專(zhuān)利名稱(chēng)：千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)方法，具體的說(shuō)，是千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，屬于中藥質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
千斤拔配方顆粒是豆科植物蔓性千斤拔Flemingia prostrata Roxb. F. exRoxb.的干燥根經(jīng)加工制成的配方顆粒，味甘、微潘，性平，歸脾、胃、肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)脾胃，益肝腎，強(qiáng)腰膝，舒筋絡(luò)之功效，主要用于脾胃虛弱，氣虛腳腫，腎虛腰痛，手足酸軟，風(fēng)濕骨痛，跌打損傷等癥。與傳統(tǒng)的中藥煎劑相比，其具有免煎易服，易儲(chǔ)存，攜帶方便等優(yōu)點(diǎn)?！吨袊?guó)藥典》2010年版一部未收載千斤拔藥材品種，而中藥配方顆粒經(jīng)過(guò)一系列工序的加工后已失去藥材的外形特征，性狀鑒別已不適用于中藥配方顆粒。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，先用薄層色譜鑒別成分，再用高效液相色譜儀測(cè)定含量，該方法準(zhǔn)確，靈敏度高，精密度、穩(wěn)定性好。本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣的千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，依次包括下述步驟1)薄層色譜法鑒別成分；2)高效液相色譜法測(cè)定含量；
其中，步驟I)所述的薄層色譜鑒別成分取本品粉末0. 45、. 55g，加甲醇25 35ml，回流25 35分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取千斤拔對(duì)照藥材5g,加水50ml,煮沸30分鐘,濾過(guò),濾液水浴蒸干，殘洛加甲醇30ml,同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色、綠色熒光斑點(diǎn)；
步驟2)所述的高效液相含量測(cè)定，首先制備對(duì)照品溶液精密稱(chēng)取染料木素對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含染料木素11. 02ng的溶液，即得；再制備供試品溶液取本品粉末約0. 6g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；
測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液5 ill、供試品溶液15 iil，注入液相色譜儀，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0. 4%磷酸為流動(dòng)相，DAD檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)263nm,柱溫 25°C,流速lml/min ;測(cè)定。上述的千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中，步驟I)所述的展開(kāi)劑氯仿-丙酮-甲酸體積比為8:1:0. 8。上述的千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中，步驟2)所述的甲醇與0. 4%磷酸的體積比為50:50。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確，靈敏度高，精密度、穩(wěn)定性好，采用HPLC法測(cè)定千斤拔配方顆粒中染料木素的含量，峰形好，分離度高，可作為千斤拔配方顆粒的質(zhì)量控制和考察工藝穩(wěn)定性的有效技術(shù)手段，對(duì)保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性及臨床用藥的有效性與安全性具有重要意義。


圖I是本發(fā)明的千斤拔配方顆粒薄層色譜 圖2是本發(fā)明的千斤拔配方顆粒高效液相色譜圖。其中對(duì)照藥材試驗(yàn)薄層色譜圖Al ;供試品第一次試驗(yàn)薄層色譜圖B2 ;供試品第二次試驗(yàn)薄層色譜圖C3 ;供試品第三次試驗(yàn)薄層色譜圖D4 ;供試品第四次試驗(yàn)薄層色譜圖E5 ;供試品第五次試驗(yàn)薄層色譜圖F6 ;點(diǎn)樣點(diǎn)11 ;藍(lán)色點(diǎn)21 ;綠色點(diǎn)31 ;對(duì)照品HPLC圖A;供試品HPLC圖B ;染料木素I?！?br> 具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任何人在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)所做出的非實(shí)質(zhì)性改變，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍內(nèi)。實(shí)例I
本發(fā)明所提供的千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)，依次包括下述步驟1)薄層色譜法鑒別成分；2)高效液相色譜法測(cè)定含量；
薄層鑒別方法取本品粉末0. 5g，加甲醇30ml，回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取千斤拔對(duì)照藥材5g，加水50ml，煮沸30分鐘，濾過(guò)，濾液水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?0ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(體積比8 1 0. 8)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，參閱圖1，顯相同顏色的藍(lán)色、綠色熒光斑點(diǎn)，其中，對(duì)照藥材檢測(cè)結(jié)果是對(duì)照藥材試驗(yàn)薄層色譜圖Al ;供試品第一次試驗(yàn)薄層色譜圖B2 ;供試品第二次試驗(yàn)薄層色譜圖C3 ;供試品第三次試驗(yàn)薄層色譜圖D4 ;供試品第四次試驗(yàn)薄層色譜圖E5 ;供試品第五次試驗(yàn)薄層色譜圖F6 ;點(diǎn)樣點(diǎn)11 ;藍(lán)色點(diǎn)21 ;綠色點(diǎn)31。含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定。參閱圖2，其中，對(duì)照品HPLC圖A ;供試品HPLC圖B ;染料木素I。I、儀器與試藥
(I)儀器=Agilent 1200高效液相色譜儀，DAD檢測(cè)器，四元梯度泵，G2170AA數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。(2)試藥甲醇為色譜純?cè)噭?一級(jí))，水為雙蒸水，其它試劑均為分析純。染料木素對(duì)照品(批號(hào)111704-200501)購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所。2、實(shí)驗(yàn)條件(I)色譜條件色譜柱Agilent Zorbax SB C18 (4. 6mmX 250mm, 5Mm)柱；流動(dòng)相甲醇-0. 4%磷酸溶液(50 50);檢測(cè)波長(zhǎng)263nm ;柱溫25°C ;流速1. Oml/min。3、方法學(xué)考察
對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取染料木素對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含染料木素
11.02ng的溶液，即得。(I)線(xiàn)性范圍的考察
分別精密吸取對(duì)照品溶液(每Iml含染料木素11.021^) I yl、3 yl、5 yl、7 iil、9ia，注入液相色譜儀進(jìn)行色譜測(cè)定，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，并以峰面積(Y)對(duì)進(jìn)樣量(X)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。Y=6. 41450152X-7. 1041885，r=0. 99987 ；
表明染料木素在11.02-99. 18ng范圍內(nèi)呈線(xiàn)性關(guān)系，結(jié)果見(jiàn)表I。表I染料木素對(duì)照品測(cè)定結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，依次包括下述步驟1)薄層色譜法鑒別成分；2)高效液相色譜法測(cè)定含量； 其中，步驟I)所述的薄層色譜鑒別成分取本品粉末0. 45、. 55g，加甲醇25 35ml，回流25 35分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取千斤拔對(duì)照藥材5g，加水50ml，煮沸30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?0ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色、綠色熒光斑點(diǎn)； 步驟2)所述的高效液相色譜測(cè)定含量，首先制備對(duì)照品溶液精密稱(chēng)取染料木素對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含染料木素11. 02ng的溶液，即得；再制備供試品溶液取本品粉末約0. 6g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液5 ill、供試品溶液15 iil，注入高效液相色譜儀，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0. 4%磷酸為流動(dòng)相，DAD檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)263nm,柱溫25°C,流速lml/min ;測(cè)定。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟I)所述的展開(kāi)劑氯仿-丙酮-甲酸體積比8:1:0. 8。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟2)所述的甲醇與0. 4%磷酸的體積比為50:50。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法；旨在提供一種方法準(zhǔn)確，靈敏度高，精密度、穩(wěn)定性好的千斤拔配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法；其技術(shù)要點(diǎn)依次包括下述步驟1)薄層色譜鑒別成分；2)高效液相色譜測(cè)定含量，其中，步驟1)所述的薄層色譜鑒別成分是先制作供試品溶液和對(duì)照藥材溶液，最后照薄層色譜法試驗(yàn)；步驟2)所述的高效液相色譜測(cè)定含量，首先制備對(duì)照品溶液，再制備供試品溶液，再用高效液相色譜儀測(cè)定；屬于中藥質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域。
文檔編號(hào)G01N30/90GK102721782SQ20121022433
公開(kāi)日2012年10月10日 申請(qǐng)日期2012年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月2日
發(fā)明者劉法錦, 孫冬梅, 畢曉黎, 涂瑤生, 程學(xué)仁 申請(qǐng)人:劉法錦, 孫冬梅, 畢曉黎, 涂瑤生, 程學(xué)仁