專利名稱：N-(n-苯甲酰基-苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物的檢測方法
技術領域：
本發(fā)明屬于藥物分析技術領域，涉及N- (N-苯甲?；?苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物的檢測方法，尤其是N- (N-苯甲?；?苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物及其相關制劑的光學異構體的檢測方法。
背景技術：
在中國專利CN1194676C中，公開了一種從苗族藥馬蹄金(Dichondra repens Forst.)中分離得到的具有抗乙肝病毒活性的單體N- (N-苯甲?；?苯丙氨?；?-0-乙酰基-L-苯丙氨醇，而中國專利CN100480234C中公開了以上述單體為母體進行結構修飾和改造設計合成的一系列結構新穎的N- (N-苯甲?；?苯丙氨酰基)-苯丙氨酸二肽衍生物，已證實部分衍生物具有抑制乙肝病毒(HBV)的活性，且毒副作用低，作為一類非核苷類抗病毒藥物，可用于制備治療病毒性感染藥物，尤其是用于制備抗乙肝病毒和抗人免疫缺陷病毒的藥物。鑒于N- (N-苯甲酰基-苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物是一類新化合物，由于其含有兩個手性中心，需要建立一種能夠同時檢測其各種構型異構體且分離度符合標準的方法。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是提供一種N- (N-苯甲?；?苯丙氨酰基)-苯丙氨酸二肽衍生物的光學異構體的檢測方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的。本發(fā)明提供的N-(N_苯甲酰基-苯丙氨?；?_苯丙氨酸二肽衍生物的光學異構體的檢測方法，所述方法為高效液相色譜法， 其中的色譜條件如下色譜柱為固定相為表面涂敷或鍵合手性多聚物(例如，直鏈淀粉或纖維素衍生物)的球形硅膠為填料的手性色譜柱，檢測波長為200-260nm，流動相為烷烴/ 醇類，流速為0. 4-1. 5ml/min。此外，理論塔板數(shù)按N- (N-苯甲?；?苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物計算不低于5000。優(yōu)選地，所述色譜柱選自CHIRALPAK IA 或 CHIRALPAK AD-H。優(yōu)選地，所述檢測波長為M6nm。優(yōu)選地，所述流動相中烷烴與醇類的體積比為50-95 50-5，優(yōu)選為 80-90 20-10。優(yōu)選地，所述流動相中烷烴選自正己烷、正戊烷、正庚烷和正辛烷中的一種或幾種；和/或優(yōu)選地，所述醇類選自乙醇、異丙醇、正丁醇中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述烷烴為正己烷，和/或所述醇類為異丙醇。優(yōu)選地，所述流動相中還包括作為添加劑的酸性或堿性溶劑，用于改善色譜峰峰形與分離度，酸性和堿性分別適用于不同結構的化合物。
優(yōu)選地，所述添加劑選自二乙胺、三乙胺、甲酸、乙酸和三氟乙酸中的一種或幾種， 優(yōu)選為二乙胺。優(yōu)選地，所述流動相中烷烴、醇類和添加劑三者的體積比為 50-95 50-5 0-0. 5 ；優(yōu)選為 80-90 20-10 0-0. 5;更優(yōu)選為 82 18 0. 3 或者 85 15 0.1。優(yōu)選地，所述色譜柱的柱溫為20 60°C，優(yōu)選為20 30°C。優(yōu)選地，所述N-(N-苯甲?；?苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物為式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物
權利要求
1.一種N-(N-苯甲?；?苯丙氨酰基)_苯丙氨酸二肽衍生物的光學異構體的檢測方法，其特征在于，所述方法為高效液相色譜法，其色譜條件如下色譜柱為固定相為表面涂敷或鍵合了手性多聚物的球形硅膠為填料的手性色譜柱，檢測波長為200j60nm，流動相為烷烴/醇類，流速為0. 4-1. 5ml/min。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜柱選自CHIRALPAK. IA或 CHIRALPAK AD-H。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述檢測波長為2^kim。
4.根據(jù)權利要求1至3中任一項所述的方法，其特征在于，所述流動相中烷烴與醇類的體積比為 50-95 50-5，優(yōu)選為 80-90 20-10。
5.根據(jù)權利要求1至4中任一項所述的方法，其特征在于，所述流動相中烷烴選自正己烷、正戊烷、正庚烷和正辛烷中的一種或幾種；和/或優(yōu)選地，所述醇類選自乙醇、異丙醇、 正丁醇中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述烷烴為正己烷，和/或所述醇類為異丙醇。
6.根據(jù)權利要求1至5中任一項所述的方法，其特征在于，所述流動相中還包括作為添加劑的酸性或堿性溶劑；優(yōu)選地，所述添加劑選自二乙胺、三乙胺、甲酸、乙酸和三氟乙酸中的一種或幾種，優(yōu)選為二乙胺。
7.根據(jù)權利要求1至6中任一項所述的方法，其特征在于，所述流動相中烷烴、醇類和添加劑三者的體積比為50-95 50-5 0-0. 5，優(yōu)選為80-90 20-10 0-0. 5，更優(yōu)選為 82 18 0. 3 或者 85 15 0. 1。
8.根據(jù)權利要求1至7中任一項所述的方法，其特征在于，所述色譜柱的柱溫為20 60°C，優(yōu)選為20 30°C。
9.根據(jù)權利要求1至8中任一項所述的方法，其特征在于，所述N-(N-苯甲?；?苯丙氨?；?_苯丙氨酸二肽衍生物為式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物
10.權利要求1至9中任一項所述的方法在檢測N-(N-苯甲酰基-苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物或包含N-(N-苯甲酰基-苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物的制劑中的應用；優(yōu)選地，所述制劑包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、注射劑、控釋或緩釋制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供一種N-(N-苯甲?；?苯丙氨酰基)-苯丙氨酸二肽衍生物的光學異構體的檢測方法。本發(fā)明提供的方法為高效液相色譜法，其色譜條件如下色譜柱為固定相為表面涂敷或鍵合了手性多聚物的球形硅膠為填料的手性色譜柱，檢測波長為200-260nm，流動相為烷烴/醇類，流速為0.4-1.5ml/min。本發(fā)明提供的方法具有較高的靈敏度和專屬性，操作簡捷的優(yōu)點，可快速準確的檢測出N-(N-苯甲酰基-苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物的光學異構體，可用于N-(N-苯甲酰基-苯丙氨?；?-苯丙氨酸二肽衍生物的質(zhì)量控制。
文檔編號G01N30/02GK102466659SQ20101054364
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月15日 優(yōu)先權日2010年11月15日
發(fā)明者劉昌孝, 夏錦輝, 姜喜成, 宋麗明, 蔣慶峰, 蔡振華, 金松子 申請人:天津藥物研究院