專利名稱：用于癌癥診斷的方法和試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷和提供預(yù)后的方法和試劑盒。
背景技術(shù)：
癌癥是最常見(jiàn)的致命疾病之一，盡管其在診斷和治療上有著新的進(jìn)展，但是每年仍然有很大數(shù)量的死亡。例如，前列腺癌是男性中十種診斷的癌癥疾病中最常見(jiàn)的癌癥疾病，前列腺癌表
現(xiàn)出來(lái)源于局部腫瘤或腫瘤轉(zhuǎn)移性擴(kuò)散的癥狀，如排泄功能障礙或骨痛，并且常常當(dāng)診斷出該疾病時(shí)已到了晚期。有時(shí)，前列腺癌會(huì)在直腸指檢或?qū)加辛夹郧傲邢僭錾哪行赃M(jìn)行外科手術(shù)期間所得組織的組織學(xué)檢查中被意外地發(fā)現(xiàn)。前列腺特異性抗原(prostate specific antigen, PSA)的測(cè)定改變了前列腺癌診斷的模式，使得更多病例在早期發(fā)現(xiàn)而較少病例在晚期發(fā)現(xiàn)。然而，由于PSA不是血清中的前列腺癌特異性標(biāo)志物，所以它不是理想的診斷標(biāo)志物并且因此不適合對(duì)前列腺癌進(jìn)行篩選。PSA試驗(yàn)不能區(qū)分良性前列腺增生和早期前列腺癌，另外不能區(qū)分具有高轉(zhuǎn)移可能的前列腺癌(侵襲性前列腺癌)和不具有或具有微弱侵襲性的癌癥(生長(zhǎng)緩慢性前列腺癌)?！安淮_定的”PSA增加經(jīng)常導(dǎo)致多次前列腺活檢，在許多情況下這對(duì)患者以及類似地對(duì)社會(huì)都是不利的。尤其，由于在隨訪檢查期間使用活檢，PSA試驗(yàn)具有可能使患者發(fā)生敗血癥的風(fēng)險(xiǎn)。另外，PSA試驗(yàn)的缺點(diǎn)常常引起切除手術(shù)(truncating surgery),即前列腺全切除。由于額外的費(fèi)用，這種類型的過(guò)度治療不僅對(duì)患者而且對(duì)社會(huì)造成很大的不便。前列腺小體(prostasome)(一類外吐小體(exosome))是前列腺的分泌產(chǎn)物。這些細(xì)胞器的膜結(jié)構(gòu)很復(fù)雜并且膜材料的二維凝膠電泳顯示出多于100種不同的蛋白質(zhì)實(shí)體。前列腺小體包括神經(jīng)內(nèi)分泌分子和⑶(cluster of differentiation,分化群)分子,并且許多不同的酶是前列腺小體膜嵌合體系的一部分。前列腺小體具有許多不同的生物活性，但是其生理功能仍然不清楚。在W02007/015174中，公開(kāi)了外吐小體特異性配體和包含其的組合物。US7，083，796公開(kāi)了至少包含分歧桿菌(Mycobacterium sp.)抗原的組合物和融合蛋白以及編碼此類組合物和融合蛋白的RNA。在US6，620，922中，公開(kāi)了用于治療和診斷癌癥(如前列腺癌)的組合物和方法。US 6，107，090公開(kāi)了識(shí)別前列腺特異性膜抗原的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域或者結(jié)合前列腺特異性膜抗原并與其一起內(nèi)化的抗體及其結(jié)合部分、探針、配體或其他生物制劑的用途。在 2001 年 Lena Carlsson、Doctoral Thesis 發(fā)表的“Perspectives onthe Biological Role of Human Prostasomes”公開(kāi)了前列腺小體具有有效的抗菌作用。Lena Carlsson 等在 “Flow cytometric technique for determination of prostasomalquantity, size and expression of CD10, CD13, CD26and CD59in human seminal plasma，，，international journal of andrology (2006)中研究了⑶標(biāo)志物的前列腺小體表達(dá)。根據(jù)上面的陳述可見(jiàn)，需要改進(jìn)的非侵入性診斷工具以用于檢測(cè)前列腺癌。上述出版物(其內(nèi)容以法律許可的最大程度并入本文)沒(méi)有公開(kāi)任何用于檢測(cè)前列腺癌的非侵入性診斷工具。

發(fā)明內(nèi)容
根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供用于對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷和提供預(yù)后的方法，包括體外檢測(cè)前列腺小體和對(duì)至少一種抗原的前列腺小體表達(dá)進(jìn)行定量，以及將所定量的表達(dá)值與來(lái)源于健康對(duì)象的相應(yīng)抗原的參考值進(jìn)行比較。本文將健康對(duì)象定義為沒(méi)有癌癥的主觀和/或臨床體征(例如不患有前列腺癌)的對(duì)象。作為新型生物標(biāo)志物的前列腺小體的體外檢測(cè)以及對(duì)至少一種抗原的前列腺小體表達(dá)進(jìn)行定量可分別在單個(gè)步驟中或兩個(gè)獨(dú)立步驟中進(jìn)行。用于體外檢測(cè)前列腺小體的抗體可與在隨后對(duì)前列腺小體抗原表達(dá)進(jìn)行定量中所使用的抗體相同或不同。例如，發(fā)現(xiàn)單克隆抗體 mAb78 (參見(jiàn),例如 Floryk D 等，Differentiation of human prostate cancer PC_3cells induced by inhibitors of inosine 5’ -monophosphate dehydrogenase.Cancer Res. 2004 ；64 :9049-9056)和mAb8H10可用于體外檢測(cè)前列腺小體。在檢測(cè)和對(duì)前列腺小體表達(dá)進(jìn)行定量之前的步驟中，提供來(lái)自懷疑患有前列腺癌的對(duì)象的樣品。本發(fā)明的方法是非侵入性的，即不需要活檢。所述樣品可以是體液，如天然或經(jīng)處理形式的前列腺分泌物、尿液、精液流體、血液(參見(jiàn)表4)。所述樣品的處理可以是例如離心。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，在提供所述樣品與檢測(cè)和定量前列腺小體抗原表達(dá)的隨后步驟之間對(duì)所述樣品進(jìn)行前列腺小體富集。該富集可通過(guò)將所述前列腺小體固定在固相支持物上進(jìn)行，例如固定在硝酸纖維素膜上、放射免疫測(cè)定管中、顆粒(如納米顆粒)上或者ELISA板上。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種抗原選自⑶13、⑶59、⑶10、⑶26、CD142、CD143 和 MHC I。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷和提供預(yù)后的方法是基于與參考值相比在患有前列腺癌的對(duì)象中抗原⑶10、⑶26、⑶142 (也稱為組織因子(Tissue Factor))和MHC I至少之一的上調(diào)。因此，根據(jù)本發(fā)明，參考值(即對(duì)照)與在來(lái)自前列腺癌患者的前列腺小體上表達(dá)的CD26之間的商可為0. 95或更小。同樣，對(duì)于⑶142，參考值(即對(duì)照)與在來(lái)自前列腺癌患者的前列腺小體上表達(dá)的⑶142之間的商可為0.75或更小。對(duì)于待診斷或預(yù)測(cè)的前列腺癌而言，對(duì)于MHC I，參考值(即對(duì)照)與在來(lái)自前列腺癌患者的前列腺小體上表達(dá)的MHC I之間的商可為0. 75或更小。在一個(gè)替代性實(shí)施方案中，對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷和提供預(yù)后的方法是基于與參考值相比在患有前列腺癌的對(duì)象中抗原CD13和CD59至少之一的下調(diào)。因此，根據(jù)本發(fā)明，參考值(即對(duì)照)與在來(lái)自前列腺癌患者的前列腺小體上表達(dá)的⑶13之間的商可為I. 59或更大。同樣，對(duì)于CD59，參考值(即對(duì)照)與在來(lái)自前列腺癌患者的前列腺小體上表達(dá)的⑶59之間的商可為I. 30或更大。所使用的參考值可來(lái)源于通過(guò)利用PSA、臨床和回憶數(shù)據(jù)確認(rèn)沒(méi)有患前列腺癌的健康對(duì)象。
上述抗原的表達(dá)可通過(guò)測(cè)量與所述抗原反應(yīng)的抗體來(lái)進(jìn)行測(cè)定。所述抗體可以是帶標(biāo)記的以用于檢測(cè)。所述檢測(cè)可用例如熒光來(lái)進(jìn)行，例如流式細(xì)胞術(shù)，并且用ROC曲線評(píng)估。本領(lǐng)域技術(shù)人員了解，用于計(jì)算上述商的平均熒光強(qiáng)度可隨所使用的分析設(shè)備而變化。然而，所述商可能在很大程度上保持不變。同樣，本領(lǐng)域技術(shù)人員了解，可使用其他方法測(cè)定所述抗原的表達(dá)。上述商同樣可在很大程度上保持不變。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，計(jì)算至少兩種所述抗原之間的商并且將所述商與參考商值進(jìn)行比較。商可基于，例如用來(lái)自前列腺癌患者的下調(diào)的前列腺小體抗原除以來(lái)自同一前列腺癌患者的上調(diào)的前列腺小體抗原。之后將該商值與來(lái)自未患前列腺癌的正?；颊叩膮⒖忌讨颠M(jìn)行比較。使用此類商可給予該方法以改進(jìn)的預(yù)后值。因此，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，基于所檢測(cè)的所述抗原的量，確定商(⑶13+⑶59)/(⑶10+⑶26)并且與參考值進(jìn)行比較。⑶13和⑶59在來(lái)自前列腺癌患者的 前列腺小體上均下調(diào)，而CDlO和CD26在來(lái)自前列腺癌患者的前列腺小體上均上調(diào)。本領(lǐng)域技術(shù)人員了解，可使用抗原的其他組合而不僅是本文所特定公開(kāi)的一種組合來(lái)計(jì)算并使用商。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，能夠特異性結(jié)合至少一種所述抗原的至少一種抗體用于檢測(cè)所述抗原并對(duì)其表達(dá)進(jìn)行定量。所述抗體可以是單克隆抗體或多克隆抗體。作為對(duì)完整抗體的替代，可使用Fab、Fab2或單鏈Fv抗體。所述完整抗體或其部分應(yīng)都具有抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在本發(fā)明又一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種抗體用可區(qū)分的熒光標(biāo)志物來(lái)標(biāo)記。可使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)和定量所述抗體以得到表達(dá)模式。在一個(gè)替代性實(shí)施方案中，使用ELISA檢測(cè)和定量所述抗體。根據(jù)本發(fā)明，使用例如銪和釤，還可利用DELPHIA分析。根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供用于對(duì)懷疑患前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷和提供預(yù)后的試劑盒，包含特異性結(jié)合至少一種選自⑶13、⑶59、⑶10、⑶26、⑶142、⑶143和MHC I的抗原的至少一種抗體。所述抗體可以是單克隆抗體或多克隆抗體，或者可替換地，F(xiàn)ab、Fab2或單鏈Fv抗體可形成所述試劑盒的一部分。在以下實(shí)施例中結(jié)合附圖進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述，其目的不在于以任何方式限制本發(fā)明的范圍。


圖I示出⑶13和⑶10之比的ROC曲線。用于區(qū)分前列腺癌患者與正常個(gè)體(未患前列腺癌)的AUC (曲線下面積)為O. 874，并且在截?cái)嘞?cut off limit)為2. 04時(shí)該比值的靈敏度為83. 3%，特異性為91. I %。圖2示出⑶59和⑶10之比的ROC曲線。用于區(qū)分前列腺癌患者與正常個(gè)體(未患前列腺癌)的AUC為O. 863，并且在截?cái)嘞逓?. 32時(shí)該比值的靈敏度為100%，特異性為
64. 6% ο
實(shí)施例樣品準(zhǔn)備
提供來(lái)自79位不具有已知前列腺癌患者(根據(jù)PSA值以及臨床和回憶信息)和10位確診前列腺癌患者的精液樣品。為了分離精子和精液漿(seminal plasma)，將人精液在室溫下孵育約30分鐘并在20°C的溫度下在IOOOXg下離心20分鐘后從人精液中獲得精液流體(seminal fluid)。由此準(zhǔn)備好了精液漿以用于下述的流式細(xì)胞術(shù)分析。尿液、前列腺分泌物和肝素化血液樣品分別在20°C的溫度下在2500X g下離心10分鐘。分別準(zhǔn)備好了來(lái)自前列腺分泌物、尿液和肝素化血液的上清液以用于流式細(xì)胞術(shù)分析。此外，通過(guò)離心獲得的血漿在固相上用ELISA進(jìn)行測(cè)試以及在硝化纖維紙上用針對(duì)前列腺小體特異性抗體進(jìn)行點(diǎn)印跡/免疫印跡(參見(jiàn)下述ELISA和免疫印跡章節(jié))。
用于流式細(xì)胞術(shù)的樣品的準(zhǔn)備將30 μ L稀釋的精液漿或各個(gè)上清液(均在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中以I : 25稀釋)添加至含有10 μ L FITC標(biāo)記的抗體的聚苯乙烯管中。將每種抗體添加至單獨(dú)的管中，因而隨后單獨(dú)分析每種標(biāo)志物。使用下述能夠結(jié)合各蛋白質(zhì)的胞外結(jié)構(gòu)域的單克隆抗體(所有抗體得自Serotec(Kidlington, UK))FITC-CD10 (抗體 MCA1556F，O. lmg/mL)FITC-CD13 (抗體 MCA1270F，O. lmg/mL)FITC-CD26 (抗體 MCA1317F，O. lmg/mL)FITC-CD59 (抗體 MCA1054F，O. lmg/mL)FITC-CD142 (抗體 MCA2548F，O. lmg/mL)FITC-CD143 (抗體 MCA2057F，O. lmg/mL)樣品在20°C下孵育10分鐘，之后通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行分析。不進(jìn)行洗滌步驟。流式細(xì)胞術(shù)使用Epics Profile XL-MCL 流式細(xì)胞儀(Coulter Electronics, Hialeah, FL)分析樣品。流式細(xì)胞儀檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞器并將它們以規(guī)則的方式在散點(diǎn)圖中表示。分析100 μ L的每個(gè)樣品以確定前列腺小體濃度和大小。對(duì)于CD標(biāo)志物的分析，使用XL軟件(Coulter Electronics)對(duì)每個(gè)患者進(jìn)行5，000個(gè)前列腺小體的數(shù)據(jù)分析。基于光散射特性，每個(gè)前列腺小體在直角坐標(biāo)系中表示為一個(gè)點(diǎn)?？紤]到高純度的前列腺小體，對(duì)門的位置和大小進(jìn)行設(shè)置。使用前向散射和側(cè)向散射，圍繞前列腺小體簇和流式計(jì)數(shù)簇放置判別框(discrimination frame)。流式細(xì)胞儀測(cè)定了來(lái)自結(jié)合前列腺小體的帶標(biāo)記的抗體的熒光信號(hào)。流式細(xì)胞儀給出了場(chǎng)內(nèi)陽(yáng)性染色的前列腺小體的百分比、熒光強(qiáng)度中值和平均值(MFI)、復(fù)雜度(直角散射)和前列腺小體群體的中值和平均值大小(前向角散射)。在熒光通道中設(shè)置分析標(biāo)志物以測(cè)定MFI (對(duì)于FITC，波長(zhǎng)=225nm)。門在研究前設(shè)置。對(duì)精液流體的流式細(xì)胞術(shù)來(lái)自前列腺癌患者的樣品相比于對(duì)照顯示出分歧的蛋白質(zhì)模式。標(biāo)志物的靈敏度和特異性用ROC曲線評(píng)估。標(biāo)志物⑶13、⑶59以及比值⑶13/⑶10和⑶59/⑶26分別是對(duì)前列腺癌具有最高靈敏度和特異性的標(biāo)志物。CD13/CD10得到了最高的特異性(91. 1%，圖I)，而CD59/CD26得到了最高的靈敏度(100% )。檢測(cè)具有對(duì)前列腺小體來(lái)說(shuō)典型的側(cè)向和前向散射的顆粒。對(duì)血■清和尿液的流式細(xì)胞術(shù)將10 μ L來(lái)自癌癥患者和對(duì)照的精液漿添加至含有100 μ L血清或尿液的聚苯乙烯管中并且將樣品用PBS以I : 25進(jìn)行稀釋。將30 μ L稀釋的樣品和IOyL FITC標(biāo)記的抗體混合并且將混合物在20°C的溫度下孵育10分鐘，然后使用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行分析。不進(jìn)行洗滌步驟。將100 μ L來(lái)自具有高PSA的兩位患者的血清也如上述進(jìn)行分析，但是不添加經(jīng)純化的前列腺小體。檢測(cè)具有對(duì)前列腺小體來(lái)說(shuō)典型的側(cè)向和前向散射的顆粒。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果(血■清和尿液)在血清或尿液中重懸的前列腺小體的⑶表達(dá)與初始精液漿相比未受干擾，結(jié)果 未改變?；颊邩悠肥境鼍哂写砬傲邢傩◇w的前向和側(cè)向散射的細(xì)胞器。顆粒為CD13陽(yáng)性，表示顆粒為前列腺小體(參見(jiàn)表4)。經(jīng)純化的前列腺小體的制備需要設(shè)置純化的前列腺小體的流式細(xì)胞儀判別門。將精液漿樣品(12至15個(gè)樣品)合并然后在4°C下以IOOOOXg超速離心15分鐘以除去可能的細(xì)胞碎片。之后將上清液再在4°C下以IOOOOOXg超速離心2小時(shí)以沉淀前列腺小體。將前列腺小體在等滲Tris-HCl 緩沖液，pH 7. 6 中重懸,然后用 Sephadex G 200 凝膠柱(Amersham Biosciences,Uppsala, Sweden)進(jìn)一步純化。在260/280nm下監(jiān)測(cè)洗脫液。收集具有升高的UV吸光度的那些級(jí)分，分析CD13 (前列腺小體的強(qiáng)標(biāo)志物酶)。合并具有高CD13活性的紫外吸收級(jí)分，然后在4°C下以IOOOOOXg超速離心2小時(shí)。將代表經(jīng)純化的前列腺小體的沉淀在等滲Tris-HCl緩沖液，pH 7. 6中重懸并調(diào)整至合適的蛋白質(zhì)濃度。免疫印跡用移液器將I μ L經(jīng)純化的精液前列腺小體加在硝酸纖維素膜上，然后該膜用
O.02Μ Na2HP04、0. 15M NaCl, pH 7. 2 (PBS)中的 I % BSA 封閉 I 小時(shí)。3 次洗滌后，將膜與IOOyL生物素化的多克隆雞抗前列腺小體抗體(用具有1% BSA的PBS以I : 1000稀釋)在20°C下孵育I小時(shí)。用PBS-T(具有O. 05%吐溫20的PBS)再洗滌3次，力口入100 μ L用具有I % BSA的PBS以I : 2，000稀釋的鏈霉親和素-堿性磷酸酶綴合物(ZymedLaboratories, Inc. , CA, USA)并且在20°C下孵育I小時(shí)。洗漆三次后，對(duì)硝酸纖維素膜進(jìn)行顯色。免疫印跡結(jié)果抗體識(shí)別纖維素膜上的前列腺小體并且顯示出紫色的點(diǎn)。這表明前列腺小體可在固相(在本試驗(yàn)中為硝酸纖維素膜)上被捕獲，之后被抗體所檢測(cè)。ELISA將微量滴定板(F96,Polysorp, Nunc)用 O. IM NaHCO3, PH 9. 5 中的 4 μ g/mL 經(jīng)純化的精液前列腺小體在20°C下包被2小時(shí)。板用O. 02MNa2HP04，0. 15M NaCl,O. 05%吐溫20，pH 7. 2 (PBS-T)洗滌 3 次，然后用 O. 02M Na2HPO4,0. 15M NaCl，pH 7. 2 的 1% BSA 封閉 2小時(shí)。洗滌3次后，將板與100 μ L多克隆雞抗前列腺小體抗體(用PBS以I : 1000稀釋)一起在20°C下孵育2小時(shí)。用PBS-T再洗滌3次后，加入IOOyL用PBS以I : 2，000稀釋的山羊抗雞IgG辣根過(guò)氧化物酶(HRP)-綴合抗體(Zymed Laboratories, Inc. ,CA,USA)并在20°C下孵育2小時(shí)。將板用250 μ L PBS-T洗滌3次，并避光與底物(四甲基對(duì)苯二氛基聯(lián)苯，Zymed Laboratories, Inc.)在 20°C下鮮育 15 分鐘。通過(guò)加入 50yL I. 8mol/L硫酸來(lái)終止反應(yīng)。用 ELISA 讀取系統(tǒng)(SPECTRA Max 250,Molecular Devices, Sunnyvale,CA，USA)在450nm處測(cè)量吸光度。ELISA 結(jié)果抗前列腺小體抗體(Immunsystem AB, Uppsala, Sweden)給出與結(jié)合于ELISA板的前列腺小體的陽(yáng)性反應(yīng)，吸光值> I. O。這表明前列腺小體可在固相(在該情況下為硝化纖維素膜)上被捕獲，然后被抗體(如在該情況下為酶標(biāo)記抗體)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以下示出對(duì)照和患有前列腺癌的患者之間的比較結(jié)果(表1、2和3)。另外，表4示出分別對(duì)精液流體、血清和尿液的測(cè)量。
權(quán)利要求
1.一種用于對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷或提供預(yù)后的方法，其包括體外檢測(cè)前列腺小體和對(duì)至少一種抗原的前列腺小體表達(dá)進(jìn)行定量以及將所定量的表達(dá)值與來(lái)源于健康對(duì)象的相應(yīng)抗原的參考值進(jìn)行比較。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中所述至少一種抗原選自⑶13、⑶59、⑶10、⑶26、CD142、CD143 和 MHC I。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷和提供預(yù)后是基于與參考值相比在患有前列腺癌的對(duì)象中抗原⑶10、⑶26、⑶142和MHC I至少之一的上調(diào)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷和提供預(yù)后是基于與參考值相比在患有前列腺癌的對(duì)象中抗原⑶13和⑶59至少之一的下調(diào)。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的方法，其中計(jì)算至少兩種所述抗原之間的商并且將所述商與參考商值進(jìn)行比較。
6.根據(jù)權(quán)利要求I至5中任一項(xiàng)所述的方法，其中能夠特異性結(jié)合至少一種所述抗原的至少一種抗體用于檢測(cè)和定量其表達(dá)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述至少一種抗體用可區(qū)分的熒光標(biāo)志物標(biāo)記。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)和定量結(jié)合所述至少一種抗原的所述抗體。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中通過(guò)ELISA檢測(cè)和定量結(jié)合所述至少一種抗原的所述抗體。
10.一種用于對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷或提供預(yù)的試劑盒，其包含特異性結(jié)合選自⑶13、⑶59、⑶10、⑶26、⑶142、⑶143和MHC I的至少一種抗原的至少一種抗體。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷或提供預(yù)后的方法，包括體外檢測(cè)前列腺小體和對(duì)至少一種選自CD13、CD59、CD10、CD26、CD142、CD143和MHC I的抗原的前列腺小體表達(dá)進(jìn)行定量，以及將所定量的表達(dá)值與來(lái)源于健康對(duì)象的相應(yīng)抗原的參考值進(jìn)行比較。另外，可使用所述抗原之間的商?？赏ㄟ^(guò)流式細(xì)胞術(shù)或ELISA的方式進(jìn)行檢測(cè)。還提供用于對(duì)懷疑患有前列腺癌的對(duì)象進(jìn)行診斷或提供預(yù)后的試劑盒。
文檔編號(hào)G01N33/574GK102869992SQ201180018729
公開(kāi)日2013年1月9日 申請(qǐng)日期2011年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月16日
發(fā)明者魯內(nèi)·埃利阿松, 尼爾斯·埃格貝里, 萊納·卡爾森, 岡納·倫奎斯特, 安德斯·拉爾森, 戈埃蘭·倫奎斯特 申請(qǐng)人:普羅斯塔索姆漢德?tīng)査共├窆?br>