專(zhuān)利名稱(chēng)：一種液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于煙氣有害化學(xué)成分分析測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法。
背景技術(shù)：
芳香胺及其衍生物具有誘變因子，可以通過(guò)吸入、食入或透過(guò)皮膚吸收而導(dǎo)致中毒，能通過(guò)形成高鐵血紅蛋白，造成人體血液系統(tǒng)損害，也可直接作用于肝細(xì)胞，引起中毒性肝損害。其中一些芳香胺衍生物還具有致癌和致突變的作用，即使是在低濃度下，對(duì)動(dòng)物和人體都具有致癌活性。芳香胺類(lèi)物質(zhì)在煙葉和煙氣中均有分布，但煙氣中的含量略高于煙葉中的含量。系統(tǒng)地研究煙氣中芳香胺類(lèi)化合物的檢測(cè)方法，對(duì)于全面認(rèn)識(shí)卷煙安全性及吸煙與健康問(wèn)題都具有十分重要的意義。盡管芳香胺的分析檢測(cè)方法很多，但是由于該類(lèi)化合物中部分高毒性芳香胺，如 I-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基聯(lián)苯和4-氨基聯(lián)苯等含量極低，且卷煙煙氣非常復(fù)雜，干擾較多，因此對(duì)芳香胺的分析研究仍然是一項(xiàng)極有挑戰(zhàn)性的工作。目前常用的方法是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) “卷煙主流煙氣總粒相物中主要芳香胺的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法”。該方法用劍橋?yàn)V片捕集卷煙主流煙氣中的總粒相物，用鹽酸溶液萃取后，經(jīng)二氯甲烷洗滌、氫氧化鈉還原、 正己烷萃取后，使用五氟丙酸酐進(jìn)行衍生化，所得溶液采用固相萃取柱純化，濃縮后通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)定量測(cè)定芳香胺的含量。此方法的研究對(duì)象僅為四種芳香胺類(lèi)化合物，即I-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基聯(lián)苯和4-氨基聯(lián)苯，且樣品前處理方法繁瑣費(fèi)時(shí)，一次樣品分析周期約3天。因此，建立一種快速、靈敏、高通量的方法檢測(cè)卷煙煙氣中芳香胺類(lèi)化合物十分必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的正是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中芳香胺類(lèi)化合物測(cè)定方法前處理繁瑣費(fèi)時(shí)的問(wèn)題，而提供一種液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)卷煙主流煙氣中芳香胺類(lèi)化合物的方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的該方法利用劍橋?yàn)V片和含5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集主流煙粒相物和氣相物中的芳香胺類(lèi)化合物，采用5%HC1溶液萃取濾片后，經(jīng)HLB固相萃取柱純化處理，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS /MS)實(shí)現(xiàn)卷煙主流煙氣中10種芳香胺的測(cè)定。其具體步驟如下
a、卷煙主流煙氣中芳香胺的捕集、萃取與凈化采用劍橋?yàn)V片和裝有5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集卷煙主流煙粒相物和氣相物，然后將濾片置于收集容器中，將吸收瓶中的HCl溶液倒入其中，加入內(nèi)標(biāo)，超聲萃取后，采用NaOH固體中和溶液至PH>13，取部分溶液上樣到經(jīng)甲醇活化的HLB固相萃取柱上，經(jīng)水洗滌，采用甲醇洗脫，洗脫液混勻后進(jìn)LC-MS/MS分析；
b、煙氣樣品的分析
LC-MS/MS 分析所用色譜柱為 Waters C18 (100 mmX2. Imm i. d. , 2. 7 μ m)，柱溫30 V;流動(dòng)相A為含O. 1%甲酸的水溶液，流動(dòng)相B為含O. 1%甲酸的乙腈溶液；梯度洗脫，條件為 0 3 min :100% Α，3· Γ 6 min :75% A, 16. I 20 min :0% A, 20. 5 25 min :100% A ;流速 O 16 min :200 M-L/min, 16. I 25 min :400 M-L/min 進(jìn)樣體積 10 μ L。離子源電噴霧電離源(ESI);掃描方式正離子掃描；檢測(cè)方式多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM ； 電噴霧電壓5500V ;氣簾氣壓力30 psi ;輔助氣I壓力70 psi ;輔助氣2壓力70 psi ； 離子源溫度500 °C。各化合物的定量離子對(duì)、定性離子對(duì)、駐留時(shí)間、碰撞能量(CE)及去簇電壓(DP)參見(jiàn)表I。表I :各化合物的定量離子對(duì)、定性離子對(duì)、駐留時(shí)間、碰撞能量及去簇電壓
權(quán)利要求
1.一種液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于該方法利用劍橋?yàn)V片和含5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集主流煙粒相物和氣相物中的芳香胺類(lèi)化合物，采用5%HC1溶液萃取濾片后，經(jīng)HLB固相萃取柱純化處理，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS /MS)實(shí)現(xiàn)卷煙主流煙氣中10種芳香胺的測(cè)定。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于其具體步驟如下a、卷煙主流煙氣中芳香胺的捕集、萃取與凈化采用劍橋?yàn)V片和裝有5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集卷煙主流煙粒相物和氣相物，然后將濾片置于收集容器中，將吸收瓶中的HCl 溶液倒入其中，加入內(nèi)標(biāo)，超聲萃取后，采用NaOH固體中和溶液至PH>13，取部分溶液上樣到經(jīng)甲醇活化的HLB固相萃取柱上，經(jīng)水洗滌，采用甲醇洗脫，洗脫液混勻后進(jìn)LC-MS/MS分析；b、煙氣樣品的分析LC-MS/MS 分析所用色譜柱為 Waters C18 (100 mmX2. Imm i. d. , 2. 7 μ m)，柱溫30 °CV流動(dòng)相A為含0. 1%甲酸的水溶液，流動(dòng)相B為含0. 1%甲酸的乙腈溶液；梯度洗脫，條件為 0 3 min :100% Α，3· Γ 6 min :75% A, 16. I 20 min :0% A, 20. 5 25 min :100% A ;流速 O 16 min :200 M-L/min, 16. I 25 min :400 ML/min,進(jìn)樣體積 10 μ L ；離子源電噴霧電離源(ESI);掃描方式正離子掃描；檢測(cè)方式多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM;電噴霧電壓5500V ;氣簾氣壓力30 psi ;輔助氣I壓力70 psi ;輔助氣2壓力70 psi ;離子源溫度500 °C。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于步驟a中所述的5%HC1溶液的用量為25 mL。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于步驟a中所述的內(nèi)標(biāo)為D7-1-氨基萘、D9-4-氨基聯(lián)苯及D5-苯胺。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于步驟a中所述的超聲萃取時(shí)間為30分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于步驟a中HLB固相萃取柱為Agilent 0asis HLB SPE小柱， 6ml/200mgo
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于步驟a中活化、洗滌、洗脫所用的水和甲醇體積均為10 mL。
8.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物的方法，其特征在于在卷煙主流煙氣中芳香胺的捕集過(guò)程中，卷煙抽吸采用直線(xiàn)吸煙機(jī)按照YC/T29-1996規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)條件抽吸，每次實(shí)驗(yàn)抽吸5支卷煙。
全文摘要
一種液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)卷煙主流煙氣中10種芳香胺類(lèi)化合物(包括苯胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對(duì)甲苯胺、間苯二胺、間茴香胺、1-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基聯(lián)苯、4-氨基聯(lián)苯)的方法，其特征在于該方法利用劍橋?yàn)V片和含5%HCl溶液的吸收瓶分別捕集主流煙粒相物和氣相物中的芳香胺類(lèi)化合物，采用5%HCl溶液萃取濾片后，經(jīng)HLB固相萃取柱純化處理，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀實(shí)現(xiàn)卷煙主流煙氣中10種芳香胺的測(cè)定。本發(fā)明的分析測(cè)定方法與現(xiàn)有卷煙主流煙氣中芳香胺檢測(cè)的GC-MS分析方法相比，無(wú)需衍生化反應(yīng)及液液萃取操作，大大簡(jiǎn)化了樣品前處理步驟，提高了分析效率。能更全面的檢測(cè)卷煙主流煙氣中有害芳香胺類(lèi)化合物。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102608232SQ201210070388
公開(kāi)日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2012年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月17日
發(fā)明者丁麗, 余晶晶, 劉克建, 張曉兵, 王昇, 秦亞瓊, 謝復(fù)煒, 趙閣 申請(qǐng)人:中國(guó)煙草總公司鄭州煙草研究院