專利名稱：肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種抗體檢測試劑盒，具體涉及一種肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒。
背景技術(shù)：
肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae, MP)是引起原發(fā)性非典型肺炎及其他呼吸道感染性疾病的常見病原微生物。除呼吸道外，MP尚可引起其他系統(tǒng)嚴重的并發(fā)癥。肺炎支原體抗體檢查方法包括冷凝聚試驗、間接血凝抑制試驗、補體結(jié)合試驗、 肺炎支原體的培養(yǎng)、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)。支原體肺炎的診斷有病原體培養(yǎng)、多種特異性血清學檢查，近年又有基因探針及DNA、PCR方法。而冷凝聚試驗、間接血凝抑制試驗、補體結(jié)合試驗及肺炎支原體的培養(yǎng)由于特異性差、敏感性低等問題在臨床應(yīng)用價值受限。冷凝聚試驗、支原體抗體測定時兩者的高峰出現(xiàn)晚，多在2 4周，并與患者年齡、免疫功能、感染輕重、病程的長短有密切關(guān)系。肺炎支原體感染后血清冷凝聚抗體陽性者，僅僅占45% 75%。嬰幼兒由于免疫系統(tǒng)發(fā)育未完善，部分免疫功能低下，在肺炎支原體感染時抗體產(chǎn)生不足，從而影響檢出率，咽拭培養(yǎng)分離肺炎支原體，對于一些血清學不能診斷肺炎支原體的患兒，可提高檢出陽性率。ELISA方法測定特異性MP2IgA，其陽性率達56. 01% ；用顆粒凝聚法測定的MP2IgM，其陽性率達60. 81%。目前國內(nèi)外一致認為MP2IgM、MP2IgG等特異性抗體測定是臨床診斷肺炎支原體感染較為可靠的指標之一。

實用新型內(nèi)容本實用新型的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了一種可以快速定性檢測血清樣本中肺炎支原體IgM抗體的肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒。為了實現(xiàn)上述目的，本實用新型提供的技術(shù)方案為肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，其特征在于盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；所述試紙條由反應(yīng)板切割而成；所述試紙條寬4mm ；所述反應(yīng)板由膠板、反應(yīng)膜、MP-IgM金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成；所述反應(yīng)膜是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組ΜΡ-iVg和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG抗體包被的；所述反應(yīng)膜設(shè)置在膠板上；所述膠板上部設(shè)置有1. 5cm寬的粗纖維濾紙；粗纖維濾紙的下部壓住反應(yīng)膜； 所述膠板下部依次設(shè)置有MP-IgM金結(jié)合物墊和樣品墊；所述MP-IgM金結(jié)合物墊寬0. 9cm ； 所述MP-IgM金結(jié)合物墊的上部壓住反應(yīng)膜；所述樣品墊位于MP-IgM金結(jié)合物墊的下部； 所述樣品墊的上部壓住MP-IgM金結(jié)合物墊。本實用新型的有益效果為肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒具有快速、 簡便、準確和靈敏度高的特點，整個操作時間僅需20分鐘就可以判讀結(jié)果。膠體金快速檢測試紙條，以多表位的重組抗原為原料，具有操作更加簡便，成本低廉，特異性好，靈敏度高的特點，可單份檢測，易于普及，對于肺炎支原體IgM抗體的檢測和控制效果明顯。
圖1為本實用新型提供的肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的盒體示意圖。圖2為本實用新型提供的肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的鋁箔袋示意圖。圖3為本實用新型提供的肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的未切割前的反應(yīng)板示意圖。圖4為本實用新型提供的肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒的切割后試紙條的示意圖。其中，1為膠板，2為反應(yīng)膜，3為粗纖維濾紙，4為MP-IgM金結(jié)合物墊，5為樣品墊。
具體實施方式
實施例1肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；試紙條由反應(yīng)板切割而成；試紙條寬4mm ；反應(yīng)板由膠板1、反應(yīng)膜2、MP-IgM金結(jié)合物墊4、粗纖維濾紙3和樣品墊5組成；反應(yīng)膜2是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組MP-Ag和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG抗體包被的； 反應(yīng)膜2設(shè)置在膠板1上；膠板1上部設(shè)置有1. 5cm寬的粗纖維濾紙3 ；粗纖維濾紙3的下部壓住反應(yīng)膜2 ；膠板1下部依次設(shè)置有MP-IgM金結(jié)合物墊4和樣品墊5 ；MP-IgM金結(jié)合物墊4寬0. 9cm ；MP-IgM金結(jié)合物墊4的上部壓住反應(yīng)膜2 ；樣品墊5位于MP-IgM金結(jié)合物墊4的下部；樣品墊5的上部壓住MP-IgM金結(jié)合物墊4。一、生產(chǎn)工藝條件的確定1、反應(yīng)膜包被條件的優(yōu)化1. 1檢測線包被濃度和膠體金標記鼠抗人IgM稀釋比例的選擇按照上述確定好的標記條件進行標記，將其體積濃縮至原體積(原體積以膠體金體積計算)的1/10，再以不同的稀釋比例稀釋濃縮液，用稀釋液浸泡金標墊，1.5ml/條，干燥后與以不同檢測線包被濃度，0. 1 μ 1/mm的包被量包被好的MP-IgM反應(yīng)膜進行配對，檢測內(nèi)控血清。實驗方案如表1，實驗結(jié)果如表2、3:表1實驗方案設(shè)計
檢測線包被濃度B膠體金標記1勿稀釋比例A1 31 41 51 60. 5mg/mlAlBlA2B1A3B1A4B11. Omg/mlA1B2A2B2A3B2A4B21. 5mg/mlA1B3A2B3A3B3A4B32. Omg/mlA1B4A2B4A3B4A4B4表2陽性內(nèi)控品和最低檢出限
權(quán)利要求1.肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，其特征在于盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；所述試紙條由反應(yīng)板切割而成； 所述試紙條寬4mm ；所述反應(yīng)板由膠板、反應(yīng)膜、MP-IgM金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成；所述反應(yīng)膜是由用磷酸鹽緩沖液稀釋過的重組MP-Ag和用磷酸鹽緩沖液稀釋過的羊抗鼠IgG抗體包被的；所述反應(yīng)膜設(shè)置在膠板上；所述膠板上部設(shè)置有1. 5cm寬的粗纖維濾紙；粗纖維濾紙的下部壓住反應(yīng)膜；所述膠板下部依次設(shè)置有MP-IgM金結(jié)合物墊和樣品墊；所述MP-IgM金結(jié)合物墊寬0. 9cm ；所述MP-IgM金結(jié)合物墊的上部壓住反應(yīng)膜；所述樣品墊位于MP-IgM金結(jié)合物墊的下部；所述樣品墊的上部壓住MP-IgM金結(jié)合物墊。
專利摘要本實用新型公開了一種肺炎支原體IgM抗體膠體金法檢測試劑盒，檢測試劑盒由盒體和盒蓋組成，盒體內(nèi)設(shè)置有鋁箔袋；所述鋁箔袋內(nèi)設(shè)置有試紙條；所述試紙條由反應(yīng)板切割而成；所述試紙條寬4mm；所述反應(yīng)板由膠板、反應(yīng)膜、MP-IgM金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙和樣品墊組成。本實用新型的有益效果為肺炎支原體IgM抗體檢測試劑盒具有快速、簡便、準確和靈敏度高的特點，整個操作時間僅需20分鐘就可以判讀結(jié)果。膠體金快速檢測試紙條，以多表位的重組抗原為原料，具有操作更加簡便，成本低廉，特異性好，靈敏度高的特點，可單份檢測，易于普及，對于肺炎支原體IgM的檢測和控制效果明顯。
文檔編號G01N33/569GK202149900SQ20112027507
公開日2012年2月22日 申請日期2011年7月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月29日
發(fā)明者李習榮 申請人:北京中檢安泰診斷科技有限公司