專利名稱：一種檢測(cè)動(dòng)物肌肉組織中替米考星的前處理試劑盒及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品安全分析技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種檢測(cè)動(dòng)物肌肉組織中替米考星(tilmicisin，TLM)的前處理試劑盒，同時(shí)還涉及一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星殘留量檢測(cè)的方法，本試劑盒及檢測(cè)方法適用于鮮活動(dòng)物(魚、蝦、豬、雞)肌肉組織中替米考星殘留量檢測(cè)的樣品前處理及檢測(cè)。
背景技術(shù)：
替米考星(Tilmicosin)是80年代由英國Elanco動(dòng)物保健品公司研發(fā)成功的，主要用于牛、奶牛、山羊、綿羊、豬、雞、魚等動(dòng)物由敏感菌引起的感染性疾病。替米考星是一種半合成的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，是泰樂菌素(Tylosin)的衍生物，具有同泰樂菌素相似的抗菌譜，對(duì)革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌、霉形體、螺旋體等均有抑制作用。其主要通過抑制細(xì)菌的蛋白合成起到殺菌的作用。在畜禽上的研究表明，其對(duì)胸膜肺炎放線桿菌、溶血性巴氏桿菌、多殺性巴氏桿菌及畜禽霉形體具有比泰樂菌素更強(qiáng)的活性。隨著人們對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類藥物研究的深入，替米考星等大環(huán)內(nèi)酯類藥物對(duì)人類的危害也逐漸被人們所認(rèn)識(shí)， 如大環(huán)內(nèi)酯可產(chǎn)生交叉耐藥性，高殘留會(huì)對(duì)人類造成至敏性和毒性反應(yīng)，尤其是敏感個(gè)體等。歐盟和我國均對(duì)動(dòng)物性食品中替米考星殘留量有嚴(yán)格的限止。為了保障我國人民的健康和避免由于動(dòng)物性食品中替米考星殘留而引起的貿(mào)易壁壘，加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物性食品中替米考星殘留的檢測(cè)是非常必要的。目前，檢測(cè)動(dòng)物肌肉組織中替米考星的前處理方法，提取過程復(fù)雜，消耗有機(jī)溶劑量大，凈化過程多采用固相萃取小柱(SPE柱)，不僅增加了工作量，而且增加了檢測(cè)的成本。在對(duì)前處理好的樣品進(jìn)行替米考星檢測(cè)所用的流動(dòng)相(液相)組分復(fù)雜，且配制過程繁瑣、耗時(shí)，所用添加劑對(duì)色譜柱有較大的損害。動(dòng)物肌肉組織中替米考星用傳統(tǒng)的前處理及檢測(cè)方法費(fèi)時(shí)、費(fèi)錢且操作過程復(fù)雜不易掌握。為提高對(duì)動(dòng)物肌肉組織中替米考星殘留檢測(cè)的效率，節(jié)約檢測(cè)成本，研制動(dòng)物肌肉組織中TLM檢測(cè)的前處理試劑盒及檢測(cè)方法具有非常重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。目前，國內(nèi)外均未見有動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)前處理試劑盒的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是在于提供了一種檢測(cè)鮮活動(dòng)物肌肉組織中替米考星(tilmicisin， TLM)的樣品前處理試劑盒，樣品前處理所用試劑價(jià)格便宜，容易獲得，且用量小，樣品處理無需用固相萃取小柱進(jìn)行樣品凈化，從而大大節(jié)約了檢測(cè)成本；該試劑盒操作方便快捷，適于大量鮮活動(dòng)物肌肉樣品的處理，從而大大提高了樣品前處理的效率；該試劑盒將所需試劑整合于一個(gè)前處理試劑盒內(nèi)便于攜帶和儲(chǔ)存。本發(fā)明的另一個(gè)目的是在于提供了一種經(jīng)本前處理試劑盒處理后的樣品中替米考星殘留量的檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法流動(dòng)相配制簡(jiǎn)單，用量少，且所用試劑對(duì)色譜柱無損害；該檢測(cè)方法所用時(shí)間短，且在較短的時(shí)間內(nèi)能將替米考星的2種同分異構(gòu)體(順式異構(gòu)體和反式異構(gòu)體)分離，從而大大節(jié)約了檢測(cè)時(shí)間和檢測(cè)成本。從使用該前處理試劑盒和檢測(cè)方法的效果來看，樣品處理干凈，在色譜圖上無雜質(zhì)峰干擾且能將替米考星的2種同分異構(gòu)體較好分離。該方法是一種能夠快速、準(zhǔn)確、靈敏地檢測(cè)利用本前處理試劑盒處理的樣品的超高效液相色譜法(UPLC)。為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)的前處理試劑盒，本發(fā)明前處理試劑盒主要由盒體、試劑管A、試劑袋B、試劑管C、試劑瓶D、試劑瓶E、試劑袋F。盒體內(nèi)分為a、b、c、d 4 個(gè)區(qū)，a和b區(qū)為適合試劑管A和試劑管C放置的孔區(qū)，c區(qū)放試劑袋B和試劑袋F的凹槽， d區(qū)放試劑瓶D和試劑瓶E的凹槽。優(yōu)選的，所述的試劑管A中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試齊LU優(yōu)選的，所述的試劑袋B中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、 磷酸二氫銨、硫酸鈉或硫酸鎂中任一種試劑。優(yōu)選的，所述試劑管C中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。優(yōu)選的，所述試劑瓶D中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液。優(yōu)選的，所述試劑瓶E中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。優(yōu)選的，所述試劑試劑袋F中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑。試劑D的溶液的配制方法取試劑D 2_20g，溶于200mL的蒸餾水中溶解配制成濃度為-10%的試劑D的溶液。試劑F的溶液的配制方法為取試劑F 0.6_3g，溶于500mL蒸餾水中，配制成濃度為10mM-50mM的試劑F的溶液。優(yōu)選的液體試劑E和試劑F的溶液的體積比E F=I 9-1 1。一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)前處理試劑盒的使用方法，其步驟是A、取動(dòng)物肌肉組織2. Og于50mL塑料離心管中，加入試劑A 5_10mL，振蕩30s ；所述試劑A可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。B、再加入試劑試劑B 2-10g，振蕩30s，5000r/min離心5min，將上清液轉(zhuǎn)移至雞心瓶中，45°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；所述試劑B可以是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、硫酸鈉或硫酸鎂中任一種試劑。C、向雞心瓶中加入試劑C 2-10mL，將其轉(zhuǎn)移至15mL離心管中；所述試劑C可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。D、再向其中加入試劑溶液D l_5mL，振蕩30s，5000r/min離心5min，將上層液體取出置于15mL離心管中，置45°C氮吹儀吹至干；所述試劑溶液D可以是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液。E、剩余物用ImL液體試劑E和試劑F的溶液的混合溶液溶解，再加入^iiL正己烷， 漩渦振蕩30s，5000r/min離心5min，去除上層液正己烷層，下層液體經(jīng)0. 22 μ m濾頭過濾，UPLC測(cè)定。所述的試劑E可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑； 所述的試劑F可以是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑。結(jié)果表明經(jīng)本試劑盒處理后的樣品經(jīng)本檢測(cè)方法檢測(cè)，色譜基線平穩(wěn)，在目標(biāo)物附近無雜質(zhì)峰干擾，并能將替米考星的2種同分異構(gòu)體分開。發(fā)明提供了一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星前處理方法，該方法包括可以提取動(dòng)物肌肉組織中替米考星的液體試劑A，用于動(dòng)物肌肉組織樣品凈化的試劑B，用于溶解濃縮樣品殘?jiān)囊后w試劑C，用于凈化溶解殘?jiān)鼧悠返脑噭┤芤篋，用于溶解經(jīng)凈化處理的樣品濃縮物的液體試劑E和試劑F的溶液的混合物。一種用于檢測(cè)經(jīng)本前處理試劑盒處理的動(dòng)物肌肉組織樣品的方法，本檢測(cè)方法包括流動(dòng)相組成液體試劑E和試劑F的溶液；色譜條件及梯度洗脫程序。優(yōu)選的液體試劑E是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。優(yōu)選的，所述試劑F是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑。試劑F的溶液的配制方法為試劑F 0.6_3g，溶于 500mL蒸餾水中，配制成濃度為10mM-50mM的試劑F的溶液。優(yōu)選的液體試劑E和試劑F的溶液的體積比E F = 1 9-1 1。優(yōu)化的色譜條件及梯度洗脫程序是色譜柱ACQUITY UPLC BEH C18 (2. 1 X 100mm, 1. 7 μ m)反相色譜柱；柱溫:30-40 °C ；流速 0. 1-0. 4mL/min ；進(jìn)樣量 2. 0-7. OyL0梯度洗脫條件:A相為液體試劑E，B相為試劑F的溶液，0 1. 5min, 10% E ； 1. 5 6min，10 % E 30 % E，6_8min 30%E 10%E，8 12min，10 % E，檢測(cè)波長 287nm。本發(fā)明還提供了一種測(cè)定動(dòng)物性食品肌肉組織的超高效液相色譜法，該方法包括流動(dòng)相組成E和F ；梯度洗脫程序等。優(yōu)選的，所述的液體試劑E是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試齊LU優(yōu)選的，所述的試劑F的溶液是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液。試劑F的溶液的配制方法為取一定量的試劑F，溶于適量的蒸餾水中，配制成濃度為10mM-50mM的試劑F的溶液，液體試劑 E和試劑F的溶液；兩者的體積比E F=I 9-1 1。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果(1)操作過程簡(jiǎn)單、快速、所用試劑量少。(2)無需用固相萃取小柱進(jìn)行樣品凈化，節(jié)約檢測(cè)成本，節(jié)約樣品前處理時(shí)間。(3)優(yōu)選的試劑處理鮮活動(dòng)物肌肉組織效果好，價(jià)格低廉。(4)流動(dòng)相配制簡(jiǎn)單，所用試劑對(duì)色譜柱無損害。(5)檢測(cè)方法消耗試劑少，分析時(shí)間短，目標(biāo)物附件無干擾峰，且能將替米考星2 種同分異構(gòu)體分離開。


圖1前處理試劑盒的直觀示意圖其中盒體1、A試劑管A2、B試劑袋B3、C試劑管C4、D試劑瓶D5、試劑瓶Eedl1^lJ 袋F7。試劑盒可常溫(15-35°C )儲(chǔ)存，有效期6個(gè)月。
圖2為一種經(jīng)本試劑盒處理后的樣品，經(jīng)本檢測(cè)方法檢測(cè)后得出的動(dòng)物肌肉組織樣品中中替米考星的色譜圖。 經(jīng)本試劑盒處理后的樣品，經(jīng)本檢測(cè)方法檢測(cè)后得出的動(dòng)物肌肉組織樣品中中替米考星的色譜圖，基線平穩(wěn)，目標(biāo)物附近無干擾峰，2種替米考星同分異構(gòu)體能較好分離。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明。一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)的前處理試劑盒，本發(fā)明前處理試劑盒主要由盒體1、試劑管A2、試劑袋B3、試劑管C4、試劑瓶D5、試劑瓶E6、試劑袋F7。盒體內(nèi)分為a、 b、c、d 4個(gè)區(qū)，a和b區(qū)為適合試劑管A2和試劑管C4放置的孔區(qū)，c區(qū)放試劑袋B3和試劑袋F7的凹槽，d區(qū)放試劑瓶D5和試劑瓶E6的凹槽。優(yōu)選的，所述的試劑管A2中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。所述試劑A可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑，加入試劑A的量為5-10mL。優(yōu)選的，所述的試劑袋B3中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、 磷酸二氫銨、硫酸鈉或硫酸鎂中任一種試劑。所述試劑B可以是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、 磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、硫酸鈉或硫酸鎂中任一種試劑，加入試劑B的量為 2-10g。優(yōu)選的，所述試劑管C4中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。所述試劑C可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑，加入試劑 C2-10mL。優(yōu)選的，所述試劑瓶D5中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液。試劑D的溶液的配制方法取試劑D 2_20g，溶于200mL的蒸餾水中溶解配制成濃度為-10%的試劑D的溶液。優(yōu)選的，所述試劑瓶E6中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試齊LU優(yōu)選的，所述試劑袋F7中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、 磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑。試劑F的溶液的配制方法為取試劑F 0. 6-3g，溶于500mL蒸餾水中，配制成濃度為10mM-50mM的試劑F的溶液，液體試劑E和試劑F的溶液兩者的體積比E F=I 9-1 1。實(shí)施例2:一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)的前處理試劑盒的樣品處理方法，其步驟是A、取動(dòng)物肌肉組織2. Og于50mL塑料離心管中，加入試劑A 5_10mL，振蕩30s ；所述試劑A可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。B、再加入試劑B 2-10g，振蕩30s，5000r/min離心5min，將上清液轉(zhuǎn)移至雞心瓶中，45°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；所述試劑B可以是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、硫酸鈉或硫酸鎂中任一種試劑。C、向雞心瓶中加入試劑C 2-10mL，將其轉(zhuǎn)移至15mL離心管中；所述試劑C可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。D、再向其中加入試劑D溶液l-5mL，振蕩30s，5000r/min離心5min，將上層液體取出置于15mL離心管中，置45°C氮吹儀吹至干；所述試劑D溶液可以是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液。E、剩余物用ImL液體試劑E和試劑F的溶液的混合溶液溶解，再2mL正己烷，漩渦振蕩30s，5000r/min離心5min，去除上層液正己烷層，下層液體經(jīng)0. 22 μ m濾頭過濾，UPLC 測(cè)定。所述試劑E可以是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑；所述試劑F的溶液可以是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液。結(jié)果表明，經(jīng)本試劑盒處理后的樣品經(jīng)本檢測(cè)方法檢測(cè)， 色譜基線平穩(wěn)，在目標(biāo)物附近無雜質(zhì)峰干擾，并能將替米考星的2種同分異構(gòu)體分開。一種用于檢測(cè)經(jīng)本前處理試劑盒處理的動(dòng)物肌肉組織樣品的方法，本檢測(cè)方法包括流動(dòng)相組成E和F ；色譜條件及梯度洗脫程序。優(yōu)選的試劑E是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑。優(yōu)選的，所述試劑試劑F是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑溶液，試劑F的溶液的配制方法為取試劑F 0. 6-3g，溶于500mL蒸餾水中，配制成濃度為10mM-50mM的試劑F的溶液。優(yōu)化的色譜條件及梯度洗脫程序是色譜柱ACQUITY UPLC BEH C18 (2. 1 X 100mm, 1. 7 μ m)反相色譜柱；柱溫:30-40 °C ；流速 0. 1-0. 4mL/min ；進(jìn)樣量 2. 0-7. 0 μ L0 梯度洗脫條件Α 相為 Ε，Β 相為 F，0 1. 5min,10% E ；1. 5 6min，10% E 30% E，6-8min 30% E 10% E，8 12min，10% E，檢測(cè)波長 287nm。
權(quán)利要求
1.一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)的前處理試劑盒，試劑盒由盒體、試劑管A、試劑袋B、試劑管C、試劑瓶D、試劑瓶E、試劑袋F組成，其特征在于盒體內(nèi)分為a、b、c、d 4個(gè)區(qū)，a和b區(qū)為試劑管A和試劑管C放置的孔區(qū)，c區(qū)放試劑袋B和試劑袋F的凹槽，d區(qū)放試劑瓶D和試劑瓶E的凹槽；所述的試劑管A中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑；所述的試劑袋B中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、 硫酸鈉或硫酸鎂中任一種試劑；所述的試劑管C中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑；所述的試劑瓶D中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、 硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液；所述的試劑瓶E中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑；所述的試劑試劑袋F中是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)的前處理試劑盒，其特征在于所述的試劑瓶D中的試劑溶液D的配制方法取試劑D 2-20 g，溶于200 mL的蒸餾水中溶解配制成濃度為1%_10%的試劑D的溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)的前處理試劑盒，其特征在于所述的試劑F的溶液的配制方法為取試劑F 0.6-3 g，溶于500 mL的蒸餾水中， 配制成濃度為10 mM-50mM的試劑F的溶液，液體試劑E和試劑F的溶液，兩者的體積比 E:F=1:9-1:1。
4.權(quán)利要求1所述的一種動(dòng)物肌肉組織中替米考星檢測(cè)前處理試劑盒的方法，其步驟是A、取動(dòng)物肌肉組織2.0g于50 mL塑料離心管中，加入試劑A 5-10 mL，振蕩30 s ；所述試劑A是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑；B、再加入試劑B2-10 g，振蕩30 s，5000 r/min離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)移至雞心瓶中， 45 °C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；所述試劑B是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、硫酸鈉或硫酸鎂中任一種試劑；C、向雞心瓶中加入試劑C2-10 mL，將其轉(zhuǎn)移至15 mL離心管中；所述試劑C是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑；D、再向其中加入試劑D的溶液1-5mL，振蕩30 s，5000 r/min離心5 min，將上層液體取出置于15 mL離心管中，置45 °C氮吹儀吹至干；所述試劑D的溶液是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑的溶液；E、剩余物用1mL液體試劑E和試劑F的溶液的混合溶液溶解，再加入2 mL正己烷， 漩渦振蕩30 8,5000 r/min離心5 min，去除上層液正己烷層，下層液體經(jīng)0. 22 Mm濾頭過濾，UPLC (超高效液相色譜)測(cè)定；所述的試劑E是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一種液體試劑；所述的試劑F是氯化鈉、碳酸鈉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、硫酸鈉鉀或硫酸鎂中任一種試劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種檢測(cè)動(dòng)物肌肉組織中替米考星的前處理試劑盒及方法，試劑盒由盒體、試劑管A、試劑袋B、試劑管C、試劑瓶D、試劑瓶E、試劑袋F組成，盒體內(nèi)分為a、b、c、d，a和b區(qū)為試劑管A和試劑管C放置的孔區(qū)，c區(qū)放試劑袋B和試劑袋F的凹槽，d區(qū)放試劑瓶D和試劑瓶E的凹槽；其步驟A、取動(dòng)物肌肉組織于離心管中，加入試劑，振蕩；B、加入試劑，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；C、向雞心瓶中加入試劑，將其轉(zhuǎn)移至離心管中；D、再加入試劑溶液，振蕩，置氮吹儀吹至干。E、剩余物用液體試劑混合溶液溶解，再加入正己烷，漩渦振蕩，去除上層液體，下層液體經(jīng)濾頭過濾，UPLC測(cè)定。操作簡(jiǎn)單、快速，價(jià)格低廉，所用試劑對(duì)色譜柱無損害。
文檔編號(hào)G01N30/14GK102393430SQ20111038483
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月28日
發(fā)明者何力, 劉永濤, 喻亞麗, 楊紅, 艾曉輝, 鄒世平 申請(qǐng)人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所