專利名稱：一種固腎安胎中藥的分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥的質(zhì)量控制方法，通過本發(fā)明的實施，能夠提供一種簡單便捷的固腎安胎中藥的分析方法。
背景技術(shù)：
先兆流產(chǎn)是指有流產(chǎn)的表現(xiàn)，但經(jīng)保胎處理后，可能繼續(xù)妊娠不能至足月者，常發(fā)生在妊娠早期，有早服反應(yīng)，少量陰道流血，出血少于月經(jīng)量，伴發(fā)輕微的間歇性子宮收縮。 婦科檢查子宮未開大，羊膜囊未破裂，子宮大小與停經(jīng)月份相符，妊娠試驗陽性，一般見于黃體功能不全、子宮敏感性增強等，若陰道流血量增多或下腹部疼痛加劇，可發(fā)展為難免流產(chǎn)。妊娠前三個月子宮比較敏感，有時出現(xiàn)輕微的下腹墜痛，但這不是先兆流產(chǎn)，出現(xiàn)這種情況應(yīng)注意休息，并及時到醫(yī)院請醫(yī)生診治，保胎治療。本發(fā)明涉及的藥物固腎安胎丸是唯一經(jīng)北京大學人民醫(yī)院臨床試驗證明最安全的保胎藥、安胎藥。具有滋陰補腎，固腎安胎的功效。臨床安全有效，用于早期先兆流產(chǎn)。中國專利文獻CN101199661(公開號)在說明書給出了一種滋陰養(yǎng)腎、固腎安胎的中藥復(fù)方制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的在于提供滋陰補腎、固腎安胎中藥復(fù)方制劑的分析方法。本發(fā)明的滋陰補腎、固腎安胎中藥復(fù)方制劑的分析方法，其中所述藥物的組成為 制何首烏60-105g，續(xù)斷60-105g，地黃60-105g，桑寄生60-105g，菟絲子120_210g，白術(shù) (炒)60-105g,黃芩60-105g,鉤藤60_105g，白芍60_105g，肉蓯蓉(制)60_105g，采用以下方法分析(1)取本品成品5_20g，研細，加氯仿30ml，加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取大黃素對照品，加甲醇制成Iml含0. Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液2_15 μ 1 和對照品溶液1-5μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為15 5 1的石油醚 (30-600C )-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點。上述分析方法中，步驟(1)中本品成品的量為10g，所述步驟(3)的供試品溶液的吸取量為8 μ 1，對照品溶液的吸取量為2 μ 1。上述分析方法中，采用以下方法分析(1)取本品成品5-20g，研細，加乙醚30ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液蒸干， 殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取菟絲子對照藥材lg，加乙醚20ml，同法制成藥材溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液2_15 μ 1和對照品溶液1-5μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為5 4 1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點。上述分析方法中，步驟⑴中本品成品的量為10g，所述步驟(3)的供試品溶液的吸取量為10 μ 1，對照品溶液的吸取量為2 μ 1。上述分析方法中，采用以下方法分析(1)取本品成品5_20g，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水IOml使溶解，置已經(jīng)處理好的聚酰胺柱(80-100目，2g，內(nèi)徑1cm)上，用水IOOml洗脫，棄去水液，再用70%乙醇50毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，離心， 取上清液作為供試品溶液；(2)另取黃芩苷對照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液和對照品溶液各4μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為5 1 1的正丁醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點。上述分析方法中，采用以下方法分析(1)取本品成品2-10g，研細，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水IOml使溶解，置已經(jīng)處理好的DlOl型大孔樹脂柱(內(nèi)徑1cm，長IOcm)，用水50ml洗脫，棄去水液，再用60%乙醇50毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取芍藥苷對照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液和對照品溶液各6μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為40 5 10 0.2的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點清晰， 供試品色譜中，在對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點。通過本發(fā)明的實施，能夠更加快速、簡便和全面地鑒定本發(fā)明所涉及的固腎安胎中藥，為藥品的安全、有效和可控提供更加有效的保障。
具體實施例方式下面通過給出的各實施例和試驗例對本發(fā)明作出進一步說明，但所述實施例和試驗例并不能對本發(fā)明要求保護的范圍構(gòu)成任何限制。實施例1何首烏 75g地黃 75g 肉蓯蓉(制)75g
續(xù)斷 75g桑寄生 75g 鉤藤75g
菟絲子 150g白木(妙) 75g 黃芩75g
白芍 75g以上十味藥材，粉碎成細粉，過篩，混勻，每IOOg粉末用煉蜜110-130g制成蜜丸， 6°Co輻射滅菌，即得。實施例2
何首烏 60g地黃 60g 肉蓯蓉(制)60g
續(xù)斷 60g桑寄生 60g 鉤藤60g
菟絲子 120g白木(妙)60g 黃芩60g
白芍 60g以上十味藥材，粉碎成細粉，過篩，混勻，每IOOg粉末用煉蜜110-130g制成蜜丸， 6°Co輻射滅菌，即得。實施例3
何首烏 75g地黃 75g 肉蓯蓉(制) 75g
續(xù)斷 60g桑寄生 60g 鉤藤60&
菟絲子 150g白木(妙)60g 黃芩60g
白芍 60g以上十味藥材，粉碎成細粉，過篩，混勻，每IOOg粉末用煉蜜110-130g制成蜜丸， 6°Co輻射滅菌，即得。實施例4何首烏75g地黃 75g 肉蓯蓉(制)75g續(xù)斷 75g桑寄生75g 鉤藤 75g白木(妙)75g 黃芩 75g 白芍75g以上九味藥材，粉碎成細粉，過篩，混勻，每IOOg粉末用煉蜜110_130g制成蜜丸， 6°Co輻射滅菌，即得。實施例5何首烏75g地黃 75g 肉蓯蓉(制)75g
續(xù)斷 75g 桑寄生 75g 鉤藤75g菟絲子 I5Og 白術(shù)(炒)75g 白芍75g以上九味藥材，粉碎成細粉，過篩，混勻，每IOOg粉末用煉蜜110_130g制成蜜丸， 6°Co輻射滅菌，即得。實施例6何首烏75g 地黃75g 肉蓯蓉(制)75g續(xù)斷 75g 桑寄生 75g 鉤藤 75g菟絲子 I5Og 白術(shù)(炒)75g 黃芩 75g以上九味藥材，粉碎成細粉，過篩，混勻，每IOOg粉末用煉蜜110_130g制成蜜丸，
6°Co輻射滅菌，即得。實驗例1-大黃素薄層色譜檢測方法(1)取實施例1-6各10g，研細，加氯仿30ml，加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取大黃素對照品，加甲醇制成Iml含0. Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液8 μ 1和對照品溶液2μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為15 5 1的石油醚(30-60°C)-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，實施例1-6在對照品色譜相應(yīng)位置上，均顯相同顏色的熒光斑點。實驗例2-菟絲子薄層色譜檢測方法(1)取實施例1-6各10g，研細，加乙醚30ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取菟絲子對照藥材lg，加乙醚20ml，同法制成藥材溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液10 μ 1和對照品溶液2μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為5 4 1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，實施例1、2、3、5、6在對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點，實施例4為陰性。實驗例3-黃芩苷薄層色譜檢測方法(1)取實施例1-6各10g，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干， 殘渣加水IOml使溶解，置已經(jīng)處理好的聚酰胺柱(80-100目，2g，內(nèi)徑1cm)上，用水IOOml 洗脫，棄去水液，再用70%乙醇50毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，離心，取上清液作為供試品溶液；(2)另取黃芩苷對照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)，吸取供試品溶液和對照品溶液各4μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為5 1 1的正丁醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，實施例1、2、3、4、6在對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點，實施例5為陰性。實驗例4-芍藥苷薄層色譜檢測方法(1)取實施例1-6各4g，研細，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水IOml使溶解，置已經(jīng)處理好的DlOl型大孔樹脂柱(內(nèi)徑1cm，長IOcm)，用水50ml洗脫，棄去水液，再用60%乙醇50毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取芍藥苷對照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法，吸取供試品溶液和對照品溶液各6 μ 1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為40 5 10 0.2的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點清晰，供試品色譜中，實施例1-5在對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點，實施例6為陰性。實驗例5-高效液相檢測法(1)對照品溶液制備精密稱取2，3，5，4’ -四羥基二苯乙烯-2_0_β -D-葡萄糖苷對照品5mg，置25ml量瓶中，加30%甲醇適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，精密稱取^il, 置25ml量瓶中，用30%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每ml含2，3，5，4’ -四羥基二苯乙烯-2-0- β -D-葡萄糖苷16 μ g)。(2)供試品溶液制備取重量差異項下的實施例1-6，研細，各取0. 4g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用 60%乙醇補足損失重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液15ml，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取4次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，低溫蒸干，殘渣加甲醇適量使溶解，定量轉(zhuǎn)移至IOml量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)，濾過，取續(xù)濾液，即得。(3)測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。實施例1-6含何首烏以2，3，5，4’-四羥基二苯乙烯-2_0_ β -D-葡萄糖苷計，均大于 0. 45mg。分析方法對比
權(quán)利要求
1.一種固腎安胎中藥的分析方法，其中所述藥物的組成為制何首烏60-105g，續(xù)斷 60-105g，地黃 60-105g，桑寄生 60-105g，菟絲子 120_210g，白術(shù)(炒)60_105g，黃芩 60-105g，鉤藤60-105g，白芍60_105g，肉蓯蓉(制)60_105g，其特征在于采用以下方法分析(1)取本品成品5-20g，研細，加氯仿30ml，加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取大黃素對照品，加甲醇制成Iml含0.Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法，吸取供試品溶液2-15μ 1和對照品溶液1-5 μ 1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為15 5 1的石油醚(30-60°C )-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在對照品色譜相應(yīng)位置上， 顯相同顏色的熒光斑點。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于所述步驟(1)中本品成品的量為10g， 所述步驟(3)的供試品溶液的吸取量為8μ 1，對照品溶液的吸取量為2μ 1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分析方法，其特征在于采用以下方法分析(1)取本品成品5-20g，研細，加乙醚30ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取菟絲子對照藥材lg，加乙醚20ml，同法制成藥材溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法，吸取供試品溶液2-15μ 1和對照品溶液1-5 μ 1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為5 4 1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的分析方法，其特征在于所述步驟(1)中本品成品的量為10g， 所述步驟(3)的供試品溶液的吸取量為10μ 1，對照品溶液的吸取量為2μ 1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分析方法，其特征在于采用以下方法分析(1)取本品成品5-20g，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水IOml使溶解，置已經(jīng)處理好的聚酰胺柱(80-100目，2g，內(nèi)徑1cm)上，用水IOOml洗脫， 棄去水液，再用70%乙醇50毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，離心，取上清液作為供試品溶液；(2)另取黃芩苷對照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法，吸取供試品溶液和對照品溶液各4μ1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為5 1 1的正丁醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分析方法，其特征在于采用以下方法分析(1)取本品成品2-10g，研細，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水 IOml使溶解，置已經(jīng)處理好的DlOl型大孔樹脂柱(內(nèi)徑1cm，長IOcm)，用水50ml洗脫，棄去水液，再用60%乙醇50毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)另取芍藥苷對照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；(3)照薄層色譜法，吸取供試品溶液和對照品溶液各6μ 1，分別點于同一硅膠薄層板上，以比例為40 5 10 0.2的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點清晰，供試品色譜中，在對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是本發(fā)明涉及一種固腎安胎中藥的分析方法。本發(fā)明中所述固腎安胎中藥的組成為制何首烏60-105g，續(xù)斷60-105g，地黃60-105g，桑寄生60-105g，菟絲子120-210g，白術(shù)(炒)60-105g，黃芩60-105g，鉤藤60-105g，白芍60-105g，肉蓯蓉(制)60-105g。本發(fā)明通過采用藥品成品與對照品以及對照藥材，進行平行的薄層色譜的分析比對，可以方便快捷地鑒定藥物，為基層的藥物的使用提供了方便和便捷的方法。
文檔編號G01N30/90GK102323372SQ20111024355
公開日2012年1月18日 申請日期2011年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月24日
發(fā)明者沈慶利 申請人:沈慶利