專利名稱：Abo血型反定型膠體金試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種ABO血型反定型膠體金試劑盒。
背景技術(shù)：
ABO血型系統(tǒng)是根據(jù)紅細(xì)胞上A及B凝集原的不同，將血型分為O、A、B及AB血型。A型血紅細(xì)胞上含A抗原，血清中含抗B抗體出型血紅細(xì)胞上含B抗原，血清中含抗A抗體；0型血紅細(xì)胞上則沒(méi)有A及B抗原，血清中含抗A及抗B抗體；AB型血紅細(xì)胞上含A及B兩種抗原，血清中則不含抗A及抗B抗體。A抗原和抗A抗體，B抗原和抗B抗體會(huì)發(fā)生免疫結(jié)合反應(yīng)，使紅細(xì)胞發(fā)生凝聚。ABO血型是由紅細(xì)胞表面抗原和血清中的抗體兩者共同決定的。利用標(biāo)準(zhǔn)的抗A、抗B抗體檢測(cè)紅細(xì)胞抗原，稱之為正定型；用標(biāo)準(zhǔn)的A及B抗原檢測(cè)血清中的抗體，稱之為反定型。正反定型同時(shí)檢測(cè)，才能正確判斷ABO血型。正確的血型鑒定是保證臨床輸血安全和搶救生命的重要工作，ABO血型檢測(cè)是常規(guī)的輸血前血型血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目之一，為了保證正確的血型鑒定，衛(wèi)生部在2000年發(fā)文(衛(wèi)醫(yī)法[2000] 184號(hào))明確規(guī)定:每位供血及受血的個(gè)體均要進(jìn)行ABO血型正反定型。目前臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的ABO血型反定型的鑒定方法是血凝試驗(yàn)和微柱凝膠試驗(yàn)。血凝試驗(yàn)中用到的標(biāo)準(zhǔn)A型、B型和O型紅細(xì)胞，保存期短，一般為2 8°C條件下保存3個(gè)月，且容易發(fā)生微生物污染及溶血現(xiàn)象。微柱凝膠法檢測(cè)時(shí)則需要特制的凝膠卡，同時(shí)需配備專用離心機(jī)，檢測(cè)成本較高。除以 上兩種常用的方法之外，還有磁珠法。磁珠法在使用前，需進(jìn)行試劑的復(fù)溶，復(fù)溶后的試劑存放時(shí)間較短，一般7天內(nèi)必須使用完，而且需要專門的磁化程控振蕩器。目前，反定型用紅細(xì)胞試劑存在有效期短、保存條件苛刻、質(zhì)量不穩(wěn)定等問(wèn)題，容易導(dǎo)致血型鑒定出差錯(cuò)，甚至出現(xiàn)嚴(yán)重輸血事故。所以急需一種使用方便、有效期長(zhǎng)、準(zhǔn)確性好、成本較低的檢測(cè)ABO血型反定型的試劑盒。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問(wèn)題是，提供一種使用方便、有效期長(zhǎng)、準(zhǔn)確性好、成本較低的檢測(cè)ABO血型反定型的膠體金試劑盒。為了解決上述問(wèn)題，本實(shí)用新型提供了一種ABO血型反定型膠體金試劑盒，其特征在于，包括盒體、瓶墊和密閉瓶，所述密閉瓶為三個(gè)，分別標(biāo)記A瓶、B瓶和O瓶，所述A瓶?jī)?nèi)含有A紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述B瓶?jī)?nèi)含有B紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述O瓶?jī)?nèi)含有O紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液。作為一個(gè)優(yōu)選方案，所述盒體為白卡材質(zhì)，所述瓶墊為海綿材質(zhì)，瓶墊中間是放置密閉瓶的三個(gè)卡槽。作為一個(gè)優(yōu)選方案，所述密閉瓶的材質(zhì)是聚乙烯塑料或者玻璃瓶，瓶蓋為塑料材質(zhì)，瓶與瓶蓋之間的墊片為硅膠材質(zhì)以增強(qiáng)密封性。[0011]本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)在于，本實(shí)用新型通過(guò)紅細(xì)胞膜抗原金粒子密閉瓶，這樣就不用考慮由于紅細(xì)胞溶血或保存不當(dāng)而引起的紅細(xì)胞血型抗原性降低的因素，解決了新鮮紅細(xì)胞保存期短的問(wèn)題。ABO血型反定型膠體金試劑一般在2_8°C條件下保存有效期不低于12個(gè)月，而且具有靈敏度高、使用方便、結(jié)果好判讀及成本較低等優(yōu)點(diǎn)。

圖1為ABO血型反定型膠體金試劑盒的內(nèi)外部構(gòu)造。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本實(shí)用新型。下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本實(shí)用新型而不用于限制本實(shí)用新型的范圍。實(shí)施例1.ABO血型反定型膠體金試劑盒ABO血型反定型膠體金試劑盒的內(nèi)外部構(gòu)造如圖1所示，包括盒體、瓶墊和密閉瓶，密閉瓶為三個(gè)，分別標(biāo)記A瓶、B瓶和O瓶，所述A瓶?jī)?nèi)含有A紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述B瓶?jī)?nèi)含有B紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述O瓶?jī)?nèi)含有O紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液。盒體為白卡材質(zhì)；瓶墊為海綿材質(zhì)，厚度25mm,中間是放置密閉瓶的三個(gè)卡槽；密閉瓶的材質(zhì)可以是聚乙烯塑料、玻璃瓶等透明材料，瓶蓋為塑料材質(zhì)，試劑能穩(wěn)定儲(chǔ)存于密閉瓶中而不會(huì)吸附于容器，瓶與瓶蓋之間的墊片為硅膠材質(zhì)以增強(qiáng)密封性。實(shí)施例2.ABO血型反定型膠體金試劑盒的制備方法及檢測(cè)結(jié)果I)制備膠體 金溶液由氯金酸在還原劑枸櫞酸鈉作用下，聚合成大小為40nm 60nm的金顆粒溶液。2)制備紅細(xì)胞膜血型抗原提取物紅細(xì)胞膜血型抗原提取物是采用低滲壓溶液法，分別破碎A型紅細(xì)胞、B型紅細(xì)胞和O型紅細(xì)胞，然后離心棄上清，再超純水洗滌，離心棄上清，直到上清無(wú)色透明，棄上清和底層雜質(zhì)即為紅細(xì)胞膜血型抗原提取物。低滲溶液為0.1%的CaCl2溶液，不僅降低可以降低成本，還可以保護(hù)膜抗原的完整性，防止膜抗原的不穩(wěn)定性。3)標(biāo)記將制備好的膠體金顆粒溶液調(diào)節(jié)pH至5.5-6.5，加入待標(biāo)記紅細(xì)胞膜血型抗原提取物，反應(yīng)5分鐘?？梢允褂肗aOH、Na2C03、KOH 或者 K2CO3 調(diào)節(jié) pH 至 5.5-6.5。4)離心3000r/min離心3分鐘，棄上清，沉淀即紅細(xì)胞膜抗原金粒子。5)復(fù)溶將紅細(xì)胞膜抗原金粒子復(fù)溶于抗原金粒子保存液。6)分裝將試劑儲(chǔ)存于密閉瓶中，分裝成2ml紅細(xì)胞膜抗原金粒子溶液/瓶。[0032]7)半成品檢驗(yàn)要求紅細(xì)胞膜抗原金粒子與相應(yīng)的血型抗體產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)，即在反應(yīng)板微孔中有凝集塊出現(xiàn)。而與不含有紅細(xì)胞膜抗原金粒子對(duì)應(yīng)的血型抗體產(chǎn)生陰性反應(yīng)，即在反應(yīng)板微孔中有無(wú)凝集塊出現(xiàn)。8)保存實(shí)驗(yàn)分裝后經(jīng)半成品檢驗(yàn)合格的試劑在2 8°C下保存12個(gè)月，保存期間，ABO血型反定型膠體金試劑具有以下檢測(cè)結(jié)果:( I)外觀試劑密封不漏液、無(wú)絮狀、不溶物或其它漂浮物質(zhì)。(2)靈敏度用已注冊(cè)上市的抗A抗B血型正定型試劑和抗H試劑與本試劑相應(yīng)抗原金粒子溶液反應(yīng)，結(jié)果 應(yīng)達(dá)到表I所示標(biāo)準(zhǔn)。表IABO血型反定型膠體金試劑靈敏度檢測(cè)
權(quán)利要求1.ABO血型反定型膠體金試劑盒，其特征在于，包括盒體、瓶墊和密閉瓶，所述密閉瓶為三個(gè)，分別標(biāo)記A瓶、B瓶和O瓶，所述A瓶?jī)?nèi)含有A紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述B瓶?jī)?nèi)含有B紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述O瓶?jī)?nèi)含有O紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ABO血型反定型膠體金試劑盒，其特征在于，所述盒體為白卡材質(zhì)，所述瓶墊為海綿材質(zhì)，瓶墊中間是放置密閉瓶的三個(gè)卡槽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ABO血型反定型膠體金試劑盒，其特征在于，所述密閉瓶的材質(zhì)是聚乙烯塑料或者玻璃瓶，瓶蓋為塑料材質(zhì)，瓶與瓶蓋之間的墊片為硅膠材質(zhì)以增強(qiáng)密封性。 ·
專利摘要本實(shí)用新型公開了一種ABO血型反定型膠體金試劑盒，試劑盒包括盒體、瓶墊和密閉瓶，所述密閉瓶為三個(gè)，分別標(biāo)記A瓶、B瓶和O瓶，所述A瓶?jī)?nèi)含有A紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述B瓶?jī)?nèi)含有B紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液，所述O瓶?jī)?nèi)含有O紅細(xì)胞膜抗原金粒子與抗原金粒子保存液。通過(guò)紅細(xì)胞膜抗原金粒子密閉瓶，這樣就不用考慮由于紅細(xì)胞溶血或保存不當(dāng)而引起的紅細(xì)胞血型抗原性降低的因素，解決了新鮮紅細(xì)胞保存期短的問(wèn)題。ABO血型反定型膠體金試劑一般在2-8℃條件下保存有效期不低于12個(gè)月，而且具有靈敏度高、使用方便、結(jié)果好判讀及成本較低等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N33/80GK203101407SQ201220684879
公開日2013年7月31日 申請(qǐng)日期2012年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月12日
發(fā)明者胡晶高, 汪大明, 林永志, 張林華 申請(qǐng)人:英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司