專利名稱：輔助診斷肺腺癌患者的試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種輔助診斷肺腺癌患者的試劑盒。
背景技術(shù)：
肺癌是嚴(yán)重威脅人類生命和健康的重大疾病。2011年世界衛(wèi)生組織(WHO)國際癌癥研究機(jī)構(gòu)IARC公布的2008全球統(tǒng)計資料結(jié)果顯示:肺癌是發(fā)病率和死亡率都高居榜首的惡性腫瘤。每年全球新發(fā)病例數(shù)160.8萬，死亡病例數(shù)137.7萬，占全部惡性腫瘤的12.7%和18.2%。美國癌癥協(xié)會公布的統(tǒng)計結(jié)果顯示:預(yù)計在2012年，美國新發(fā)肺癌病例數(shù)將達(dá)到22.6萬，因肺癌死亡病例數(shù)將達(dá)到16萬。在我國，由衛(wèi)生部主持的全國第三次死因回顧抽樣調(diào)查結(jié)果顯示:肺癌為樣本地區(qū)惡性腫瘤死亡原因之首，粗死亡率為30.83/10萬，其中男性41.34/10萬，女性19.84/10萬；在男性、女性中均為首位癌癥死亡原因。隨著全球老齡化的加速和環(huán)境污染加劇等因素，肺癌發(fā)病必將繼續(xù)呈上升趨勢，因此，對肺癌的診斷治療研究的進(jìn)展需求，必定越來越強(qiáng)烈。從病理上，肺癌可分為非小細(xì)胞肺癌(NSCLC，約占85%)和小細(xì)胞肺癌(SCLC，約占15%)。其中，NSCLC主要由鱗癌(又稱鱗狀細(xì)胞癌或肺鱗癌)、腺癌(又稱肺腺癌)和大細(xì)胞癌組成。鱗癌和腺癌各占NSCLC的40%。肺癌的發(fā)病較為隱匿，超過70%的患者在就診時已發(fā)展至中晚期，失去了手術(shù)機(jī)會。這也是肺癌療效差，死亡率高的主要原因之一。因此，早期篩查、診斷成為防治肺癌的重中之重。目前，臨床所使用肺癌篩查診斷方法主要是胸部X射線檢查、CT掃描等影像學(xué)技術(shù)。雖然這些影像資料對診斷起著重要作用，但也存在很多局限性，例如假陽性率高，無法檢出隱性病灶、亞臨床病灶和微小轉(zhuǎn)移病灶。除此之外，對肺癌的診斷方法還包括支氣管鏡檢查、穿刺活檢等有創(chuàng)操作，這類方法耗時長，增加患者痛苦。因此，尋找無創(chuàng)、無輻射、費用低廉、診斷快速且敏感性、特異性均高的篩查、診斷方法，是目前癌癥早期診斷的迫切需求。腫瘤標(biāo)記物是指腫瘤細(xì)胞或者組織由于癌基因或其他腫瘤相關(guān)基因及其產(chǎn)物異常表達(dá)所產(chǎn)生的生物活性物質(zhì)或其本身由癌組織脫落，而在正常組織或良性疾病時有一定程度表達(dá)或產(chǎn)量甚微。它反映了癌的發(fā)生發(fā)展過程，可在腫瘤患者組織、體液及排泄物中檢出，廣泛應(yīng)用于腫瘤的診斷，監(jiān)測復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，預(yù)后，預(yù)測療效等。臨床上現(xiàn)有的廣泛受到認(rèn)可的幾種主要標(biāo)志物為:應(yīng)用于卵巢癌的腫瘤抗原125 (CA125)，應(yīng)用于胰腺癌的類抗原19-9 (CA19-9)，應(yīng)用于結(jié)直腸癌的癌胚抗原(CEA)和應(yīng)用于前列腺癌的前列腺特異性抗原(PSA)0而其他癌癥例如乳腺癌和肺癌，目前仍然缺少用于篩查的可信的腫瘤標(biāo)記物。目前已經(jīng)應(yīng)用于肺癌臨床輔助診斷的標(biāo)記物只有蛋白標(biāo)記物，為下列幾種:(I)CEA:Gold和Freeman在1965年首先在大腸癌中發(fā)現(xiàn)CEA，它是一種糖蛋白，分子量為180KD，半衰期為3-4天，是胚胎發(fā)展過程產(chǎn)生的抗原，出生后顯著下降；其特異性不強(qiáng)，但可用于腫瘤發(fā)展的監(jiān)測、療效判斷和預(yù)后估計，對于早期診斷并不敏感；肺癌病人雖有升高，但存在較高的假陰性和假陽性，不適于在肺癌篩查診斷中單獨使用；(2)CA125:Bast在1981首先發(fā)現(xiàn)CA125這種大分子糖蛋白，其半衰期約4.8天，主要應(yīng)用于卵巢癌，同時在肺癌中也有上升；(3) CYFRA21-1 (CYFRA211):CYFRA211是細(xì)胞角蛋白19的水溶性片段，半衰期約
4天；雖然目前以上蛋白標(biāo)記物已經(jīng)用于肺癌的輔助診斷，但其診斷效率低下，達(dá)不到臨床需求。因此，開發(fā)新的診斷標(biāo)記物和診斷方法已迫不及待。IDHl是一種位于細(xì)胞質(zhì)和過氧化物酶體中的NADP+依賴的異檸檬酸脫氫酶，可催化異檸檬酸進(jìn)行氧化脫羧反應(yīng)為α-酮戊二酸。本發(fā)明的發(fā)明人在以往的研究中發(fā)現(xiàn)，肺鱗癌和肺腺癌患者的IDHl水平明顯高于正常人群及肺良性腫瘤患者，能夠作為肺癌的新的診斷標(biāo)記物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種輔助診斷肺腺癌患者的試劑盒。本發(fā)明提供的用于輔助診斷肺腺癌患者的試劑盒，包括用于檢測蛋白標(biāo)志物IDHl的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CA125的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1的產(chǎn)品和記載有如下函數(shù)式的載體:
權(quán)利要求
1.用于輔助診斷肺腺癌患者的試劑盒，包括用于檢測蛋白標(biāo)志物IDHl的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CA125的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1的產(chǎn)品和記載有如下函數(shù)式的載體: Xl代表蛋白標(biāo)志物IDHl的濃度，X2代表蛋白標(biāo)志物CA125的濃度，x3代表蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1的濃度。
2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于:所述蛋白標(biāo)志物IDHl為GENBANKACCESSION N0.CAG46496.1 所示的蛋白質(zhì)；所述蛋白標(biāo)志物 CA125 為 GENBANK ACCESSIONN0.AAL65133.2所示的蛋白質(zhì)；所述蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1為GENBANK ACCESSIONN0.NP_002267.2所示的蛋白質(zhì)。
3.如權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于:所述蛋白標(biāo)志物IDHl的濃度的單位為U/L，所述蛋白標(biāo)志物CA125的濃度的單位為U/mL，所述蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1的濃度的單位為ng/mL。
4.如權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于:所述載體上還記載有如下診斷標(biāo)準(zhǔn):當(dāng)P彡0.5762時，待測患者為候選的肺腺癌患者，當(dāng)P < 0.5762時，待測患者為候選的非肺腺癌患者。
5.用于檢測蛋白標(biāo)志物IDHl的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CA125的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1的產(chǎn)品和記載有函數(shù)式和診斷標(biāo)準(zhǔn)的載體在制備輔助診斷肺腺癌患者的試劑盒中的應(yīng)用: 所述函數(shù)式如下: Xl代表蛋白標(biāo)志物IDHl的濃度、單位為U/L，X2代表蛋白標(biāo)志物CA125的濃度、單位為U/mL，x3代表蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1的濃度、單位為ng/mL ； 所述診斷標(biāo)準(zhǔn)如下:當(dāng)P彡0.5762時,待測患者為候選的肺腺癌患者，當(dāng)P < 0.5762時，待測患者為候選的非肺腺癌患者。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于:所述蛋白標(biāo)志物IDHl為GENBANKACCESSION N0.CAG46496.1 所示的蛋白質(zhì)；所述蛋白標(biāo)志物 CA125 為 GENBANK ACCESSIONN0.AAL65133.2所示的蛋白質(zhì)；所述蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1為GENBANK ACCESSIONN0.NP_002267.2所示的蛋白質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種輔助診斷肺腺癌患者的試劑盒。本發(fā)明提供的試劑盒包括用于檢測蛋白標(biāo)志物IDH1的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CA125的產(chǎn)品、用于檢測蛋白標(biāo)志物CYFRA21-1的產(chǎn)品和記載有如下函數(shù)式的載體x1代表IDH1的濃度；x2代表CA125的濃度；x3代表CYFRA21-1的濃度。采用本發(fā)明提供的試劑盒并按照相應(yīng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)輔助診斷肺腺癌患者，具有靈敏性高、特異性強(qiáng)的特點，診斷結(jié)果可信度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于采用各個單獨的蛋白質(zhì)標(biāo)記物進(jìn)行診斷，對于肺腺癌的診斷和治療具有重大價值和應(yīng)用前景。
文檔編號G01N33/68GK103163303SQ20121020819
公開日2013年6月19日 申請日期2012年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月19日
發(fā)明者赫捷, 譚鋒維, 孫楠, 陳照麗 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院