一種甘草酸衍生物的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種甘草酸衍生物的檢測方法，屬于物理分析檢測領(lǐng)域范疇。本發(fā)明所建立的高效液相色譜梯度洗脫法同時檢測甘草次酸、乙酰甘草次酸、甘草酸酯等，具有良好的精密度、重現(xiàn)性、可靠性，方法先進(jìn)簡單，可以同時測定多種甘草酸衍生物的純度，能夠安全、有效、全面的控制甘草酸衍生物的質(zhì)量。
【專利說明】一種甘草酸衍生物的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種甘草酸衍生物多種成分的高效液相色譜檢測方法，屬于物理分析檢測領(lǐng)域范疇。
【背景技術(shù)】
[0002]甘草為多年生草本植物甘草(Glycyrrhiza urlensis Fisch.)的根及根莖,性味甘平，歸心、肺、脾、胃經(jīng)，是臨床上常用的藥材之一，具有“十方九草”的美稱。藥理研究表明甘草具有補脾益氣、潤肺止咳、通經(jīng)脈、利氣血、清熱解毒、止血祛痰潤肺的功效，臨床上被廣泛地用于治療胃潰瘍和十二指腸潰瘍、咽喉腫痛、支氣管炎、咳嗽、關(guān)節(jié)炎、過敏等疾病及用于保肝、降血脂、抗癌、抗干擾素誘生及增強細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)等。甘草酸(glycyrrhizicacid,GA)是甘草中最重要的有效成分之一，具有解毒、消炎、抗氧化、抗過敏、抗腫瘤以及增強免疫等多種藥理活性。但游離GA的水溶性較差，需制成有關(guān)衍生物后藥用。而由GA制得的衍生物主要包括甘草甜素(glycyrrhizic,GL)、甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GAS)以及酸化甘草次酸(acyl glycyrrhetinic acid, AGA)。
[0003]本實驗室在研究過程中，對甘草酸進(jìn)行處理，獲得了甘草酸衍生物:甘草酸單糖苷、甘草次酸、乙酰甘草次酸以及甘草酸酯。本發(fā)明在甘草酸甜素的液相色譜條件的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，建立的一種甘草酸衍生物通用的高效液相色譜檢測方法，用于檢測區(qū)別不同的甘草酸衍生物和含量。本方法簡便快捷，精密度好，重現(xiàn)性好，具有很強的實用性。
[0004]在已經(jīng)公開的文獻(xiàn)與專利中，都是關(guān)于甘草酸及其衍生物的制備與應(yīng)用、研究進(jìn)展和藥理活性研究的描述，未發(fā)現(xiàn)與本發(fā)明相關(guān)或類似的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種測定多種甘草酸衍生物純度的方法，本方法相對簡單，具有良好的精密度、重現(xiàn)性和可靠性，通用于測定多種甘草酸衍生物成分的純度及含量，可用于甘草酸衍生物的質(zhì)量控制。
[0006]本發(fā)明提供一種甘草酸衍生物的高效液相檢測方法，該方法包括以下步驟:
[0007](I)色譜條件:室溫，相對濕度25?40% ;以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以30?90%乙腈溶液為流動相A，以0.0lmol/L磷酸水為流動相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速:0.8?1.2ml/min，柱溫25?40°C，檢測波長250?257nm。
[0008]
【權(quán)利要求】
1.一種甘草酸衍生物的檢測方法，其特征在于該方法如下: 色譜條件:室溫，相對濕度25~40% ;以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以30~90%乙腈溶液為流動相A，以0.01mol/L磷酸水為流動相B ;按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速:0.8 ~1.2ml/min,柱溫 25 ~40°C。 稱取甘草酸衍生物適量，加入適量甲醇，制成每Iml含0.5~2mg的溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的檢測方法，其特征在于梯度洗脫過程為--第0.01分鐘，流動相A乙腈為30~40%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為60~70% ;第10~15分鐘，流動相A乙腈為40~50%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為50~60 第15~25分鐘，流動相A乙腈為50~55%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為45~50% ;第25~35分鐘，流動相A乙腈為55~65%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為35~45%;第35~50分鐘，流動相A乙腈為65~85%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為15~35%;第50~60分鐘，流動相A乙腈為85~90%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為10~15%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于供試品溶液的制備方法為:稱取甘草酸衍生物適量，加入適量甲醇，超聲溶解5~20分鐘，放冷，配制成每Iml含0.5~2mg的溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于高效液相色譜的進(jìn)樣量為10或20 μ 1，優(yōu)選為 20 μ I。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于色譜條件中室溫優(yōu)選為20°C，相對濕度優(yōu)選為35%，柱溫為30°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的的檢測方法，其特征在于梯度洗脫過程為:第0.01分鐘，流動相A乙腈為35%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為65% ;第15分鐘，流動相A乙腈為45%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為55% ;第25分鐘，流動相A乙腈為55%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為45%;第35分鐘，流動相A乙腈為65%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為35% ;第50分鐘，流動相A乙腈為85%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為15% ；第60分鐘，流動相A乙腈為90%，流動相B0.01mol/L磷酸水溶液為10%。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測方法，其特征在于供試品溶液制備中的超聲處理為10分鐘，制成每Iml含Img的溶液。
【文檔編號】G01N30/36GK103529151SQ201210228702
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2012年7月4日 優(yōu)先權(quán)日:2012年7月4日
【發(fā)明者】易銘, 楊永安, 鐘慧, 金顯友, 袁繼文, 魏元剛, 黃全書, 季浩 申請人:江蘇天晟藥業(yè)有限公司