專利名稱：養(yǎng)殖或屠宰環(huán)境中6種擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及牛、羊、豬、雞、魚(yú)和蝦養(yǎng)殖和屠宰環(huán)境中甲氰菊酯，λ -氯氟氰菊酯，氟氯氰菊酯，λ -氯氰菊酯，氟胺氰菊酯，溴氰菊酯等6種擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥脂溶性高、水溶性很差、在環(huán)境中殘留期較長(zhǎng)、代謝速度很慢。 毒性特點(diǎn)主要為①毒性強(qiáng)；②負(fù)溫度依賴性；③選擇毒性；④其它靶標(biāo)位，各種受體、通道和酶均可能成為擬除蟲(chóng)菊酯的作用靶標(biāo)。擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥對(duì)人或哺乳動(dòng)物毒性低或有中等毒性，但對(duì)蜜蜂和魚(yú)則是高毒的，然而接觸該類藥物的人群會(huì)有慢性毒性表現(xiàn)頭痛、眩暈、惡心、皮膚瘙癢等。有報(bào)道稱，長(zhǎng)期接觸該類藥物會(huì)引起淋巴結(jié)和脾臟損傷，有致癌變的危險(xiǎn)。原因在于擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥可以影響人體內(nèi)的鈉離子通道，進(jìn)而引起一系列神經(jīng)毒性癥狀，例如抽搐、戰(zhàn)栗、共濟(jì)失調(diào)、麻痹等。隨著擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的大量濫用和過(guò)度使用，導(dǎo)致土壤和環(huán)境水的污染。而目前擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)對(duì)象主要是針對(duì)蔬菜、水果或動(dòng)物源性的食品等，而針對(duì)土壤和環(huán)境水中擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)方法仍然缺失。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供用于牛、羊、豬、雞、魚(yú)和蝦屠宰和養(yǎng)殖環(huán)境的土壤和水體中甲氰菊酯， λ -氯氟氰菊酯，氟氯氰菊酯，λ -氯氰菊酯，氟胺氰菊酯，溴氰菊酯6種擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的免疫親和柱凈化-氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法，以治理環(huán)境污染，提升我國(guó)環(huán)境質(zhì)量。本發(fā)明方法包括以下步驟(1) 土壤樣品中加入石油醚-乙醚超聲振蕩提取，取濾液揮干后用甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(PH ^ 7. 8)溶解，準(zhǔn)備過(guò)免疫親和柱凈化；(2)環(huán)境水樣品中直接使用磷酸鹽緩沖溶液(pH ^ 7. 8)稀釋，準(zhǔn)備過(guò)免疫親和柱凈化；(3)濾液加入免疫親和萃取柱，NaCl-PBS-20%甲醇溶液淋洗，甲醇溶液洗脫，正己
烷定容。(4)將定容樣品溶液用氣相-質(zhì)譜進(jìn)行分析測(cè)試，測(cè)得樣品的色譜峰；(5)將測(cè)得的色譜峰與各已知藥物的標(biāo)準(zhǔn)色譜峰對(duì)照，確定所檢出藥物的名稱。上述步驟C3)所說(shuō)固相萃取柱為自制的擬除蟲(chóng)菊酯類的免疫親和萃取柱。本發(fā)明采用空白土壤樣本用石油醚-乙醚提取，磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解，自制備免疫親和柱凈化；環(huán)境水用磷酸鹽緩沖液(PBQ調(diào)節(jié)pH值后利用免疫親和柱凈化。該方法專一性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)低限低，土壤和環(huán)境水檢測(cè)低限分別可達(dá)到20μ g/kg和5μ g/L。 該方法為治理環(huán)境污染，制定相關(guān)行業(yè)及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)提供了參考。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例土壤和環(huán)境水樣品中擬除蟲(chóng)菊酯類殘留檢測(cè)
稱取2g空白土壤樣本，置于30mL離心管中，靜置Ih后，進(jìn)行提取。加入石油醚-乙 Bi (1 1，v/v)6mL。渦旋Imin后進(jìn)行超聲水浴提取lOmin。離心G000rpm，6min)收集上清液，重復(fù)提取一次，合并上清液，在45°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至至干，采用5mL甲醇復(fù)溶，移出溶液，離心后用20mL磷酸鹽緩沖溶液(PBQ稀釋，等待IAC凈化。準(zhǔn)確量取水樣本IOOmL,過(guò)濾后，用磷酸鹽緩沖溶液(PBQ稀釋1倍，等待IAC凈化。將IAC柱用20mL PBS平衡后，上樣，在重力作用下流出；然后進(jìn)行淋洗，淋洗溶液是含有0. 2M的NaCl-PBS-20%甲醇溶液，淋洗體積為20mL ；最后用4mL甲醇溶液洗脫，并收集洗脫液；使用20mL水和15mL PBS溶液對(duì)IAC柱再生，最后將柱保存在4°C于0. 01 %疊氮鈉-PBS溶液中。將收集的洗脫液在氮?dú)饬飨麓蹈?，溶解于ImL環(huán)己烷溶液中，用GC-MS進(jìn)行檢測(cè)。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定典型條件Varian GC 3800-Varian Saturn 2000，毛細(xì)管色譜柱VF-5mscolumn(30mX0.載氣高純氦，> 99. 999 %，流速為ImIv升溫程序和進(jìn)樣口溫度同1. 3. 1.離子阱溫度是220°C傳輸線溫度260°C岐盒溫度45°C倍增器電壓1750v燈絲電流50mA掃描方式MS/MS表1、6種菊酯類藥物的質(zhì)譜參數(shù)
權(quán)利要求
1.養(yǎng)殖或屠宰環(huán)境中6種擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的測(cè)定方法，其特征是包括以下步驟(1)土壤樣品中加入石油醚-乙醚超聲振蕩提取，取濾液揮干后用PH 7.8甲醇-磷酸鹽緩沖溶液溶解或環(huán)境水樣品直接使用pH 7. 8磷酸鹽緩沖溶液稀釋，得樣品提取液；(2)所述樣品提取液加入免疫親和萃取柱，NaCl-PBS-20%甲醇溶液淋洗，甲醇溶液洗脫，正己烷定容，；(3)將定容樣品溶液用氣相-質(zhì)譜進(jìn)行分析測(cè)試，測(cè)得樣品的色譜峰；(4)將測(cè)得的色譜峰與各已知藥物的標(biāo)準(zhǔn)色譜峰對(duì)照，確定所檢出藥物名稱。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征是所說(shuō)固相萃取柱為自制的擬除蟲(chóng)菊酯類的免疫親和萃取柱。
全文摘要
本發(fā)明涉及養(yǎng)殖或屠宰環(huán)境中6種擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的測(cè)定方法，具體是牛、羊、豬、雞、魚(yú)或蝦的屠宰或養(yǎng)殖環(huán)境的土壤或環(huán)境水中甲氰菊酯，λ-氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、λ-氯氰菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯六種擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的免疫親和柱凈化-氣質(zhì)聯(lián)用的快速鑒定和確證檢測(cè)方法?？瞻淄寥罉颖纠檬兔?乙醚提取，磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解，自制備免疫親和柱凈化；環(huán)境水用磷酸鹽緩沖液(PBS)調(diào)節(jié)pH值后利用免疫親和柱凈化。該方法專一性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)低限低，土壤和環(huán)境水檢測(cè)低限分別可達(dá)到20μg/kg和5μg/L。該方法為治理環(huán)境污染，制定相關(guān)行業(yè)及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)提供了參考。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102507788SQ20111036374
公開(kāi)日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月15日
發(fā)明者丁濤, 張睿, 蔣原, 薛峰 申請(qǐng)人:江蘇出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物與食品檢測(cè)中心