專利名稱：用于液體過(guò)濾的組件和方法以及在顯微鏡檢查中的使用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于液體過(guò)濾的組件，該組件包括載體、濾膜和支撐體，其中支撐體被布置和/或形成在載體的凹部中。本發(fā)明還涉及一種用于利用上述組件進(jìn)行流體過(guò)濾的方法，還涉及對(duì)留在濾膜上的殘留物進(jìn)行顯微鏡檢查的使用。
背景技術(shù)：
顯微鏡方法是分析中廣泛使用的方法。特別地，在“生命科學(xué)”的領(lǐng)域中，這是不可缺少的工具以便例如表征組織和細(xì)胞。載物體已經(jīng)成為要被檢查的培養(yǎng)基與顯微鏡成像元件之間建立的“界面”。這些是尺寸為26X76mm并具有從I至I. 5mm厚度的玻璃片(ISO 8255-2)。這些物體，例如，以薄層施加于載物體并由蓋玻片覆蓋，蓋玻片通常尺寸為18X 18mm并具有O. 16mm的厚度。物體例如是由液體膜包圍的組織切片。 過(guò)濾也是廣泛使用的技術(shù)，尤其是用于使不同尺寸的固體彼此分離和/或與液體分離。當(dāng)顯微鏡方法和過(guò)濾相結(jié)合時(shí)，在過(guò)濾工序之后，用顯微鏡檢查過(guò)濾殘留物。為此，過(guò)濾介質(zhì)，例如濾膜必須從過(guò)濾裝置中移除并放置在載物體上。特別是對(duì)于薄的濾膜，例如對(duì)于厚度為10 μ m、直徑為25mm的濾膜，該工序需要相當(dāng)多的實(shí)驗(yàn)技巧并且是非常耗時(shí)的以及易發(fā)生錯(cuò)誤，這在實(shí)際中給測(cè)試過(guò)程帶來(lái)了更高的費(fèi)用。另外，手工交互在保證質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面使標(biāo)準(zhǔn)化變得復(fù)雜。手工交互的已知問(wèn)題是例如濾膜的局部破壞、以及阻礙隨后的顯微鏡檢查的濾膜與載物體之間氣泡的積聚。為了使該工序能夠日常地且不昂貴地用于醫(yī)療診斷，例如，在對(duì)從血液樣本中濾出的腫瘤細(xì)胞的檢查過(guò)程中，必須研發(fā)一種簡(jiǎn)單且廉價(jià)的解決方案，其還可以由未受過(guò)訓(xùn)練的人員實(shí)施。手動(dòng)工序步驟的最少化還得到改進(jìn)的標(biāo)準(zhǔn)化潛能，并避免結(jié)果質(zhì)量的任何減損。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是公開(kāi)一種用于液體過(guò)濾的組件和方法，其能夠以標(biāo)準(zhǔn)方法高質(zhì)量地使用并易于構(gòu)建和處理，而且不昂貴。特別地，本發(fā)明的目的是公開(kāi)一種用于液體過(guò)濾的組件和方法，特別適于隨后的顯微鏡檢查。在該情況下，該組件必須可以用在具有標(biāo)準(zhǔn)保持架的標(biāo)準(zhǔn)裝置中，從而例如按標(biāo)準(zhǔn)、簡(jiǎn)單且廉價(jià)地執(zhí)行過(guò)濾殘留物的光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡檢查。特別地，一個(gè)目的是幫助用于(循環(huán))腫瘤細(xì)胞的復(fù)原和檢查。所公開(kāi)的目的通過(guò)由權(quán)利要求I的特征限定的用于液體過(guò)濾的組件、由權(quán)利要求11的特征限定的用于借助組件進(jìn)行液體過(guò)濾的方法、以及由權(quán)利要求14的特征限定的組件和方法的用途來(lái)實(shí)現(xiàn)。根據(jù)本發(fā)明的用于液體過(guò)濾的組件和方法及其用途的有利實(shí)施例可以從各個(gè)依附的從屬權(quán)利要求得到。獨(dú)立權(quán)利要求的特征可與從屬權(quán)利要求的特征組合，從屬權(quán)利要求的特征可相互組合。根據(jù)本發(fā)明的用于液體或懸浮液的過(guò)濾的組件包括載體、濾膜和支撐體。支撐體布置和/或形成在載體的凹部中。濾膜平坦地和/或平地布置在支撐體上。在本文中，“平”是指濾膜布置在平面區(qū)域中，沒(méi)有類似于峰-谷的升高。根據(jù)本發(fā)明的組件的結(jié)構(gòu)能夠使薄的濾膜施加于標(biāo)準(zhǔn)形狀的載體，作為過(guò)濾器。在過(guò)濾過(guò)程中，支撐體對(duì)濾膜提供機(jī)械支撐，從而使大量的液體能夠在合理的時(shí)間內(nèi)被過(guò)濾。濾膜的水平施加一方面確保了在濾膜和支撐體之間存在許多公共支撐點(diǎn)。這使濾膜能夠構(gòu)造得很薄，在以高流速過(guò)濾大量液體時(shí)不會(huì)破裂?？梢詢H構(gòu)造成非常薄的濾膜例如是由具有精確限定的通孔或孔的薄膜通過(guò)粒子轟擊而產(chǎn)生的濾膜。借助支撐體以許多均勻分布的支撐點(diǎn)的形式進(jìn)行良好的支撐，對(duì)于這種濾膜用作過(guò)濾器是必需的。載體可以是由玻璃或塑料、特別是聚碳酸酯制成的載物體，特別是用于顯微鏡檢查的載物體。這些材料都是廉價(jià)的，易于加工并且在可見(jiàn)光范圍內(nèi)是透明的。支撐體可以是有紋理的，特別是多孔的。紋理決定了用于濾膜的支撐點(diǎn)的數(shù)量并能夠使所過(guò)濾的液體在通過(guò)濾膜后排出。支撐體可由塑料、特別是聚碳酸酯，或者陶瓷制成。塑料易于形成紋理，并能例如借助注塑成型廉價(jià)地生產(chǎn)且具有簡(jiǎn)單的紋理。具有限定的孔尺寸的微多孔陶瓷，生產(chǎn)起來(lái)是廉價(jià)的。使用載物體作為用于濾膜的載體促進(jìn)了在標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備中的簡(jiǎn)單操縱和使用。由玻璃或塑料制成的載物體在機(jī)械和化學(xué)上都是非常穩(wěn)定的，這在例如在顯微鏡檢查之前制備過(guò)濾殘留物時(shí)是重要的。透明的載體尤其能夠用在光學(xué)顯微鏡檢查中，尤其是在透射模式和直射光模式下。載體可以具有I至I. 5mm范圍內(nèi)的厚度，75至76mm范圍內(nèi)的長(zhǎng)度以及25至26mm范圍內(nèi)的寬度。濾膜可以具有I至20 μ m范圍內(nèi)、特別是IOym范圍內(nèi)的厚度以及25mm范圍內(nèi)的直徑。這些尺寸使載體適用于標(biāo)準(zhǔn)裝置中對(duì)載物體最常用的保持器。在檢查期間確 保了良好的保持，而沒(méi)有滑動(dòng)。具有規(guī)定尺寸的濾膜例如通過(guò)粒子轟擊易于生產(chǎn)，并易于平坦地布置在載體上。連同支撐體一起，它們具有足夠的穩(wěn)定性，以確保它們不會(huì)在高流速的流體通過(guò)濾膜的高效率過(guò)濾操作期間破裂或受到任何其它類型的損壞。載體中的凹部可具有與支撐體相同的尺寸。這有助于將支撐體良好地保持在載體中。另一方面，支撐體可以與載體材料一體地生產(chǎn)。在第二種情況中，獲得了永久性穩(wěn)定的組件。支撐體可具有圓形設(shè)計(jì)，濾膜也可具有圓形設(shè)計(jì)。這有助于用在具有圓形的流體饋送管和圓形的流體排放管的系統(tǒng)中。圓的實(shí)施例還有助于顯微鏡檢查，因?yàn)檎麄€(gè)圓形的區(qū)域可以在顯微鏡的視野中被光學(xué)地分辨。這還支持在圓形流動(dòng)腔中的使用，其中該實(shí)施例在層流方面具有優(yōu)勢(shì)并具有良好的清潔可能性。如上所述，載體和支撐體可以一體地構(gòu)造為一個(gè)單體。這使得生產(chǎn)更容易并增加了使用過(guò)程中的穩(wěn)定性。濾膜的邊緣區(qū)域可固定到載體，其中濾膜完全覆蓋載體中的凹部，并且特別是在凹部的區(qū)域中平坦地位于支撐體上。濾膜的邊緣區(qū)域可焊接到載體。濾膜的完全覆蓋能夠?qū)崿F(xiàn)液體的完全過(guò)濾，而不會(huì)有任何未過(guò)濾的液體通過(guò)凹部的邊緣區(qū)域漏出。如果濾膜焊接到載體，則提供了可以是液體不能透過(guò)的良好固定。支撐體可以包括形成在面對(duì)濾膜的面上的通道，該通道與濾膜流體接觸。這些通道有助于從濾膜過(guò)濾出的液體良好排放以及將要被過(guò)濾的液體良好通過(guò)濾膜。支撐體可以特別地包括從支撐體的中心區(qū)域沿載體的方向或沿濾膜的邊緣區(qū)域的方向(在下文中也應(yīng)當(dāng)被理解為是指沿載體的方向)輻射出的通道。這能夠?qū)崿F(xiàn)大量的通道經(jīng)過(guò)由濾膜覆蓋的區(qū)域。從支撐體的中點(diǎn)觀察，沿載體的方向的通道的數(shù)量可以增加，特別是通道的數(shù)量隨著與支撐體的中點(diǎn)的距離的平方而增加。這在被濾膜覆蓋的支撐體的表面上產(chǎn)生了具有高且均勻的表面密度的通道。另外，支撐體可包括構(gòu)造在圓形路徑上的用于使輻射通道彼此流體連接的通道。具有以星形和圓形延伸的通道的組件有助于被過(guò)濾的液體從濾膜良好地排出。以星形延伸的圓形通道的網(wǎng)絡(luò)有助于支撐體表面上的通道具有高表面密度以及使沒(méi)有通道的支撐體面積最小化。通道可以構(gòu)造成具有深度和/或?qū)挾?，或者通道橫截面面積，其從支撐體的中心區(qū)域沿載體的方向增加。這具有與之前描述的通道數(shù)量從支撐體的中心區(qū)域朝邊緣區(qū)域增加所實(shí)現(xiàn)的效果相同的效果，或者說(shuō)支持該效果。特別地，通道的橫截面或其通道橫截面面積可以隨著與支撐體或支撐體表面(與濾膜表面相對(duì))的中 心區(qū)域或中點(diǎn)的距離的平方而增加。這意味著橫截面或橫截面面積與距支撐體或支撐體表面的、因此也特別是距濾膜表面的中點(diǎn)的距離r的平方成比例。優(yōu)選地，通道橫截面面積的增加還可以大于距離r的平方。通道實(shí)施例的另一可能性是通道橫截面面積的總和隨著通道與支撐體和/或?yàn)V膜的中點(diǎn)的距離r二次方地增加的實(shí)施例。應(yīng)當(dāng)指出，通常，膜表面或膜的中點(diǎn)與支撐體表面或支撐體的中點(diǎn)相同。通道橫截面隨著與支撐體中點(diǎn)的距離增加而增加，還有助于被過(guò)濾的流體沿過(guò)濾器的邊緣區(qū)域的方向(從過(guò)濾器的中心觀察)未受阻礙地排出，其中由于更大的面積以及流體來(lái)自于中心區(qū)域，因此在邊緣區(qū)域，與在中心區(qū)域相比，更多的液體流過(guò)過(guò)濾器。在支撐體的圓周區(qū)域中，完全穿過(guò)支撐體和/或載體的厚度的流體排出孔可以構(gòu)造在支撐體和/或載體中。這些排出孔可以每個(gè)都流體連接到一個(gè)或更多個(gè)通道。在通道中收集并運(yùn)送的液體可以經(jīng)由排出孔運(yùn)送離開(kāi)濾膜，即從載體的正面運(yùn)送至載體的背面。促進(jìn)了液體未受阻礙地流過(guò)濾膜和遠(yuǎn)離濾膜流動(dòng)以及由此良好地通過(guò)濾膜和以高流速進(jìn)行過(guò)濾。支撐體的邊緣區(qū)域中的排出孔的組件促進(jìn)了具有大的或相對(duì)較大的橫截面的排出孔的實(shí)施例，而不會(huì)顯著地限制濾膜的穩(wěn)定性和支撐體的支撐作用。濾膜和支撐體可包括具有接觸區(qū)域或直接機(jī)械接觸點(diǎn)的平面公共區(qū)域，以下稱作接觸表面。在此，特別地，濾膜可具有小于ΙΟΟμπι的與平面接觸表面的最大距離。平面區(qū)域促進(jìn)過(guò)濾殘留物集結(jié)在平坦的平面中，其中，例如，在顯微鏡檢查期間，借助對(duì)位于平面中的過(guò)濾目標(biāo)的良好聚焦，實(shí)現(xiàn)了良好的成像。在濾膜和支撐體之間的接觸區(qū)域中，支撐體可構(gòu)造成條的形狀，特別是具有三角形橫截面(沿條的高度的截面)、在與濾膜的接觸點(diǎn)處的寬度小于或等于ΙΟΟμπι的條的形狀?？蛇x擇地，條還可構(gòu)造成柱的形狀(沿柱的高度或縱向延伸方向的矩形橫截面)。具有小寬度的支撐點(diǎn)的實(shí)施例促進(jìn)通過(guò)濾膜的液體良好排出以及殘留物在過(guò)濾器上更均勻地分布。濾膜和支撐體之間的直接機(jī)械接觸的面積的最小化可借助支撐體的良好支撐作用來(lái)實(shí)現(xiàn)，其中獲得了支撐作用與最小直接接觸之間的最佳效果，即液體良好通過(guò)濾膜以及液體從濾膜良好排出。濾膜可以是徑跡蝕刻濾膜，其由聚碳酸酯薄膜制成，并包括具有微米級(jí)、特別是8 μ m的直徑、以及1%至80% (有孔面積與總面積之比)的孔密度、特別是每平方厘米IO5個(gè)孔的孔密度的孔。蝕刻濾膜無(wú)需過(guò)度努力就可生產(chǎn)為具有精確限定的孔直徑，并且在厚度小的情況下具有良好的機(jī)械穩(wěn)定性。組件可以直至90° C的溫度都是熱穩(wěn)定的。這有助于在顯微鏡檢查之前對(duì)特定的過(guò)濾殘留物進(jìn)行化學(xué)和生物化學(xué)方面的準(zhǔn)備。對(duì)于借助上述組件進(jìn)行的用于液體過(guò)濾的方法，血液可用作液體，特別是混合有用于裂解紅細(xì)胞的裂解緩沖液的血液，其中細(xì)胞從流體中被過(guò)濾出。過(guò)濾出的細(xì)胞是血液中的癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞，特別是白血球，作為過(guò)濾殘留物，其中，沒(méi)有或僅有少量的健康細(xì)胞被濾膜保留，作為液體的過(guò)濾殘留物。具有8 μ m孔尺寸的徑跡蝕刻濾膜的濾膜實(shí)施例有助于腫瘤細(xì)胞從流體中分離，而沒(méi)有或幾乎沒(méi)有健康細(xì)胞離開(kāi)濾液而保留。濾膜下方的支撐體中的通道或通道網(wǎng)絡(luò)的特別均勻的實(shí)施例有助于被過(guò)濾的液體良好、均勻地通過(guò)，特別是均勻地通過(guò)整個(gè)濾膜表面。這反過(guò)來(lái)促進(jìn)了過(guò)濾殘留物，即例如腫瘤細(xì)胞，在濾膜表面上的極均勻的分布，使得有助于隨后的檢查以及例如個(gè)體細(xì)胞的良好的光學(xué)分辨。
為了更好的檢測(cè)，過(guò)濾殘留物可在過(guò)濾結(jié)束后被染色。特別地，在顯微鏡檢查的情況中，這簡(jiǎn)化了對(duì)例如腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)。濾膜、支撐體和/或載體的直至90° C的溫度穩(wěn)定性和良好的耐化學(xué)性有助于準(zhǔn)備過(guò)濾殘留物進(jìn)行檢查，諸如，例如細(xì)胞破碎和DNA或蛋白質(zhì)的復(fù)制和標(biāo)記。裂解緩沖液的使用促進(jìn)了細(xì)胞壁的崩解，PCR可用于例如DNA的復(fù)制。標(biāo)記能夠例如經(jīng)由含偶聯(lián)染料，例如亞甲藍(lán)的互補(bǔ)DNA片段而進(jìn)行?？蛇x擇地，裂解能夠溶解紅細(xì)胞并由此減少待過(guò)濾的細(xì)胞的數(shù)目。白細(xì)胞不能通過(guò)裂解而溶解，表示直徑達(dá)到正常白細(xì)胞的20倍的放大細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞可與健康的白細(xì)胞分離(濾液，其通過(guò)濾膜)，作為過(guò)濾殘留物。為腫瘤細(xì)胞的光學(xué)檢查做準(zhǔn)備的準(zhǔn)備步驟可以包括非常復(fù)雜的化學(xué)和熱步驟。上述組件和/或方法可用于過(guò)濾和過(guò)濾殘留物的顯微鏡檢查，尤其是光學(xué)顯微鏡檢查或熒光顯微鏡檢查，其中，極其平坦的濾膜促進(jìn)了對(duì)過(guò)濾殘留物的良好和簡(jiǎn)單的聚焦以及對(duì)過(guò)濾殘留物的良好、在視覺(jué)上敏銳的描述。支撐體的小條尺寸以及由此可獲得的與濾膜流體接觸的通道的大面積，能夠使流體均勻流過(guò)濾膜，并能夠?qū)Ω采w有非常少或沒(méi)有的不期望微粒的均勻分布的過(guò)濾殘留物進(jìn)行復(fù)原和檢查。這對(duì)于用透射光或直射光進(jìn)行顯微鏡檢查具有特別的優(yōu)勢(shì)。與借助所述組件用于流體過(guò)濾的方法及其用途有關(guān)的優(yōu)點(diǎn)，類似于以上針對(duì)組件所描述的優(yōu)點(diǎn)。以下參照附圖更詳細(xì)地解釋根據(jù)從屬權(quán)利要求的特征的具有有利改進(jìn)的本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，但不限于此。


附圖示出圖I以俯視圖示意性地示出根據(jù)本發(fā)明的組件，其中載體、支撐體和濾膜位于其上;圖2是通過(guò)圖I中所示組件的示意性截面圖；圖3是具有通道和排出孔的支撐體的詳細(xì)示意圖，以及圖4是通過(guò)圖3中所示支撐體的示意性截面圖。
具體實(shí)施例方式圖I中所示的根據(jù)本發(fā)明的組件包括載體I和布置在載體I的凹部中的支撐體3。載體I被構(gòu)造成平坦的用于光學(xué)顯微鏡檢查的載物體的形式。在與支撐體3相距一距離的地方，一區(qū)域可構(gòu)造為把手4，在這個(gè)地方例如表面是粗糙的。載物體通常具有76_范圍內(nèi)的長(zhǎng)度L和26mm范圍內(nèi)的寬度B?？蛇x擇地，載物體也可具有75mm范圍內(nèi)的長(zhǎng)度和25mm范圍內(nèi)的寬度。圖2示出了沿載體I的長(zhǎng)度L的截面圖，其中載體I具有厚度Dx。通常，載物體具有I至I. 5_范圍內(nèi)的厚度Dx。還可以使用其它尺寸的標(biāo)準(zhǔn)載物體。如圖I和2所示，圓形的薄膜型濾膜2平坦地布置在載體I和支撐體3的正面6上。圓形濾膜2具有例如25mm范圍內(nèi)的圓直徑0M和10 μ m范圍內(nèi)的厚度DM。在邊緣區(qū)域5中，濾膜2例如通過(guò)焊接或粘結(jié)而機(jī)械地連接到載體。圓形的支撐體3布置在濾膜2的下面。支撐體具有例如23_范圍內(nèi)的圓直徑0S和與載體厚度相對(duì)應(yīng)的厚度Dx。濾膜2平坦地位于支撐體3上，其中與支撐體3和濾膜2之間的平面接觸表面的偏差可以是例如最大100 μ m。支撐體2和載體I可以形成為一個(gè)整體件，或者圓形支撐體3可以完全穿過(guò)載體的厚度Dx而布置在圓形凹部中，特別是以機(jī)械穩(wěn)定的方式連接到載體2。除了支撐體3和凹部的圓形形狀之外，其它形狀，例如矩形或三角形形狀都是可以的。支撐體3和載體I的·凹部之間的確實(shí)接觸在此具有優(yōu)勢(shì)。如圖I和2所示，通道8、10形成在支撐體3的位于正面6的表面中。為了簡(jiǎn)單起見(jiàn)，圖I中僅僅是顯示出通道8、10，而沒(méi)有全部示出。圖3是支撐體3中的通道8、10的可能圖案的詳細(xì)示意圖，盡管為了簡(jiǎn)單起見(jiàn)，僅具有少量的通道8、10。通道8在支撐體3的表面中從濾膜2或支撐體3的圓形形狀的中點(diǎn)11沿邊緣區(qū)域5的方向以星形延伸。為了使表面上的通道8沿邊緣區(qū)域5的方向的通道密度保持基本恒定，通道8的數(shù)量沿邊緣5的方向從中點(diǎn)11增加。由于通道8的橫截面隨著與中點(diǎn)11的距離r而增加，最大距離r小于直徑0S的一半。通道8的數(shù)量和/或橫截面的增加使過(guò)濾通過(guò)濾膜2的流體容易進(jìn)行均勻地流動(dòng)?？蛇x擇地或與通道8的數(shù)量沿邊緣5的方向增加一起，沿邊緣5的方向載體表面中的凹陷或通道橫截面可以優(yōu)選地隨著與中點(diǎn)11的距離r呈二次方地增加，或者位于具有圓心11和半徑r (中點(diǎn)11與圓周之間的距離r)的圓的圓周上的通道8的所有橫截面面積的總和可以以距離r的平方增加。完全穿過(guò)載體I或支撐體3的厚度Dx的排出孔9接近于濾膜2的邊緣區(qū)域5布置在支撐體3中或載體I中或支撐體3和載體I之間的接觸區(qū)域中。通道8終止于排出孔
9。流動(dòng)通過(guò)濾膜2的流體可以從載體6的正面通過(guò)通道8和排出孔9并到達(dá)載體I的背面7，然后可以從此處被輸送走。促進(jìn)了流體良好地均勻通過(guò)濾膜2以及良好地過(guò)濾。特別地，實(shí)現(xiàn)了整個(gè)濾膜表面上的均勻壓降。通道8通過(guò)圓形通道10彼此連接。圓形通道10使流體在濾膜2下方的流動(dòng)得以改進(jìn)，特別是更加均勻。類似于通道8，通道10的橫截面和/或數(shù)量可以隨著與中點(diǎn)11的距離r增加而增加，尤其是以距離r的平方增加。類似于通道8，通道10的和/或通道8的橫截面的總和可以隨著與中點(diǎn)11的距離r增加而增加，尤其是以距離r的平方增加。為了促進(jìn)通過(guò)濾膜2的流體在表面上均勻流動(dòng)以及經(jīng)由支撐體3沿載體I的背面7的方向良好排出，使濾膜2和支撐體3之間的直接接觸最小化是有利的。這能夠?qū)崿F(xiàn)濾液在濾膜表面上的均勻分布。如果通道8、10被構(gòu)造為這樣高的數(shù)量和密度，使得如圖4所示在支撐體3的表面上現(xiàn)在僅僅是條11構(gòu)造在通道8和/或10之間，則濾膜2和支撐體3之間的表面上的最小機(jī)械接觸例如得以保持。圖4示出了沿橫斷線IV-IV’通過(guò)圖3所示的支撐體3的截面，其中，為了更好地表現(xiàn)，僅示出了少量的通道10和條13。如圖4所示，條13的高的數(shù)量和密度，尤其是條13的三角形形式，促進(jìn)了濾膜2和支撐體3之間的最小直接機(jī)械接觸，且組件具有高的機(jī)械穩(wěn)定性。以這種方式實(shí)現(xiàn)了在除邊緣區(qū)域5以外的濾膜2的整個(gè)表面上的特別均勻的流體流動(dòng)。如果使用聚碳酸酯生產(chǎn)載體I和支撐體3，則組件的生產(chǎn)可以特別簡(jiǎn)單且廉價(jià)。特別地，如果支撐體3和載體I由一個(gè)單體生產(chǎn)，則通道8、10可以被銑到支撐體的表面中?？蛇x擇地，通道8、10可以例如由一次型鑄或激光加工來(lái)形成。排出孔9可以例如通過(guò)鉆、銑、激光加工或一次型鑄來(lái)產(chǎn)生。濾膜2可以通過(guò)粒子轟擊由薄膜生產(chǎn)，特別是由聚碳酸酯薄膜制成徑跡蝕刻濾膜。在邊緣區(qū)域5，濾膜2可以通過(guò)例如粘結(jié)或焊接而被機(jī)械地固定到載體I?？蛇x擇地，如果陶瓷用作支撐體3的材料，則多孔層可以形成在支撐體3的表面上，其類似于通道8、10，允許流體均勻排出。如果支撐體3完全由多孔材料制成，則排出孔9和通道8、10可以由該多孔結(jié)構(gòu)提供。
具有限定的孔直徑的由聚碳酸酯薄膜形成的徑跡蝕刻濾膜的使用，使根據(jù)本發(fā)明的組件容易用于例如從血液中濾出腫瘤細(xì)胞。例如，借助例如8μπι的孔直徑，血液中的健康細(xì)胞(例如，白血球和紅血球)可以基本上通過(guò)濾膜2，而非常大且無(wú)彈性的腫瘤細(xì)胞被濾膜2阻擋。以此方式，從血液中過(guò)濾出腫瘤細(xì)胞并使其保留在濾膜中(過(guò)濾殘留物)。濾膜2表面上的均勻的流體流動(dòng)使得容易以這樣的方式濾出腫瘤細(xì)胞，即，在過(guò)濾之后腫瘤細(xì)胞基本上均勻地分布在濾膜2上。這簡(jiǎn)化了腫瘤細(xì)胞的光學(xué)檢查。除血液以外可選擇地，還可以過(guò)濾其它液體和氣體或包含在液體中的固體。至少在達(dá)到90° C的區(qū)域中將溫度穩(wěn)定型材料用于根據(jù)本發(fā)明的組件，這使得濾膜2上例如細(xì)胞的DNA復(fù)制和標(biāo)記以及溶解細(xì)胞破碎容易?？蛇x擇地，細(xì)胞本身可以例如用染料進(jìn)行特定地染色。這簡(jiǎn)化了對(duì)過(guò)濾殘留物的光學(xué)檢查，特別是光學(xué)顯微鏡檢查或熒光顯微鏡檢查。處于平坦的平面中的濾膜2的平坦、平面的實(shí)施例促進(jìn)了過(guò)濾殘留物的良好聚焦和描述。
權(quán)利要求
1.一種用于液體過(guò)濾的組件，包括載體(I)、濾膜(2)和支撐體(3)，其中支撐體(3)布置和/或形成在載體(I)的凹部中， 其特征在于， 濾膜(2)基本上平坦地和/或平地布置在支撐體(3)上。
2.根據(jù)權(quán)利要求I的組件，其特征在于，載體(I)是由玻璃或塑料、特別是聚碳酸酯制成的用于顯微鏡檢查的載物體，和/或支撐體(3)是有紋理的和/或多孔的，并且由塑料特別是聚碳酸酯或陶瓷制成。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的組件，其特征在于，載體(I)具有位于I至I.5mm的范圍內(nèi)的厚度Dx,位于75至76mm的范圍內(nèi)的長(zhǎng)度L和位于25至26mm的范圍內(nèi)的寬度B，并且，濾膜(2)具有位于I至20 μ m范圍內(nèi)、優(yōu)選是10 μ m范圍內(nèi)的厚度Dm和位于25mm范圍內(nèi)的直徑0M。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件，其特征在于，載體(I)中的凹部具有與支撐體(3)相同的尺寸和/或被構(gòu)造成圓形，和/或?yàn)V膜(2)是圓形的。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件，其特征在于，載體(I)和支撐體(3)—體形成為一個(gè)單體，和/或?yàn)V膜(2)的邊緣區(qū)域(5)被固定到載體(I)，其中，濾膜(2)完全覆蓋載體(I)中的凹部，并且特別是平坦地位于在凹部的區(qū)域中的支撐體(3)上，和/或其邊緣區(qū)域(5)被焊接到載體(I)。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件，其特征在于，支撐體(3)在面對(duì)濾膜(2)的面(6)上具有與濾膜(2)流體接觸的通道(8，10)，特別是從支撐體(3)的中心區(qū)域沿載體(I)的方向延伸和/或通道(8)的數(shù)量從支撐體的中點(diǎn)(11)沿載體(I)的方向增加的通道(8)和/或構(gòu)造在圓形路徑上的用于使通道(8)彼此流體連接的通道(10)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的組件，其特征在于，通道(8，10)被構(gòu)造為具有從支撐體的中心區(qū)域(11)沿載體(I)的方向增加的深度和/或?qū)挾?，特別是通道(8，10)的橫截面，隨著與中心區(qū)域(11)的距離r的平方而增加和/或更多地增加，和/或通道(8和/或10)具有通道橫截面積，特別是圓周上的通道橫截面積，其總和隨著通道(8和/或10)與支撐體(3)的中點(diǎn)(11)的距離r 二次方地增加，和/或完全穿過(guò)支撐體(3)和/或載體(I)的厚度的用于濾液的排出開(kāi)口(9)構(gòu)造在支撐體(3)和/或載體(I)中的支撐體(5)的圓周區(qū)域中，所述排出孔中的每個(gè)與一個(gè)或多個(gè)通道(8，10)流體連接。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件，其特征在于，濾膜(2)和支撐體(3)包括位于接觸表面(12)的平坦平面中的多個(gè)公共接觸點(diǎn)(12)，其中，特別地，濾膜(2)與平面接觸表面(12)的最大距離小于ΙΟΟμπι，并且，支撐體(3)在濾膜⑵與支撐體(3)之間的接觸區(qū)域中構(gòu)造成條(13)的形狀，特別是具有三角形橫截面、寬度在50 μ m至500 μ m范圍內(nèi)的條(13)的形狀，和/或柱的形狀。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件，其特征在于，濾膜(2)是由聚碳酸酯薄膜制成的徑跡蝕刻濾膜，包括具有微米級(jí)、特別是8 μ m的直徑以及每平方厘米IO5個(gè)孔的孔密度的孔。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件，其特征在于，該組件直至90°C的溫度都是熱穩(wěn)定的。
11.一種用根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件進(jìn)行流體過(guò)濾的方法，其特征在于，血液用作流體，特別是混合有用于裂解紅細(xì)胞的裂解緩沖液的血液，其中，細(xì)胞從流體中濾出。
12.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其特征在于，過(guò)濾出的濾出細(xì)胞是血液中的癌細(xì)胞，并且沒(méi)有或僅有少數(shù)的健康細(xì)胞，特別地，白細(xì)胞被濾膜(2)保留作為流體的殘留物。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12的方法，其特征在于，濾膜上的過(guò)濾殘留物在過(guò)濾完成后被染色。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組件和/或方法的用途，用于過(guò)濾和過(guò)濾殘留物的顯微鏡檢查，特別是光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡檢查。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的用途，其特征在于，所述顯微鏡檢查借助熒光顯微術(shù)來(lái)進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于液體過(guò)濾的組件和方法及其用途，其中支撐體(3)被設(shè)計(jì)在載體(1)的凹部中，濾膜(2)平坦地位于支撐體(3)上。根據(jù)本發(fā)明的濾膜(2)和支撐體(3)被設(shè)計(jì)為液體可滲透的并由此用作過(guò)濾器，尤其是用于從血液中過(guò)濾腫瘤細(xì)胞。載體(1)可具有用于顯微鏡檢查的載物體的標(biāo)準(zhǔn)形狀，濾膜上的過(guò)濾殘留物可以被容易地處理并在顯微鏡中檢查。由于濾膜(2)水平地位于支撐體(3)上，因此過(guò)濾殘留物可以特別好地進(jìn)行顯微鏡檢查。
文檔編號(hào)G01N33/483GK102791378SQ201180013546
公開(kāi)日2012年11月21日 申請(qǐng)日期2011年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月28日
發(fā)明者K.希爾塔夫斯基, K.弗雷德里克, P.保利卡, W.古姆布雷克特 申請(qǐng)人:西門子公司