專利名稱：快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具與檢測(cè)盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于醫(yī)用檢測(cè)工具，特別涉及一種檢測(cè)妊娠期婦女胎膜早破的檢測(cè)工 具。
背景技術(shù)：
臨產(chǎn)前的胎膜破裂稱為胎膜早破(Premature Rupture of Fetal Membrane，簡(jiǎn)稱 PROM)。胎膜早破是引起產(chǎn)科病人產(chǎn)前、產(chǎn)后并發(fā)癥的主要因素，是導(dǎo)致胎兒早產(chǎn)和必須入 住新生兒重癥監(jiān)護(hù)室(NI⑶)的主要原因，所以，對(duì)胎膜早破患者的管理成本高、難度大。因 此，準(zhǔn)確及時(shí)診斷孕婦是否發(fā)生胎膜早破至關(guān)重要?，F(xiàn)有技術(shù)中，采用金標(biāo)準(zhǔn)是診斷胎膜早破的一種準(zhǔn)確方法，即在孕婦羊膜腔內(nèi)注 入染料(如美藍(lán))，若陰道內(nèi)有被染料著色的液體流出即可診斷為胎膜早破，但采用金標(biāo)準(zhǔn) 檢測(cè)臨床很難操作，并且造成患者的痛苦，故臨床很少使用。臨床上通常采用詢問(wèn)病史、患 者自訴陰道有羊水流出、陰道液PH值變?yōu)槠珘A性(正常陰道分泌液pH為4. 5 5. 5，而羊 水PH值為7. 0 7. 5)、顯微鏡下查見(jiàn)陰道分泌物涂片中出現(xiàn)羊水結(jié)晶等方法，這些方法雖 然操作簡(jiǎn)單，但準(zhǔn)確性、敏感性均較低。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具 和檢測(cè)盒，使用所述檢測(cè)工具和檢測(cè)盒，不僅能實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng)檢測(cè)，而且能快速獲得準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具以胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 1 (Insulin-like growth factor-binding protein 1，簡(jiǎn)稱 IGFBP-1，下文中，以“IGFBP-1” 表示胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1)為檢測(cè)指標(biāo)，所述IGFBP-1是一種胰島素和孕酮依賴蛋 白，分子量為25kDa，負(fù)責(zé)機(jī)體內(nèi)胰島素樣生長(zhǎng)因子的儲(chǔ)存和轉(zhuǎn)運(yùn)。IGFBP-1主要由蛻膜細(xì) 胞、胎兒及成人肝臟、卵巢顆粒細(xì)胞合成并分泌，可出現(xiàn)于妊娠婦女的血清和羊水中，羊水 中IGFBP-1的質(zhì)量濃度比血清中的質(zhì)量濃度高出100 1000倍。IGFBP-1是妊娠3個(gè)月后 出現(xiàn)于羊水中的最主要的蛋白質(zhì)。胎膜早破時(shí)將有羊水漏出，羊水中的IGFBP-1則會(huì)出現(xiàn) 在宮頸粘液中，用本實(shí)用新型所述檢測(cè)工具檢測(cè)妊娠婦女的陰道分泌物，即可判斷是否發(fā) 生胎膜早破。本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，包括襯片，由上至下依次相接粘 貼在襯片上的吸水墊、硝酸纖維素膜、金標(biāo)墊和樣品墊；所述硝酸纖維素膜上設(shè)置有由兔抗 人IGFBP-1多克隆抗體包被形成的檢測(cè)線和由羊抗鼠IGFBP-1多克隆抗體包被形成的控制 線，檢測(cè)線位于控制線之下且相隔一間距，所述金標(biāo)墊為包被有金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克 隆抗體結(jié)合物的吸水纖維且被樣品墊部分覆蓋。本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)盒，由盒體和裝入盒體內(nèi)的上述檢測(cè)工 具構(gòu)成；所述盒體的內(nèi)腔與檢測(cè)工具的形狀和尺寸相匹配，所述盒體的頂壁設(shè)置有檢測(cè)工具插入孔，側(cè)壁設(shè)置有加樣孔和觀察孔，所述加樣孔的設(shè)置位置與檢測(cè)工具裝入盒體后其 樣品墊的位置相對(duì)應(yīng)，所述觀察孔的設(shè)置位置與檢測(cè)工具裝入盒體后其檢測(cè)線和控制線的 位置相對(duì)應(yīng)。上述檢測(cè)工具中，所述檢測(cè)線和控制線的寬度優(yōu)選0. 8mm 1mm ；所述檢測(cè)線與控 制線之間的間距優(yōu)選10mm 12mm。檢測(cè)工具的形狀無(wú)嚴(yán)格要求，從節(jié)約成本、方便制作的 角度考慮，其形狀優(yōu)選矩形條。所述吸水墊是由吸水紙制作的墊體，樣品墊是由吸水纖維制 作的墊體，即為吸水纖維墊。本實(shí)用新型所述檢測(cè)工具和檢測(cè)盒具有以下有益效果1、使用本實(shí)用新型所述檢測(cè)盒對(duì)確診胎膜破裂組、確診胎膜未破組和疑似胎膜破 裂組妊娠婦女進(jìn)行采樣檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果表明，準(zhǔn)確率達(dá)100%。2、使用本實(shí)用新型所述檢測(cè)盒，檢測(cè)一個(gè)樣品僅需5-10分鐘，與現(xiàn)有方法相比， 檢測(cè)速度大幅度提高。3、由于檢測(cè)樣品是妊娠婦女的陰道分泌物，因而是一種無(wú)創(chuàng)檢測(cè)。4、使用本實(shí)用新型所述檢測(cè)盒進(jìn)行檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，無(wú)論在婦產(chǎn)科診所、醫(yī)院或家 庭，均可獲得同樣準(zhǔn)確的結(jié)果。5、本實(shí)用新型所述檢測(cè)工具和檢測(cè)盒結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，易于加工制作，生產(chǎn)成本低，便于 工業(yè)化生產(chǎn)。本實(shí)用新型所述檢測(cè)工具和檢測(cè)盒適用于所有妊娠期婦女，尤其是存在早產(chǎn)風(fēng) 險(xiǎn)、腹部受到損傷的妊娠期婦女。

圖1是本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具的一種結(jié)構(gòu)示意圖；圖2是圖1的左視圖；圖3是本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)盒盒體的一種結(jié)構(gòu)示意圖；圖4是圖3的俯視圖；圖5是圖3的A-A剖視圖；圖6是本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)盒的一種結(jié)構(gòu)示意圖。圖中， 1-襯片、2-吸水墊、3-控制線、4-檢測(cè)線、5-硝酸纖維素膜、6-金標(biāo)墊、7-樣品墊、8-盒體、 9_觀察孔、10-加樣孔、11-檢測(cè)工具插入孔；12-檢測(cè)工具、13-待測(cè)樣品中的IGFBP-1。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型所述檢測(cè)工具和檢測(cè)盒的結(jié)構(gòu)、制作方法和使用方法 做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1本實(shí)施例中，快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具如圖1、圖2所示，其形狀為矩形條，其 構(gòu)造包括襯片1，由上至下依次相接粘貼在襯片上的吸水墊2、硝酸纖維素膜5、金標(biāo)墊6和 樣品墊7，所述金標(biāo)墊6被樣品墊部分覆蓋。襯片1由醫(yī)用塑料高白度PVC片材制作，上面 涂布?jí)好裟z，對(duì)生物活性分子具有惰性；吸水墊2為吸水紙，硝酸纖維素膜5上設(shè)置有由兔 抗人IGFBP-1多克隆抗體(Santz Cruz公司)包被形成的檢測(cè)線4和由羊抗鼠IGFBP-1多克隆抗體(上海派坤生物工程有限公司)包被形成的控制線3 (兔抗人IGFBP-1多克隆抗體 和羊抗鼠IGFBP-1多克隆抗體在硝酸纖維素膜上的包被方法見(jiàn)論文“AFP免疫層析測(cè)試條 的研制”，侯惠仁、吳馮波、陳鍵、劉一兵、賀佑豐，《同位素》，2000，13(3) 124-126)，檢測(cè)線4 位于控制線3之下，它們的寬度均為1mm (或0. 8mm或0. 9mm)，它們之間的間距為10mm (或 11mm或12mm)，金標(biāo)墊6為包被有金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體結(jié)合物的玻璃纖維膜或 聚酯纖維膜，樣品墊7為玻璃纖維膜或聚酯纖維膜。金標(biāo)墊6的制備方法如下(1)膠體金的制備取0. Olg氯金酸溶解于100ml三蒸水中，形成氯金酸水溶液；將100ml氯金酸水溶 液加熱至沸騰，在攪拌下加入濃度為10g/100ml的檸檬酸三鈉水溶液1. 5ml，再煮沸至呈現(xiàn) 透明的橙紅色(約7 10分鐘)，冷卻至室溫后用濃度為0. 2mol/L的K2C03溶液調(diào)節(jié)其pH 至7. 0-7. 2，獲膠體金；(2)金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體結(jié)合物的制備在步驟⑴制備的100ml膠體金中加入200 ii g鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體 (Thermoscientific公司)，攪拌混合均勻后加入250mg牛血清白蛋白(BSA,Roche公司)， 再攪拌混合均勻后加入濃度為10g/100ml的NaCl溶液，NaCl溶液的加入量以膠體金溶液 中NaCl的濃度達(dá)到lg/100ml為限。繼后分別以2，000轉(zhuǎn)/分、4，000轉(zhuǎn)/分、10，000轉(zhuǎn)/ 分的條件各離心10分鐘，獲得的分離產(chǎn)物即為金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體結(jié)合物，將 所述結(jié)合物溶于PH 7. 2的磷酸鹽緩沖液(PBS，含0. 09%疊氮鈉)中，4°C貯存?zhèn)溆茫?3)金標(biāo)墊的制備用濃度為0. 5g/100ml的牛血清白蛋白(BSA，Roche公司)溶液在22°C 25°C浸泡 玻璃纖維膜或聚酯纖維膜1小時(shí)后，將步驟(2)制備的金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體結(jié) 合物包被在玻璃纖維膜或聚酯纖維膜上(包被方法見(jiàn)論文“AFP免疫層析測(cè)試條的研制”， 侯惠仁、吳馮波、陳鍵、劉一兵、賀佑豐，《同位素》，2000，13(3) :124-126)，即獲得金標(biāo)墊。所述檢測(cè)工具的制備，可將片狀吸水墊2、硝酸纖維素膜5、金標(biāo)墊6和樣品墊7粘 在片狀襯片上，然后切成矩形條。實(shí)施例2本實(shí)施例中，快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)盒的形狀和構(gòu)造如圖6所示，由盒體8和裝 入盒體內(nèi)的檢測(cè)工具12構(gòu)成。所述檢測(cè)工具12為實(shí)施例1所述形狀和構(gòu)造的檢測(cè)工具。 所述盒體8用醫(yī)用塑料制作，如圖3、圖4、圖5所示，外形為長(zhǎng)方體，內(nèi)腔與檢測(cè)工具的形狀 和尺寸相匹配，其頂壁設(shè)置有檢測(cè)工具插入孔11，其側(cè)壁設(shè)置有加樣孔10和觀察孔9，所述 加樣孔10的設(shè)置位置與檢測(cè)工具裝入盒體后其樣品墊7的位置相對(duì)應(yīng)，所述觀察孔9的設(shè) 置位置與檢測(cè)工具裝入盒體后其檢測(cè)線4和控制線3的位置相對(duì)應(yīng)。所制作的檢測(cè)盒用放 置有干燥劑的鋁箔袋密封封裝備用。所述檢測(cè)盒的使用方法和檢測(cè)原理如下將待測(cè)樣品從盒體8的加樣孔10加入檢測(cè)工具的樣品墊7，由于層析原理，待測(cè) 樣品從樣品墊7沿條狀檢測(cè)工具向上移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至金標(biāo)墊6，將金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克 隆抗體結(jié)合物溶解，并帶著金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體繼續(xù)向上移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至硝酸 纖維素膜上的檢測(cè)線4，如果樣品中有IGFBP-1抗原存在，檢測(cè)線4上的兔抗人IGFBP-1多 克隆抗體和金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體與樣品中的IGFBP-1抗原將會(huì)在檢測(cè)線上形成一條紫紅色的夾心免疫復(fù)合物，檢測(cè)線上可見(jiàn)一條清晰的紫紅色線，此結(jié)果判為陽(yáng)性；樣品 中的IGFBP-1抗原含量越高，色線顏色越深。如果樣品中沒(méi)有IGFBP-1抗原，金標(biāo)鼠抗人 IGFBP-1單克隆抗體則不會(huì)與檢測(cè)線上的兔抗人IGFBP-1多克隆抗體形成復(fù)合物，檢測(cè)線 上沒(méi)有色線出現(xiàn)，此結(jié)果判定為陰性。當(dāng)待測(cè)樣品和金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1單克隆抗體繼續(xù) 向上移動(dòng)至控制線3時(shí)，控制線上的羊抗鼠IGFBP-1多克隆抗體將會(huì)與金標(biāo)鼠抗人IGFBP-1 單克隆抗體結(jié)合，在控制線上形成一條紅色或紫紅色線，證明測(cè)試工具有效。檢測(cè)結(jié)果通過(guò) 盒體上的觀察孔9觀察獲得。
權(quán)利要求一種快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于包括襯片(1)，由上至下依次相接粘貼在襯片上的吸水墊(2)、硝酸纖維素膜(5)、金標(biāo)墊(6)和樣品墊(7)，所述硝酸纖維素膜(5)上設(shè)置有由兔抗人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1多克隆抗體包被形成的檢測(cè)線(4)和由羊抗鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1多克隆抗體包被形成的控制線(3)，檢測(cè)線位于控制線之下且相隔一間距，所述金標(biāo)墊(6)為包被有金標(biāo)鼠抗人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1單克隆抗體結(jié)合物的吸水纖維且被樣品墊部分覆蓋。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于所述檢測(cè)線(4) 和控制線(3)的寬度為0. 8mm 1mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于所述檢測(cè)線 ⑷與控制線⑶之間的間距為10mm 12mm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于它的形狀為 矩形條。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于它的形狀為矩形^^ o
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于所述吸水墊 (2)為吸水紙，樣品墊(7)為吸水纖維墊。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于所述吸水墊(2) 為吸水紙，樣品墊(7)為吸水纖維墊。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，其特征在于所述吸水墊(2) 為吸水紙，樣品墊(7)為吸水纖維墊。
9.一種快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)盒，由盒體(8)和裝入盒體內(nèi)的檢測(cè)工具構(gòu)成；所述 檢測(cè)工具包括襯片(1)，由上至下依次相接粘貼在襯片上的吸水墊(2)、硝酸纖維素膜(5)、 金標(biāo)墊(6)和樣品墊(7)，所述硝酸纖維素膜(5)上設(shè)置有由兔抗人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合 蛋白1多克隆抗體包被形成的檢測(cè)線(4)和由羊抗鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1多克隆 抗體包被形成的控制線(3)，所述檢測(cè)線位于控制線之下且相隔一間距，所述金標(biāo)墊(6)為 包被有金標(biāo)鼠抗人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1單克隆抗體結(jié)合物的吸水纖維且被樣品 墊部分覆蓋；所述盒體的內(nèi)腔與檢測(cè)工具的形狀和尺寸相匹配，所述盒體的頂壁設(shè)置有檢 測(cè)工具插入孔(11)，側(cè)壁設(shè)置有加樣孔(10)和觀察孔(9)，所述加樣孔(10)的設(shè)置位置與 檢測(cè)工具裝入盒體后其樣品墊(7)的位置相對(duì)應(yīng)，所述觀察孔(9)的設(shè)置位置與檢測(cè)工具 裝入盒體后其檢測(cè)線(4)和控制線(3)的位置相對(duì)應(yīng)。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)盒，其特征在于所述檢測(cè)工具的 形狀為矩形條。
專利摘要一種快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)工具，包括襯片，由上至下依次相接粘貼在襯片上的吸水墊、硝酸纖維素膜、金標(biāo)墊和樣品墊；所述硝酸纖維素膜上設(shè)置有由兔抗人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1多克隆抗體包被形成的檢測(cè)線和由羊抗鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1多克隆抗體包被形成的控制線，檢測(cè)線位于控制線之下且相隔一間距，所述金標(biāo)墊為包被有金標(biāo)鼠抗人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1單克隆抗體結(jié)合物的吸水纖維且被樣品墊部分覆蓋。一種快速檢測(cè)胎膜早破的檢測(cè)盒，由盒體和裝入盒體內(nèi)的上述檢測(cè)工具構(gòu)成；盒體的內(nèi)腔與檢測(cè)工具的形狀和尺寸相匹配，其頂壁設(shè)置有檢測(cè)工具插入孔，側(cè)壁設(shè)置有加樣孔和觀察孔。
文檔編號(hào)G01N33/577GK201583543SQ20102003762
公開(kāi)日2010年9月15日 申請(qǐng)日期2010年1月11日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月11日
發(fā)明者周容, 張 林, 王濤, 胡懷忠 申請(qǐng)人:四川大學(xué)華西第二醫(yī)院