專利名稱：一種復(fù)方丹參滴丸的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物檢測(cè)方法，特別涉及復(fù)方丹參滴丸的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
復(fù)方丹參滴丸是由丹參、三七及冰片等藥味組成的復(fù)方制劑，具有活血化瘀、理氣 止痛的功效?，F(xiàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載在《中國藥典》2005年版一部中檢測(cè)的內(nèi)容如下表 權(quán)利要求
1.一種復(fù)方丹參滴丸，由丹參、三七及冰片制成，其特征在于，其有效成分通過薄層鑒 別、指紋圖譜鑒別及含量測(cè)定方法進(jìn)行全面、準(zhǔn)確、科學(xué)控制。
2.權(quán)利要求1的復(fù)方丹參滴丸的檢測(cè)方法，其特征在于，包括對(duì)藥物成分三七的鑒別 方法、丹參的指紋圖譜鑒別方法、丹參的含量檢測(cè)方法和三七的含量檢測(cè)方法。
3.權(quán)利要求2的檢測(cè)方法，其特征在于，所述三七的鑒別方法采用薄層層析法，參照物 選用三七對(duì)照藥材、人參皂苷對(duì)照品、人參皂苷Re對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品及三七 皂苷R1對(duì)照品。
4.權(quán)利要求3的檢測(cè)方法，其特征在于，所述薄層層析法，步驟如下供試品溶液的 制備取本品20丸，置離心管中，加入稀氨溶液9ml，超聲處理使溶解，離心，取上清液，通 過DlOl型大孔吸附樹脂柱，用水15ml洗脫，棄去水洗脫液，再用甲醇洗脫，棄去初洗脫液 約0.細(xì)1，收集續(xù)洗脫液約5ml，濃縮至約anl，作為供試品溶液，對(duì)照藥材溶液的制備取 三七對(duì)照藥材0. 5g，置離心管中，加入稀氨溶液9ml，超聲處理15分鐘，離心，取上清液，通 過DlOl型大孔吸附樹脂柱，用水15ml洗脫，棄去水洗脫液，再用甲醇洗脫，棄去初洗脫液約 0.細(xì)1，收集續(xù)洗脫液約5ml，作為對(duì)照藥材溶液，對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取三七皂 苷R1對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品、人參皂苷對(duì)照品、人參皂苷Re對(duì)照品，加甲醇制成 每Iml分別含lmg、0. 5mg、0. 5mg、0. 5mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液，薄層條件照中國藥 典2005版附錄VIB試驗(yàn)，吸取供試品溶液4 8 μ 1、對(duì)照藥材溶液2 μ 1，對(duì)照品溶液2 μ 1 分別點(diǎn)于同一高效硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水=13 7 25 10°C放置12 小時(shí)的下層溶液為展開劑，展開12cm以上，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加 熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及 對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)。
5.權(quán)利要求2的檢測(cè)方法，其特征在于，所述丹參的鑒別方法采用指紋圖譜比較法，參 照物選用丹參素鈉。
6.權(quán)利要求5的檢測(cè)方法，其特征在于，所述指紋圖譜比較法，步驟如下色譜條件與 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)Waters Acquity UPLC HSS T3色譜柱，以含0. 02% ml/ml磷酸的80%乙 腈為流動(dòng)相A ；以0. 02% ml/ml的磷酸水溶液為流動(dòng)相B，按流動(dòng)相梯度洗脫表進(jìn)行洗脫； 流速為每分鐘0. 4ml ；檢測(cè)波長為280nm ；柱溫40°C ；記錄時(shí)間為10分鐘，理論板數(shù)按丹參 素峰計(jì)算應(yīng)不低于8000，流動(dòng)相梯度洗脫參照表時(shí)間(分鐘)流動(dòng)相A流動(dòng)相B.0 1. 69 —-2291 —-78.1. 6 1. 822 —-2678 —-74.1. 8 8. 026 —-3974 - 61.8. 0 8. 439 —-961 - 91.8. 4 10991對(duì)照品溶液的制備取丹參素鈉對(duì)照品適量，精密稱定，加75%甲醇制成每Iml含 0. 16mg的溶液相當(dāng)于每Iml含丹參素0. 144mg,即得，復(fù)方丹參滴丸供試品溶液的制備取本 品10丸，精密稱定，置IOml量瓶中，加水適量，超聲處理15分鐘使溶解，放冷，加水至刻度， 搖勻，過0. 22 μ m微孔濾膜，即得，測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液各2 μ 1 4μ1注入液相色譜儀，測(cè)定，復(fù)方丹參滴丸供試品色譜圖與對(duì)照指紋圖譜經(jīng)計(jì)算機(jī)模擬相 似度計(jì)算軟件計(jì)算，相似度應(yīng)不低于0. 9。
7.權(quán)利要求2的檢測(cè)方法，其特征在于，所述丹參的含量測(cè)定，是對(duì)其中丹參素的含量 進(jìn)行測(cè)定，采用亞2 μ m液相色譜技術(shù)，測(cè)定處方中丹參素含量。
8.權(quán)利要求7的檢測(cè)方法，其特征在于，所述丹參素的含量測(cè)定方法，步驟與指紋圖譜 方法相同，達(dá)到指紋圖譜鑒別與含量測(cè)定同時(shí)檢測(cè)，用外標(biāo)法計(jì)算含量，本品每丸含丹參以 丹參素計(jì)，不得少于0. 10mg。
9.權(quán)利要求2的檢測(cè)方法，其特征在于，所述三七的含量測(cè)定，是對(duì)其中三七皂苷R1， 人參皂苷Rgl及人參皂苷Rbl的含量進(jìn)行測(cè)定，采用亞2 μ m液相色譜技術(shù)，測(cè)定處方中 三七成分的含量。
10.權(quán)利要求9的檢測(cè)方法，其特征在于，所述三七皂苷隊(duì)，人參皂苷及人參皂苷 Rb1的含量測(cè)定，步驟如下色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)Waters Aqucity UPLC BEH Shield RP18色譜柱，以水 溶液為流動(dòng)相A ；以乙腈溶液為流動(dòng)相B，按流動(dòng)相梯度洗脫參考進(jìn)行洗脫；流速為每分鐘 0. 4ml ；檢測(cè)波長為203nm ；柱溫40°C ；記錄時(shí)間為16分鐘，理論板數(shù)按三七皂苷R1峰計(jì)算 應(yīng)不低于8000，流動(dòng)相梯度洗脫參照表時(shí)間(分鐘) 流動(dòng)相A 流動(dòng)相B O 7.083 — 79 17 — 21·7. O 13. 5 79 — 64 21 — 36·13.5 13. 6 64 — 10 36 — 90·13.6 14. 51090·14.5 15. O 10 — 83 90 — 17·15.0 16.08317對(duì)照品溶液的制備精密稱取人參皂苷對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品和三七皂苷R1 對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含人參皂苷Rg1O. %ig、人參皂苷Rb1O. %ig、三七皂苷禮0. Img 的混合溶液，即得，供試品溶液的制備取復(fù)方丹參滴丸10丸，精密稱定，加4%氨水5ml，超 聲使溶解，溶液全部通過預(yù)處理好的80-100目1. Og的C-18小柱，并用水洗至中性，再用甲 醇洗脫至5ml容量瓶中，定容至刻度，用0. 22 μ m有機(jī)濾膜濾過，即得，測(cè)定法分別精密吸取 對(duì)照品溶液、供試品溶液各2 μ 1注入超高效液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)法計(jì)算含量，本品含 三七以三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1總量計(jì)，每丸不低于0. 10mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復(fù)方丹參滴丸的檢測(cè)方法，該方法包括以下內(nèi)容性狀的觀察，內(nèi)容物的鑒別，內(nèi)容物的檢查，指紋圖譜比較，對(duì)含有的成分進(jìn)行含量測(cè)定，本發(fā)明的檢測(cè)方法，包括對(duì)藥物成分三七的鑒別方法，所述方法采用薄層層析法，參照物選用三七對(duì)照藥材、人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Re對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品及三七皂苷R1對(duì)照品；本發(fā)明的檢測(cè)方法，還包括對(duì)藥物成分丹參的鑒別方法和含量測(cè)定方法，其中鑒別方法采用亞2μm液相色譜技術(shù)進(jìn)行色譜指紋圖譜鑒別，參照物選用丹參素鈉，含量測(cè)定方法用亞2μm液相色譜技術(shù)對(duì)丹參中的成分丹參素，三七皂苷R1，人參皂苷Rg1及人參皂苷Rb1進(jìn)行含量測(cè)定。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102119961SQ20101003131
公開日2011年7月13日 申請(qǐng)日期2010年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月7日
發(fā)明者孫巍, 孫玉俠, 徐麗媛, 高展 申請(qǐng)人:天津天士力制藥股份有限公司