專利名稱：一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種鄰苯二甲酸二丁酯的檢測方法。
技術(shù)背景
2011年4月份以來，在臺灣發(fā)生的食品添加物起云劑中加入有害健康的塑化劑事件引起軒然大波。塑化劑是一種對樹脂或塑料或橡膠或粘合劑等高分子材料有溶劑化作用的一類功能性化學品，是一種高分子材料助劑，常用的增塑劑是鄰苯二甲酸酯。研究信息表明，鄰苯二甲酸酯對環(huán)境和人體可能存在不良影響。歐盟是最早對鄰苯二甲酸酯的應用做出限制的國際組織。歐盟2005/84/EC指令列出了六種鄰苯二甲酸酯物質(zhì)DEHP、DBP、BBP (鄰苯二甲酸丁芐酯)、DINP、DIDP (鄰苯二甲酸二異癸酯)、DNOP (鄰苯二甲酸二正辛酯)進行限制，其中前三種DEHP、DBP、BBP不得用于兒童玩具和用品中，在塑料中的含量每種不得超過0. 1%。后三種DINP、DIDP、DN0P不得用于能入口的兒童玩具及兒童類物品中，每種含量不得超過0.1%。
目前鄰苯二甲酸酯類的檢測技術(shù)主要有分光光度法、氣相色譜法、液相色譜法、紅外光譜法、薄層色譜法等。最常采用的檢測技術(shù)是氣相色譜法和液相色譜法，但是監(jiān)測費用昂貴，需專業(yè)人員操作，樣品前處理煩瑣，很難進行批量處理，難以適應食品業(yè)快速診斷的形勢。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種靈敏度高、檢測限低、快速簡便的從食品樣品中測定鄰苯二甲酸二丁酯的方法。
本發(fā)明解決技術(shù)問題的技術(shù)方案為一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，包括以下步驟
a 抑制曲線的建立步驟
在建立鄰苯二甲酸二丁酯的抑制曲線之前，先配制不同濃度的標準品。鄰苯二甲酸二丁酯標準品用l_2mL的無水乙醇溶解后，用PBS稀釋至一系列濃度，分別為IlOOng/ mL、366ng/mL、122ng/mL、40ng/mL、13ng/mL、4. 5ng/mL、l. 5ng/mL、0. 5ng/mL、0. 16ng/mL、 0. 055ng/mL、0. 018ng/mL、0. 006ng/mL。競爭時加入這一系列濃度的標準液，測定結(jié)果的平均值經(jīng)過0rigin6. 0軟件處理后繪制成抑制曲線。
(1)包被步驟
用濃度為5 μ g/mL的鄰苯二甲酸二丁酯包被抗原(DBAP-OVA)包被96孔酶標板， 每孔100 μ L，放置培養(yǎng)箱37°C溫育池后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次。
(2)封閉步驟
在包被好的酶標準版中加入1 %卵清蛋白(OVA)溶液，每孔150 μ L，封閉沒有包被抗原的多余的部分，避免抗體的非特異吸附在酶標板上。37°C溫育30min后，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；
(3)競爭步驟
每孔加入50 μ L鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)標準溶液和50 μ L熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體使之發(fā)生競爭反應。37°C下溫育2.證后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；以除去游離的DBP及抗體結(jié)合物。
(4)檢測步驟
用多功能酶標儀測定各孔在激發(fā)波長為485nm，發(fā)射波長為時的熒光強度。
b:樣品的檢測步驟
除C3)競爭步驟每孔加入50 μ L樣品溶液和50 μ L的熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體，37°C下溫育2.證后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干， 每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；外，其余與a 抑制曲線的建立步驟相同。
為了建立方法的重復性好，以及檢測的準確度，需要在樣品中加入標準品，進行加標回收實驗。
除C3)競爭步驟每孔加入25 μ L樣品和25 μ L鄰苯二甲酸二丁酯標準溶液，再加入50μ L熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體，37°C下溫育2.證后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；外，其余與a 抑制曲線的建立步驟相同。
所述的鄰苯二甲酸二丁酯包被抗原通過以下方法制備
稱取4-氨基鄰苯二甲酸二丁酯0.02488，溶于501^濃鹽酸(1211101/1)中，加入1. 5mL蒸餾水，在冰水浴(0-4°C )中攪拌。緩慢加入2mL 0. lmol/L的NaNO2溶液，攪拌 30min后，再加入0. OOlg尿素，除去未反應的NaN02。再緩慢加入20mL溶有80mg卵清蛋白 (OVA)的四硼酸鈉的溶液中(pH = 9. 18)，冰水浴(0-4°C)攪拌3- 后，將反應液裝入透析袋(MWCO =Nominal :8，000-14，000)，在蒸餾水(pH = 7. 0)中透析5天，每天換水兩次，得棕紅色鄰苯二甲酸二丁酯包被抗原溶液。
所述的熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體，通過以下方法制備
免疫抗原的制備步驟
稱取4-氨基鄰苯二甲酸二丁酯0.02488，溶于5(^1^農(nóng)鹽酸(1211101/1)中，并加入1. 5mL蒸餾水，在冰水浴(0-4°C )中攪拌；緩慢加入2mL 0. lmol/L的NaNO2溶液，攪拌 30min后，再加入0. OOlg尿素，除去未反應的NaNO2 ；
再緩慢加入20mL溶有SOmg牛血清蛋白(BSA)的四硼酸鈉的溶液中(pH = 9. 18)， 冰水浴(0-4°C )攪拌3- 后，將反應液裝入透析袋(MWCO =Nominal :8，000-14, 000)，在蒸餾水(pH = 7.0)中透析5天，每天換水兩次，得棕紅色鄰苯二甲酸二丁酯免疫抗原溶液
抗體的制備步驟
將棕紅色鄰苯二甲酸二丁酯免疫抗原溶液與弗氏佐劑以1 1 (ν/ν)混溶，對三只新西蘭大白兔進行多次免疫，第一次動物免疫將免疫抗原與弗氏完全佐劑混溶，之后的加強免疫是將免疫抗原與弗氏不完全佐劑混溶，經(jīng)五次免疫后，制得抗鄰苯二甲酸二丁酯抗體。
熒光標記步驟
稱取N-羥基丁二酰亞胺0. 004g, N, N' - 二環(huán)己基碳酰亞胺0. 006g,和氟硼二吡咯衍生物(BODIPY) 10. %ig，溶于ImL無水的二甲基甲酰胺溶液中，室溫Q0_25°C )攪拌過夜。第二天，在上述溶液中加入500 μ L 1，4-二氧雜環(huán)乙烷，室溫Q0-25°C )攪拌30min;
將250 μ L抗鄰苯二甲酸二丁酯抗體與750 μ L 0. 05mol/L,pH 7. 3磷酸緩沖液(PB 溶液)混勻后，逐滴加入上述溶液中，室溫O0-25°c)攪拌池后，全部轉(zhuǎn)移入透析袋(MWC0 Nominal =8,000-14, 000)中，在PB溶液中透析過夜，次日從透析袋中取出合成的溶液裝入離心管中，避光低溫(0-4°C )保存待用；
所述的弗氏佐劑通過以下方法制備
將液體石蠟和羊毛脂按2 1體積比用超聲清洗器超聲3_4h，使之完全混勻，即滴一滴乳化劑到冰水混合液中半分鐘之內(nèi)不擴散才能算混合完全。此油包水乳化劑稱之為不完全佐劑。不完全佐劑低溫(0-4°C )貯存，臨用前加液體卡介苗即為完全佐劑。
所述的免疫步驟為
選用三只月齡3個月左右，體重為1. 5_2kg左右的健康新西蘭雄兔作為免疫對象。 首次注射用含完全弗氏佐劑的抗原進行基礎免疫，之后用含不完全弗氏佐劑的抗原加強免疫。用剪刀剪去兔背部，酒精消毒，采用背部皮下多點注射的方法，免疫劑量為0.5mg lmg/kg/次，每次背部皮下免疫10點，每次注射lmL。3周后開始加強免疫，以后每2周再次加強免疫，經(jīng)5次免疫后，從兔心臟采血，血清室溫O0-25°C )靜置0. 5-lh，在冰箱) 靜止?jié)岷笪∩蠈映吻宓难濉?br> 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下的特點
本發(fā)明采用熒光信號作為檢測信號，與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫技術(shù)相比，不需要底物溶液的加入及溫育時間，縮短了操作時間；本發(fā)明的檢測限為0. 003ng/mL，與之前的熒光免疫法技術(shù)報道的0. 02ng/mL、0. 05ng/mL相比，均低一個數(shù)量級。本發(fā)明的靈敏度為0. 66ng/ mL,比之前的熒光免疫法技術(shù)報道的10. 53ng/mL相比，低兩個數(shù)量級；本發(fā)明通過免疫動物，制備出了抗DBP的多克隆抗體，通過特異性的考察，得出制備的抗體具有高度特異性； 本發(fā)明無需大量的樣品前處理過程，節(jié)省了檢測時間，簡化了分析過程，提高了工作效率， 減少了樣品處理時的溶劑對測定結(jié)果的影響。
綜上所述，本發(fā)明靈敏度高、快速、特異性強，方法簡單、耗時短，適合環(huán)境污染物 DBP的快速分析，而且對鄰苯二甲酸酯的測定有著重要意義。


圖1為實施例本發(fā)明的抑制曲線圖。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作詳細的說明。
牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)Sigma公司
液體卡介苗蕪湖新蕪區(qū)醫(yī)院
液體石蠟上海試劑有限公司
羊毛脂國藥集團化學試劑有限公司
氟硼二吡咯衍生物(BODIPY)見文獻(JiaoLJ, Yu CJ, Liu MM, Wu YC, Cong KB, Meng Τ, Wang YQ, and Hao EH. Synthesis and Functionalization of AsymmetricalBenzo-Fused BODIPY Dyes.J. Org. Chem. 2010，75，6035—6038)
其余化學試劑均為分析純，配制溶液的水均為二次蒸餾水
溶液的配制
(1)包被緩沖液(0. 05mol/L pH 9. 6 碳酸鹽緩沖液)稱取 1. 59g Na2CO3, 2. 94g NaHCO3，加蒸餾水至IOOOmL
(2)稀釋液(0. 01mol/L pH 7. 4 磷酸鹽緩沖液，PBS)稱取 NaCl 8. Og, NaH2PO4 · 2H20 0. 29g, Na2HPO4 · 12H20 2. 96g, KCl 0. lg，加蒸餾水至 IOOOmL
(3)洗滌液(0. 01mol/L pH 7. 4，PBST) =PBS 中加入 0. 05% 吐溫-20
(4)封閉液卵清蛋白(OVA)溶液
(5)透析液(0. 05mol/L pH 7. 3，PB)稱取 NaH2PO4 · 2H20 0. 897g, Na2HPO4 · 12H20 5. 999g，加蒸餾水至500mL
實施例1
鄰苯二甲酸二丁酯的抑制曲線的建立
(1)包被步驟
濃度為5 μ g/mL的包被抗原DBAP-OVA包被96孔酶標板，每孔100 μ L，放置培養(yǎng)箱37°C溫育池后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液PBST洗滌并甩干，每次洗滌 3-5min，總共洗滌3次。
(2)封閉步驟
加入OVA溶液，每孔150 μ L，封閉沒有包被抗原的多余的部分，避免抗體的非特異吸附在酶標板上。37°C溫育30min后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，然后同上洗滌。
(3)競爭步驟
每孔加入50 μ L DBP標準溶液和50 μ L熒光物質(zhì)標記的DBP抗體，使之發(fā)生競爭反應。37°C下溫育2. 5h后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，同上洗滌，除去游離的DBP及抗體結(jié)合物。
(4)檢測步驟
用多功能酶標儀測定各孔在激發(fā)波長為485nm，發(fā)射波長為時的熒光強度。
將實施例取得的熒光強度信號轉(zhuǎn)化為數(shù)值，應用0rigin6. 0軟件對其結(jié)果作圖， 如圖1所示。該抑制曲線在0.006-1100ng/mL濃度范圍內(nèi)與熒光強度有良好的線性關系。
線性回歸方程為Υ = 8984+14556/[1+(Χ/0.66)°_379]，此式中Y為熒光強度，X為 DBP的濃度。檢測限為0. 003ng/mL，計算方法見文獻(Cao YS, Lu YT, Long SY, Hong JB, Sheng GQ. Development of an ELISA for the detection of bromoxynil in water. Environment International,2005,31,33-42)。
該技術(shù)方法的檢測限比之前的檢測鄰苯二甲酸二丁酯的檢測限0. 02 μ g/L(Zhang MC，Wang QE，Zhuang HS. A novel competitive fluorescence immunoassay for the determination of dibutyl phthalate. Anal Bioanal Chem,2006，386，1401-1406)， 0.05 μ g/L (Zhang MC, Wang QE, Zhuang HS. Determination of dibutyl o-phthalate by antigen-coated competitive fluorescence immunoassay. Analytical Letters，2007， 40,127-137)均低一個數(shù)量級。
在免疫分析中，方法的靈敏度通常用IC5tl表示=IC5tl的值越小，表明分析的靈敏度越高，具體說明見文獻(Wang YZ, Wei DP, Yang H，Yang Y，Xing WW, Li Y，Deng AP. Development of a highly sensitive and specific monoclonal antibody-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of Sudan I in food samples. Talanta，2009，771783-1789)。該技術(shù)方法的靈敏度為0. 66ng/mL,比之前的相關文獻報道靈敏度為 10. 53 μ g/L (Zhang MC, Wang QE, Zhuang HS. A novel competitive fluorescence immunoassay for the determination of dibutyl phthalate. Anal Bioanal Chem，2006，386，1401-1406)低兩個數(shù)量級。
綜上所述，該競爭熒光免疫分析法檢測鄰苯二甲酸二丁酯的檢測限和靈敏度都較之前的相關文獻數(shù)值更低，因此適合實際樣品中快速簡便地進行鄰苯二甲酸二丁酯痕量分析。
實施例2
檢測全脂牛奶中的鄰苯二甲酸二丁酯的含量及加標回收實驗
全脂牛奶的預處理步驟稱取2. Og全脂牛奶固體粉末(購于蕪湖市超市)，溶解于IOmL熱(70-90°C)的蒸餾水中，待其冷卻后。將2mL無水乙醇加入上述IOmL溶液中，震蕩5min,隨后在低溫下(0-40C ) 10，000轉(zhuǎn)/分鐘離心IOmin0離心后，取出試管，去除上層脂肪層，中間的溶液層轉(zhuǎn)移到干凈的玻璃容器中，并且用lmol/L NaOH或者lmol/L HCl.調(diào)節(jié)該溶液PH至7.0，保存在低溫(0-4°C )下。
1、檢測全脂牛奶中的鄰苯二甲酸二丁酯的含量
除
(3)競爭步驟
每孔加入50 μ L處理過的全脂牛奶溶液和50 μ L熒光物質(zhì)標記的DBP抗體溶液， 使之發(fā)生競爭反應。37°C下溫育2. 5h后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，同上洗滌，除去游離的DBP及抗體結(jié)合物。外，其余與實施例1相同。
2、全脂牛奶中的鄰苯二甲酸二丁酯加標回收實驗
除
(3)競爭每孔加入25 μ L處理過的全脂牛奶溶液、25 μ L指定濃度的DBP標準溶液(0. UU10ng/mL)和50 μ L熒光物質(zhì)標記的DBP抗體，使之發(fā)生競爭反應。37°C下溫育 2. 后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，同上洗滌，除去游離的DBP及抗體結(jié)合物。外，其余與實施例1相同。
將實施例取得的熒光強度信號轉(zhuǎn)化為數(shù)值，計算結(jié)果如表1所示。
表 權(quán)利要求
1.一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，包括以下步驟 a:抑制曲線的建立步驟在建立鄰苯二甲酸二丁酯的抑制曲線之前，先配制不同濃度的標準品鄰苯二甲酸二丁酯標準品用l_2mL的無水乙醇溶解后，用稀釋液稀釋至一系列濃度，分別為IlOOng/ mL、366ng/mL、122ng/mL、40ng/mL、13ng/mL、4. 5ng/mL、l. 5ng/mL、0. 5ng/mL、0. 16ng/mL、 0. 055ng/mL、0. 018ng/mL、0. 006ng/mL。競爭時加入這一系列濃度的標準液，測定結(jié)果的平均值經(jīng)過0rigin6. 0軟件處理后繪制成抑制曲線；(1)包被步驟用濃度為5 μ g/mL的鄰苯二甲酸二丁酯包被抗原包被96孔酶標板，每孔100 μ L，放置培養(yǎng)箱37°C溫育池后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌 3-5min，總共洗滌3次;(2)封閉步驟在包被好的酶標準版中加入卵清蛋白溶液，每孔150yL，37°C溫育30min后，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；(3)競爭步驟每孔加入50 μ L鄰苯二甲酸二丁酯標準溶液和50 μ L熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體，37°C下溫育2.證后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；(4)檢測步驟用多功能酶標儀測定各孔在激發(fā)波長為485nm，發(fā)射波長為528nm時的熒光強度； b 樣品的檢測步驟除(3)競爭步驟每孔加入50 μ L樣品溶液和50 μ L的熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體，37°C下溫育2.證后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；外，其余與a 抑制曲線的建立步驟相同。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于除(3)競爭步驟每孔加入25 μ L樣品和25 μ L鄰苯二甲酸二丁酯標準溶液，再加入 50 μ L熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體，37°C下溫育2.證后，從培養(yǎng)箱內(nèi)取出，甩掉孔內(nèi)溶液，再用洗滌液洗滌并甩干，每次洗滌3-5min，總共洗滌3次；外，其余與a 抑制曲線的建立步驟相同。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于所述的鄰苯二甲酸二丁酯包被抗原通過以下方法制備稱取4-氨基鄰苯二甲酸二丁酯0.0248g，溶于50 μ L濃鹽酸(12mol/L)中，加入1.5mL 蒸餾水，在冰水浴(0-4°C )中攪拌；加入2mL 0. lmol/L的NaNO2溶液，攪拌30min后，再加入0. OOlg尿素，除去未反應的NaN02 ；再加入20mL溶有SOmg卵清蛋白的四硼酸鈉的溶液中(pH = 9. 18)，冰水浴(0_4°C ) 攪拌3- 后，將反應液裝入透析袋，在蒸餾水中透析5天，每天換水兩次，得棕紅色鄰苯二甲酸二丁酯包被抗原溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于所述的熒光標記的鄰苯二甲酸二丁酯抗體的制備步驟，包括免疫抗原的制備步驟、抗體的制備步驟、熒光標記步驟 所述的熒光標記步驟稱取N-羥基丁二酰亞胺0. 004g, N, N' - 二環(huán)己基碳酰亞胺0. 006g,和氟硼二吡咯衍生物10. %ig，溶于ImL無水的二甲基甲酰胺溶液中，室溫Q0-25°C )攪拌過夜；第二天，在上述溶液中加入500yL 1，4-二氧雜環(huán)乙烷，室溫Q0-25°C )攪拌30min ；將250 μ L抗鄰苯二甲酸二丁酯抗體與750 μ L 0. 05mol/L,pH 7. 3磷酸緩沖液混勻后， 逐滴加入上述溶液中，室溫攪拌池后，全部轉(zhuǎn)移入透析袋中，在0.05mol/L，pH 7. 3磷酸緩沖液中透析過夜，次日從透析袋中取出合成的溶液裝入離心管中，避光低溫(0_4°C)保存待用；
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于所述的抗鄰苯二甲酸二丁酯抗體通過以下方法制備 免疫抗原的制備步驟稱取4-氨基鄰苯二甲酸二丁酯0.0248g，溶于50 μ L濃鹽酸(12mol/L)中，并加入 1. 5mL蒸餾水，在冰水浴(0-4°C )中攪拌；加入2mL 0. lmol/L的NaNO2溶液，攪拌30min后， 再加入0. OOlg尿素，除去未反應的NaNO2 ；再加入20mL溶有SOmg牛血清蛋白的四硼酸鈉的溶液，冰水浴(0_4°C )攪拌3- 后， 將反應液裝入透析袋，在蒸餾水(pH = 7.0)中透析5天，每天換水兩次，得棕紅色鄰苯二甲酸二丁酯免疫抗原溶液； 抗體的制備步驟將棕紅色鄰苯二甲酸二丁酯免疫抗原溶液與弗氏佐劑以1 l(v/v)混溶，對三只新西蘭大白兔進行多次免疫，第一次動物免疫將免疫抗原與弗氏完全佐劑混溶，之后的加強免疫是將免疫抗原與弗氏不完全佐劑混溶，經(jīng)五次免疫后，制得抗鄰苯二甲酸二丁酯抗體。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于所述的免疫步驟為選用三只月齡3個月左右，體重為1.54kg左右的健康新西蘭雄兔作為免疫對象，首次注射用含完全弗氏佐劑的抗原進行基礎免疫，之后用含不完全弗氏佐劑的抗原加強免疫 用剪刀剪去兔背部，酒精消毒，采用背部皮下多點注射的方法，免疫劑量為0. 5mg Img/ kg/次，每次背部皮下免疫10點，每次注射lmL，3周后開始加強免疫，以后每2周再次加強免疫，經(jīng)5次免疫后，從兔心臟采血，血清室溫O0-25°C )靜置0. 5-lh，在冰箱)靜止 2h后吸取上層澄清的血清。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種快速檢測食品中的鄰苯二甲酸二丁酯的方法，包括以下步驟a抑制曲線的建立步驟、b樣品的檢測步驟，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有靈敏度高、快速、特異性強，方法簡單、耗時短，適合環(huán)境污染物DBP的快速分析，而且對鄰苯二甲酸酯的測定有著重要意義。
文檔編號G01N21/64GK102520153SQ20111042021
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月15日
發(fā)明者張明翠, 焦莉娟, 胡玉嶸 申請人:安徽師范大學