專利名稱：膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥包材成分的檢測(cè)方法，具體地說，涉及膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì)是指為了改善膠塞的使用性能和膠塞本身的耐用性而在膠塞的生產(chǎn)過程中添加的一些成分。上述揮發(fā)性物質(zhì)(如BHT、聚乙烯脂、硬脂酸、硅油等) 會(huì)在膠塞的使用過程中揮發(fā)出來，特別是藥用膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì)會(huì)污染藥品。如果藥品中所含的上述揮發(fā)性物質(zhì)水平高于安全值時(shí)，就會(huì)影響藥品的質(zhì)量并對(duì)人體產(chǎn)生危害。對(duì)膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行控制的難點(diǎn)在于，相同品種的膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì)具有不確定性。這是由于不同的生產(chǎn)企業(yè)可以采用不同的配方和生產(chǎn)工藝生產(chǎn)相同品種的膠塞，而且膠塞的生產(chǎn)工藝也在不斷變化改進(jìn)，使得膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì)不斷變化，因此建立全面快速的檢測(cè)系統(tǒng)是膠塞揮發(fā)性物質(zhì)測(cè)定的趨勢(shì)。目前，國(guó)內(nèi)尚無針對(duì)膠塞揮發(fā)性物質(zhì)的檢測(cè)方法，藥典常用氣相色譜法(GC)對(duì)藥品中的殘留溶劑進(jìn)行檢測(cè)(殘留溶劑也是揮發(fā)性的，但是不同于膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì))，如 《中國(guó)藥典》2010版推薦的檢測(cè)方法為頂空毛細(xì)管氣相色譜法。氣相色譜法中的定性分析主要是依據(jù)保留時(shí)間，這需要和已知的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時(shí)間進(jìn)行比對(duì)，但是對(duì)于未知峰，則很難進(jìn)行定性分析。此外，用常規(guī)氣相色譜法檢測(cè)膠塞中含有的揮發(fā)性物質(zhì)時(shí)，由于膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì)種類較多，不同揮發(fā)性物質(zhì)在一根色譜柱上的保留時(shí)間可能相同或相近，這給揮發(fā)性物質(zhì)的定性及定量分析都帶來了困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測(cè)方法，其包括如下步驟1)數(shù)據(jù)庫(kù)的建立a、用極性相反的兩個(gè)色譜柱對(duì)建庫(kù)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行氣相色譜分析，然后以2，6_ 二叔丁基對(duì)甲酚(BHT)為參比物質(zhì)，分別計(jì)算各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間；b、然后再用所述極性相反的兩個(gè)色譜柱對(duì)所述建庫(kù)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行氣質(zhì)聯(lián)用分析，分別對(duì)所述建庫(kù)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行定性分析，確定其所屬種類；C、在所述建庫(kù)樣品中加入內(nèi)標(biāo)物，重復(fù)步驟a、b，然后將氣相色譜檢測(cè)器上的經(jīng)由所述極性相反的兩個(gè)色譜柱得到的色譜峰，分別與質(zhì)譜檢測(cè)器上得到的峰進(jìn)行相似度匹配；d、根據(jù)步驟c的相似度匹配結(jié)果，建立所述極性相反的兩個(gè)色譜柱的色譜峰之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，及其與質(zhì)譜圖之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，并根據(jù)質(zhì)譜進(jìn)行歸類，從而建立數(shù)據(jù)庫(kù)；2)待測(cè)膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的測(cè)定
e、用所述極性相反的兩個(gè)色譜柱對(duì)待測(cè)膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行氣相色譜分析， 并根據(jù)步驟a方法計(jì)算兩個(gè)色譜柱的各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間；f、將步驟e得到的相對(duì)保留時(shí)間與步驟1)的數(shù)據(jù)庫(kù)相比較，從而確定待測(cè)膠塞中含有的揮發(fā)性物質(zhì)的種類。其中，所述建庫(kù)樣品包括丁基膠塞、溴化丁基膠塞及氯化丁基膠塞等已知的各種膠塞；還可以包括聚乙烯脂，酚醛樹脂、硬脂酸、溴化丁基膠塞原膠，氯化丁基膠塞原膠及俄羅斯膠等現(xiàn)有膠塞的各種原輔料。所述內(nèi)標(biāo)物為苯、甲苯、乙酸丁酯、四氫化萘、正丁醇、正戊醇或BHT等。所述極性相反的兩個(gè)色譜柱是指在氣相色譜中并聯(lián)的兩個(gè)極性相反的色譜柱，優(yōu)選為非極性色譜柱和極性色譜柱。其中，所述非極性色譜柱包括固定相為聚氧硅烷或聚二甲基硅烷的色譜柱，如Supelco公司生產(chǎn)的SPB-I型非極性色譜柱；所述極性色譜柱包括固定相為聚乙二醇-硝基對(duì)苯二甲酸修飾的色譜柱，如安捷倫公司生產(chǎn)的HP-FFAP型極性色譜柱。步驟a中氣相色譜的色譜條件為程序升溫40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；進(jìn)樣口溫度:200°C;恒定流速2. OmL/min ；載氣氦氣；分流比5 1 ；檢測(cè)器溫度250°C;頂空溫度:150°C ；頂空時(shí)間:30min。步驟b中氣質(zhì)聯(lián)用色譜條件為程序升溫40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；進(jìn)樣口溫度200°C ；恒定流速1. OmL/min ；不分流；檢測(cè)器溫度250°C ；頂空溫度150°C ；頂空時(shí)間:30min。本發(fā)明所述的相似度匹配是使用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)Q004A版， 國(guó)家藥典委員會(huì))進(jìn)行相似度分析，相似度在800以上可以認(rèn)為是相匹配的峰，所述相似度分析的計(jì)算原理為夾角余弦。此外，為了驗(yàn)證本發(fā)明方法的重復(fù)性，還可以在建立數(shù)據(jù)庫(kù)后增加確定每種揮發(fā)性物質(zhì)的時(shí)間窗的步驟。本發(fā)明方法在氣相色譜的進(jìn)樣系統(tǒng)后增加了一個(gè)雙通道或三通道的分流管，每個(gè)通道有獨(dú)立的開關(guān)控制其流通量，分流管后至少并列連接兩個(gè)極性相反的色譜柱，從而實(shí)現(xiàn)了并聯(lián)使用兩個(gè)極性相反的色譜柱的目的，其能夠在保證進(jìn)樣樣品和進(jìn)樣條件一致性的同時(shí)，使得在一根色譜柱上保留時(shí)間相同或相近的揮發(fā)性物質(zhì)在極性相反的色譜柱上有相差較大的保留時(shí)間。具體地說，本發(fā)明方法中使用的氣相色譜，當(dāng)使用雙通道的分流管時(shí)，與之并列連接的是兩根極性相反的色譜柱；當(dāng)使用三通道的分流管時(shí)，與之并列連接的除了上述極性相反的色譜柱外，還有質(zhì)譜分析系統(tǒng)，使質(zhì)譜分析系統(tǒng)與氣相色譜構(gòu)成并列運(yùn)作的分析系統(tǒng)。所述分流管可以是玻璃管、不銹鋼管等現(xiàn)有色譜儀器中可以使用的材質(zhì)制備的分流管，對(duì)其形狀、大小等沒有特別限制，可以根據(jù)不同型號(hào)的儀器進(jìn)行選擇。所述分流管可以以可拆卸的方式應(yīng)用于氣相色譜中；也可以將其固定在氣相色譜儀或氣質(zhì)聯(lián)用儀器中， 此時(shí)通過控制每個(gè)通道的開關(guān)來選擇不同的檢測(cè)系統(tǒng)，例如為單色譜柱、雙色譜柱、或氣相和質(zhì)譜并用檢測(cè)系統(tǒng)。本發(fā)明的檢測(cè)方法，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，將極性相反的兩個(gè)色譜柱并聯(lián)使用，在保證進(jìn)樣樣品和進(jìn)樣條件一致性的同時(shí)，使得在一根色譜柱上保留時(shí)間相同或相近的揮發(fā)性物質(zhì)在極性相反的色譜柱上有相差較大的保留時(shí)間。通過將兩根色譜柱測(cè)定后的保留時(shí)間與數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比較，結(jié)果可以在沒有標(biāo)準(zhǔn)品的情況下進(jìn)行定性分析，初步確定藥用膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的種類，從而避免了對(duì)未知峰進(jìn)行盲目篩選。當(dāng)測(cè)量過程中出現(xiàn)未知色譜峰需要進(jìn)一步確定時(shí)，可以使用與色譜柱系統(tǒng)并聯(lián)的質(zhì)譜分析系統(tǒng)同時(shí)檢測(cè)，綜合所得結(jié)果進(jìn)行確定。此外，由于同一種揮發(fā)性物質(zhì)在極性不同的色譜柱上的保留時(shí)間不同，相對(duì)保留時(shí)間也不同，因此通過聯(lián)用質(zhì)譜來確定同一揮發(fā)性物質(zhì)在兩種色譜柱上的保留時(shí)間，并把這兩個(gè)保留時(shí)間聯(lián)系起來，形成互為佐證的一個(gè)系統(tǒng)，并通過質(zhì)譜的NIST數(shù)據(jù)庫(kù)提供的結(jié)構(gòu)式，并用有機(jī)化合物命名法命名，從而對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行歸類，從而建立膠塞揮發(fā)性物質(zhì)的數(shù)據(jù)庫(kù)。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，本發(fā)明方法能夠使同一樣品在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)得到兩組數(shù)據(jù)，大大節(jié)省了定性篩選的試驗(yàn)時(shí)間，并可以有效排除共出峰的干擾；通過建立膠塞揮發(fā)性物質(zhì)的數(shù)據(jù)庫(kù)，可以快速全面地對(duì)膠塞揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行篩選，不局限于具體品種，是通用型數(shù)據(jù)庫(kù)；另外，本發(fā)明方法易于推廣。


圖1為雙通道并聯(lián)色譜柱系統(tǒng)模式圖；圖2為膠塞揮發(fā)性物質(zhì)極性色譜系統(tǒng)擬合圖譜；圖3為膠塞揮發(fā)性物質(zhì)非極性色譜系統(tǒng)擬合圖譜。
具體實(shí)施例方式以下通過具體實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1膠塞揮發(fā)性物質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)的建立儀器和軟件1 (氣相)Trace GC Ultra (熱電公司)；頂空系統(tǒng)(熱電公司)；數(shù)據(jù)分析軟件為)(calibur 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(熱電公司)；色譜柱SPB-I型非極性色譜柱(30mX0.32mmXlum， supelco)，HP-FFAP型極性色譜柱(30mX0. 32mmX0. 52um,安捷倫公司)，各部件連接示意圖如圖1所示。色譜條件1 (氣相)程序升溫40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；進(jìn)樣口溫度:200°C;恒定流速2. OmL/min ；載氣氦氣；分流比5 1 ；檢測(cè)器溫度250°C;頂空溫度:150°C ；頂空時(shí)間:30min。儀器和軟件2 (氣質(zhì)聯(lián)用)Trace GC Ultra-Polaris Q(熱電公司)；頂空系統(tǒng)(熱電公司)；數(shù)據(jù)分析軟件為kalibur數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(熱電公司)；色譜柱SPB-I型非極性色譜柱 (30mX0. 25mmX 0. 25um, supelco)，HP-FFAP 型極性色譜柱(30mX 0. 25mmX 0. 25um，安捷倫公司)。色譜條件2 (氣質(zhì)聯(lián)用)程序升溫40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；進(jìn)樣口溫度200°C ；恒定流速1. Oml/min ；不分流；檢測(cè)器溫度250°C ；頂空溫度150°C ；頂空時(shí)間:30min。BHT參比物質(zhì)的配置精密稱取5mgBHT，與50g分析純氯化鈉在研缽中混合并研制均勻，制成濃度0. 1 μ g/mg的參比物。建庫(kù)樣品氯化丁基橡膠塞(江陰蘭陵、山東藥玻)、溴化丁基橡膠塞(江蘇博生醫(yī)用材料股份有限公司、安徽華峰、成都南環(huán))、丁基橡膠塞(重慶三海蘭陵公司)。內(nèi)標(biāo)物苯、甲苯、乙酸丁酯、四氫化萘、正丁醇、正戊醇及2，6_ 二叔丁基對(duì)甲酚。步驟(1)在上述給定的色譜條件1下，以甲烷測(cè)定死時(shí)間，分別測(cè)定建庫(kù)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)在極性與非極性色譜柱(兩個(gè)色譜系統(tǒng))上的保留時(shí)間；以BHT的調(diào)整保留時(shí)間作為參比，計(jì)算每種揮發(fā)性物質(zhì)的調(diào)整相對(duì)保留時(shí)間，結(jié)果見表1，其中Tk(min)為保留時(shí)間， RART為調(diào)整相對(duì)保留時(shí)間；(2)在上述給定的色譜條件2下，用質(zhì)譜檢測(cè)器對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見表2;(3)在標(biāo)準(zhǔn)樣品中加入多種不同的內(nèi)標(biāo)物，重復(fù)步驟(1)、O)，然后分別對(duì)并聯(lián)的極性和非極性色譜柱系統(tǒng)在FID檢測(cè)器上得到的揮發(fā)性物質(zhì)的峰與在質(zhì)譜檢測(cè)器上得到的揮發(fā)性物質(zhì)的峰進(jìn)行匹配，結(jié)果見表3 4 ；所述匹配是用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)O004A版，國(guó)家藥典委員會(huì))進(jìn)行相似度分析，相似度在800以上可以認(rèn)為是相匹配的峰；(4)然后根據(jù)匹配結(jié)果，建立標(biāo)準(zhǔn)樣品的揮發(fā)性物質(zhì)在極性相反的兩個(gè)色譜柱的峰之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系(如表5所示)，及其與質(zhì)譜圖之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，并根據(jù)質(zhì)譜對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行歸類，從而建立膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)，結(jié)果如表6所示；(5)確定每種揮發(fā)性物質(zhì)時(shí)間窗，以驗(yàn)證本發(fā)明方法的重復(fù)性，結(jié)果見表7。表1氣相中膠塞揮發(fā)性物質(zhì)的的保留時(shí)間和相對(duì)保留時(shí)間
權(quán)利要求
1.膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測(cè)方法，其包括如下步驟1)數(shù)據(jù)庫(kù)的建立a、用極性相反的兩個(gè)色譜柱對(duì)建庫(kù)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行氣相色譜分析，然后以2， 6-二叔丁基對(duì)甲酚為參比物質(zhì)，分別計(jì)算各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間；b、然后再用所述極性相反的兩個(gè)色譜柱對(duì)所述建庫(kù)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行氣質(zhì)聯(lián)用分析，分別對(duì)所述建庫(kù)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行定性分析，確定其所屬種類；C、在所述建庫(kù)樣品中加入內(nèi)標(biāo)物，重復(fù)步驟a、b，然后將氣相色譜檢測(cè)器上的經(jīng)由所述極性相反的兩個(gè)色譜柱得到的色譜峰，分別與質(zhì)譜檢測(cè)器上得到的峰進(jìn)行相似度匹配；d、根據(jù)步驟c的相似度匹配結(jié)果，建立所述極性相反的兩個(gè)色譜柱的色譜峰之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，及其與質(zhì)譜圖之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，并根據(jù)質(zhì)譜結(jié)果進(jìn)行歸類，從而建立數(shù)據(jù)庫(kù)；2)待測(cè)膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的測(cè)定e、用所述極性相反的兩個(gè)色譜柱對(duì)待測(cè)膠塞中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行氣相色譜分析，并根據(jù)步驟a方法計(jì)算兩個(gè)色譜柱的各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間；f、將步驟e得到的相對(duì)保留時(shí)間與步驟1)的數(shù)據(jù)庫(kù)相比較，從而確定待測(cè)膠塞中含有的揮發(fā)性物質(zhì)的種類。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述建庫(kù)樣品包括丁基膠塞、溴化丁基膠塞及氯化丁基膠塞。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述建庫(kù)樣品還包括聚乙烯脂， 酚醛樹脂、硬脂酸、溴化丁基膠塞原膠，氯化丁基膠塞原膠及俄羅斯膠。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述內(nèi)標(biāo)物為苯、甲苯、乙酸丁酯、 四氫化萘、正丁醇、正戊醇或2，6_ 二叔丁基對(duì)甲酚。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述極性相反的兩個(gè)色譜柱是指在氣相色譜中并聯(lián)的兩個(gè)極性相反的色譜柱。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述極性相反的兩個(gè)色譜柱為非極性色譜柱和極性色譜柱。
7.根據(jù)權(quán)利要求1任意一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟a中所述氣相色譜的色譜條件為程序升溫40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；進(jìn)樣口溫度:200°C;恒定流速2. OmL/min ；載氣氦氣；分流比5 1 ；檢測(cè)器溫度250°C;頂空溫度:150°C ；頂空時(shí)間:30min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1任意一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，步驟b中所述氣質(zhì)聯(lián)用的色譜條件為程序升溫40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；進(jìn)樣口溫度200°C ；恒定流速1. OmL/min ；不分流；檢測(cè)器溫度250°C ；頂空溫度150°C ；頂空時(shí)間30min。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測(cè)方法，其包括如下步驟1)建立膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)；2)測(cè)定待測(cè)膠塞中揮發(fā)性物質(zhì)。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，本發(fā)明方法能夠使同一樣品在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)得到兩組數(shù)據(jù)，大大節(jié)省了定性篩選的試驗(yàn)時(shí)間，并可以有效排除共出峰的干擾；通過建立膠塞揮發(fā)性物質(zhì)的數(shù)據(jù)庫(kù)，可以快速全面地對(duì)膠塞揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行篩選，不局限于具體品種，是通用型數(shù)據(jù)庫(kù)；另外，本發(fā)明方法易于推廣。
文檔編號(hào)G01N30/88GK102375043SQ20101026361
公開日2012年3月14日 申請(qǐng)日期2010年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月25日
發(fā)明者崇小萌, 張宇, 胡昌勤 申請(qǐng)人:中國(guó)藥品生物制品檢定所