專利名稱：一種檢測(cè)熊果酸抑制AGEs的作用機(jī)制的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于病理檢測(cè)領(lǐng)域，具體的涉及一種檢測(cè)熊果酸抑制AGEs的作用機(jī)制的方法。
背景技術(shù)：
人體內(nèi)持久的高血糖狀態(tài)，會(huì)導(dǎo)致許多結(jié)構(gòu)功能蛋白和核酸蛋白與葡萄糖發(fā)生非酶糖化反應(yīng)，形成晚期糖基化產(chǎn)物(Advance Glycation End Products，AGEs)，AGh除可影響這些蛋白正常結(jié)構(gòu)與功能外，它還可通過(guò)晚期糖基化受體(RAGE)發(fā)揮多種病理作用，業(yè)已證明AGEs是糖尿病(Diabetic Mellitus,DM)患者加速發(fā)生血管病變的主要原因之一。 因此，抑制AGEs形成，是防治糖尿病血管病變的重要手段。熊果酸(Ursolic Acid, UA)具有抗腫瘤、抗糖尿病、降脂、抗氧化等多種生物學(xué)效應(yīng)，我們前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已證實(shí)UA對(duì)DM血管損傷有改善作用，但其作用機(jī)制尚不清楚。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種檢測(cè)熊果酸抑制AGEs的作用機(jī)制的方法，包括以下步驟步驟1 模擬體內(nèi)蛋白質(zhì)非酶糖基化反應(yīng)體系；步驟2 檢測(cè)熊果酸對(duì)果糖胺生成的抑制作用；步驟3 檢測(cè)熊果酸對(duì)AGEs生成的抑制作用；步驟4 數(shù)據(jù)處理，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)比對(duì)熊果酸對(duì)果糖胺生成的抑制作用與熊果酸對(duì) AGEs生成的抑制作用，即可知道熊果酸對(duì)AGEs的抑制的作用機(jī)制。本發(fā)明能簡(jiǎn)單、有效的檢測(cè)出熊果酸對(duì)AGEs的抑制的作用機(jī)制。
具體實(shí)施例方式一種檢測(cè)熊果酸抑制AGEs的作用機(jī)制的方法，包括以下步驟步驟1 模擬體內(nèi)蛋白質(zhì)非酶糖基化反應(yīng)體系；以牛血清白蛋白(BSA)濃度，葡萄糖濃度和孵育時(shí)間這3個(gè)因素，每個(gè)因素4個(gè)水平，用L1605)正交試驗(yàn)反應(yīng)體系篩選最佳條件。在PBS液中加入BSA，使其質(zhì)量終濃度為1，2，2. 5，5g/L，d_葡萄糖質(zhì)量終濃度為 5，10，25，50mM，加入終濃度為IOmM的EDTA防腐，0. ^ii微孔濾膜無(wú)菌過(guò)濾后，置于37°C培養(yǎng)箱，孵育20，40，60，80d，構(gòu)成表1正交試驗(yàn)因素水平表。表1正交試驗(yàn)因素水平表
權(quán)利要求
1. 一種檢測(cè)熊果酸抑制AGEs的作用機(jī)制的方法，其特征在于，包括以下步驟 步驟1，模擬體內(nèi)蛋白質(zhì)非酶糖基化反應(yīng)體系； 步驟2，檢測(cè)熊果酸對(duì)果糖胺生成的抑制作用； 步驟3，檢測(cè)熊果酸對(duì)AGEs生成的抑制作用；步驟4，數(shù)據(jù)處理，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)比對(duì)熊果酸對(duì)果糖胺生成的抑制作用與熊果酸對(duì)AGEs 生成的抑制作用，即可知道熊果酸對(duì)AGEs的抑制的作用機(jī)制。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)熊果酸抑制AGEs的作用機(jī)制的方法，包括以下步驟步驟1、模擬體內(nèi)蛋白質(zhì)非酶糖基化反應(yīng)體系；步驟2、檢測(cè)熊果酸對(duì)果糖胺生成的抑制作用；步驟3、檢測(cè)熊果酸對(duì)AGEs生成的抑制作用；步驟4、數(shù)據(jù)處理，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)比對(duì)熊果酸對(duì)果糖胺生成的抑制作用與熊果酸對(duì)AGEs生成的抑制作用，即可知道熊果酸對(duì)AGEs的抑制的作用機(jī)制。本發(fā)明能簡(jiǎn)單、有效的檢測(cè)出熊果酸對(duì)AGEs的抑制的作用機(jī)制。
文檔編號(hào)G01N21/31GK102478503SQ20101055817
公開(kāi)日2012年5月30日 申請(qǐng)日期2010年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月25日
發(fā)明者向敏, 吳萍萍, 張雅琴, 王建梅 申請(qǐng)人:蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院