專利名稱：毛細管驅(qū)動的檢驗裝置及其制備的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種用于表面親水化和在環(huán)烯烴共聚物表面固定抗體的改進方法，尤 其是在毛細管驅(qū)動的檢驗裝置中。
背景技術：
包括固體相的生化反應的過程取決于該固體相表面的化學和物理性質(zhì)。在以毛細 管驅(qū)動的流動形式進行免疫檢驗時，表面需要支撐液體流動并為俘獲抗體的固定提供一個 化學處理。而且，要想獲得良好的檢驗效果，分析物最好具有較高的結合能力。毛細管驅(qū)動的微流裝置例如在均屬于Amic AB的US2005/042766， US2006/0285996, US2007/0266777, US2008/0176272, US2009/0208920, US2009/0311805, US2010/0009465和US2010/0041154中所述的那樣。在毛細管驅(qū)動的微流裝置中，通常需要 對與流體接觸的表面的性質(zhì)加以改變。在很多情況下，需要改變表面的親水性以使得水溶 液能夠更容易通過毛細管系統(tǒng)流動。尤其當流動是由毛細管驅(qū)動時，能夠控制微流裝置表 面與流體之間的作用力是很重要的。微流裝置的表面可以通過數(shù)種方式來改性?，F(xiàn)有技術中的一種表面改性方式是生 成一個更致密或是更不致密的小的有機分子的單層。該層提供了流體所必需的物理性質(zhì)并 充當了較大的組織例如基質(zhì)組分和生物分子的后續(xù)連接的把手。制備這樣的表面既可以在 氣相中也可以在液相中進行。在現(xiàn)有技術中表面擴展基質(zhì)的生成包括具有較高分子量的分 子，例如葡聚糖或其它聚合材料。這樣的材料由此通常通過液相化學的手段附加到表面上， 例如通過浸涂。在某些情況下，親和結合劑，例如抗體或核酸，隨后沉積在基質(zhì)覆蓋的表面 上。W090/01167描述了一種多孔載體系統(tǒng)用于免疫檢驗成分的固定。RU2102134描述了一種具有載體的免疫吸收劑，其可以是用葡聚糖溶液改性后再 氧化得到的氧相二氧化硅。該免疫吸收劑具有改進的特定性能。Jijnsson等人在《歐洲細胞與材料》(European Cells and Materials)，vol. 14， suppl. 3，2007 (第64頁)描述了一種用氧化后的葡聚糖基質(zhì)功能化的硅烷化塑料表面。俘 獲抗體點布在該功能化的表面上。由此提供了一種用于抗體固定的高性能的基質(zhì)。該俘獲 抗體和該基質(zhì)(葡聚糖)在其被點布到該表面上之前相互并不偶聯(lián)。Jdnsson等人在《芯片試驗室》(Lab on a Chip)，vol. 8，2008，第 1191-1197 頁公 開了一種測試芯片表面的處理方法。該表面通過浸入到APTES (3-氨丙基三乙氧基硅烷) 溶液中硅烷化。隨后將氧化的葡聚糖與表面上的氨基基團偶聯(lián)。然后，將上面偶聯(lián)有氧化 的葡聚糖的表面通過一個氧化步驟來生成具有反應活性的乙醛，用于與俘獲抗體中的氨基 反應。抗體在固定到該表面之后與氧化的葡聚糖形成偶聯(lián)。W003/020978公開了一種用于制備水凝膠生物芯片的方法，其中末端具有環(huán)氧基 的星狀聚乙二醇衍生物和親水聚合交聯(lián)劑與探針或俘獲分子反應形成共軛物。該共軛物隨 后沉積在該生物芯片上。
US2006/141484公開的基材包括反應性離子蝕刻的表面和固定在該表面上的特殊 結合劑。還公開了制備該反應性離子蝕刻的表面的方法。JonssonC.等人在《歐洲細胞與材料》(European Cells and Materials)，vol. 14， 2007，suppl. 3，第64頁公開了將芯片用APTES覆蓋，用葡聚糖涂覆，氧化，并將抗體點布在 該表面上。W02005/054860公開了一種在樣品中檢測生物標記物的方法。鑒于在現(xiàn)有技術中的毛細管驅(qū)動檢驗需要表面改性，人們也期望將參與診斷檢驗 的俘獲分子連接上去。當俘獲分子被連接到毛細管驅(qū)動化流體裝置的表面時，包括親水性 在內(nèi)的表面性質(zhì)的改善就受到了限制。在某些情況下，為了得到令人滿意的毛細管作用力， 必須對毛細管驅(qū)動流體裝置的表面性質(zhì)加以改善。在現(xiàn)有技術中，毛細管驅(qū)動流體裝置仍 然具有改善的空間，無論是在俘獲分子的連接還是在表面親水性的改善方面，都是人們所 期望的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是消除現(xiàn)有技術中的至少部分缺陷并提供一種改進的方法和改進 的毛細管驅(qū)動檢驗裝置。具體而言，本發(fā)明的一個目的在于提供一種將俘獲分子連接到毛 細管驅(qū)動檢驗裝置上的可能性，從而改進表面改善的可能性。第一個方面是提供一種制備毛細管驅(qū)動檢驗裝置的方法，該方法包括以下步驟a)提供基材，所述基材包括至少一個樣品添加區(qū)，至少一個保持區(qū)，至少一個凹 槽(sink)，和連接該至少一個樣品添加區(qū)、至少一個保持區(qū)和至少一個凹槽的至少一個流 路，其中該至少一個流路是敞開的并且包括基本垂直于所述基材的表面的突起并具有高度 (H)，直徑(D)和相互的間隔(tl，t2)，以實現(xiàn)液體樣品的側向毛細管流，b)改變基材表面的親水性，c)將基質(zhì)和俘獲分子在溶液中混合從而得到包括與基質(zhì)共價結合的俘獲分子的 溶液，以及d)在該至少一個保持區(qū)的明確的區(qū)域沉積該溶液。第二個方面是提供一種包括基材的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，在所述基材上提供至少 一個樣品添加區(qū)，至少一個保持區(qū)，至少一個凹槽，和連接該至少一個樣品添加區(qū)、至少一 個保持區(qū)和至少一個凹槽的至少一個流路，其中該至少一個流路是敞開的并且包括基本垂 直于所述基材的表面的突起并具有高度(H)，直徑(D)和相互的間隔(tl，t2)，以實現(xiàn)所述 樣品的側向毛細管流，其中該毛細管驅(qū)動檢驗裝置是通過包括以下步驟的方法制備的a)改變基材表面的親水性，b)將基質(zhì)和俘獲分子在溶液中混合從而得到包括與基質(zhì)共價結合的俘獲分子的 溶液，以及c)在該至少一個保持區(qū)的明確的區(qū)域沉積該溶液。附帶的權利要求中限定了更進一步的方面和具體實施方式
，在此將其引作參考。其優(yōu)點包括能夠在毛細管驅(qū)動檢驗裝置中提供一種表面改性，并同時在基材上的 明確的和充分限定的區(qū)域固定俘獲分子。這為選擇合適的表面處理以改變毛細管驅(qū)動檢驗 裝置中的表面的親水性提供了更多的自由。其能夠通過某種表面化學品改善基材并且還能將俘獲分子沉積在最佳基質(zhì)的理想?yún)^(qū)域上。其優(yōu)點進一步包括為附著俘獲分子而使用的液相浸涂步驟不再是必需的，從而改 善了再現(xiàn)性。更進一步地，基質(zhì)僅被施加在俘獲分子沉積之處。與涂覆整個基材相比較，由此可 以消耗更少的基質(zhì)材料。由于基質(zhì)材料僅局部沉積，不同的基質(zhì)配方可以用于不同的親和 結合劑。在多路檢驗中，這一手段通過修改例如基質(zhì)的結合能力，密度或厚度，為針對不同 的俘獲分子優(yōu)化基質(zhì)配方和反應條件提供了可能。而且極少量體積的基質(zhì)材料的需求意味 著相對昂貴的基質(zhì)，例如多功能樹突/樹狀大分子或是滾環(huán)制品可以被潛在地使用。在對本發(fā)明進行公開和詳細介紹之前，應當了理解本發(fā)明并不限于本文中公開的 那些特定的化合物，配置，方法步驟，基材，和材料，因為這些化合物，配置，方法步驟，基材， 和材料可能會有一定的變化。還應當理解的是本文中使用的術語僅旨在描述特定的具體實 施方式而非限制，因為本發(fā)明的范圍僅受到所附的權利要求及其同等變化的限制。應當說明的是，當用于本說明書和附加的權利要求中時，單數(shù)形式“a”，“an”和 “the”包括復數(shù)對象，除非文中清楚地表明并非如此。如果沒有其它限定，本文中使用的任何術語或科學術語都視為具有本發(fā)明所屬領 域的技術人員通常理解的含義。在本說明書和權利要求書中與數(shù)值相連使用的術語“約“是指代一個能夠為所屬 領域的技術人員所熟知并可接受的精確度的幅度。所述的幅度是士 10%。在本權利要求書和說明書中使用的術語“分析物“是指一種物質(zhì)或是化學的或生 物的組分，在分析過程中測定其一種或多種性質(zhì)。一種分析物或一種組分自身通常不能測 量，但是能夠測量其可測量的性質(zhì)。例如可以測量一種分析物的濃度。在本權利要求書和說明書中使用的術語“分析裝置“是指一種用于分析樣品的裝 置。診斷裝置是一種分析裝置的非限定性的例子。在本權利要求書和說明書中使用的術語“毛細管流“是指主要靠毛細管作用力導 致的流動。在本權利要求書和說明書中使用的術語“俘獲分子“是指具有結合到作為目標的 另一種化學物質(zhì)或生物實體的能力的分子。術語“俘獲分子“包括具有結合到特定分子的 特定結合能力的分子。在本權利要求書和說明書中使用的術語“殼體“是指封閉部分裝置或整個裝置的 部件。在本權利要求書和說明書中使用的術語“環(huán)烯烴聚合物“是指基于不同類型的環(huán) 狀烯烴單體的環(huán)狀烯烴共聚物。基于環(huán)狀烯烴單體和乙烷的共聚物也包含在該術語下。本文中使用的“樹狀大分子”是指重復分支的分子和分子。樹狀大分子是單分散系。本文中使用的“樹狀結構”是指一種分支結構。樹狀結構的例子包括但不限于樹 突，樹狀大分子，超支化的和樹突化的聚合物。在本權利要求書和說明書中使用的術語“可檢測的基團“是指任何分子或原子的 組合，當其存在于基體上時能夠被檢測。
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在本權利要求書和說明書中使用的術語“流路“是指裝置上在不同區(qū)域之間能夠 產(chǎn)生液體流動的通道。在本權利要求書和說明書中使用的術語“流體連接“是指能夠輸送流體的連接。在本權利要求書和說明書中與表面相連使用的術語“親水性“是涉及水溶液潤濕 該表面的傾向性。潤濕是當液體與固體表面接觸時，由分子間的相互作用導致的液體與固 體表面保持接觸的能力。潤濕的程度可以通過粘附力和內(nèi)聚力之間作用力的平衡來測定。 潤濕和控制潤濕的表面作用力還導致其它相關的作用，包括毛細管作用。在本權利要求書和說明書中與聚合物分子相關使用的術語“超支化“是指高度分 枝的結構。在本權利要求書和說明書中使用的術語“蓋子“是指覆蓋部分裝置或整個裝置的 部件。在本權利要求書和說明書中使用的術語“基質(zhì)“是指俘獲分子所偶聯(lián)到的材料。在本權利要求書和說明書中與毛細管流相關使用的術語“敞開”是指系統(tǒng)是敞開 的，即系統(tǒng)不是封閉的。敞開的系統(tǒng)的例子包括蓋子不與樣品液體產(chǎn)生毛細管接觸的系統(tǒng)。 在敞開的系統(tǒng)里，蓋子不與樣品液體產(chǎn)生毛細管接觸，即蓋子不參與形成毛細管作用力。在本權利要求書和說明書中使用的術語“相互的間隔“是指相鄰的突起之間的距 罔。在本權利要求書和說明書中使用的術語“保持區(qū)“是指毛細管驅(qū)動的檢驗裝置上 樣品中的分子能夠與俘獲分子結合的區(qū)域。在本權利要求書和說明書中使用的術語“樣品“是指要分析的混合物或溶液。在本權利要求書和說明書中使用的術語“樣品添加區(qū)“是指添加樣品的區(qū)域。在本權利要求書和說明書中使用的術語“硅烷化“是指硅烷分子附加到表面上。在本權利要求書和說明書中使用的術語“凹槽“是指具有接受液體樣品的容積的 區(qū)域。在本權利要求書和說明書中使用的術語“物質(zhì)“是指任何純凈的化學物質(zhì)或生物 實體或包括至少一種化學物質(zhì)或生物實體的任何混合物或溶液。


參照以下附圖對本發(fā)明作了更詳細的說明圖1表示了 一種檢驗裝置的示意圖，A是樣品添加區(qū)，B是保持區(qū)，C是具有接受液 體樣品容積的凹槽。圖2表示了先氣相沉積然后點涂與葡聚糖基質(zhì)共價偶合的抗體的示意圖。上部的 板表明基材表面親水性的改變。中間的表明葡聚糖-抗體復合體的沉積。在底部的板上表 示了沉積的復合體包括葡聚糖偶合到抗體?；|(zhì)僅存在于抗體沉積之處。圖3表示了分別具有浸涂葡聚糖和點布葡聚糖的CRP檢驗的劑量響應對比。發(fā)明詳述在此提供了一種制造毛細管驅(qū)動檢驗裝置的方法，該方法包括以下步驟a)提供基材，所述基材包括至少一個樣品添加區(qū)，至少一個保持區(qū)，至少一個凹 槽，和連接該至少一個樣品添加區(qū)、至少一個保持區(qū)和至少一個凹槽的至少一個流路，其中該至少一個流路是敞開的并且包括基本垂直于所述基材的表面的突起并具有高度(H)，直 徑⑶和相互的間隔(tl，t2)，以實現(xiàn)液體樣品的側向毛細管流，b)改變基材表面的親水性，c)將基質(zhì)和俘獲分子在溶液中混合從而得到包括與基質(zhì)共價結合的俘獲分子的 溶液，以及d)在該至少一個保持區(qū)的明確的區(qū)域沉積該溶液。在一種具體實施方式
中，毛細管驅(qū)動檢驗裝置的表面在所述沉積之前氧化。在一 種具體實施方式
中，氧化步驟包括電暈處理。在一種具體實施方式
中，基材表面首先通過氣 相電暈反應活化，隨后小的有機交聯(lián)劑分子通過氣相沉積連接到表面上。氣相沉積是有利 的，因其減少了生產(chǎn)的復雜性而且改善了重現(xiàn)性和涂層的均勻性。交聯(lián)劑分子的自由端具 有活性基團(例如氨基)可與基質(zhì)反應或與基質(zhì)親和。該結合劑-基質(zhì)復合體由此可以直 接點布在活化后的表面上。在一種具體實施方式
中，毛細管驅(qū)動檢驗裝置的至少一部分表面是硅烷化的。在 一種具體實施方式
中，該硅烷化步驟包括在氣相中硅烷化。在步驟b)中，改變基材的表面親水性，既包括增加親水性又包括降低疏水性。在 一種具體實施方式
中，通過向表面上添加極性基團來增加親水性。在一種具體實施方式
中， 通過向表面上添加荷電基團來增加親水性。在一種具體實施方式
中，改變基材整體表面的親水性。在另一種替代的具體實施 方式中，改變基材的一側表面的親水性。在一種具體實施方式
中，毛細管驅(qū)動檢驗裝置包括至少一個環(huán)烯烴聚合物表面。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包括多糖類。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包括瓊脂 糖。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包括葡聚糖。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包括氧化的葡 聚糖。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包括聚丙烯酰胺凝膠。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包 括超支化的聚合物。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包括樹突。在一種具體實施方式
中，基質(zhì) 包括樹狀大分子。在一種具體實施方式
中，基質(zhì)包括上述物質(zhì)的組合。在一種具體實施方式
中，俘獲分子包括至少一種主體，選自抗體，適體，核酸探針， DNA探針，RNA探針，PNA探針，抗體片段，F(xiàn)ab片段，和scFv片段組成的組。在一種具體實 施方式中，俘獲分子是抗體。在一種具體實施方式
中，俘獲分子包括上述物質(zhì)的組合。在此進一步提供一種包括基材的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，在所述基材上提供至少一 個樣品添加區(qū)，至少一個保持區(qū)，至少一個凹槽，和連接該至少一個樣品添加區(qū)、至少一個 保持區(qū)和至少一個凹槽的至少一個流路，其中該至少一個流路是敞開的并且包括基本垂直 于所述基材的表面的突起并具有高度(H)，直徑(D)和相互的間隔(tl，t2)，以實現(xiàn)所述樣 品的側向毛細管流，其中該毛細管驅(qū)動檢驗裝置是通過包括以下步驟的方法制備的a)改變基材表面的親水性，b)將基質(zhì)和俘獲分子在溶液中混合從而得到包括與基質(zhì)共價地結合的俘獲分子 的溶液，以及c)在該至少一個保持區(qū)的明確的區(qū)域沉積該溶液。在一種具體實施方式
中，該毛細管驅(qū)動檢驗裝置包括至少兩種不同的基質(zhì)和至少 兩種不同的俘獲分子，其中每一種基質(zhì)與特定類型的俘獲分子共價地偶合。
在此公開了一種僅在俘獲分子沉積之處生成具有局部三維的高性能基質(zhì)的方法。 這是通過在沉積之前在均相中將結合劑結合到表面放大的基質(zhì)上來實現(xiàn)的?；牡挠H水 性得到改變以及表面改性的例子包括但不限于吸附有機分子，在基材表面上與化學基團反 應。在圖2中，頂部的板表示一種改變疏水性后的基材的具體實施方式
。在圖2中，中間的 板表示了俘獲分子是如何在沉積到表面上之前結合到基質(zhì)上。在圖2中，底部的板表示包 括結合到俘獲分子的基質(zhì)的復合體是如何沉積到表面上。無定形的聚合物材料因其顯示出具有較高的玻璃化溫度，Tg，光學透明度，低收縮 性，低吸濕性，以及低的雙折射性的性質(zhì)而適于用作基材。環(huán)烯烴聚合物具有大量的環(huán)狀烯 烴單元任意地或交替地與聚合物骨架相連，由此該聚合物成為無定形的并且顯示出理想的 性質(zhì)。在一種具體實施方式
中，該毛細管驅(qū)動檢驗裝置包括至少一個環(huán)烯烴聚合物表面。在 一種具體實施方式
中，該毛細管驅(qū)動檢驗裝置由環(huán)烯烴聚合物制成。在一種具體實施方式
中，該毛細管驅(qū)動檢驗裝置用環(huán)烯烴聚合物注壓制成。在一種具體實施方式
中，該環(huán)烯烴聚 合物由各種環(huán)狀單體通過開環(huán)置換聚合而后加氫制備得到。在一種具體實施方式
中，該檢驗裝置包括至少兩種不同的基質(zhì)和至少兩種不同的 俘獲分子，其中每一種基質(zhì)與特定類型的俘獲分子共價地偶合。通過這樣可能使用不同的 俘獲分子完成多路分析，其中每一種俘獲分子具有其自身個別適用的基質(zhì)。每一對的俘獲 分子和基質(zhì)混合而后點布到該檢驗裝置上預定的明確的區(qū)域。在閱讀本說明書和實施例之后，本發(fā)明的其它特點和其相關的優(yōu)點對于本領域的 技術人員來說是顯然的。應當理解本發(fā)明并非限于在此展示的特定的具體實施方式
。以下的實施例是用于 說明之目的而非對本發(fā)明范圍的限制。因為本發(fā)明的范圍僅受到所附的權利要求及其同等 變化的限制。
實施例使用由Zeonoi€) (Zeon公司，日本)制成的塑料基材芯片在氧氣電暈中氧化。該 氧化是在電暈倉室(400電暈系統(tǒng))中持續(xù)6分鐘，工作壓力0. 26mbar，1000W，氧氣流量 100ml/mino使用兩種不同的硅烷化手段。氣相硅烷化是在Solitec BPM-2000倉室每批次三 個芯片進行的。每次沉積中，將250μ 1的APTES(Fluka)施加到置于倉室內(nèi)熱板(80°C ) 上的表面皿上。在25mmHg的工作壓力下沉積15分鐘。由于受到氣相沉積倉室生產(chǎn)能力 的限制，液相沉積方法也被使用。在本方法中，將芯片浸入到3vol %的APTES在95%乙醇 (Kemetyl, Sweden)中的溶液中2小時。將芯片在乙醇和MilliQ-H2O中嚴格地沖洗。在這 兩種手段中，均在室溫空氣中過夜將硅烷層固化以使硅烷交聯(lián)從而得到穩(wěn)定的氨基功能化 的表面。氧化的葡聚糖(Dextran T40 (40kDa)，Pharmacosmos，Denmark)通過在稀釋 到2 %的30mM的NaI04(Sigma Aldrich)中氧化制備的。俘獲抗體(α CPR，clone nr M701289，F(xiàn)itzgerald, ΜΑ)在水溶液中偶合到氧化的葡聚糖上。該溶液含有500 μ g/ml的 抗體，2%的氧化的葡聚糖，的海藻糖(Sigma Aldrich)和50mM的NaPO4 (ρΗ7· 5，Sigma Aldrich)緩沖劑。該溶液在沉積到該芯片表面的至少一個保持區(qū)之前培養(yǎng)1小時。將該
9溶液沿橫過芯片流道的線進行點布。該混合物是在濕度條件(相對濕度75%)下使用 Nano-PlotterNP2. 1 (Ge-Sim,Germany)在整個過流道上點布的，形成一個 0. 5X 2mm的條 帶。沉積的全部體積為16nl。在控制試驗中，整個芯片首先浸入氧化的2%的葡聚糖溶液 中2小時并在MiIliQ-H2O中徹底漂洗。俘獲抗體通過同樣的手段沉積代替帶有MilliQ-H20 的該葡聚糖。 完成一個競爭性的CRP檢驗以表示該方法的性能。通過將CRP在貧CRP血清 (Scipack，UK)中分五步(250，50，10，2，0. 4和Omg/1)稀釋以制備CRP檢驗樣品。CRP 購自Scipack，UK。CRP是按照供貨商的指導使用AleXaFluor€)647蛋白質(zhì)標記試劑盒 (Invitrogen,US)進行熒光標記的。將標記后的CRP加入到樣品中，制成的最終濃度為lmg/ 1。將37μ 1的樣品添加到芯片的樣品區(qū)，微毛細陣列的毛細管作用將樣品分布通過該至少 一個保持區(qū)并進入芯吸區(qū)。添加的體積略大于芯片中能夠保持的最大體積。在讀出信號前 不再需要添加其它液體。通常的檢驗時間約為10分鐘。信號的強度記錄在原型線照明熒光 掃描儀中。對每個檢驗使用一個新的芯片，并且全部檢驗重復進行三次，除非有其它說明。 點布葡聚糖和浸涂葡聚糖的對照檢驗試驗的結果如圖3所示。
權利要求
一種制備毛細管驅(qū)動檢驗裝置的方法，所述方法包括以下步驟a)提供基材，所述基材包括至少一個樣品添加區(qū)，至少一個保持區(qū)，至少一個凹槽，和連接所述至少一個樣品添加區(qū)、至少一個保持區(qū)和至少一個凹槽的至少一個流路，其中所述至少一個流路是敞開的并且包括基本垂直于所述基材的表面的突起并具有高度(H)，直徑(D)和相互的間隔(t1，t2)，以實現(xiàn)液體樣品的側向毛細管流，b)改變基材表面的親水性，c)將基質(zhì)和俘獲分子在溶液中混合從而得到包括與基質(zhì)共價地結合的俘獲分子的溶液，以及d)在所述至少一個保持區(qū)的明確的區(qū)域沉積所述溶液。
2.如權利要求1中的方法，其中所述毛細管驅(qū)動檢驗裝置的表面在所述沉積之前被氧化。
3.如權利要求1-2中任一項的方法，其中所述氧化步驟包括電暈處理。
4.如權利要求1-3中任一項的方法，其中所述毛細管驅(qū)動檢驗裝置的表面的至少一部 分是硅烷化的。
5.如權利要求4的方法，其中所述硅烷化步驟包括在氣相中硅烷化。
6.如權利要求1-5中任一項的方法，其中所述毛細管驅(qū)動檢驗裝置包括至少一個環(huán)烯 烴聚合物表面。
7.如權利要求1-6中任一項的方法，其中基質(zhì)包括多糖。
8.如權利要求1-7中任一項的方法，其中基質(zhì)包括瓊脂糖。
9.如權利要求1-8中任一項的方法，其中基質(zhì)包括葡聚糖。
10.如權利要求1-9中任一項的方法，其中基質(zhì)包括氧化的葡聚糖。
11.如權利要求1-10中任一項的方法，其中基質(zhì)包括聚丙烯酰胺凝膠。
12.如權利要求1-11中任一項的方法，其中基質(zhì)包括超支化的聚合物。
13.如權利要求1-12中任一項的方法，其中基質(zhì)包括樹突。
14.如權利要求1-13中任一項的方法，其中基質(zhì)包括樹狀大分子。
15.如權利要求1-14中任一項的方法，其中俘獲分子包括至少一種主體選自抗體，適 體，核酸探針，DNA探針，RNA探針，PNA探針，抗體片段，F(xiàn)ab片段，和scFv片段組成的組。
16.如權利要求1-15中任一項的方法，其中俘獲分子是抗體。
17.—種包括基材的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，在所述基材上提供至少一個樣品添加區(qū)，至 少一個保持區(qū)，至少一個凹槽，和連接所述至少一個樣品添加區(qū)、至少一個保持區(qū)和至少一 個凹槽的至少一個流路，其中所述至少一個流路是敞開的并且包括基本垂直于所述基材的 表面的突起并具有高度(H)，直徑(D)和相互的間隔(tl，t2)，以實現(xiàn)所述樣品的側向毛細 管流，其特征在于所述毛細管驅(qū)動檢驗裝置是通過包括以下步驟的方法制備的a)改變基材表面的親水性，b)將基質(zhì)和俘獲分子在溶液中混合從而得到包括與基質(zhì)共價地結合的俘獲分子的溶 液，以及c)在所述至少一個保持區(qū)的明確的區(qū)域沉積所述溶液。
18.如權利要求17中的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中所述毛細管驅(qū)動檢驗裝置的表面在 步驟c)之前被氧化。
19.如權利要求17-18中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中所述氧化步驟包括電暈處理。
20.如權利要求17-19中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中所述毛細管驅(qū)動檢驗裝 置的表面的至少一部分被硅烷化。
21.如權利要求20中的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中所述硅烷化步驟包括在氣相中硅烷化。
22.如權利要求17-21中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中所述毛細管驅(qū)動檢驗裝 置包括至少一個環(huán)烯烴聚合物表面。
23.如權利要求17-22中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括多糖。
24.如權利要求17-23中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括瓊脂糖。
25.如權利要求17-24中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括葡聚糖。
26.如權利要求17-25中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括氧化的葡聚糖。
27.如權利要求17-26中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括聚丙烯酰胺凝膠。
28.如權利要求17-27中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括超支化的聚合物。
29.如權利要求17-28中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括樹突。
30.如權利要求17-29中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中基質(zhì)包括樹狀大分子。
31.如權利要求17-30中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中俘獲分子包括至少一種 主體選自抗體，適體，核酸探針，DNA探針，RNA探針，PNA探針，抗體片段，F(xiàn)ab片段，和scFv 片段組成的組。
32.如權利要求17-31中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中俘獲分子是抗體。
33.如權利要求17-32中任一項的毛細管驅(qū)動檢驗裝置，其中包括至少兩種不同的基 質(zhì)和至少兩種不同的俘獲分子，其中每一種基質(zhì)與特定類型的俘獲分子共價地偶合。
全文摘要
毛細管驅(qū)動的檢驗裝置及其制備。一種用于制備毛細管驅(qū)動的檢驗裝置的方法，其包括以下步驟a)提供一種毛細管基材，b)改善基材表面的親水性，c)將基質(zhì)和俘獲分子在溶液中混合從而得到包括與基質(zhì)共價結合的俘獲分子溶液，以及d)在該至少一個保持區(qū)的明確的區(qū)域沉積該溶液。一種通過該方法得到的毛細管驅(qū)動的檢驗裝置。本發(fā)明的優(yōu)點包括能夠通過一種表面化學品改善該基材并且還能將俘獲分子沉積在最佳基質(zhì)的理想?yún)^(qū)域。消耗的基質(zhì)材料較少，并由此能夠在一個芯片上使用數(shù)種不同的基質(zhì)材料。
文檔編號G01N33/543GK101957368SQ201010250048
公開日2011年1月26日 申請日期2010年7月2日 優(yōu)先權日2009年7月2日
發(fā)明者C·瓊森, J·梅林 申請人:阿米克股份公司