專利名稱：現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的制作方法
技術領域：
本實用新型屬于免疫檢測技術領域，特別是涉及一種現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒。
背景技術：
目前，現(xiàn)行的競爭法免疫層析檢測試紙條制作時，在支持板(如PVC板)上依次粘貼有樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜、吸水墊等。在硝酸纖維素膜上劃線包被I條抗原線作為檢測線(T線)，在其下游包被I條二抗線用予捕獲抗體線作為參考線。然后依次粘貼樣 品墊、金標墊、吸水墊，即組合為快速檢測試紙。檢測時，于樣品墊上滴加水溶液樣品，5 IOmin內(nèi)觀察顏色。若檢測線呈現(xiàn)紅顏色，表明樣品為陰性；若檢測線不顯色，表明樣品為陽性。無論樣品是陰性還是陽性，參考線應該顯色，若參考線不顯色，表明該試紙失效。現(xiàn)行的競爭法免疫層析檢測試紙條是“單份”測定而且試紙條上的質(zhì)控線(C線)實際上是測定一抗的存在，至于一抗有否失活是測不出來的。假如，待測樣品中目標物不存在(陰性)，而金標抗體失活不能和T線上包埋的抗原結合但照樣會被C線上的二抗捕獲顯色而得出陽性結果。而實際上是因試紙條失效而顯示的假陽性。相反，假如待測樣品中目標物存在，但質(zhì)控線C線上捕獲抗體(二抗)失活而金標抗體正常，那么金標抗體和目標物結合后不能和T線上包埋的抗原結合(這是正常陽性情景)但由于不能與C線上失活的捕獲蛋白/抗體結合顯色而得出試紙條失效的結論。而實際上應該是陽性。因此現(xiàn)行的競爭法免疫層析檢測試紙條的質(zhì)控線(C線)的結果不能完全用于評價試紙條質(zhì)量的好壞。
發(fā)明內(nèi)容本實用新型為解決公知技術中存在的技術問題，而提供一種現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒。本實用新型公開一種現(xiàn)場用競爭法免疫檢測試劑盒。該試劑盒包括一個三反應槽測試板或多反應槽測試板，樣品稀釋液反應液，液滴瓶，一組陽性對照和陰性對照，試紙條或進一步包含洗滌液，顯色液和塑料吸管。測試板含有三個或三個以上反應槽的成形板?？捎糜谕瑫r測定陽性對照，陰性對照以及一個或一個以上的待測樣品。測試板是具有固定形狀可盛裝液體、常溫常壓下化學性質(zhì)穩(wěn)定不與待測的樣品及檢測系統(tǒng)中的物質(zhì)發(fā)生化學反應的成形板。該測試板可以是一次性使用的也可以是經(jīng)洗滌后可多次使用的。該測試板的反應槽可以是臥式排列，也可以是立式排列。測試板是一個含有三個或三個以上反應槽的塑膠板(比如聚苯乙烯)或紙質(zhì)板。反應液含有預先標記好的可特異性地識別待測分子的抗體。該特異抗體的標記可以是膠體金，酶(如過氧化氫酶，堿性磷酸酶)，熒光分子或其它有助于直接或間接地測試被標記抗體的分子。[0010]試紙條含有預先包埋好的抗原分子或半抗原偶聯(lián)分子。該抗原或半抗原是可以被所述的反應液中含有的抗體所識別的分子。也可以是能與待測分子競爭性地與所述反應液中的抗體相結合的分子。陽性對照和陰性對照試劑盒中的至少有一個已知濃度的陽性對照其所含的待測目標分子的濃度正好是臨床需求或產(chǎn)品質(zhì)量要求上的界限濃度。比如含有I微克/毫升三聚氰胺的牛奶。因此，這樣的陽性對照可以用于直觀地比較測定樣品是否超標。試劑盒中的至少有一個不含待測目標分子的陰性對照。比如不含三聚氰胺的牛奶。這樣通過比較陰性對照、陽性對照和定測定樣品的顯色程度可以較準確地界定測定樣品所含的待測目標分子的濃度范圍，并可用于判定檢測系統(tǒng)本身有否失效。試劑盒中的可以有一個以上不同濃度的陽性對照組最好其中有一個對照所含的待測目標分子的濃度正好是臨床需求或待測產(chǎn)品質(zhì)量要求上的界限濃度。比如含有I微克/毫升三聚氰胺的牛奶。這樣的一組陽性對照組可以用于半定量測定樣品中待測目標 分子的濃度。洗滌液PBS緩沖液加O. 1%吐溫-20。顯色液是可以根據(jù)稀釋液中的特異抗體的標記來配套的。滴瓶滴瓶的口配有一套蓋子內(nèi)蓋和外蓋。內(nèi)蓋是有通道的蓋,通道上裝有一慮膜的以防止細菌進入瓶內(nèi)，同時在使用瓶內(nèi)液體時防止瓶內(nèi)沉淀物被擠出造成濃度不均，也防止液體逆流，所述慮膜的孔徑在O. 1-10 μ m之間；外蓋是可以蓋在內(nèi)蓋上的蓋子以防液體蒸發(fā)而改變瓶內(nèi)液體濃度。試劑盒中的反應液、陽性對照液、陰性對照夜，待測樣品液、稀釋液和顯色液是分別裝在相同規(guī)格的滴瓶里，這樣可根據(jù)擠出液體的滴數(shù)來確定其添加量。所述滴瓶的口徑控制在一定的范圍，比如每滴50微升誤差不超過+/- 3微升。本實用新型的目的是提供一種具有結構簡單，使用方便，檢測效率高，實現(xiàn)在一次實驗中同時測定未知濃度的樣品和已知濃度的陽性對照和陰性對照以便正確地界定檢測結果和有效性，便捷進行半定量地界定被檢樣品中所含目標分子的濃度等特點的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒。本實用新型現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒為解決現(xiàn)有技術問題所采取的技術方案是一種現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是試劑盒包括一個測試板，反應液，液滴瓶，一組陽性對照液和陰性對照液，試紙條和顯色液；液滴瓶口設有內(nèi)蓋和外蓋，內(nèi)蓋有通道，通道上裝有濾膜，外蓋蓋在內(nèi)蓋上。本實用新型現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒還可以采用如下技術措施所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是測試板為三反應槽測試板或多反應槽測試板；測試板具有固定形狀可盛裝液體，常溫常壓下化學性質(zhì)穩(wěn)定不與待測的樣品及檢測系統(tǒng)中的物質(zhì)發(fā)生化學反應的成形板。所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是測試板有反應槽、顯色槽和洗滌槽。所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是測試板上槽的排列方式是臥式排列或立式排列；測試板上的槽是固定型或可拆撤型設置。[0025]所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是液滴瓶的濾膜孔徑為O. 1-10 μ m
O所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是液滴瓶的內(nèi)蓋的外形為圓柱形或錐形，外蓋的內(nèi)側形狀與 內(nèi)蓋的外形相一致。所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是液滴瓶的口徑一致，每滴液40 -60微升,誤差小于3微升。本實用新型提供一種操作便捷，檢測效率高，在一次現(xiàn)場用競爭法免疫檢測實驗中，同時測定未知濃度的樣品和已知濃度(一個或一組)的陽性對照和陰性對照，從而能正確地界定檢測結果及有效性，或進行半定量地界定被檢樣品中所含目標分子的濃度等特點的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法。本實用新型現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法為解決現(xiàn)有技術問題所采取的技術方案是現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特征是檢測方法包括以下過程在測試板上的各反應槽中加入反應液；反應液含有預先標記好的可特異性地識別待測分子的抗體；再分別在兩個反應槽中加入陽性對照和陰性對照，其它反應槽中加入待測樣品，混勻；然后，取試紙條并標記，分別用于測試陽性對照，陰性對照和待測樣品，分別置于測試板上的反應槽中；搖混勻后在室溫下進行孵育；取洗滌液或蒸餾水置于洗滌槽，顯色液置于顯色槽；將孵育好的試紙條轉移到洗滌槽中，漂洗后轉移到顯色槽；輕晃或靜置顯色，直至試紙條上有清晰的色帶出現(xiàn)；取出試紙條轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色；比較試紙條上陽性對照、陰性對照和待測樣品的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。本實用新型現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法還可以采用如下技術措施所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特點是試紙條含有預先包埋好的抗原分子或半抗原偶聯(lián)分子；陽性對照是所含的待測目標分子的濃度正好是臨床需求或產(chǎn)品質(zhì)量要求上的界限濃度；陰性對照是不含待測目標分子的陰性對照。所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特點是搖混勻后在室溫下進行孵育的時間為10-30分鐘。本實用新型具有的優(yōu)點和積極效果是現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒由于采用了本實用新型全新的技術方案，與現(xiàn)有技術相比，本實用新型具有結構簡單，使用方便，檢測效率高特點。本實用新型實現(xiàn)了在一次現(xiàn)場用競爭法免疫檢測實驗中，同時測定未知濃度的樣品和已知濃度(一個或一組)的陽性對照和陰性對照，避免了使用現(xiàn)行的競爭法免疫層析試紙條時可能隱藏的假陽性和假失效的結果(現(xiàn)行的競爭法免疫層析試紙條是“單份”測定試紙條因此無法實現(xiàn)同時測定一組已知陽性和陰性的對照物)，從而能正確地界定檢測結果及有效性，或進行半定量地界定被檢樣品中所含目標分子的濃度。
圖I是本實用新型現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒結構示意圖；圖2是三槽測試板臥式槽排列結構示意圖；圖3是圖2的左視結構示意圖；圖4是多槽測試板立式槽排列結構示意圖；圖5是圖2的左視結構示意圖；圖6是錐形內(nèi)蓋液滴瓶結構示意圖；圖7是圓柱形內(nèi)蓋液滴瓶結構不意圖。圖中1 一測試板；1. I 一反應槽；1. 2 一洗漆槽；1. 3 一顯色槽；2 —反應液；3 —液滴瓶；3. I 一外蓋；3. 2 一濾膜；3. 3 —內(nèi)蓋；3. 4 一瓶頸；3. 5 一瓶身；4 一陽性對照；5 —陰性對照；6 —試紙條；7 —顯色液，8 —塑料吸管。
具體實施方式
為能進一步了解本實用新型的技術內(nèi)容、特點及功效，茲例舉以下實施例，并配合附圖詳細說明如下參閱附圖I至圖7。實施例I一種現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，包括一個測試板1，反應液2，液滴瓶3，一組陽 性對照4和陰性對照5，試紙條6和顯色液7 ;液滴瓶口設有內(nèi)蓋3. 3和外蓋3. 1，內(nèi)蓋3. 3有通道,通道上裝有濾膜3. 2,濾膜孔徑為O. 1-10 μ m。外蓋3. I蓋在內(nèi)蓋3. 3上,液滴瓶的內(nèi)蓋的外形為圓柱形或錐形，外蓋的內(nèi)側形狀與內(nèi)蓋的外形相一致。液滴瓶的口徑一致，每滴液40 — 60微升,誤差小于3微升。測試板為三反應槽測試板或多反應槽測試板；測試板具有固定形狀可盛裝液體，常溫常壓下化學性質(zhì)穩(wěn)定不與待測的樣品及檢測系統(tǒng)中的物質(zhì)發(fā)生化學反應的成形板。測試板有反應槽、顯色槽和洗滌槽。測試板上槽的排列方式是臥式排列或立式排列；測試板上的槽是固定型或可拆撤型設置。實施例2實施例I現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，包括以下過程在測試板上的各反應槽中加入O. 5毫升反應液，反應液含有預先標記好的可特異性地識別待測分子的抗體；再分別在反應槽I和反應槽2中加入O. 5毫升陽性對照和陰性對照，其它反應槽中加入待測樣品，混勻后待用。然后，任取三條(如果有多個待測樣品，則取試紙條數(shù)=2+待測樣品數(shù))試紙條(含有預先包埋好的抗原)用鉛筆標上1，2，3分別用于測試陽性對照，陰性對照和待測樣品，再分別置于測試板上的1，2，3三個反應槽中(對號入座)。輕搖混勻后在室溫下孵育10-30分鐘。在這期間，取10毫升洗滌液(或蒸餾水)置于洗滌槽中，3毫升顯色液置于顯色槽中。然后，用小鑷子將孵育好的試紙條取出并轉移到洗滌槽中，來回劃動漂洗6下(約3秒鐘)后再轉移到顯色槽中。輕晃或靜置顯色，直至試紙條上有清晰的色帶出現(xiàn)，取出試紙條并轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色。比較試紙條I (陽性對照)，2(陰性對照)和3(待測樣品)上的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。檢測結果分析正常情況下，陽性對照顯淺色色帶，陰性對照顯深色色帶；如果該被檢樣品的色帶比陽性對照深但比陰性對照淺，說明該被檢樣品為弱陽性但沒有超標；如果該被檢樣品的色帶比陽性對照同樣淺或更淡甚至無顯色，說明該被檢樣品為陽性超標。實施例3現(xiàn)場用氨苷青霉素(ampicillin )試紙條速測試劑盒。I.原材料及試劑制備多槽測試板如圖4和圖5所示。稀釋液將I克BSA (牛血清蛋白，購于SIGMA公司)溶于100毫升PBS緩沖液，便制得1%BSA/PBS。無菌過濾后置于冰箱備用。反應液用上述稀釋液將過氧化氫酶-酶標氨苷青霉素(Ampicillin-HRP，購于RANDOX公司)按每毫升I微克稀釋，無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰禮備用。抗體溶液用PBS緩沖液將羊抗氨苷青霉素抗體(購于RANDOX公司)按每毫升10微克稀釋后置于冰箱備用。試紙條將硝基纖維膜(NC膜，購于FISHER公司)切成O. 3cm x 2cm小條，準備10條，并在每個小條的一端用馬克筆作個標記(如Fu)以定為正面上端。然后將上述抗體溶液點滴或畫線于小條NC膜的正面中間(標記號下面約0.5cm處)，每點或每線2微升。待其自然干燥后，用上述稀釋液5毫升浸泡I小時以封閉NC膜表面無抗體點滴或畫線的部位。37°C干燥后，用塑料簿膜將每一試紙條分別包好后置于干燥處備用。陽性對照用稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)將氨苷青霉素(ampicillin購于SIGMA公司)配成10ug/ml溶液,準備5毫升，無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。陰性對照不含氨苷青霉素的稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)。準備5毫升，無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。試樣模擬陽性牛奶1毫升鮮牛奶加氨苷青霉素20微克，現(xiàn)配現(xiàn)用。顯色液DAB顯色液(購于SIGMA公司)。無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。(將上述反應液、陽性對照液、陰性對照夜，稀釋液和顯色液是分別裝在本實用新型所述的具有相同規(guī)格的滴瓶里(比如滴瓶的口徑控制在每滴50微升誤差不超過+/- 2微升)。塑料吸管l_ml刻度的3. 9毫升塑料中吸管(購于Lab Safety Supply公司)I根。2.檢測方法I)按下述順序，滴取6滴(約O. 3毫升)陰性對照液轉移到測試板上的#1反應槽，滴取6滴(約O. 3毫升)陽性對照液到測試板上的#2反應槽，滴取6滴(約O. 3毫升)待測樣品到測試板上的#3反應槽；然后，分別滴取6滴(約O. 3毫升)反應液到測試板上的#1，#2,#3反應槽；輕晃混勻。2)任取三個試紙條，在試紙條的正面下端用馬克筆分別標記上#1、#2、#3。然后將其分別浸入測試板上的#1，#2，#3反應槽中。輕晃待試紙條完成浸濕后，室溫靜置并不時晃動20分鐘。3)在這期間，取10毫升洗滌液(或蒸餾水)置于洗滌槽中，3毫升顯色液置于顯色槽中。20分鐘時間到后，用小鑷子將試紙條取出并轉移到洗滌槽中，來回劃動漂洗6下(約3秒鐘)后再轉移到顯色槽中，正面朝上。4)用吸管吸取2毫升顯色液覆蓋于試紙條上，靜置顯色，直至試紙條上有清晰的色帶出現(xiàn)。取出試紙條并轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色。5)比較試紙條1(陰性對照)，2(陽性對照)和3 (被測樣品)上的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。檢測結果如下陽性對照顯淺色色帶，陰性對照顯深色色帶；該被檢樣品的色帶比陽性對照略淺，說明該被檢樣品為陽性并略超標(>10ug/ml)。實施例4現(xiàn)場用氨苷青霉素(ampicillin )膠體金試紙條速測試劑盒。I.原材料及試劑制備氨苷青霉素(ampicillin購于SIGMA公司)氨苷青霉素-BSA偶聯(lián)抗原是通過EDC介導將半抗原氨苷青霉素與載體蛋白BSA偶聯(lián)，既將EDC、氨苷青霉素、BSA按摩爾數(shù)20 20 1溶解于PBS緩沖液，并在室溫反應2小時，然后通過透析去除游離的EDC和氨苷青霉素后獲得。膠體金(購于SPI Supplies公司)·抗氨苷青霉素抗體(購于RANDOX公司)金標抗氨苷青霉素抗體用PBS透析抗體以除去鹽分,取金溶膠2ml,用O. I mol/L K2C03或O. I mo I/L HCl調(diào)節(jié)金溶膠至pH=9，加入2mg (約O. 5ml)的抗體溶液，攪拌2 3分鐘。加入2 ml 1% PEG20000溶液，于10000 100000 g離心，小心吸去上清液；將沉淀懸浮于一定的緩沖液中，離心沉淀后，再用同一緩沖液恢復，濃度以A I cm/540nm=1.5左右為宜，置4° C保存。即制得金標抗氨苷青霉素抗體。多槽測試板如圖4和圖5所示。稀釋液將I克BSA (牛血清蛋白，購于SIGMA公司)溶于100毫升PBS緩沖液，便制得1%BSA/PBS。無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。反應液用上述稀釋液將金標抗氨苷青霉素抗體按每毫升I微克稀釋，無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。包埋抗原溶液用PBS緩沖液將氨苷青霉素-BSA偶聯(lián)抗原按每毫升10微克稀釋后置于冰箱備用。試紙條將硝基纖維膜(NC膜，購于FISHER公司)確切成O. 3cm x 2cm小條，準備10條，并在每個小條的一端用馬克筆作個標記(如Fu)以定為正面上端。然后將上述包埋抗原溶液點滴或畫線於小條NC膜的正面中間(標記號下面約0.5cm處)，每點或每線2微升。待其自然干燥后，用上述稀釋液5毫升浸泡I小時以封閉NC膜表面無包埋抗原的部位。37°C干燥后，用塑料簿膜將每一試紙條分別包好后冷藏干燥處備用。陽性對照用稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)將氨苷青霉素(ampicillin購于SIGMA公司)配成10ug/ml溶液,準備5毫升,無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。陰性對照不含氨苷青霉素的稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)。準備5毫升，裝在本實用新型所述的滴瓶里，無菌過濾后置于冰箱備用。試樣模擬陽性牛奶1毫升鮮牛奶加氨苷青霉素20微克，無菌過濾后裝在本實 用新型所述的滴瓶里，現(xiàn)配現(xiàn)用。(將上述反應液、陽性對照液、陰性對照夜，待測樣品液分別裝在本實用新型所述的具有相同規(guī)格的滴瓶里(比如滴瓶的口徑控制在每滴50微升誤差不超過+/- 2微升)。塑料吸管l_ml刻度的3. 9毫升塑料中吸管(購于Lab Safety Supply公司)I根。2.檢測方法I)滴取6滴(約O. 3毫升)陰性對照液轉移到測試板上的#1反應槽，滴取6滴(約O. 3毫升)陽性對照液到測試板上的#2反應槽，滴取6滴(約O. 3毫升)待測樣品到測試板上的#3反應槽；2)任取三個試紙條，在試紙條的正面下端用馬克筆分別標記上#1、#2、#3。然后將其分別浸入測試板上的#1，#2，#3反應槽中。輕晃待試紙條完成浸濕。3)分別滴取6滴(約O. 3毫升)反應液到測試板上的#1，#2, #3反應槽；輕晃混勻，室溫孵育并不時晃動約20分鐘，直至試紙條上有清晰的色帶出現(xiàn)。4)在這期間，取10毫升洗滌液(或蒸餾水)置于洗滌槽中，用小鑷子將試紙條取出并轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色。5)比較試紙條1(陰性對照)，2(陽性對照)和3 (被測樣品)上的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。檢測結果如下陽性對照顯淺色色帶，陰性對照顯深色色帶；該被檢樣品的色帶比陽性對照略淺，說明該被檢樣品為陽性并略超標(>10ug/ml)。實施例5現(xiàn)場用半定量氨苷青霉素(ampicillin )測試條速測試劑盒。I.原材料及試劑制備稀釋液將I克BSA (牛血清蛋白，購于SIGMA公司)溶于100毫升PBS緩沖液，便制得1%BSA/PBS。無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。反應液用上述稀釋液將過氧化氫酶-酶標氨苷青霉素(Ampicillin-HRP，購于RANDOX公司)按每毫升O. I微克稀釋后分裝于3ml-液滴瓶每瓶2毫升，無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用?？贵w包被液用碳酸鈉/碳酸氫鈉緩沖液(pH 9. 2)將羊抗氨苷青霉素抗體(購于RANDOX公司)按每毫升I微克稀釋后置于冰箱備用。多槽測試板8槽可拆撤ELISA測試條(購于Fisher Scientific公司)兩條。測試條準備12條8槽可拆撤ELISA測試條(購于Fisher Scientific公司),在每個條的一端用馬克筆作個標記(如上)以定為上端。然后在每個槽內(nèi)加入100微升上述抗體包被液，置于冷藏室(1_8°C )過夜包被，除去抗體包被液并用洗滌液洗槽3次，然后在每個槽內(nèi)加入200微升稀釋液，置于室溫孵育2小時后除去稀釋液并用洗滌液洗槽3次，然后置于37-45°C干燥后用塑料鋁膜袋將包裝好后冷藏干燥處備用。標準對照液用稀釋液將純氨苷青霉素(ampicillin )分別配成lug/ml,O. lug/ml, O. 01ug/ml和Oug/ml溶液,分裝于3ml_液滴瓶,每瓶I毫升,無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。試樣模擬陽性牛奶用鮮牛奶加氨苷青霉素(ampicillin )配成O. lug/ml (試樣a)和lOug/ml (試樣b)兩組，現(xiàn)配現(xiàn)用。洗滌液PBS緩沖液加0.1%吐溫-20，無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。.顯色液TMB顯色液(購于SIGMA公司)，無菌過濾后裝在本實用新型所述的滴瓶里，置于冰箱備用。 終止液1N HCl溶液(購于SIGMA公司)，裝在本實用新型所述的滴瓶里。2.檢測方法I)取一事先包被好的(見上述)測試條，分別滴加2滴(約O. I毫升)氨苷青霉素標準對照液(分別含氨苷青霉素lug/ml, O. lug/ml,O. 01ug/ml和Oug/ml溶液)到測試條上的A、B、C、D槽，滴加2滴(約O. I毫升)待測樣品a和b到測試條的E和F槽；(可根據(jù)需要，每個標準對照液和樣品重復1-2組)。2)分別滴加2滴(約O. I毫升)反應液到各反應槽；輕晃混勻，室溫孵育并不時晃動約30分鐘。3)用洗滌液洗反應槽3次，每次O. 3毫升/槽，將測試條倒扣在吸水紙以除去殘留水分。4)分別滴加4滴(約O. 2毫升)顯色液到各反應槽，室溫孵育至藍綠色顯現(xiàn)。5)分別滴加4滴(約O. 2毫升)終止液到各反應槽，以終止色顯。6)結果判斷比較被檢樣品槽與各標準液槽的顏色深淺程度以判定該被檢樣品含氨苷青霉素濃度的范圍。因為是競爭反應，顏色越深說明含氨苷青霉素濃度越低。被檢樣品E槽與B槽相近，說明該被檢樣品a含氨苷青霉素在O. I左右。被檢樣品F槽比B槽還淺，說明該被檢樣品b含氨苷青霉素在lug/ml之上。結果判斷方法如果被檢樣品顏色與陰性對照(D槽，含氨苷青霉素Oug/ml)相同或略深說明該被檢樣品為陰性。如果被檢樣品顏色比A槽(含氨苷青霉素lug/ml)還淺說明該被檢樣品含氨苷青霉素超過lug/ml ;如果被檢樣品顏色比A槽深但比B槽淺說明該被檢樣品含氨苷青霉素在O. 1-lug/ml之間；如果被檢樣品顏色比B槽深但比C槽淺說明該被檢樣品含氨苷青霉素在O. 01-0. lug/ml之間。
權利要求1.一種現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是試劑盒包括一個測試板，反應液，液滴瓶，一組陽性對照液和陰性對照液和試紙條；所述的反應液、陽性對照液和陰性對照液是裝在液滴瓶內(nèi)；所述的液滴瓶瓶口裝有濾膜。
2.按照權利要求I所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是試劑盒包括洗滌液，顯色液和塑料吸管。
3.按照權利要求I所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶口設有內(nèi)蓋和外蓋，內(nèi)蓋有通道，通道上裝有濾膜，外蓋蓋在內(nèi)蓋上。
4.按照權利要求I所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是測試板為三反應槽測試板或多反應槽測試板；測試板具有固定形狀可盛裝液體，常溫常壓下化學性質(zhì)穩(wěn)定不與待測的樣品及檢測系統(tǒng)中的物質(zhì)發(fā)生化學反應的成形板。
5.按照權利要求I或4所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是測試板有反應槽、顯色槽和洗滌槽。
6.按照權利要求I或4所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是測試板上槽的排列方式是臥式排列或立式排列；測試板上的槽是固定型或可拆撤型設置。
7.按照權利要求3所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶的濾膜孔徑為 0. 1-10u m。
8.按照權利要求I或7所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶的內(nèi)蓋的外形為圓柱形或錐形，外蓋的內(nèi)側形狀與內(nèi)蓋的外形相一致。
9.按照權利要求I或7所述的現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶的口徑一致，每滴液40 — 60微升,誤差小于3微升。
專利摘要本實用新型涉及一種現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒。本實用新型屬于免疫檢測技術領域。一種現(xiàn)場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是試劑盒包括一個測試板，反應液，液滴瓶，一組陽性對照和陰性對照，試紙條；液滴瓶口設有內(nèi)蓋和外蓋，內(nèi)蓋有通道，通道上裝有濾膜，外蓋蓋在內(nèi)蓋上。本實用新型具有結構簡單，快捷方便，檢測效率高，實現(xiàn)在一次實驗中同時測定未知濃度的樣品和已知濃度的陽性對照和陰性對照以便正確地界定檢測結果和有效性，快捷進行半定量地界定被檢樣品中所含目標分子的濃度等優(yōu)點。
文檔編號G01N33/53GK202471707SQ201220007849
公開日2012年10月3日 申請日期2012年1月9日 優(yōu)先權日2012年1月9日
發(fā)明者鄒潮 申請人:哈德遜(天津)生物技術有限責任公司