特征分類所述顆粒的處理器；以及用于根據(jù)所述顆粒的分類分揀所述顆粒的分揀系統(tǒng)。88.—種4吏用流式細(xì)胞術(shù)分揀顆粒的方法，包括沿向上的非豎直軌跡、通過噴嘴孔將包含所述顆粒的流體流輸送到第一位置；引導(dǎo)電磁輻射射束在所述第一位置與流體流相交，導(dǎo)致顆粒中發(fā)出電磁輻射；檢測所述輻射的至少一些，將所述輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所迷顆粒特征的電信號；處理所述電信號并根據(jù)所述特征分類所述顆粒；以及根據(jù)所述顆粒的分類分揀所述顆粒。89.—種使用流式細(xì)胞術(shù)從細(xì)胞的混合物中分離所需細(xì)胞群組的方法，所述群組具有光線可檢測特征，所述方法包括在約20至40psi的壓力下引導(dǎo)包含所述細(xì)胞的流體流以約每秒30000至50000個細(xì)胞的細(xì)胞速度通過噴嘴孔，所述噴嘴孔的直徑在約50至70孩t米的范圍內(nèi)；使得所述流體流在約20到100KHz的頻率下分裂為液滴；以及使用流式細(xì)胞術(shù)分揀所述液滴以便從細(xì)胞的混合物中分離所述所需細(xì)胞群組。90.卯.一種包括處理其中具有細(xì)胞的精液的經(jīng)商方法，所迷方法包括獲得精液的供應(yīng)；使用可編程機(jī)器執(zhí)行多個集成流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括(a)接受精液的所述供應(yīng)；(b)形成包含所述細(xì)胞的多個流；以及(c)將所述細(xì)胞分揀到具有特征A的細(xì)胞的第一群組和具有特征B的細(xì)胞的第二群組中；以及分配第一或第二群組以用于商業(yè)用途。91.一種包括處理其中具有細(xì)胞的精液樣本的經(jīng)商方法，所述方法包括獲得精液的供應(yīng)；使用可編程機(jī)器執(zhí)行多個集成流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括(a)接受精液的所述供應(yīng)；以及(b)從所述供應(yīng)的最初部分中將所迷細(xì)胞分揀到不同群組中，所述群組包括包含具有特征A的細(xì)胞的第一群組和包含具有特征B的細(xì)胞的第二群組；以及僅在從所述最初部分中最初分揀的細(xì)胞滿足或超過預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)時，才從所述供應(yīng)的剩余部分中將所述細(xì)胞分揀到不同組中，所述組包括包含具有特征A的細(xì)胞的第一組和包含具有特征B的細(xì)胞的第二組。92.—種包括處理其中具有細(xì)胞的精液樣本的經(jīng)商方法，所述方法包括獲得精液的供應(yīng)；使用機(jī)器執(zhí)行多個集成流式細(xì)胞術(shù)操作，所述操作包括U)接受精液的所述供應(yīng)；以及(b)從所述供應(yīng)的第一部分中將所述細(xì)胞分揀到不同群組中，所述群組包括包含具有特征A的細(xì)胞的笫一群組和包含具有特征B的細(xì)胞的第二群組，從所述供應(yīng)的第二部分中將所述細(xì)胞分揀到不同群組中，所述群組包括包含具有特征A的細(xì)胞的第一群組和包含具有特征B的細(xì)胞的第二群組，將第一部分的群組之一與第二部分的群組之一相混合以獲得混合群組。93.—種用于根據(jù)染色體DNA特征分揀精細(xì)胞的液滴干擾系統(tǒng)，包括流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，用于將包含所述細(xì)胞的流體流輸送到第一位置，使得所選擇的流體流的流部分在第二位置處被來自于液滴干擾流體流的液滴擊打，從而將所選擇的部分和包含于其中的細(xì)胞與所迷流體流相分離，所所述流體流部分中的細(xì)胞的分類分揀所述流體流部分，所述流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備包括外照射光學(xué)系統(tǒng)，所述外照射光學(xué)系統(tǒng)包括聚焦透鏡、所述光學(xué)系統(tǒng)可沿著在所述第一位置與流體流相交的射束軸線在向前的方向上引導(dǎo)激光束穿過所述聚焦透鏡以使所述細(xì)胞穿過光束，導(dǎo)致來自于細(xì)胞的電磁輻射的發(fā)射沿著所述射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)。94.一種低溫貯藏精細(xì)胞的方法，包括以下步驟將低溫保護(hù)劑加入到一定量精細(xì)胞中；將所述一定量的精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑冷卻到約0-8。C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑基本在所述保溫溫度下保持小于60分4中的時間；以及將所迷一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40'C的溫度。95.—種低溫貯藏精細(xì)胞的方法，包括以下步驟將一定量的精細(xì)胞冷卻到約0-8。C的保溫溫度；向所述一定量的精細(xì)胞中加入低溫保護(hù)劑；以及使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑基本在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間。96.—種用在分析流體流中的顆粒的流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備中的噴嘴，所迷流體流包括包圍包含所述顆粒的芯流的鞘流，所述噴嘴包括噴嘴，所述噴嘴具有為所述流體流限定流動路徑的內(nèi)表面和用于使得流體流從噴嘴排出的孔；以及在噴嘴中的、在所述流動路徑中位于所述孔上游的擋板，所述擋板用于在流體流沿著所述流動路徑移動時使流體流偏轉(zhuǎn)，所迷擋板和噴嘴的內(nèi)表面構(gòu)造成使顆粒在離開所迷孔時處于所需取向。97.—種用于在流式細(xì)胞術(shù)i殳備中為顆粒定向的方法，所述方法包括使得具有包含所述顆粒的樣本流體的芯流和包圍所述芯流的鞘流體的鞘流的流體流流過噴嘴，所述噴嘴具有從噴嘴的上游部分向位于噴嘴的下游端的孔逐漸減縮的內(nèi)表面；以及當(dāng)芯流流過噴嘴時偏轉(zhuǎn)芯流以使得芯流中的顆粒受到流體動力的作用，該流體動力用于使得顆粒呈現(xiàn)所需取向。98.—種用在分析流體流中的顆粒的流式細(xì)胞計數(shù)器中的噴嘴系統(tǒng)，所述流體流包括包圍包含所述顆粒的芯流的鞘流，所迷噴嘴系統(tǒng)包括噴嘴，該噴嘴具有縱軸線、限定所述流體流的流動路徑的內(nèi)表面、以述內(nèi)表面的形狀設(shè)計成限定至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域，該扭轉(zhuǎn)區(qū)域包括具有基本為橢圓形的橫截面的軸向漸縮區(qū)域，用于當(dāng)所述流體流朝向所述孔流過扭轉(zhuǎn)區(qū)域時使得顆粒處于所需取向；以及從顆粒源到噴嘴的導(dǎo)管，所述導(dǎo)管^t布置得在偏離所述噴嘴的縱軸線的位置處將所述芯流51入到噴嘴中。99.一種用于在流式細(xì)胞計數(shù)器中為顆粒定向的方法，包括使得鞘流流過噴嘴，所述噴嘴具有縱軸線和至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域，所述扭轉(zhuǎn)區(qū)域包括具有基本為橢圓形的橫截面的噴嘴軸向漸縮區(qū)域；以及在偏離所述縱軸線的位置處將包含顆粒的芯流體流引入到鞘流體流中，以使鞘流體流和芯流體流流過至少一個扭轉(zhuǎn)區(qū)域，100.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀到多個精細(xì)胞群組中的一個中；從所述多個精細(xì)胞群組中的一個獲得具有所需DNA特征的、一定量精細(xì)胞，所述一定量的精細(xì)胞被包含在一定量的收集流體中；對所述定量的收集流體進(jìn)行第一離心處理，以形成精細(xì)胞的第一丸和覆蓋第一丸的上層清液；4吏得第一丸與上層清液分離；對上層清液進(jìn)行附加的離心處理，以形成在第一離心處理后保留在上層清液中的精細(xì)胞的第二丸；以及將一定量的再懸浮流體加入到第一和第二丸以獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的懸浮液，選擇所述一定量的再懸浮流體的量以在懸浮液中形成所需濃度的精細(xì)胞。101.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；分揀精細(xì)胞以獲得具有所需特征的一定量的精細(xì)胞，所述一定量的祐^分揀的精細(xì)胞被包含在其中具有精細(xì)胞第一濃度的第一體積的流體中；以及對精細(xì)胞進(jìn)行濃縮步驟，其中所述精細(xì)胞的濃度增加到大于所述第一濃度的第二濃度；其中，所述濃縮步驟包括使得所述第一體積的流體的至少一部分流過第一過濾器，其中作用在第一過濾器上的壓力差小于約20英寸汞柱，所述過濾器具有足夠小以阻止所述精細(xì)胞通過的過濾孔，保持包含所述精細(xì)胞的第二體積的未過濾的流體。102.—種用于處理精細(xì)胞的方法，包括以下步驟從雄性動物收集包含精細(xì)胞的精液樣本；將所述精液樣本輸送到精細(xì)胞處理設(shè)施；在精液上執(zhí)行初始質(zhì)量控制檢查；通過將所述精細(xì)胞暴露于選擇性地粘結(jié)于精細(xì)胞的DNA上的DNA選擇性熒光染料，以DNA選擇性熒光染料為所述精液樣本中的精細(xì)胞著色以形成著色混合物，使所述著色混合物經(jīng)受約至少約40。C的溫度；使用流式細(xì)胞計數(shù)器根據(jù)特定DNA特征分揀精細(xì)胞；獲得懸浮在一定體積流體中的、具有所需DNA特征的、一定量的精細(xì)胞；通過執(zhí)行濃度處理調(diào)節(jié)所述懸浮液中精細(xì)胞的濃度以獲得所需濃度；以及使得所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻。103.—種用于處理精細(xì)胞的方法，包括以下步驟從雄性動物收集包含精細(xì)胞的精液樣本；將所述精液樣本輸送到精細(xì)胞處理設(shè)施；在精液上執(zhí)行初始質(zhì)量控制檢查；以DNA選擇性熒光染料使得所述精液樣本中的精細(xì)胞著色；使用流式細(xì)胞計數(shù)器分揀精細(xì)胞以獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的一個或多個群組；獲得懸浮在流體中、具有所需DNA特征的、一定量的精細(xì)胞；調(diào)節(jié)所述一定量精細(xì)胞的濃度以在懸浮液中獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的所需濃度；在所述一定量精細(xì)胞具有超過玻璃轉(zhuǎn)換溫度的溫度時向具有所述所需特征的精細(xì)胞中加入低溫保護(hù)劑，其中在低于所述玻璃轉(zhuǎn)換溫度時所迷精細(xì)胞會受到冷沖擊的損害；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8。C的保溫溫度；使得所述一定量的精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在約O-8。C的溫度范圍內(nèi)保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到低于-40。C的溫度。104.—種用于處理精細(xì)胞的方法，包括以下步驟從雄性動物收集包含精細(xì)胞的精液樣本；將所述精液樣本輸送到精細(xì)胞處理設(shè)施；在所述精液樣本上執(zhí)行初始質(zhì)量控制檢查；在對精細(xì)胞執(zhí)行任何實質(zhì)性稀釋之前將所述精細(xì)胞冷卻到約O-8。C的溫度；形成包括含有精細(xì)胞和DNA選擇性染料的溶液的混合物，使得所述混合物處于約0-8。C的溫度下以為精細(xì)胞著色；使用流式細(xì)胞計數(shù)器分揀精細(xì)胞以獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的一個或多個群組；獲得懸浮在流體中的、具有所需DNA特征的、一定量的精細(xì)胞；調(diào)節(jié)所述一定量精細(xì)胞的濃度以在懸浮液中獲得具有所需DNA特征的精細(xì)胞的所需濃度；在所述一定量精細(xì)胞中加入低溫保護(hù)劑；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑保持在約O-8。C的保溫溫度下約30分鐘到3小時；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到低于40。C的溫度。105.—種收集系統(tǒng)，用于收集由液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器所分揀的液滴流，所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器產(chǎn)生沿具有水平分量的軌跡移動的液滴流，所述系統(tǒng)包括用于當(dāng)所述液滴沿所述軌跡移動時截取所述液滴流中的液滴的截取裝置，以及布置成用于收集所截取的液滴的收集容器。106.—種用于收集由液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器所分揀的液滴流的方法，所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器產(chǎn)生沿具有水平分量的軌跡移動的液滴流，所述方法包括以下步驟當(dāng)所述液滴沿所述軌跡移動時截取所述液滴；以及將所述截取的液滴收集在第一收集容器中。107.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括以下步驟利用流式細(xì)胞術(shù)處理基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀到不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的/>共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；以及根據(jù)下列因素中的至少一個改變輸送樣本流體的速度(1)具有所需DNA特征的精細(xì)胞的第一分揀的群組的純度；以及(2)在第二分揀群組中的具有所述所需DNA特征的精細(xì)胞量。108.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟利用流式細(xì)胞術(shù)處理基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀到不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；以及利用一個或者多個模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器對來自于每一個流式細(xì)胞術(shù)單元的隨時間變化的輸出進(jìn)行同步采樣，提供包括對應(yīng)于所述隨時間變化的模擬輸出的數(shù)字信息的輸出，其中所述隨時間變化的模擬輸出和相應(yīng)的數(shù)字信息表示所述特定DNA特征。109.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物處于至少約40。C的溫度；以及利用流式細(xì)胞術(shù)處理基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀到不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的^^共流體輸送系統(tǒng)。110.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括以下步驟利用流式細(xì)胞術(shù)處理基于一個或者多個特定DNA特征將精細(xì)胞分揀到不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括將包含精細(xì)胞的樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；從一個或者多個分揀的精細(xì)胞群組獲得具有所需DNA特征的、一定量的精細(xì)胞；將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞中；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8'C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑基本在所述保溫溫度下保持小于60分4中的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40'C的溫度。111.一種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，使著色混合物處于至少約40'C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到第一位置，使得所述流體流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；從所述第二和笫三液滴分揀所述第一液滴；收集所述第一液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；識別所述至少一個群組中具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及根據(jù)與在所述第一、第二和第三液滴中的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的總量相關(guān)的、在所述至少一個群組中所識別的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量，改變流體被輸送到所述第一位置的速度。112.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，使得著色混合物處于至少約40。C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到第一位置，使得所述流體流在第二位置分裂成液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；從所述第二液滴分揀所述第一和第三液滴；收集所述第一和第三液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；識別所述至少一個群組中具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及根據(jù)所識別的在所述至少一個群組中的具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的量，改變流體被輸送到所述第一位置的速度。113.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，使得著色混合物處于至少約40。C的溫度；基于特定DNA特征分揀所述著色混合物中的所述精細(xì)胞；獲得具有所需DNA特征的、一定量的精細(xì)胞；將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8'C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40'C的溫度。114.一種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物處于至少約40。C的溫度；利用流式細(xì)胞術(shù)處理基于一個或者多個特定DNA特征將所述著色混合物中的精細(xì)胞分揀到不同的精細(xì)胞群組中，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括將樣本流體輸送到多個流式細(xì)胞術(shù)單元，每一個流式細(xì)胞術(shù)單元基于所述一個或者多個DNA特征分揀精細(xì)胞；操作所迷單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(l)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；將低溫保護(hù)劑加入到所述一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8'C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-4(TC的溫度。115.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物處于至少約4(TC的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元中的每一個，利用流式細(xì)胞術(shù)單元將每個流體流分裂為液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；利用液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)處理從所述第二和第三液滴中分揀所迷第一液滴，所述液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)處理包括操作所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；收集所述第一液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；識別所述至少一個群組中具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及根據(jù)與在所述第一、第二和第三液滴中的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的總量相關(guān)的所識別的在所迷至少一個群組中的具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量來改變流體被輸送到一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元的速度。116.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包含精細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物處于至少約40。C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元中的每一個，利用流式細(xì)胞術(shù)單元將每個流體流分裂為液滴，所述液滴包括每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的第一液滴、每個都包含一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第二液滴以及每個都包含一個或者多個具有所需性別染色體的精細(xì)胞和一個或者多個具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的第三液滴；利用液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)處理從所述第二液滴中分揀所述第一和第三液滴，所述液滴分揀流式細(xì)胞術(shù)處理包括操作所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(i)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；收集所述第一和第三液滴以提供至少一個具有所需性別染色體的精細(xì)胞的群組；識別所述至少一個群組中具有所需性別染色體的精細(xì)胞的量；以及根據(jù)所識別的在所述至少一個群組中的具有非所需性別染色體的精細(xì)胞的量來改變流體被輸送到一個或多個流式細(xì)胞術(shù)單元的速度。117.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟形成包*細(xì)胞和DNA選擇性熒光染料的著色混合物，以及使得著色混合物處于至少約40'C的溫度；將包含精細(xì)胞的所述著色混合物的流體流輸送到所述多個流式細(xì)胞術(shù)單元中的每一個，利用流式細(xì)胞術(shù)單元將每個流體流分裂為液滴，利用流式細(xì)胞術(shù)處理根據(jù)包含在液滴中精細(xì)胞的一個或者多個特定DNA特征分揀所述液滴，以獲得一個或多個具有所需DNA特征的精細(xì)胞的群組，所述流式細(xì)胞術(shù)處理包括操作所述單元同時共享一個集成平臺，所述集成平臺包括下列元件中的至少一個(1)精細(xì)胞的公共供給；(2)電磁輻射的公共源；(3)公共殼體；(4)用于控制單元操作的公共輸入；(5)用于接收和處理來自于單元的信息以允許對一個單元與另一個單元相關(guān)的操作進(jìn)行評估的公共處理器；以及(6)用于將包含所述精細(xì)胞的流體輸送到所述流式細(xì)胞術(shù)單元的公共流體輸送系統(tǒng)；根據(jù)下列因素至少一個來改變輸送流體的速度(1)所述具有所需DNA特征的精細(xì)胞的一個或多個群組的純度；以及(2)與所述液滴中具有所述所需DNA特征的精細(xì)胞的總量相關(guān)的在一個或多個精細(xì)胞群組中具有所述所需DNA特征的精細(xì)胞量；加入低溫保護(hù)劑以保護(hù)從所述一個或多個精細(xì)胞群組中獲得的一定量的精細(xì)胞；將所述一定量的精細(xì)胞和低溫保護(hù)劑冷卻到約O-8。C的保溫溫度；使得所述精細(xì)胞和所述低溫保護(hù)劑在所述保溫溫度下保持小于60分鐘的時間；以及將所述一定量精細(xì)胞過度冷卻到-40。C的溫度。118.—種處理動物精細(xì)胞的方法，包括下列步驟從雄性動物收集精細(xì)胞；利用DNA選擇性熒光染料使得精細(xì)胞著色；利用電磁輻射照射精細(xì)胞以使得DNA選擇性熒光染料發(fā)出熒光；檢測由精細(xì)胞發(fā)出的熒光；分析由精細(xì)胞發(fā)出的熒光以確定精細(xì)胞的一個或者多個特定的DNA特征；基于所述一個或者多個特定的DNA特征將精細(xì)胞分揀成多個精細(xì)胞群組；從所述多個精細(xì)胞群組中的一個獲得具有所需DNA特征的一定量的精細(xì)胞；以及使得所述一定量的精細(xì)胞過度冷卻；其中，在精細(xì)胞收集后在小于約12小時的時間內(nèi)完成過度冷卻的步驟。119.一種根據(jù)染色體成分分揀活精細(xì)胞的方法，包括(a)將DNA選擇性熒光染料加入到活精細(xì)胞供給；(b)使得包含所述精細(xì)胞的樣本流體和鞘流體流過用于使得精細(xì)胞轉(zhuǎn)動到所需取向的定向噴嘴，所述樣本流體和鞘流體以流體流的形式離開噴嘴，所述流體流包括由樣本流體和精細(xì)胞形成的芯流和包圍芯流的鞘流體流；(c)為噴嘴提供聲能以使得流體流在噴嘴下游的液滴分裂位置處分裂成液滴流；(d)引導(dǎo)電磁輻射射束在液滴分裂位置上游的詢問位置處與流體流相交以激發(fā)在精細(xì)胞中的熒光染料，從而使得精細(xì)胞發(fā)出熒光；(e)利用輸出表示被檢測的熒光發(fā)射的強(qiáng)度的隨時間改變的模擬信號的光檢測器檢測發(fā)出的熒光；(f)對所述隨時間改變的模擬信號進(jìn)行電子處理以確定多個精細(xì)胞的染色體成分；(g)根據(jù)包含在液滴中的精細(xì)胞的染色體成分選擇性地為流體流提供靜電荷以選擇性地為液滴提供電荷或者不提供電荷；(h)利用電場根據(jù)它們的電荷使得液滴偏轉(zhuǎn)，從而使得包含在具有相同電荷的液滴中精細(xì)胞與包含在具有不同電荷的液滴中精細(xì)胞分離；以及(i)以至少每秒5000個精細(xì)胞的速度收集至少一個活精細(xì)胞群組。120.—種分析在具有流動方向的流體流中的動物精細(xì)胞的染色體DNA特征的方法，所述每一個精細(xì)胞具有帶核的頭部，所述核包括包含至少一個染色體的局部染色體區(qū)域，所述核在流體流的流動方向上具有一定長度，所述方法包括以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著基本垂直流體流的流動方向延伸的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的流動方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所迷精細(xì)胞適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從精細(xì)胞發(fā)出，包括從表示所迷區(qū)域的染色體特征的所述染色體區(qū)域發(fā)出的輻射；檢測來自于所述染色體區(qū)域的輻射的至少一些，將來自于所述染色體區(qū)域的輻射的至少一些轉(zhuǎn)換成表示所述染色體DNA特征的隨時間變化的模擬電信號；數(shù)字化地采樣隨時間變化的模擬信號，提供包含與所述隨時間變化的模擬信號相對應(yīng)的數(shù)字信息的輸出；分析所述數(shù)字信息以抽取表示隨時間變化的模擬信號的微分特性的信息；以及至少部分地根據(jù)所述抽取信息，按具有特定染色體DNA特征對至少一些精細(xì)胞進(jìn)行分類。121.—種分析在具有流動方向的流體流中的顆粒的方法，所述方法包括以基本橢圓形斑點的形式將電磁輻射射束聚焦在流體流上，所述斑點具有沿著基本垂直于流體流的流動方向的長軸的長度和沿著基本平行于流體流的流動方向延伸的短軸的寬度，射束斑點的寬度小于所述核的長度，所迷顆粒適于穿過所述斑點，導(dǎo)致電磁輻射從顆粒發(fā)出；檢測輻射的至少一些并將其轉(zhuǎn)換成表示顆粒特征的隨時間變化的模擬電信號；數(shù)字化地采樣隨時間變化的模擬信號，提供包含與所述隨時間變化的模擬信號相對應(yīng)的數(shù)字信息的輸出；分析所述數(shù)字信息以抽取表示隨時間變化的模擬信號的微分特性的信息；以及至少部分地才艮據(jù)所述抽取信息，按具有特定特征對至少一些顆粒進(jìn)行分類。122.—種流式細(xì)胞術(shù)設(shè)備，包括用于引導(dǎo)包含樣本顆粒的流體流通過顆粒詢問位置的流動通道；用于發(fā)出多個電磁輻射(EMR)脈沖的激光器，其中每個脈沖都具有超過所述激光器的平均功率的峰值功率，所述脈沖沿射束路徑從所述激光器被引導(dǎo)到顆粒詢問位置；用于產(chǎn)生表示脈沖到達(dá)詢問位置的定時信號的定時電路；適于從詢問位置中檢測EMR并用于輸出表示所檢測的EMR的強(qiáng)度的、隨時間改變的模擬信號的檢測器；適于接收作為輸入的隨時間改變的模擬信號、適于采樣所述模擬信號以產(chǎn)生數(shù)字化輸出的模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器；以及用于分析與定時信號相關(guān)的、來自于模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器的數(shù)字化輸出的電子處理器。123.—種用于當(dāng)其流過詢問位置時分析包含在流體流中顆粒的方法，所述方法包括以下步驟從激光器中發(fā)出多個電磁輻射(EMR)脈沖，其中每個脈沖的峰值功率都超過所述激光器的平均功率；通過沿射束路徑將來自于激光器中的所述脈沖引導(dǎo)到詢問位置而間歇地照射流體流和包含于其中的顆粒；檢測來自于詢問位置的EMR;產(chǎn)生表示檢測的EMR的強(qiáng)度的、隨時間改變的才莫擬信號；產(chǎn)生表示脈沖到達(dá)所述詢問位置的定時信號；將隨時間改變的模擬信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號；以及分析所述數(shù)字信號以確定流體流中的顆粒的特征。124.—種評估對用于分揀的細(xì)胞群組著色的一組條件的程序，所述群組包括第一類型和第二類型的細(xì)胞，所述程序包括(a)在一組著色條件下利用熒光染料使得細(xì)胞群組的一部分著色；(b)當(dāng)著色的細(xì)胞以一速度(R)通過流式細(xì)胞計的詢問位置時使得著色細(xì)胞暴露在電磁輻射下；(c)確定暴露的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征；(d)利用確定的熒光特征將暴露的細(xì)胞分類成兩個或者多個細(xì)胞的子群組，其中一個子群組是第一類型細(xì)胞的富集子群組；(e)確定富集子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的改變系數(shù)以提供對著色條件的分揀效率的指示；以及(f)判定是否改變?nèi)魏螌?xì)胞著色的著色條件或者著色的細(xì)胞通過流式細(xì)胞計的詢問位置的速度(R)以提高分揀效率。125.—種評估對用于分揀的細(xì)胞群組著色的一組條件的程序，所述群組包括第一類型和第二類型的細(xì)胞，所迷程序包括(a)在一組著色條件下利用熒光染料使得細(xì)胞群組的一部分著色；(b)當(dāng)著色的細(xì)胞以速度(R)通過流式細(xì)胞計的詢問位置時使得著色細(xì)胞暴露在電磁輻射下；(c)確定暴露的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征；U)利用確定的熒光特征將暴露的細(xì)胞分類成兩個或者多個細(xì)胞的子群組，其中一個子群組是第一類型細(xì)胞的富集子群組；(e)確定富集子群組的細(xì)胞的熒光發(fā)射特征的改變系數(shù)以提供對著色條件的分揀效率的指示；(f)確定是否改變對細(xì)胞著色的任何著色條件或者著色的細(xì)胞通過流式細(xì)胞計的詢問位置的速度(R)以提高分揀效率；以及(g)將改變的著色條件應(yīng)用于所述細(xì)胞群組的其余部分。126.—種用于自動化校準(zhǔn)液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器的設(shè)備，當(dāng)在液滴分裂位置由連續(xù)流體流分裂出液滴時，所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器選擇性地向多個液滴施加或不施加一組一個或多個電荷中的一個，靜電地將所述液滴分揀到兩個或多個獨立液滴流中，取決于所需的液滴成分為每個液滴選擇電荷，基于表示在流式細(xì)胞計數(shù)器的詢問位置處檢測出流體流中所包含的顆粒的時刻與所述顆粒到達(dá)液滴分裂位置處的時刻之間的時間段的估計值的滴落延遲設(shè)定，所述設(shè)備包括(a)詢問位置下游的外照射傳感器，用于照射所述獨立液滴流之一中的液滴，檢測由包含在所述液滴中的顆粒發(fā)出的任何熒光發(fā)射，產(chǎn)生表示所檢測的熒光發(fā)射的輸出信號；以及(b)用于分析所述輸出信號、自動化地調(diào)節(jié)以下至少一項的控制裝置(1)滴落延遲設(shè)定；以及(2)所述電荷組中電荷的幅度。127.—種用于連續(xù)地校驗流式細(xì)胞計數(shù)器中適當(dāng)分揀刻度的方法，當(dāng)在液滴分裂位置由連續(xù)流體流形成液滴時所迷液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器選擇性地向多個液滴施加或不施加一組一個或多個電荷中的一個，靜電地將所述液滴分揀到兩個或多個獨立液滴流中，取決于所迷所需液滴成分為每個液滴選擇電荷，基于表示在流式細(xì)胞計數(shù)器的詢問位置處檢測出流體流中所包含的顆粒的時刻與所述顆粒到達(dá)液滴分裂位置處的時刻之間的時間段的估計值的滴落延遲i殳定，所述方法包括(a)通過沿向前的方向引導(dǎo)照射射束沿射束軸線穿過透鏡系統(tǒng)而照射所述獨立液滴流之一中的液滴，從而產(chǎn)生由包含在所述液滴中的任何顆粒發(fā)出的熒光發(fā)射；(b)使用所述透鏡系統(tǒng)收集所述熒光光線的一些，沿射束軸線在向后的方向上引導(dǎo)所述熒光光線；(c)檢測所收集的熒光光線中至少一些并產(chǎn)生表示所檢測的光線的輸出信號；以及分析所述輸出信號、根據(jù)所述分析自動化地調(diào)節(jié)以下至少一項(1)滴落延遲設(shè)定；以及(2)所迷電荷組中電荷的幅度。128.—種用于連續(xù)地校驗流式細(xì)胞計數(shù)器中適當(dāng)分揀刻度的方法，當(dāng)在液滴分裂位置由連續(xù)流體流形成液滴時，所述液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器選擇性地向多個液滴施加或不施加一組一個或多個電荷中的一個，靜電地將所述液滴分揀到兩個或多個獨立液滴流中，取決于所需的液滴的成分為每個液滴選擇電荷，基于表示在流式細(xì)胞計數(shù)器的詢問位置處檢測出流體流中所包含的顆粒的時刻與所述顆粒到達(dá)液滴分裂位置處的時刻之間的時間段的估計值的滴落延遲設(shè)定，所述方法包括選擇被評估為包含所述顆粒的可能性基本為零的液滴；向所選擇的液滴施加所述電荷組的一個電荷，以便從所選擇液滴形成測試流；照射所述測試流中的液滴；以及檢測由所選擇的液滴中的任何顆粒發(fā)出或散射的任何光線。129.—種用于液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器的分揀系統(tǒng)校正系統(tǒng)，包括充電元件，用于當(dāng)在液滴分裂位置處的連續(xù)流體流形成液滴時選擇性地向液滴流中的每個液滴施加來自于一組電荷中的一個電荷；充電元件下游的一對充電偏轉(zhuǎn)板，被布置得用于使得液滴穿過所述偏轉(zhuǎn)板之間以便于依照其電荷分揀所述液滴；以及清除殘損物系統(tǒng)，包括以下元件中的至少一個(l)用于從充電元件中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)；以及(2)用于從偏轉(zhuǎn)板中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)。130.—種操作液滴分揀流式細(xì)胞計數(shù)器系統(tǒng)的方法，所述方法包括當(dāng)在液滴分裂位置處的連續(xù)流體流形成液滴時，使用充電元件將來自于一組電荷中的一個電荷選擇性地施加于液滴流中的每個液滴；使得所述液滴穿過充電元件下游的一對充電偏轉(zhuǎn)板之間以便于依照其電荷分揀所述液滴；使用處理器判定殘損物是否妨礙液滴分揀；以及如果處理器判定殘損物妨礙液滴分揀，則在處理器的控制下使用清除殘損物系統(tǒng)去除所述殘損物，所述清除殘損物系統(tǒng)包括以下元件中的至少一個(1)用于從充電元件中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)；以及(2)用于從偏轉(zhuǎn)板中去除殘損物的可選擇性地啟動的空氣系統(tǒng)。全文摘要本發(fā)明涉及用于分揀顆粒和提供性別分揀的動物精子的設(shè)備、方法和程序，包括收集精子；選擇著色條件；利用DNA選擇性熒光染料對精子著色；根據(jù)性別染色體含量分揀精細(xì)胞；和低溫儲藏分揀的精子群組直至人工受精。一實施例包括利用共享一整體平臺的多個流式細(xì)胞術(shù)單元分揀精細(xì)胞的設(shè)備和方法。在一實施例中，流式細(xì)胞術(shù)分揀包括使用下列設(shè)備和方法具有擋板的定向噴嘴；外照射光學(xué)系統(tǒng)；在細(xì)胞核內(nèi)的局部DNA區(qū)域的狹縫掃描；數(shù)字信號處理，包括模擬輸出信號的同步采樣、在脈沖的一個點處的脈沖波形的第一級導(dǎo)數(shù)的近似值的脈沖波形的特征抽取；多種分揀策略中的任何一種；以及自動分揀校準(zhǔn)系統(tǒng)。在一實施例中，數(shù)字信號處理包括在相對于從照射激光發(fā)出的脈沖的時間處對模擬輸出信號采樣。其它實施例與上述的大不相同，包括涉及可用于任何各種應(yīng)用(包括顆粒分析)的各個步驟或者系統(tǒng)的實施例。文檔編號G01N33/487GK101614731SQ20091014686公開日2009年12月30日申請日期2004年3月29日優(yōu)先權(quán)日2003年3月28日發(fā)明者B·迪迪翁,C·L·路德維格,D·R·黑爾布林,G·P·萬德雷,G·杜拉克,J·A·格雷厄姆,J·D·華萊士,J·T·哈徹,K·S·克勞利,L·A·韋斯特福爾,M·安扎爾,N·V·納亞克申請人:英格朗公司