專利名稱：一種痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥成方制劑領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)涉及一種痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
痛經(jīng)寧膠囊由痛經(jīng)寧糖漿改劑型而來(lái)，痛經(jīng)寧糖漿來(lái)源于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十一冊(cè)(標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)WS3-B-2M4-96)。配方為當(dāng)歸(炒)160g香附(制)160g 白芍(炒)160g延胡索(炒)144g川芎(炒)96g甘草(炙)64g丹參160g川楝子 (炒)144g紅花80g，制法如下以上九味，除紅花外，其余當(dāng)歸等八味加水煎煮二次，第一次2小時(shí)后加入紅花，繼續(xù)煎煮0. 5小時(shí)，第二次1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液靜置過(guò)夜，取上清液，濃縮至相對(duì)密度為1.10 1.12(85°C)，放冷，加入2倍量的乙醇，攪勻，靜置對(duì)小時(shí)，取上清液回收乙醇至無(wú)醇味，備用；另取蔗糖300g加水煮沸，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1. 08 (850C )，與上述藥液混勻，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1. 07 1. 08 (85°C )，放冷， 濾過(guò)，濾液加入苯甲酸2. 5g，對(duì)羥基苯甲酸乙酯0. 3g，再加水至1000ml，攪勻，即得。其鑒別項(xiàng)下只有一項(xiàng)顯色反應(yīng)，無(wú)薄層色譜鑒別等專屬很強(qiáng)的鑒別試驗(yàn)及含量測(cè)定。痛經(jīng)是指婦女經(jīng)期前后及行經(jīng)期間出現(xiàn)的以腰骶、小腹疼痛及全身不適為主要特征的一類病癥。痛經(jīng)為常見(jiàn)病、多發(fā)病，重者影響正常的學(xué)習(xí)和工作。中醫(yī)認(rèn)為，痛經(jīng)主要因情志不暢或感受邪氣，引起體內(nèi)氣血不暢，侵襲婦女子宮，氣滯血瘀、陰血損傷，不通則痛。 日久不愈，甚則引致繼發(fā)性器質(zhì)病變。痛經(jīng)寧膠囊由當(dāng)歸(炒)、香附(制)、白芍(炒)、延胡索(炒)、川芎(炒)、甘草(炙)、丹參、川楝子(炒)、紅花制成，具有調(diào)經(jīng)止痛的功效，用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)前、行經(jīng)期腹痛。本方源自臨床調(diào)經(jīng)止痛有效驗(yàn)方，集調(diào)經(jīng)止痛、理氣活血、養(yǎng)血護(hù)本等綜合治法。方中當(dāng)歸活血養(yǎng)血，為歷代中醫(yī)推崇的“調(diào)經(jīng)圣藥”；香附尤善疏理氣機(jī)而止痛經(jīng)，同時(shí)有解郁暢情志的作用，有“女科主帥”美譽(yù)。兩味藥物配合，體現(xiàn)理氣活血以止痛、養(yǎng)血固根本的調(diào)經(jīng)止痛心法。 白芍?jǐn)筷庰B(yǎng)血以囊助當(dāng)歸固護(hù)婦女陰血根本，又善于柔肝緩急止痛；其他藥物中延胡索、川楝子、川芎、紅花、丹參或長(zhǎng)于活血止痛、或長(zhǎng)于行氣止痛，均為增強(qiáng)止痛作用以徹底解除經(jīng)痛的有效藥物；炙甘草調(diào)理方中諸藥協(xié)同起效，亦能緩急止痛。諸藥合用則調(diào)經(jīng)止痛力強(qiáng)， 快速緩解痛經(jīng)癥狀，又能消除痛經(jīng)病因，共奏調(diào)經(jīng)止痛之功，達(dá)到標(biāo)本兼治的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種控制痛經(jīng)寧膠囊產(chǎn)品質(zhì)量，保證用藥安全有效的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法。本發(fā)明的一種痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括如下步驟含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VID)測(cè)定；
(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1% 磷酸(體積比為15 85)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 5000 ；
(2)對(duì)照品溶液的制備取芍藥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每Iml含50μβ 的溶液，即得；
(3)供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物粉末0.25g，精密稱定，精密加入稀乙醇25ml， 稱定重量；超聲提取40分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用 0. 45Mffl的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；
(4)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ1，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。上述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中本品每粒含白芍以芍藥苷(C23H28O11) 計(jì)，不得少于1.5mg。上述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中
鑒別
a.取本品內(nèi)容物10g，加乙醚50ml，水浴回流30分鐘，棄去乙醚液，藥渣揮去乙醚，加乙醇50ml，水浴回流30分鐘，取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，用水飽和正丁醇萃取2次，每次20ml，合并正丁醇液；再用正丁醇飽和的水20ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右掖?. 5ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml 含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-15μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上， 以三氯甲燒一乙酸乙酯一甲醇一濃氨(體積比為8 :1:4 :1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
b.取本品內(nèi)容物4g，加80%乙醇40ml，超聲處理30分鐘；取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)铀?5ml溶解，用乙醚萃取3次，每次15ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)?. 5ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 5_15μ1，分別點(diǎn)于同一以1%氫氧化鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己燒一三氯甲燒一甲醇(體積比為10 4 :1)為展開(kāi)劑，預(yù)飽和20分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，置碘蒸氣中熏數(shù)分鐘后，在空氣中揮盡吸附的碘，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
c.取本品內(nèi)容物5g，加乙醚40ml，水浴回流1小時(shí)，棄去乙醚液，藥渣揮去乙醚，加甲醇40ml，水浴回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，用正丁醇萃取三次，每次 20ml，合并正丁醇液，用水洗滌3次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml 溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材粉末lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法 (中國(guó)藥典2010版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-15μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲燒一甲醇一7Κ(體積比為13 7 :2)下層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。上述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國(guó)藥典2010年版一部附錄I L)。上述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中本品的制法為當(dāng)歸(炒)800g、香附(制) 800g、白芍(炒)800g、延胡索(炒)720g、川芎(炒)480g、甘草(炙)320g、、丹參800g、川楝子 (炒)720g、紅花400 g，以上九味，除紅花外，其余當(dāng)歸等八味加水煎煮二次，第一次加12倍量水煎煮2小時(shí)后加入紅花，繼續(xù)煎煮0. 5小時(shí)，第二次加10倍量水煎煮1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液靜置過(guò)夜；取上清液，濃縮至相對(duì)密度為1. 10-1. 12 (85°C)，放冷，加入2倍量的乙醇，攪勻，靜置M小時(shí)；取上清液回收乙醇，濃縮至稠浸膏，減壓干燥，粉碎，加入適量輔料，制粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有明顯的有益效果，從以上技術(shù)方案可知經(jīng)大量多次實(shí)驗(yàn)研究，采用對(duì)主要藥味白芍的有效成份芍藥苷進(jìn)行含量測(cè)定，對(duì)白芍、延胡索和甘草進(jìn)行鑒別，達(dá)到了控制痛經(jīng)寧膠囊產(chǎn)品質(zhì)量，保證用藥安全有效。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)試驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的有益效果
“痛經(jīng)寧膠囊”按“痛經(jīng)寧糖漿”原處方，由當(dāng)歸(炒)、香附(制)、白芍(炒)、延胡索(炒)、 川芎(炒)、甘草(灸)、丹參等九味藥材組成?！巴唇?jīng)寧糖漿”(WS3-B-2M4-96)鑒別項(xiàng)下只有一項(xiàng)顯色反應(yīng)，無(wú)薄層色譜鑒別等專屬很強(qiáng)的鑒別試驗(yàn)。試驗(yàn)研究時(shí)對(duì)方中當(dāng)歸、香附等九味藥材進(jìn)行了專屬很強(qiáng)的薄層色譜鑒別試驗(yàn)，其中白芍、延胡索和甘草三味藥材陰性無(wú)干擾、系統(tǒng)重現(xiàn)性好，故將其列入正文；其他幾味由于重現(xiàn)性差或陰性干擾較大等原因，不能列入正文。結(jié)果如下
(1)當(dāng)歸、川芎的鑒別
當(dāng)歸、川芎所含成分相近，相互影響極大，難以分開(kāi)鑒別，參照《中國(guó)藥典》一部“四物合劑”，同時(shí)以阿魏酸對(duì)照品為對(duì)照，進(jìn)行鑒別。當(dāng)歸含揮發(fā)油和非揮發(fā)油成分。其中揮發(fā)油含量約占0. 4%，分為中性、酚性、酸性三種。中性揮發(fā)油主要含藁本內(nèi)酯，占揮發(fā)油總量的49%等多種成分；酚性揮發(fā)油含有香荊芥酚、苯酚、對(duì)甲苯酚等；酸性揮發(fā)油主要含鄰苯二甲酸二甲酯、壬二酸二甲酯等。非揮發(fā)性成分含阿魏酸、香莢蘭酸、新當(dāng)歸內(nèi)酯、煙酸等等化合物。川芎的化學(xué)成分研究較多，含揮發(fā)油1%;生物堿有川芎嗪、異亮氨酰纈氨酸內(nèi)酰氨、川芎哚等；酚類成分有阿魏酸、川芎酚、大黃素、咖啡酸等；內(nèi)酯類成分有藁本內(nèi)酯、新蛇床子內(nèi)酯；萜類化合物有匙葉桉油烯醇、谷留醇等成分。方法
供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物4g，加80%乙醇30ml超聲處理30分鐘，放冷，濾過(guò)， 濾液蒸至近干，殘?jiān)铀?0 ml加熱溶解，放冷，用乙酸乙酯提取3次(20ml，15ml，15ml )，合并乙酸乙酯液，用洲碳酸鈉溶液提取3次，每次15ml，合并堿液，加稀鹽酸調(diào)PH=2 3，加苯15ml洗滌，棄苯液，再用乙酸乙酯提取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，揮干，殘?jiān)蛹状?. 5ml溶解，作為供試品溶液。
對(duì)照品溶液的制備另取阿魏酸對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。陰性對(duì)照溶液的制備取缺當(dāng)歸、川芎的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。分別吸取以上供試品溶液、對(duì)照品溶液、陰性對(duì)照溶液各5 15 μ 1，點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以下列展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，結(jié)果如下
權(quán)利要求
1.一種痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括如下步驟(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%磷酸(15 85)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于5000 ；(2)對(duì)照品溶液的制備取芍藥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每Iml含50μβ 的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物粉末0.25g，精密稱定，精密加入稀乙醇25ml， 稱定重量；超聲提取40分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用 0. 45Mffl的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；(4)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ1，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。
2.如權(quán)利要求1所述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中本品每粒含白芍以芍藥苷計(jì)，不得少于1.5mg。
3.如權(quán)利要求1或2所述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中鑒別a.取本品內(nèi)容物10g，加乙醚50ml，水浴回流30分鐘，棄去乙醚液，藥渣揮去乙醚，加乙醇50ml，水浴回流30分鐘，取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，用水飽和正丁醇萃取2次，每次20ml，合并正丁醇液；再用正丁醇飽和的水20ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右掖?. 5ml溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml 含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-15μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為8 :1:4 :1三氯甲燒一乙酸乙酯一甲醇一濃氨為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b.取本品內(nèi)容物4g，加80%乙醇40ml，超聲處理30分鐘；取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)铀?5ml溶解，用乙醚萃取3次，每次15ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)?. 5ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-15μ1，分別點(diǎn)于同一以1%氫氧化鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10 4 :1正己烷一三氯甲烷一甲醇為展開(kāi)劑，預(yù)飽和20分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，置碘蒸氣中熏數(shù)分鐘后，在空氣中揮盡吸附的碘， 置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑占.c.取本品內(nèi)容物5g，加乙醚40ml，水浴回流1小時(shí)，棄去乙醚液，藥渣揮去乙醚，加甲醇40ml，水浴回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，用正丁醇萃取三次，每次 20ml，合并正丁醇液，用水洗滌3次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml 溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材粉末lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-15μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為13 7 :2三氯甲燒一甲醇一水下層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以 10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.如權(quán)利要求3所述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。
5.如權(quán)利要求4所述的痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中本品的制法為炒當(dāng)歸800g、 制香附800g、炒白芍800g、炒延胡索720g、炒川芎480g、炙甘草320g、丹參800g、炒川楝子 720g、紅花400 g，以上九味，除紅花外，其余當(dāng)歸等八味加水煎煮二次，第一次加12倍量水煎煮2小時(shí)后加入紅花，繼續(xù)煎煮0. 5小時(shí)，第二次加10倍量水煎煮1. 5小時(shí)，合并煎液， 濾過(guò)，濾液靜置過(guò)夜；取上清液，濃縮至相對(duì)密度為1. 10-1. 12 (85°C)，放冷，加入2倍量的乙醇，攪勻，靜置M小時(shí)；取上清液回收乙醇，濃縮至稠浸膏，減壓干燥，粉碎，加入適量輔料，制粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種痛經(jīng)寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，對(duì)白芍、延胡索和甘草進(jìn)行鑒別；采用高效液相色譜法，根據(jù)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)結(jié)果，白芍的有效成份芍藥苷進(jìn)行含量測(cè)定，并進(jìn)行最低限量規(guī)定，本品每粒含白芍以芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.5mg。本發(fā)明達(dá)到了控制痛經(jīng)寧膠囊產(chǎn)品質(zhì)量，保證用藥安全有效。
文檔編號(hào)G01N30/90GK102353744SQ20111016000
公開(kāi)日2012年2月15日 申請(qǐng)日期2011年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月15日
發(fā)明者孫敏, 王恩源, 龍鳳榮 申請(qǐng)人:貴州弘康藥業(yè)有限公司