專利名稱：一種測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于卷煙原料理化檢驗技術(shù)領(lǐng)域；具體涉及一種測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法。
背景技術(shù)：
再造煙葉是利用煙末、煙梗、碎煙片等煙草物質(zhì)為原料制成片狀或絲狀的再生產(chǎn)品，用作卷煙填充料。再造煙葉生產(chǎn)企業(yè)會添加一定比例的膠粘劑來提高其機(jī)械性能，而膠粘劑中均添加有一定的鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)作為增塑劑，因此，目前大部分再造煙葉中含有或多或少的鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)。鄰苯二甲酸酯作為增塑劑廣泛應(yīng)用于塑料制品、紡織品、食品包裝、印染油墨和膠黏劑中。鄰苯二甲酸酯可干擾內(nèi)分泌，導(dǎo)致生殖機(jī)能失常，致癌、致畸、致突變。歐盟自1999年12月7日起發(fā)布有關(guān)含某些鄰苯二甲酸酯產(chǎn)品的臨時禁令，并最終于2005年12月14日由歐洲議會和歐盟理事會通過第2005/84/EC號新指令，永久禁止在玩具和兒童護(hù)理用品中使用含量超過0.1%的3種鄰苯二甲酸酯(DEHP、DBP和BBP)類增塑劑，同時，在兒童可放人口中的玩具和兒童護(hù)理用品中也不得有含量超過0.1%的另3種鄰苯二甲酸酯(DINP、DIDP和DN0P)類增塑劑。早期鄰苯二甲酸酯的檢測技術(shù)有比色法、滴定法、分光光度法等，這些方法靈敏度低，選擇性差，而且只能檢測總量，不能分別定量。近幾年國家先后發(fā)布了 GB/T 21911-2008食品中鄰苯二甲酸酯的測定，GB/T 22931-2008皮革和毛皮化學(xué)試驗增塑劑的測定等標(biāo)準(zhǔn)，國外檢測標(biāo)準(zhǔn)有BS EU 15777-2009紡織品鄰苯二甲酸酯檢測方法，EN 14372-2004兒童用品、餐具和喂食器具的安全要求和測試等，采用的方法均為氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。目前，針對再造煙葉中鄰苯二甲酸酯的定量檢測方法國內(nèi)還未見有關(guān)報道，再造煙葉作為一種重要的卷煙原料對卷煙產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性具有重要影響，因此，在從卷煙原料的安全性和感官質(zhì)量的角度出發(fā)，分析再造煙葉中有害成分殘留量，對正確評價和嚴(yán)格控制產(chǎn)品的安全性等方面具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案在于采用了一種再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的測定方法包括以下步驟:(I)內(nèi)標(biāo)溶液的配制:稱取0.1 0.2g苯甲酸芐酯，置于IOmL容量瓶中，用乙醇溶解并定容，配制成濃度為10 20mg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液；(2)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制:稱取鄰苯二甲酸二甲酯DMP、鄰苯二甲酸二乙酯DEPdP苯二甲酸二異丁酯DIBP、鄰苯二甲酸二正丁酯DBP、鄰苯二甲酸丁基芐基酯BBP、鄰苯二甲酸
二(2-乙基)己酯DEHP、鄰苯二甲酸正二辛酯DN0P，用乙醇溶液定容到容量瓶中，作為標(biāo)準(zhǔn)儲備液，將標(biāo)準(zhǔn)儲備液通過逐級稀釋配制成標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；(3)待測樣品溶液的配制:將再造煙葉樣品置于天平上稱量，再剪成不大于0.5cmX0.5cm的碎片，置于50mL具塞三角瓶中，加入20mL異丙醇溶液及10 y L步驟(I)配制成的內(nèi)標(biāo)溶液，超聲萃取30min，靜置，待萃取液冷卻至室溫后，移取2.0mL上層清液過0.45 um有機(jī)濾膜，制得待測樣品溶液；(4)氣相色譜質(zhì)譜測定:利用氣相色譜質(zhì)譜儀分別對步驟(2)制得的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和步驟(3)制得的待測樣品溶液進(jìn)行分析檢測；(5)測定結(jié)果的計算:以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行7種鄰苯二甲酸酯類化合物的定量分析，即以各鄰苯二甲酸酯類化合物和內(nèi)標(biāo)苯甲酸芐酯的色譜峰面積比對其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；在相同條件下對制備好的的樣品進(jìn)行測定，測得7種鄰苯二甲酸酯類化合物和內(nèi)標(biāo)苯甲酸芐酯的色譜峰面積比，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別得到樣品中7種鄰苯二甲酸酯類化合物的含量。所述的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置方法具體包括以下步驟:(I)混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液1:分別準(zhǔn)確稱取50 200mg的7種鄰苯二甲酸酯類化合物置于同一 IOOmL容量瓶中，用乙醇溶解并定容，混勻得到混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I，其中各組分濃度分別為0.5 2mg/mL ；(2)混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I1:將混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I以乙醇逐級稀釋得到濃度為0.025 0.lmg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液II ；(3)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:分別準(zhǔn)確移取 50 ii LUOO u L、200 u L、400 u L、600 u L、1000 u L混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液II于IOOmL容量瓶中，分別加入10 y L的內(nèi)標(biāo)溶液，乙醇混勻并定容到刻度，得到6個濃度級別的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。所述的氣相色譜質(zhì)譜分析，其色譜條件為:色譜柱:熔融石英毛細(xì)管柱，5%苯基-95%甲基聚硅氧烷(30mX0.25mm1.d.X0.25iim d.f.);進(jìn)樣口溫度:280°C，進(jìn)樣量:luL，載氣為:氦氣，純度彡99.999%，分流比:10: 1，恒流流速:1.0mL/min ;升溫程序為:初始溫度60°C，保持lmin，以20°C /min的速率至220°C，保持lmin，再以5°C /min的速率至280°C，保持15min ;其質(zhì)譜分析條件為傳輸線溫度為:280°C ;電離EI能量為70eV ;離子源溫度為:230°C;溶劑延遲時間6min，選擇離子掃描模式SIM分段掃描，以特征離子進(jìn)行定量分析。本發(fā)明的檢測方法對樣品的處理方法和色譜質(zhì)譜條件進(jìn)行了改進(jìn)和優(yōu)化，達(dá)到了一下效果:(I)將再造煙葉樣品裁剪為不大于0.5cmX0.5cm的碎片,選取異丙醇溶劑進(jìn)行萃取，能有效的萃取出樣品中的鄰苯二甲酸酯類化合物，大大提高了檢測方法的靈敏度。(2)本發(fā)明方法利用內(nèi)標(biāo)法定量，通過內(nèi)標(biāo)物的加入，利用組分的相對峰面積值進(jìn)行一些量化數(shù)據(jù)的計算，可以不用定容，且可以減少前處理方法重現(xiàn)性和儀器精密度問題帶來的誤差。

(3)本發(fā)明方法所采用的色譜條件使7種目標(biāo)化合物及內(nèi)標(biāo)色譜峰都分離度較好，并且均具有較好的線性相關(guān)性，檢出限在0.01 0.02 i! g/g之間。(4)本發(fā)明方法的加標(biāo)回收率在95% 104%之間，平均相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在3.1 4.1之間，說明本發(fā)明方法的回收率高，重復(fù)性好。


圖1為本發(fā)明測定方法的流程圖；圖2為標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的色譜質(zhì)譜分析圖；圖3為鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖4為鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖5為鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖6為鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖7為鄰苯二甲酸丁基芐酯(BBP)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖8為鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖9為鄰苯二甲酸正二辛酯(DNOP)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
具體實施例方式實施例1 本實施例測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法如下(測定方法流程如圖1所示)1、內(nèi)標(biāo)溶液的配制:稱取0.2g苯甲酸芐酯，置于IOmL容量瓶中，用乙醇溶解并定容，配制成濃度為20mg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液；內(nèi)標(biāo)溶液在4°C冰箱內(nèi)密封存放，有效期為3個月；2、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置:(I)混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液1:分別準(zhǔn)確稱取IOOmg的7種鄰苯二甲酸酯類化合物置于同一 IOOmL容量瓶中，用乙醇溶解并定容，混勻得到混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I，其中各組分濃度分別為lmg/mL ;混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I在4°C冰箱內(nèi)密封存放，有效期為3個月；(2)混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I1:將混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I以乙醇逐級稀釋得到濃度為
0.025mg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液II ；(3)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:分別準(zhǔn)確移取 50 μ LUOO μ L、200 μ L、400 μ L、600 μ L、1000 μ L混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液II于IOOmL容量瓶中，分別加入10 μ L的內(nèi)標(biāo)溶液，乙醇混勻并定容到刻度，得到6個濃度級別的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；標(biāo)準(zhǔn)工作溶液需要現(xiàn)配現(xiàn)用；3、待測樣品溶液的配制:將再造煙葉樣品置于天平上稱量，再剪成不大于0.5cmX0.5cm的碎片，置于50mL具塞三角瓶中，加入20mL異丙醇溶液及10 μ L內(nèi)標(biāo)溶液，超聲萃取30min，靜置，待萃取液冷卻至室溫后，移取2.0mL上層清液過0.45 μ m有機(jī)濾膜，制得待測樣品溶液；4、氣相色譜質(zhì)譜測定:分別取標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和待測樣品溶液進(jìn)行色譜質(zhì)譜分析檢測，其色譜條件為:色譜柱:熔融石英毛細(xì)管柱，5%苯基-95%甲基聚硅氧烷(30mX0.25mm1.d.X0.25 μ md.f.);進(jìn)樣口溫度:280°C，進(jìn)樣量:lyL，載氣為:氦氣，純度彡99.999%，分流比:10: 1，恒流流速:1.0mL/min ;升溫程序為:初始溫度60°C，保持lmin，以20°C /min的速率至220°C，保持lmin，再以5°C /min的速率至280°C，保持15min ；
質(zhì)譜分析條件:傳輸線溫度為280°C ；電離EI能量為70eV ;離子源溫度為:230°C ；溶劑延遲時間6min，選擇離子掃描模式SIM分段掃描，以特征離子進(jìn)行定量分析；各組分特征離子選擇如表I所示，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的色譜/質(zhì)譜分析結(jié)果如圖2所示；表I鄰苯二甲酸酯類化合物特征離子選擇
權(quán)利要求
1.一種測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法，其特征在于:該測定方法包括以下步驟: (1)內(nèi)標(biāo)溶液的配制:稱取0.1 0.2g苯甲酸芐酯，置于IOmL容量瓶中，用乙醇溶解并定容，配制成濃度為10 20mg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液； (2)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制:稱取鄰苯二甲酸二甲酯DMP、鄰苯二甲酸二乙酯DEP、鄰苯二甲酸二異丁酯DIBP、鄰苯二甲酸二正丁酯DBP、鄰苯二甲酸丁基芐基酯BBP、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯DEHP、鄰苯二甲酸正二辛酯DNOP，用乙醇溶液定容到容量瓶中，作為標(biāo)準(zhǔn)儲備液，將標(biāo)準(zhǔn)儲備液通過逐級稀釋配制成標(biāo)準(zhǔn)工作溶液； (3)待測樣品溶液的配制:將再造煙葉樣品置于天平上稱量，再剪成不大于0.5cmX0.5cm的碎片，置于50mL具塞三角瓶中，加入20mL異丙醇溶液及10 y L步驟(I)配制成的內(nèi)標(biāo)溶液，超聲萃取30min，靜置，待萃取液冷卻至室溫后，移取2.0mL上層清液過0.45 um有機(jī)濾膜，制得待測樣品溶液； (4)氣相色譜質(zhì)譜測定:利用氣相色譜質(zhì)譜儀分別對步驟(2)制得的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和步驟(3)制得的待測樣品溶液進(jìn)行分析檢測； (5)測定結(jié)果的計算:以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行7種鄰苯二甲酸酯類化合物的定量分析，即以各鄰苯二甲酸酯類化合物和內(nèi)標(biāo)苯甲酸芐酯的色譜峰面積比對其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；在相同條件下對制備好的的樣品進(jìn)行測定，測得7種鄰苯二甲酸酯類化合物和內(nèi)標(biāo)苯甲酸芐酯的色譜峰面積比 ，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別得到樣品中7種鄰苯二甲酸酯類化合物的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法，其特征在于:所述步驟(I)的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制方法具體包括以下步驟: (1)混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液1:分別準(zhǔn)確稱取50 200mg的7種鄰苯二甲酸酯類化合物置于同一 IOOmL容量瓶中，用乙醇溶解并定容，混勻得到混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I，其中各組分濃度分別為 0.5 2mg/mL ； (2)混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I1:將混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液I以乙醇逐級稀釋得到濃度為0.025 mg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液II ； (3)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:分別準(zhǔn)確移取50u LUOO u L、200 u L、400 u L、600 u LU000 u L混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液II于IOOmL容量瓶中，分別加入10 ii L的內(nèi)標(biāo)溶液，乙醇混勻并定容到刻度，得到6個濃度級別的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法，其特征在于:所述的氣相色譜質(zhì)譜分析，其色譜條件為:色譜柱:熔融石英毛細(xì)管柱，5%苯基-95%甲基聚硅氧烷(30mX0.25mm1.d.X0.25 u m d.f.);進(jìn)樣口溫度:280°C，進(jìn)樣量:Iu L，載氣為:氦氣，純度彡99.999%，分流比:10: I，恒流流速:1.0mL/min ;升溫程序為:初始溫度60°C，保持lmin，以20°C /min的速率至220°C，保持lmin，再以5°C /min的速率至280°C，保持15min ;其質(zhì)譜分析條件為傳輸線溫度為:280°C ;電離EI能量為70eV ;離子源溫度為:230°C;溶劑延遲時間6min，選擇離子掃描模式SIM分段掃描，以特征離子進(jìn)行定量分析。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種測定再造煙葉中鄰苯二甲酸酯類化合物含量的方法，包括配置內(nèi)標(biāo)溶液、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和待測樣品溶液，氣相色譜質(zhì)譜分析及測定結(jié)果的計算等步驟。經(jīng)改進(jìn)和優(yōu)化之后的檢測方法具有操作簡便、靈敏度高、回收率高及重復(fù)性好等優(yōu)點。
文檔編號G01N30/02GK103091410SQ20121050450
公開日2013年5月8日 申請日期2013年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月25日
發(fā)明者黃世杰, 黃泰松, 李小蘭, 胡斌, 陳志燕, 周蕓, 吳晶晶, 朱靜 申請人:廣西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司