專利名稱：檢測(cè)試劑以及使用該檢測(cè)試劑測(cè)定檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物的檢測(cè)試劑以及使用該檢測(cè)試劑測(cè)定該被測(cè)定物的方法，其中，該檢測(cè)試劑以懸浮有粒子的粒子懸浮液中的粒子的凝集為指標(biāo)，所述粒子是將被測(cè)定物捕獲物質(zhì)擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的。
背景技術(shù)：
下列方法作為免疫凝集法是公知的并且被廣泛采用將懸浮有粒子的粒子懸浮液作為檢測(cè)試劑——所述粒子是將抗體、抗原擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的，與檢測(cè)樣品反應(yīng)，然后以粒子的凝集程度為指標(biāo)，測(cè)定檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物(抗原、抗體)。有報(bào)道稱，擔(dān)載了抗體的不溶性載體在特定的環(huán)境下在NaCl濃度為一定濃度以下的低離子強(qiáng)度的液相中、或相反地在一定濃度以上的高離子強(qiáng)度的液相中分散。在NaCl濃度為一定濃度以下的低離子強(qiáng)度、即，電導(dǎo)率低的溶劑中擔(dān)載有懸浮蛋白質(zhì)的不溶性載體在高效率獲得分散性、靈敏度方面是優(yōu)異的。但是，由于來(lái)自生物物質(zhì)中的夾雜物質(zhì)的離子的混入，可能發(fā)生非特異性凝集。已知對(duì)于生物樣品，對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的免疫反應(yīng)產(chǎn)生影響的妨礙物質(zhì)存在于生物樣品中。為了避免免疫反應(yīng)的妨礙物質(zhì)的影響，廣泛采用使用試劑的方法，所述試劑應(yīng)用各種添加物。例如，已知下列方法其使用用于檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)的反應(yīng)液、以及作為第2試劑的緩沖液，可避免妨礙物質(zhì)的影響的物質(zhì)在所述第2試劑中共存。緩沖液大多采用具有與生理鹽水接近的電導(dǎo)率(約15-20 ms/cm)的溶液。在采用在低電導(dǎo)率條件下?lián)d懸浮抗體的不溶性載體的測(cè)定系統(tǒng)中，在測(cè)定時(shí)，僅將反應(yīng)液與緩沖液混合就可能引發(fā)非特異性凝集。在免疫凝集法等中，為了提高試劑的靈敏度，有時(shí)使用各種添加劑(例如聚乙二醇、胍)。但是，使用添加劑則電導(dǎo)率增加，在測(cè)定時(shí)，僅將試劑液與緩沖液混合就可能發(fā)生非特異性凝集。另一方面，使用在高電導(dǎo)率條件下?lián)d懸浮蛋白質(zhì)的不溶性載體時(shí)，如果是數(shù)小時(shí)以內(nèi)的短時(shí)間，則不發(fā)生自身凝集。但是，在數(shù)天或數(shù)個(gè)月以上的長(zhǎng)期保存中，可能發(fā)生自身凝集而無(wú)法保存?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)
專利文獻(xiàn)1 日本特開2005-351643號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2 日本特許第3095541號(hào)專利文獻(xiàn)3 日本特開昭57-182168號(hào)公報(bào)非專利文獻(xiàn)
非專利文獻(xiàn) 1 :J. Biomater. Sci. Polymer Edn, Vol. 10，No. 11，PP. 1093-1105 (1999)。 發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目標(biāo)是提供檢測(cè)試劑以及使用該試劑測(cè)定檢測(cè)樣品中被測(cè)定物的方法， 所述檢測(cè)試劑是以懸浮有粒子的粒子懸浮液中的粒子的凝集為指標(biāo)的、檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物的檢測(cè)試劑，所述粒子是將被測(cè)定物捕獲物質(zhì)擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的，所述檢測(cè)試劑在保存中不發(fā)生自身凝集，并且在測(cè)定時(shí)也幾乎不發(fā)生非特異性凝集。本申請(qǐng)發(fā)明人進(jìn)行了深入的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過(guò)將檢測(cè)試劑制成分別含有粒子懸浮液和緩沖液的雙液系統(tǒng)，同時(shí)使粒子懸浮液的電導(dǎo)率比特定值低、使緩沖液的電導(dǎo)率比作為常規(guī)檢測(cè)試劑使用的緩沖液的電導(dǎo)率高且比特定值高、在測(cè)定操作開始之前即刻將緩沖液和粒子懸浮液混合并進(jìn)行測(cè)定，在保存中不發(fā)生自身凝集，并且在測(cè)定時(shí)也能夠抑制非特異性凝集，從而完成了本發(fā)明。即，本發(fā)明提供用于測(cè)定上述被測(cè)定物的檢測(cè)試劑，該檢測(cè)試劑至少含有A液和B 液，A液是具有30 ms/cm以上電導(dǎo)率的緩沖液；B液是懸浮有粒子的粒子懸浮液并具有6. 5 ms/cm以下的電導(dǎo)率，其中，所述粒子是將被測(cè)定物捕獲物質(zhì)擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的。本發(fā)明還提供使用上述本發(fā)明的檢測(cè)試劑測(cè)定檢測(cè)樣品中被測(cè)定物的方法，該方法包含將上述A液、上述B液和上述檢測(cè)樣品混合的步驟以及測(cè)定所得混合液中上述粒子的凝集程度的步驟，并且在測(cè)定操作開始之前即刻將至少上述A液與上述B液混合。根據(jù)本發(fā)明，在試劑的保存中不發(fā)生自身凝集，另外在測(cè)定時(shí)也幾乎不發(fā)生非特異性凝集，因此可以準(zhǔn)確地測(cè)定檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物。


圖1是表示使用自動(dòng)測(cè)定裝置實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)A液、B液和檢測(cè)樣品的混合方法的一個(gè)方案的圖。圖2是表示在自動(dòng)測(cè)定裝置中使用Y字型管實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)A液、B液和檢測(cè)樣品的混合方法的又一方案的圖。圖3是表示使用過(guò)濾管實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)A液、B液和檢測(cè)樣品的混合方法的另一方案的圖。圖4表示由本發(fā)明的實(shí)施例制作的校準(zhǔn)曲線。具體實(shí)施方案
如上所述，本發(fā)明的試劑含有作為緩沖液的A液、和作為粒子懸浮液的B液。A液和B 液是在分開的容器中容納的個(gè)別液體，其在測(cè)定操作開始之前即刻混合?；旌系姆绞皆谙挛闹嘘愂?。A液(緩沖液)
作為緩沖液的A液中所含的緩沖劑可以是檢測(cè)試劑中通常使用的公知的緩沖劑，例如可優(yōu)選使用丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸等氨基酸；檸檬酸、馬來(lái)酸、戊二酸等的羧酸鹽；磷酸鈉、磷酸氫鈉等磷酸鹽； 碳酸鈣、碳酸鎂等碳酸鹽；Good’ s緩沖劑等，適宜使用Tris緩沖劑、Good’ s緩沖劑、磷酸系緩沖劑，但緩沖劑并不限于此。A液的電導(dǎo)率為30 ms/cm以上，優(yōu)選35 ms/cm以上。電導(dǎo)率的上限沒(méi)有特別限定，通常、電導(dǎo)率為200 ms/cm以下，優(yōu)選100 ms/cm以下。通過(guò)使A液的電導(dǎo)率為30 ms/ cm以上，測(cè)定時(shí)的非特異性凝集得到顯著抑制。作為以往在檢測(cè)試劑中廣泛使用的緩沖液，使用與生理鹽水具有同程度電導(dǎo)率的緩沖液，即，電導(dǎo)率為15-20 ms/cm左右的緩沖液。因此，本發(fā)明中的一個(gè)特征是使用具有比通常高的電導(dǎo)率的緩沖液。電導(dǎo)率可按照使用廣泛市售的電導(dǎo)率計(jì)的常規(guī)方法測(cè)定。電導(dǎo)率的測(cè)定在室溫下進(jìn)行。通過(guò)調(diào)節(jié)上述緩沖劑的濃度和添加水溶性離子化合物，可將A液的電導(dǎo)率調(diào)節(jié)為任意值?？墒褂玫膬?yōu)選的水溶性離子化合物例如可舉出鈉、鉀等堿金屬和/或鎂、鈣等堿土類金屬的氯化物、溴化物、碘化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽、乙酸鹽、硫酸鹽，明礬類等。其中， NaCl是簡(jiǎn)便和優(yōu)選的。如果使用市售的電導(dǎo)率計(jì)，則可實(shí)時(shí)測(cè)定液體的電導(dǎo)率，因此，通過(guò)一邊測(cè)定電導(dǎo)率一邊添加水溶性離子化合物，可以容易地達(dá)到期望的電導(dǎo)率。B液(粒子懸浮液)
如上所述，在B液中，被測(cè)定物捕獲物質(zhì)擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的粒子以懸浮狀態(tài)被包含。該懸浮粒子沒(méi)有任何限定，可以是以往在檢測(cè)試劑中使用的公知的粒子。S卩，被測(cè)定物捕獲物質(zhì)是可與要測(cè)定的被測(cè)定物特異性結(jié)合的物質(zhì)即可，其可以通過(guò)抗原抗體反應(yīng)、配體-受體反應(yīng)等特異性結(jié)合反應(yīng)與被測(cè)定物結(jié)合。利用抗原抗體反應(yīng)的方法是被稱為免疫凝集法的公知的免疫測(cè)定法，被測(cè)定物為抗原時(shí)，擔(dān)載與該抗原進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的抗體或其抗原結(jié)合片段(保持與抗原的結(jié)合性的Fab片段、F(ab’)2片段等)。被測(cè)定物為抗體時(shí)，抗體也是抗原，因此，擔(dān)載與該抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的抗體或其抗原結(jié)合片段。另外，這些抗體可以是單克隆抗體，也可以是多克隆抗體。被測(cè)定物為抗原時(shí)，被測(cè)定物例如可舉出CRP (C-反應(yīng)蛋白)、前列腺特異抗原、鐵蛋白、β-2微球蛋白、肌紅蛋白、巨蛋白、足萼蛋白運(yùn)鐵蛋白、白蛋白、肌酸酐等蛋白標(biāo)志物，各種腫瘤標(biāo)志物，LDL、HDL、TG等脂蛋白，甲型流感病毒(influenza A virus)、 乙型流感病毒(influenza B virus)、RS病毒(RSV)、鼻病毒(rhinovirus)、輪狀病毒 (rotavirus)、諾如病毒(norovirus)、腺病毒(adenovirus)、星狀病毒(astrovirus)、 HAV, HBs、HCV, HIV、EBV 等病毒抗原，沙眼衣原體(chlamydia trachomatis)、溶血性鏈球菌(hemolytic streptococcus)、百日咳菌(bordetella pertussis)、幽門螺方寵桿菌 (helicobacter pylori)、鉤端螺方寵體(Ieptospira)、梅毒螺方寵體(treponema palidum)、弓形蟲(toxoplasma gondii)、包柔氏螺旋體(borrelia)、軍團(tuán)菌屬菌(Iegionella)、炭疽桿菌(anthrax bacillus)、MRSA等細(xì)菌抗原，細(xì)菌等生產(chǎn)的毒素，支原體(mycoplasma)脂質(zhì)抗原，人絨毛膜促性腺激素等肽激素、類固醇激素等類固醇，腎上腺素或嗎啡等生理活性胺類，維生素B類等維生素類，前列腺素類，四環(huán)素等抗生素，農(nóng)藥、環(huán)境激素等，但并不限于這些。優(yōu)選的例子可舉出CRP、前列腺特異抗原、鐵蛋白和β-2微球蛋白等抗原。被測(cè)定物為抗體時(shí)，被測(cè)定物可舉出與上述蛋白質(zhì)標(biāo)志物、各種腫瘤標(biāo)志物、脂蛋白、病毒抗原、細(xì)菌抗原、細(xì)菌等產(chǎn)生的毒素、肽激素、類固醇、生理活性胺類、維生素類、 抗生素、農(nóng)藥、環(huán)境激素等抗原特異性反應(yīng)的抗體等。被測(cè)定物為抗原時(shí)，可以使與被測(cè)定物結(jié)合的被測(cè)定物捕獲物質(zhì)為抗體，使載體粒子敏化。被測(cè)定物為抗體時(shí)，可以使與被測(cè)定物結(jié)合的被測(cè)定物捕獲物質(zhì)為載體粒子中的抗原而敏化。被測(cè)定物為配體時(shí)，可以使與被測(cè)定物結(jié)合的被測(cè)定物捕獲物質(zhì)為受體，使載體粒子敏化，被測(cè)定物為受體時(shí)，可以使與被測(cè)定物結(jié)合的被測(cè)定物捕獲物質(zhì)為載體粒子中的配體。不溶性載體也可以是以往在檢測(cè)試劑中使用的公知的載體，例如可舉出聚乙烯、聚苯乙烯等樹脂膠乳，氧化鋁，二氧化硅，膠體金，磁性粒子等粒子。在這些不溶性載體中， 適合使用膠乳粒子、特別是聚苯乙烯膠乳粒子。B液中的懸浮粒子濃度根據(jù)所使用的被測(cè)定物捕獲物質(zhì)的種類、被測(cè)定物的種類、 檢測(cè)樣品中被測(cè)定物的預(yù)測(cè)濃度等適當(dāng)設(shè)定，通常，粒子濃度為0. 01-0. 5%左右。B液的電導(dǎo)率為6. 5 ms/cm以下，優(yōu)選5 ms/cm以下。B液的電導(dǎo)率為6. 5 ms/cm 以下時(shí)，可防止保存中粒子的自身凝集，另外，幾乎不發(fā)生測(cè)定時(shí)的非特異性凝集。電導(dǎo)率的下限沒(méi)有特別限定，通常電導(dǎo)率為0.1 ms/cm以上。6.5 ms/cm以下的電導(dǎo)率通過(guò)使用例如水、醇(例如乙醇等)、糖液(例如葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖等)等作為B液的溶劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。在實(shí)現(xiàn)上述電導(dǎo)率的范圍內(nèi)，B液內(nèi)也可添加氯化鈉、緩沖劑。本發(fā)明的檢測(cè)試劑中可以結(jié)合作為添加劑的下列物質(zhì)用于檢出檢測(cè)對(duì)象物質(zhì)的顯色試劑、反應(yīng)性試劑，膽固醇氧化酶、膽固醇酯酶等酶，表面活性劑，用于抗體穩(wěn)定化、抑制非特異性反應(yīng)的蛋白質(zhì)等，用于調(diào)節(jié)比重的糖類、甘油等。這些添加劑可以添加在A液或 B液中，也可以在測(cè)定時(shí)作為與A液、B液分開的試劑(進(jìn)一步地，另外的液體)添加。測(cè)定方法
使用上述本發(fā)明的檢測(cè)試劑的本發(fā)明的測(cè)定方法包含以下步驟將A液、B液和檢測(cè)樣品混合的步驟，以及測(cè)定所得混合液中上述粒子的凝集程度的步驟。檢測(cè)樣品只要是可能含有上述的被測(cè)定物抗原、抗體等的檢測(cè)樣品即可，沒(méi)有任何限定。但是，推測(cè)測(cè)定時(shí)的非特異性凝集是由來(lái)自檢測(cè)樣品中的夾雜物質(zhì)的離子的混入導(dǎo)致的，因此，本發(fā)明在應(yīng)用于由人體或動(dòng)物、優(yōu)選由人體采集的檢測(cè)樣品時(shí)最發(fā)揮威力。 這種檢測(cè)樣品例如可舉出血液、血清、尿液、腦脊髄液、汗液、淋巴液、唾液、胃液等液體，糞便、毛發(fā)、角質(zhì)、指/趾甲等，適合使用血液、血清、血漿、尿液、腦脊髄液或糞便，特別適合使用來(lái)自血液的血液、血清或血漿。對(duì)于A液、B液、檢測(cè)樣品的混合，只要可將它們?nèi)?檢測(cè)試劑含有另外的添加劑時(shí)，進(jìn)一步包含該添加劑)混合即可，其順序沒(méi)有限定，可舉出將三者同時(shí)混合的方法、將A 液與B液混合后混合檢測(cè)樣品的方法、將A液與檢測(cè)樣品混合后混合B液的方法等。使用自動(dòng)測(cè)定裝置的凝集法也廣泛采用，本發(fā)明中也可優(yōu)選使用市售的自動(dòng)測(cè)定裝置。使用自動(dòng)測(cè)定裝置時(shí)的A液、B液、檢測(cè)樣品的混合方案可舉出例如圖1-圖2所示的方案。在圖 1的方法中，先添加下面的液體，然后添加上面的液體。圖2所示的方法是使用Y字形管的方法，其中使A液和B液合流混合，然后將該混合液與檢測(cè)樣品混合。圖3所示的方法是使用過(guò)濾管的混合方法，其中將A液加入到管內(nèi)，將檢測(cè)樣品加入到過(guò)濾器內(nèi)，將A液、檢測(cè)樣品混合過(guò)濾，滴加到B液中。優(yōu)選在混合后攪拌。至少A液與B液的混合在測(cè)定操作開始之前即刻進(jìn)行。這里，“測(cè)定操作”是測(cè)定混合液中粒子的凝集程度的操作，通常是吸光度或濁度的測(cè)定?！爸凹纯獭笔菧y(cè)定操作開始前10分鐘以內(nèi)、優(yōu)選5分鐘以內(nèi)。通過(guò)將A液和B液在測(cè)定操作開始之前即刻混合，本發(fā)明的效果得以實(shí)現(xiàn)，即，防止保存時(shí)的自身凝集、防止測(cè)定時(shí)的非特異性凝集。另外，混合時(shí)各液的溫度優(yōu)選為進(jìn)行反應(yīng)的溫度，通常為室溫_37°C。與以往同樣，混合后，通常使反應(yīng)進(jìn)行1分鐘-1小時(shí)左右、優(yōu)選3分鐘-15分鐘左右。與以往同樣，凝集程度通常通過(guò)光學(xué)方法測(cè)定，優(yōu)選通過(guò)測(cè)定吸光度或濁度進(jìn)行。對(duì)各種已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定，將濃度與測(cè)定值(吸光度等)的關(guān)系繪圖，制作校準(zhǔn)曲線，通過(guò)將針對(duì)檢測(cè)樣品得到的測(cè)定值代入校準(zhǔn)曲線，可以測(cè)定檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物。 “測(cè)定”以包含檢出、定量、半定量中任一種的含義使用。檢測(cè)試劑試劑盒
使用上述本發(fā)明的檢測(cè)試劑的本發(fā)明的檢測(cè)試劑試劑盒含有A液、B液和容器等檢測(cè)所必須的試劑和部件。以下，基于實(shí)施例更具體地說(shuō)明本發(fā)明。但本發(fā)明并不限于下述實(shí)施例。 實(shí)施例實(shí)施例1-3、比較例1-5
如下所示，測(cè)定粒子懸浮液(B液)的自身凝集的差異，所述粒子懸浮液(B液)含有擔(dān)載了懸浮蛋白質(zhì)的不溶性載體粒子。另外，將生理鹽水作為空白檢測(cè)物，評(píng)價(jià)在改變緩沖液 (A液)的電導(dǎo)率的反應(yīng)條件下非特異性凝集的差異。另外，通過(guò)CRP的測(cè)定評(píng)價(jià)靈敏度的差異。使用材料
A液在含100 mM Tris的緩沖液中一邊監(jiān)控電導(dǎo)率一邊添加氯化鈉，得到規(guī)定的電導(dǎo)率。電導(dǎo)率為8 ms/cm(氯化鈉濃度50 mM,比較例1,5),16 ms/cm (氯化鈉濃度150 mM, 比較例2)、35 ms/cm (氯化鈉濃度400 mM，實(shí)施例1)、75 ms/cm (氯化鈉濃度1000 mM,實(shí)施例2，比較例3、4)、200 ms/cm (氯化鈉濃度5000 mM,實(shí)施例3)。B液在將擔(dān)載了 0. 25 mg/mL市售抗CRP抗體的平均粒徑220 nm的0. 1%聚苯乙烯膠乳分散于水中而成的反應(yīng)液中添加氯化鈉，得到規(guī)定的電導(dǎo)率。電導(dǎo)率為5 ms/cm (氯化鈉50 mM,實(shí)施例1-3，比較例1,2),15 ms/cm (氯化鈉:150 mM,比較例3)、78 ms/ cm (氯化鈉:1000 mM,比較例4、5)。方法
測(cè)定上述B液的初期吸光度和1個(gè)月后的吸光度，確認(rèn)自身凝集的有無(wú)。使用生理鹽水作為空白檢測(cè)樣品，將上述A液與B液混合得到的試劑用自動(dòng)分析裝置測(cè)定，確認(rèn)試劑的非特異性凝集。即，在日立7180型(商品名)自動(dòng)分析裝置上，在 2.4 UL生理鹽水中添加120 μ L上述的A液，將該混合液在37°C下攪拌混合，然后放置5 分鐘，然后添加120 μ L上述B液，進(jìn)一步在37°C下攪拌混合。以570 nm的吸光度變化量來(lái)測(cè)定約5分鐘的凝集反應(yīng)。CRP測(cè)定使用含有0.05 mg/dL CRP的溶液作為檢測(cè)樣品，通過(guò)自動(dòng)分析裝置對(duì)將上述A液與B液混合得到的試劑進(jìn)行測(cè)定，確認(rèn)吸光度變化量。S卩，在日立7180型(商品名)自動(dòng)分析裝置中，在2. 4 μ L 0. 05 mg/dL的CRP溶液中添加120 μ L上述A液，將該混合液在37°C下攪拌混合，然后放置5分鐘，然后添加120 μ L上述B液，進(jìn)一步在37°C下攪拌混合。以570 nm的吸光度變化量來(lái)測(cè)定約5分鐘的凝集反應(yīng)。評(píng)價(jià)方法
對(duì)于自身凝集，在保存前后分別計(jì)算0. 1%聚苯乙烯膠乳粒子分散液的吸光度、和B液的吸光度之差，按照以下的判定基準(zhǔn)評(píng)價(jià)各電導(dǎo)率下的自身凝集。判定基準(zhǔn)
以0. 1%聚苯乙烯膠乳粒子分散液的吸光度為基準(zhǔn)，〇差為15%以下 X 差超過(guò)15%
關(guān)于測(cè)定時(shí)的非特異性凝集，按照以下的判定基準(zhǔn)，評(píng)價(jià)自動(dòng)分析裝置中生理鹽水測(cè)定時(shí)的吸光度變化量。判定基準(zhǔn)
〇吸光度變化量八Abs的10000倍為20以下 X 吸光度變化量八Abs的10000倍超過(guò)20 CRP測(cè)定
關(guān)于CRP的測(cè)定，計(jì)算作為空白的生理鹽水和0.05 mg/dL CRP溶液測(cè)定時(shí)的吸光度變化量之差，對(duì)靈敏度進(jìn)行比較。電導(dǎo)率的測(cè)定
A液和B液的電導(dǎo)率的測(cè)定使用東亞電波工業(yè)(株式)會(huì)社制造的電導(dǎo)率計(jì)CM-60G型進(jìn)行。(電極CT_57101B，溫度25°C)
結(jié)果
結(jié)果如下述表1所示。[表 1]
權(quán)利要求
1.檢測(cè)試劑，所述檢測(cè)試劑用于測(cè)定被測(cè)定物并且至少含有A液和B液，所述A液是具有30 ms/cm以上電導(dǎo)率的緩沖液，所述B液是懸浮有粒子的粒子懸浮液且具有6.5 ms/cm 以下的電導(dǎo)率，其中，所述粒子是將被測(cè)定物捕獲物質(zhì)擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的。
2.權(quán)利要求1的檢測(cè)試劑，其中，所述A液的電導(dǎo)率為200ms/cm以下。
3.權(quán)利要求1或2的檢測(cè)試劑，其中，所述被測(cè)定物捕獲物質(zhì)是抗體或其抗原結(jié)合片段、或者抗原。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的檢測(cè)試劑，其中，所述不溶性載體粒子是膠乳粒子。
5.權(quán)利要求4的檢測(cè)試劑，其中，所述膠乳粒子是聚苯乙烯膠乳粒子。
6.測(cè)定檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物的方法，所述方法使用權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的檢測(cè)試劑，所述方法包含將所述A液、所述B液和所述檢測(cè)樣品混合的步驟以及測(cè)定所得混合液中所述粒子的凝集程度的步驟，并且在測(cè)定操作開始之前即刻將至少所述A液與所述B液混
7.權(quán)利要求6的測(cè)定方法，其中，所述檢測(cè)樣品是尿液、腦脊髄液或糞便。
8.權(quán)利要求6的測(cè)定方法，其中，所述檢測(cè)樣品是血液、血清或血漿。
9.檢測(cè)試劑試劑盒，所述檢測(cè)試劑試劑盒至少含有權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的檢測(cè)試劑。
全文摘要
本發(fā)明的課題是提供檢測(cè)試劑以及使用該檢測(cè)試劑測(cè)定檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物的方法，該檢測(cè)試劑是以懸浮有粒子的粒子懸浮液中的粒子的凝集作為指標(biāo)的、檢測(cè)樣品中的被測(cè)定物的檢測(cè)試劑，所述粒子是將被測(cè)定物捕獲物質(zhì)擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的，該檢測(cè)試劑在保存中不發(fā)生自身凝集，且測(cè)定時(shí)也幾乎不發(fā)生非特異性凝集。所述課題的解決方法是用于測(cè)定被測(cè)定物的檢測(cè)試劑至少含有A液和B液，A液是具有30ms/cm以上電導(dǎo)率的緩沖液，B液是懸浮有粒子的粒子懸浮液，所述粒子是將被測(cè)定物捕獲物質(zhì)擔(dān)載于不溶性載體粒子上得到的，并且B液具有6.5ms/cm以下的電導(dǎo)率。
文檔編號(hào)G01N33/545GK102341707SQ20108001007
公開日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2010年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月5日
發(fā)明者加納 M., 飯塚雅行 申請(qǐng)人:電化生研株式會(huì)社