專利名稱：一種胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)療檢測領域，具體的說，涉及一種醫(yī)療用體外診斷試劑的反應緩沖液。
背景技術：
膠體金試紙條屬于免疫學檢測范疇，方法特異，敏感性好。1974年Romano等將膠體金標記在第二抗體(馬抗人IgG)上，建立了間接免疫膠體金染色法。1978年geoghega發(fā)現(xiàn)了膠體金標記物在光鏡水平的應用。膠體金在免疫化學中的這種應用，又被稱為免疫金 .之后，許多學者進一步證實膠體金能穩(wěn)定又迅速地吸附蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)的生物活性無明顯改變.它可以作為探針進行細胞表面和細胞內(nèi)多糖、蛋白質(zhì)、多膚、抗原、激素、核酸等生物大分子的精確定位，也可以用于日常的免疫診斷，進行免疫組織化學定位，因而在臨床診斷及藥物檢測等方面的應用已受到廣泛的重視。胎膜早破膠體金試紙由含有被預先固定于膜上檢測區(qū)(T)的抗胰島素樣生長因子結合蛋白-1和控制區(qū)(C)的相應抗體而組成，主要用于體外快速定性檢測孕婦陰道分泌物中的羊水胰島素樣生長因子結合蛋白-1，用于輔助診斷被懷疑或有臨床征象顯示有可能發(fā)生胎膜早破。但目前，用于胎膜早破膠體金試紙反應的緩沖液，移行速度不夠快和質(zhì)控線、檢測線出現(xiàn)速度較慢。

發(fā)明內(nèi)容
為解決以上技術問題，本發(fā)明目的之一在于提供一種成本低廉，能大大提高膠體金試紙移行速度，縮短檢測線、質(zhì)控線出現(xiàn)時間的胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液。本發(fā)明目的之二在于提供一種胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液的制備方法。本發(fā)明目的是這樣實現(xiàn)的
一種胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液按重量份數(shù)由下列原料組成
PH值為pH6. 50 10. 00的檸檬酸鈉緩沖液100份
BSA (牛血清蛋白)1 5份
Nacl 0. 5-0. 9 份
TritonXlOO 0.2 2 份
Proclin300 0. 01-0. 06 份。上述檸檬酸鈉緩沖液按重量份數(shù)由檸檬酸三鈉1. 2 7. 8份溶于100份純化水中，配成溶液A ；檸檬酸0. 1 1. 2份溶于100份純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A 至pH6. 50 10. 00得到。緩沖液中酸堿度的檸檬酸鈉緩沖液用于提高抗原抗體的結合能力提高色帶的顯色速度，使用TritonXlOO作為非離子表面活性劑，給蛋白等反應體系中的物質(zhì)加上助推器，加快了層析的的速度，BSA的使用使反應體系更加接近陰道中的分泌物的體系，加入 ft~OClin300使緩沖液避免滋生細菌等微生物起到防腐作用。一種制備胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液的方法，其關鍵在于按如下步驟進行(1)稱取檸檬酸三鈉1.2 7. 8份溶于100份純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸0. 1 1. 2份溶于100份純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH6. 50 10. 00，配成檸檬酸鈉緩沖液；
(2)量取檸檬酸鈉緩沖液100份，稱取BSA1 5份，Nacl 0. 5 0. 9份，TritonXlOO 0.2 2份，PrOclin300 0. 01 0. 06份加入檸檬酸鈉緩沖液中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液。有益效果本發(fā)明能大大提高膠體金試紙移行速度，縮短檢測線、質(zhì)控線出現(xiàn)時間，且緩沖液組成成分常見，價格相對便宜，整個制備也比較方便，制備工序簡單容易操作。
具體實施例方式實施例1
(1)稱取檸檬酸三鈉1.2克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸0. 1克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH6. 50，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA 1 克，Nacl 0. 5 克，TritonXlOO 0. 2 克， Proclin300 0. Olml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例2
(1)稱取檸檬酸三鈉1.5克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸0. 2克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH7. 00，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA 1.5 克，Nacl 0. 6 克，iTritonXlOO 0. 3 克， Proclin300 0. 02ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例3
(1)稱取檸檬酸三鈉2.0克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸0. 4克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH7. 50，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA2. 0 克，Nacl 0. 8 克，TritonXlOO 0. 5 克， Proclin300 0. 03ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例4
(1)稱取檸檬酸三鈉2.5克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸0. 6克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH8. 00，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA3. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 0. 8 克， Proclin300 0. 04ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例5
(1)稱取檸檬酸三鈉3.0克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸0. 8克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH8. 50，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA4. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 1. 0 克， Proclin300 0. 05ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例6
(1)稱取檸檬酸三鈉4.0克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 0克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH9. 0，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA5. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 1. 1 克，Proclin300 0. 06ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例7
(1)稱取檸檬酸三鈉5.0克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 2克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH9. 5，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA5. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 1. 5 克， Proclin300 0. 06ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例8
(1)稱取檸檬酸三鈉5.5克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 2克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH9. 8，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA5. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 1. 8 克， Proclin300 0. 06ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例9
(1)稱取檸檬酸三鈉6.0克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 2克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至ρΗΙΟ. 0，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA5. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 2. 0 克， Proclin300 0. 06ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例10
(1)稱取檸檬酸三鈉6.5克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 0克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至ρΗΙΟ. 0，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA5. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 1. 5 克， Proclin300 0. 05ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例11
(1)稱取檸檬酸三鈉7.0克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 0克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至ρΗΙΟ. 0，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA4. 0 克，Nacl 0. 9 克，TritonXlOO 1. 2 克， Proclin300 0. 04ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例12
(1)稱取檸檬酸三鈉7.5克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 0克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至ρΗΙΟ. 0，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA5. 0 克，Nacl 0. 85 克，TritonXlOO 1. 2 克， Proclin300 0. 05ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例13
(1)稱取檸檬酸三鈉7.80克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 2克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至ρΗΙΟ. 0，配成溶液C
(2)量取溶液C 100 毫升，稱取 BSA4. 50 克，Nacl 0. 85 克，TritonXlOO 1. 0 克， Proclin300 0. 05ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液；
實施例14
(1)稱取檸檬酸三鈉7. 50克溶于100毫升純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸1. 0克溶于100毫升純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至ρΗΙΟ. 0，配成溶液C(2)量取溶液 C 100 毫升，稱取 BSA4. OO 克，Nacl 0. 75 克，TritonXlOO 0. 9 克， Proclin300 0. 05ml加入溶液C中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液； 表1是本發(fā)明實施例1-14的測試部分結果表1中用于測試的原料分別為
胰島素樣生長因子結合蛋白I抗原胰島素樣生長因子結合蛋白I (美國Meridian公司生產(chǎn))
胎膜早破膠體金試紙胰島素樣生長因子結合蛋白I測定試劑盒(重慶中元生物技術有限公司生產(chǎn))
BSA =Roche公司生產(chǎn)
測試時把胰島素樣生長因子結合蛋白I加入胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液中，用胎膜早破膠體金試紙檢測，然后進行數(shù)據(jù)分析。
表1 測試結果
權利要求
1.一種胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液按重量份數(shù)由下列原料組成PH值為pH6. 50 10. 00的檸檬酸鈉緩沖液100份BSA 1 5份Nacl 0. 5-0. 9 份TritonXlOO 0.2 2 份Proclin300 0. 01 0. 06 份。
2.根據(jù)權利要求1所述一種胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液，其特征在于所述檸檬酸鈉緩沖液按重量份數(shù)由檸檬酸三鈉1. 2 7. 8份溶于100份純化水中，配成溶液A ；檸檬酸0. 1 1. 2份溶于100份純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH6. 50 10. 00得到。
3.一種制備權利要求1或2所述胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液的方法，其特征在于按如下步驟進行(1)稱取檸檬酸三鈉1.2 7. 8份溶于100份純化水中，配成溶液A ；稱取檸檬酸0. 1 1. 2份溶于100份純化水中，配成溶液B ；用溶液B調(diào)溶液A至pH6. 50 10. 00，配成檸檬酸鈉緩沖液；(2)量取檸檬酸鈉緩沖液100份，稱取BSA1 5份，Nacl 0. 5 0. 9份，TritonXlOO 0.2 2份，PrOclin300 0. 01 0. 06份加入檸檬酸鈉緩沖液中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液及其制備方法，檸檬酸三鈉1.2～7.8份溶于100份純化水中，配成溶液A；檸檬酸0.1～1.2份溶于100份純化水中，配成溶液B；用溶液B調(diào)溶液A至pH6.50～10.00，配成檸檬酸鈉緩沖液；檸檬酸鈉緩沖液100份、BSA1～5份、Nacl0.5～0.9份、TritonX1000.2～2份、Proclin3000.01～0.06份加入檸檬酸鈉緩沖液中，攪拌均勻，配成胎膜早破膠體金試紙反應緩沖液。本發(fā)明能大大提高膠體金試紙移行速度，縮短檢測線、質(zhì)控線出現(xiàn)時間，且緩沖液組成成分常見，價格相對便宜，整個制備也比較方便，制備工序簡單容易操作。
文檔編號G01N33/532GK102297963SQ20111014110
公開日2011年12月28日 申請日期2011年5月30日 優(yōu)先權日2011年5月30日
發(fā)明者吉權, 李民友, 潘能科 申請人:吉權, 李民友