專利名稱：血栓心脈寧片有效成分的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域，具體涉及一種血栓心脈寧片的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
中藥成分復(fù)雜，特別是中藥復(fù)方往往含多類、多種成分，構(gòu)成了一個(gè)非常復(fù)雜的系統(tǒng)。目前，新的有效部位中藥制劑和現(xiàn)代復(fù)方中藥制劑的研發(fā)不斷增多，新的工藝及多種不同提取方式并用于藥品的研究及生產(chǎn)。隨著現(xiàn)代分析測(cè)試技術(shù)、設(shè)備儀器的迅猛發(fā)展，中藥的含量測(cè)定、色譜鑒別成為檢測(cè)的重要手段。但目前一般只建立某一指標(biāo)化學(xué)成分的含量測(cè)定或鑒別，針對(duì)上述多種新工藝同時(shí)應(yīng)用的情況，僅建立某單一成分的含量測(cè)定或鑒別在很大程度上帶有較大的片面性。血栓心脈寧片具有益氣活血，開(kāi)竅止痛功能，用于氣虛血瘀所致的中風(fēng)、胸痹，癥見(jiàn)頭暈?zāi)垦?、半身不遂、胸悶心痛、心悸氣短；缺血性中風(fēng)恢復(fù)期、冠心病心絞痛見(jiàn)上述癥候
者ο血栓心脈寧片為薄膜衣片，除去薄膜衣后顯棕色；氣微香，味微苦。其處方是川芎500g，丹參500g，槐花250g，水蛭125g，毛冬青250g，人工麝香 1. 25g，人工牛黃12. 5g，人參莖葉皂苷25g，冰片2. 5g，蟾酥1. 25g ；制法以上十味，取人工麝香、冰片、人工牛黃、人參莖葉總皂苷、蟾酥粉碎成細(xì)粉； 丹參、毛冬青用80%乙醇回流提取2次，每次1. 5小時(shí)，濾過(guò)，合并鋁濾液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1. 28 1. 30 (600C )的稠膏，藥渣備用。川芎提取揮發(fā)油，收集揮發(fā)油備用，蒸餾后水溶液另器收集，藥渣備用。水蛭與丹參、毛冬青醇提后的藥渣合并，加水煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，濾液放置，藥渣與上述川芎藥渣合并，加水煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，濾液與上述各煎液合并， 濃縮至相對(duì)密度為1. 28 1. 30 (600C )的稠膏，與丹參、毛冬青醇提取膏混合，于60 70°C 干燥，粉碎成細(xì)粉；取槐花加適量水，用飽和氫氧化鈣水溶液調(diào)節(jié)PH值至8 9，加熱至微沸，保溫30分鐘，趁熱濾過(guò)，藥渣如上法再提取2次，合并濾液，60 70°C攪拌加入鹽酸，調(diào)節(jié)PH值至4 5，靜置1 2小時(shí)，抽濾上清液，沉淀用適量水洗3 4次，60°C減壓干燥， 粉碎成細(xì)粉，與上述各細(xì)粉混勻，制粒，干燥，加入適量滑石粉，硬脂酸鎂，羧甲淀粉鈉，噴加川彎揮發(fā)油，混勻，壓制成1000片，包薄膜衣，即得。每片重0.40g; 口服。一次2片，一日3 次。方中以辛溫、入肝膽經(jīng)，行氣開(kāi)郁，祛風(fēng)燥濕，活血止痛的川芎及苦微溫，入心肝經(jīng)，活血祛瘀，安神寧心之痛，養(yǎng)血的丹參共為君藥。臣以毛冬青、水蛭、槐花、人工麝香，活血化瘀，開(kāi)竅醒神、通絡(luò)止痛。佐以冰片、人工牛黃、人參莖葉皂苷三藥佐君臣活血化瘀，開(kāi)竅醒神，通絡(luò)止痛，清心肝堅(jiān)腎水，治標(biāo)為主，兼顧本虛及郁化熱之勢(shì)。使以蟾酥，引藥直達(dá)病所，強(qiáng)身止痛，通行經(jīng)絡(luò)。血栓心脈寧片原來(lái)檢測(cè)方法中對(duì)臣藥的鑒別及含量測(cè)定方面僅有對(duì)槐花的鑒別及含量測(cè)定，但同為方中臣藥的人工麝香并沒(méi)有鑒別方法，而臣藥是輔助君藥加強(qiáng)治療主病和主證的藥物，且因人工麝香價(jià)格昂貴，如沒(méi)有相應(yīng)的檢測(cè)手段容易造成不法企業(yè)不填或少填人工麝香，使得僅對(duì)槐花的鑒別及含量測(cè)定在很大程度上帶有較大的片面性，不能全面的反映血栓心脈寧片重要成份的含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種血栓心脈寧片有效成分的檢測(cè)方法，以解決目前檢測(cè)方法中存在的對(duì)臣藥檢測(cè)方法不全面的問(wèn)題。本發(fā)明采取的技術(shù)方案是，包括如下鑒別方法和含量測(cè)定方法(一)鑒別方法槐花的薄層色譜鑒別取本品6片，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水溶液備用，取該備用水溶液，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，取Iml，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取槐花對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取蘆丁對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水8 1 1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置氨蒸氣中熏30分鐘；人工麝香的氣相色譜鑒別取本品20片，研細(xì)，加乙醚40ml冷浸1小時(shí)，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；取麝香酮對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每Iml含0. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照氣相色譜法試驗(yàn)，DB-FFAP毛細(xì)管柱柱長(zhǎng)為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5 μ m，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至250°C，保持10分鐘；分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測(cè)定；記錄供試品色譜中與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相同的色譜峰；(二)含量測(cè)定方法槐花色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-1%乙酸溶液7 14 79為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為257nm，理論板數(shù)按蘆丁峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000 ；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品20片，精密稱定，研細(xì)，取約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率50kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)是規(guī)范了血栓心脈寧片的檢測(cè)方法，通過(guò)建立對(duì)人工麝香的鑒別，并配合原有的槐花的鑒別及含量測(cè)定，能更全面的檢測(cè)臣藥的成分和其配伍，了解其含量和穩(wěn)定性，也有助于說(shuō)明藥物的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式血栓心脈寧片由吉林華康藥業(yè)股份有限公司按背景技術(shù)中處方和工藝生產(chǎn)提供。包括如下鑒別方法和含量測(cè)定方法(一 )鑒別方法取本品6片，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml 溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水溶液備用，取該備用水溶液，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液， 取1ml，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取槐花對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取蘆丁對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B,吸取上述三種溶液各4 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水8 1 1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置氨蒸氣中熏30分鐘；人工麝香的氣相色譜鑒別取本品20片，研細(xì)，加乙醚40ml冷浸1小時(shí)，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇^iil
使溶解，作為供試品溶液；取麝香酮對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每Iml含0. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液； 照氣相色譜法試驗(yàn)、中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI E，DB-FFAP毛細(xì)管柱柱長(zhǎng)為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5 μ m，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至250°C，保持10分鐘；分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各 Iy 1，注入氣相色譜儀，測(cè)定；記錄供試品色譜中與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相同的色譜峰。( 二)含量測(cè)定方法槐花照高效液相色譜法中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-1%乙酸溶液7 14 79為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為257nm，理論板數(shù)按蘆丁峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000 ；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品20片，精密稱定，研細(xì)，取約0. 3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率50kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每片含槐花以無(wú)水蘆丁(C27H3tlO16)計(jì)，不少于12. Omgo試驗(yàn)例采用氣相色譜法鑒別人工麝香中的麝香酮。Agilent 7890A氣相色譜儀，DB-FFAP毛細(xì)管柱柱長(zhǎng)為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5 μ m，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至250°C，保持10分鐘，F(xiàn)ID檢測(cè)器；按本發(fā)明方法制備供試品溶液和麝香酮對(duì)照品溶液，同法制備不含人工麝香的陰性對(duì)照溶液，5批次樣品供試品色譜中，均呈現(xiàn)與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相同的色譜峰，陰性無(wú)干擾。
權(quán)利要求
1. 一種血栓心脈寧片有效成分的檢測(cè)方法，包括如下槐花鑒別方法和含量測(cè)定方法 槐花鑒別方法取本品6片，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解， 用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水溶液備用，取該備用水溶液，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，取lml，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取槐花對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取蘆丁對(duì)照品，加甲醇制成每 Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水8 :1 :1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置氨蒸氣中熏30分鐘；槐花含量測(cè)定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-1% 乙酸溶液7 14 79為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為257nm，理論板數(shù)按蘆丁峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在120°C減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品20片，精密稱定，研細(xì)，取約0. 3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率50kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；其特征在于還包括人工麝香的氣相色譜鑒別取本品20片，研細(xì)，加乙醚40ml冷浸1小時(shí)，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；取麝香酮對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每Iml含0. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照氣相色譜法試驗(yàn)，DB-FFAP毛細(xì)管柱柱長(zhǎng)為30m，內(nèi)徑為0. 32mm，膜厚度為0. 5Mm，柱溫為程序升溫起始溫度為200°C，保持10分鐘，以每分鐘20°C的速率升溫至 250°C，保持10分鐘；分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各 μ ，注入氣相色譜儀， 測(cè)定；記錄供試品色譜中與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相同的色譜峰。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種血栓心脈寧片有效成分的檢測(cè)方法，屬于中藥的檢測(cè)領(lǐng)域。通過(guò)建立對(duì)人工麝香的鑒別，并配合原有的槐花的鑒別及含量測(cè)定，規(guī)范了血栓心脈寧片的檢測(cè)方法，能更全面的檢測(cè)臣藥的成分和其配伍，了解其含量和穩(wěn)定性，也有助于說(shuō)明藥物的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)G01N30/90GK102507843SQ20111035741
公開(kāi)日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月13日
發(fā)明者劉傳貴, 劉艷秋, 洪梅, 金立群, 閆智力 申請(qǐng)人:吉林華康藥業(yè)股份有限公司