專利名稱：穩(wěn)定化的β-羥丁酸檢測試紙的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種穩(wěn)定化的β -羥丁酸檢測試紙。
技術(shù)背景酮體是脂肪酸在肝臟進行正常分解代謝所產(chǎn)生的特殊中間產(chǎn)物，其中75%是 β-羥丁酸。羥丁酸在正常人血液中的含量極少。但在某些生理情況(如饑餓、禁食) 或病理情況下(如糖尿病)，糖的來源或氧化供能障礙，脂動員增強，脂肪酸就成了人體的 主要供能物質(zhì)。若肝中合成酮體的量超過肝外組織利用酮體的能力，二者之間失去平衡，血 中濃度就會過高，導(dǎo)致酮血癥和酮尿癥。β “羥丁酸是酸性物質(zhì)，因此在體內(nèi)大量堆積還會 引起酸中毒。目前，在臨床診斷中，測定人體中β-羥丁酸的濃度越來越受到重視。人體內(nèi) 羥丁酸濃度的測定對于糖尿病的早期預(yù)警很有意義。目前，羥丁酸的測定主要是通
過大型血液生化分析儀結(jié)合羥丁酸試劑盒的方法。但該方法存在的主要問題是需要 使用特定的設(shè)備、場地與人員，測定所需要的血量較多，耗時較長，成本較高，只適合在大型 檢測場所如醫(yī)院內(nèi)進行，不能在小型診所檢測，也不方便患者在家里自測。因此方便、快捷、 經(jīng)濟、有效地檢測人體內(nèi)羥丁酸濃度一直是醫(yī)學(xué)工程技術(shù)人員的研究課題之一。
發(fā)明內(nèi)容為了解決上述技術(shù)問題，本實用新型提供了一種穩(wěn)定化的羥丁酸檢測試紙。本實用新型解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種穩(wěn)定化的β “羥丁酸檢測 試紙，由全血過濾層、顯色層、基底層依次層疊而成，所述全血過濾層至少由一層聚合物膜 層組合而成。本實用新型能夠不受地域等條件限制，方便患者隨時隨地自我監(jiān)測，而且只需微 量血液便可在短時間內(nèi)測出羥丁酸的濃度，同時其制造簡單，具有廣泛的市場價值。


以下結(jié)合附圖和實施例對本實用新型進一步說明。圖1為本實用新型的結(jié)構(gòu)分解示意圖。圖2為本實用新型全自動生化分析儀和自制的β _羥丁酸檢測試紙進行測定圖。圖中1、全血過濾層；2、顯色層；3、基底層。
具體實施方式
如圖1所示一種穩(wěn)定化的β _羥丁酸檢測試紙，由全血過濾層1、顯色層2、基底層 3三層依次層疊而成，所述全血過濾層1至少由一層聚合物膜層組合而成，所述顯色層2為 吸水性材料，所述基底層3為不溶性的支持性材料。所述穩(wěn)定化的β -羥丁酸檢測試紙的制備方法步驟如下a、將顯色層2浸于試劑溶液中2h后取出冷風(fēng)干燥，b、將全血過濾層1、浸泡干燥過后的顯色層2、基底層3裁剪成 相同的規(guī)格，并由上至下依次采用膠黏在一起；所述試劑溶液包括以下成分(1)、酶β-羥丁酸脫氫酶，濃度為10-500U/ml、黃遞酶，濃度為10-1000U/ml ；(2)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)，濃度為1-lOmmol/l ；(3)、四唑類染料，濃度為0. l-10mmol/l ；(4)、惰性染料0. l-10mg/ml ；與顯色劑產(chǎn)生不同顏色以便更好區(qū)別β-羥丁酸的 濃度水平，常用染料包括媒染黃、亮黃苯胺染料、雙磷酸伯氨奎、噻唑黃G、亮黃和無水堿性 嫩黃；(5)、PH 為 6. 5-9. 0 的溶解體系通過將顯色層浸漬液中含有酶及染料，雖基本上可顯色層達到貯存變色的目的， 但其制備得到的顯色試紙會出現(xiàn)貯存變色等不穩(wěn)定現(xiàn)象，大大影響產(chǎn)品的檢測穩(wěn)定性，為 產(chǎn)品的實現(xiàn)增加難度，所以，還應(yīng)在其中繼續(xù)添加如下成分(6)、抗氧劑，NBT光化還原反應(yīng)中存在02_的產(chǎn)生系統(tǒng)，而抗氧劑，如水楊酸(濃度 1%-3%)> HRP (濃度2U/ml-25U/ml)能對02_具有一定的淬滅作用，所以可以抑制自然條 件下NBT光化還原反應(yīng)，從而提高顯色層試紙的穩(wěn)定性；(7)、濃度10-30mmol/l的草酸鈉，濃度0.05% -0. 1 %的乙二胺四乙酸二鈉，可以 有效結(jié)合金屬離子，避免對酶的破壞；(8)、濃度 0. 009% -0. 015% 的疊氮鈉；(9)、濃度 0. 01 % -0. 025 % 的海藻糖;(10)、濃度 0. 02% -0. 05%的氯化鎂。為了更有利于理解，下面給出六種實驗的具體成分圖表以及對β-羥丁酸檢測試 紙效果評價。Α、六種已經(jīng)過反復(fù)實驗的具體成分圖表
4 B、β _羥丁酸檢測試紙效果評價1)比對試驗 取15例全血樣本，分別用全自動生化分析儀和自制的β _羥丁酸檢測試紙進行測 定，比較檢測結(jié)果的相關(guān)性(如圖2所示)。2)穩(wěn)定性考察試驗取一定量自制的β-羥丁酸檢測試紙置高溫(40°C )、光照條件下放置10天。10 天后，再取20例全血樣本，分別用全自動生化分析儀和放置10天的β -羥丁酸檢測試紙進 行測定，相關(guān)系數(shù)R2 = 0.955，表明自制的羥丁酸檢測試紙具有一定的穩(wěn)定性。β _羥丁酸檢測試紙的使用方法滴加一定量全血樣品至β _羥丁酸檢測試紙上， 3min后擦去試紙表面血漬，顯色穩(wěn)定5min后與標(biāo)準(zhǔn)比色卡(不同的標(biāo)準(zhǔn)色號對應(yīng)不同的 β-羥丁酸濃度卡)進行比色，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)比色卡讀出檢測樣品中的羥丁酸濃度。
權(quán)利要求一種穩(wěn)定化的β 羥丁酸檢測試紙，其特征是所述穩(wěn)定化的β 羥丁酸檢測試紙由全血過濾層(1)、顯色層(2)、基底層(3)依次層疊而成，所述全血過濾層(1)至少由一層聚合物膜層組合而成。
專利摘要本實用新型涉及一種穩(wěn)定化的β-羥丁酸檢測試紙。一種穩(wěn)定化的β-羥丁酸檢測試紙，由全血過濾層、顯色層、基底層依次層疊而成，所述全血過濾層至少有一層聚合物膜層組合而成。本實用新型的試紙能夠不受地域等條件限制，方便患者隨時隨地自我監(jiān)測，而且只需微量血液便可在短時間內(nèi)測出β-羥丁酸的濃度，同時其制造簡單，具有廣泛的市場價值。
文檔編號G01N21/78GK201662534SQ201020132198
公開日2010年12月1日 申請日期2010年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月16日
發(fā)明者徐華良, 肖潔瑾, 鄒麗萍, 顧瑜 申請人:蘇州市瑋琪生物科技有限公司