專利名稱：快速獲取大量根結(jié)線蟲雌蟲的簡易方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種獲得大量雌性根結(jié)線蟲的簡易方法。適用于植物病理學(xué)、植物線蟲學(xué)的研究、植物病理學(xué)和植物線蟲學(xué)實驗教學(xué)課程以及在根結(jié)線蟲分類學(xué)等方面有極其重要的利用價值。
背景技術(shù)：
會陰花紋是根結(jié)線蟲種類鑒定的重要的形態(tài)這依據(jù)，制備會陰花紋的玻片及實驗教學(xué)中需要大量的雌蟲，而雌性根結(jié)線蟲均埋生在寄主根組織內(nèi)部，獲得雌蟲必須在解剖鏡下解剖根結(jié)，取出內(nèi)部的雌蟲，在操作過程中，看不清楚內(nèi)部的雌蟲，因此，在解剖時經(jīng)常弄破雌蟲，以致花費大量的時間獲得少量的雌蟲，事倍功半。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種短時間內(nèi)可以獲得大量完整雌性根結(jié)線蟲的簡易方法， 以克服現(xiàn)有獲取雌性根結(jié)線蟲技術(shù)費時費力和蟲體易破的不足。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采取技術(shù)方案是第一步利用細(xì)菌在25°C -30°C溫度下，分解腐敗植物根部的表皮和皮層組織；第二步將分解后的腐敗植物根的表皮和皮層脫落，釋放內(nèi)部的雌蟲，然后通過 20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在15X解剖鏡下觀察到大量的白色梨形雌蟲。第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線蟲白色雌蟲。本發(fā)明更詳細(xì)的步驟為第一步取新鮮的、表現(xiàn)根結(jié)癥狀的植物病根，用自來水沖去表面的泥土，剪成段狀置于相應(yīng)大小的燒杯中，加入自來水，浸沒根組織，然后將燒杯置于恒溫箱中直至植物病根部的表皮和皮層組織分解。上述恒溫箱的溫度一般控制在25 °C "30 °C。第二步將處理后的病根移入組織搗碎機組織攪拌，使腐敗的表皮和皮層脫落，釋放內(nèi)部的雌蟲，再通過20目和80目的標(biāo)準(zhǔn)篩，收集80目的殘留物到小皿中，解剖鏡下可看到大量白色的梨形的根結(jié)線蟲雌蟲。上述組織攪拌時間一般為30秒鐘，第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線蟲白色雌蟲。本發(fā)明的優(yōu)點是1、避免在解剖鏡下逐一解剖根結(jié)，且取出雌蟲時易被弄破。2、在短時間內(nèi)，獲得雌蟲量大，完整性好。3、方法簡單，不需要特殊的儀器設(shè)備為了驗證本發(fā)明的優(yōu)點，在同等條件下利用本發(fā)明方法和常規(guī)方法進(jìn)行對比試驗，結(jié)果表明，利用本方法30分鐘可獲得50-60個或更多完整的雌蟲，而用常規(guī)方法在體視鏡直接解剖，如果獲得同樣數(shù)量的雌蟲需要2-3個小時，且需要一直在鏡下操作，費時費力。上述試驗結(jié)果說明本發(fā)明方法在短時間內(nèi)可獲得大量的雌性根結(jié)線蟲，操作簡單，不需要特殊儀器設(shè)備，彌補了常規(guī)技術(shù)費時費力和蟲體易破的不足。


圖1是利用本發(fā)明方法30分鐘獲得的部分南方根結(jié)線蟲雌蟲的顯微鏡放大圖，其中 bar = 1000 μ m ；圖2是利用本發(fā)明方法30分鐘獲得的部分南方根結(jié)線蟲雌蟲的顯微鏡放大圖，其中 bar = 500 μ m。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案。1.準(zhǔn)備具有明顯根結(jié)癥狀的病根，500ml燒杯，組織搗碎機，20目和80目的標(biāo)準(zhǔn)篩，體視解剖鏡，恒溫培養(yǎng)箱。2.將病根剪成2cm長放入500ml燒杯中，加自來水浸末根組織，置于30°C恒溫箱過夜，待燒杯內(nèi)水混濁，將根取出移入組織搗碎機，工作30秒鐘。然后通過20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在解剖鏡下觀察到大量的白色雌蟲，如圖1中A(bar = 1000 μ m)圖片和 B (bar = 500 μ m)圖片。3.在體視解剖鏡下或在光線充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線蟲白色雌蟲。
權(quán)利要求
1.一種快速獲取大量根結(jié)線蟲雌蟲的簡易方法，其特征在于，步驟如下 第一步利用細(xì)菌在25°c -30°C溫度下，分解腐敗植物根部的表皮和皮層組織； 第二步將分解后的腐敗植物根的表皮和皮層脫落，釋放內(nèi)部的雌蟲，然后通過20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在15 X解剖鏡下觀察到大量的白色梨形雌蟲； 第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線蟲白色雌蟲。
2.如權(quán)利要求1所述的快速獲取大量根結(jié)線蟲雌蟲的簡易方法，其特征在于，步驟如下第一步取新鮮的、表現(xiàn)根結(jié)癥狀的植物病根，用自來水沖去表面的泥土，剪成段狀置于相應(yīng)大小的燒杯中，加入自來水，浸沒根組織，然后將燒杯置于30°C恒溫箱中直至植物病根部的表皮和皮層組織分解；第二步將處理后的病根移入組織搗碎機組織攪拌30秒鐘，使腐敗的表皮和皮層脫落，釋放內(nèi)部的雌蟲，再通過20目和80目的標(biāo)準(zhǔn)篩，收集80目的殘留物到小皿中，在15X 解剖鏡下古納差觀察到大量白色的梨形的根結(jié)線蟲雌蟲；第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線蟲白色雌蟲。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種快速獲取大量根結(jié)線蟲雌蟲的簡易方法，它主要是利用細(xì)菌在25℃-30℃溫度下，分解腐敗植物根部的表皮和皮層組織；將分解后的腐敗植物根的表皮和皮層脫落，釋放內(nèi)部的雌蟲，然后通過20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物；最后在體視解剖鏡下或在光線充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線蟲白色雌蟲。本發(fā)明方法在短時間內(nèi)可獲得大量的雌性根結(jié)線蟲，操作簡單，不需要特殊儀器設(shè)備，彌補了常規(guī)技術(shù)費時費力和蟲體易破的不足。
文檔編號G01N1/28GK102175495SQ20101061561
公開日2011年9月7日 申請日期2010年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月30日
發(fā)明者吳海燕, 周勛波, 畢建杰 申請人:吳海燕