專利名稱：用于檢測地溝油的試劑組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品安全檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種采用紫外光譜分析方法進(jìn)行地溝油檢測的方法。
背景技術(shù)：
地溝油，泛指在生活中存在的各類劣質(zhì)油，如回收的食用油、反復(fù)使用的炸油等。地溝油最大來源為城市大型飯店下水道的隔油池。長期食用可能會引發(fā)癌癥，對人體的危害極大。目前國內(nèi)尚未有檢測地溝油的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。現(xiàn)行的國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)《食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(2716— 2005)中，關(guān)于食用油的理化指標(biāo)檢測包括酸價(jià)、過氧化值、浸出油溶劑殘留、游離酚(棉籽油)、總砷、鉛、黃曲霉毒素、苯并芘、農(nóng)藥殘留共9項(xiàng)指標(biāo)，分別對植物原油和植物食用油進(jìn)行不同的標(biāo)準(zhǔn)檢測。但是植物原油、植物食用油均不是地溝油。而標(biāo)準(zhǔn)里這9項(xiàng)基本的食用油檢測指標(biāo)，即使是地溝油煉出來的油也都可能合格，根本無法針對地溝油 去進(jìn)行辨別性檢測。目前進(jìn)行地溝油往往通過四大波譜法手段去分析研究。它們包括核磁共振波譜法(NMR)、質(zhì)譜分析法(MS)、紅外光譜法(IR)、紫外光譜分析法(UV)。而前三種方法需要昂貴的專用設(shè)備、專業(yè)的操作/維護(hù)人員以及特定的使用環(huán)境，而且實(shí)際使用效果也不十分理想。而現(xiàn)有的技術(shù)手段檢測結(jié)果特異性不強(qiáng)，不能作為“地溝油”判定手段。本發(fā)明因此而來。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種用于檢測地溝油的試劑組合物，解決了現(xiàn)有技術(shù)中地溝油檢測時(shí)檢測結(jié)果特異性不高、檢測方法昂貴無法進(jìn)行實(shí)際應(yīng)用等問題。為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的這些問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是一種用于檢測地溝油的試劑組合物，其特征在于所述組合物以其組分的重量百分比計(jì)包括水和占試劑組合物總質(zhì)量的O. 19Γ0. 5%的非離子表面活性劑。優(yōu)選的，所述非離子表面活性劑的親水親油平衡值(HLB)在O 20之間。優(yōu)選的，所述非離子表面活性劑占試劑組合物總質(zhì)量的O. 1°/Γθ. 35%。優(yōu)選的，所述非離子表面活性劑占試劑組合物總質(zhì)量的O. 159ΓΟ. 35%。優(yōu)選的，所述非離子表面活性劑占試劑組合物總質(zhì)量的O. 25%。優(yōu)選的,所述非離子表面活性劑選用Tween20。本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述的用于檢測地溝油的試劑組合物在地溝油樣品的檢測方面的應(yīng)用。優(yōu)選的，所述用于檢測地溝油的試劑組合物作為待測地溝油樣品的萃取試劑。本發(fā)明采用所述用于檢測地溝油的試劑組合物作為待測地溝油樣品的萃取試劑，這樣方便了采用光譜分析方法進(jìn)行地溝油檢測的過程。具體實(shí)施時(shí)，可以采用紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜等分析方法。常見的，如采用紫外光譜時(shí)，一種采用紫外光譜分析方法進(jìn)行地溝油檢測的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟(I)待測油樣的預(yù)處理采用烷類溶劑對待測油樣進(jìn)行稀釋，然后將稀釋后的待測油樣進(jìn)行水萃取，所述萃取液采用加入表面活性劑的水溶液，形成水包油分子(W/0)的微乳狀液體；(2)采用基質(zhì)加標(biāo)方法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，所述混合油品為標(biāo)準(zhǔn)正常油品與標(biāo)準(zhǔn)生物柴油勾兌形成，所述標(biāo)準(zhǔn)正常油品采用選自正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油的一種或兩種以上的任意混合；分別將混合油品、標(biāo)準(zhǔn)正常油品按照步驟(I)待測油樣的方式進(jìn)行預(yù)處理后，按照紫外光譜比色分析法在200nnT320nm之間進(jìn)行掃描，繪制兩種樣品的水溶液光譜吸收圖作為兩者的標(biāo)準(zhǔn)曲線即為地溝油檢測的檢測限；(3)將水包油分子(W/0)的微乳狀液體按照紫外光譜比色分析法在200nnT320nm之間進(jìn)行掃描，繪制待測油樣的水溶液光譜吸收圖；根據(jù)水溶液光譜吸收圖的吸光值高度、光譜特征曲線以及曲線圖形相似度進(jìn)行判斷待測油樣是否為地溝油。 優(yōu)選的，所述方法步驟(I)烷類溶劑選自異辛烷或正己烷，所述待測油樣進(jìn)行稀釋時(shí)烷類溶劑與待測油樣的體積比為2 :1。優(yōu)選的，所述方法步驟(I)中表面活性劑的親水親油平衡值(HLB)在O 20之間。優(yōu)選的，所述方法步驟(I)中表面活性劑選自非離子表面活性劑和兩性離子表面活性劑。優(yōu)選的，所述方法步驟(I)中表面活性劑選自TWeen20。Tween20,其中 / 英文名分別為 Polyoxyethylene sorbitan monolaurate,聚氧乙烯(20E0)失水山梨醇單月桂酸酯。優(yōu)選的，所述方法步驟(I)中表面活性劑加入的量為水溶液總質(zhì)量的O. 25%。優(yōu)選的，所述方法步驟(2)中混合油品是特別配制用作地溝油檢測參照標(biāo)準(zhǔn)，為正常標(biāo)準(zhǔn)油品與標(biāo)準(zhǔn)生物柴油按照體積比50 :1或者20:1或者5:1進(jìn)行勾兌?；旌嫌推肥欠謩e取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油，加入標(biāo)準(zhǔn)生物柴油勾兌而成。而標(biāo)準(zhǔn)正常油品可以選自上述5種正常油品中的一種或兩種以上的任意組合，優(yōu)選是上述5種正常油品中紫外吸光值較高的一種。本發(fā)明通過對油脂所含有機(jī)化合物的分析入手，剖析其有機(jī)化合物的分子結(jié)構(gòu)，找出地溝油所具備的主要共性特征，從而實(shí)現(xiàn)地溝油的鑒別。運(yùn)用紫外光譜分析法(UV)來找出地溝油所具備的主要共性特征，然后進(jìn)行準(zhǔn)確地定性分析，完成對地溝油的快速鑒別，可以達(dá)到事半功倍的效果。本發(fā)明方法簡單、快速、經(jīng)濟(jì)，確認(rèn)地溝油所具備的主要共同特征，運(yùn)用定性分析的手段，實(shí)現(xiàn)地溝油的快速鑒別。本發(fā)明方法的主要原理就是采用紫外光譜分析法(UV)對油品所含有機(jī)化合物進(jìn)行定性分析。本發(fā)明采用紫外光譜分析法(UV)的適用性和可行性(I)檢測特征性成分極性組分(Polar Compound)作為檢測的主要被檢測內(nèi)容為了能體現(xiàn)快速、經(jīng)濟(jì)、簡便、可靠的原則，首先必須確定地溝油和區(qū)別正常食用植物油的具體特征。地溝油經(jīng)過精制以后，雖然表觀上和優(yōu)質(zhì)油相同，但它在提煉處理過程中，不容易徹底清除掉極性物質(zhì)(Polar Compound),它的組分中仍會殘留一些微量濃度的極性物質(zhì)，和非極性芳香族化合物。因此，油品中極性組分的檢測成為地溝油鑒別的重要標(biāo)志。地溝油中極性組分(有機(jī)物)應(yīng)包括多環(huán)芳烴、膽固醇(膽留醇)、丙烯酰胺、游離棉酚及雜酚、香料香精等，這些極性物質(zhì)很少會在一般優(yōu)質(zhì)食用植物油(如豆油、菜油、花生油等)出現(xiàn)。這也構(gòu)成優(yōu)劣油脂明顯的本質(zhì)差異，從而成為地溝油檢測的關(guān)鍵指標(biāo)。(2)極性組分(Polar Compound)對紫外光譜的吸收特性極性有機(jī)組分往往在紫外區(qū)域(200— 300nm)，具有光吸收特點(diǎn)。極性分子吸收了光能，會使外層電子能級發(fā)生躍遷，從而出現(xiàn)不同的吸收特征。因此，采用紫外分光光度法，進(jìn)行不同波段的光譜吸收掃描分析，可以觀察到地溝油在紫外波段強(qiáng)烈的吸收狀況。極性組分中6種有代表性的多環(huán)芳烴(苯并芘、螢蒽等)在紫外230nm左右區(qū)域均有吸收特征。動物油脂膽固醇也存在多苯環(huán)結(jié)構(gòu)，在220nm有明顯的吸收峰。游離棉酚及雜酚在24(T260nm區(qū)域也有較強(qiáng)吸收。其它極性組分如醛基和羰基物質(zhì)，老油中的丙烯酰胺等在紫外波段均有相應(yīng)吸收特性。本發(fā)明還采用一些關(guān)鍵技術(shù)手段來解決紫外光譜分析法(UV)遇到的問題。(I)油樣不溶于水 雖然地溝油中所包含的有害物質(zhì)可以對紫外光譜有吸收特性，但沒有辦法直接將油樣進(jìn)行紫外光譜比色操作，絕大多數(shù)的比色操作都是在水相中進(jìn)行的。而油樣也不能直接進(jìn)行水溶液萃取。為此，我們借助了加入表面活性劑的水萃取溶液。表面活性劑既有親油的特性一面也有親水的另一面，它的親油/親水特性是用HLB值來表示的。其取值范圍在廣40之間。HLB值越小表示其親油性越好，可以充分地吸附油分子；HLB值越大表示其親水性越好，可以充分地與水分子結(jié)合。只要選取適當(dāng)?shù)腍LB值，例如HLB=16. 7的非離子表面活性劑TWEEN20。TWEEN20水溶液的質(zhì)量百分比濃度為O. 25%，作為油樣水萃取溶液主體，使得油樣和水在一定程度上溶合，形成水包油分子(W/0)的微乳狀液體，一方面可以使極性組分能有效進(jìn)入萃取液中；其次，可以通過這些水包油分子(W/0)對紫外光的吸收來增強(qiáng)極性組分在紫外光譜段吸收的特征。為了保證油樣在非離子表面活性劑水溶液中的微乳化效果基本接近，必須對油樣進(jìn)行稀釋預(yù)處理。具體方法是用異辛烷或者正己烷按2 :1的體積比例對油樣稀釋。(2)紫外光譜分析法(UV)的圖譜定性分析所謂定性分析就是通過對待測油樣的紫外光譜曲線圖進(jìn)行分析進(jìn)而對待測油樣種類定性。對曲線圖進(jìn)行分析分別從兩個方面入手，一是其在紫外段(200nnT320nm)吸光值高度；二是分析其曲線圖在紫外段(200nnT320nm)的特征圖形；三是將待測油樣在紫外段(200nnT320nm)的特征圖形與標(biāo)準(zhǔn)油樣曲線圖形進(jìn)行相似度對比。然后，綜合三方面的結(jié)論，做出最終的判斷。相對于現(xiàn)有技術(shù)中的方案，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是由于地溝油的檢測是目前尚處于科學(xué)攻關(guān)，有待于解決的一個課題?，F(xiàn)有的各種技術(shù)手段都有一定的局限性，大多檢測的成功率都不是很高。本發(fā)明的試劑組合物作為待測地溝油樣品的萃取試劑，方便了采用光譜分析方法進(jìn)行地溝油檢測的過程，具有檢測的成功率高、檢測結(jié)果重現(xiàn)性、穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn)。目前，本發(fā)明通過紫外光譜地溝油檢測方法經(jīng)過多方測試和驗(yàn)證，基本可以達(dá)到709Γ80%的成功率。


下面結(jié)合附圖及實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述圖I為本發(fā)明實(shí)施例I新疆成品地溝油油樣、混合油品和正常標(biāo)準(zhǔn)油品的紫外光譜曲線圖；圖2為本發(fā)明實(shí)施例2正常玉米油油樣、混合油品和正常標(biāo)準(zhǔn)油品的紫外光譜曲線圖；圖3為本發(fā)明實(shí)施例將正常標(biāo)準(zhǔn)油品、混合油品和棕櫚油按照實(shí)施例I的方法進(jìn)行紫外吸收檢測得到的紫外光譜曲線圖；圖4為本發(fā)明實(shí)施例2不同比例勾兌的千門地溝油油樣的紫外光譜曲線圖；圖5為本發(fā)明實(shí)施例2不同比例勾兌的千門地溝油油樣、混合油品和正常標(biāo)準(zhǔn)油品的紫外光譜曲線圖；
圖6為本發(fā)明實(shí)施例3不同比例勾兌的廣州地溝2油樣的紫外光譜曲線圖；圖7為本發(fā)明實(shí)施例4不同濃度生物柴油的紫外光譜曲線圖。圖8為本發(fā)明實(shí)施例5檢測方法重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例對上述方案做進(jìn)一步說明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例是用于說明本發(fā)明而不限于限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中采用的實(shí)施條件可以根據(jù)具體廠家的條件做進(jìn)一步調(diào)整，未注明的實(shí)施條件通常為常規(guī)實(shí)驗(yàn)中的條件。實(shí)施例12-21#新疆成品地溝油4油樣的檢測I、采用的儀器本實(shí)施例采用紫外光譜分析儀器——紫外光譜分析儀(微型)。紫外光譜分析儀(微型)能對從185nm到SOOnm的光譜進(jìn)行直觀地?cái)?shù)據(jù)/圖示吸光值分析。紫外分析儀對于含共軛結(jié)構(gòu)的烯烴及苯環(huán)類有機(jī)物的分析是有效的，可以進(jìn)行科學(xué)的定性定量分析。因此，采用微型紫外光譜儀，進(jìn)行紫外分光吸收光度分析，能科學(xué)地將地溝油中的極性組分紫外吸收狀況分析出來。而對于優(yōu)質(zhì)食用植物油，其極性組分相對較少，紫外吸收也很弱。兩者顯示明顯的差異。儀器電腦圖示紫外光譜曲線走向是不同的，可以直觀、簡潔地用目視圖解法來鑒別地溝油。2、具體步驟(I)樣品處理本實(shí)施例地溝油樣品為采集自新疆的疑似地溝油，編號為2-21#新疆成品地溝油4。標(biāo)準(zhǔn)正常油品采用市面上可以購買到的花生油?；旌嫌推窞楦魅≌４蠖褂?、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各10份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成。I)油樣的稀釋因?yàn)橛蜆拥恼扯纫话愣己艽螅踔吝€有固態(tài)的油樣，若不加稀釋，無法做到精確取樣。這里，是通過加入烷類溶劑與待測油樣的體積比為2 1的烷類溶劑異辛烷或正己烷來加以稀釋。2)油樣的水萃取過程將稀釋后的待測樣品按要求劑量，加入事先準(zhǔn)備好的、盛有水萃取溶液的玻璃試管中，然后采用專用攪拌器進(jìn)行定時(shí)攪拌，以形成水包油分子(W/0)的微乳狀液體。等待10分鐘，使得微乳狀液體能夠充分地穩(wěn)定。(2)基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的制備
為了提高鑒別的可靠性，本發(fā)明采用相對對比法。這樣可以排除儀器可能存在的干擾因素。也就是說在若干未知油品鑒別過程中，加入已知的標(biāo)準(zhǔn)油品和正常油品，它們一同參與一輪的油品鑒別過程。然后，在整個過程結(jié)束后，將未知油品的光譜圖分別與已知的標(biāo)準(zhǔn)正常油品和混合油品光譜圖作對比，從而得出定性的判別。標(biāo)準(zhǔn)正常油品和混合油品所起的作用是為操作者提供一個目視判斷的目標(biāo)門檻。這樣，標(biāo)準(zhǔn)正常油品和混合油品的標(biāo)準(zhǔn)曲線組成了判斷的上限和下限標(biāo)準(zhǔn)。(3)測定I)制作油樣的微乳狀液體根據(jù)步驟(I)中所描述的方法，將待檢測油品和標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品制作成油樣的微乳狀液體。2)樣品萃取水溶液的紫外比色過程 將待測樣品或標(biāo)準(zhǔn)油品及正常油品的微乳狀液體放入鑒別儀中，由儀器自動加入比色皿中。采用的萃取液為含非離子表面活性劑TWEEN20的水溶液，TWEEN20的質(zhì)量百分比濃度為O. 25%。3)繪制樣品水溶液光譜吸收圖和后續(xù)數(shù)據(jù)處理過程根據(jù)所加入的樣品溶液，進(jìn)行比色操作。然后繪制樣品水溶液光譜吸收圖和后續(xù)數(shù)據(jù)處理。4)比色皿清洗在完成一個樣品測試后，自動將樣品溶液從比色皿中抽出，然后分別加入清洗劑和純水完成清洗和漂洗過程。5)目視鑒別對所有樣品完成上述操作步驟后，采用目視方法，根據(jù)繪制樣品的微乳狀液體紫外光譜吸收圖曲線，分別將待鑒別油樣曲線與標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品曲線在紫外段(200nnT320nm)的吸光值高度、光譜特征曲線以及曲線圖形相似度的對比，直觀鑒別油品種類。檢測所需時(shí)間也僅有十幾分鐘。(4)結(jié)果討論結(jié)果如圖I所示。I)吸光值高度對比將被測油樣在紫外段(200nnT320nm)吸光值高度與標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品進(jìn)行對比，可以得出初步的結(jié)論。圖I顯示，其紫外段(200nnT320nm)吸光值高度遠(yuǎn)高于標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品，因此可以得出正確的初步判斷。為了更為明顯的說明問題，圖2為本發(fā)明將正常標(biāo)準(zhǔn)油品、混合油品和玉米油按照實(shí)施例I的方法進(jìn)行紫外吸收檢測得到的紫外光譜曲線圖。其中標(biāo)準(zhǔn)正常油品采用市面上可以購買到的花生油?；旌嫌推窞楦魅≌４蠖褂汀⒉擞?、葵花油、花生油、和玉米油各4份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成。玉米油作為待測油樣，記為05#玉米。圖2顯示，玉米油的紫外段(200nnT320nm)吸光值高度遠(yuǎn)低于標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品，因此可以得出正確的初步判斷。2)紫外光譜曲線特征圖形分析在已完成對被測油樣在紫外段(200nnT320nm)吸光值高度與標(biāo)準(zhǔn)油品及正常油品的作對比，并得出初步的結(jié)論后，再對被測油樣的紫外光譜曲線圖紫外段(200nnT320nm)可能存在特征圖形進(jìn)行分析，可以做出最終判斷。特征圖形是指在紫外段(260nnT300nm)是否存在吸光值變化率拐點(diǎn)，從而導(dǎo)致其圖形是否有拐點(diǎn)特征。在圖2可以看到，混合油品的油樣存在這樣的拐點(diǎn)特征。而正常標(biāo)準(zhǔn)油品和其他食用油油樣沒有這樣的拐點(diǎn)特征。為了更為明顯的說明問題，圖3為本發(fā)明將正常標(biāo)準(zhǔn)油品、混合油品和棕櫚油按照實(shí)施例I的方法進(jìn)行紫外吸收檢測得到的紫外光譜曲線圖。其中標(biāo)準(zhǔn)正常油品采用市面上可以購買到的花生油?；旌嫌推窞楦魅≌４蠖褂?、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成。棕櫚油作為待測油樣，記為03#棕櫚。圖3顯示，03#棕櫚的吸光度值要高于標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品。但從圖3中顯示，雖然其吸光度值要高于標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品，但不十分明顯。而且沒有大多數(shù)地溝油圖形中所具備的拐點(diǎn)特征，因此綜合判斷03#棕櫚非地溝油。
實(shí)施例2千門地溝3油樣的檢測(I)樣品處理本實(shí)施例地溝油樣品為采集自千門的疑似地溝油，編號為千門地溝3 ;分為3種待測油樣，其中30#千門地溝3+菜籽油10%為I份(體積)千門地溝油3與9份(體積)菜籽油混合而成；15#千門地溝3+菜籽油20%為I份(體積)千門地溝油3與4份(體積)菜籽油混合而成；02#千門地溝3+菜籽油50%為I份(體積)千門地溝油3與I份(體積)菜籽油混合而成。標(biāo)準(zhǔn)正常油品采用市面上可以購買到的花生油?；旌嫌推窞楦魅≌４蠖褂?、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成。加入異辛烷或正己烷進(jìn)行稀釋，異辛烷或正己烷與待測油樣的體積比為2 :1。將稀釋后的待測樣品按要求劑量，加入事先準(zhǔn)備好的、盛有水萃取溶液的玻璃試管中，然后采用專用攪拌器進(jìn)行定時(shí)攪拌，以形成水包油分子(W/0)的微乳狀液體。等待10分鐘。采用的萃取液為含非離子表面活性劑TWEEN20的水溶液，TWEEN20的質(zhì)量百分比濃度為O. 15%。(2)基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的制備本發(fā)明采用相對對比法。在整個過程結(jié)束后，將未知油品的光譜圖分別與已知的標(biāo)準(zhǔn)正常油品和混合油品光譜圖作對比，從而得出定性的判別。(3)測定將待測樣品或標(biāo)準(zhǔn)油品及正常油品的微乳狀液體放入鑒別儀中，由儀器自動加入比色皿中。根據(jù)所加入的樣品溶液，進(jìn)行比色操作。然后繪制樣品水溶液光譜吸收圖和后續(xù)數(shù)據(jù)處理。在完成一個樣品測試后，自動將樣品溶液從比色皿中抽出，然后分別加入清洗劑和純水完成清洗和漂洗過程。對所有樣品完成上述操作步驟后，采用目視方法，根據(jù)繪制樣品的微乳狀液體紫外光譜吸收圖曲線，分別將待鑒別油樣曲線與標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品曲線在紫外段(200nnT320nm)的吸光值高度、光譜特征曲線以及曲線圖形相似度的對比，直觀鑒別油品種類。(4)結(jié)果討論結(jié)果如圖4和圖5所不。圖4、5中含有同一系列不同的地溝油，它們都是用千門地溝油3#和菜籽油勾兌而成，只是地溝油含量有所不同。其中30#千門地溝3+菜籽油10%為I份(體積)千門地溝油3與9份(體積)菜籽油混合而成;15#千門地溝3+菜籽油20%為I份(體積)千門地溝油3與4份(體積)菜籽油混合而成;02#千門地溝3+菜籽油50%為I份(體積)千門地溝油3與I份(體積)菜籽油混合而成。圖4和圖5中可以看出02#千門地溝油3#+菜籽油50%位于標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品的吸光度值高度之間，而其它地溝油待測油品(15#千門地溝油3#+菜籽油20% ;30#千門地溝油3#+菜籽油10%)均低于標(biāo)準(zhǔn)正常油品的吸光度值高度。然而，從圖4和圖5可以看出，同一系列3種不同的地溝油均具備拐點(diǎn)特征。其吸光值的高低反映了不同含量的梯度情況。實(shí)施例3廣州地溝2與混合油品混合油樣的檢測(I)樣品處理本實(shí)施例待測樣品為采集自廣州的疑似地溝油，編號為廣州地溝2 ;分為3種待測 油樣，其中02#廣州地溝2+混油10%為I份(體積)廣州地溝2與9份(體積)的混油勾兌而成;01#廣州地溝2+混油20%為I份(體積)廣州地溝2與4份(體積)的混油勾兌而成；07#廣州地溝2+混油50%為I份(體積)廣州地溝2與I份(體積)的混油勾兌而成。混油為各取調(diào)和油、大豆油、花生油各I份(體積)勾兌而成。加入異辛烷或正己烷進(jìn)行稀釋，異辛烷或正己烷與待測油樣的體積比為2 :1。將稀釋后的待測樣品按要求劑量，加入事先準(zhǔn)備好的、盛有水萃取溶液的玻璃試管中，然后采用專用攪拌器進(jìn)行定時(shí)攪拌，以形成水包油分子(W/0)的微乳狀液體。等待10分鐘。采用的萃取液為含非離子表面活性劑TWEEN20的水溶液，TWEEN20的質(zhì)量百分比濃度為O. 35%。(3)測定將待測樣品的微乳狀液體放入鑒別儀中，由儀器自動加入比色皿中。根據(jù)所加入的樣品溶液，進(jìn)行比色操作。然后繪制樣品水溶液光譜吸收圖和后續(xù)數(shù)據(jù)處理。在完成一個樣品測試后，自動將樣品溶液從比色皿中抽出，然后分別加入清洗劑和純水完成清洗和漂洗過程。對所有樣品完成上述操作步驟后，采用目視方法，根據(jù)繪制樣品的微乳狀液體紫外光譜吸收圖曲線，分別將待鑒別油樣曲線與之前獲得的標(biāo)準(zhǔn)正常油品及混合油品曲線(其他實(shí)施例已提供)在紫外段(200nnT320nm)的吸光值高度、光譜特征曲線以及曲線圖形相似度的對比，直觀鑒別油品種類。(4)結(jié)果討論結(jié)果如圖6所示。圖6中02#廣州地溝2+混油10%為I份(體積)廣州地溝2與9份(體積)的混油勾兌而成-’01#廣州地溝2+混油20%為I份(體積)廣州地溝2與4份(體積)的混油勾兌而成;07#廣州地溝2+混油50%為I份(體積)廣州地溝2與I份(體積)的混油勾兌而成?；煊蜑楦魅≌{(diào)和油、大豆油、花生油各I份(體積)勾兌而成。圖6中可以看出三種待測油樣均具有拐點(diǎn)特征，可以直接判斷為地溝油?？梢钥闯龅販嫌秃坎煌?，具有不同的吸光值高度。實(shí)施例4不同濃度生物柴油的檢測(I)樣品處理本實(shí)施例待測樣品為不同濃度的混合油品，其中混合I. 97%為各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各10份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成；混合4. 8%為各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成；混合16. 7%為各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各I份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成。標(biāo)準(zhǔn)正常油品(標(biāo)樣2)采用市面上可以購買到的花生油。加入異辛烷或正己烷進(jìn)行稀釋，異辛烷或正己烷與待測油樣的體積比為2 :1。將稀釋后的待測樣品按要求劑量，加入事先準(zhǔn)備好的、盛有水萃取溶液的玻璃試管中，然后采用專用攪拌器進(jìn)行定時(shí)攪拌，以形成水包油分子(W/0)的微乳狀液體。等待10分鐘。采用的萃取液為含非離子表面活性劑TWEEN20的水溶液，TWEEN20的質(zhì)量百分比濃度為O. 5%。(3)測定將待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)正常油品的微乳狀液體分別放入鑒別儀中，由儀器自動加入比色皿中。根據(jù)所加入的樣品溶液，進(jìn)行比色操作。然后繪制樣品水溶液光譜吸收圖和后續(xù)數(shù)據(jù)處理。在完成一個樣品測試后，自動將樣品溶液從比色皿中抽出，然后分別加入清洗劑 和純水完成清洗和漂洗過程。對所有樣品完成上述操作步驟后，采用目視方法，根據(jù)繪制樣品的微乳狀液體紫外光譜吸收圖曲線，分別將待測油樣曲線與標(biāo)準(zhǔn)正常油品在紫外段(200nnT320nm)的吸光值高度、光譜特征曲線以及曲線圖形相似度的對比。(4)結(jié)果討論結(jié)果如圖7所示。圖7中混合I. 97%為各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各10份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成；混合4. 8%為各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成；混合16. 7%為各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各I份(體積)，加入I份標(biāo)準(zhǔn)生物柴油(體積)勾兌而成。圖7中可以看出三種待測油樣均具有拐點(diǎn)特征，可以作為地溝油樣品的參照。可以看出混合油品的含量不同，具有不同的吸光值高度。實(shí)施例5檢測方法重復(fù)性試驗(yàn)。為了考驗(yàn)所述檢測方法的重復(fù)性和可靠性，特選用上海食品安全部門提供的第二批地溝油樣品盲樣中的4種，分別是S2-l#、S2-2#、S2-4#和S2-6#。在提供本批盲樣時(shí)，采用了復(fù)樣設(shè)計(jì)。其中，S2-1#和S2-6#為同種油樣；而S2-2#和S2-4#為另種油樣。結(jié)果如圖8所示，在結(jié)果紫外光譜吸收曲線圖上可以清楚地看到明確的結(jié)果。S2-1#和S2-6#油樣無論在吸光值高度或整紫外光譜吸收曲線圖形上都幾乎完全一致；而S2-2#和S2-4#的紫外光譜吸收曲線圖也說明了同樣的道理。上述實(shí)例只為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn)，其目的在于讓熟悉此項(xiàng)技術(shù)的人是能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實(shí)施，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。凡根據(jù)本發(fā)明精神實(shí)質(zhì)所做的等效變換或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測地溝油的試劑組合物，其特征在于所述組合物以其組分的重量百分比計(jì)包括水和占試劑組合物總質(zhì)量的O. 19Γ0. 5%的非離子表面活性劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測地溝油的試劑組合物，其特征在于所述非離子表面活性劑的親水親油平衡值(HLB)在O 20之間。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測地溝油的試劑組合物，其特征在于所述非離子表面活性劑選自Tween20。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測地溝油的試劑組合物，其特征在于所述非離子表面活性劑占試劑組合物總質(zhì)量的O. 19Γ0. 35%。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測地溝油的試劑組合物，其特征在于所述非離子表面活性劑占試劑組合物總質(zhì)量的O. 159ΓΟ. 35%。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測地溝油的試劑組合物，其特征在于所述非離子表面活性劑占試劑組合物總質(zhì)量的O. 25%。
7.—種權(quán)利要求I所述的用于檢測地溝油的試劑組合物在地溝油樣品的檢測方面的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述用于檢測地溝油的試劑組合物作為待測地溝油樣品的萃取試劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于檢測地溝油的試劑組合物及其應(yīng)用，所述組合物以其組分的重量百分比計(jì)包括水和占試劑組合物總質(zhì)量的0.1%~0.5%的非離子表面活性劑。該試劑組合物作為待測地溝油樣品的萃取試劑，方便了采用光譜分析方法進(jìn)行地溝油檢測的過程，具有檢測的成功率高、檢測結(jié)果重現(xiàn)性、穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號G01N21/33GK102928376SQ20121025831
公開日2013年2月13日 申請日期2012年7月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月25日
發(fā)明者宗群 申請人:蘇州派爾精密儀器有限公司