專利名稱：全氟辛磺酸人工完全抗原的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種全氟辛磺酸(Perfluorooctane sulfonates，PFOQ人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。
背景技術：
全氟辛磺酸(PF0Q是一種重要的含氟表面活性劑，主要用于聚合物添加劑、潤滑劑、滅火劑、殺蟲劑等。由于全氟辛磺酸的化學惰性及其廣泛的生產(chǎn)和使用，已造成嚴重的環(huán)境累積和污染，成為繼有機氯農(nóng)藥、二惡英之后日益引起重視的新型持久性有機污染物。 研究表明，全氟辛磺酸是具有中等毒性的肝致癌物，可增加人類患癌癥的風險，此外，全氟辛磺酸還具有胚胎毒性和潛在的神經(jīng)毒性，而且生物蓄積性強，具有引起生物體脂肪代謝紊亂、能量代謝障礙、誘導過氧化產(chǎn)物作用及胚胎毒性等多種毒性。調(diào)查表明，職業(yè)性PFOS 暴露人群、一般人群和野生動物體內(nèi)以及環(huán)境中，均廣泛存在著以PFOS為主的PFCs污染。 因此，對于環(huán)境中全氟辛磺酸的檢測是非常重要的。目前國內(nèi)的研究多集中于利用了固相萃取與高效液相色譜.質譜(HPLCMQ聯(lián)用的方法同時檢測生物體內(nèi)和水中的PF0S。但樣品預處理煩瑣，操作復雜，儀器昂貴，很難達到快速、簡便的現(xiàn)場檢測要求。如果能夠采用金標免疫或酶聯(lián)免疫的方法，則可達到快速、靈敏并能現(xiàn)場檢測PFOS的需要。為了建立其免疫分析的方法，首先必須得到全氟辛磺酸的抗體。全氟辛磺酸分子結構簡單，分子量小，屬于半抗原，不能直接免疫制取抗體，必須首先將其與載體蛋白偶聯(lián)制備出它的完全抗原，才能誘發(fā)動物產(chǎn)生抗體。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于尋求適當?shù)脑噭煤唵?、實用的方法合成出全氟辛磺酸的完全抗原，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供基礎。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種全氟辛磺酸(Perfluorooctane sulfonates，PFOQ人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。利用全氟辛磺酸的羧酸基團，可以將全氟辛磺酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上；連接臂的類型或者長度的選擇取決于由此抗原產(chǎn)生的抗體的活性，制備全氟辛磺酸的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。MALDI-T0F-MS質譜確定載體蛋白上全氟辛磺酸的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎。
具體實施例方式實施例1
權利要求
1.本發(fā)明涉及一種全氟辛磺酸(Perfluorooctanesulfonates, PF0S)人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。利用全氟辛磺酸的羧酸基團，將全氟辛磺酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上，制備全氟辛磺酸的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。MALDI-TOF-MS質譜確定載體蛋白上全氟辛磺酸的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)jp 清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，可以將全氟辛磺酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上；連接臂的類型或者長度的選擇取決于由此抗原產(chǎn)生的抗體的活性。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，能夠將全氟辛磺酸鏈接到載體蛋白上的方法和試劑。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，反應溫度在-100°C-100°C之間。
6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，反應時間在1分鐘-200小時之間。
7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，全氟辛磺酸的用量為載體蛋白的 0. 001-2000摩爾當量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種全氟辛磺酸(Perfluorooctane sulfonates，PFOS)人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。利用全氟辛磺酸的羧酸基團，將全氟辛磺酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上，制備全氟辛磺酸的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-TOF-MS質譜確定載體蛋白上全氟辛磺酸的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎。
文檔編號G01N27/62GK102276711SQ201010202750
公開日2011年12月14日 申請日期2010年6月10日 優(yōu)先權日2010年6月10日
發(fā)明者孫艷靈, 杜宇國, 魏國華 申請人:中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心