專利名稱：瘦肉精快速測試盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于一種監(jiān)測樣品中瘦肉精的裝置，這種快速測試盒采取膠體金免疫層析檢測技術(shù)，屬于食品安全檢測領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
瘦肉精，指的是一類動物用藥，包括鹽酸克侖特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇和硫酸特布他林等，屬于腎上腺類神經(jīng)興奮劑。把“瘦肉精”添加到飼料中，的確可以增加動物的瘦肉量。但國內(nèi)外的相關(guān)科學(xué)研究表明，食用含有“瘦肉精”的肉會對人體產(chǎn)生危害，常見有惡心、頭暈、四肢無力、手顫等中毒癥狀，特別是對心臟病、高血壓患者危害更大。長期食用則有可能導(dǎo)致染色體畸變，會誘發(fā)惡性腫瘤，瘦肉精是一種俗稱，現(xiàn)在應(yīng)用的以鹽酸克倫特羅與萊克多巴胺為多，其它的沙丁胺醇與硫酸特布他林也有發(fā)現(xiàn)。鹽酸克倫特羅化學(xué)名稱7-[2_甲基丙烷-2-亞氨基-甲基]-4-氨基-3，5- 二氯苯甲醇鹽酸鹽萊克多巴胺化學(xué)名稱1-(4-羥基苯基)-2 [I-甲基_3_ (4-輕基苯基)-丙氛基]-乙醇鹽酸鹽。鹽酸克侖特羅(Clenbuterol Hydrochloride,簡寫Clen),為一種人工合成的 β -腎上腺素能 興奮劑，具有擴(kuò)張支氣管的作用。當(dāng)人食用含有鹽酸克侖特羅(瘦肉精)殘留的產(chǎn)品后的中毒癥狀為心動過速，低血鉀，低磷酸鹽血癥，肌肉震顫，頭暈，口干，失眠甚至癱瘓等。萊克多巴胺(ractopamine)是一種腎上腺受體激動劑,可以加快畜禽生長速度,提高瘦肉率。人食用了飼喂萊克多巴胺的禽畜產(chǎn)品后，殘留的萊克多巴胺可對消費(fèi)者的健康構(gòu)成極大危害。瘦肉精的檢測有各種色譜-質(zhì)譜及聯(lián)用、免疫檢測方法如酶聯(lián)免疫與膠體金法等。膠體金法快檢卡因?yàn)槠洳僮骱唵?，結(jié)果立刻可顯等優(yōu)點(diǎn)，尤其在現(xiàn)場檢測中有不可替代的作用。傳統(tǒng)的膠體金金快檢卡的觀察窗口為一段外露的硝酸纖維素膜。觀察方式一般為由無色出現(xiàn)紅色的線條。但硝酸纖維素膜材質(zhì)較軟，在生產(chǎn)及使用中容易受外界壓力出現(xiàn)劃痕，反應(yīng)中膠體金可能在劃痕中沉積顯色，另外一些非特異性的膠體金污點(diǎn)也會造成判讀的困難。對于檢測不同產(chǎn)品的快檢卡，外形上都一樣，很容易在裝配時混淆，使得快檢卡在使用時測試結(jié)果發(fā)生錯誤。
發(fā)明內(nèi)容針對現(xiàn)有測試盒存在的問題，本實(shí)用新型發(fā)明了一種瘦肉精快速測試盒，能很好地解決判讀的困難和產(chǎn)品裝配、分類的問題，本測試盒包括卡盒和測試條，卡盒分為上下兩片，上片依次開有加樣孔、觀察窗口，上下兩片卡接，測試條由樣品墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜和吸收墊搭接而成，固定于卡盒的下片，其中硝酸纖維素膜上標(biāo)有藍(lán)色的質(zhì)控帶和檢測帶，金標(biāo)墊上設(shè)置膠體金標(biāo)記的瘦肉精單克隆抗體，檢測帶設(shè)置有瘦肉精抗原，質(zhì)控帶設(shè)置抗鼠IgG的第二抗體，上下兩片盒體內(nèi)部由多個不同形狀的小凸起，用于固定測試條。質(zhì)控帶和檢測帶標(biāo)記為藍(lán)色后，使用者能夠?qū)ψ罱K免疫反應(yīng)顯色位點(diǎn)有預(yù)期，不會受到劃痕中沉積顯色，和ー些非特異性的膠體金污點(diǎn)的誤導(dǎo)，從而能更方便地分析判讀檢測結(jié)果。同時本測試盒的生產(chǎn)與質(zhì)檢中可以對點(diǎn)膜的效果、卡盒裝配的位置方便地進(jìn)行質(zhì)量控制，而且還可以通過顔色來區(qū)別不同產(chǎn)品的測試盒。反應(yīng)流程如下樣品滴入加樣區(qū)，在樣品中沒有瘦肉精或含量低于臨界點(diǎn)時，膠體金抗體在層析過程中會被固定在膜上的瘦肉精捕獲，在檢測帶出現(xiàn)一條紅色條帯。如果瘦肉精在樣品中濃度高于臨界點(diǎn)時，膠體金標(biāo)記的單克隆抗體與被樣品中的瘦肉精全部結(jié)合，因此檢測帶內(nèi)不會出現(xiàn)紅色條帶。另外硝酸纖維素膜上還有ー個質(zhì)控帶，預(yù)先固定的是第二抗體等捕獲IgG的物質(zhì)，不論樣品中是否有瘦肉精，均能捕獲單抗，從而出現(xiàn)紅色條帶。本實(shí)用新型還包括一種快速測試盒的包裝袋，所述包裝袋中包括權(quán)利I或2所述的快速測試盒I個，塑料滴管I個，干燥劑I袋。

圖I測試盒結(jié)構(gòu)圖圖2測試條剖面圖圖3測試條結(jié)構(gòu)圖其中，⑴加樣孔(2)樣品墊(3) PVC底板(4)金標(biāo)墊(5)硝酸纖維素膜
(6)觀察窗ロ (7)質(zhì)控帶(8)固定小凸起(9)吸收墊(10)著色簽(11)卡盒下片
(12)檢測帶(13)卡盒上片
具體實(shí)施方式
本瘦肉精快速測試盒目的是這樣實(shí)現(xiàn)的本測試盒包括卡盒和測試條，卡盒分為上下兩片，上片依次開有加樣孔、觀察窗ロ，上下兩片卡接，測試條由樣品墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜和吸收墊搭接而成，如圖2所示，固定于卡盒的下片，其中硝酸纖維素膜上標(biāo)有藍(lán)顔色的質(zhì)控帶和檢測帶，金標(biāo)墊上設(shè)置膠體金標(biāo)記的瘦肉精單克隆抗體，檢測帶設(shè)置有瘦肉精抗原，質(zhì)控帶設(shè)置抗鼠IgG的第二抗體。在生產(chǎn)過程硝酸纖維素膜上劃膜時，劃膜液中預(yù)先加入藍(lán)紫色或藍(lán)色染料，如溴甲酚紫，溴酚藍(lán)等。質(zhì)控帶與檢測帶可以采用同種顏色，也可以采用不同顔色，或僅將其中一個條帶加以顏色。所加染料應(yīng)當(dāng)為水溶性，不影響抗原抗體的免疫反應(yīng)，復(fù)溶后能通過層析作用離開硝酸纖維素膜，不會對實(shí)驗(yàn)造成干擾。這樣劃膜完成后，硝酸膜上就留有一條藍(lán)色條帶。干燥后，色帶清晰可見。條帶是否均一也反映了劃膜的質(zhì)量，后期的裝配過程可以利用色帶可以用來控制卡盒的裝配位置，生產(chǎn)中還可以方便將劃膜質(zhì)量不好的區(qū)段棄除。成品質(zhì)檢吋，也可以增設(shè)條帶位置偏差的項(xiàng)目。使用者在操作本測試盒時，可以觀察到染料條帶由原有的藍(lán)紫色或藍(lán)色變?yōu)闊o色或紅色的過程。使用者可以準(zhǔn)確預(yù)知檢測帶與質(zhì)控帶的位置，從而不會被其它區(qū)域的異常色斑、線條等干擾。本瘦肉精快速測試盒吸收墊上可以加有ー層不干膠著色簽，可以是任意顔色，也可以是與質(zhì)控帶和檢測帶一致的藍(lán)色，主要是用于區(qū)分不同的產(chǎn)品。[0020]實(shí)施例一本實(shí)用新型所述的瘦肉精快速測試盒。包括ー塑料卡盒，如圖I所示，長度是6 IOcm,寬度是I 3cm,厚度為O. 3 O. 6cm?？ê姓嬗啸藗€窗孔,ー個為加樣孔，一個為觀察窗。加樣孔長度為O. 5 lcm，觀察窗為I 3cm。觀察窗ロ可以看見硝酸纖維素膜上質(zhì)控帶藍(lán)紫色或藍(lán)色。條帶寬度為O. 3 1_。使用本實(shí)用新型時，在加樣孔滴加樣品2滴，展開液I滴。液體向觀察窗方向流動。質(zhì)控區(qū)藍(lán)紫色或藍(lán)色褪去變?yōu)榧t色，代表實(shí)驗(yàn)有效。如果檢測區(qū)也出現(xiàn)紅色條帶，代表樣品為陰性結(jié)果。如果檢測區(qū)沒有出現(xiàn)紅色條帶，代表樣品為陽性結(jié)果。實(shí)施例ニ 檢測帶制備用O. IM PB緩沖液，PH6. 0-8. 0，將鹽酸克倫特羅抗原(CL-BSA)稀釋至l-4mg/ml,按O. 5 lml/cm的量點(diǎn)在硝酸纖維素膜預(yù)定的位置上。質(zhì)控帶制備用O. IM PB緩沖液，PH6. 0-8. 0，將抗鼠IgG稀釋至2_6mg/ml，溴甲酚 紫I :5000 1:20000。按O. 5 lml/cm的量點(diǎn)在硝酸纖維素膜預(yù)定的位置上。金標(biāo)墊制備將膠體金標(biāo)記的抗鹽酸克倫特羅單克隆抗體濃縮至OD值3. 0-6. O,噴涂在聚脂膜上，將聚脂膜按4-8mm切為窄條。將硝酸膜粘貼于30cm長度的底板中部，質(zhì)控帶在上，檢測帶在下，如圖3所示。上方粘貼一條2 4cm寬度的吸收墊條,并搭接在硝酸膜上I 3mm,吸收墊條上粘貼一條I 3cm寬度的著色簽。硝酸膜下方粘貼金墊條,搭接硝酸膜I 3mm,金墊條下再粘接2 4_寬度的樣品墊，樣品墊搭接金墊2 6mm。制成物可稱為大板。將大板按3 4mm切為小條，小條裝入塑料合下片，蓋上上片壓緊，形成完整的檢測卡。本測試盒體內(nèi)部由多個不同形狀的小凸起，用于固定測試條，如圖I所示。使用時，將豬尿或其它樣品滴入一滴(約30ml)于樣品孔，再滴入展開液(O. 02MPBS) 一滴(約50ml)于樣品孔,液體逐漸向上流動。于5 15分鐘內(nèi)判定結(jié)果。如檢測帶由無色變?yōu)榧t色，則為陰性。如檢測帶由仍為無色，則為陽性結(jié)果。表示鹽酸克倫特羅含量在3ppm以上。質(zhì)控線應(yīng)由藍(lán)色變?yōu)榧t色，表示測試有效。質(zhì)控線由藍(lán)紫色變?yōu)闊o色，表示測試無效。上述瘦肉精快速測試盒為單卡鋁箔袋包裝，每袋中還包括干燥劑ー袋，取樣用塑料滴管ー個。
權(quán)利要求1.一種瘦肉精快速測試盒，包括卡盒和測試條，卡盒分為上下兩片，上片依次開有加樣孔、觀察窗口，測試條由樣品墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜和吸收墊搭接而成，固定于卡盒的下片，其特征在于硝酸纖維素膜上標(biāo)有藍(lán)紫色或藍(lán)色的質(zhì)控帶和檢測帶，金標(biāo)墊上設(shè)置膠體金標(biāo)記的瘦肉精單克隆抗體，檢測帶設(shè)置有瘦肉精抗原，質(zhì)控帶設(shè)置抗鼠IgG的第二抗體， 上下兩片盒體內(nèi)部由多個不同形狀的小凸起。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的瘦肉精檢測試劑盒，其特征在于吸收墊上有層藍(lán)色的著色簽。
專利摘要一種瘦肉精快速測試盒，包括卡盒和測試條，卡盒分為上下兩片，上片依次開有加樣孔、觀察窗口，測試條由樣品墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜和吸收墊搭接而成，固定于卡盒的下片，硝酸纖維素膜上標(biāo)有藍(lán)紫色或藍(lán)色的質(zhì)控帶和檢測帶，金標(biāo)墊上設(shè)置膠體金標(biāo)記的瘦肉精單克隆抗體，檢測帶設(shè)置有瘦肉精抗原，質(zhì)控帶設(shè)置抗鼠IgG的第二抗體，上下兩片盒體內(nèi)部由多個不同形狀的小凸起，結(jié)合在點(diǎn)膜的蛋白溶液中加入藍(lán)紫色或藍(lán)色等與紅色有明顯區(qū)別的染料，使得點(diǎn)膜后形成有色的質(zhì)控帶與檢測帶，能很好地解決判讀的困難和產(chǎn)品裝配、分類的問題，使后續(xù)檢查工作，組裝工作更加簡單、快速，使用時通過顏色能夠很容易區(qū)分不同產(chǎn)品，節(jié)約流程和時間，提高了產(chǎn)品使用的普遍性和可操作性。
文檔編號G01N33/577GK202471717SQ20112056163
公開日2012年10月3日 申請日期2011年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月29日
發(fā)明者張恂 申請人:北京沙屏研科技有限公司