專利名稱：糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于醫(yī)療設(shè)備，涉及一種離子交換層析法檢測糖化血紅蛋白濃度的糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀。
背景技術(shù)：
人體血液中糖化血紅蛋白的濃度是糖尿病診斷的重要臨床指標(biāo)。正常血紅蛋白 (Hb)被糖化后會形成多種亞組分，但最主要的亞組分為HbA1。，其形成后結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，有90 120天的生命周期。通過檢測該指標(biāo)，可反映糖尿病人三個(gè)月的平均血糖水平。因此，臨床上一般以該指標(biāo)作為糖尿病人的篩查、診斷、治療的重要依據(jù)?，F(xiàn)有糖化血紅蛋白的測定方法有離子交換層析法、電泳法、免疫比濁法和親和層析法。最主要的方法為離子交換層析法。采用離子交換層析法是基于血紅蛋白糖化后會導(dǎo)致血紅蛋白分子表面陽離子丟失。當(dāng)含有糖化血紅蛋白的樣本經(jīng)過陽離子交換層析柱時(shí)，糖化血紅蛋白和非糖化血紅蛋白均被陽離子交換樹脂所吸附。因不同亞組分的糖化血紅蛋白和非糖化血紅蛋白分子表面所帶正電荷各不相同，所以與陽離子交換樹脂的吸附力也各不相同。用不同離子濃度的洗脫液，采取由低到高的梯度洗脫方法，可以逐次洗脫出不同亞組分的糖化血紅蛋白和非糖化血紅蛋白。目前臨床上采用離子交換液相色譜層析法來分離糖化血紅蛋白的方法，其中又分為離子交換高效液相色譜分析法(HPLC)和離子交換低壓液相色譜分析法(LPLC)。其中，離子交換高效液相色譜分析法(HPLC)為糖化血紅蛋白HbAlc國際公認(rèn)的全標(biāo)準(zhǔn)分析方法。上述兩種方法為能分離出多種糖化血紅蛋白亞組分，均只采用兩種離子濃度的洗脫液，即一種高離子濃度洗脫液和一種低離子濃度洗脫液。在使用時(shí)，是通過機(jī)內(nèi)設(shè)置一個(gè)機(jī)械式的六通旋轉(zhuǎn)分配閥來配比生成不同離子濃度的洗脫液，以對樣本進(jìn)行洗脫。理論上講，配比出的離子濃度種類越多，能洗脫的亞組分液越多。但在大多數(shù)場合的臨床實(shí)踐中，真正具有指導(dǎo)意義的指標(biāo)只有HbA1。，其他亞組分對臨床上糖尿病的篩查、治療效果的檢查沒有太大的實(shí)際意義，一般只能用于研究或特殊病例，因而現(xiàn)有設(shè)備分離出的大多數(shù)結(jié)果對臨床的指導(dǎo)意義并不大。但由于現(xiàn)有設(shè)備采用機(jī)內(nèi)配比不同濃度洗脫液，使得儀器的復(fù)雜程度增高、 故障率增加，洗脫液的交叉污染嚴(yán)重，儀器的制造、維修、使用的成本也較高。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是，提供一種結(jié)構(gòu)簡單、設(shè)備運(yùn)行可靠、檢測精確、制造成本低、洗脫液無交叉污染的糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀。本實(shí)用新型的糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀包括有安裝在供液管路上的蠕動泵，所述蠕動泵的出液口依次經(jīng)過陽離子交換樹脂層析柱和比色池，經(jīng)比色分析后進(jìn)入廢液瓶；所述蠕動泵的進(jìn)液口與四個(gè)洗脫液容器連接，所述的四個(gè)洗脫液容器分別是A洗脫液容器，盛放用于陽離子交換樹脂清洗、平衡的A洗脫液；[0009]B洗脫液容器，盛放用于洗脫糖化血紅蛋白其他亞組分HbAla、HbAlb的B洗脫液；C洗脫液容器，盛放用于洗脫糖化血紅蛋白HbAle亞組分的C洗脫液；D洗脫液容器，盛放用于洗脫非糖化血紅蛋白及再生陽離子交換樹脂的D洗脫液；所述A洗脫液容器、B洗脫液容器、C洗脫液容器和D洗脫液容器分別通過閥門各自獨(dú)立地與蠕動泵進(jìn)液口連接。所述A洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置串聯(lián)的閥門V1-2、閥門V2-2和閥門 V3-2 ；所述B洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門V3-1 ；所述C洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門V2-1 ；所述D洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門Vl-I ；所述閥門Vl-I 和閥門V1-2、閥門V2-1和閥門V2-2、閥門V3-1和閥門V3-2是三對聯(lián)動閥，并且每對聯(lián)動閥中的兩個(gè)閥門的開、關(guān)狀態(tài)相反。本實(shí)用新型由于采用簡單的流路系統(tǒng)在常壓的條件下就能實(shí)現(xiàn)只有高效液相層析法在高壓條件下才能實(shí)現(xiàn)的糖化血紅蛋白HbAle的分離精度，也避免了為配比多種離子濃度洗脫液而必須采用的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的六通旋轉(zhuǎn)分配閥，消除了不同濃度洗脫液之間的交叉污染影響，可使洗脫液的離子濃度更精確可靠，糖化血紅蛋白HbA1。亞組分的分離精度更
尚ο由于人體血液中的糖化血紅蛋白的濃度是診斷糖尿病的重要臨床指標(biāo)。人體血液中正常血紅蛋白(Hb)由三種血紅蛋白亞組分組成血紅蛋白A(HbA)，血紅蛋白F(HbF)，血紅蛋白A2(HbA2)。成人血紅蛋白中主要含有血紅蛋白A(HbA)，約占整個(gè)血紅蛋白的95% 97%。而血紅蛋白A(HbA)又由兩種亞組分組成糖化血紅蛋白(HbAl) (5% 7%)和非糖化血紅蛋白(HbAO) (90%)。糖化血紅蛋白(HbAl)是血紅蛋白(Hb)與糖類(如葡萄糖、6-磷酸葡萄糖或1. 6- 二磷酸果糖)經(jīng)非酶促結(jié)合而成的。在糖化血紅蛋白(HbAl)中，除存在少量其他不同變異體外，主要亦有三種亞組分，分別為HbAla、HbAlb和HbAlc。其中，HbAlc約占HbAl的75% 80%，且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。因此，通過本實(shí)用新型對糖化血紅蛋白(HbAl)的各亞組分及非糖化血紅蛋白(HbAO)進(jìn)行精確的洗脫分離就可以通過理論推導(dǎo)獲得糖化血紅蛋白的濃度。經(jīng)試驗(yàn)對比，本實(shí)用新型的檢測結(jié)果能夠完全滿足臨床診斷的需要。
圖1是本實(shí)用新型的流路系統(tǒng)原理圖。
具體實(shí)施方式
如圖所示，糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀包括有安裝在供液管路上的蠕動泵1， 所述蠕動泵的出液口依次經(jīng)過陽離子交換樹脂層析柱3和比色池4，經(jīng)比色分析后進(jìn)入廢液瓶5 ；所述蠕動泵1的進(jìn)液口與四個(gè)洗脫液容器連接，所述的四個(gè)洗脫液容器分別是A洗脫液容器6，盛放用于陽離子交換樹脂清洗、平衡的A洗脫液；B洗脫液容器7，盛放用于洗脫糖化血紅蛋白其他亞組分HbAla、HbAlb的B洗脫液；C洗脫液容器8，盛放用于洗脫糖化血紅蛋白HbAle亞組分的C洗脫液；D洗脫液容器9，盛放用于洗脫非糖化血紅蛋白及再生陽離子交換樹脂的D洗脫液；[0023]所述A洗脫液容器6、B洗脫液容器7、C洗脫液容器8和D洗脫液容器9分別通過閥門各自獨(dú)立地與蠕動泵進(jìn)液口連接。所述A洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置串聯(lián)的閥門V1-2、閥門V2-2和閥門 V3-2 ；所述B洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門V3-1 ；所述C洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門V2-1 ；所述D洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門Vl-I ；所述閥門Vl-I 和閥門V1-2、閥門V2-1和閥門V2-2、閥門V3-1和閥門V3-2是三對聯(lián)動閥，并且每對聯(lián)動閥中的兩個(gè)閥門的開、關(guān)狀態(tài)相反。即，只有B洗脫液容器、C洗脫液容器和D洗脫液容器均被關(guān)閉時(shí)，才能夠?qū)洗脫液通入蠕動泵。其工作過程中，不同的洗脫液分別在蠕動泵1的作用下經(jīng)過吸附了待測樣本的陽離子交換樹脂層析柱3，洗脫后進(jìn)入比色池4進(jìn)行色譜分析。
權(quán)利要求1.一種糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀，包括有安裝在供液管路上的蠕動泵(1 )，所述蠕動泵的出液口依次經(jīng)過陽離子交換樹脂層析柱(3)和比色池(4)進(jìn)入廢液瓶(5)，其特征是所述蠕動泵(1)的進(jìn)液口與四個(gè)洗脫液容器連接，所述的四個(gè)洗脫液容器分別是A洗脫液容器(6)，盛放用于陽離子交換樹脂清洗、平衡的A洗脫液； B洗脫液容器(7)，盛放用于洗脫糖化血紅蛋白其他亞組分HbAla、Hb~b的B洗脫液； C洗脫液容器(8)，盛放用于洗脫糖化血紅蛋白HbA1。亞組分的C洗脫液； D洗脫液容器(9)，盛放用于洗脫非糖化血紅蛋白及再生陽離子交換樹脂的D洗脫液； 所述A洗脫液容器(6)、B洗脫液容器(7)、C洗脫液容器(8)和D洗脫液容器(9)分別通過閥門各自獨(dú)立地與蠕動泵進(jìn)液口連接。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀，其特征是所述A洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置串聯(lián)的閥門V1-2、閥門V2-2和閥門V3-2 ；所述B洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門V3-1 ；所述C洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門V2-1 ；所述 D洗脫液容器與蠕動泵進(jìn)液口之設(shè)置閥門Vl-I ；所述閥門Vl-I和閥門V1-2、閥門V2-1和閥門V2-2、閥門V3-1和閥門V3-2是三對聯(lián)動閥，并且每對聯(lián)動閥中的兩個(gè)閥門的開、關(guān)狀態(tài)相反。
專利摘要本實(shí)用新型屬于醫(yī)療設(shè)備，涉及一種離子交換層析法檢測糖化血紅蛋白濃度的糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀。該糖化血紅蛋白四梯度洗脫分析儀包括有安裝在供液管路上的蠕動泵，所述蠕動泵的出液口依次經(jīng)過陽離子交換樹脂層析柱和比色池，經(jīng)比色分析后進(jìn)入廢液瓶；所述蠕動泵的進(jìn)液口與四個(gè)洗脫液容器連接，所述的四個(gè)洗脫液容器通過閥門各自獨(dú)立地與蠕動泵進(jìn)液口連接。本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡單、設(shè)備運(yùn)行可靠、檢測精確、制造成本低、洗脫液無交叉污染。
文檔編號G01N30/02GK202126430SQ20112015883
公開日2012年1月25日 申請日期2011年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月18日
發(fā)明者莊東寧 申請人:江蘇奧迪康醫(yī)學(xué)科技有限公司