專利名稱：檢測結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖特異性抗體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種免疫層析方法檢測血清中結(jié)核抗體的方法，具體地說涉及使用結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原，采用雙抗原夾心的方法制備檢測血清中結(jié)核抗體的方法。
背景技術(shù)：
目前，世界上有1/3的人口感染了分支桿菌，在所有可以避免的死亡人口當(dāng)中，結(jié)核超過25%，是單一細(xì)菌感染最常見的死亡原因。世界衛(wèi)生組織(WHO)將結(jié)核稱為“全球性急癥狀態(tài)”。目前，普遍認(rèn)為宿主對結(jié)核桿菌的抵抗是依靠細(xì)胞免疫機(jī)制，因而大部分在研制的針對結(jié)核桿菌的疫苗是通過刺激細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)來控制結(jié)核桿菌的生長從而使機(jī) 體獲得保護(hù)?？贵w介導(dǎo)的針對結(jié)核桿菌感染的保護(hù)作用目前仍然存在爭議。結(jié)核病的細(xì)菌學(xué)檢查目前是結(jié)核病實驗室診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。由于痰涂片陽性率較低，鏡檢需要經(jīng)驗，難以區(qū)分環(huán)境分枝桿菌造成的假陽性；痰培養(yǎng)需時太長，因此細(xì)菌學(xué)檢查對結(jié)核病的診斷價值有限。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，用高度敏感的方法檢測結(jié)核菌及其特異性DNA片段，如PCR、生物探針和基因芯片等，需要相應(yīng)的檢測設(shè)備和檢測費用高未能廣泛推廣。血清學(xué)診斷技術(shù)有其固有的優(yōu)勢，如操作簡便、快速、便于推廣、無需特殊精密儀器，已有多種純化的特異性抗原可采用，可以發(fā)展成自動化檢測，尤其是對痰培養(yǎng)陰性和肺外結(jié)核病有較為重要的輔助診斷價值，受到廣泛的重視。結(jié)核桿菌的38kDa蛋白是一定位在質(zhì)膜上的磷酸鹽轉(zhuǎn)運蛋白，只在分枝桿菌復(fù)合體中表達(dá)。38kDa蛋白為一分泌蛋白，可刺激T細(xì)胞和B細(xì)胞免疫反應(yīng)，廣泛應(yīng)用于結(jié)核病的血清學(xué)試驗。英國公司生產(chǎn)的OMEGA結(jié)核抗體定量檢測Myco G、A、M試劑盒聯(lián)合應(yīng)用38kDa和脂多糖(LPS)抗原，而TB Complex Plus試劑盒選用的是38kDa和16kDa抗原。然而，38kDa對活動性肺結(jié)核的診斷非常有效，但和大腸埃希菌同源蛋白有30%以上的交叉，所以對不同人群的靈敏度波動較大，尤其對涂片陰性和合并HIV感染的結(jié)核病患者效果較差。脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原指結(jié)核桿菌的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)。LAM是分枝桿菌細(xì)胞壁的重要組成部分，是屬特異性抗原，具有較強(qiáng)的免疫原性和免疫調(diào)節(jié)功能，可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，比如抑制T細(xì)胞的增殖，干擾伽馬干擾素介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞的激活，清除毒性的氧自由基，抑制蛋白激酶的活性和抑制IL-2，IL-5，人T細(xì)胞GM-CSF的mRNA的合成，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞即時基因表達(dá)，增加單核細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子和介導(dǎo)補(bǔ)體的激活。因此，LAM是結(jié)核病的血清學(xué)診斷應(yīng)用較廣的抗原，有一些應(yīng)用LAM抗原進(jìn)行檢測的報道。檢測LAM抗體被認(rèn)為是結(jié)核病一項有效的輔助診斷方法。例如，Antunes等人研發(fā)了結(jié)明(MycoDot TM)試劑盒,用于檢測活動性肺結(jié)核病人?，F(xiàn)有的利用LAM抗原來檢測結(jié)核抗體的試劑盒大部分是采用間接斑點法(也稱為滲濾法)。該方法包括用純化的LAM抗原包被在硝酸纖維膜上，封閉干燥；將血清樣本滴在硝酸纖維膜上，洗滌后加膠體金標(biāo)記的抗人IgG、IgM 二抗，如果血清中含有抗LAM抗體，二抗或Protein A將與之結(jié)合呈現(xiàn)紅色的斑點，為陽性。反之則為陰性。雖然斑點法已經(jīng)應(yīng)用于臨床檢測，但是斑點法檢測存在以下缺點1)由于使用LAM包被間接法檢測容易導(dǎo)致假陽性結(jié)果出現(xiàn)。2)滲濾法檢測步驟有加樣、洗滌、加標(biāo)記的二抗或Protein A、洗滌等步驟。必須配備洗漆液、膠體金標(biāo)記的二抗或Protein A等試劑,步驟繁瑣,而且試劑容易失去活性。目前，在快速檢測中的間接法檢測僅限于斑點滲濾法。雖然人們希望并嘗試開發(fā)利用層析法來快速、簡便地對結(jié)核桿菌進(jìn)行血清檢測，但是由于種種原因至今未開發(fā)出使用令人滿意的、有效的、高準(zhǔn)確性的血清學(xué)檢測方法。綜上所述，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)新的快速、高效、簡便、準(zhǔn)確地血清學(xué)檢測結(jié)核桿菌的方法和試劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種快速、高效、簡便、準(zhǔn)確地血清學(xué)檢測結(jié)核桿菌的方法和試劑。在本發(fā)明的第一方面，提供了一種結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原，其中，所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原吸附于或偶聯(lián)于乳膠微粒。在另一優(yōu)選例中，所述的LAM抗原共價偶聯(lián)于乳膠微粒。在另一優(yōu)選例中，所述的LAM抗原通過活化羥基共價偶聯(lián)于乳膠微粒。在另一優(yōu)選例中，所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原與乳膠微粒的重量比為I : 2 至 I : 20。所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原與乳膠微粒的重量比為I : 5至15 ;更佳地 I : 6 至 I : 12，如 I : 10。在另一優(yōu)選例中，所述的乳膠微粒的直徑為150_200nm。在本發(fā)明的第二方面，提供了一種結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原的復(fù)合物，所述復(fù)合物由乳膠顆粒以及吸附于或偶聯(lián)于乳膠微粒的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原構(gòu)成。在另一優(yōu)選例中，所述的LAM抗原共價偶聯(lián)于乳膠微粒。在另一優(yōu)選例中，所述的LAM抗原通過活化羥基共價偶聯(lián)于乳膠微粒。在另一優(yōu)選例中，所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原與乳膠微粒的重量比為I : 2 至 I : 20。所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原與乳膠微粒的重量比為I : 5至15 ;更佳地 I : 6 至 I : 12，如 I : 10。在另一優(yōu)選例中，所述的乳膠微粒的直徑為150_200nm。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種免疫層析試劑，所述的試劑含有本發(fā)明第一方面中所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原，或第二方面中所述的LAM抗原的復(fù)合物。在另一優(yōu)選例中，所述的試劑是側(cè)流片或側(cè)流試紙條。
在另一優(yōu)選例中，所述的側(cè)流片或側(cè)流試紙條包括以下組件樣品墊，結(jié)合物釋放墊，檢測線，反應(yīng)膜，對照線，吸收墊，和背襯。在本發(fā)明的第四方面，提供了一種試劑盒，它包括(a)本發(fā)明第三方面中所述的免疫層析試劑；和(b)使用說明書。在另一優(yōu)選例中，所述的試劑是側(cè)流片或側(cè) 流試紙條。在另一優(yōu)選例中，所述的試劑被密封于一容器或包裝中。在本發(fā)明的第五方面，提供了本發(fā)明第一方面所述的抗原或第二方面所述的復(fù)合物或第三方面所述的試劑的用途，它們被用于制備血清檢測結(jié)核桿菌的試劑盒。在本發(fā)明的第六方面，提供了一種血清檢測結(jié)核桿菌的方法，包括步驟用本發(fā)明第三方面所述的試劑或第四所述的試劑盒進(jìn)行層析檢測。在本發(fā)明的第七方面，提供本發(fā)明第三方面所述的試劑或第四所述的試劑盒的用途，它們被用于血清檢測結(jié)核桿菌。應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在
此不再一一累述。


圖I顯示了本發(fā)明一種側(cè)流免疫層析試紙條(板)的結(jié)構(gòu)示意圖，其中，各標(biāo)識如下1為樣品墊，2為結(jié)合物釋放墊，3為檢測線，4為反應(yīng)膜，5為對照線，6為吸收墊，7為背襯。圖2顯示了本發(fā)明側(cè)流免疫層析檢測原理的示意圖。
具體實施例方式本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究，首次選用LAM抗原開發(fā)出了血清-層析檢測結(jié)核桿菌的方法。該方法巧妙地利用了 LAM抗原的脂多糖化學(xué)特征，建立了用乳膠顆粒標(biāo)記LAM抗原的方法，再用雙抗原夾心法，成功地檢測出樣本中LAM抗原的抗體。與現(xiàn)有的結(jié)核桿菌檢測方法相比，本發(fā)明方法的簡便性、快速性、靈敏度和/或特異性均有顯著提高。LAM 抗原在本發(fā)明中，術(shù)語“LAM抗原”、“脂阿拉伯甘露聚糖”、“脂阿拉伯甘露聚糖抗原”或“本發(fā)明抗原”可互換使用，指來源于結(jié)核分枝桿菌的、構(gòu)成細(xì)胞壁的聚糖。本發(fā)明的研究表明，LAM抗原是結(jié)核桿菌特異性的且經(jīng)預(yù)處理后適合層析法的抗原。LAM抗原可用常規(guī)方法進(jìn)行制備、分離和純化。乳膠微球可用于本發(fā)明的乳膠微球沒有特別限制，可以選用市售的或用常規(guī)方法準(zhǔn)備的乳膠微球。乳膠微球的直徑一般為lO-lOOOnm，較佳地為50_500nm，更佳地為100_250nm，最佳地為 150-200nm。
通常，本發(fā)明優(yōu)選的乳膠微粒是表面帶活化基團(tuán)(如活化羧基)的乳膠微粒，可以為聚苯乙烯，聚丙烯或二氧化硅乳膠顆粒。自從1947年乳膠微粒被開發(fā)應(yīng)用，它已經(jīng)被廣泛用于各個科學(xué)領(lǐng)域。在醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域，從最早的乳膠凝集試驗發(fā)展到今天復(fù)雜的多元化檢測。以乳膠微粒作為抗原抗體的標(biāo)記物，主要是由于乳膠微粒本身的特性，它可以進(jìn)行多種形式表面功能化修飾，密度改變和特殊屬性的改變(比如顏色改變、熒光或磁性等)，使得乳膠成為檢測中的一個重要部分。彩色乳膠微?？梢蕴娲z體金用于免疫層析檢測。此外，結(jié)合熒光染料的熒光微?？梢杂脕硖娲l(fā)射性標(biāo)記技術(shù)。在本發(fā)明中，優(yōu)選的乳膠微粒是具有某一色彩的乳膠微粒，以便于檢測。一種優(yōu)選的乳膠微粒是彩色乳膠微粒。預(yù)處理的LAM抗原 本發(fā)明提供了經(jīng)乳膠微粒預(yù)處理的LAM。經(jīng)預(yù)處理后，LAM抗原被吸附于或偶聯(lián)于乳膠微粒。當(dāng)然，也可視為乳膠微粒被吸附或偶聯(lián)有LAM抗原。將LAM抗原吸附于或偶聯(lián)于乳膠微粒可采用吸附法或偶聯(lián)法。一種優(yōu)選的方法是將LAM抗原通過乳膠微粒表面活化的羥基而共價偶聯(lián)于乳膠微粒。免疫層析側(cè)流片利用本發(fā)明的上述經(jīng)乳膠微粒預(yù)處理的LAM，本發(fā)明還提供了免疫層析檢測試劑。一種優(yōu)選的檢測試劑是利用側(cè)流原理的免疫層析側(cè)流片或免疫層析試紙條。本發(fā)明的一種免疫層析側(cè)流片(或試紙條)的結(jié)構(gòu)如圖I所示，其中包括1樣品墊，2結(jié)合物釋放墊，3檢測線，4反應(yīng)膜，5對照線，6吸收墊，和7背襯。在本發(fā)明中，所述側(cè)流片的各組成元件(或組件)可選用本領(lǐng)域已有的材料制成。在本發(fā)明中，根據(jù)結(jié)核病人血清中產(chǎn)生抗結(jié)核桿菌特異性的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原的特異性抗體的原理，采用純化的LAM抗原固相包被，同時用乳膠顆粒標(biāo)記的LAM抗原，使用三明治雙抗原夾心的方法，捕捉樣本中的特異性抗體，從而進(jìn)行血清檢測。為了便于理解本發(fā)明，給出本發(fā)明免疫層析側(cè)流片的檢測原理。應(yīng)理解，本發(fā)明的保護(hù)范圍并不受該原理的影響或限制。如圖2所示，如果血清中含有抗結(jié)核LAM的抗體(IgG或IgM)，抗體將與乳膠標(biāo)記的LAM抗原結(jié)合，一起沿硝酸纖維膜向前流動，到達(dá)檢測線位置時，被固定在膜上的LAM抗原捕獲，形成有色的條帶，則為陽性，反之，則為陰性。無論結(jié)果如何，乳膠標(biāo)記的兔IgG將會與對照線上的羊抗兔IgG多抗結(jié)合，形成對照線，說明檢測系統(tǒng)工作正常。檢測試劑盒和檢測方法本發(fā)明還提供了可用于血清檢測結(jié)核桿菌的檢測試劑盒。所述試劑盒包括一容器以及位于容器內(nèi)的、本發(fā)明上述的帶有經(jīng)乳膠微粒預(yù)處理的LAM抗原的免疫層析側(cè)流片。 本發(fā)明提供了采用雙抗原夾心的層析方法來檢測病人血清中的結(jié)核抗體的方法。本發(fā)明的試劑盒和檢測方法解決了斑點滲濾法的繁瑣操作，結(jié)果迅速。更重要的是提高了檢測的靈敏度和特異性。降低了假陽性率。本發(fā)明的免疫層析檢測血清中結(jié)核抗體的方法和試劑(或試劑盒)，可用于結(jié)核桿菌的臨床檢測等場合。本發(fā)明的主要優(yōu)點包括
(a)與斑點法相比，更為簡便、增加快速性。(b)與常規(guī)的、目前使用較多的斑點法、或以結(jié)核蛋白抗原的雙抗原夾心法相比，靈敏度有顯著提高；(C)與常規(guī)的斑點法等方法相比，檢測特異性有顯著提高。(d)進(jìn)一步降低了假陽性率。下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，例如Sambrook等人，分子克隆實驗室手冊(New York Cold Spring HarborLaboratory Press, 1989)中所述的條件,或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)是重量百分比和重量份數(shù)。

LAM抗原的制備H37Ra菌株(該菌株的來源，ATCC 25177)培養(yǎng)物破碎后，用常規(guī)方法進(jìn)行純化，方法如下用50%乙醇提取，再用苯酚和水提取，水相凍干后用含O. 2M NaCl,O. 25%deoxycholate, ImM EDTA, O. 02% NaNjtJlOmM Tris pH 8. O 溶解,過 Sephacryl S-200 柱。獲得純化的LAM抗原。實施例2結(jié)核桿菌特異性的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原乳膠微粒的預(yù)處理在本實施例中，通過吸附法進(jìn)行預(yù)處理，方法如下2. OxlO9個表面帶活化羧基的聚苯乙烯乳膠顆粒直徑150_200nm(BangsLaboratories, Inc. , Fishers, IN. USA),用 0· 05M pH 9. 6 的碳酸鹽緩沖液洗漆兩次,IOOOOrpm離心10分鐘。用Im 10. 05M pH 9. 6的碳酸鹽緩沖液重懸，加入50mg純化的LAM抗原混合，在37°C下孵育2小時。離心后棄上清，用0. OlM pH 7. 3的磷酸鹽緩沖液洗滌兩次，加入含5%人血清白蛋白(HAS)的磷酸鹽緩沖液，在37°C下孵育2小時。以封閉非特異結(jié)合位點。離心后用含0. 5%人血清白蛋白(HAS)的磷酸鹽緩沖液洗滌，再用含0. 5%人血清白蛋白(HAS)的磷酸鹽緩沖液重懸，保存于4°C。經(jīng)多糖檢測，證實LAM抗原被吸附于乳膠微粒上。實施例3結(jié)核桿菌特異性的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原乳膠微粒的預(yù)處理在本實施例中，通過共價偶聯(lián)法進(jìn)行預(yù)處理，方法如下用O. IM的硼砂鹽緩沖液稀釋聚苯乙烯乳膠微粒(表面含羧基)到Iwt % (乳膠微粒同實施例I)。在13000rpm下離心20分鐘。棄去上清液。用0. IM pH 8. 5硼砂緩沖液重懸乳膠顆粒。逐滴加入純化的LAM抗原，總量為lmg/ml,混勻。用純水配制量是Iml的15mg/ml EDC溶液，取lul/ml加入到乳膠溶液中。在室溫下混合過夜。加入0. IM乙醇胺溶液30ul/ml封閉，室溫下旋轉(zhuǎn)混合30分鐘。在13000rpm下離心20分鐘。棄去上清液。然后加入相同體積的用含5%的人血清白蛋白0. IM pH 8. 5硼砂緩沖液重懸乳膠微粒。在室溫下混合4個小時。13000rpm下離心20分鐘。棄去上清液，再加入相同體積的含0. 5%的人血清白蛋白0. IM pH 8. 5硼砂緩沖液，保存于4°C。實施例4免疫層析檢測試劑板的制備
(I)乳膠標(biāo)記的LAM抗原玻璃纖維條的制備將實施例2或3制備的預(yù)處理的乳膠微粒的LAM抗原與含O. 5% S9 (表面活性劑Tetronic-1037，購自BASF公司)pH為7. 4的IOmM磷酸鹽緩沖溶液，混合，配制成O. 5mg/ml濃度的溶液，均勻地涂布在玻璃纖維素紙上，涂布量為50μ 1/cm2，真空干燥。(2)乳膠標(biāo)記的兔IgG玻璃纖維條的制備將實施例2或3同樣方法制備的乳膠標(biāo)記的兔IgG (購自Sigma公司)與含O. 5%S9 (表面活性劑Tetronic-1037) pH為7. 4的IOmM磷酸鹽緩沖溶液，混合，配制成O. 5mg/ml濃度的溶液，均勻地涂布在玻璃纖維素紙上，涂布量為50μ 1/cm2，真空干燥。(3)檢測線和質(zhì)控線檢測線將I)純化的LAM抗原與pH為7. 4的IOmM磷酸鹽緩沖溶液混合配制成為 濃度為O. 5mg/ml的混合溶液，噴在硝酸纖維膜上，涂布量為10 μ 1/cm2 ；質(zhì)控線(也稱為對照線)將羊抗兔IgG多抗(購自購自Sigma公司)與pH為7. 4的IOmM磷酸鹽緩沖溶液混合配制成為濃度為O. 8mg/ml混合溶液，噴在硝酸纖維膜上，涂布量為 10 μ 1/cm2 ；然后在15 35°C干燥。(4)樣品墊的制備樣品墊材質(zhì)為玻璃纖維紙或聚酯膜，用配制好的樣品墊處理液浸泡樣品墊，樣品處理液的量為lOOul/cm2，然后在37°C下晾干，樣品墊的組成為pH為7. 4的IOmM磷酸鹽緩沖溶液，含 O. 5% S9(表面活性劑 Tetronic-1037), 1% PVP,O. 2% EDTA 和 O. 5% BSA(5)測試條組裝用常規(guī)方法，將以下各組件按圖I所示組裝成檢測試劑條I.樣品墊2.結(jié)合物釋放墊包被乳膠標(biāo)記的LAM抗原和兔IgG的玻璃纖維紙3.檢測線硝酸纖維素膜上包被純化的LAM抗原4.反應(yīng)膜5.質(zhì)控線硝酸纖維素膜上包被羊抗兔IgG多抗6.吸收墊7.背襯(PVC)。實施例5試劑板檢測結(jié)果對檢測對象，用本發(fā)明方法如下進(jìn)行檢測取20ul被測血清，用O. OlM磷酸緩沖液180ul稀釋，緩慢滴三滴于檢測板的加樣孔中，等待15分鐘后判斷檢測結(jié)果。如圖2所示，如果血清中含有抗結(jié)核LAM的抗體(IgG或IgM)，抗體將與乳膠標(biāo)記的LAM抗原結(jié)合，一起沿硝酸纖維膜向前流動，到達(dá)檢測線位置時，被固定在膜上的LAM抗原捕獲，形成有色的條帶，則為陽性，反之，則為陰性。無論結(jié)果如何，乳膠標(biāo)記的兔IgG將會與對照線上的羊抗兔IgG多抗結(jié)合，形成對照線，說明檢測系統(tǒng)工作正常。此外，對于同一檢測對象的樣品，還分別用常規(guī)的斑點滲濾法和結(jié)核蛋白雙抗原夾心法進(jìn)行測試。三種方法的檢測結(jié)果匯總于下表
權(quán)利要求
1.一種結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原，其特征在于，所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原吸附于或偶聯(lián)于乳膠微粒。
2.如權(quán)利要求I所述的抗原，其特征在于，所述的LAM抗原共價偶聯(lián)于乳膠微粒。
3.如權(quán)利要求2所述的抗原，其特征在于，所述的LAM抗原通過活化羥基共價偶聯(lián)于乳膠微粒。
4.如權(quán)利要求I所述的抗原，其特征在于，所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖抗原與乳膠微粒的重量比為I : 2至I : 20。
5.—種免疫層析試劑，其特征在于，所述的試劑含有權(quán)利要求I所述的結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原。
6.如權(quán)利要求5所述的試劑，其特征在于，所述的試劑是側(cè)流片或側(cè)流試紙條。
7.如權(quán)利要求6所述的試劑，其特征在于，所述的側(cè)流片或側(cè)流試紙條包括以下組件樣品墊，結(jié)合物釋放墊，檢測線，反應(yīng)膜，對照線，吸收墊，和背村。
8.ー種試劑盒，其特征在于，包括 (a)權(quán)利要求5所述的免疫層析試劑；和 (b)使用說明書。
9.如權(quán)利要求I所述的抗原或權(quán)利要求5所述的試劑的用途，其特征在于，用于制備血清檢測結(jié)核桿菌的試劑盒。
10.ー種血清檢測結(jié)核桿菌的方法，其特征在干，包括步驟權(quán)利要求5所述的試劑或權(quán)利要求8所述的試劑盒進(jìn)行層析檢測。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種檢測結(jié)核桿菌脂阿拉伯甘露聚糖特異性抗體的方法。本發(fā)明提供了經(jīng)乳膠微粒預(yù)處理的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原、含所述預(yù)處理抗原的檢測試劑和試劑盒。本發(fā)明的試劑盒和檢測方法具有快速、高靈敏度、高特異性等優(yōu)點。
文檔編號G01N33/552GK102818889SQ20111015526
公開日2012年12月12日 申請日期2011年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月9日
發(fā)明者胡小龍, 張子羿 申請人:上海伊思柏生物科技有限公司